CN102869992A - 用于癌症诊断的方法和试剂盒 - Google Patents

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尼尔斯·埃格贝里
莱纳·卡尔森
冈纳·伦奎斯特
安德斯·拉尔森
戈埃兰·伦奎斯特
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Abstract

本发明涉及用于对怀疑患有前列腺癌的对象进行诊断或提供预后的方法，包括体外检测前列腺小体和对至少一种选自CD13、CD59、CD10、CD26、CD142、CD143和MHC I的抗原的前列腺小体表达进行定量，以及将所定量的表达值与来源于健康对象的相应抗原的参考值进行比较。另外，可使用所述抗原之间的商。可通过流式细胞术或ELISA的方式进行检测。还提供用于对怀疑患有前列腺癌的对象进行诊断或提供预后的试剂盒。

Description

用于癌症诊断的方法和试剂盒
技术领域
本发明涉及用于对怀疑患有前列腺癌的对象进行诊断和提供预后的方法和试剂盒。
背景技术
癌症是最常见的致命疾病之一，尽管其在诊断和治疗上有着新的进展，但是每年仍然有很大数量的死亡。
例如，前列腺癌是男性中十种诊断的癌症疾病中最常见的癌症疾病，前列腺癌表现出来源于局部肿瘤或肿瘤转移性扩散的症状，如排泄功能障碍或骨痛，并且常常当诊断出该疾病时已到了晚期。有时，前列腺癌会在直肠指检或对患有良性前列腺增生的男性进行外科手术期间所得组织的组织学检查中被意外地发现。
前列腺特异性抗原(prostate specific antigen，PSA)的测定改变了前列腺癌诊断的模式，使得更多病例在早期发现而较少病例在晚期发现。然而，由于PSA不是血清中的前列腺癌特异性标志物，所以它不是理想的诊断标志物并且因此不适合对前列腺癌进行筛选。PSA试验不能区分良性前列腺增生和早期前列腺癌，另外不能区分具有高转移可能的前列腺癌(侵袭性前列腺癌)和不具有或具有微弱侵袭性的癌症(生长缓慢性前列腺癌)。“不确定的”PSA增加经常导致多次前列腺活检，在许多情况下这对患者以及类似地对社会都是不利的。尤其，由于在随访检查期间使用活检，PSA试验具有可能使患者发生败血症的风险。
另外，PSA试验的缺点常常引起切除手术(truncating surgery)，即前列腺全切除。由于额外的费用，这种类型的过度治疗不仅对患者而且对社会造成很大的不便。
前列腺小体(prostasome)(一类外吐小体(exosome))是前列腺的分泌产物。这些细胞器的膜结构很复杂并且膜材料的二维凝胶电泳显示出多于100种不同的蛋白质实体。前列腺小体包括神经内分泌分子和CD(cluster of differentiation，分化群)分子，并且许多不同的酶是前列腺小体膜嵌合体系的一部分。前列腺小体具有许多不同的生物活性，但是其生理功能仍然不清楚。
在W02007/015174中，公开了外吐小体特异性配体和包含其的组合物。US 7,083,796公开了至少包含分歧杆菌(Mycobacterium sp.)抗原的组合物和融合蛋白以及编码此类组合物和融合蛋白的RNA。在US6,620,922中，公开了用于治疗和诊断癌症(如前列腺癌)的组合物和方法。US 6,107,090公开了识别前列腺特异性膜抗原的细胞外结构域或者结合前列腺特异性膜抗原并与其一起内化的抗体及其结合部分、探针、配体或其他生物制剂的用途。在2001年Lena Carlsson、Doctoral Thesis发表的“Perspectives on the Biological Role of Human Prostasomes”公开了前列腺小体具有有效的抗菌作用。Lena Carlsson等在“Flow cytometrictechnique for determination of prostasomal quantity，size and expressionof CD10，CD13，CD26and CD59in human seminal plasma”，internationaljournal of andrology(2006)中研究了CD标志物的前列腺小体表达。根据上面的陈述可见，需要改进的非侵入性诊断工具以用于检测前列腺癌。上述出版物(其内容以法律许可的最大程度并入本文)没有公开任何用于检测前列腺癌的非侵入性诊断工具。
发明内容
根据本发明的第一个方面，提供用于对怀疑患有前列腺癌的对象进行诊断和提供预后的方法，包括体外检测前列腺小体和对至少一种抗原的前列腺小体表达进行定量，以及将所定量的表达值与来源于健康对象的相应抗原的参考值进行比较。本文将健康对象定义为没有癌症的主观和/或临床体征(例如不患有前列腺癌)的对象。
作为新型生物标志物的前列腺小体的体外检测以及对至少一种抗原的前列腺小体表达进行定量可分别在单个步骤中或两个独立步骤中进行。用于体外检测前列腺小体的抗体可与在随后对前列腺小体抗原表达进行定量中所使用的抗体相同或不同。例如，发现单克隆抗体mAb78(参见，例如Floryk D等，Differentiation of human prostate cancer PC-3cellsinduced by inhibitors of inosine 5’-monophosphate dehydrogenase.Cancer Res.2004；64：9049-9056)和mAb8H10可用于体外检测前列腺小体。
在检测和对前列腺小体表达进行定量之前的步骤中，提供来自怀疑患有前列腺癌的对象的样品。本发明的方法是非侵入性的，即不需要活检。所述样品可以是体液，如天然或经处理形式的前列腺分泌物、尿液、精液流体、血液(参见表4)。所述样品的处理可以是例如离心。
根据本发明的一个实施方案，在提供所述样品与检测和定量前列腺小体抗原表达的随后步骤之间对所述样品进行前列腺小体富集。该富集可通过将所述前列腺小体固定在固相支持物上进行，例如固定在硝酸纤维素膜上、放射免疫测定管中、颗粒(如纳米颗粒)上或者ELISA板上。
在本发明的一个实施方案中，所述至少一种抗原选自CD13、CD59、CD10、CD26、CD142、CD143和MHC I。
在本发明的一个实施方案中，对怀疑患有前列腺癌的对象进行诊断和提供预后的方法是基于与参考值相比在患有前列腺癌的对象中抗原CD10、CD26、CD142(也称为组织因子(Tissue Factor))和MHC I至少之一的上调。因此，根据本发明，参考值(即对照)与在来自前列腺癌患者的前列腺小体上表达的CD26之间的商可为0.95或更小。同样，对于CD142，参考值(即对照)与在来自前列腺癌患者的前列腺小体上表达的CD142之间的商可为0.75或更小。对于待诊断或预测的前列腺癌而言，对于MHC I，参考值(即对照)与在来自前列腺癌患者的前列腺小体上表达的MHC I之间的商可为0.75或更小。
在一个替代性实施方案中，对怀疑患有前列腺癌的对象进行诊断和提供预后的方法是基于与参考值相比在患有前列腺癌的对象中抗原CD13和CD59至少之一的下调。因此，根据本发明，参考值(即对照)与在来自前列腺癌患者的前列腺小体上表达的CD13之间的商可为1.59或更大。同样，对于CD59，参考值(即对照)与在来自前列腺癌患者的前列腺小体上表达的CD59之间的商可为1.30或更大。
所使用的参考值可来源于通过利用PSA、临床和回忆数据确认没有患前列腺癌的健康对象。
上述抗原的表达可通过测量与所述抗原反应的抗体来进行测定。所述抗体可以是带标记的以用于检测。所述检测可用例如荧光来进行，例如流式细胞术，并且用ROC曲线评估。
本领域技术人员了解，用于计算上述商的平均荧光强度可随所使用的分析设备而变化。然而，所述商可能在很大程度上保持不变。同样，本领域技术人员了解，可使用其他方法测定所述抗原的表达。上述商同样可在很大程度上保持不变。
在本发明的一个实施方案中，计算至少两种所述抗原之间的商并且将所述商与参考商值进行比较。商可基于，例如用来自前列腺癌患者的下调的前列腺小体抗原除以来自同一前列腺癌患者的上调的前列腺小体抗原。之后将该商值与来自未患前列腺癌的正常患者的参考商值进行比较。使用此类商可给予该方法以改进的预后值。
因此，在本发明的一个实施方案中，基于所检测的所述抗原的量，确定商(CD13+CD59)/(CD10+CD26)并且与参考值进行比较。CD13和CD59在来自前列腺癌患者的前列腺小体上均下调，而CD10和CD26在来自前列腺癌患者的前列腺小体上均上调。本领域技术人员了解，可使用抗原的其他组合而不仅是本文所特定公开的一种组合来计算并使用商。
在本发明的另一个实施方案中，能够特异性结合至少一种所述抗原的至少一种抗体用于检测所述抗原并对其表达进行定量。所述抗体可以是单克隆抗体或多克隆抗体。作为对完整抗体的替代，可使用Fab、Fab2或单链Fv抗体。所述完整抗体或其部分应都具有抗原结合结构域。
在本发明又一个实施方案中，所述至少一种抗体用可区分的荧光标志物来标记。可使用流式细胞术检测和定量所述抗体以得到表达模式。在一个替代性实施方案中，使用ELISA检测和定量所述抗体。根据本发明，使用例如铕和钐，还可利用DELPHIA分析。
根据本发明的第二个方面，提供用于对怀疑患前列腺癌的对象进行诊断和提供预后的试剂盒，包含特异性结合至少一种选自CD13、CD59、CD10、CD26、CD142、CD143和MHC I的抗原的至少一种抗体。所述抗体可以是单克隆抗体或多克隆抗体，或者可替换地，Fab、Fab2或单链Fv抗体可形成所述试剂盒的一部分。
在以下实施例中结合附图进一步对本发明进行描述，其目的不在于以任何方式限制本发明的范围。
附图说明
图1示出CD13和CD10之比的ROC曲线。用于区分前列腺癌患者与正常个体(未患前列腺癌)的AUC(曲线下面积)为0.874，并且在截断限(cut off limit)为2.04时该比值的灵敏度为83.3％，特异性为91.1％。
图2示出CD59和CD10之比的ROC曲线。用于区分前列腺癌患者与正常个体(未患前列腺癌)的AUC为0.863，并且在截断限为5.32时该比值的灵敏度为100％，特异性为64.6％。
实施例
样品准备
提供来自79位不具有已知前列腺癌患者(根据PSA值以及临床和回忆信息)和10位确诊前列腺癌患者的精液样品。
为了分离精子和精液浆(seminal plasma)，将人精液在室温下孵育约30分钟并在20℃的温度下在1000×g下离心20分钟后从人精液中获得精液流体(seminal fluid)。由此准备好了精液浆以用于下述的流式细胞术分析。
尿液、前列腺分泌物和肝素化血液样品分别在20℃的温度下在2500×g下离心10分钟。分别准备好了来自前列腺分泌物、尿液和肝素化血液的上清液以用于流式细胞术分析。此外，通过离心获得的血浆在固相上用ELISA进行测试以及在硝化纤维纸上用针对前列腺小体特异性抗体进行点印迹/免疫印迹(参见下述ELISA和免疫印迹章节)。
用于流式细胞术的样品的准备
将30μL稀释的精液浆或各个上清液(均在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中以1∶25稀释)添加至含有10μL FITC标记的抗体的聚苯乙烯管中。将每种抗体添加至单独的管中，因而随后单独分析每种标志物。
使用下述能够结合各蛋白质的胞外结构域的单克隆抗体(所有抗体得自Serotec(Kidlington，UK))：
FITC-CD10(抗体MCA1556F，0.1mg/mL)
FITC-CD13(抗体MCA1270F，0.1mg/mL)
FITC-CD26(抗体MCA1317F，0.1mg/mL)
FITC-CD59(抗体MCA1054F，0.1mg/mL)
FITC-CD142(抗体MCA2548F，0.1mg/mL)
FITC-CD143(抗体MCA2057F，0.1mg/mL)
样品在20℃下孵育10分钟，之后通过流式细胞术进行分析。不进行洗涤步骤。
流式细胞术
使用Epics Profile XL-MCL流式细胞仪(Coulter Electronics，Hialeah，FL)分析样品。流式细胞仪检测单个细胞或细胞器并将它们以规则的方式在散点图中表示。分析100μL的每个样品以确定前列腺小体浓度和大小。对于CD标志物的分析，使用XL软件(Coulter Electronics)对每个患者进行5,000个前列腺小体的数据分析。基于光散射特性，每个前列腺小体在直角坐标系中表示为一个点。考虑到高纯度的前列腺小体，对门的位置和大小进行设置。使用前向散射和侧向散射，围绕前列腺小体簇和流式计数簇放置判别框(discrimination frame)。
流式细胞仪测定了来自结合前列腺小体的带标记的抗体的荧光信号。流式细胞仪给出了场内阳性染色的前列腺小体的百分比、荧光强度中值和平均值(MFI)、复杂度(直角散射)和前列腺小体群体的中值和平均值大小(前向角散射)。在荧光通道中设置分析标志物以测定MFI(对于FITC，波长＝225nm)。门在研究前设置。
对精液流体的流式细胞术
来自前列腺癌患者的样品相比于对照显示出分歧的蛋白质模式。标志物的灵敏度和特异性用ROC曲线评估。标志物CD13、CD59以及比值CD13/CD10和CD59/CD26分别是对前列腺癌具有最高灵敏度和特异性的标志物。CD13/CD10得到了最高的特异性(91.1％，图1)，而CD59/CD26得到了最高的灵敏度(100％)。检测具有对前列腺小体来说典型的侧向和前向散射的颗粒。
对血清和尿液的流式细胞术
将10μL来自癌症患者和对照的精液浆添加至含有100μL血清或尿液的聚苯乙烯管中并且将样品用PBS以1∶25进行稀释。将30μL稀释的样品和10μL FITC标记的抗体混合并且将混合物在20℃的温度下孵育10分钟，然后使用流式细胞术进行分析。不进行洗涤步骤。
将100μL来自具有高PSA的两位患者的血清也如上述进行分析，但是不添加经纯化的前列腺小体。检测具有对前列腺小体来说典型的侧向和前向散射的颗粒。
流式细胞术结果(血清和尿液)
在血清或尿液中重悬的前列腺小体的CD表达与初始精液浆相比未受干扰，结果未改变。患者样品示出具有代表前列腺小体的前向和侧向散射的细胞器。颗粒为CD13阳性，表示颗粒为前列腺小体(参见表4)。
经纯化的前列腺小体的制备
需要设置纯化的前列腺小体的流式细胞仪判别门。将精液浆样品(12至15个样品)合并然后在4℃下以10000×g超速离心15分钟以除去可能的细胞碎片。之后将上清液再在4℃下以100000×g超速离心2小时以沉淀前列腺小体。将前列腺小体在等渗Tris-HCl缓冲液，pH 7.6中重悬，然后用Sephadex G 200凝胶柱(Amersham Biosciences，Uppsala，Sweden)进一步纯化。在260/280nm下监测洗脱液。收集具有升高的UV吸光度的那些级分，分析CD13(前列腺小体的强标志物酶)。合并具有高CD13活性的紫外吸收级分，然后在4℃下以100000×g超速离心2小时。将代表经纯化的前列腺小体的沉淀在等渗Tris-HCl缓冲液，pH 7.6中重悬并调整至合适的蛋白质浓度。
免疫印迹
用移液器将1μL经纯化的精液前列腺小体加在硝酸纤维素膜上，然后该膜用0.02M Na2HPO4、0.15M NaCl，pH 7.2(PBS)中的1％BSA封闭1小时。3次洗涤后，将膜与100μL生物素化的多克隆鸡抗前列腺小体抗体(用具有1％BSA的PBS以1∶1000稀释)在20℃下孵育1小时。用PBS-T(具有0.05％吐温20的PBS)再洗涤3次，加入100μL用具有1％BSA的PBS以1∶2,000稀释的链霉亲和素-碱性磷酸酶缀合物(ZymedLaboratories，Inc.，CA，USA)并且在20℃下孵育1小时。洗涤三次后，对硝酸纤维素膜进行显色。
免疫印迹结果
抗体识别纤维素膜上的前列腺小体并且显示出紫色的点。这表明前列腺小体可在固相(在本试验中为硝酸纤维素膜)上被捕获，之后被抗体所检测。
ELISA
将微量滴定板(F96，Polysorp，Nunc)用0.1M NaHCO3，PH 9.5中的4μg/mL经纯化的精液前列腺小体在20℃下包被2小时。板用0.02MNa2HPO4，0.15M NaCl，0.05％吐温20，pH 7.2(PBS-T)洗涤3次，然后用0.02M Na2HPO4，0.15M NaCl，pH 7.2的1％BSA封闭2小时。洗涤3次后，将板与100μL多克隆鸡抗前列腺小体抗体(用PBS以1∶1000稀释)一起在20℃下孵育2小时。用PBS-T再洗涤3次后，加入100μL用PBS以1∶2,000稀释的山羊抗鸡IgG辣根过氧化物酶(HRP)-缀合抗体(Zymed Laboratories，Inc.，CA，USA)并在20℃下孵育2小时。将板用250μL PBS-T洗涤3次，并避光与底物(四甲基对苯二氨基联苯，ZymedLaboratories，Inc.)在20℃下孵育15分钟。通过加入50μL 1.8mol/L硫酸来终止反应。用ELISA读取系统(SPECTRA Max 250，MolecularDevices，Sunnyvale，CA，USA)在450nm处测量吸光度。
ELISA结果
抗前列腺小体抗体(Immunsystem AB，Uppsala，Sweden)给出与结合于ELISA板的前列腺小体的阳性反应，吸光值＞1.0。这表明前列腺小体可在固相(在该情况下为硝化纤维素膜)上被捕获，然后被抗体(如在该情况下为酶标记抗体)检测。
实验结果
以下示出对照和患有前列腺癌的患者之间的比较结果(表1、2和3)。另外，表4示出分别对精液流体、血清和尿液的测量。
Figure BDA00002247318400081
Figure BDA00002247318400091
Figure BDA00002247318400101
Figure BDA00002247318400111
表1
Figure BDA00002247318400121
表2
Figure BDA00002247318400122
表3
Figure BDA00002247318400131
表4
ROC分析——根据本发明预测前列腺癌发生率
接受者操作特征(ROC)曲线是判定阈值作用(decision thresholdeffect)的简单但完全的经验性描述，表明在诊断判定中多种类型正确和不正确判定的相对频率的所有可能组合。对于二元分类器系统，ROC曲线是随着判别阈值的变化灵敏度或者真阳性相对于(1-特异性)或者假阳性的图。同样，ROC还可通过对真阳性比例(TPR＝真阳性率)相对于假阳性比例(FPR＝假阳性率)作图来表示。ROC分析提供了在不依赖于成本背景或分类分布(并且在确定其之前)的情况下选择可能的最优模型并摒除次最优模型。ROC分析以直接且自然的方式与诊断判定的成本/收益分析有关。
结果
如表1至3所示，来自前列腺癌患者的前列腺小体在所述表面抗原的表达上有差异。因此，在这些表中列出的标志物抗原可用于区分前列腺癌和对照对象。标志物可单独或组合使用以改进测定的灵敏度和特异性(参见上文“发明内容”)。图1表示以ROC曲线形式的CD13和CD10之间的比，图2表示以ROC曲线形式的CD59和CD10之间的比。与仅使用一种抗原标记物相比增加了灵敏度和特异性。
表4示出当在各种体液(血清、尿液和精液流体)中分析前列腺小体时获得了类似的值。在来自两名前列腺癌患者的血清中前列腺小体的流式细胞术检测表明前列腺小体也存在于血清中。
引用的文献：
WO2007/015174
US 7,083,796
US 6,620,922
US 6,107,090
“Perspectives on the Biological Role of Human Prostasomes”Lena Carlsson，Doctoral Thesis2001和“Flow cytometric technique for determination of prostasomal quantity，size and expression ofCD10，CD13，CD26and CD59in human seminal plasma”，Lena Carlsson et al，internationaljournal of andrology(2005)
“Differentiation of human prostate cancer PC-3 cells induced by inhibitors of inosine
5′-monophosphate dehydrogenase”D.Floryk et al，Cancer Res.2004；64：9049-9056

Claims (10)

1.一种用于对怀疑患有前列腺癌的对象进行诊断或提供预后的方法，其包括体外检测前列腺小体和对至少一种抗原的前列腺小体表达进行定量以及将所定量的表达值与来源于健康对象的相应抗原的参考值进行比较。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少一种抗原选自CD13、CD59、CD10、CD26、CD142、CD143和MHC I。
3.根据权利要求2所述的方法，其中对怀疑患有前列腺癌的对象进行诊断和提供预后是基于与参考值相比在患有前列腺癌的对象中抗原CD10、CD26、CD142和MHC I至少之一的上调。
4.根据权利要求2所述的方法，其中对怀疑患有前列腺癌的对象进行诊断和提供预后是基于与参考值相比在患有前列腺癌的对象中抗原CD13和CD59至少之一的下调。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中计算至少两种所述抗原之间的商并且将所述商与参考商值进行比较。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中能够特异性结合至少一种所述抗原的至少一种抗体用于检测和定量其表达。
7.根据权利要求6所述的方法，其中所述至少一种抗体用可区分的荧光标志物标记。
8.根据权利要求7所述的方法，其中通过流式细胞术检测和定量结合所述至少一种抗原的所述抗体。
9.根据权利要求6所述的方法，其中通过ELISA检测和定量结合所述至少一种抗原的所述抗体。
10.一种用于对怀疑患有前列腺癌的对象进行诊断或提供预的试剂盒，其包含特异性结合选自CD13、CD59、CD10、CD26、CD142、CD143和MHC I的至少一种抗原的至少一种抗体。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104357404A (zh) * 2014-11-10 2015-02-18 昂科生物医学技术(苏州)有限公司 一种杂交瘤细胞及其分泌的单克隆抗体与应用
CN104897900A (zh) * 2014-03-03 2015-09-09 昂科生物医学技术(苏州)有限公司 一种前列腺小体外泄蛋白抗原及其抗体与应用
CN110993095A (zh) * 2019-11-26 2020-04-10 上海市第十人民医院 预测前列腺癌发生和转移发生的装置
CN115184616A (zh) * 2022-06-23 2022-10-14 昂科生物医学技术(苏州)有限公司 前列腺小体外泄蛋白抗原及其抗体在制备良性前列腺增生诊断试剂盒中的应用

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6415829B2 (ja) * 2014-02-28 2018-10-31 キヤノンメディカルシステムズ株式会社 検体に含まれるエキソソームの特性を判定する方法、診断方法および装置
EP3304084B1 (en) 2015-06-08 2022-03-23 Arquer Diagnostics Limited Methods and kits
JP6854246B2 (ja) 2015-06-08 2021-04-07 アーケア ダイアグノスティクス リミテッド 尿サンプルの分析方法
US10617720B2 (en) * 2016-10-20 2020-04-14 Miltenyi Biotech, GmbH Chimeric antigen receptor specific for tumor cells
JP7326764B2 (ja) * 2018-03-09 2023-08-16 東ソー株式会社 腫瘍マーカーならびに腫瘍細胞を夾雑細胞と区別して回収および検出する方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002071065A1 (en) * 2001-02-22 2002-09-12 Lena Carlsson Immunological detection of prostate diseases and prostasome-related conditions
WO2006130689A2 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Regents Of The University Of Minnesota Detecting prostate cancer

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8728744B2 (en) * 2007-10-26 2014-05-20 The Regents Of The University Of California Salivary protein biomarkers for human oral cancer

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2002071065A1 (en) * 2001-02-22 2002-09-12 Lena Carlsson Immunological detection of prostate diseases and prostasome-related conditions
WO2006130689A2 (en) * 2005-06-02 2006-12-07 Regents Of The University Of Minnesota Detecting prostate cancer

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BRADFORD T J ET AL: "Molecular markers of prostate cancer", 《UROLOGIC ONCOLOGY》 *
CARLSSON ET AL: "Flow cytometric technique for determination of prostasomal quantity, size and expression of CD10, CD13, CD26 and CD59 in human seminal plasma", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF ANDROLOGY》 *
LENA CARLSSON ET AL: "Characteristics of Human Prostasomes Isolated From Three Different Sources", 《THE PROSTATE》 *
LI R. ET AL: "Proteomics cataloging analysis of human expressed prostatic secretions reveals rich source of biomarker candidates", 《PROTEOMICS-CLINICAL APPLICATIONS》 *
WILSON M J ET AL: "ELEVATION OF DIPEPTIDYLPEPTIDASE IV ACTIVITIES IN THE PROSTATE PERIPHERAL ZONE AND PROSTATIC SECRETIONS OF MEN WITH PROSTATE CANCER: POSSIBLE PROSTATE CANCER DISEASE MARKER", 《JOURNAL OF UROLOGY》 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104897900A (zh) * 2014-03-03 2015-09-09 昂科生物医学技术(苏州)有限公司 一种前列腺小体外泄蛋白抗原及其抗体与应用
CN104897900B (zh) * 2014-03-03 2018-03-27 昂科生物医学技术(苏州)有限公司 一种前列腺小体外泄蛋白抗原及其抗体与应用
CN104357404A (zh) * 2014-11-10 2015-02-18 昂科生物医学技术(苏州)有限公司 一种杂交瘤细胞及其分泌的单克隆抗体与应用
CN104357404B (zh) * 2014-11-10 2018-09-07 昂科生物医学技术(苏州)有限公司 一种杂交瘤细胞及其分泌的单克隆抗体与应用
CN110993095A (zh) * 2019-11-26 2020-04-10 上海市第十人民医院 预测前列腺癌发生和转移发生的装置
CN110993095B (zh) * 2019-11-26 2024-04-26 上海市第十人民医院 预测前列腺癌发生和转移发生的装置
CN115184616A (zh) * 2022-06-23 2022-10-14 昂科生物医学技术(苏州)有限公司 前列腺小体外泄蛋白抗原及其抗体在制备良性前列腺增生诊断试剂盒中的应用

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