CN102846593B

CN102846593B - 一种含有莪术二酮的药物组合物

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Publication number: CN102846593B
Application number: CN201210347687.7A
Authority: CN
Inventors: 陈容; 徐扬; 冯仲异; 史朝辉
Original assignee: Bikai Pharmaceutical Industry Co Ltd Hainan
Current assignee: Hainan Huiyuantang Pharmaceutical Co., Ltd.
Priority date: 2012-09-19
Filing date: 2012-09-19
Publication date: 2014-03-05
Anticipated expiration: 2032-09-19
Also published as: CN102846593A

Abstract

本发明属于医药技术领域，本发明提供了一种含有莪术二酮的药物组合物，该药物组合物含有吉马酮、呋喃二烯、莪术二酮、β-榄香烯、莪术醇、莪术烯，冰片的药物组合物。该药物组合物成分明确，质量可控；该药物组合物控制莪术烯和莪术醇的重量份，减少药物的刺激性；本发明所述的药物组合物可以用于制备栓剂，软膏剂、胶囊剂、泡腾片、凝胶剂、洗剂、膜剂或泡沫剂；本发明所述的药物组合物对HR-HPV和/或LR-HPV、宫颈癌等疾病具有很好的治疗作用，适于临床广泛应用。

Description

一种含有莪术二酮的药物组合物

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种含有吉马酮、呋喃二烯、莪术二酮、β-榄香烯、莪术醇、莪术烯、冰片的药物组合物。

背景技术

从中药莪术中提取的莪术油是我国首先应用于临床上治疗子宫颈癌的药物，已收载于中国药典中。莪术油的主要化学成分是倍半萜类；临床实践证明，治疗子宫颈癌总有效率为64.4％；对癌组织有破坏作用，对正常组织无明显影响。莪术油不仅在体外试验中对小鼠艾氏腹水癌细胞有直接地抑杀作用；而且用莪术出了力的艾氏腹水癌细胞能成功地使小白鼠获得明显的主动免疫。病理形态学的初步观察提示，这种获得性免疫与淋巴样组织的增生有密切的关系。莪术油中的抗癌有效成分是倍半萜类化合物莪术二酮和莪术醇等。当莪术二酮和莪术醇的剂量为75mg/kg时，对小白鼠肉瘤S37、宫颈癌U14有较高的抑制率，肿瘤明显缩小者，其肿瘤周围纤维明显增多，内有一层淋巴细胞包围着肿瘤细胞。这可能是在治疗过程中，动物机体产生的免疫反应的结果。莪术二酮和莪术醇的半数致死量(LD₅₀)分别为414mg/kg和250mg/kg。由此可见，莪术二酮和莪术醇是具有免疫功能的抗肿瘤药物。

莪术二酮(英文名Curdione)，分子式为C₁₅H₂₄O₂，分子量为236.35，结构式如下：

莪术二酮。

莪术二酮的半数致死量明显低于莪术醇，而且莪术醇易升华，因此含有莪术醇的制剂的质量不稳定，从而影响其疗效。

发明内容

为解决上述现有技术中所存在的问题，本发明提供了一种药物组合物及其制剂。

本发明的目的是提供一种药物组合物，该组合物对HR-HPV(高危型人乳头瘤病毒)和/或LR-HPV(低危型人乳头瘤病毒感染)感染有效。

本发明的目的是提供一种药物组合物，该组合物对阴道炎有效。

本发明的目的是提供一种药物组合物，该药物组合物中控制莪术烯和莪术醇的用量。

本发明的目的是提供一种含有该药物组合物的制剂。

本发明的目的是提供一种含有该药物组合物的制剂，所得制剂的刺激性较小。

本发明的目的是提供一种含有该药物组合物的制剂在抗HPV病毒中的应用。

本发明的目的是提供一种含有该药物组合物的制剂在治疗阴道炎中的应用。

具体而言，本发明提供了：

一种药物组合物，其特征药物组合物包含吉马酮、呋喃二烯、莪术二酮、β- 榄香烯、莪术醇、莪术烯、冰片。

上述所述的药物组合物，包含以下重量份的成分：

吉马酮 10-16重量份；

呋喃二烯 10-40重量份；

莪术二酮 5-25重量份；

β-榄香烯 4-11重量份；

莪术醇 1-3重量份；

莪术烯大于0重量份-小于0.1重量份；

冰片 30-90重量份。

上述所述的冰片选自天然冰片和/或合成冰片。

上述所述的药物组合物制备成阴道给药制剂或直肠给药制剂。

所述制剂包括栓剂，软膏剂、胶囊剂、泡腾片、凝胶剂、洗剂、膜剂或泡沫剂。

上述所述的药物组合物在制备预防和/或治疗人乳头瘤病毒感染的药物中的应用。

其中人乳头瘤病毒感染包含高危型人乳头瘤病毒感染和/或低危型人乳头瘤病毒感染。

上述所述的药物组合物在制备预防和/或治疗阴道炎、宫颈糜烂、宫颈癌的药物中的应用。

本发明与现有技术相比具有以下优点和积极效果：

1、本方明所述的药物组合物成分明确，质量可控；

2、本发明所述的药物组合物不受原料产地的限制，适合工业大生产；

3、本发明所述的药物组合物对HR-HPV和/或LR-HPV、宫颈疾病等均有很好的治疗作用，适于临床广泛应用。

药理试验例

以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。

吉马酮、呋喃二烯、莪术二酮、β-榄香烯、莪术醇、莪术烯购自上海顺勃生物有限公司。

冰片购自天津利朗化工科技有限公司。

试验例1：抗小鼠宫颈癌实验

实验材料

动物：

BALB/C纯系雌性小鼠，体重20g±2g，购于中国科学院上海实验动物中心，饲养于浙江中医学院实验动物中心。饲养期间给予小鼠颗粒饲料(浙江中医学院实验动物中心提供)及自由饮水。

试验药物：

药物1组：莪术油88mg和冰片75mg。

药物2组：吉马酮11mg、呋喃二烯38.4mg、莪术二酮20mg、β-榄香烯9mg、莪术醇1.5mg，莪术烯0.09mg，冰片75mg。

药物3组：吉马酮11mg、呋喃二烯38.4mg、莪术二酮20mg、β-榄香烯9mg、莪术醇3mg，莪术烯0.09mg，冰片75mg。

药物4组：吉马酮11mg、呋喃二烯38.4mg、莪术二酮20mg、β-榄香烯9mg、莪术醇4mg，莪术烯0.09mg，冰片75mg。

试剂：台盼蓝(tyrpan blue)，Sigma公司生产。

瘤株

小鼠宫颈癌U₁₄瘤种，由中国医学科学院北京药物研究所提供。

试验方法：

1、瘤细胞悬液的制备

取腹腔接种U₁₄7d的种鼠，无菌条件下抽吸腹水液，0.2％台盼蓝染色确定活细胞在95％以上，然后用生理盐水稀释成不同浓度的细胞悬液。

2、对小鼠实体型宫颈癌的抑制作用

将0.2ml(浓度为1×10⁷/ml)U₁₄细胞悬液注射于小鼠右腋窝皮下后24h随机分为5组：生理盐水组(简称NS组)、药物1组、药物2组、药物3组和药物4组，每组10只。生理盐水组灌服等量的生理盐水，药物1组、药物2组、药物3组和药物4组以每日90mg/kg剂量腹腔注射药物。连续给药10d，于第11d颈椎脱臼处死全部动物，剥取瘤块、称重，计算抑瘤率。

3、对荷腹水型宫颈癌小鼠存活期的影响

将0.2ml(浓度为5×10⁶/ml)U₁₄细胞悬液注射于小鼠腹腔后24h，随机分为5组，分组方法同上。生理盐水组和药物组给药方法及给药量同上。连续给药8d后停药，于第9d开始以每日上午8时为准，记录小鼠的存活天数，计算生命延长率。

统计学处理

计量资料数据处理用均数±标准差(

)表示。计量资料多组间均数

比较用F检验，其中两两比较用q检验。

结果

1、对小鼠实体型宫颈癌的抑制作用

各组给药10d后观察，本发明药物对小鼠U14宫颈癌均有明显抑制作用。

表1对小鼠实体型宫颈癌的抑制作用(

)

组别	例数	瘤重(g)
			NS组	10	2.52g±0.47g
药物1组	10	1.88g±0.61g**
			药物2组	10	1.46g±0.73g**#
药物3组	10	1.53g±0.16g**#
			药物4组	10	1.86g±0.57g**

注：与NS组比较**P＜0.01，与药物1组比较#P＜0.05

2、荷腹水型宫颈癌小鼠存活期的影响

结果发现生理盐水组、药物1～4组小鼠的平均存活天数分别为14.4d±2.07d、18.6d±4.40d、22.4d±3.842d、20.2d±3.88d、18.7d±2.80d。药物1～4组与NS组比较有非常显著差异(P＜0.01)，药物2、3组与药物1组组比较，差异显著(P＜0.05)，结果见表2。

表2对荷腹水型宫颈癌小鼠存活期的影(

)

组别	例数	存活期(d)
			NS组	10	14.4±2.07
药物1组	10	18.6±4.40**
			药物2组	10	22.4±3.84**#
药物3组	10	20.2±3.88**#
			药物4组	10	19.7±2.80**

注：与NS组比较**P＜0.01，与药物1组比较#P＜0.05

结论

实验结果表明，药物2、3组的抗肿瘤作用与药物1组相比在瘤重、存活期上均存在显著差异。

试验例2：对人宫颈癌细胞Caski侵袭转移的影响

材料

细胞系：人宫颈癌细胞Caski，小鼠成纤维细胞NIH3T3，均由本室提供。

RPMI-1640干粉培养基：美国Gibco公司。

新生牛血清：TBD公司。

重组人工基底膜Matrigel：美国BD公司。

Transwell Chamber(8μm孔径)：美国Costar公司。

四甲基偶氮唑盐(MTT)：美国Sigma公司。

MMP-2鼠抗人单克隆抗体、MT1-MMP鼠抗人单克隆抗体、NF-κB鼠抗人单克隆抗体以及β-action鼠抗人单克隆抗体、辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG：Santa Cruz公司。

RIPA细胞裂解液：上海申能博彩生物科技有限公司。

BeyoECL，western荧光检测试剂：碧云天生物技术研究所。

试验药物：

药物1组：保妇康栓，海南碧凯药业有限公司生产，每粒重1.74g，其中含莪术油88mg，冰片75mg，其余成分为基质；将保妇康栓溶于44mlRPMI-1640培养液中，其浓度为3.70×10³mg/l(活性成分)，待溶液澄清后，用孔径为0.22μm的滤器过滤除菌，分装后4℃避光保存备用。

药物2组：取实施例1所得栓剂(含莪术烯0.09mg/粒，莪术醇1.5mg/粒)；将栓剂溶于44mlRPMI-1640培养液中，其浓度为3.70×10³mg/l(活性成分)，待溶液澄清后，用孔径为0.22μm的滤器过滤除菌，分装后4℃避光保存备用。

药物3组：调整实施例1所述的处方中莪术醇的用量为3g，按实施例1所述方法制备的栓剂(含莪术烯0.09mg/粒，莪术醇3mg/粒)；将栓剂溶于44mlRPMI-1640培养液中，其浓度为3.70×10³mg/l(活性成分)，待溶液澄清后，用孔径为0.22μm的滤器过滤除菌，分装后4℃避光保存备用。

药物4组：调整实施例1所述的处方中莪术醇的用量为4g，按实施例1所述方法制备的栓剂(含莪术烯0.09mg/粒，莪术醇4mg/粒)；将栓剂溶于44mlRPMI-1640培养液中，其浓度为3.70×10³mg/l(活性成分)，待溶液澄清后，用孔径为0.22μm的滤器过滤除菌，分装后4℃避光保存备用。

方法

1、细胞培养：将人宫颈癌细胞Caski及小鼠成纤维细胞NIH3T3常规复苏，接种于含100ml/l新生牛血清，10×10⁴U/l青霉素和100mg/l链霉素的RPMI-1640培养液中，置于37℃，体积分数5％CO₂及饱和湿度的孵箱中培养。

2、MTT法测定细胞增殖取对数生长期的Caski细胞，调整细胞浓度为4.5×10⁴/ml。取4块96孔培养板每孔接种细胞悬液200μl，设未加药细胞组、药物组(于细胞80％处于融合状态后加药)，每组设5个平行孔。置37℃、体积分数5％CO₂饱和湿度孵箱内培养。分别培养24、48和72h后弃上清，每孔加入MTT 20ml(5mg/ml)及无血清RPMI-1640 200μl继续培养4h，取出后2000r/min(r＝15cm)离心10min，弃上清，每孔加200μlDMSO震荡10min，用酶标仪测定波长570nm的吸光值(A)。实验重复3次，取平均值。计算药物在不同浓度、不同作用时间对MDA-MB-231细胞的抑制率。

3、侵袭实验常规培养NIH 3T3细胞，当细胞生长达80％融合状态时用生理盐水洗3次，然后加无血清RPMI-1640液继续培养24h后收集上清液，离心(2000r/min×5min，r＝15cm)，-20℃保存备用。将Matrigel按40μl/孔均匀的铺在Transwell Chamber膜上。取对照组和实验组细胞(加药物处理72h)，消化离心后调整细胞密度为4×10⁵个/ml，分别取0.2ml接种到成胶的Transwell Chamber，并将Transwell Chamber置于24孔板内，同时在Transwell小室下层加入.NIH 3T3细胞上清液(趋化因子)，每孔0.6ml，培养48h后取出Transwell Chamber，用棉签头檫掉Matrigel，PBS液洗3次，950ml/l乙醇固定。常规HE染色，揭下Transwell Chamber膜反贴在载玻片上。结果判定：400倍光镜下，计数每膜5个随机不同视野的穿膜细胞数，取均值，每组平行设3个小室。实验重复3次。

4、迁移实验Transwell小室表面不铺Matrigel，其余步骤与侵袭实验相同。

5、统计学方法数据以x±s表示，采用t检验和方差分析，以P＜0.05表示差异有统计学意义。

结果

1、组合物对Caski细胞侵袭迁移能力的影响

表3组合物对Caski细胞侵袭与迁移能力的影响(n＝9，

％)

组别	侵袭细胞计数	迁移细胞计数
			对照组	106±4	139±7
药物1组	75±3**	93±7**
			药物2组	54±6**#	73±5**#
药物3组	59±2**#	76±4**#
			药物4组	73±6**	90±5**

注：与对照组比较**P＜0.01，与药物1组比较#P＜0.05

由表3可见，组合物处理后，Caski细胞的侵袭迁移能力均下降。侵袭实验中，组合物处理后Caski细胞侵袭穿过Matrigel成胶Transwell Chamber重组人工基底膜的侵袭细胞数减少，与对照组侵袭细胞数比较，统计学意义差异显著(P＜0.01)；药物2、3组与药物1组侵袭细胞数比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。迁移实验中，组合物处理后Caski细胞穿过未经Matrigel成胶的人工基底膜的迁移细胞数减少，与对照组迁移细胞数比较，差异有统计学意义(P＜0.01)；药物2、3组与药物1组迁移细胞数比较，差异有统计学意义(P＜0.05)。

试验例3：对人宫颈癌Hela细胞生长和凋亡的影响

样品及主要试剂

药物4组：调整实施例1所述的处方中莪术醇的用量为4g，按实施例1所述方法制备的栓剂(含莪术烯0.09mg/粒，莪术醇4mg/粒)；将栓剂溶于44ml RPMI-1640培养液中，其浓度为3.70×10³mg/l(活性成分)，待溶液澄清后，用孔径为0.22μm的滤器过滤除菌，分装后4℃避光保存备用。

MTT，碘化丙锭(PI)为Sigma公司产品。

RPMll640购自Gibco公司，其它试剂为进口、国产分析纯；FITC标记鼠IgG₁、鼠抗人Fas单抗由美国Caltag实验室提供。

细胞株与细胞培养

宫颈癌Hela细胞由暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室提供。液氮冻存的人宫颈癌Hela细胞经复苏后培养于含有10％胎牛血清(杭州四季青公司)、青霉素、链霉素各100U/ml的RPMI-1640培养液中，在37℃、5％CO₂和95％湿度的培养箱中培养，细胞两天换液，85％汇片时传代，取对数生长期细胞进行实验。

方法

1、MTT比色分析法测定细胞抑制率

Hela细胞以完全培养液调为5×10⁴/ml，接种于96孔培养板中150μl/孔，然后分别加入50μl药物组药物，用RPMI-1640培养液作对照，总体积200μl/孔，每组均设3个平行孔。置于37℃50ml/lCO₂条件下培养48h，轻轻吸去上清液，加入100/ml不含血清的RPMI-1640培养液，同时每孔加入5mg/ml的MTT10μl，继续培养4h。培养结束后，加入150μlDMSO每孔，在震荡器上震荡10min，使紫色结晶完全溶解。用酶联免疫检测仪，以570nm波长测定光密度值。

2、流式细胞仪法测定Hela细胞凋亡和细胞Fas基因表达

对数生长期的Hela细胞，胰酶消化后，以5×10⁴/ml的密度传代、接种于6孔板，加入3ml RPMI-1640培养基培养至贴壁后，分别加入1ml药物组的药物，以加入等体积完全培养液的Hela细胞作为对照组；继续培养48h后，胰酶消化成单细胞悬液，冰PBS洗涤2次，800r/min离心5min，弃上清，分别缓慢加入预冷的70％乙醇或PBS，4℃过夜。取细胞悬液，PBS洗涤离心及后续处理后流式细胞仪测定细胞凋亡和Fas蛋白。

3、统计学处理

实验所得数据均以均数表示，应用SPSS 13.0统计分析软件包进行统计处理，采用单因素方差分析及均数间多重比较。

实验结果

1、对Hela细胞生长的影响

表4各组处理方法对不同细胞增殖的抑制作用(n＝9，

)

组别	Hela的A₅₇₀	抑制率
			对照组	0.4566±0.0145	-
药物1组	0.3087±0.0208**	32.39
			药物2组	0.1161±0.0018**#	74.57
药物3组	0.1603±0.0102**#	64.89
			药物4组	0.2807±0.0038**	38.52

注：与对照组相比**P＜0.01；与药物1组相比#P＜0.05

2、各药物组诱导Hela细胞凋亡

表5各药物组对Hela细胞凋亡的影响(n＝9，

)

组别	凋亡细胞数	细胞总数	凋亡率(％)
				对照组	258±2	12000	2.2
药物1组	426±1**	12000	3.6
				药物2组	2388±3**#	12000	19.9
药物3组	1673±4**#	12000	14.0
				药物4组	854±2**	12000	7.1

注：与对照组相比**P＜0.01；与药物1组相比#P＜0.05

3、各药物组诱导Hela细胞Fas表达

表6各药物组引起Hela细胞fas蛋白的表达

注：与对照组相比**P＜0.01；与药物1组相比#P＜0.05

试验例4：体外抗菌试验

采用微量连续二倍稀释法测定本发明实施例1药物组合物对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、表皮葡萄球菌、普通变形杆菌、粪链球菌、淋病奈瑟氏菌的标注菌株和大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、表皮葡萄球菌、普通变形杆菌、粪链球菌、淋病奈瑟氏菌临床分离株的最小抑菌浓度(MIC)，采用平板转染法测定本发明药物组合物对上述细菌的最小杀菌浓度(MBC)。将大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、表皮葡萄球菌、普通变形杆菌、阴道加特纳菌接种于MH肉汤，置普通培养箱37℃培养24h；粪链球菌接种于TPY肉汤(厌氧菌营养肉汤)，置厌氧培养箱37℃培养48h；淋病奈瑟氏菌接种于汗5％小牛血清的MH肉汤，置5％CO₂培养性37℃培养48h。

表7对标准菌株的MIC和MBC

由上表可知，本发明药物组合物对试验所选用的大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、绿脓假单胞菌、表皮葡萄球菌、普通变形杆菌、粪链球菌、淋病奈瑟氏菌的标注菌株和阴道加特纳菌临床分离参考株均有较明显的抑制和灭活作用，其MBC为MIC的2～4倍。

表8对405株临床分离菌株的MIC、MIC₅₀、MIC₉₉和MBC

(mg组合物/ml)

菌株	株数	MIC	MIC₅₀	MIC₉₉	MBC
						金黄色葡萄球菌	100	0.35～1.40	1.0134	1.2434	0.70～6.00
大肠杆菌	120	6.25～50	18.1637	22.4375	25～100
						表皮葡萄球菌	50	0.38～3.13	0.6487	1.4368	1.56～6.25
变形杆菌	100	12.5～50	25.468	33.0072	25～100
						淋病奈瑟氏菌	24	0.165～0.35	0.2074	0.2433	0.165～0.78
阴道加特纳菌	11	0.36～1.56	0.6534	0.9124	0.75～1.56

由上表可见，本发明药物组合物对试验所选用的405株临床分离菌株均有一定的抑制和灭活作用，其MBC为MIC的2～4倍。

试验例5：体外抗真菌试验

采用微量连续二倍稀释法测定本发明实施例1药物组合物对念珠菌的MIC，采用平板转染法测定本发明药物组合物对念珠菌的MBC。采用微量连续二倍稀释法测定本发明药物组合物对霉菌的MIC，采用平板转染法测定本发明药物组合物对霉菌的MBC。

表9对试验菌株的MIC和MBC

由上表可知，本发明药物组合物对试验所选用的白色念珠菌、近平滑念珠菌、季也蒙念珠菌、副克柔念珠菌、热带念珠菌、青霉菌、黄曲霉菌的标注菌株或临床分离参考株均有较明显的抑制和灭活作用，其MBC为MIC的2～4倍。

表10对白色念珠菌临床分离菌株的MIC、MIC₅₀、MIC₉₉和MBC

(mg组合物/ml)

株数	MIC	MIC₅₀	MIC₉₉	MBC
					50	1.35～6.01	0.0931	0.1129	6.04～10.5

由上表可见，本发明药物组合物对变色试验所选用的50株白色念珠菌临床分离菌株有一定的抑制和灭活作用。

试验例6：抗阴道毛滴虫试验

采用体外培养法测定本发明1实施例药物组合物对阴道毛滴虫的最小杀虫浓度。阴道毛滴虫在改良的CPLM培养基37℃培养48h，滴虫运动活泼，生长良好，自然死亡率＜2％，试验用阴道毛滴虫液含虫浓度为1.8～2.5×10³/ml。

结果表明，本发明药物组合物体外对杀灭阴道毛滴虫有效。

制备实施例

实施例1

处方：吉马酮19g、呋喃二烯38.4g、莪术二酮9g、β-榄香烯9g、莪术醇1.5g，莪术烯0.09g，冰片75g。

剂型：栓剂。

制备方法：将处方量的吉马酮、呋喃二烯、莪术二酮、β-榄香烯、莪术醇、莪术烯与67g聚山梨酯80混匀，冰片75g用适量的乙醇溶解，与上述溶液混匀。

处方量的聚氧乙烯硬脂酸酯1523g，置水浴上加热使熔化，加入上述药液，搅匀，灌装，制成栓剂1000只，每只1.74g。

实施例2～8

按如下处方制备栓剂，制备方法同实施例1。

实施例	2	3	4	5	6	7	8
								吉马酮	15.5	16	19	20	21	23	24
呋喃二烯	37	33	30	28	25	15	11
								莪术二酮	6	8	9	15	18	20	23
β-榄香烯	10.5	10	9.5	8	6.5	5	4.5
								莪术醇	1.1	1.3	1.8	2.1	2.5	2.8	3
莪术烯	0.05	0.09	0.02	0.03	0.04	0.05	0.045
								冰片	30	40	50	60	70	80	90
聚山梨酯80	53	57	63	69	73	79	84
								聚氧乙烯硬脂酸酯	1561	1572	1464	1570	1582	1541	1546

实施例9

处方：吉马酮16.5g、呋喃二烯32g、莪术二酮21g、β-榄香烯8.5g，莪术醇2.9g，冰片35g。

剂型：泡腾片。

制备方法：

1)取β-环糊精，按25ml/g加水适量，搅拌使其全溶，必要时加热，得β-环糊精溶液；吉马酮、呋喃二烯、莪术二酮、β-榄香烯、莪术醇，冰片35g，用无水乙醇稀释后缓慢加入β-环糊精溶液中，继续搅拌至成均相，冰箱中放置过夜，抽滤，用少量石油醚洗涤3次，冷冻，的得白色粉末。

2)将上述白色粉末与35g冰片、枸橼酸150g和乳糖160g混匀；另取碳酸氢钠120g与乳糖160g混匀，分别用5％PVP无水乙醇溶液作为粘合剂制粒，50℃干燥，整粒，加入PEG6000适量，混匀，压片。

实施例10

处方：吉马酮17.5g、呋喃二烯31g、莪术二酮19g、β-榄香烯5.5g、莪术醇1.5g、莪术烯0.035g，冰片45g。

剂型：胶囊剂

制备方法：

1)囊皮制备：按明胶∶甘油∶水＝10∶3.7∶9.5的重量份混合物，取明胶，加入适量水使明胶吸水膨胀。另取甘油及余下的水置煮胶锅中加热至70℃2，混合均匀，加入膨胀的明胶，搅拌，熔融，保温，真空抽气除去气泡，虑过，加入约3％重量份的聚乙二醇400，混匀，然后保温50℃，备用。

2)内容物制备：取300g聚乙二醇400加热至80℃，加入冰片45g，待完全溶解后加入150g聚乙二醇4000搅拌至溶解，温度降至40～50℃时，加入处方量的吉马酮、呋喃二烯、莪术二酮、β-榄香烯、莪术醇、莪术烯，搅拌均匀，降温至25～30℃，过胶体磨磨2遍，每次5min，制成内容物，保温条件下，制成1000粒软胶囊。

实施例11

处方：吉马酮18.5g、呋喃二烯29g、莪术二酮21g、β-榄香烯4.5g、莪术醇2.7g、莪术烯0.011g，冰片55g。

剂型：膜剂。

制备方法：取聚乙烯醇800g于800ml水中浸泡24小时，在80℃温度下水浴中溶解；将吉马酮、呋喃二烯、莪术二酮、β-榄香烯、莪术醇、莪术烯，冰片55g，溶解于1000ml乙醇(W/V＝75％)中，将上述聚乙烯醇溶液混合，搅拌均匀；在上述混合液中加入抗氧化剂焦亚硫酸钠10g、保湿剂甘油80g、增塑剂三醋酸甘油80g，搅拌均匀；按常规方法脱出气泡，涂覆成膜后，干燥，分切，即得1000张膜剂产品。

实施例12

处方：吉马酮19.5g、呋喃二烯26g、莪术二酮23g、β-榄香烯4.2g，莪术醇1.2g、莪术烯0.01g，冰片65g。

剂型：凝胶剂

制备方法：取卡波姆20g溶胀于丙二醇760g中，静置至溶胀完全后调节pH值到4～7，并加入丙二醇600g制成基质备用；将吉马酮、呋喃二烯、莪术二酮、β-榄香烯、莪术醇、莪术烯，冰片65g溶于120g聚乙二醇400中得混合溶液，搅匀，将混合液与上述基质混合均匀，分装，即得。

实施例13

处方：吉马酮10.5g、呋喃二烯23g、莪术二酮24.5g、β-榄香烯4.6g，莪术醇1.6g、莪术烯0.041g，冰片70g。

剂型：洗剂

制备方法：取冰片70g，加适量乙醇使其溶解；将吉马酮、呋喃二烯、莪术二酮、β-榄香烯、莪术醇、莪术烯与氮酮20g，2500g吐温80混合均匀，加入乙醇至2800g，搅拌均匀后加入注射用水至10kg，搅匀，分装，得浓溶液，使用时加水稀释10倍使用。

实施例14

处方：吉马酮12.5g、呋喃二烯17g、莪术二酮18.5g、β-榄香烯6.3g，莪术醇2.7g、莪术烯0.016g，冰片80g。

剂型：软膏剂

制备方法：将凡士林800g在温控80～100℃下熔化后，控温115～120℃灭菌，将已灭菌的凡士林冷却到70～80℃；将羊毛脂40g在控温115～120℃灭菌；将二甲亚砜25g控温55～65℃至熔化；将凡士林放入配料罐中，放入一半时搅拌；再将冰片、二甲亚砜和羊毛脂共熔，过滤并投入配料罐中搅拌；然后将吉马酮、呋喃二烯、莪术二酮、β-榄香烯、莪术醇、莪术烯加入配料罐中，搅拌均匀，即成。

Claims

1.一种药物组合物，其特征在于药物组合物活性成分组成为：

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述的冰片选自天然冰片和/或合成冰片。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于药物组合物是阴道给药制剂或直肠给药制剂。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其中制剂为栓剂、软膏剂、胶囊剂、泡腾片、凝胶剂、洗剂、膜剂或泡沫剂。

5.根据权利要求1所述的药物组合物在制备预防和/或治疗人乳头瘤病毒感染的药物中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其中人乳头瘤病毒感染包含高危型人乳头瘤病毒感染和/或低危型人乳头瘤病毒感染。

7.根据权利要求1所述的药物组合物在制备预防和/或治疗阴道炎、宫颈糜烂、宫颈癌的药物中的应用。