CN102885937B - 酸浆有效部位群的制备方法及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种酸浆的有效部位群的制备方法及其应用。其制备方法是将酸浆提取后，通过聚酰胺、大孔树脂、离子交换树脂等色谱纯化技术，得到总甾体类有效部位、总黄酮有效部位及总有机酸有效部位。将上述三种有效部位提取物的一种或两种或三种合并混匀，即为酸浆的有效部位群。该酸浆有效部位群提取物，可与药学上可接受的载体或其他适宜赋形剂相结合，按照常规方法制成口服给药的剂型或非口服给药的注射剂或其他剂型，可用于制备预防和治疗糖尿病的药物。

Description

酸浆有效部位群的制备方法及其应用

技术领域

本发明属于中药制剂领域，涉及一种中药材的有效部位群的制备方法及应用，具体地说是涉及酸浆的有效部位群的制备方法及其在降血糖药物中的应用。

背景技术

随着世界人口的老龄化，糖尿病已经成为一种常见病、多发病，在工业发达国家其发病率呈上升趋势。据统计，全世界约有1.5亿糖尿病患者，80%为非胰岛素依赖型糖尿病（2型），其中我国约有3000万。由糖尿病并发症引起的死亡人数在发达国家已是继心脑血管疾病、癌症之后列第三位，引起了世界各国的高度重视，纷纷对糖尿病的发病机制、药物防治等进行研究。由于1型糖尿病病因已基本明确，只需补充胰岛素即可，而2型糖尿病则较复杂，目前我国医学界对其采取的是包括饮食疗法、药物治疗与其它辅助疗法的综合治疗措施。西药虽然层出不穷，但不能从根本上解决问题，而且西药治疗具有一定的副作用及“治疗失效”。中医药治疗糖尿病历史悠久，临床经验丰富，疗效显著，已成为近年来国内外研究热点。中医学对糖尿病的认识与西医不同，中医强调整体观，以阴、阳二者的变化反映疾病的本质。正常机体是“阴平阳秘”，阴阳平衡，即机体内环境维持稳态，糖代谢也维持稳定；并且中药的毒副作用相对较小，病人可长期服用，这是西药所不能比拟的独特的优势。

酸浆为茄科植物酸浆PhysalisalkekengiL.var.franchetii（Mast.）Makino的干燥宿萼或带果实的宿萼。主要药理作用有：1、抗菌作用：酸浆煎剂及其宿萼提取物均有抗菌作用。酸浆煎剂对宋氏杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、淋球菌、分枝杆菌有抑制作用。酸浆宿萼提取物，对金黄色葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌、蜡样芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌有抑制作用。2、强心作用：酸浆醚溶性和水溶性成分对蛙心均有加强收缩的作用，而以前者的作用尤强，用量大时其心脏就在收缩期中静止。对于家兔的心脏，二者共呈搏动旺盛作用，并能引起微弱的血管收缩及血压亢进。服用酸浆过量时，就会发生中枢性麻痹及全身痉挛，造成呼吸静止及心脏的扩张期静止等严重后果。3、镇痛作用：对酸浆镇痛作用进行的实验观察发现，酸浆对不同理化性质刺激引起的体表痛、内脏痛、炎症性疼痛和神经源性疼痛的急性期和慢性期都有一定的镇痛作用。酸浆的镇痛机制中有阿片受体参与，但并不完全决定于阿片受体。4、降血糖作用在一定的剂量下，酸浆果实的水提液、带果实的宿萼水提液及醇提液，具有明显的抑制血糖升高作用。降血糖作用与剂量有密切关系，当超过一定剂量时，反而会使血糖升高。5、抗癌作用：1986年，Dornberger等人对酸浆中的抗肿瘤成分进行的研究发现，酸浆中的甾体成分酸浆苦素具有多种体内体外的抗癌活性，并有抵抗Hela癌细胞的作用。酸浆水提物在小鼠体内具有抗欧利西氏癌细胞的活性，其主要原理可能是水提物可以阻断柠檬酸循环。另有报道，酸浆甲醇提取物对小鼠髓磷脂类白血病细胞(MLcells)有抑制作用。6、兴奋子宫和催产作用：酸浆根素(Hystonin)可使家兔及大鼠的离体子宫肌肉发生紧张性的收缩，作用比脑垂体后叶素快而短，可用于催产，但酸浆根素注射于动物，可表现大脑抑制，若大剂量应用，可使呼吸麻痹死亡，这是宫磷酸激酶同功酶的活性会受到时间依赖性的抑制，并可使植入的卵细胞发育成胚胎的数目降低。8、其他作用：酸浆果实中甘醇酸有利尿作用，国外有用其同属植物的叶、果作为利尿剂的报道。酸浆的果实及宿萼有解热作用；酸浆根中含有的打碗花素可作为葡萄糖苷酶的竞争性抑制剂。

酸浆在临床上有治疗小儿上呼吸道炎症的报道：用100%的锦灯笼注射液肌肉注射，临床观察120例，全部患儿均有中同程度发热，80%以上病例有咽痛症状及不同程度的扁桃体肿大，且有脓性渗出物。治疗结果，显效(于两天内体温降至正常，临床症状与咽部脓性渗出物消失)93例(77.5%)，有效(于3-5天内体温降至正常，临床症状与咽部脓性渗出物消失)20例(16.7%)，无效(体温与咽部脓性渗出物5天以内均未好转，症状无明显变化)7例(5.8%)。单项统计，80%以上的患者体温可以在2天内降至正常，90%以上的病例扁桃体分泌物及咽痛症状在3天内消失。但扁桃体肿大仅8例于治疗4天后略见缩小，其余均无明显改变。

专利申请号为CN98119025.1的专利公开了一种酸浆保健酒，其具有清咽利喉、减少咽喉刺激的作用，专利申请号为CN200410030860.6的专利申请公开了酸浆和黄芩组合用于治疗急性咽炎，专利申请号为CN200510016677.5的专利公开了一种酸浆注射液，用于治疗咽炎、扁桃体肿大、发烧等症。专利申请号为CN200510016675.6的专利公开了一种酸浆肠复康胶囊，它是由酸浆籽和蜜炙甘草制备而成，仅仅用于治疗痢疾、肠炎、结肠炎等症。专利申请号为CN200810300310.X的专利公开了一种酸浆在制备治疗消化道溃疡及胰腺炎的药物中的应用。

上述文献及专利等，尚未见公开从酸浆中提取分离有效部位群的制备方法及其在降血糖药物中的应用。

发明内容

本发明的目的在于提供一种酸浆的有效部位群。

本发明的另一目的在于提供从酸浆中提取分离有效部位群的提取制备方法。

本发明的再一目的在于提供该酸浆有效部位群制备成各种口服剂型和注射剂的制备方法。酸浆有效部位群提取物可与药学上可接受的载体或其他适宜赋形剂相结合，按照常规方法制成口服给药的剂型或非口服给药的注射剂或其他剂型。

本发明的又一目的在于提供该酸浆有效部位群在制备降血糖药物中的应用。

本发明所用酸浆为茄科植物酸浆PhysalisalkekengiL.var.franchetii（Mast.）Makino的根、茎、叶、果实、宿萼或种子。

酸浆有效部位群的制备方法，其特征在于按以下步骤制备：

（1）将酸浆用水或10～95%乙醇作为溶剂进行提取，提取次数为1-3次，每次提取时间为1～4小时，每次溶剂用量为药材重量的3-15倍；合并提取液，过滤，浓缩至相对密度为1.0～1.12（60℃）的药液；

（2）将步骤（1）得到的药液用有机溶剂萃取，合并萃取液，浓缩，通过聚酰胺柱，以5%-95%的乙醇进行梯度洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥，即得到总甾体类有效部位；

（3）将步骤（2）萃取后剩余的水溶液挥尽溶剂，通过大孔吸附树脂柱，用水洗脱，再用5%-95%的乙醇溶液进行梯度洗脱，收集醇洗脱液，浓缩干燥，即得到总黄酮有效部位；

（4）将步骤（3）大孔吸附树脂吸附后的水液及水洗液合并，通过阴离子交换树脂，用氨性乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥，即得总有机酸有效部位；

（5）将上述一种或两种或三种有效部位提取物合并混匀，即为酸浆的有效部位群。

本发明所述的酸浆有效部位群的制备方法，其特征在于：所述步骤（2）所采用的大孔吸附树脂为Ls-300大孔树脂、LSA-21大孔树脂、AB-8大孔树脂、NKA大孔树脂、D101大孔树脂、NKA-9大孔树脂、ADS-17大孔树脂。

本发明所述的酸浆有效部位群的制备方法，其特征在于：所述步骤（3）所采用的阴离子交换树脂为201X7强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂；D201、D296型大孔强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂；D301、D382型大孔弱碱苯乙烯系阴离子交换树脂。

本发明所述的酸浆有效部位群的制备方法，其特征在于：所述的总甾体类有效部位在酸浆有效部位群中的含量为质量分数20%-60%。所述的总甾体类有效部位主要含有：酸浆苦素A（PhysailinA）；酸浆苦素B（PhysailinB）；酸浆苦素C（PhysailinC）；酸浆苦素K（PhysailinK）；酸浆苦素D（PhysailinD）；酸浆苦素L（PhysailinL）；酸浆苦素Q（PhysailinQ）；酸浆苦素G（PhysailinG）；酸浆苦素P（PhysailinP）；4，7-二脱氢新酸浆苦素B；4，7-二去氢一7一脱氧新苦味素L；25,27-氢-4,7-脱氢新酸浆苦素A；4,7-二脱氢新酸浆苦素B；异酸浆苦素B；2，3-氢-酸浆苦素D；酸浆醇A(PhysanolA)；酸浆醇B(PhysanolB)；豆甾醇；禾本甾醇(Gramisterol)；钝叶醇(Obtusifoliol)；胆甾醇；24-乙基胆甾醇；环木菠萝烷醇(Cycloartanol)；环木菠萝烯醇(Cycloartenol)；羊毛酯-8-烯-3β-醇(Lanost-8-en-3b-ol)；14α-甲基-5β-（11）烯胆甾醇。其中酸浆苦素类成分及其衍生物在总甾体类有效部位中的含量为质量分数30%-90%。

本发明所述的酸浆有效部位群的制备方法，其特征在于：所述的总有机酸有效部位在酸浆有效部位群中的含量为质量分数2%-25%。所述的总有机酸有效部位主要含有草酸、枸橼酸、咖啡酸、桂皮酸、阿魏酸、甘醇酸、抗坏血酸，其中甘醇酸在总有机酸有效部位中的含量为质量分数10%-20%。

本发明所述的酸浆有效部位群的制备方法，其特征在于：所述的总黄酮有效部位在酸浆有效部位群中的含量为30%-60%。所述的总黄酮有效部位主要含有木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷；木犀草素-4，-O-β-D-葡葡萄糖苷；槲皮素-3-O-β-D-葡葡萄糖苷；槲皮素-7,3-二-O-β-D-葡葡萄糖苷；木犀草素7,3，-二-O-β-D-葡葡萄糖苷；木犀草素7,4-二-O-β-D-葡葡萄糖苷；木犀草素；商陆素。其中木犀草素类成分在总黄酮有效部位中的含量为质量分数30%-60%。

本发明的酸浆有效部位群，可以通过加入药剂学允许的各种辅料，制成药剂学上的各种剂型。

本发明的酸浆有效部位群可用于预防和治疗糖尿病。

本发明是以为茄科植物酸浆PhysalisalkekengiL.var.franchetii（Mast.）Makino为原料提取制备有效部位群。本发明首次探索研究并分离得到了酸浆具有降糖活性的有效部位群，即总甾体有效部位、总有机酸有效部位、总黄酮有效部位，制备工艺操作简便，生产成本低，适于工业化大生产。本发明制备降血糖的中药制剂，质量可控，疗效确切，安全性高。

建议临床患者使用本发明酸浆有效部位群的剂量为0.3-1.0g/次，一日三次。

本发明提供的酸浆有效部位群，通过观察对腹腔注射链脲霉素致小鼠高血糖的降糖作用，结果表明，酸浆有效部位群有较明显的降糖作用。

酸浆的有效部位群的制备工艺流程图见附图1

具体实施方式

下面通过具体实施例对酸浆有效部位群的制备方法及药理活性作进一步详述。

实施例1：酸浆有效部位群的制备

将酸浆果20kg置提取罐中，加80%乙醇15倍量，提取二次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇，过滤，浓缩至相对密度为1.10（60℃）的药液；用二氯甲烷萃取三次，每次用量与药液量相同，合并二氯甲烷萃取液，回收溶剂至干，上聚酰胺柱，用30%乙醇洗脱3BV，60%乙醇洗脱3BV，合并洗脱液，浓缩干燥，得总甾体类有效部位0.62kg；将二氯甲烷萃取后剩余的水溶液挥尽溶剂，通过LSA-21大孔吸附树脂柱，用水洗脱3倍量树脂柱体积（3BV），再用30%乙醇洗脱3BV，70%乙醇洗脱2BV，合并醇洗脱液，浓缩干燥，得到总黄酮有效部位0.35kg；上述流出液和水洗液合并，通过D301大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂，用水洗脱2BV，再用10%氨水乙醇洗脱3BV，收集醇洗脱液，浓缩干燥，得到总有机酸有效部位0.67kg。

实施例2：酸浆有效部位群的制备

将酸浆宿萼20kg置提取罐中，加30%乙醇20倍量，提取3次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇，过滤，浓缩至相对密度为1.0（60℃）的药液；用乙酸乙酯萃取三次，每次用量与药液量相同，合并乙酸乙酯萃取液，回收溶剂至干，上聚酰胺柱，用10%乙醇洗脱3BV，80%乙醇洗脱3BV，合并洗脱液，浓缩干燥，得总甾体类有效部位0.52kg；将乙酸乙酯萃取后剩余的水溶液挥尽溶剂，通过NKA大孔吸附树脂柱，用水洗脱3倍量树脂柱体积（3BV），再用20%乙醇洗脱3BV，90%乙醇洗脱2BV，合并醇洗脱液，浓缩干燥，得到总黄酮有效部位0.45kg；上述流出液和水洗液合并，通过201X7强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂，用水洗脱2BV，再用20%氨水乙醇洗脱2BV，收集醇洗脱液，浓缩干燥，得到总有机酸有效部位0.50kg。

实施例3：酸浆有效部位群的制备

将酸浆根、酸浆茎、酸浆叶混合物10kg置提取罐中，加水10倍量，提取3次，每次1.5小时，合并提取液，过滤，浓缩至相对密度为1.20（60℃）的药液；用环己烷萃取三次，每次用量与药液量相同，合并环己烷萃取液，回收溶剂至干，上聚酰胺柱，用20%乙醇洗脱3BV，90%乙醇洗脱3BV，合并洗脱液，浓缩干燥，得总甾体类有效部位0.24kg；将环己烷萃取后剩余的水溶液挥尽溶剂，通过ADS-17大孔吸附树脂柱，用水洗脱3倍量树脂柱体积（3BV），再用30%乙醇洗脱3BV，70%乙醇洗脱2BV，95%乙醇洗脱2BV，合并醇洗脱液，浓缩干燥，得到总黄酮有效部位0.26kg；上述流出液和水洗液合并，通过D201强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂，用水洗脱2BV，再用20%氨水乙醇洗脱2BV，收集醇洗脱液，浓缩干燥，得到总有机酸有效部位0.21kg。

实施例4：有效部位群中总黄酮有效部位中总黄酮的含量测定

采用紫外分光光度法测定本发明总黄酮有效部位中总黄酮的含量：

对照品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的芦丁对照品15mg，置5ml量瓶中，加无水乙醇超声使溶解，加无水乙醇至刻度，摇匀，精密吸取2.5ml，置25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得（每1ml含0.3mg）；

供试品溶液的制备：取本品总黄酮有效部位提取物0.2g，精密称定，置25ml量瓶中，加无水乙醇10ml，超声处理5分钟，加水12ml，超声处理20分钟，放冷，加水至刻度，摇匀，离心（3000转/分）5分钟，精密吸取上清液1.5ml，置25ml量瓶中，加水至6ml，摇匀，即得；

标准曲线的制备：精密吸取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml至25ml量瓶中，加水至6ml摇匀，加5％亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟。精密吸取水6ml，至25ml量瓶中，按上法操作制得空白对照溶液。照分光光度法（中国药典2005年版一部附录ⅤB），在505nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；

测定法：供试品溶液按标准曲线制备项下方法，自“加5％亚硝酸钠”起依法制备，在505nm处测定吸收度，按标准曲线计算样品中总黄酮含量，即得。本品每1g含总黄酮以芦丁计为620mg。

实施例5:酸浆有效部位群片剂的制备

取上述各实施例中任一酸浆有效部位群305g，加入60g淀粉，混匀，制粒，过筛，加15g微晶纤维素，0.5g硬脂酸镁，混匀，压制成1000片,即为本发明的片剂。

实施例6：酸浆有效部位群颗粒剂的制备

取上述各实施例中任一酸浆有效部位群305g，加入乳糖150g，糊精150g，制粒，整粒，过筛，制成颗粒1000g，即成本发明的颗粒剂。

实施例7：酸浆有效部位群的降糖作用观察。

1、试验目的

观察降糖样品对腹腔注射链脲霉素致小鼠高血糖的降糖作用。

2、试验材料

2.1药品：

供试品：实施例一酸浆有效部位群。药物配制：取粉末100mg溶于20ml蒸馏水中；

阳性药：降糖灵（苯乙双胍片），250mg/片。使用时取降糖灵1片（250mg），研碎，加水至30ml。链脲霉素(STREPTOZOCIN，STZ)，规格：1g/瓶，批号：015K1279，SIGMA公司；

称链脲霉素192mg，试验前加预冷的0.1molpH4.4柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液至40ml（4.8mg/ml）,在冰浴中配制。以上药品均为现用现配；

血糖（GLU）试剂盒，批号：240711，由北京中生北控生物科技有限公司提供。

2.2实验动物

雄性昆明种小鼠60只，体重24±1g。由山东鲁抗医药股份有限公司动物中心提供，许可证号：SCXK（鲁）20050017。

2.3.动物实验室条件

动物饲养于普通级环境，温度：20～24℃，湿度：40～70%，合格证号：鲁动环字H2002120672。笼具：苏州新区枫桥净化设备厂，许可证号：SCXK（苏）2002-0034。块状鼠饲料：山东省实验动物中心提供。SCXK（鲁）20040014。

2.4主要仪器设备

强生稳豪型血糖仪。KNOEPRO型全自动生化分析仪，芬兰康艺仪器公司。

3、实验方法及结果

昆明种雄性小鼠70只，禁食14h,随机选10只鼠为正常对照组，其余60只小鼠快速腹腔注射链脲霉素120mg/kg，制备糖尿病模型，注射给药容积为0.5ml/20g。正常对照组腹腔注射等体积的柠檬酸-柠檬酸三钠缓冲液。造模48小时后，注射链脲霉素小鼠均出现多饮、多尿、多食等糖尿病症状。随机抽取5只，尾静脉取血用血糖仪检测空腹血糖，血糖值均高于11.2mmol/L，说明模型成功，随后将60只小鼠按体重随机分为6组，各组动物灌胃给予相应的药物，正常对照及模型对照组给予等体积的饮用水，灌胃体积0.5ml/20g小鼠，每日灌胃1次，连续灌胃8天。于给药第8天，小鼠禁食2小时灌胃给药，药后1小时，各组小鼠摘眼球取血，用全自动生化仪测定小鼠空腹血糖。

检测结果表明，与正常对照组比较，模型组小鼠血糖水平明显增高（P＜0.001），说明小鼠腹腔注射链脲霉素致糖尿病模型造模成功。降糖4个样品组血糖值与模型组血糖值相比，均有较明显的降糖作用。结果详见表1。

表1降糖样品对链脲霉素致小鼠糖尿病血糖水平的影响（X±SD）

注：P值为各试验组与模型组比较

综上所述，酸浆有效部位群样品均具有较好的降糖活性。

实施例7酸浆有效部位群片剂对高血糖病患者的临床观察试验。

一、一般资料：

45例患者均系门诊病人，其中男性20例，女性25例，年龄最小40岁，最大61岁，平均53.5岁，病程最长15年，最短1年，血糖8～12.2mmol/L。

二、观察项目：

1、主症：气短乏力，口渴喜饮，多食易饥，手足心热，烦热急躁，自汗盗汗，腰膝酸软，大便秘结；

2、血糖：治疗前后各测1次空腹血糖。

三、治疗方法：

1、所有患者均合理控制饮食，原服用西药降糖者，均维持原来用法用量；

2、本组病例均每日服酸浆有效部位群片，2片/次，3次/日；治疗以1个月为1个疗程。

四、临床疗效评定标准

显效：临床症状消失，空腹血糖复查正常；

有效：临床症状消失，空腹血糖未降至正常者；

无效：临床症状无变化或有所加重，空腹血糖无变化或加重。

五、临床观察结果

1、治疗前临床症状：气短乏力者40例，口渴喜饮者35例，多食易饥者30例，手足心热者28例，烦热急躁者30例，自汗盗汗者33例，腰膝酸软者38例，大便秘结者32例；

2、治疗后临床症状疗效：见表2；

表2　治疗后临床疗效

疗效	气短乏力	口渴喜饮	多食易饥	手足心热	烦热急躁	自汗盗汗	腰膝酸软	大便秘结	血糖
										显效(例)	7	9	7	4	6	7	6	3	8
有效(例)	25	20	20	20	17	20	27	19	30
										无效(例)	8	6	3	4	7	6	5	10	7
总有效率（%）	80.00	82.86	90.00	85.71	76.67	81.82	86.84	68.75	84.44

结果表明，45例病人中显效者8例(占17.8%)；有效30例(占66.7%)；无效7例(占15.6%)；总有效38例，总有效率84.4%。

Claims (4)

1.酸浆有效部位群的制备方法，其特征在于按以下步骤制备：

（1）将酸浆用80%乙醇作为溶剂进行提取，提取次数为2次，每次提取时间为1小时，每次溶剂用量为药材重量的15倍；合并提取液，过滤，浓缩至60℃相对密度为1.10的药液；

（2）将步骤（1）得到的药液用二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷萃取液，回收溶剂至干，通过聚酰胺柱，用30%乙醇洗脱3倍量树脂柱体积，60%乙醇洗脱3倍量树脂柱体积，合并洗脱液，浓缩干燥，即得到总甾体类有效部位；

（3）将步骤（2）萃取后剩余的水溶液挥尽溶剂，通过LSA-21大孔吸附树脂柱，用水洗脱3倍量树脂柱体积，再用30%乙醇洗脱3倍量树脂柱体积，70%乙醇洗脱2倍量树脂柱体积，合并不同浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得总黄酮有效部位；

（4）将步骤（3）大孔吸附树脂吸附后的水液及水洗脱液合并，通过D301大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂，用水洗脱2倍量树脂柱体积，再用10%氨水乙醇洗脱3倍量树脂柱体积，收集氨水乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得总有机酸有效部位；

（5）将上述三种有效部位提取物合并混匀，即得酸浆有效部位群。

2.根据权利要求1所述的酸浆有效部位群的制备方法，其特征在于所述的酸浆可以是酸浆根或酸浆茎或酸浆叶或酸浆果实或酸浆宿萼或酸浆种子。

3.根据权利要求1所述的酸浆有效部位群的制备方法，其特征在于酸浆有效部位群通过加入药剂学允许的各种辅料制成药剂学上口服的片剂、颗粒剂。

4.酸浆有效部位群在制备预防和治疗糖尿病药物中的应用，其特征在于酸浆有效部位群的制备方法为：

（1）将酸浆用80%乙醇作为溶剂进行提取，提取次数为2次，每次提取时间为1小时，每次溶剂用量为药材重量的15倍；合并提取液，过滤，浓缩至60℃相对密度为1.10的药液；

（2）将步骤（1）得到的药液用二氯甲烷萃取，合并二氯甲烷萃取液，回收溶剂至干，通过聚酰胺柱，用30%乙醇洗脱3倍量树脂柱体积，60%乙醇洗脱3倍量树脂柱体积，合并洗脱液，浓缩干燥，即得到总甾体类有效部位；

（3）将步骤（2）萃取后剩余的水溶液挥尽溶剂，通过LSA-21大孔吸附树脂柱，用水洗脱3倍量树脂柱体积，再用30%乙醇洗脱3倍量树脂柱体积，70%乙醇洗脱2倍量树脂柱体积，合并不同浓度乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得总黄酮有效部位；

（4）将步骤（3）大孔吸附树脂吸附后的水液及水洗脱液合并，通过D301大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂，用水洗脱2倍量树脂柱体积，再用10%氨水乙醇洗脱3倍量树脂柱体积，收集氨水乙醇洗脱液，浓缩干燥，即得总有机酸有效部位；

（5）将上述三种有效部位提取物合并混匀，即得酸浆有效部位群。