CN102836140B - 牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊制剂 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药领域，具体涉及一种牛蒡子苷元肠溶软胶囊及其制备方法，该肠溶软胶囊由含有牛蒡子苷元微乳浓缩液的内容物和肠溶性囊壳组成，该软胶囊在肠道内溶解，不仅提高了牛蒡子苷元的生物利用度，而且降低了对胃的刺激性。该胶囊可以在肠内定向释放，具有稳定性高、缓释效果好的优点，有十分广泛的医学应用前景。

Description

牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊制剂

技术领域

本发明属于医药制剂领域，涉及一种含有牛蒡子苷元微乳的肠溶软胶囊及其制备方法。

背景技术

牛蒡子为菊科植物牛蒡的干燥成熟果实，是常用中药，具有疏散风热、宣肺透疹、解毒利咽的功能，用于风热感冒、咳嗽痰多、麻疹、风疹、咽喉肿痛、痒腮丹毒、痈肿疮毒。该中药含有木脂素类化合物，主要是牛蒡苷(arctiin)和牛蒡子苷元(arctigenin)等。虽然牛蒡子苷元(也称牛蒡子苷元)在牛蒡子中的含量很低，但是其前体牛蒡苷在中药牛蒡和毛头牛蒡果实中含量较高，所以通过牛蒡苷转化可以获得大量的牛蒡子苷元。据文献报道，牛蒡苷在体内被分解为牛蒡子苷元而产生众多药理作用，并且牛蒡子苷元比牛蒡苷具有更强的生物活性，比如显著的抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗PAF受体及钙拮抗活性。

牛蒡子苷元为白色粉末或无色块状结晶，在氯仿、甲醇、乙醇等有机溶剂中易溶，在石油醚中难溶，熔点为111-112℃。不易挥发，空气中不易被氧化，物理及化学性质均较为稳定。但牛蒡子苷元难溶于水，生物利用度低，在一定程度上限制了其作为新药的应用。牛蒡子苷元的分子结构如下：

吕佳在《牛蒡子苷元药物动力学研究》一文中报道了牛蒡子苷元在小鼠、家兔体内的药物动力学特征。对牛蒡子苷元小鼠胃肠道吸收、家兔静脉注射、灌胃牛蒡子苷元的药物动力学特征以及牛蒡子苷元在大鼠体内分布研究结果表明：(1)牛蒡子苷元在胃肠道内较为稳定，转化、破坏较少。(2)家兔静注不同剂量牛蒡子苷元时，各剂量的半衰期T_1/2等主要动力学参数十分接近，且药-时曲线下面积(AUC)随剂量增加而成比例增加，说明牛蒡子苷元的消除为线性动力学；(3)家兔灌胃牛蒡子苷元的绝对生物利用度为9.5％；(4)牛蒡子苷元在大鼠体内分布广泛，在肝、肺中分布浓度较高，其次为心、脾、肾等。血浆蛋白结合率实验表明，牛蒡子苷元与大鼠血浆蛋白平均结合率为78.3％。

发明专利申请公布说明书CN101134031A公开了牛蒡子苷元软胶囊的制备方法，但是由于牛蒡子苷元属于脂溶性化合物，水溶性较差，直接口服生物利用度低。为解决牛蒡子苷元的溶解性问题，发明专利申请公布说明书CN101036643A也公开了一种含牛蒡子苷元的药物组合物，该药物组合物包含牛蒡子苷元、油、乳化剂和水，具体的提供的是一种口服或静脉乳剂，该乳剂的平均粒径均大于100nm。但是直接口服牛蒡子苷元会产生上消化道的不良反应，注射给药后全身分布、选择性较差，常引起严重的不良反应。

微乳给药系统是由药物、油相、水相、乳化剂以及助乳化剂以适当比例混合形成的一种混合物，体外可形成热力学稳定体系，由乳化剂以及助乳化剂共同起稳定作用；对水溶性、脂溶性及难溶性药物均有较好的溶解力，物理稳定性较高；因表面张力较低，故易透过胃肠壁的水化层，药物可直接和胃肠上皮细胞接触，促进药物吸收，提高生物利用度；口服后可经淋巴管吸收，克服了首过效应及大分子通过胃肠道上皮细胞膜时的障碍。但是，牛蒡子苷元微乳直接口服会产生胃部不适、恶心、呕吐等上消化道的不良反应而影响患者的适从性。并且微乳中需要大量的乳化剂，随着乳化剂含量的增高及其在体内的蓄积势必产生一定的毒性。

基于口服牛蒡子苷元微乳具有上消化道的副作用和注射给药的严重不良反应以及它在肠道内有良好的吸收，本发明提供一种含有牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊及其制备方法。

发明内容

牛蒡子苷元因其广泛的药理作用引起了医药研究者的研究兴趣，但牛蒡子苷元口服后，会对上消化道特别是胃部有强烈的刺激，研究证明，30％以上的患者口服后会发生恶心、呕吐、上消化道和胃部不适等副作用，严重影响患者服用的依从性。为了克服上述现有技术的不足，本发明提供一种牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊制剂及其制备方法，该制剂不仅有效的降低了常规牛蒡子苷元制剂的副作用，而且显著提高了牛蒡子苷元的生物利用度。

本发明所提供的含牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊，由含有牛蒡子苷元微乳浓缩液的内容物和肠溶性囊壳组成。本发明所述肠溶软胶囊中，每粒肠溶软胶囊中牛蒡子苷元的含量为0.1-50mg，优选为0.5-30mg。

本发明所述肠溶软胶囊中牛蒡子苷元微乳浓缩液的粒径为10-100nm，优选为20-80nm。上述肠溶软胶囊中的牛蒡子苷元微乳浓缩液含有油相、乳化剂、助乳化剂，还可以选择性加入抗氧剂或稳定剂，其中：油相选自亚油酸甘油酯、中链脂肪酸甘油酯和单硬脂酸甘油酯中一种或几种；乳化剂选自聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油、乳化剂OP和吐温80中的一种或几种；助乳化剂选自丙二醇、甘油、乙醇和聚乙二醇400中的一种或几种；抗氧剂或稳定剂选自维生素E、二丁基苯酚、叔丁基对羟基茴香醚中一种或几种。上述肠溶软胶囊中，肠溶软胶囊中的牛蒡子苷元微乳浓缩液各组分含量为能够与主药牛蒡子苷元形成均一稳定微乳浓缩液的合适的含量，优选地，牛蒡子苷元、油相、乳化剂和助乳化剂重量份为：牛蒡子苷元1-10份、油相5-85份、乳化剂20-60份、助乳化剂5-60份。

上述牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊可以按照三种实施方式分别进行如下优选。

方案一：

本发明所述牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊的肠溶性囊壳由胶皮和肠溶衣组成。其中：所述胶皮包含明胶、甘油和水或明胶、山梨醇和水，其中明胶、甘油和水或明胶、山梨醇和水的重量比为1∶(0.4-0.6)∶1；所述肠溶衣包含肠溶包衣材料和可选择性使用的增塑剂，肠溶包衣材料为聚丙烯酸树脂、邻苯二甲酸酞酸酯、醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯、邻苯二甲酸醋酸纤维素、乙基纤维素、Eudragit L30D-55、醋酸纤维素苯三酸酯、聚乙烯醇酞酸酯、肠溶欧巴代、聚醋酸乙烯苯二酸酯和虫胶中的一种或几种；所述增塑剂选自柠檬酸三乙酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二丁酯、聚乙二醇、滑石粉和山梨醇中的一种或几种。优选地，肠溶包衣材料和增塑剂的重量比为10∶1-1∶1，进一步优选地，肠溶包衣材料和增塑剂的重量比为3∶1-1∶1。

上述牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊的制备方法为：将牛蒡子苷元微乳浓缩液的内容物用胶皮包裹后制得软胶囊，在软胶囊外面包肠溶衣即得牛蒡苷元微乳肠溶软胶囊。

方案二：

本发明所述肠溶软胶囊的肠溶性囊壳由肠溶性胶皮制成，所述肠溶性胶皮包含明胶、肠溶性材料、增塑剂和水。其中：肠溶性材料为聚丙烯酸树脂、邻苯二甲酸酞酸酯、醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯、Eudragit L30D-55、邻苯二甲酸醋酸纤维素、乙基纤维素、醋酸纤维素苯三酸酯、聚乙烯醇酞酸酯、肠溶欧巴代、聚醋酸乙烯苯二酸酯和虫胶中的一种或几种。增塑剂为柠檬酸三乙酯、邻苯二甲酸二乙酯。邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二丁酯、聚乙二醇和山梨醇中的一种或几种。优选地，明胶、肠溶性材料、增塑剂和水的重量百分比含量为：明胶25％-40％，肠溶性材料10％-20％，增塑剂10％-25％，水15％-35％。

上述牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊的制备方法为：将肠溶性材料与明胶液以及增塑剂混合均匀后制备肠溶性胶皮，将预先制备的牛蒡子苷元微乳浓缩液用肠溶性胶皮包裹即可得到所述牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊。

方案三：

本发明所述牛蒡子苷元微乳肠溶性囊壳为方案一的胶皮制备的软胶囊经过甲醛-丙酮溶液浸渍后即得，所述甲醛-丙酮溶液优选为0.5～2％甲醛的丙酮溶液。

上述牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊的制备方法为：将制得的牛蒡子苷元微乳浓缩液包入胶皮中制得软胶囊，将软胶囊在甲醛-丙酮溶液中进行浸渍操作即可制备得到牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊。

本发明所述的肠溶软胶囊，可以采用压制法或滴制法制备。压制法是指采用压制机将含有牛蒡子苷元微乳的内容物用胶皮包裹起来形成软胶囊的制备方法，通常用自动旋转轧囊机或冲压式连续自动软胶囊机进行封囊制备；滴制法是指通过滴制机制备软胶囊的方法，在一定温度下，一般保持在45℃以上，利用胶液与液态内容物为两相，使一定量的胶液将定量的液态内容物包裹后，滴入另一种不相混溶的冷凝液中，胶液接触冷凝液后，由于表面张力作用而使之形成球形，并逐步凝固成丸剂。冷凝液可以是液体石蜡、甲基硅油、植物油、煤油中的任意一种。

以本发明制备方法得到的牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊，性质稳定，外观良好，完全符合质量标准要求。本发明制备牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊，与牛蒡子苷元的传统制剂相比，具有如下技术优势：

1、本发明所制备的牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊在胃中不溶解，而是在接近中性的肠道中溶解，避免了牛蒡子苷元传统制剂长期服用时对胃环境的影响而产生的恶心、呕吐、上消化道和胃部不适等副作用，提高患者服用的依从性；

2、改变了普通口服制剂吸收程序和状态，达到了肠部释放和集中吸收的目的，不仅能改善制剂的生物利用度，也使得食物对肠溶制剂药物效能的影响大大减小；

3、操作方便，制备工艺简便，车间生产无粉尘污染，有利于劳动保护。

本发明通过考察牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊制剂的口服生物利用度，结果发现本发明提供的牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊(含实施例1-5)的生物利用度是CN101036643A公开的牛蒡子苷元乳剂口服生物利用度的2.39-5.75倍，是CN101134031A公开的牛蒡子苷元软胶囊剂口服生物利用度的4.03-5.78倍，牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊制剂的半衰期也比CN101036643A公开的牛蒡子苷元乳剂和CN101134031A公开的牛蒡子苷元软胶囊剂的半衰期长。本发明还通过牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊对犬呕吐次数、呕吐潜伏期及呕吐持续时间的影响实验发现本发明提供的牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊制剂能有效抑制牛蒡子苷元所致的恶心、呕吐等消化道的不良反应。

总之，本发明的牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊制剂显示出有利的性质，可以克服牛蒡子苷元水溶性差、口服时的上消化道的副作用、吸收不完全等缺点，并可口服给药并起到缓释作用，显著提高了牛蒡子苷元的生物利用度，减少了用药次数，有十分广泛的医学应用前景。

具体实施方式

以下通过具体实施方式进一步描述本发明，本发明不仅仅限于以下实施例。

实施例1牛蒡子苷元微乳肠溶胶囊制剂

内容物处方：

胶皮处方：

肠溶包衣液处方：

制备工艺：称取处方量中链脂肪酸甘油酯、聚氧乙烯蓖麻油、丙二醇、无水乙醇，混合后搅拌均匀，然后加入牛蒡苷元溶解，也可以超声波处理以加速溶解，得澄清浓缩液，即为牛蒡苷元微乳浓缩物。将上述所得的微乳浓缩物加水按照1∶10-20的重量比稀释至澄清溶液，即得微乳内容物。称取处方量中明胶、甘油、纯化水，混合均匀后压制成胶皮，再称取处方量中的Eudragit L30D-55、柠檬酸三乙酯、滑石粉、纯化水混合均匀制得肠溶包衣液。将含有牛蒡子苷元微乳浓缩液的内容物用胶皮包裹制成软胶囊，并在软胶囊上包肠衣制得肠溶软胶囊。

实施例2牛蒡子苷元微乳肠溶胶囊制剂

内容物处方：

胶皮处方：

肠溶包衣液处方：

制备工艺：称取处方量中聚乙二醇400、聚氧乙烯蓖麻油、亚油酸甘油酯、无水乙醇，混合后搅拌均匀，然后加入牛蒡苷元溶解，也可以超声波处理以加速溶解，得澄清浓缩液，即为牛蒡苷元微乳浓缩物。将上述所得的微乳浓缩物加水按照1∶10-20的重量比稀释至澄清溶液，即得微乳内容物。称取处方量中明胶、山梨醇、纯化水，混合均匀后压制成胶皮，再称取处方量中的聚丙烯酸树脂II、聚丙烯酸树脂III、邻苯二甲酸二乙酯、吐温80、95％乙醇混合均匀制得肠溶包衣液。将含有牛蒡子苷元微乳的内容物用胶皮包裹制成软胶囊，并在软胶囊上包肠衣制得肠溶软胶囊。

实施例3牛蒡子苷元微乳肠溶胶囊制剂

内容物处方：

肠溶性胶皮处方：

制备工艺：称取处方量中无水乙醇、甘油、乳化剂OP、单硬脂酸甘油酯，混合后搅拌均匀，然后加入牛蒡苷元溶解，也可以超声波处理以加速溶解，得澄清浓缩液，即为牛蒡苷元微乳浓缩物。将上述所得的微乳浓缩物加水按照1∶10-20的重量比稀释至澄清溶液，即得微乳内容物。称取处方量中明胶、甘油、纯化水、Eudragit L100-55、柠檬酸三乙酯，混合均匀后压制成肠溶性胶皮，将含有牛蒡子苷元微乳的内容物用肠溶性胶皮包裹制得肠溶性软胶囊。

实施例4牛蒡子苷元微乳肠溶胶囊制剂

内容物处方：

肠溶性胶皮处方：

制备工艺：称取处方量中无水乙醇、吐温80、乳化剂OP、单硬脂酸甘油酯，混合后搅拌均匀，然后加入牛蒡苷元溶解，也可以超声波处理以加速溶解，得澄清浓缩液，即为牛蒡苷元微乳浓缩物。将上述所得的微乳浓缩物加水按照1∶10-20的重量比稀释至澄清溶液，即得微乳内容物。称取处方量中明胶、山梨醇、纯化水、肠溶欧巴代、邻苯二甲酸二甲酯，混合均匀后压制成肠溶性胶皮，将含有牛蒡子苷元微乳的内容物用肠溶性胶皮包裹制得肠溶性软胶囊。

实施例5牛蒡子苷元微乳肠溶胶囊制剂

内容物处方：

胶皮处方：

制备工艺：称取处方量中无水乙醇、聚氧乙烯氢化蓖麻油、中链脂肪酸甘油酯、亚油酸甘油酯，混合后搅拌均匀，然后加入牛蒡苷元溶解，也可以超声波处理以加速溶解，得澄清浓缩液，即为牛蒡苷元微乳浓缩物。将上述所得的微乳浓缩物加水按照1∶10-20的重量比稀释至澄清溶液，即得微乳内容物。称取处方量中明胶、甘油、纯化水，混合均匀后压制成胶皮，将含有牛蒡子苷元微乳的内容物用胶皮包裹制得软胶囊，对以上软胶囊用1％的甲醛丙酮溶液浸泡60分钟，取出用无水乙醇洗至无丙酮味，烘干，即得含牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊。

实施例6牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊制剂的口服生物利用度研究

1、实验材料

1.1药品与试剂

牛蒡子苷元注射液(自制，溶液中加20％丙二醇助溶并配成所需剂量)；

牛蒡子苷元软胶囊剂(制备工艺同CN101134031A说明书第4页实施例4)；

牛蒡子苷元乳剂(制备工艺同CN101036643A说明书第4页实施例3)；

牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊剂(制备工艺同本发明实施例1)；

牛蒡子苷元对照品(纯度99.5％)；肝素，生理盐水，甲醇，乙腈(均为色谱纯试剂)，其他均为分析纯试剂。

1.2实验仪器

LC-10A高效液相色谱仪；SPD-10AV紫外检测器：ShimazuClass-vp Version 5.03working station；KQ-100型超声波清洗器；台式离心机TGL-16C；手动匀浆器。

1.3实验动物

比格犬，6～8kg，雄性，共12只。

2、实验方法

2.1血浆中药物浓度的测定方法

2.1.1对照品溶液的配制

精密称取牛蒡子苷元对照品9.58mg，置于10ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，得0.958mg/ml的对照品溶液。

2.1.2血浆样品预处理

取样品0.5ml置于分液漏斗中，加入5ml二氯甲烷，摇匀，提取两次。分取二氯甲烷层并合并，40℃水浴蒸干二氯甲烷液，残渣加乙腈0.5ml溶解，作为供试品溶液，置于冰箱中(-20℃)待测，进样10μl。

2.1.3生物样品中药物含量测定方法的建立

2.1.3.1色谱条件

色谱柱：Diamonsil C₁₈(size：5μm，-150mm×4.6mm)；流动相：乙腈-水(35∶65)；流速：0.8ml/min；紫外检测波长：280nm；柱温：室温。

2.1.3.2方法专属性考察

将实验动物的血浆按上述方法处理后，取10μl注入高效液相色谱仪。同法处理空白血浆样品。结果，在上述色谱条件下，牛蒡子苷元色谱峰与其它峰有良好的分离度，与邻近峰分离度R：2.5，理论塔板数为3566块/米，空白血浆对其分析测定没有干扰。

2.1.3.3最低检测浓度的测定

按峰高为基线噪音3倍计算，血浆中牛蒡子苷元最低检测量为9.58×10^-3μg/ml。

2.1.3.4线性范围

取空白生物样品，加入不同浓度牛蒡子苷元标准溶液，使样品浓度为：1.916×10^-2、4.79×10^-2、9.58×10^-2、4.79×10^-1、9.58×10^-1、2.874、4.79μg/ml，各进样10μl，以进样量(μg)为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。结果：在1.916×10^-4-4.79×10^-2μg范围内，色谱峰面积与牛蒡子苷元的进样量(μg)呈良好线性关系，回归方程为：Y＝1119986X+1508.8，r＝0.9993。

2.1.3.5回收率和精密度

回收率：取空白生物样品，配制4.79×10^-2μg/ml、4.79×10^-1μg/ml、4.79μg/ml三个浓度生物样品及同样浓度的牛蒡子苷元标准溶液，分别在前述HPLC色谱条件下各测定5次，并将测定结果进行比较，计算绝对回收率。结果表明：本方法在低、中、高三种浓度水平上的回收率最低为：75.6％，能满足生物样品的测试要求。

精密度：取4.79×10^-2μg/ml、4.79×10^-1μg/ml、4.79μg/ml三个浓度血浆在同一天内分别进行五次测定，计算其日内相对标准差，精密度RSD分别为2.22％，1.67％，0.98％。经测定其他生物样品的日内、日间相对标准差均小于5％，符合生物样品的测试要求。

2.1.4血浆等生物样品预处理方法选择

血浆样品在注入色谱柱测定前需去除蛋白质等杂质，以防止堵塞色谱柱，造成柱效降低，一般采用加入水溶性有机溶媒如甲醇、乙腈等，或加入10％三氯醋酸等强酸除蛋白，或用有机溶媒提取。本实验中采用对牛蒡子苷元有较好溶解度的二氯甲烷提取生物样品，考虑到二氯甲烷的挥发性较大，故将二氯甲烷液挥干后加较为稳定的乙腈来溶解，进样。

2.2分组与给药

2.2.1静脉注射组：

将禁食12小时，自由饮水的比格犬3只，取1.5ml空白血后分别给5mg/kg牛蒡子苷元溶液，静脉注射，于给药5min、10min、20min、30min、40min、50min、60min、75min、90min、105min、120min静脉取血1.5ml，置涂有肝素的离心管中，离心(3000rpm)10min，取血浆0.5ml，保存于-20℃冰箱中，按前述生物样品制备方法进行处理，并制备，测定血药浓度时取10μl进样分析。

2.2.2牛蒡子苷元乳剂组

将禁食12小时，自由饮水的比格犬3只，取1.5ml空白血后分别给15mg/kg牛蒡子苷元乳剂灌胃，分别于给药后0.5小时、1小时、1.5小时、2.0小时、2.5小时、3.0小时、4.0小时、5.0小时、6.0小时静脉取血1.5ml，置涂有肝素的离心管中，离心(3000rpm)10min，取血浆0.5ml，保存于-20℃冰箱中，按前述生物样品制备方法进行处理，并制备，保存于-20℃冰箱中，测定血药浓度时取10μl进样分析。

2.2.3牛蒡子苷元软胶囊组

将禁食12小时，自由饮水的比格犬3只，取1.5ml空白血后分别给予相应量的牛蒡子苷元软胶囊内容物(15mg/kg)灌封于软胶囊中用30ml温水灌服，，分别于给药后0.5小时、1小时、1.5小时、2.0小时、2.5小时、3.0小时、4.0小时、5.0小时、6.0小时静脉取血1.5ml，置涂有肝素的离心管中，离心(3000rpm)10min，取血浆0.5ml，保存于-20℃冰箱中，按前述生物样品制备方法进行处理，并制备，保存于-20℃冰箱中，测定血药浓度时取10μl进样分析。

2.2.4牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊组

将禁食12小时，自由饮水的比格犬3只，取1.5ml空白血后分别给予相应量的牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊内容物(15mg/kg)灌封于肠溶胶囊中用30ml温水灌服，分别于给药后0.5小时、1小时、1.5小时、2.0小时、2.5小时、3.0小时、4.0小时、5.0小时、6.0小时静脉取血1.5ml，置涂有肝素的离心管中，离心(3000rpm)10min，取血浆0.5ml，保存于-20℃冰箱中，按前述生物样品制备方法进行处理，并制备，保存于-20℃冰箱中，测定血药浓度时取10μl进样分析。

2.3数据处理

将血药浓度-时间曲线用中国药学会数学药理专业委员会编写的3p87实用药代动力学程序进行处理，经计算机进行曲线拟合，求得主要药动力学参。

2.4实验结果

比格犬静脉注射牛蒡子苷元5mg/kg，取血药浓度的平均值。用中国药学会数学药理专业委员会编写的3p87实用药代动力学程序进行处理，经计算机拟合，得拟合优度比较，房室间F检验，根据F检验和AIC值选择房室数，当F检验有显著意义时(P＜0.05或P＜0.01)，应取AIC值较小的房室数，当F检验无显著意义时p＞0.05)，则取房室数少者为宜。从房室间F检验各房室间F检验P均大于0.5，确定其动力学行为符合单室一级吸收模型。

另外在静注3-4mg/kg时，各剂量的Ke、T_1/2(Ke)、Vc、CL(s)等主要动力学参数十分接近，经统计学检验无显著性差异(P＞0.05)，且AUC随剂量增加而成比例增加，说明在此剂量范围内牛蒡子苷元的消除为线性动力学。

比格犬灌胃给药15mg/kg，血药浓度-时间数据见表1。取血药浓度的平均值，用中国药学会数学药理专业委员会编写的3p87实用药代动力学程序进行处理，经计算机拟合，得拟合优度比较、房室间F检验，根据F检验和AIC值选择房室数，当F检验有显著意义时(P＜0.05或P＜0.01)，应取AIC值较小的房室数，当F检验无显著意义时(P＞0.05)，则取房室数少者为宜。确定其动力学行为符合单室一级吸收模型。

按照上述确定的单室一级吸收模型计算所得到的药物动力学参数，见表1。

表1注射和灌胃给药后牛蒡子苷元的主要药动学参数

参数	乳剂组	微乳剂组	软胶囊组	注射组
					Ke/h-1	0.8387±0.0641	0.7506±0.0646	0.8174±0.0742	0.7974±0.0887
T1/2/h	0.8263±0.0631	0.9233±0.0506	0.8478±0.0904	0.8694±0.0962
					Tmax/h	1.5594±0.1726	1.2451±0.1030	1.5971±0.1128	-
Cmax/μg·ml-1	0.5109±0.0490	0.8184±0.0508	0.5042±0.0120	-
					AUC/μg·ml-1·h	1.0531±0.1210	3.6190±0.5171	0.7247±0.4821	2.5108±0.5680

根据上表，分别计算牛蒡子苷元乳剂和微乳肠溶软胶囊剂灌胃给药的绝对生物利用度F。结果见表2。

由此可见，将牛蒡子苷元制备成微乳肠溶软胶囊制剂后，口服生物利用度较乳剂提高了3倍多。

表2牛蒡子苷元乳剂、软胶囊和微乳肠溶软胶囊剂灌胃给药的绝对生物利用度

组别	给药剂量(mg/kg)	AUC(μg·ml-1·h)	AUC/D	F(％)
					注射组	5	2.5108	0.5022	-
软胶囊组	15	0.7247	0.0483	9.62
					乳剂组	15	1.0531	0.0702	13.98
微乳软胶囊剂组	15	3.6190	0.2127	42.35

将实施例2-5制备的牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊制剂替代实施例6中使用的实施例1的牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊制剂，CN101036643A说明书公开实施例1-7替换实施例6中的乳剂重复实施例6，结果发现CN101036643A说明书公开实施例1-7牛蒡子苷元的乳剂口服生物利用度为9.67％-16.23％，牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊制剂的口服生物利用度为38.80％-55.60％，较牛蒡子苷元的乳剂口服生物利用度明显提高了2.39-5.75倍，较CN101134031A说明书公开的牛蒡子苷元软胶囊口服生物利用度明显提高了4.03-5.78倍。

实施例7牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊致犬呕吐研究

1、受试药物和实验动物

比格犬，6～8kg，雌雄各半，共30只。牛蒡子苷元乳剂、牛蒡子苷元软胶囊、牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊

2、分组与给药

选体重相近且健康比格犬随机分为5组，每组6只，雌雄各半，每只称重记录。口服给药。每日1次，连续14d。

表3各组给药方案

3、测定指标

各组动物的呕吐次数；从给药结束到动物第1次呕吐的时间(呕吐潜伏期)；从动物第1次呕吐至动物末次呕吐的时间(呕吐持续时间)。连续观察4小时，记录数据并作统计学处理。

4、结果

4.1牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊对犬呕吐次数的作用

低剂量和高剂量牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊口服给药后，对犬呕吐次数均有明显影响，实验结果见表4。

4.2牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊对犬呕吐潜伏期的作用

低剂量和高剂量牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊口服给药均可延长呕吐潜伏期，见表4

4.3牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊对犬呕吐持续时间的作用

低剂量和高剂量牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊口服给药均能明显缩短犬呕吐持续时间，结果见表4

表4牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊对犬呕吐次数、呕吐潜伏期及呕吐持续时间的影响

与牛蒡子苷元乳剂组相比，^*p＜0.05，^**p＜0.01；与牛蒡子苷元软胶囊组相比，^#p＜0.05，^##p＜0.01

将实施例2-5制备的牛蒡子苷元的微乳软胶囊制剂替代实施例7中使用的实施例1的牛蒡子苷元的微乳软胶囊制剂，用CN101036643A说明书公开实施例2-7替换实施例7中的乳剂，重复实施例7，结果发现低剂量和高剂量牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊口服给药均能有效的降低牛蒡子苷元对胃粘膜的刺激作用，明显减少呕吐次数，延长呕吐潜伏期及缩短呕吐持续时间。这表明本发明提供的牛蒡子苷元微乳肠溶软胶囊能有效抑制牛蒡子苷元所致的恶心、呕吐等消化道的不良反应，相对于CN101036643A说明书公开实施例2-7乳剂和CN101134031A说明书公开实施例4软胶囊有显著差异，这表明本发明提供的牛蒡子苷元微乳软胶囊制剂较CN101036643A公开的乳剂和CN101134031A公开软胶囊对犬呕吐次数、呕吐潜伏期及呕吐持续时间的效果显著提高。

以上通过具体实施方式进一步描述了本发明，任何等同替换对于本领域的技术人员来说都是显而易见的且包含在本发明之中。

Claims (15)

1.一种牛蒡子苷元肠溶软胶囊，由含有牛蒡子苷元微乳浓缩液的内容物和肠溶性囊壳组成；

    其中每粒肠溶软胶囊中含有牛蒡子苷元0.1-50mg；所述牛蒡子苷元微乳浓缩液的粒径为10-100nm，牛蒡子苷元微乳浓缩液含有牛蒡子苷元、油相、乳化剂、助乳化剂，其中各组分的重量份为：牛蒡子苷元1-10份、油相 5-85份、乳化剂20-60份、助乳化剂 5-60份；

    所述油相选自亚油酸甘油酯、中链脂肪酸甘油酯和单硬脂酸甘油酯中一种或几种；所述乳化剂选自聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油、乳化剂OP和吐温80中的一种或几种；所述助乳化剂选自丙二醇、甘油、乙醇和聚乙二醇400中的一种或几种。

2.如权利要求1所述的肠溶软胶囊，其特征在于所述肠溶软胶囊的内容物还含有抗氧剂或稳定剂。

3.如权利要求2所述的肠溶软胶囊，其特征在于所述抗氧剂和稳定剂选自维生素E、二丁基苯酚和叔丁基对羟基茴香醚中的一种或几种。

4.如权利要求1所述的肠溶软胶囊，其特征在于所述肠溶性囊壳由胶皮和肠溶衣组成。

5.如权利要求4所述的肠溶软胶囊，其特征在于所述胶皮包含明胶、甘油和水或明胶、山梨醇和水。

6.如权利要求4所述的肠溶软胶囊，其特征在于所述肠溶衣包含肠溶包衣材料和增塑剂。

7.如权利要求6所述的肠溶软胶囊，其特征在于所述肠溶包衣材料为聚丙烯酸树脂、邻苯二甲酸酞酸酯、醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯、邻苯二甲酸醋酸纤维素、乙基纤维素、醋酸纤维素苯三酸酯、聚乙烯醇酞酸酯、Eudragit L30D-55、肠溶欧巴代、聚醋酸乙烯苯二酸酯和虫胶中的一种或几种；所述增塑剂为柠檬酸三乙酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二丁酯、聚乙二醇和山梨醇中的一种或几种。

8.如权利要求1 所述的肠溶软胶囊，其特征在于所述肠溶性囊壳包含肠溶性胶皮。

9.如权利要求8所述的肠溶软胶囊，其特征在于所述肠溶性胶皮包含明胶、肠溶性材料、水和增塑剂。

10.如权利要求9所述的肠溶软胶囊，其特征在于所述肠溶性材料为聚丙烯酸树脂、邻苯二甲酸酞酸酯、Eudragit L30D-55、醋酸羟丙甲纤维素琥珀酸酯、邻苯二甲酸醋酸纤维素、乙基纤维素、醋酸纤维素苯三酸酯、聚乙烯醇酞酸酯、肠溶欧巴代、聚醋酸乙烯苯二酸酯和虫胶中的一种或几种，所述增塑剂为柠檬酸三乙酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二丁酯、聚乙二醇和山梨醇中的一种或几种。

11.如权利要求1所述的肠溶软胶囊，其特征在于所述肠溶性囊壳是在软胶囊压制定型后，将软胶囊在0.5～2%甲醛-丙酮溶液中进行浸渍操作而形成。

12.如权利要求4所述的肠溶软胶囊的制备方法，其特征在于将含有牛蒡子苷元微乳的内容物用胶皮包裹后制得软胶囊，在软胶囊外面包肠溶衣。

13.如权利要求8所述的肠溶软胶囊的制备方法，其特征在于将含有牛蒡子苷元微乳的内容物用肠溶性胶皮包裹。

14.如权利要求11所述的肠溶软胶囊的制备方法，其特征在于将含有牛蒡子苷元微乳的内容物用胶皮包裹后再进一步用0.5～2%甲醛的丙酮溶液浸渍。

15.如权利要求12-14任一所述的肠溶软胶囊的制备方法，其特征在于牛蒡子苷元微乳浓缩物的包裹方法为压制法或滴制法。