CN102676394A - 一种分离食用菌菌种的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种分离食用菌菌种的方法，包括以下步骤：将子实体露出新鲜无菌组织，在无菌组织面上，用锋利的尖端划块，并斜插入组织内用尖端掰离；试管斜面朝下，拔掉棉塞，镊子夹住组织块在火焰上轻快来回烧燎2-3次放入试管，塞上棉塞；最后，试管倾斜，分离培养基面朝下，把组织块轻轻震动，使组织块从试管口直接滑落在培养基试管底部，卡在培养基与试管中间，然后将试管放置在22-28℃的温度下，3d即可萌发菌丝；8-12d菌种即可转接。本发明的分离方法在开放的环境即可操作，不需特殊设备；另外表面处理不用消毒剂(如酒精)，直接用镊子夹住在酒精灯火焰上均匀过一下，使表面灰尘及杂菌用火焰烧灼一下即可；组织块不用经过培养基上方，大大降低污染率。

Description

一种分离食用菌菌种的方法
技术领域
本发明涉及一种利用培养基倒悬接种卡块萌发分离食用菌菌种的方法，属于微生物菌种分离方法。
背景技术
菌种分离是将有价值的子实体的局部组织、孢子或基内菌丝移接到斜面试管培养基上，从而获得纯培养菌丝的操作方式。菌种资源的获得有野外采集和栽培场所采集两种途径，其中野外标本的采集主要适用于食用菌的野生种驯化、遗传育种、生理生态以及各种研究用的一级种的分离。而在食用菌栽培上一级种的分离，其种菇的来源主要是从栽培场中经留种获得的。
食用菌菌种是重要的生产资料，也是教学、科研上的重要实验材料。菌种质量的好坏直接影响栽培的成败和产量的高低，只有优良的菌种才能获得高产和优质的产品，因此生产优良的菌种是食用菌栽培的一个极其重要的环节。根据菌种的来源、繁殖代数及生产目的，把菌种分为母种、原种和栽培种、用子实体分离，通常在子实体大量出现时期。最好在采集当天就进行分离。一般应选取幼嫩、坚实、干爽、无病的子实体为分离对象。
无论是人工栽培子实体还是液体发酵菌丝体生产，获得高品质的优良菌种是关键。进行菌种分离是食用菌栽培中的一个重要环节。菌种分离须按一个严格的无菌操作程序进行。菌种分离可以分为孢子分离、组织分离和基内菌丝分离三种。实际生产中用最多的就是组织分离法，常规的组织分离方法是：选择优良的种菇作为分离材料，用无菌水冲洗后，用75％的酒精溶液表面消毒。取消毒过的刀片从菌柄或菌盖中部纵切、撕开，挑取菌盖与菌柄交界处的一小块组织(火柴头大小)，接种到PDA培养基上3-5天后，接种块上产生白色绒毛状菌丝。
这种方法及衍生出的方法，都是把分离的组织块粘附在试管培养基中央，在移动过程中组织块易活动，增加了污染的机会。另外，分离过程中组织块是在培养基上方操作固定，也增加了接种工具上未完全消毒的杂菌落在培养基表面的机会。
发明内容
本发明的目的在于提供一种安全的分离食用菌菌种的方法。
为了实现上述目的，本发明的技术方案采用了一种分离食用菌菌种的方法，包括以下步骤：将子实体露出新鲜无菌组织，在无菌组织面上，用锋利的尖端划块，并斜插入组织内用尖端掰离；试管斜面朝下，拔掉棉塞，镊子夹住组织块在火焰上轻快来回烧燎2-3次放入试管，塞上棉塞；最后，试管倾斜，分离培养基面朝下，把组织块轻轻震动，使组织块从试管口直接滑落在培养基试管底部，卡在培养基与试管中间，然后将试管放置在22-28℃的温度下，3d即可萌发菌丝；8-12d菌种即可转接。
先将子实体进行预处理，即在酒精灯火焰上均匀转动，除去表面的浮尘和部分杂菌。
所述的分离培养基为PDA培养基。
本发明的分离方法在开放的环境即可操作，不需特殊设备；另外表面处理不用消毒剂(如酒精)，直接用镊子夹住在酒精灯火焰上均匀过一下，使表面灰尘及杂菌用火焰烧灼一下即可；组织块不用经过培养基上方，大大降低污染率；固定组织块，有利于组织块的定位萌发，也防止在移动过程中组织块晃动影响萌发；操作工具只有一把尖嘴镊，取块接种，一步到位，减少了可能造成污染的环节。
附图说明
图1为本发明的方法中组织块与培养基的位置关系图。
具体实施方式
本实施例的方法如下：尖嘴镊、双手消毒后，用镊子夹住子实体在酒精灯火焰上均匀转动，除去表面的浮尘和部分杂菌。然后手持子实体纵掰，露出新鲜无菌组织，尖嘴镊前端2cm，火焰灼烧，待冷却透，在无菌组织面上，用锋利的尖端划块玉米粒大小，最后，斜插入组织内用尖端掰离。试管斜面朝下，如图1中2所示。右手小手指拔掉棉塞，镊子走火后夹住组织块在火焰上轻快来回烧燎3次放入试管，塞上棉塞。最后，试管倾斜，分离培养基面朝下，把组织块轻轻震动，使组织块从试管口直接滑落在培养基试管底部，卡在培养基与试管中间，如图1中1所示位置。试管放置在25℃的温度下，3d即可萌发菌丝；10d菌种即可转接。

Claims (3)

1.一种分离食用菌菌种的方法，其特征在于：包括以下步骤：将子实体露出新鲜无菌组织，在无菌组织面上，用锋利的尖端划块，并斜插入组织内用尖端掰离；试管斜面朝下，拔掉棉塞，镊子夹住组织块在火焰上轻快来回烧燎2-3次放入试管，塞上棉塞；最后，试管倾斜，分离培养基面朝下，把组织块轻轻震动，使组织块从试管口直接滑落在培养基试管底部，卡在培养基与试管中间，然后将试管放置在22-28℃的温度下，3d即可萌发菌丝；8-12d菌种即可转接。
2.根据权利要求1所述的分离食用菌菌种的方法，其特征在于：先将子实体进行预处理，即在酒精灯火焰上均匀转动，除去表面的浮尘和部分杂菌。
3.根据权利要求1所述的分离食用菌菌种的方法，其特征在于：所述的分离培养基为PDA培养基。
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