CN102861124B - 一种木香组合药物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供的木香提取芪和人参提取物的组合,其充分转移了木香挥发油的和黄芪、人参的组合作用,在治疗心律失常和胃肠道神经官能症方面具有良好的活性。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药组合药物,更具体的说涉及一种木香组合药物及其应用。
技术背景
木香为行气中药中常用药物之一。《本草纲目》日:“木香是三焦气分之药,能升降诸气。”其性味辛、苦、温,归脾、大肠、胆经,功效行气调中止痛。《日华子本草》日:“治心腹一切气,膀胱冷痛,呕逆反胃,霍乱,泄泻,痢疾,健脾消食,安胎。”临床主要用于脾胃气滞所致的消化不良、腹泻、下痢腹痛及肝胆湿热气滞等证。木香含α、β-木香烃、木香醇、木香酸、樟烯、木香内酯等挥发油及木香碱,能降低肠管紧张性,并可拮抗乙酰胆碱引起的收缩,起到解除痉挛的作用;本药还有兴奋心脏的作用,对伤寒杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌和多种真菌也有一定的抑制效果。在临床实际运用中,木香若与不同的药物配伍使用,往往能起到更为广泛的作用。王轩等2011年6月在中华中医药杂志公开了一种木香和黄芪的组合物对实验性SD大鼠早期桡骨骨折愈合过程中骨痂厚度及BMP-2表达的影响,探讨骨折三期辨证的治疗方法。木香与黄芪配伍能显著提高SD大鼠早期桡骨骨折断端局部BMP-2的表达水平,增加骨痂厚度,就促进SD大鼠骨折愈合过程中BMP-2表达作用而言,理气活血法可能是四肢闭合骨折早期具有治疗作用。专利CN101757278B公开了一种含木香治疗胃肠疾病中药组合物及其制备方法。它是由木香、砂仁或沉香、枳壳或枳实、檀香、大黄、厚朴、麝香、巴豆霜、大枣、川芎等十药味经加工制成。临床上主要治疗急性腹泻、肠易激综合征等疾病。专利CN101757083B本发明涉及含有木香烯内酯的治疗胃肠疾病中药组合物及其制备方法。它是由木香烯内酯,柚皮苷,总檀香醇,大黄酚,人工麝香,川芎嗪,巴豆油和大枣多糖为基础方药加上其他药物制成。临床上主要治疗急性腹泻、肠易激综合征等疾病。
发明内容
研究发现,木香烃内酯和去氢木香内酯是挥发油的主要成分,木香烃内酯和去氢术香内酯具有松弛平滑肌和解痉作用,木香烃内酯具有利胆和抑制溃疡作用,木香烃内酯能抑制由KCI诱导的主动脉收缩等。本发明将木香分别与人参和黄芪配伍。得到两种以木香为骨架药物的药物组合,具体发明内容为:
一种木香组合药物,所述配方包括木香的超临界提取物。
所述配方还包括黄芪的提取物。
所述木香、黄芪原药材重量比为5-20:2-15。
所述木香、黄芪、人参和白术的原药材重量比为1:1。
所述配方还包括人参的提取物。
所述木香、人参原药材重量比为5-20:2-15。
所述木香、人参原药材重量比为1:1。
所述木香的超临界提取物为采用SFE-CO2提取木香药材,得到木香的超临界提取物,其中夹带剂为无水乙醇。
上述任一所述的木香组合药物在制备治疗心律失常病症药物中的应用。
上述任一所述的木香组合药物在制备治疗胃肠道神经官能症药物中的应用。
本发明的有益技术效果是:本发明提供的木香提取芪和人参提取物的组合,其充分转移了木香挥发油的和黄芪、人参的组合作用,在治疗心律失常和胃肠道神经官能症方面具有良好的活性。
具体实施方式
实施例1木香组合药物的制备
称取10.0kg经干燥的粉碎过的木香原药材,分别填加到超临界萃取釜中,按程序升温加压,进行动态萃取,CO2流量为4.6L·h-1,萃取温度55℃,萃取压力25MPa,采用无水乙醇为夹带剂,夹带剂用量为2mL·g-1,定量泵入夹带剂,萃取时间100min;从解析釜收集产品,减压回收有机溶剂,并得到棕黄色油状提取物,作为木香提取物。
分别用50-80%乙醇作为溶媒渗漉黄芪和人参,溶媒用量为药材重量的5-10倍,分别得到黄芪提取物和人参提取物。
将木香提取物、黄芪提取物按原药材重量比为1:3混合得到木香组合药物Ⅰ。
将木香提取物、黄芪提取物按原药材重量比为10:1混合得到木香组合药物Ⅱ。
将木香提取物、黄芪提取物按原药材重量比为1:1混合得到木香组合药物Ⅲ。
将木香提取物、人参提取物按原药材重量比为1:3混合得到木香组合药物Ⅳ。
将木香提取物、人参提取物按原药材重量比为10:1混合得到木香组合药物Ⅴ。
将木香提取物、人参提取物按原药材重量比为1:1混合得到木香组合药物Ⅵ。
实施例2木香组合药物对心动过缓大鼠的活性考察
选用健康成年Wistar大鼠,体重250g-300g,实验前动物经测试确认无异常行为。大鼠在适应性喂养7d后,每日臀部皮下注射氢化可的松,每天25mg/kg,连续注射14d。并在实验第2周时,强迫大鼠每天上、下午各游泳1次,至无力即将下沉时捞出,以诱导劳倦过度,持续1周。观察大鼠一般形态,凡出现活动减少,精神不振,反应迟钝,弓背蜷缩、饮水量减少,体重减轻等肾阳气虚症状者为造模成功。选择造模成功的大鼠620只,随机分为木香组合药物Ⅰ组、木香组合药物Ⅱ、木香组合药物Ⅲ和木香组合药物Ⅳ、木香组合药物Ⅴ和木香组合药物Ⅵ,扶正助脉合剂对照组,模型对照组,每组各12只,再选取12只健康大鼠为空白组,每组雌雄各半,分笼饲养。造模成功后次日开始药物干预。空白对照组和模型组常规喂养,按大鼠体重以20ml/kg剂量以蒸馏水灌胃。扶正助脉方煎剂组的药物浓度分别为20ml/kg,给药组给药量为35g原药材提取物/kg,每组都于每日上午10时灌胃给药一次,连续治疗14d。
各组动物在造模、用药中的一般状态观察;心电图测定;血浆中cAMP与cGMP的含量变化。实验数据采用SPSS14.0统计软件处理,所有数据均采用均数±标准差表示。
空白组动物表现为:毛发顺滑,双目有神,反应、活动灵活敏捷,叫声响亮,正常进食饮水。模型组和各治疗组大鼠在实验第1ld~14d时出现不同程度的精神萎靡,摄食减少,生长迟缓体重减轻,毛发枯燥松弛,肢冷,身体瘦削,喜蜷缩扎堆,呼吸微弱,大便溏泻等肾阳气虚症状,特别是模型对照组更为显著。
给药第14天,给药后1h用乙醚浅麻醉大鼠在其下四肢皮下埋置电极,记录大鼠清醒后标准Ⅱ导联心电图。第15天以盐酸可乐定2mg/kg给各组大鼠皮下注射,并同时灌胃给药,记录灌胃后0.5h、lh、1.5h、2h心电信号,统计分析大鼠心率,心律,房室传导阻滞变化情况。
木香组合药物与水提木香组合药物1组对心动过缓大鼠心率的影响如表1所示,结果表明,木香组合药物Ⅰ组、水提木香组合药物1组、市售归脾丸组、市售人参归脾丸量组与扶正助脉煎剂组都可以提高缓慢性心律失常大鼠心率。
表1各组大鼠心律比较
注:与模型组比较:△P﹤0.05,▲P﹤0.01;与空白组比较:◇P﹤0.05,◆P﹤0.01;
实验结束后,立即断头取血、取出心脏,制备心肌匀浆,按试剂盒规定检测心肌匀浆中cAMP和cGMP含量。
如表2所示,各组相比较,木香组合药物Ⅰ-Ⅵ组、及扶正助脉煎剂组cAMP含量均有提高,cGMP水平都有下降,尤其以木香组合药物Ⅳ组显著。
表2各组大鼠血浆cAMP和cCMP的浓度的比较
注:与模型组比较:△P﹤0.05,▲P﹤0.01;与空白组比较:◇P﹤0.05,◆P﹤0.01;
缓慢性心律失常是临床常见病症,表现为不同程度的心悸气短、胸闷隐痛、头昏乏力、动则加重,严重者出现反复晕厥史,突发抽搐、心前区剧痛、可并发心力衰竭、心源性休克、心脏猝死等。
cAMP与心脏功能正相关,当心脏上的p1受体激动时,细胞内产生大量的cAMP,心率随之增快,房室传导时间缩短,心肌收缩力增加。cAMP促进脂肪分解、糖原分解、心肌收缩,而cGMP恰恰相反。cAMP与cGMP是机体内一对既相互拮抗又相互依存的生物活性物质——第二信使。它们普遍存在于生物细胞和和体液中,调节着机体细胞内新陈代谢和各种生理活动。目前认为它们对心肌细胞、血管平滑肌细胞的功能起着重要的调节作用,其血浆浓度异常变化在心血管疾病发生过程中具有重要作用。因此cAMP与cGMP的平衡,是调节机体的关键性物质,和影响整体性机制细胞功能的中间枢纽。cAMP下降,cGMP升高,是公认的阳虚证的特异性病理变化之一,维持二者的平衡与稳定在心动过缓的治疗中具有重要意义。当M受体激动时,使K+外流增加,抑制腺苷酸环化酶,cGMP的含量增加,促进血小板聚积,使心脏抑制,其含量可间接地反映心房压力的变化,可由此判断心衰程度。方中用太子参等温补肾阳药治疗,并采用分类提取有效部位的不方法对组合物药物中有效成分进行提取,可使cAMP回升而cGMP下降,与模型组比较,剂量组和扶正助脉合剂组cAMP水平均有提高,cGMP水平均有下降,其差异有显著性。与有关报道的结果一致,表明木香组合药物Ⅰ可促进机体脏腑的阴阳气血、虚实正邪逐渐趋向平衡,改善阳虚大鼠紊乱的内环境,促使阳虚大鼠向正常发展。木香组合药物Ⅰ可改善由心肾阳虚引起的心动过缓大鼠心功能和心肌细胞代谢,有利于促进心脏窦房结的营养状况、改善窦房结功能,是改善心功能、治疗心动过缓的有效制剂。
实施例4木香组合药物Ⅰ对心动过速大鼠的活性考察
取健康大鼠60只,雌雄不限,平均体重为(200±10)g。分6组。第一组为模型组;第二组为心律宁片剂对照组,灌胃给予药物心律宁片剂的生理盐水溶液(210mg/10ml)。第三组为木香组合药物Ⅰ组,灌胃给予木香组合药物Ⅰ的生理盐水溶液(生药材,875mg/10ml);第四组为水提木香组合药物1组,灌胃给予水提木香组合药物1组的生理盐水溶液(生药材,1275mg/10ml),第五组为市售人参归脾丸组,灌胃给予市售人参归脾丸的生理盐水溶液(生药材,1275mg/10ml),第六组为市售归脾丸组,灌胃给予市售归脾丸的生理盐水溶液(生药材,1275mg/10ml)。各组均按2ml/只的量给药。给药后,首先将大鼠用乌拉坦(1.2g·kg-1)腹腔麻醉,然后将其固定在手术台上。连接心电示波器,记录Ⅱ导,以观察心电变化(纸速50mm/s)。在尾静脉注射乌头碱(20μg·ml-1)之前,记录正常心电图。各组给药1h后注射乌头碱,观察心电变化情况。实验结果见表3。
表3木香组合药物Ⅰ抗乌头碱诱发室性心动过速的结果
取健康豚鼠60只。雌雄不限,平均体重为(200±10)g。分6组。第一组为模型组;第二组为心律宁片剂对照组,灌胃给予药物心律宁片剂的生理盐水溶液(210mg/lOml),2ml/只。第三组为木香组合药物Ⅰ组,灌胃给予木香组合药物Ⅰ的生理盐水溶液(生药材,875mg/10ml);第四组为水提木香组合药物1组,灌胃给予水提木香组合药物1组的生理盐水溶液(生药材,1275mg/10ml),第五组为市售人参归脾丸组,灌胃给予市售人参归脾丸的生理盐水溶液(生药材,1275mg/10ml),第六组为市售归脾丸组,灌胃给予市售归脾丸的生理盐水溶液(生药材,1275mg/10ml)。3ml/只。给药后,用乌拉坦(1.2g·kg-1)将豚鼠腹腔麻醉,仰位固定在手术台上,将针电极插入四肢皮下,并与心电机相联,记录Ⅱ导以观察心电变化(纸速50mm·s-1)。在股静脉注射西地兰(0.82ml·kg-1)之前,记录正常心电。然后股静脉注射西地兰(0.82ml·kg-1),观察心电变化情况,直至心律失常恢复正常为止;对照组给药lh后注射西地兰(0.82ml·kg),观察心电变化情况。实验结果见表4。
表4归脾方组合药物Ⅰ抗乌头碱诱发室性心动过速的结果
由实验结果可知,木香组合药物Ⅰ对药物诱发的心律失常有较强的抑制作用,在有效剂量时,心电一直保持正常状况无任何变化;心律宁灌胃组偶见室性早搏或二联律,在一段时间以后消失,心律恢复正常。结果也表明,木香组合药物Ⅰ在持续作用时间上优于其他药物。
乌头碱引起心律失常的主要机制是:激活了心肌细胞的钠通道,使钠通道开放,加快心肌细胞Na+内流,促使细胞膜去极化,加快起博点自律性,诱发异位节律点,可形成多源性异位节律,缩短心肌不应期,而导致心律失常。实验结果表明,木香组合药物Ⅰ能够有效地抑制由乌头碱引起的心律失常。
强心苷类药物(如西地兰)中毒时可抑制心肌细胞膜上Na+-K+-ATP酶,从而减少K+向细胞内的主动转运,导致细胞内缺K+,使心肌的最大舒张电位降低,舒张期自动除极速度加快,自律性升高,发生心律失常。采用几种不同的药物诱发不同类型的心律失常可有效地模拟临床症状,反映药物的疗效。结果表明,木香组合药物Ⅰ可以有效地防治心律失常。
实施例5木香组合药物Ⅰ对Beagle犬窦性心律不齐的活性考察
窦性心律不齐Beagle犬的选择标准:选择了4条beagle犬进行研究,雌雄各半,体重10kg左右,月龄6-12个月。Beagle犬经至少5次(隔天)Ⅱ导联心电图(ECG)检查并符合以下条件者:①窦性P波,R-R周期不等,P渡后有ORS,周期差>0.16秒,P-R间期固定而且>O.12秒,与呼吸无关;②10个R-R周期出现3个以上长R-R周期,经一周观察而无改善者,确定为窦性心律不齐。连续5次(隔天1次)做心电图检查,如有一次不符合上述选择标准者则予以排除。心律不齐情况改善,心电图明显改善并符合以下两条为有效:①R-R周期差减小且接近0.16秒,P-R间期固定而且<O.12秒;②心律不齐次数减少:10个R-R周期中出现长R-R周期的次数明显减少。心电图无改善为无效。实验设木香组合药物Ⅰ组(A组)(生药3.75g/kg)和水提木香组合药物1组(B组)(生药3.75g/kg),每天9am和4pm定时给药,先把药物配成一定浓度的混悬液加入1/3饲料中混匀,让犬自行食完,然后再给其余2/3饲料,连续17d。
ECG检查方法:犬取自然站立位,四肢皮下插入针式电极,在食前清醒状态下安静后测量Ⅱ导联心电图。
观察药后1、3、5、7、8、9、l1、13、15、17d和停药后2d的心电图:P-R间期、QRs间期、Q-T间期、P波、Q波、R波、s波、T波、ST段、心率和心律,并与药前进行比较。
表5木香组合药物Ⅰ对心律不齐Beagle犬P-R间期及心率的影响
表6木香组合药物Ⅰ对心律不齐Beagle犬R-R周期差(s)的影响
*下降百分率:药前R-R周期差-药后R-R周期差
由表5可见,P-R间期药前>0.12秒,药后3d起至17d有改善,P-R问期均<0.12秒,且持续到停药后2d。木香组合药物Ⅰ组和水提木香组合药物1组均能改善心律不齐犬的心率,药后9d起药效稳定,且维持一段时间和水平;而心电图P波、Q渡、R波、S波、QRS间期、Q-T间期,无论是木香组合药物Ⅰ组还是水提木香组合药物1组均无明显影响。
由表6可见,给药前,四条犬的R-R周期差为0.48~0.53s,远远大于0.16s,药后1d起,2个剂量组的R-R周期差均开始缩短,从药前的0.48~0.53s降为040s,其降幅为15%~25%;药后5~11d,R-R周期差均明显缩短,降为0.20~0.27秒,降幅为44~62%;在药后13~15d,R-R周期差接近正常(接近0.16s,木香组合药物Ⅰ组在药后13d为0.16s;水提木香组合药物1组在药后15d为0.17s。停药2d后两组分别为0.20s和0.08s,其降幅分别为62%和83%。
表7木香组合药物Ⅰ对心律不齐Beagle犬心律发生频率(长R-R周期/10个R-R周期)的影响
由表7可见,给药前,四条犬心律不齐的发生频率为10个R-R周期中,出现4个长R-R周期。药后3-5d起木香组合药物Ⅰ组和水提木香组合药物1组均开始减少,为2-3.5个;药后7-13d明显减少,为1.5-2.5个;药后15-17d减为1-2个,停药2d减至1个,说明木香组合药物Ⅰ组和水提木香组合药物1组能明显减少心律不齐的发生频率,且停药后能维持一定时间。
实验结果表明,木香组合药物Ⅰ组和水提木香组合药物1组能明显改善心律不齐犬的心率,减少心律不齐的发生频率,对心律不齐有很好的治疗作用。选择窦性心律不齐Beagle犬作为研究对象,由于动物温顺,心电图检查方便等优点,其对实验疗效的观察结果更接近临床。在以Bealge犬冠状动脉结扎诱发心律失常的实验中,同样观察到木香组合药物Ⅰ对心律失常有很好的防治作用,因此用心律不齐犬与药物或手术造成的动物病理模型的结果一样,对抗心律失常药物的评价作用同样客观和准确.且易于评价疗效。
实施例6木香组合药物Ⅰ对大鼠胃肠道功能紊乱的活性考察
胃肠道神经官能症又称为胃肠道功能紊乱,胃肠道功能紊乱症临床主要表现为腹泻、便秘、腹痛和腹泻便秘交替;并伴有纳少、倦怠、消瘦及烦躁等症状。利血平属于肾上腺素神经阻滞药,耗竭中枢及外周的儿茶酚胺递质,使交感神经系统功能低下,副交感神经系统功能亢进,导致植物神经系统功能失调,进而促使胃肠道功能紊乱,一定剂量的利血平腹腔注射能使大鼠出现临床胃肠道功能紊乱症的表现。
胃动素(MTL)是一种重要的脑肠肽激素,主要分布于脑和空肠,具有调节胃动力,促进胃排空的作用。MTL不足会导致胃肠平滑肌松弛,胃张力及蠕动减弱,胃排空时间延长,液潴留增加,饥饿时收缩消失,小肠运动减弱,肠对木糖和氨基酸的吸收障碍,胰腺外分泌功能以及胆囊浓缩及收缩功能抑制等症状。研究证明,动态观察胃肠道功能紊乱模型大鼠MTL的变化规律,发现在造模过程的早期(小于6d)表现为水泻,其MTL含量较正常对照组明显增加,而晚期腹泻症状消失,粪便粘滞时,其含量则明显下降,说明胃肠道功能紊乱与MTL含量变化密切相关。
健康雄性大鼠按设计要求随机分成以下5组,每组20只:正常对照组:腹腔注射生理盐水5ml/(kg·d),同时灌服蒸馏水5ml/(kg·d);胃肠道功能紊乱模型组:腹腔注射利血平0.5mg/(kg·d),同时灌服蒸馏水5ml/(kg·d);木香组合药物Ⅰ组:腹腔注射利血平0.5mg/(kg·d),同时灌服含有木香组合药物Ⅰ的生理盐水(生药量2.5g,下同)/(kg·d):水提木香组合药物1组:腹腔注射利血平0.5mg/(kg·d),同时灌服含有水提木香组合药物1的生理盐水;市售归脾丸组:腹腔注射利血平0.5mg/(kg·d),同时灌服含有市售归脾丸组的生理盐水;市售人参归脾丸量组:腹腔注射利血平0.5mg/(kg·d),同时灌服含有市售人参归脾丸量组的生理盐水,连续给药14d。6d时每组各取一半动物实验检测,14d时再取另一半动物实验检测。给药期间每日观察、记录大鼠的摄食量、体重和粪便情况。
检测指标及方法为:各组大鼠实验检测前禁食18h,①血浆及窄肠组织中胃动素(MTL)含量检测:按MTL放射免疫试剂盒要求,各组大鼠眼眶取血2ml于30μL抑肽酶(,30ml10%EDTA于管中,4℃离心,-70℃储存备测;脱颈椎处死大鼠后,立即取空肠组织匀浆,3500r/min离心,吸取上清,-70℃储存备测;测定方法按说明书进行。②局部肠组织病理检查:每组随机选取3只大鼠,肉眼观察胃肠道变化,留取胃肠组织做病理检查,以排除肠黏膜炎性病变。
实验结果采用t检验,用表示。具体结果如表8所示。
表8大鼠血浆及空肠组织中MTL的动态量动态变化
注:与模型组比,*P﹤0.05,**P﹤0.01;
模型组大鼠在注射利血平后24h内出现粪便不成形,并陆续出现不同程度的腹泻、肛周污秽,随之出现食欲下降,6d时便溏尤甚,9d时便溏逐渐停止,粪便粘滞不爽,甚至出现便秘、厌食,消瘦日见加重。木香组合药物I组个别大鼠、水提木香组合药物1组少数大鼠、市售归脾丸组和市售人参归脾丸多数大鼠出现上述症状,且所述四组表现程度较模型组大鼠轻,正常对照组大鼠健康如初,未见任何异常。各组大鼠胃肠道黏膜肉眼观察未发现异常,病理检查也未见有明显的炎性病变。综上所述,木香组合药物能调节实验性胃肠道功能紊乱大鼠的胃肠激素,显著改善其胃肠功能紊乱症状,是该方治疗此症的作用机理之一,至于该方调节胃肠激素的途径,尚需作进一步探讨。
Claims (4)
1.一种木香组合药物,其特征在于:所述为木香超临界提取物以及黄芪提取物的混合物;
所述木香超临界提取物为采用SFE-CO2提取木香药材,得到木香的超临界提取物,其中夹带剂为无水乙醇;
所述黄芪提取物为用药材重量的5-10倍的50-80%乙醇作为溶媒渗漉黄芪,得到黄芪提取物;
所述木香、黄芪原药材重量比为5-20:2-15。
2.根据权利要求1所述的木香组合药物,其特征在于:所述木香、黄芪的原药材重量比为1:1。
3.权利要求1-2任一所述的木香组合药物在制备治疗心律失常病症药物中的应用。
4.权利要求1-2任一所述的木香组合药物在制备治疗胃肠道神经官能症药物中的应用。
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2012
- 2012-10-29 CN CN201210418034.3A patent/CN102861124B/zh active Active
Patent Citations (3)
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Also Published As
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