CN102809542A - 红景天注射液多糖含量测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种中药制剂的质量方法，具体是红景天注射液多糖含量测定方法。其步骤如下：（1）对照品溶液的制备：精密称取经105℃干燥至恒重的D-无水葡萄糖24.74mg，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；（2）供试品溶液的制备：精密量取本品5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取本品5ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。（3）标准曲线的制备。（4）供试品溶液的测定：本品每1ml含多糖以D-无水葡萄糖（C6H10O6）计，≥6.0mg。具有结果准确，重现性、回收率、加样回收率、稳定性较好的特点。
Description
技术领域
本发明涉及一种中药制剂的质量方法，具体是红景天注射液多糖含量测定方法。
背景技术
在已有技术中，大株红景天注射液是通化玉圣药业股份有限公司独家生产的专利产品，国药准字Z20060361。性状：本品为淡黄色至棕黄色的澄明液体。 成份：大株红景天。适应症状：活血化瘀。冠心病稳定型劳累性心绞痛。症见：胸部刺痛，绞痛，固定不移，痛引肩背及臂内侧，胸闷，心悸不宁，唇舌紫暗，脉细涩。用法用量：静脉滴注。一次10ml加入250ml氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液中，一日一次，10天为一疗程。
制备方法：取大株红景天1670g，加水煎煮三次，每次加水6倍，煎煮2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.15～1.20（50℃）的清膏，加乙醇使含醇量达70%，搅匀，冷藏 24小时（5～10℃），滤过，沉淀以5～10℃的少量70%乙醇洗涤一次，滤过，合并滤液，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.15～1.20(50℃)的清膏，再加乙醇使含醇量达85%，搅匀，冷藏24小时（5～10℃），滤过，沉淀以5～10℃的少量85%乙醇洗涤一次，滤过，合并滤液，调pH值至8.0， 冷藏12小时（5～10℃），滤过，滤液回收乙醇并浓缩至相对密度为1.20～1.30（50℃）的清膏，加入注射用水1000ml，冷藏12小时（5～10℃），滤过，滤液调pH值至7.0，加热煮沸30分钟，冷藏72小时（5～10℃），滤过，滤液以截留分子量为10000的超滤柱超滤，超滤液浓缩，冷冻干燥得干粉，加注射液用水配制成1000ml，微孔滤膜过滤，灌封，灭菌，即得。
原质量标准中多糖的含量测定，采用硫酸苯酚显色后，用紫外-可见分光光度法测定，该法操作繁琐、费时，且不易得到平行的结果，而且加样回收率只能达到30%左右，故对原标准中多糖的含量测定进行了修订。
发明内容
本发明的目的是针对上述不足而提供一种提高检查效果的红景天注射液多糖含量测定方法。
本发明的技术解决方案是：红景天注射液多糖含量测定方法，步骤如下：
（1）对照品溶液的制备：精密称取经105℃干燥至恒重的D-无水葡萄糖24.74mg，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；
（2）供试品溶液的制备：精密量取本品5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取本品5ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
（3）标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8ml，分别置25ml量瓶中，精密加水至2ml，分别精密加入3，5-二硝基水杨酸试液1.5ml，混匀，在沸水浴中加热5分钟，取出，立即冷却至室温，加水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以第一点为空白，照紫外-可见分光光度法，在488nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；
（4）供试品溶液的测定：精密量取供试品溶液1ml，置25ml量瓶中，加3mol/L盐酸溶液10ml，置沸水浴中加热30分钟，取出，冷却后加酚酞指示液1滴，用饱和氢氧化钠溶液调至近粉红色时，再滴加氢氧化钠溶液0.1mol/L，使呈粉红色，放冷至室温，加水至刻度，摇匀，精密量取该溶液和校正液各1ml，分别置25ml量瓶中，精密加水1ml，照标准曲线项下的方法自“分别精密加入3，5-二硝基水杨酸试液1.5ml，混匀”起，依法测定吸光度，减去空白校正，从标准曲线上读出供试品中D-无水葡萄糖的重量，计算，即得；本品每1ml含多糖以D-无水葡萄糖（C6H10O6）计，≥6.0mg。
本发明的优点是：1、本方法操做简便、快速、灵敏度高、杂质干扰小，检测结果准确、重现性、回收率、加样回收率、稳定性较好。2、此法中色素等还原物质与3，5-二硝基水杨酸显色，采用水解前测定值校正水解后测定值的方法，简便有效的排除了色素等杂质的干扰。
下面将结合实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。
附图说明
图1是多糖标准曲线图。
图2是供试品中多糖紫外扫描图。
图3是葡萄糖对照品紫外扫描图。
具体实施方式
红景天注射液多糖含量测定方法，其步骤如下：
1 方法
1.1 仪器与试药：UV-2550紫外可见分光光度计；D-无水葡萄糖对照品由中国药品生物制品检定所提供，批号110833—200503。通化玉圣药业有限公司提供样品，批号：20080401、20080402、20080702、20090901，试药均为分析纯。
1.2 对照品溶液的制备：精密称取经105℃干燥至恒重的D-无水葡萄糖约24.74mg，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含无水葡萄1mg）。
1.3 供试品溶液的制备：精密量取本品5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取本品5ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
1.4 校正液的制备：精密量取供试品溶液1ml，置25ml量瓶中,加水10ml，加酚酞指示液1滴，滴加滴加氢氧化钠溶液（0.1mol/L）使呈粉红色，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
2 方法学考察
2.1 标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8ml，分别置25ml量瓶中，精密加水至2ml，分别精密加入3，5-二硝基水杨酸试液1.5ml，混匀，在沸水浴中加热5分钟，取出，立即冷却至室温，加水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以第一点为空白，照紫外-可见分光光度法（中国药典2005年版一部附录V A），在488nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，结果见表1（参见图1）。
表1 多糖标准曲线数据
2.2 供试品溶液的测定：精密量取供试品溶液1ml，置25ml量瓶中，加3mol/L盐酸溶液10ml，置沸水浴中加热30分钟，取出，冷却后加酚酞指示液1滴，用饱和氢氧化钠溶液调至近粉红色时，再滴加氢氧化钠溶液（0.1mol/L）使呈粉红色，放冷至室温，加水至刻度，摇匀，精密量取该溶液和校正液各1ml，分别置25ml量瓶中，精密加水1ml，照标准曲线项下的方法自“分别精密加入3，5-二硝基水杨酸试液1.5ml，混匀”起，依法测定吸光度，减去空白校正，从标准曲线上读出供试品中D-无水葡萄糖的重量，计算，即得。
2.3 测定波长的选择：取显色后的对照品溶液及供试品溶液，于200～600nm波长范围内进行扫描，结果对照品溶液在488nm波长处有最大吸收，供试品溶液在486nm波长处有最大吸收，故488nm为测定波长（参见图2、3）。
2.4 反应时间的考察：取同一供试品溶液3份（批号200800702），依法操作，显色反应时间分别为5、10、15分钟，于488nm波长处测定吸光度分别为0.612、0.614、0.610，从测定结果看无明显差异，故反应时间定为沸水浴中加热5分钟。
2.5 已知成分红景天苷及酪醇的干扰试验：取红景天苷对照品溶液（0.4848mg/ml）2ml及酪醇对照品溶液（0.218mg/ml）2ml，同置25ml量瓶中，加3mol/L盐酸溶液10ml，置沸水浴中加热30分钟，取出，冷却后加酚酞指示液1滴，用饱和氢氧化钠溶液调至近粉红色时，再滴加氢氧化钠溶液（0.1mol/L）使呈粉红色，放冷至室温，加水至刻度，摇匀，精密量取2ml，置25ml量瓶中，精密加入3，5-二硝基水杨酸试液1.5ml，混匀，在沸水浴中加热5分钟，取出，立即冷却至室温，加水稀释至刻度，摇匀，立即于488nm波长处测定吸光度，其值为0.212，表明对多糖测定有干扰，放置5分钟，在测定其吸光度为0.025，放置10分钟后测定其吸光度为0.004，对测定几乎无干扰，说明红景天苷水解后产生的糖，虽能与3，5-二硝基水杨酸试液反应，但生成的化合物不稳定，从而确定10分钟后对多糖测定无干扰，故规定反应后的溶液放置10分钟后测定。
2.6 重复性试验：取同一批号的样品（批号 20080702），按上述方法独立测定6份，结果多糖含量（mg/ml）分别为：16.45、16.00、15.96、16.28、15.83、16.20，平均含量为16.12mg/ml，RSD为1.41%。结果表明重复性较好。
2.7 准确度试验：供试品溶液的制备 精密量取已知含量的样品溶液（批号20080702，含量16.12mg/ml）0.25ml，共9份，分别置25ml量瓶中，精密加入D-无水葡萄糖对照品溶液（浓度1.0316mg/ml）2.5、3.0、3.5ml，各3份，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置25ml量瓶中，加3mol/L盐酸溶液10ml，置沸水浴中加热30分钟，取出，冷却后加酚酞指示液1滴，用饱和氢氧化钠溶液调至近粉红色时，再滴加氢氧化钠溶液（0.1mol/L）使呈粉红色，放冷至室温，加水至刻度，摇匀，即得。
校正液的制备：精密量取样品溶液（批号20080702）0.25ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，置25ml量瓶中，加酚酞指示液1滴，滴加氢氧化钠溶液（0.1mol/L）使呈粉红色，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
测定法：精密量取上述供试品溶液及校正液各1ml，分别置25ml量瓶中，照标准曲线项下的方法自“分别精密加入3，5-二硝基水杨酸试液1.5ml，混匀”起，依法测定吸光度，减去空白校正，从标准曲线上读出供试品中D-无水葡萄糖的重量，计算，即得。结果见表2.
表2 多糖准确度试验结果
结果表明加样回收率较好。
2.8 稳定性试验：
2.8.1 供试品溶液经酸水解碱中和后的溶液放置24小时时测得的多糖含量几乎无变化。
2.8.2 显色后的供试品溶液，每隔一定时间测定吸光度值1次，结果见表3。
表3 显色后的溶液稳定性试验结果
| 时间（分钟） | 10 | 20 | 40 | 60 90 120 RSD（%） |
| 吸光度 | 0.643 | 0.642 | 0.643 | 0.643 0.642 0.642 0.085 |
结果表明本品显色后的溶液在2小时内稳定。
3 样品测定结果及限度
依正文方法测定4批样品，结果见表4。
表4 4批样品含量测定结果（mg/ml）
| 批号 | 含量 平均含量 |
| 20080401 | 13.47 13.93 13.7 |
| 20080402 | 14.60 14.78 14.7 |
| 20080702 | 16.00 16.28 16.1 |
| 20090901 | 10.88 10.49 10.7 |
根据对以上4批样品的测定结果，以及原标准中的含量测定限度，将本品的含量限度定为：本品每1ml含多糖以D-无水葡萄糖（C6H10O6）计，≥6.0mg。
Claims (1)
1.一种红景天注射液多糖含量测定方法，其特征在于步骤如下：
（1）对照品溶液的制备：精密称取经105℃干燥至恒重的D-无水葡萄糖24.74mg，置25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；
（2）供试品溶液的制备：精密量取本品5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取本品5ml，置25ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得；
（3）标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8ml，分别置25ml量瓶中，精密加水至2ml，分别精密加入3，5-二硝基水杨酸试液1.5ml，混匀，在沸水浴中加热5分钟，取出，立即冷却至室温，加水稀释至刻度，摇匀，放置10分钟，以第一点为空白，照紫外-可见分光光度法，在488nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；
（4）供试品溶液的测定：精密量取供试品溶液1ml，置25ml量瓶中，加3mol/L盐酸溶液10ml，置沸水浴中加热30分钟，取出，冷却后加酚酞指示液1滴，用饱和氢氧化钠溶液调至近粉红色时，再滴加氢氧化钠溶液0.1mol/L，使呈粉红色，放冷至室温，加水至刻度，摇匀，精密量取该溶液和校正液各1ml，分别置25ml量瓶中，精密加水1ml，照标准曲线项下的方法自“分别精密加入3，5-二硝基水杨酸试液1.5ml，混匀”起，依法测定吸光度，减去空白校正，从标准曲线上读出供试品中D-无水葡萄糖的重量，计算，即得；本品每1ml含多糖以D-无水葡萄糖（C6H10O6）计，≥6.0mg。
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Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102809542A (zh) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104237151A (zh) * | 2014-10-14 | 2014-12-24 | 宁波枫康生物科技有限公司 | 一种铁皮石斛药材的质量检测方法 |
| CN104713842A (zh) * | 2015-03-24 | 2015-06-17 | 河南省奥林特药业有限公司 | 利用紫外-可见分光光度法评价体虚感冒合剂质量的方法 |
| CN110514606A (zh) * | 2019-08-16 | 2019-11-29 | 大连百利天华制药有限公司 | 脾氨肽溶液核糖测定方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1731144A (zh) * | 2005-08-24 | 2006-02-08 | 郝再彬 | 快速测定甜叶菊糖含量的方法及其专用试剂 |
| CN101963578A (zh) * | 2010-09-11 | 2011-02-02 | 大连工业大学 | 一种测定制浆黑液还原糖含量的方法 |
| US20110299066A1 (en) * | 2009-12-18 | 2011-12-08 | Panasonic Corporation | Component concentration meter, component concentration measurement method, shipping inspection system, and health management system |
| CN102443621A (zh) * | 2011-11-30 | 2012-05-09 | 河南工业大学 | 一种测定β-葡聚糖合成酶活力的方法 |
-
2012
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Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1731144A (zh) * | 2005-08-24 | 2006-02-08 | 郝再彬 | 快速测定甜叶菊糖含量的方法及其专用试剂 |
| US20110299066A1 (en) * | 2009-12-18 | 2011-12-08 | Panasonic Corporation | Component concentration meter, component concentration measurement method, shipping inspection system, and health management system |
| CN101963578A (zh) * | 2010-09-11 | 2011-02-02 | 大连工业大学 | 一种测定制浆黑液还原糖含量的方法 |
| CN102443621A (zh) * | 2011-11-30 | 2012-05-09 | 河南工业大学 | 一种测定β-葡聚糖合成酶活力的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 俞冰: "《金耳多糖注射剂中多糖的含量测定》", 《江西科学》, 30 April 2007 (2007-04-30), pages 188 * |
| 王丽娜等: "《3 , 52二硝基水杨酸法测定多糖含量的研究进展》", 《吉林医药学院学报》, 31 August 2009 (2009-08-31), pages 232 - 234 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104237151A (zh) * | 2014-10-14 | 2014-12-24 | 宁波枫康生物科技有限公司 | 一种铁皮石斛药材的质量检测方法 |
| CN104713842A (zh) * | 2015-03-24 | 2015-06-17 | 河南省奥林特药业有限公司 | 利用紫外-可见分光光度法评价体虚感冒合剂质量的方法 |
| CN110514606A (zh) * | 2019-08-16 | 2019-11-29 | 大连百利天华制药有限公司 | 脾氨肽溶液核糖测定方法 |
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