CN102924321A - 一种从发酵液中提取谷氨酰胺的方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于发酵技术领域，公开了一种从发酵液中提取谷氨酰胺的方法，为取谷氨酰胺发酵液降温、过滤，得到的滤液浓缩、冷却结晶、分离得到结晶粗品，然后加入其重量30～60%的水洗晶，分离得洗晶粗品；加水溶解后依次加入阳离子交换树脂、阴离子交换树脂脱盐，过滤得到脱盐液；纳滤后得到纳滤液，脱色、过滤得脱色液，浓缩、冷却结晶、分离干燥即得谷氨酰胺。本发明所述提取方法采用水洗结晶粗品，除去结晶粗品表面的大部分杂质，减少脱盐树脂的用量，从而减少了产生污水量，降低了能耗，减少了污染。同时采用将阳离子交换树脂、阴离子交换树脂依次加入到料液中的方法进行脱盐，大大降低了脱盐周期较长导致的谷氨酰胺的损失，提高了谷氨酰胺收率。

Description

一种从发酵液中提取谷氨酰胺的方法

技术领域

本发明属于发酵技术领域，尤其涉及一种从发酵液中提取谷氨酰胺的方法。

背景技术

L-谷氨酰胺（Gln）是L-谷氨酸的γ－羧基酰胺化的一种条件必需性氨基酸，是20种构成蛋白质的基本氨基酸之一，在体内可以由葡萄糖转变而来，是哺乳动物非必需氨基酸。L-谷氨酰胺属中性氨基酸，在偏酸、偏碱及较高温度下易分解成谷氨酸或环化为吡咯烷酮二羧酸，它的化学分子式为C₅H₁₀O₃N₂，分子量为146.15，分解温度为184～185℃，等电点为5.65，结构式如下：

近年来研究表明谷氨酰胺是机体含量最丰富的氨基酸，占全部游离氨基酸60%以上，主要储存在脑、骨骼肌和血液中，具有很广泛的生理作用:(1)维持机体免疫功能。现有资料表明谷氨酰胺不仅是淋巴细胞和巨噬细胞的重要能量物质，甚至可能是各种免疫细胞的主要能源物质。小肠作为人体重要的最大免疫器官，是利用L-谷氨酰胺的主要器官，它的吸收细胞以很高的速率利用谷氨酰胺，说明谷氨酰胺在机体免疫中发挥着十分重要的作用。(2)调节蛋白质的合成和分解。谷氨酰胺是蛋白质合成的重要调节剂，在运动中可以调节蛋白质合成和降低肌肉蛋白质的分解，从而维持机体的生理功能。(3)谷氨酰胺是机体内氮和碳的重要运载工具。(4)维持体内酸碱平衡。谷氨酰胺可以作为肾脏生成的氨的载体，直接参与氨的代谢，从而起到维持酸碱平衡的重要作用。(5)调节糖代谢。谷氨酰胺可以通过糖异生作用生成葡萄糖，维持血糖浓度平衡。(6)细胞燃料。谷氨酰胺为快速生长和分化的细胞(如血管内皮细胞、淋巴细胞、肠粘膜上皮细胞等)提供能量来源。每1mol·L^-1的谷氨酰胺直接经三羧酸循环可以产生30mol·L^-1的ATP。故谷氨酰胺产能对谷氨酰胺依赖性细胞（特别是小肠粘膜细胞,对谷氨酰胺具有很高的摄取率和利用率）具有更加重要的意义。此外，谷氨酰胺还有作为氨流动的重要载体、大分子的合成前体、胃肠管腔细胞的基本营养来源、在血液中暂时解除氨毒的作用等。由于谷氨酰胺在生物代谢中起着举足轻重的作用，谷氨酰胺缺乏时将引发多种疾病。因此，开发谷氨酰胺具有重要意义。

目前谷氨酰胺的生产方法主要有化学合成法、酶法和发酵法。现有化学合成法均采用浓硫酸作为必需的催化剂，反应条件苛刻、反应步骤多、收率低。化学合成法使用的化学试剂在产品中均有不同程度的残留，而谷氨酰胺往往作为一种药或功能食品，对纯度有较高的要求，而且大量化学试剂的使用会造成环境污染，从而限制了产品质量及使用范围。酶法合成谷氨酰胺主要是以NH₃、三磷酸腺苷(ATP)及谷氨酸作为原料经合成酶催化生成谷氨酰胺。与化学合成法相比，酶法合成反应步骤相对简单。然而其中ATP是必需的，而ATP价格昂贵，难以在工业上应用。同时，酶反应底物NH⁴⁺、副产物二磷酸腺苷(ADP)都明显抑制谷氨酰胺的生成，反应收率低。因此酶法合成谷氨酰胺不能满足大规模工业化生产的需要。

发酵法是目前最常用的谷氨酰胺生产方法，具有原料来源广泛、生产成本低，产品质量可控，产物单一等优点，适宜于大规模工业化生产。其中，从发酵液中分离提取谷氨酰胺是发酵法生产谷氨酰胺的重要步骤，直接影响谷氨酰胺产品生产效率。目前大多数采用发酵法生产谷氨酰胺的企业基本上都采用阴阳双柱离子交换法分离提取谷氨酰胺。然而阴阳双柱分离工艺存在交换树脂用量大、洗脱和再生过程中酸碱消耗多的问题，造成严重的环境污染。另外谷氨酰胺在强酸或强碱环境容易转化为谷氨酸，导致收率很低。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种能耗低、污染小、谷氨酰胺收率高从发酵液中提取谷氨酰胺的方法。

为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

一种从发酵液中提取谷氨酰胺的方法，包括以下步骤：

步骤1、取谷氨酰胺发酵液降温、过滤，得到的滤液浓缩、冷却结晶、分离得到结晶粗品，然后加入结晶粗品重量30～60%的水洗晶，分离得洗晶粗品；

步骤2、取洗晶粗品加水溶解后依次加入阳离子交换树脂、阴离子交换树脂脱盐，过滤得到脱盐液；

步骤3、取脱盐液纳滤得到纳滤液，纳滤液脱色、过滤得脱色液，浓缩、冷却结晶、分离干燥即得。

作为优选，本发明步骤1所述过滤的过滤介质为陶瓷膜。更优选为过截留分子量为30kDa的陶瓷膜。

作为优选，步骤1所述浓缩为浓缩至谷氨酰胺含量为20～35%。

作为优选，步骤1所述冷却结晶为缓慢降温至5～15℃，维持10小时左右。

作为优选，所述水洗晶的用水量为结晶粗品质量的50wt%。

作为优选，本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法步骤2所述加水溶解为加水溶解成谷氨酰胺含量为3-4wt%的溶液。

作为优选，步骤2所述脱盐的具体操作为先加入阳离子交换树脂，搅拌2小时，过滤除去阳离子交换树脂，然后再加入阴离子交换树脂，搅拌2小时，过滤除去阴离子交换树脂，得到脱盐液。

作为优选，所述阳离子交换树脂的用量为谷氨酰胺发酵液体积的3.17~3.65v/v%。

作为优选，所述阴离子交换树脂的用量为谷氨酰胺发酵液体积的4.25~4.89v/v%。

作为优选，本发明所述阳离子交换树脂为强酸型阳离子交换树脂。更优选为JK008、732#、WA-2或W-2型离子交换树脂。

作为优选，本发明所述阴离子交换树脂为是弱碱型阴离子交换树脂。更优选为A830或D354型离子交换树脂。

作为优选，步骤3所述纳滤为用截留分子量为1000Da的纳滤膜过滤。

作为优选，步骤3所述纳滤液脱色优选为纳滤液加热至40℃加入活性炭脱色。

作为优选，步骤3所述浓缩为浓缩至谷氨酰胺含量为25～45wt%。

作为优选，步骤3所述冷却结晶为缓慢降温至5～15℃，维持10小时左右。

从上述的技术方案可以看出，本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法为取谷氨酰胺发酵液降温、过滤，得到的滤液浓缩、冷却结晶、分离得到结晶粗品，然后加入结晶粗品重量30～60%的水洗晶，分离得洗晶粗品；洗晶粗品加水溶解后依次加入阳离子交换树脂、阴离子交换树脂脱盐，过滤得到脱盐液；脱盐液纳滤得到纳滤液，纳滤液脱色、过滤得脱色液，浓缩、冷却结晶、分离干燥即得谷氨酰胺。本发明所述提取方法采用水洗谷氨酰胺发酵液过滤后的结晶粗品，除去了结晶粗品表面的大部分杂质，减少脱盐树脂的用量，从而减少了因树脂再生而产生污水量，降低了能耗，减少了污染。同时采用将阳离子交换树脂、阴离子交换树脂依次加入到料液中的方法进行脱盐，料液脱盐时间仅为4小时，大大降低了脱盐周期较长导致的谷氨酰胺的损失，提高了谷氨酰胺收率。同时本发明所述提取方法在脱盐时在使用阳离子交换树脂脱盐后，又用阴离子交换树脂脱盐，阴离子交换树脂可以吸附料液中的谷氨酸，使成品中谷氨酸的含量降低到0.3%以下，大大提高了提取谷氨酰胺的纯度。并且本发明所述提取方法操作简单，安全性高，工艺成本低，适合工业化生产。

附图说明

图1示现有技术中提取谷氨酰胺的工艺流程图；

图2示本发明所述提取谷氨酰胺的方法的流程图。

具体实施方式

本发明实施例公开了从发酵液中提取谷氨酰胺的方法。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

一种从发酵液中提取谷氨酰胺的方法，包括以下步骤：

步骤1、取谷氨酰胺发酵液降温、过滤，得到的滤液浓缩、冷却结晶、分离得到结晶粗品，然后加入结晶粗品重量30～60%的水洗晶，分离得洗晶粗品；

步骤2、取洗晶粗品加水溶解后依次加入阳离子交换树脂、阴离子交换树脂脱盐，过滤得到脱盐液；

步骤3、取脱盐液纳滤得到纳滤液，纳滤液脱色、过滤得脱色液，浓缩、冷却结晶、分离干燥即得。

本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法首先将谷氨酰胺发酵液降温，然后过滤以除去谷氨酰胺发酵液中的菌体及其它不溶性大分子物质。

过滤是在推动力的作用下，位于一侧的悬浮液（或含尘气）中的流体通过多孔介质的孔道向另一侧流动，颗粒则被截留，从而实现流体与颗粒的分离操作过程。被过滤的悬浮液又称为滤浆，过滤时截留下的颗粒层称为滤饼，过滤的清液称为滤液。无论采用何种过滤方式，过滤介质总是必须的，过滤介质即为使流体通过而颗粒被截留的多孔介质。过滤介质的共性要求是多孔、理化性质稳定、耐用和可反复利用等。目前可以用作过滤介质的材料很多，如由天然或合成纤维、金属丝等编织而成的滤布和滤网、聚酰胺、聚酯或聚丙烯等纤维制成的单缕滤网、陶瓷膜、高分子聚合物多孔膜等。

其中作为优选，本发明步骤1所述过滤的过滤介质为陶瓷膜。陶瓷膜也称CT膜，是固态膜的一种，最早由日本的大日本印刷公司和东洋油墨公司在1996年开发引入市场。陶瓷膜具有分离效率高、效果稳定、化学稳定性好、耐酸碱、耐有机溶剂、耐菌、耐高温、抗污染、机械强度高、膜再生性能好、分离过程简单、能耗低、操作维护简便、膜使用寿命长等众多优势广泛应用于食品、饮料、植（药）物深加工、生物医药、发酵、精细化工等众多领域，可用于工艺过程中的分离、澄清、纯化、浓缩、除菌、除盐等。

更优选为过截留分子量为30kDa的陶瓷膜。

作为优选，本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法步骤1所述浓缩为浓缩至谷氨酰胺含量为20～35%。

作为优选，本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法步骤1所述冷却结晶为缓慢降温至5～15℃，维持10小时左右。

本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法步骤1采用水洗谷氨酰胺发酵液过滤后的结晶粗品，以除去结晶粗品表面的大部分杂质，减少脱盐树脂的用量，从而减少了因树脂再生而产生污水量，降低了能耗，减少了污染。

优选的，所述水洗晶的用水量为结晶粗品质量的50wt%。

本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法步骤1冷却结晶后将结晶粗品与一次结晶母液分离得到结晶粗品，然后进行用水洗结晶粗品，水洗结晶粗品后将洗晶粗品与洗晶母液分离得到洗晶粗品。其中所述两步分离均可以采用板框分离或离心分离。

作为优选，本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法步骤2所述加水溶解为加水溶解成谷氨酰胺含量为3-4wt%的溶液。

因脱盐树脂用量较少，若用离子交换树脂柱脱盐，如果阳柱以1Bv/h的上柱流速上柱，过柱时间需要33.48小时，以1.2Bv/h的上柱流速上柱，过柱时间需要27.9小时，阴柱以1Bv/h的上柱流速上柱，过柱时间需要25小时，阳柱和阴柱串联上柱，整个过柱时间为28.9小时，过柱时间长，并且料液长期处于酸性或碱性条件下，谷氨酰胺易分解为谷氨酸，导致收率很低。本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法采用将阳离子交换树脂、阴离子交换树脂依次加入到料液中的方法进行脱盐，料液脱盐时间仅为4小时，大大降低了脱盐较长导致的谷氨酰胺的损失。同时本发明所述提取方法在脱盐时在使用阳离子交换树脂脱盐后，又用阴离子交换树脂脱盐，阴离子交换树脂可以吸附料液中的谷氨酸，使成品中谷氨酸的含量降低到0.3%以下，大大提高了提取谷氨酰胺的纯度。

作为优选，本发明所述提取方法步骤2所述脱盐的具体操作为先加入阳离子交换树脂，搅拌2小时，过滤除去阳离子交换树脂，然后再加入阴离子交换树脂，搅拌2小时，过滤除去阴离子交换树脂，得到脱盐液。

进一步的，所述阳离子交换树脂的用量为谷氨酰胺发酵液体积的3.17~3.65v/v%。

进一步的，所述阴离子交换树脂的用量为谷氨酰胺发酵液体积的4.25~4.89v/v%。

目前阳离子交换树脂又分为强酸性和弱酸性两类。强酸型阳离子交换树脂主要含有强酸性的反应基，如磺酸基（－SO₃H），此离子交换树脂可以交换所有的阳离子。弱酸型阳离子交换树脂具有较弱的反应基如羧基（－COOH基），此离子交换树脂仅可交换弱碱中的阳离子如Ca²⁺、Mg²⁺，对于强碱中的离子如Na⁺、K⁺等无法进行交换。

作为优选，本发明所述阳离子交换树脂为强酸型阳离子交换树脂。更优选为JK008、732#、WA-2或W-2型离子交换树脂。其中，732#型离子交换树脂，又名001×7型阳离子交换树脂，是指凝胶型强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，交联度为7%，骨架带有很高密度的电荷。732型阳离子交换树脂经钙离子转型后，制得732型钙离子交换树脂。JK008型离子交换树脂为均孔强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，性能与001×7系列阳离子交换树脂相似，但具有更高的交换容量。

阴离子交换树脂又分为强碱性和弱碱性两类。（1）强碱型阴离子交换树脂：主要是含有较强的反应基，如具有四面体铵盐官能基之－N+(CH₃)₃，在氢氧形式下，－N⁺(CH₃)₃OH^-中的氢氧离子可以迅速释出，以进行交换，强碱型阴离子交换树脂可以和所有的阴离子进行交换去除，这类树脂含有强碱性基团，如季胺基（亦称四级胺基）－NR₃OH(R为碳氢基团），能在水中离解出OH^－而呈强碱性。这种树脂的正电基团能与溶液中的阴离子吸附结合，从而产生阴离子交换作用。这种树脂的离解性很强，在不同pH下都能正常工作。它用强碱（如NaOH）进行再生。（2）弱碱型阴离子交换树脂：含有弱碱性基团，如伯胺基（亦称一级胺基）-NH₂、仲胺基（二级胺基）-NHR、或叔胺基（三级胺基）-NR₂，它们在水中能离解出OH－而呈弱碱性。这种树脂的正电基团能与溶液中的阴离子吸附结合，从而产生阴离子交换作用。这种树脂在多数情况下是将溶液中的整个其他酸分子吸附。它只能在中性或酸性条件（如pH1～9）下工作。它可用Na₂CO₃、NH₄OH进行再生。

作为优选，本发明所述阴离子交换树脂为是弱碱型阴离子交换树脂。更优选为A830或D354型离子交换树脂。

本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法在利用离子交换树脂脱盐后对脱盐液进行纳滤，以除去脱盐液中可溶性大分子物质及少量二价盐。

纳滤(NF)是介于超滤与反渗透之间的一种膜分离技术，其截留分子量在80-1000的范围内，孔径为几纳米，因此称纳滤。纳滤分离作为一项新型的膜分离技术，技术原理近似机械筛分。但是纳滤膜本体带有电荷性，这是它在很低压力下仍具有较高脱盐性能和截留分子量为数百的膜也可脱除无机盐的重要原因。纳滤能截留分子量大于100的有机物以及多价离子，允许小分子有机物和单价离子透过，可在高温、酸、碱等苛刻条件下运行，耐污染，运行压力低，膜通量高，装置运行费用低。与超滤或反渗透相比，纳滤过程对单价离子和分子量低于200的有机物截留较差，而对二价或多价离子及分子量介于200～500之间的有机物有较高脱除率。基于这一特性，纳滤主要应用于水的软化、净化以及相对分子质量在百级的物质的分离、分级和浓缩（如染料、抗生素、多肽、多醣等化工和生物工程产物的分级和浓缩）、脱色和去异味等。

作为优选，本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法步骤3所述纳滤为用截留分子量为1000Da的纳滤膜过滤。

脱色就是用吸附的方法除去化合物样品中的杂质。当样品(产品)为固体时，一般是先用适当溶剂将其溶解，加入吸附剂，停留或搅拌片刻，杂质即被吸附剂吸附。然后过滤，被吸附的杂质即与吸附剂一起留在滤纸上，而与样品分离。活性炭是一种黑色粉状，粒状或丸状的无定形具有多孔的碳，具有较大的表面积，有很强的吸附性能，常用于气体的吸附、分离和提纯，溶剂的回收，糖液、油脂、甘油、药物的脱色剂等。因此本发明步骤3所述纳滤液脱色优选为纳滤液加热至40℃加入活性炭脱色。

作为优选，本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法步骤3所述浓缩为浓缩至谷氨酰胺含量为25～45wt%。

作为优选，本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法步骤3所述冷却结晶为缓慢降温至5～15℃，维持10小时左右。

为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明进行详细说明。

实施例1：本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法提取谷氨酰胺

取27L谷氨酰胺发酵液(谷氨酰胺含量为78mg/mL），截留分子量为30kDa陶瓷膜过滤得到滤液，滤液经真空浓缩至谷氨酰胺含量为30%，然后缓慢降温至7℃，冷却结晶10小时，离心分离得到一次结晶粗品2302.6克，加入1064mL水洗晶，经分离得到洗晶粗品2201.8克，加水溶解至谷氨酰胺含量为3.9%，向溶解液中先加入856mL阳离子交换树脂搅拌2小时，过滤，再加入1150mL阴离子交换树脂，搅拌2小时，过滤，得滤液29.08L，滤液过截留分子量为1000Da的纳滤膜，得纳滤液，加入84.8克针剂炭脱色，经过滤后将脱色液浓缩至谷氨酰胺含量为30%，浓缩液冷却至10℃以下，维持10小时，经分离得二次结晶湿品，湿品干燥后得谷氨酰胺成品。所得谷氨酰胺纯度99.1%，成品中谷氨酸含量为0.15%，谷氨酰胺的收率为64.58%。阳树脂再生过程中产生的废水量为5735mL，阴树脂再生过程中产生的废水量为7660mL。

实施例2：本发明所述从发酵液中提取谷氨酰胺的方法提取谷氨酰胺

取28L谷氨酰胺发酵液（谷氨酰胺含量为76mg/mL），截留分子量为30kDa陶瓷膜过滤得到滤液，滤液经真空浓缩至谷氨酰胺含量为28%，缓慢降温至7℃，冷却结晶10小时，离心分离得到一次结晶粗品2250.1克，加入1070mL水洗晶，经分离得到洗晶粗品2133.3克，加水溶解至谷氨酰胺含量为3.7%，向溶解液中先加入890mL阳离子交换树脂、搅拌2小时，过滤，再加入1190mL阴离子交换树脂，搅拌2小时，过滤，得滤液32L，滤液过截留分子量为1000Da的纳滤膜，得纳滤液，加入88.8克针剂炭脱色，过滤，脱色液浓缩至谷氨酰胺含量为30%，浓缩液冷却至10℃以下，维持10小时，经分离得二次结晶湿品，湿品干燥后得谷氨酰胺成品。所得谷氨酰胺纯度为98.8%，成品中谷氨酸含量为0.05%，该过程中谷氨酰胺的收率为62.55%。阳树脂再生过程中产生的废水量为5960mL，阴树脂再生过程中产生的废水量为7930mL。

实施例3：现有提取谷氨酰胺的方法提取谷氨酰胺

取32L谷氨酰胺发酵液（谷氨酰胺含量为75.2mg/mL），截留分子量为30kDa陶瓷膜过滤得到滤液，过阴阳离子交换柱，阳树脂体积为9L，阴树脂体积为9L，过柱所得的脱盐液经真空浓缩至谷氨酰胺含量为25%，缓慢降温至7℃，冷却结晶10小时，离心分离得到一次结晶粗品克，加水溶解至谷氨酰胺含量为4.5%，加入120克针剂炭脱色，过滤，过滤得到的脱色液过截留分子量为800Da的纳滤膜，得纳滤液，浓缩至谷氨酰胺含量为40%，浓缩液冷却至10℃以下，维持10小时，经分离得二次结晶湿品，湿品干燥后得谷氨酰胺成品。所得谷氨酰胺纯度为98.8%，成品中谷氨酸含量为1.1%，该过程中谷氨酰胺的收率为51%。阳树脂再生过程中产生的废水量为30L，阴树脂在生过程中产生的废水量为30L。

以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims (15)

1.一种从发酵液中提取谷氨酰胺的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1、取谷氨酰胺发酵液降温、过滤，得到的滤液浓缩、冷却结晶、分离得到结晶粗品，然后加入结晶粗品重量30～60%的水洗晶，分离得洗晶粗品；

步骤2、取洗晶粗品加水溶解后依次加入阳离子交换树脂、阴离子交换树脂脱盐，过滤得到脱盐液；

步骤3、取脱盐液纳滤得到纳滤液，纳滤液脱色、过滤得脱色液，浓缩、冷却结晶、分离干燥即得。

2.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，步骤1所述过滤为过截留分子量为30kDa的陶瓷膜。

3.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，步骤1所述浓缩为浓缩至谷氨酰胺含量为20～35%。

4.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，步骤1所述冷却结晶为缓慢降温至5～15℃，维持10小时左右。

5.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，步骤1所述水洗晶的用水量为结晶粗品质量的50%。

6.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，步骤2所述加水溶解为加水溶解成谷氨酰胺含量为3-4wt%的溶液。

7.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，步骤2所述脱盐的具体操作为为先加入阳离子交换树脂，搅拌2小时，过滤除去阳离子交换树脂，然后再加入阴离子交换树脂，搅拌2小时，过滤除去阴离子交换树脂，得到脱盐液。

8.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，所述阳离子交换树脂的用量为谷氨酰胺发酵液体积的3.17~3.65v/v%。

9.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，所述阴离子交换树脂的用量为谷氨酰胺发酵液体积的4.25~4.89v/v%。

10.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，所述阳离子交换树脂为强酸型阳离子交换树脂。

11.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，所述阴离子交换树脂为是弱碱型离子交换树脂。

12.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，步骤3所述纳滤为用截留分子量为1000Da的纳滤膜过滤。

13.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，步骤3所述纳滤液脱色为纳滤液加入活性炭脱色。

14.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，步骤3所述浓缩为浓缩至谷氨酰胺含量为25～45wt%。

15.根据权利要求1所述提取方法，其特征在于，步骤3所述冷却结晶为缓慢降温至5～15℃，维持10小时左右。