CN102911025A

CN102911025A - 一种从明日叶中提取4-羟基德里辛的方法

Info

Publication number: CN102911025A
Application number: CN2011102186938A
Authority: CN
Inventors: 李法庆; 刘东锋
Original assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2011-08-02
Filing date: 2011-08-02
Publication date: 2013-02-06

Abstract

本发明属于生物技术领域，公开了一种从明日叶中提取4-羟基德里辛的方法，其特征在于以下步骤：1)明日叶粉碎，加5-8倍量30-60％乙醇超声提取2-3次，提取液浓缩至无醇，加入聚酰胺树脂柱吸附，取4-5BV20-30％乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩后调节pH3-5，加乙酸乙酯萃取，萃取液用5％碳酸钠溶液洗涤3-4次，回收乙酸乙酯得粗品；2)取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水混合，取上相注满高速逆流色谱柱，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗品由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，合并流分减压干燥得高纯度4-羟基德里辛。本方法具有高效、制备量大、收率高等特点。

Description

一种从明日叶中提取4-羟基德里辛的方法

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其是涉及一种从明日叶中提取4-羟基德里辛的方法。

背景技术

4-羟基德里辛(4-hydroxyderricin)为查耳酮类化合物，CAS号55912-03-3，分子式C₂₁H₂₂O₄，分子结构式为

4-羟基德里辛是一种水溶性黄色素，具有良好的抗菌、抗溃疡、抗血栓、降血压、抗过敏、抗癌、抗艾滋病、防痴呆症、防糖尿病等诸多功效。

明日叶属于伞形科植物，原产于日本，又被称为都管草、长寿草、间草、八丈草、还阳草、天赐之草等。明日叶营养成份丰富而全面，在日本被称为蔬菜之王。现今在日本、韩国、台湾等地，明日叶已经成为“健康、活力、长寿”的全能食品。现代研究表明，明日叶中不仅含有大量人体必需微量元素，还含有查耳酮类和香豆素类化合物。其中查耳酮类化合物主要活性成分是4-羟基德里辛。

现有从明日叶中制备4-羟基德里辛的方法，主要是固体填充柱法。专利(申请号：201010299189.0)“一种明日叶中查耳酮类成分的提取工艺”，该专利公开的方法是是选取明日叶的干燥茎叶，粉碎，用乙醇进行热浸提取，合并提取液，减压回收乙醇至无醇味得到流浸膏，用水溶解流浸膏后用乙酸乙酯进行萃取，减压回收乙酸乙酯得萃取物，即得查耳酮粗品。查耳酮粗品采用AB-8大孔吸附树脂柱进行分离纯化，收集洗脱液，洗脱液再经硅胶层析柱进行分离纯化，得查耳酮。专利(申请号：200910266615.8)“从新鲜明日叶中提取查耳酮的方法”，该专利公开的方法：a.取适量新鲜明日叶粉碎匀浆，过滤收集滤液，将过滤后的滤渣加入1～2倍体积的乙酸乙酯，25-35℃搅拌浸提1-2小时过滤收集滤液，将滤渣同样条件浸提过滤一次并收集滤液；b.将上述三次滤液合并后加热至50-55℃，浓缩滤液开回收乙酸乙酯；c.向浓缩提取液中加入适量体积的二甲亚砜，混匀后用C18-OPN柱进行层析分离，经乙腈洗脱并干燥后获得天然明日叶查耳酮。现有制备工艺存在着收率低、成本高、制备量小、周期长的缺点。

发明内容

本发明的目的是克服现有方法的缺陷，提供一种从明日叶中提取4-羟基德里辛的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种从明日叶中提取4-羟基德里辛的方法，其特征在于以下步骤：

1)明日叶粉碎，加5-8倍量30-60％乙醇超声提取2-3次，提取液浓缩至无醇，加入聚酰胺树脂柱吸附，取4-5BV20-30％乙醇溶液洗脱，洗脱液浓缩后调节ph3-5，加乙酸乙酯萃取，萃取液用5％碳酸钠溶液洗涤3-4次，回收乙酸乙酯得粗品；

2)取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水混合，取上相注满高速逆流色谱柱，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗品由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，合并流分减压干燥得高纯度4-羟基德里辛。

步骤2)中的正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水混合比例为：3-7∶3-7∶2-5∶3-5。

本发明的技术优势在于工艺采用高速逆流色谱制备4-羟基德里辛，是一种收率高、制备量大、制备周期短的高效方法，解决了硅胶柱效率低而且污染严重的技术缺陷，所得到的产品纯度95％以上。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施例。

具体实施方式

实施例1：

明日叶粉碎，取500g加5倍量60％乙醇超声提取3次，提取液浓缩至无醇，加入聚酰胺树脂柱吸附，取4BV30％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液浓缩后调节ph3，加等体积乙酸乙酯萃取3次，萃取液用5％碳酸钠溶液洗涤3次，回收乙酸乙酯得粗品8g。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按3∶3∶2∶3混合，静置分层后，取上相注满高速逆流色谱柱，转动主机，转速调节800rpm，泵入下相做流动相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，同时流动相溶解粗品由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，合并流分减压干燥，得5.2g黄色粉末4-羟基德里辛，经高效液相检测，含量97.2％。

实施例2：

明日叶粉碎，取500g加8倍量30％乙醇超声提取2次，提取液浓缩至无醇，加入聚酰胺树脂柱吸附，取5BV20％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液浓缩后调节ph5，加等体积乙酸乙酯萃取3次，萃取液用5％碳酸钠溶液洗涤4次，回收乙酸乙酯得粗品7g。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按7∶7∶4∶3混合，静置分层后，取上相注满高速逆流色谱柱，转动主机，转速调节900rpm，泵入下相做流动相，建立动态平衡后，流速调节为3ml/min，同时流动相溶解粗品由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，合并流分减压干燥，得4.7g黄色粉末4-羟基德里辛，经高效液相检测，含量98.5％。

实施例3：

明日叶粉碎，取500g加8倍量40％乙醇超声提取2次，提取液浓缩至无醇，加入聚酰胺树脂柱吸附，取5BV30％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液浓缩后调节ph4，加等体积乙酸乙酯萃取3次，萃取液用5％碳酸钠溶液洗涤3次，回收乙酸乙酯得粗品7g。取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按5∶5∶3∶4混合，静置分层后，取上相注满高速逆流色谱柱，转动主机，转速调节700rpm，泵入下相做流动相，建立动态平衡后，流速调节为2ml/min，同时流动相溶解粗品由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集目标成分，连续制备，合并流分减压干燥，得5.2g黄色粉末4-羟基德里辛，经高效液相检测，含量96.8％。

Claims

1.一种从明日叶中提取4-羟基德里辛的方法，其特征在于以下步骤：

2.如权利要求1所述从明日叶中提取4-羟基德里辛的方法，其特征在于所述步骤2)中的正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水混合比例为3-7∶3-7∶2-5∶3-5。