CN102911068A - 左旋肉碱l-苹果酸盐及其制备方法与用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种新的左旋肉碱药学可接受盐即左旋肉碱L-苹果酸盐及其二价金属盐，以及该盐的制备方法与用途。本发明所述的左旋肉碱L-苹果酸盐及其二价金属盐不但比左旋肉碱内盐具有适于稳定性高、不易吸潮的特点，而且比现有的左旋肉碱药学可接受盐更容易为人体接受，更易参与人体生理代谢，并具有更强的营养及治疗作用。本发明还提供了所述的左旋肉碱L-苹果酸盐及其二价金属盐用于制备减肥药物或保健食品的用途，以及用于制备饮食/营养增补剂的用途，以及用于制备兽医产品或饲料的用途。

Description

左旋肉碱L-苹果酸盐及其制备方法与用途

技术领域

本发明属于医药中间体与食品添加剂领域，涉及一种新的左旋肉碱药学可接受盐，特别是涉及一种左旋肉碱L-苹果酸盐，尤其是左旋肉碱L-苹果酸二价金属盐，以及该盐的制备方法与用途。

背景技术

随着经济的发展，人们生活水平的提高，肥胖已经成为一个严重的公众健康问题，近年来全世界肥胖症患者日益增多，发达国家肥胖的患病率高达20%以上，每年因肥胖死亡的人数仅次于吸烟，国际肥胖症大会发布报告，全世界因肥胖症引起的有关疾病的死亡人数已超过同期全球饿死的人数。肥胖症是受生物、行为、环境因素共同影响的一种多因素的疾病，并可诱发严重的糖尿病、心血管病等疾患。因此，它是人类健康长寿的大敌。

肥胖症的治疗药有：食欲抑制药、增加能量消耗的药物、抑制肠道消化吸收的药物、胰岛素增敏剂、生物肽类及其激动剂或抑制剂等。这些药物有较多的不良反应，例如心脏瓣膜损害、肺动脉高压和手指坏死、升高血压、胃肠道功能紊乱、呼吸道感染、头痛、月经失调、焦虑、易疲劳、肠胀气、腹痛、腹泻等，个别患者还可出现低血糖、肝毒性反应等。

左旋肉碱的减肥效果早在上世纪90年代已经得到美、法、德、日、韩认可，2003年被国际肥胖健康组织认定为安全无副作用的减肥营养补充品。

左旋肉碱是脂肪代谢过程中的一种关键的物质，能够促进脂肪酸进入线粒体氧化分解。左旋肉碱是转运脂肪酸的载体。在长时间大强度运动中，左旋肉碱提高了脂肪的氧化速率，减少了糖原的消耗，同时也延缓了疲劳。目前，左旋肉碱已经广泛应用于食品工业，如婴儿奶粉、大众减肥食品、运动员营养品和中老年营养补剂中以及饲料加工业中，此外还发现其有医药方面的疗效，心血管疾病、肝脏疾病、肾脏疾病、高脂血症、糖尿病、神经肌肉疾病等均可通过服用左旋肉碱系列新产品而使病症得到改善。很多高科技减肥品都把左旋肉碱作为减肥的主要成分之一。

左旋肉碱的药学可接受盐与其内盐一样具有同样的治疗或营养作用，没有毒性或副作用，目前人们已经研发了几种左旋肉碱的药学可接受盐，以改善内盐的稳定性及易吸潮性。目前已报道的这些药学可接受盐主要有左旋肉碱酒石酸盐（参见US 4602039）、左旋肉碱富马酸盐（参见US 5703376）、左旋肉碱粘酸盐（参见US 5952379）、左旋肉碱硝酸盐（参见CN 101817759A）、左旋肉碱柠檬酸镁（参见US 5071874）等。但是，左旋肉碱酒石酸盐仍有较大的吸湿性，相对湿度超过60%会潮解，而且其中的阴离子部分即酒石酸没有任何治疗和营养作用。而左旋肉碱富马酸钙（CN101209975）的制备过程中需要冷冻，这在大生产过程中操作不便，增加了生产成本。左旋肉碱硝酸盐制备时，L-肉碱与硝酸反应放热，需要小心的控制温度和速度。

钙、镁、锌等元素是人体所必需的元素。儿童长期缺钙生长发育缓慢，身体矮小，牙齿不全，小儿头顶卤门长期不闭合，易患软骨病等，骨骼硬度不够，腿支持不住全身重量以致变弯形成罗圈腿型腿、八字脚型脚等, 以及鸡胸、驼背、甚至抽筋、易怒、多汗等；青年人缺钙会导致骨骼生长不良、抽筋、急燥易怒、出血时凝血差等；中老年缺钙易发生骨质疏松、骨质增生、四肢无力、抽筋、肩周炎、腰背痛、头晕、四肢麻木、气喘、易疲劳、记忆力衰退、动脉硬化、高血压(血液中钙浓度降低所致)、冠心病、结石病、糖尿病、性功能下降、老年痴呆病、身体变矮、易于衰老等。孕妇缺钙不利于胎儿正常生长、骨骼钙化、牙齿形成，抽筋等，妇女在妊娠、分娩、产后哺乳期中由于大量消耗钙，必须及时补充钙。妇女在中年易发生骨质疏松, 随时都有发生骨折的危险。镁摄入不足，吸收障碍、丢失过多等可导致机体镁缺乏。镁缺乏可致神经肌肉兴奋性亢进，抽搐、痉挛等；低镁血症患者可有房室性早搏、房颤以及室速与室颤，半数有血压升高。镁缺乏也可导致胰岛素抵抗和骨质疏松。人体锌缺乏体征是一种或多种锌的生物学功能降低的结果，严重的先天性锌吸收不良在人类证明为肠病性肢端性皮炎。这种严重缺锌引起的皮肤损害和免疫功能损伤，目前并不常见。人类锌缺乏的常见体征是生长缓慢、皮肤伤口愈合不良、味觉障碍、胃肠道疾患、免疫功能减退等。

因此有必要开发有效的补钙、补镁、补锌的营养品。目前在我国市场上销售的镁、锌的营养补充剂较少，钙强化补充剂主要有三种类型: 无机钙强化剂、生物钙强化剂和有机钙强化剂。（1）无机钙强化剂（如CaCO₃），含钙量较高, 但溶解性差，在机体内吸收需要消耗胃酸，且吸收率低，因此这类钙补充剂会增加肝肾的负担。（2）生物钙强化剂（如贝壳粉、珍珠粉、动物骨粉），除具有与无机钙补充剂一样的难于吸收的缺点外，还普遍存在重金属（铅、镉、汞、锌）含量超标的问题。（3）有机钙强化剂（如葡萄糖酸钙、醋酸钙），主要存在钙含量低和不同程度的毒性问题，如葡萄糖酸钙，含钙量仅为8.9%且不适用于糖尿病人服用；醋酸钙LD50〈5g/kg，毒性较大，容易导致肾结石、心脏痉挛、血管和软组织钙化。因此，醋酸钙作为钙强化剂一直没能通过美国FDA 认证。L-苹果酸钙与其它补钙剂作用机理不同，与上述钙补充剂相比，它具有明显的优势，它是一种有机钙强化剂，含钙量约20%，比葡萄糖酸钙高出一倍还多。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的不足，提供一种新的左旋肉碱药学可接受盐，即左旋肉碱L-苹果酸盐及其二价金属盐，这种左旋肉碱L-苹果酸盐及其二价金属盐不但比左旋肉碱内盐具有适于稳定性高、不易吸潮的特点，而且比现有的左旋肉碱药学可接受盐更容易为人体接受，更易参与人体生理代谢，并具有更强的营养及治疗作用。

本发明所述的一种左旋肉碱L-苹果酸盐，其结构式为：

  。

本发明所述的一种左旋肉碱L-苹果酸盐为二价金属盐，其结构式为：

，

其中，M²⁺为二价金属离子。

根据本发明所述的左旋肉碱L-苹果酸二价金属盐的进一步特征，所述的二价金属离子优选：Ca²⁺、Mg²⁺或Zn²⁺。

本发明还提供了一种所述的左旋肉碱L-苹果酸盐的制备方法，包括以下步骤：

A．将左旋肉碱氯化物溶于甲醇中；

B．向氢氧化钠的甲醇溶液中滴加上述左旋肉碱氯化物的甲醇溶液；

C．过滤除去生成的氯化钠固体；

D．再向滤液中滴加L-苹果酸的甲醇溶液；

E．浓缩反应液至干，加入适量丙酮洗涤；

F．再加入无水乙醇搅拌，过滤析出的固体，真空干燥即为左旋肉碱L-苹果酸盐。

本发明还提供了一种所述的左旋肉碱L-苹果酸二价金属盐的制备方法，包括以下步骤：

A．将左旋肉碱内盐溶于水中，加入L-苹果酸和二价金属化合物，其加入量按摩尔比为左旋肉碱：L-苹果酸：二价金属化合物=1-1.1：1：0.5，室温下搅拌反应至澄清；  

B. 将反应产物减压浓缩，用丙酮洗涤浓缩物，再加入无水乙醇，过滤析出的固体；优选地，减压浓缩的温度不超过70℃；

C．将析出的固体产物进行减压干燥，即得所述的左旋肉碱L-苹果酸二价金属盐。

根据本发明所述的左旋肉碱L-苹果酸二价金属盐的制备方法的进一步特征，当所述的二价金属离子是Ca²⁺时，所述的二价金属化合物是选自：Ca(OH)₂、CaO或CaCO₃。

根据本发明所述的左旋肉碱L-苹果酸二价金属盐的制备方法的进一步特征，当所述的二价金属离子是Mg²⁺时，所述的二价金属化合物是选自：Mg(OH) ₂、MgO或MgCO₃。

根据本发明所述的左旋肉碱L-苹果酸二价金属盐的制备方法的进一步特征，当所述的二价金属离子是Zn²⁺时，所述的二价金属化合物是Zn(OH) ₂、ZnO或ZnCO₃。

本发明还提供了所述的左旋肉碱L-苹果酸盐及其二价金属盐用于制备减肥药物或保健食品的用途，以及用于制备饮食/营养增补剂的用途，以及用于制备兽医产品或饲料的用途。

在应用时，本发明所述左旋肉碱L-苹果酸盐可制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液或其他口服剂型。

在应用时，可将本发明所述的左旋肉碱L-苹果酸盐及其二价金属盐和任选的药理学上可以接受的赋形剂进行组合。根据初步测算，作为减肥药物或保健食品，左旋肉碱L-苹果酸盐及其二价金属盐的单位剂量相当于50-2000 mg/天，优选100-1000 mg/天左旋肉碱内盐。作为饮食/营养增补剂，左旋肉碱L-苹果酸盐及其二价金属盐的单位剂量相当于50-3000mg/kg，优选100-1000mg/kg左旋肉碱内盐。作为兽医产品或饲料，左旋肉碱L-苹果酸盐及其二价金属盐的单位剂量相当于4-12g/kg，优选8-10g/kg 左旋肉碱内盐。

本发明所述的左旋肉碱L-苹果酸盐及其二价金属盐的特点与优点在于：

（1）本发明首次采用L-苹果酸来成功地制备出一种新的左旋肉碱药学可接受盐，是一种稳定性更高、非吸潮性的且易于口服的左旋肉碱药学可接受盐。

（2）L-苹果酸是参于整个生物体基本代谢的中间产物之一。当人体服用本发明所述的左旋肉碱L-苹果酸盐时，L-苹果酸不会在组织内积累以至产生有害的作用，反而可直接进入三羧酸循环，参与人体代谢。

（3）本发明提供了普通的左旋肉碱L-苹果酸盐以及三种典型的左旋肉碱L-苹果酸二价金属盐（钙盐、镁盐和锌盐）。本发明所述的左旋肉碱L-苹果酸盐在体内可分解析出这些二价金属离子，易被人体吸收和利用，因而提供了补钙、补镁和补锌的功能。

（4）本发明所述的左旋肉碱L-苹果酸盐与钙、镁、锌盐不易吸潮，且生产工艺简单、合理，常压下反应，反应条件温和，适合工业化大生产。

具体实施方式

实施例一：左旋肉碱L-苹果酸盐的制备

    向反应容器内加入氢氧化钠1.8g（45.3mmol），加入甲醇50ml，搅拌使其溶解后，滴加左旋肉碱氯化物的甲醇溶液（含左旋肉碱氯化物8.9g(45.3mmol)。滴加完毕，室温下继续搅拌反应2h。过滤出生成的氯化钠固体。向滤液中滴加L-苹果酸的甲醇溶液（苹果酸6.3g（45.3mmol）溶解于甲醇30ml中）。滴加完毕，继续搅拌3h。减压浓缩至干，用适量丙酮洗涤2次。加入无水乙醇100ml，用力捣碎，有白色固体析出。继续室温搅拌2h。减压过滤析出的白色固体，用无水乙醇10ml洗涤。置于烘箱内30℃减压干燥3h。产品为白色固体粉末11.0g,收率为82％。

元素分析C₁₁H₂₁NO₈

	C％	N％	H％
				计算值	44.7	4.7	7.2
测定值	44.8	4.6	7.3

HNMR（重水）

 δ 4.5（1H，m，CHOH左旋肉碱部分），4.3（1H，m，CHOH苹果酸部分）3.3-3.5（2H，dd，NCHH），3.1（9H，s，（CH₃）₃N），2.5-2.7（2H，m，CHHCOO苹果酸部分），2.3-2.4（2H，d，CHHCOOH左旋肉碱部分）。

CNMR（重水）

δ 179.8 （COO苹果酸部分），176.6（COOH左旋肉碱部分），77.1（叔碳苹果酸部分），69.8（NCH₂左旋肉碱部分），63.5（叔碳左旋肉碱部分），54.0（甲基碳），42.9（CH₂COO左旋肉碱部分），39.4（CH₂COOH苹果酸部分）。

IR 

3200.3 （O-H伸缩振动吸收），3038.0（C-H伸缩振动吸收），2964.9，2924.2（CH3，CH2 伸缩振动吸收），1717.2（C=O伸缩振动吸收），1600.1（COOH中的C=O伸缩振动吸收），1478.4（CH2弯曲振动吸收），1242.9（COOH中的C-O伸缩振动吸收），1191.9（叔醇的C-O伸缩振动），1416.4，936.7（COOH中O-H弯曲振动）。

MS

   M+，M+1=162，为左旋肉碱部分的离子峰。

   M-，M-1=133，为苹果酸部分的离子峰。

将以上所得白色固体粉末从漏斗上方慢慢加入，测量从漏斗底部漏出的物料在水平面上形成圆锥状堆积体的倾斜角（休止角）。测得本实施例所制备的左旋肉碱L-苹果酸盐的休止角为30度，流动性较好。

配制各种盐的饱和水溶液， 置普通干燥器内，于室温25℃下恒温使达到平衡水蒸气压。将称量瓶干燥至恒重, 平铺试样（厚度≤10mm）后称重。于上述干燥器内恒温放置, 隔一定时间后称重, 直至达到吸湿平衡, 记下吸湿试样的重量, 计算吸湿增重百分率。以相对湿度为横坐标, 吸湿增重百分率为纵坐标, 绘制吸湿平衡曲线。在吸湿平衡曲线两端绘出两条直线，由其交点画垂直于横轴的直线，得横坐标数据即为临界相对湿度CRH。结果表明，本实施例所制备的左旋肉碱L-苹果酸盐的临界相对湿度为87%，不易吸潮。

经实验证明，本实施例所制备的左旋肉碱L-苹果酸盐具有良好的流动性和抗吸潮性。

所得的左旋肉碱L-苹果酸盐可用于制备减肥药物、保健食品、饮食/营养增补剂、兽医产品或饲料。

实施例二：左旋肉碱L-苹果酸钙的制备

向反应容器内加入左旋肉碱1.6g（10mmol），加入水50ml，搅拌使其溶解后，加入L-苹果酸1.3g（10mmol）、氢氧化钙0.37g（5mmol），溶液浑浊。室温继续搅拌反应至溶液澄清。真空减压浓缩反应液（70℃）。向浓缩后的残留物中加入丙酮20 ml洗涤。再向其中加入无水乙醇搅拌至有白色固体析出。继续搅拌2h。减压过滤析出的白色固体，用无水乙醇10ml洗涤。置于烘箱内70℃减压干燥3小时。

产品为白色固体粉末2.8g，收率为90％。

所得的左旋肉碱L-苹果酸钙的结构式如下：

本实施例中的Ca(OH)2可用CaO或CaCO₃替代。

元素分析C₁₁H₂₀Ca_0.5NO₈

	C％	N％	H％	Ca％
					计算值	39.5	4.2	6.0	12.0
测定值	39.6	4.1	5.9	12.1

HNMR（重水）

δ 4.5（1H，m，CHOH左旋肉碱部分），4.3（1H，m，CHOH苹果酸部分）3.3-3.5（2H，dd，NCHH），3.1（9H，s，（CH₃）₃N），2.5-2.7（2H，m，CHHCOO苹果酸部分），2.3-2.4（2H，d，CHHCOOH左旋肉碱部分）。

CNMR（重水）

δ 179.6 （COO苹果酸部分），176.4（COOH左旋肉碱部分），77.3（叔碳苹果酸部分），69.5（NCH₂左旋肉碱部分），63.3（叔碳左旋肉碱部分），54.1（甲基碳），42.8（CH₂COO左旋肉碱部分），39.6（CH₂COOH苹果酸部分）。

IR 

3202.5 （O-H伸缩振动吸收），3037.8（C-H伸缩振动吸收），2965.2，2923.8（CH3，CH2 伸缩振动吸收），1718.1（C=O伸缩振动吸收），1602.1（COOH中的C=O伸缩振动吸收），1477.9（CH2弯曲振动吸收），1243.2（COOH中的C-O伸缩振动吸收），1192.3（叔醇的C-O伸缩振动），1415.7，936.9（COOH中O-H弯曲振动）。

MS

M+，M+1=162，为左旋肉碱部分的离子峰。

M-，M-1=133，为苹果酸部分的离子峰。

将以上所得白色固体粉末从漏斗上方慢慢加入，测量从漏斗底部漏出的物料在水平面上形成圆锥状堆积体的倾斜角（休止角）。测得本实施例所制备的左旋肉碱L-苹果酸钙的休止角为29度，流动性较好。

配制各种盐的饱和水溶液， 置普通干燥器内，于室温25℃下恒温使达到平衡水蒸气压。将称量瓶干燥至恒重, 平铺试样（厚度≤10mm）后称重。于上述干燥器内恒温放置, 隔一定时间后称重, 直至达到吸湿平衡, 记下吸湿试样的重量, 计算吸湿增重百分率。以相对湿度为横坐标, 吸湿增重百分率为纵坐标, 绘制吸湿平衡曲线。在吸湿平衡曲线两端绘出两条直线，由其交点画垂直于横轴的直线，得横坐标数据即为临界相对湿度CRH。结果表明，本实施例所制备的左旋肉碱L-苹果酸钙的临界相对湿度为85%，不易吸潮。

经实验证明，本实施例所制备的左旋肉碱L-苹果酸钙盐具有良好的流动性和抗吸潮性。

所得的左旋肉碱L-苹果酸钙盐可用于制备减肥药物、保健食品、饮食/营养增补剂（补钙）、兽医产品或饲料。

实施例三：左旋肉碱L-苹果酸镁的制备

向反应容器内加入左旋肉碱1.6g（10mmol），加入水50ml，搅拌使其溶解后，加入L-苹果酸1.3g（10mmol），室温搅拌反应2h。升温至70℃，继续保温反应3h。冷却至室温。加入Mg(OH)₂  0.29g（5mmol）。室温搅拌反应至澄清后，继续反应4h。过滤反应液。滤液真空减压浓缩。向浓缩后的残留物中加入无水乙醇50ml。搅拌至固化后，继续搅拌2h。减压过滤得产品，置于烘箱内70℃减压干燥3h。

产品为白色固体粉末2.5g，收率为83％。

所得的左旋肉碱L-苹果酸镁的结构式如下式所列：

本实施例中的Mg(OH)₂可用MgO或MgCO₃替代。

元素分析C₁₁H₂₀Mg_0.5NO₈

	C％	N％	H％	Mg％
					计算值	43.1	4.6	6.6	4.0
测定值	43.2	4.5	6.6	4.1

HNMR（重水）

δ 4.5（1H，m，CHOH左旋肉碱部分），4.3（1H，m，CHOH苹果酸部分）3.3-3.5（2H，dd，NCHH），3.1（9H，s，（CH₃）₃N），2.5-2.7（2H，m，CHHCOO苹果酸部分），2.3-2.4（2H，d，CHHCOOH左旋肉碱部分）。

CNMR（重水）

δ 179.6 （COO苹果酸部分），176.4（COOH左旋肉碱部分），77.3（叔碳苹果酸部分），69.5（NCH₂左旋肉碱部分），63.3（叔碳左旋肉碱部分），54.1（甲基碳），42.8（CH₂COO左旋肉碱部分），39.6（CH₂COOH苹果酸部分）。

IR 

3202.7 （O-H伸缩振动吸收），3037.5（C-H伸缩振动吸收），2965.4，2926.8（CH3，CH2 伸缩振动吸收），1718.4（C=O伸缩振动吸收），1602.5（COOH中的C=O伸缩振动吸收），1477.5（CH2弯曲振动吸收），1243.6（COOH中的C-O伸缩振动吸收），1192.2（叔醇的C-O伸缩振动），1415.8，936.7（COOH中O-H弯曲振动）。

MS

M+，M+1=162，为左旋肉碱部分的离子峰。

M-，M-1=133，为L-苹果酸部分的离子峰。

将以上所得白色固体粉末从漏斗上方慢慢加入，测量从漏斗底部漏出的物料在水平面上形成圆锥状堆积体的倾斜角（休止角）。测得本实施例所制备的左旋肉碱L-苹果酸镁的休止角为31度，流动性较好。

配制各种盐的饱和水溶液， 置普通干燥器内，于室温25℃下恒温使达到平衡水蒸气压。将称量瓶干燥至恒重, 平铺试样（厚度≤10mm）后称重。于上述干燥器内恒温放置, 隔一定时间后称重, 直至达到吸湿平衡, 记下吸湿试样的重量, 计算吸湿增重百分率。以相对湿度为横坐标, 吸湿增重百分率为纵坐标, 绘制吸湿平衡曲线。在吸湿平衡曲线两端绘出两条直线，由其交点画垂直于横轴的直线，得横坐标数据即为临界相对湿度CRH。结果表明，本实施例所制备的左旋肉碱L-苹果酸镁的临界相对湿度为84%，不易吸潮。

经实验证明，本实施例所制备的左旋肉碱L-苹果酸镁盐具有良好的流动性和抗吸潮性。

所得的左旋肉碱L-苹果酸镁盐可用于制备减肥药物、保健食品、饮食/营养增补剂（补镁）、兽医产品或饲料。

实施例四：左旋肉碱L-苹果酸锌的制备

向反应容器内加入左旋肉碱1.6g（10mmol），加入水50ml，搅拌使其溶解后，加入L-苹果酸1.3g（10mmol），室温搅拌反应2h。升温至70℃，继续保温反应3h。冷却至室温。加入Zn(OH)₂  0.5g（5mmol）。室温搅拌反应至澄清后，继续反应4h。过滤反应液。滤液真空减压浓缩。向浓缩后的残留物中加入无水乙醇50ml。搅拌至固化后，继续搅拌2h。减压过滤得产品，置于烘箱内70℃减压干燥3h。

产品为白色固体粉末2.8g，收率为87％。

所得的左旋肉碱L-苹果酸锌的结构式如下式所列：

本实施例中的Zn(OH)₂可用ZnO或ZnCO₃替代。

元素分析C₁₁H₂₀Zn_0.5NO₈

	C％	N％	H％	Zn％
					计算值	40.4	4.3	6.2	10.0
测定值	40.5	4.6	6.3	10.1

HNMR（重水）

δ 4.5（1H，m，CHOH左旋肉碱部分），4.3（1H，m，CHOH苹果酸部分）3.3-3.5（2H，dd，NCHH），3.1（9H，s，（CH₃）₃N），2.5-2.7（2H，m，CHHCOO苹果酸部分），2.3-2.4（2H，d，CHHCOOH左旋肉碱部分）。

CNMR（重水）

δ 179.6 （COO苹果酸部分），176.4（COOH左旋肉碱部分），77.3（叔碳苹果酸部分），69.5（NCH₂左旋肉碱部分），63.3（叔碳左旋肉碱部分），54.1（甲基碳），42.8（CH₂COO左旋肉碱部分），39.6（CH₂COOH苹果酸部分）。

IR 

3201.9 （O-H伸缩振动吸收），3035.3（C-H伸缩振动吸收），2963.6，2925.4（CH3，CH2 伸缩振动吸收），1715.1（C=O伸缩振动吸收），1600.8（COOH中的C=O伸缩振动吸收），1473.7（CH2弯曲振动吸收），1241.8（COOH中的C-O伸缩振动吸收），1193.5（叔醇的C-O伸缩振动），1417.5，934.9（COOH中O-H弯曲振动）。

MS

M+，M+1=162，为左旋肉碱部分的离子峰。

M-，M-1=133，为L-苹果酸部分的离子峰。

将以上所得白色固体粉末从漏斗上方慢慢加入，测量从漏斗底部漏出的物料在水平面上形成圆锥状堆积体的倾斜角（休止角）。测得本实施例所制备的左旋肉碱L-苹果酸锌的休止角为33度，流动性较好。

配制各种盐的饱和水溶液， 置普通干燥器内，于室温25℃下恒温使达到平衡水蒸气压。将称量瓶干燥至恒重, 平铺试样（厚度≤10mm）后称重。于上述干燥器内恒温放置, 隔一定时间后称重, 直至达到吸湿平衡, 记下吸湿试样的重量, 计算吸湿增重百分率。以相对湿度为横坐标, 吸湿增重百分率为纵坐标, 绘制吸湿平衡曲线。在吸湿平衡曲线两端绘出两条直线，由其交点画垂直于横轴的直线，得横坐标数据即为临界相对湿度CRH。结果表明，本实施例所制备的左旋肉碱L-苹果酸锌的临界相对湿度为86%，不易吸潮。

经实验证明，本实施例所制备的左旋肉碱L-苹果酸锌盐具有良好的流动性和抗吸潮性。

所得的左旋肉碱L-苹果酸锌盐可用于制备减肥药物、保健食品、饮食/营养增补剂（补锌）、兽医产品或饲料。

实施例五：减肥药效试验 

原料：SPF级SD大鼠，购买自广东省医学实验动物中心；左旋肉碱酒石酸盐（对照药）购买自湖北万邦伟业医药化工有限公司。

SPF级SD大鼠，120只，雄性，200~220g。检疫5d，喂饲基础饲料，自由饮水。检疫结束后随机分为空白对照组10只和肥胖模型组110只。肥胖模型组大鼠用营养饲料喂养60天后，其体重增重比空白对照组增加，差异有显著性，则肥胖模型建立。大鼠肥胖模型建立以后，将动物随机分为模型对照组、模型对照+运动组、左旋肉碱酒石酸盐对照+运动组、实施例1药低剂量+运动组、实施例1药高剂量+运动组，实施例2药低剂量+运动组、实施例2药高剂量+运动组，实施例3药低剂量+运动组、实施例3药高剂量+运动组，实施例4药低剂量+运动组、实施例4药高剂量+运动组。低、高剂量组用药剂量分别相当于人体推荐用量的5倍、30倍（实施例2药高剂量组为最大溶解浓度）。各组给予不同受试样品2ml灌胃（现配现用），模型对照+运动组和模型对照组给予相应的蒸馏水，连续给药30天，同时给予营养饲料。给药后进行游泳运动30min，一周5次。

左旋肉碱酒石酸盐受试样品：左旋肉碱酒石酸盐0.13g，加入蒸馏水2ml，搅拌混匀。

例1药低剂量组的受试样品：例1药0.16g，加入蒸馏水2ml，搅拌混匀。

例1药高剂量组的受试样品：例1药0.96g，加入蒸馏水2ml，搅拌混匀。

例2药低剂量组的受试样品：例2药0.18g，加入蒸馏水2ml，搅拌混匀。

例2药高剂量组的受试样品：例2药0.36g，加入蒸馏水2ml，搅拌混匀。

例3药低剂量组的受试样品：例3药0.17g，加入蒸馏水2ml，搅拌混匀。

例3药高剂量组的受试样品：例3药1.02g，加入蒸馏水2ml，搅拌混匀。

例4药低剂量组的受试样品：例4药0.18g，加入蒸馏水2ml，搅拌混匀。

例4药高剂量组的受试样品：例4药1.08g，加入蒸馏水2ml，搅拌混匀。

试验期间记录每只动物的给食量、剩食量，结束时称体重，剖腹取体脂（睾丸及肾周围脂肪垫）并称重，计算。

结果表明，实施例1药、实施例2药、实施例3药、实施例4药的结果之间无明显差异。低、高剂量组喂养30天后，体重比模型对照组明显下降，与模型对照组、左旋肉碱酒石酸盐对照组比较也有较大幅度下降。高剂量组的体脂、脂/体比明显较模型对照组、模型运动组和左旋肉碱酒石酸盐对照组减少。试验期间未发现不良反应。见下表1。

表1 对肥胖模型大鼠体重、体脂、脂/体比的影响

组别	体重增加g	体脂g	脂/体比
				空白对照组	12.5±5.8	4.8±1.5	0.02±0.01
模型对照组	30.7±10.6	16.6±7.8	0.06±0.02
				模型对照+运动组	24.2±13.4	10.5±5.2	0.04±0.02
左旋肉碱酒石酸盐+运动组	21.3±14.2*	8.2±4.3	0.03±0.01*
				例1药低剂量+运动组	19.3±10.2*	7.3±4.1	0.03±0.01
例1药高剂量+运动组	15.2±7.9*	5.9±4.5*	0.02±0.02*
				例2药低剂量+运动组	18.5±9.8	6.8±4.6*	0.02±0.01
例2药高剂量+运动组	14.6±8.4*	6.0±3.8*	0.02±0.01*
				例3药低剂量+运动组	18.2±9.6*	6.8±3.5*	0.02±0.02
例3药高剂量+运动组	15.2±9.1*	5.6±3.2*	0.01±0.01*
				例4药低剂量+运动组	18.8±9.4*	7.1±4.5*	0.02±0.02
例4药高剂量+运动组	14.9±8.8*	6.2±3.3*	0.02±0.01*

*：与模型对照组比P<0.05。

实施例六：口服制剂

本发明所述的左旋肉碱L-苹果酸盐，可结合任选的药理学上可以接受的赋形剂，以组合物形式制备为减肥药物或保健食品、饮食/营养增补剂。其中的组合物包含实施例1～4中所述的任意一种左旋肉碱L-苹果酸盐作为活性成分。其组合物可以制成固体制剂，如片剂、胶囊、颗粒剂、丸剂等，或液体制剂如口服液等。作为减肥药物或保健食品，左旋肉碱L-苹果酸盐及其二价金属盐的单位剂量相当于50-2000mg/天，优选100-1000mg/天左旋肉碱内盐。作为饮食/营养增补剂，左旋肉碱L-苹果酸盐及其二价金属盐的单位剂量相当于50-3000mg/kg，优选100-1000mg/kg左旋肉碱内盐。

片剂的制备例：

左旋肉碱L-苹果酸钙      400g

淀粉                     15g

滑石粉                    5g

硬脂酸镁                  3g

                    制成1000片。

胶囊剂的制备例：

左旋肉碱L-苹果酸镁      260g

硬脂酸镁                  3g

75%乙醇                  适量

                    制成1000粒。

颗粒剂的制备例：

左旋肉碱L-苹果酸锌      280g

阿斯巴甜                  1g

硬脂酸镁                  3g

75%乙醇                  适量

                    制成100袋（每袋10g）。

丸剂的制备例：

左旋肉碱L-苹果酸镁      300g

阿斯巴甜                  1g

硬脂酸镁                  2g

纯化水                   适量

                    制成100袋（每袋10g）。

    口服液的制备例：

左旋肉碱L-苹果酸盐       80g

甜蜜素                   0.5g

二甲基二碳酸盐           0.2g

纯化水                 1000ml

                     制成100支（每支10ml）。

实施例七：兽医产品或饲料

本发明所述的左旋肉碱L-苹果酸盐，可以组合物形式制备为兽医产品或饲料。其中的组合物包含实施例1～4中所述的任意一种左旋肉碱L-苹果酸盐作为活性成分。作为兽医产品或饲料，左旋肉碱L-苹果酸盐及其二价金属盐的单位剂量相当于4-12g/kg，优选8-10g/kg 左旋肉碱内盐。

制备例：

左旋肉碱L-苹果酸盐       18g

麦麸                    980g

丙酸钠                    2g

                       制成1kg。

本发明所述的左旋肉碱L-苹果酸盐，包括钙盐、镁盐、锌盐等，在体内可水解提供以下有效成分：

（1）左旋肉碱。左旋肉碱是脂肪代谢过程中的一种关键的物质，能够促进脂肪酸进入线粒体氧化分解。同时，左旋肉碱是转运脂肪酸的载体。在长时间大强度运动中，左旋肉碱提高了脂肪的氧化速率，减少了糖原的消耗，同时也延缓了疲劳。

（2）L-苹果酸。L-苹果酸具有重要的生理功能，它可直接进入三羧酸循环，参与人体代谢。其具体保健功效为：1、由于L-苹果酸在物质代谢途径中所处的特殊位置，可直接参与人体代谢，被人体直接吸收，实现短时间内向肌体提供能量，消除疲劳，起到抗疲劳、迅速恢复体力的作用。2、代谢的正常运行可以使各种营养物质顺利分解，促进食物在人体内吸收代谢，低热量，可有效地防止肥胖，可以起到减肥作用。3、在药物中添加L-苹果酸可增加其稳定性，促进药物在人体的吸收、扩散。4、L-苹果酸可以促进氨代谢，降低血氨浓度，对肝脏有保护作用。5、L-苹果酸作为治疗心脏病基础液成分之一，用于K+、Mg²⁺的补充，保持心肌的能量代谢，对心肌梗塞的缺血性心肌层起到保护作用。6、 L-苹果酸是乳酸钙注射液的稳定剂，也可作为抗癌药的前体及用作动物生长促进剂。7、抗牙垢，L-苹果酸具有酸度大、味道柔和、香味独特及L-苹果酸的腐蚀破坏作用比较弱，相应的牙釉质磨损体积损失较小，有不损害口腔和牙齿等特点。8、可以改善脑组织的能量代谢，调整脑内神经递质，有利于学习记忆功能的恢复，对学习记忆有明显的改善作用。9、L-苹果酸是一个比较理想的谷氨酸脱羧酶抑制剂，可以减少睡眠、提高兴奋度。10、L-苹果酸对人体血管内皮细胞有保护作用，对损伤内皮细胞效应具有抵抗作用。

（3）钙离子。钙除了对牙齿和骨头有至关重要的作用外，还能维持细胞的生存和功能，对神经传导、维持免疫系统、帮助血液凝固、新陈代谢、肌肉收缩、以及心脏细胞有着重要的帮助。钙对维持体内酸碱平衡、维持和调节体内许多生化过程是必需的，它能促进体内多种酶的活动。钙缺乏容易引起软骨瘤质、骨质疏松、佝偻病、坐骨神经痛、白发、肌肉痉挛、心肌功能下降、心脏病、生殖能力下降、经痛，也会导致神经兴奋性增强、精神失调、记忆力下降、易于疲劳过敏反应、增加肠癌患病率、高血压、骨骼畸形等。因此，钙是人体不可或缺的元素，是人体的生命之源，成为各种营养补剂中的常见元素。

（4）镁离子。镁是人体不可缺少的矿物质元素之一。镁几乎参与人体所有的新陈代谢过程，在细胞内它的含量仅次于钾。镁影响钾、钠、钙离子细胞内外移动的“通道”，并有维持生物膜电位的作用。镁元素的缺乏，必然会对人体健康造成危害。因此镁是人体不可或缺的元素，是人体的生命之源，成为各种营养补剂中的常见元素。

（5）锌离子。锌是人体不可缺少的矿物质元素之一。锌元素是多种金属酶的主要组成成分，与人体内许多酶的活性有关，直接参与核酸和蛋白质的代谢。如果体内缺锌可导致许多疾病。因此锌是人体不可或缺的元素，是人体的生命之源，成为各种营养补剂中的常见元素。

Claims (10)

1.一种左旋肉碱L-苹果酸盐，其特征在于：所述的左旋肉碱L-苹果酸盐的结构式为：

  。

2.一种左旋肉碱L-苹果酸盐，其特征在于：所述的左旋肉碱L-苹果酸盐为二价金属盐，其结构式为：

，

其中，M²⁺为二价金属离子。

3.根据权利要求2所述的左旋肉碱L-苹果酸盐，其特征在于：所述的二价金属离子是选自：Ca²⁺、Mg²⁺或Zn²⁺。

4.根据权利要求1所述的左旋肉碱L-苹果酸盐的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

A．将左旋肉碱氯化物溶于甲醇中；

B．向氢氧化钠的甲醇溶液中滴加上述左旋肉碱氯化物的甲醇溶液；

C．过滤除去生成的氯化钠固体；

D．再向滤液中滴加L-苹果酸的甲醇溶液；

E．浓缩反应液至干，加入适量丙酮洗涤；

F．再加入无水乙醇搅拌，过滤析出的固体，真空干燥即为左旋肉碱L-苹果酸盐。

5.根据权利要求2所述的左旋肉碱L-苹果酸盐的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

A．将左旋肉碱内盐溶于水中，加入L-苹果酸和二价金属化合物，其加入量按摩尔比为左旋肉碱：L-苹果酸：二价金属化合物=1-1.1：1：0.5，室温下搅拌反应至澄清；  

B. 将反应产物减压浓缩，用丙酮洗涤浓缩物，再加入无水乙醇，过滤析出的固体；

C．将析出的固体产物进行减压干燥，即得所述的左旋肉碱L-苹果酸二价金属盐。

6.根据权利要求5所述的左旋肉碱L-苹果酸盐的制备方法，其特征在于：当所述的二价金属离子是Ca²⁺时，所述的二价金属化合物是选自：Ca(OH)₂、CaO或CaCO₃。

7.根据权利要求5所述的左旋肉碱L-苹果酸盐的制备方法，其特征在于：当所述的二价金属离子是Mg²⁺时，所述的二价金属化合物是选自：Mg(OH) ₂、MgO或MgCO₃。

8.根据权利要求5所述的左旋肉碱L-苹果酸盐的制备方法，其特征在于：当所述的二价金属离子是Zn²⁺时，所述的二价金属化合物是Zn(OH) ₂、ZnO或ZnCO₃。

9.根据权利要求1或2所述的左旋肉碱L-苹果酸盐用于制备减肥药物或保健食品、饮食/营养增补剂、兽医产品或饲料的用途。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于：所述左旋肉碱L-苹果酸盐制成口服剂型，包括：片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液。