CN102579641B - 一种保护肝脏并具醒酒功能的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种保护肝脏并具醒酒功能的组合物及其制备方法和用途。所述的组合物中含有：30-180重量份芝麻素，1-6重量份五味子乙素，150-900重量份枳椇子提取物，150-900重量份葛花提取物，0.0012-0.0072重量份维生素B12，和14-84重量份维生素E。

Description

一种保护肝脏并具醒酒功能的组合物

技术领域

本发明涉及肝脏保护，尤其涉及一种催肝脏有保护作用的组合物。

背景技术

酒精性肝病(alcoholic liver disease，ALD)是指因长期、大量饮用含乙醇的饮料所致的肝脏损害性病变，初期常表现为脂肪肝，进而可发展成酒精性肝炎、酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化。嗜酒已成为世界范围内的公共卫生问题，但迄今为止尚无防治酒精性肝病的特效药物，而中医中药则显示出了越来越大的优势。同时近年来随着生活方式及饮食结构的改变，非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD)在全世界的发病率越来越高，且日趋年轻化，并被公认为肝硬化和终末期肝病的病因之一，在临床上日益受到重视。然而目前现代医学对NAFLD尚无特效的治疗药物，因此从中医的角度出发，寻找更好地阻断NAFLD进展或治疗、改善患者的药物已成为研究的热点问题。

因此，本领域迫切需要提供能够预防或治疗酒精性肝病和NAFLD的新的产品。

发明内容

本发明旨在提供对肝脏有保护作用和具有醒酒功能的组合物及其制备方法和用途。

在本发明的第一方面，提供了一种保护肝脏并具醒酒功能的组合物，所述的组合物中含有：

30-180重量份芝麻素，

1-6重量份五味子乙素，

150-900重量份枳椇子提取物，

150-900重量份葛花提取物，

0.0012-0.0072重量份维生素B12，和

14-84重量份维生素E。

在另一优选例中，所述的组合物中含有：

60-180重量份芝麻素，

2-6重量份五味子乙素，

300-900重量份枳椇子提取物，

300-900重量份葛花提取物，

0.0024-0.0072重量份维生素B12，和

28-84重量份维生素E。

优选地，本发明提供的组合物中，所述的枳椇子提取物是枳椇子的水醇提取物；所述的葛花提取物是葛花的水醇提取物；所述的维生素E是维生素E醋酸酯。

在本发明的第二方面，提供了一种如上所述本发明提供的组合物的制备方法，所述的方法包括步骤：

将30-180重量份芝麻素，1-6重量份五味子乙素，150-900重量份枳椇子提取物，150-900重量份葛花提取物，0.0012-0.0072重量份维生素B12，和14-84重量份维生素E混合，得到如上所述本发明提供的组合物。

在另一优选例中，所述的方法包括步骤：

将60-180重量份芝麻素，2-6重量份五味子乙素，300-900重量份枳椇子提取物，300-900重量份葛花提取物，0.0024-0.0072重量份维生素B12，和28-84重量份维生素E混合。

在本发明的第三方面，提供了一种如上所述本发明提供的组合物的用途，用于制备预防、和/或治疗酒精性肝损伤的药物或食品；所述的酒精性肝损伤或酒精中毒是急性酒精性肝损伤。

在本发明的第四方面，提供了一种如上所述本发明提供的组合物的用途，用于制备预防、和/或治疗脂肪肝的药物或食品；所述的脂肪肝是慢性酒精性脂肪肝、和/或膳食性脂肪肝。

据此，本发明提供了能够预防或治疗酒精性肝病和NAFLD的新的产品。

附图说明

图1是实施例2中各实验组小鼠醉酒时间统计。

图2是实施例2中各实验组醉酒百分率统计。

图3是实施例3中各实验组小鼠醉酒时间统计。

图4是实施例3中各实验组小鼠醉酒百分率统计。

图5是实施例4中小鼠是否醉酒状态对比；其中

A是服用本发明提供的组合物和酒后的小鼠状态；B是服用酒后的小鼠状态。

图6是实施例4中各实验组小鼠醉酒时间随时间的变化趋势图。

图7是实施例4中各实验组小鼠肝体重指数。

图8是实施例4中各实验组小鼠血清乙醇脱氢酶活性检测。

图9是实施例4中各实验组小鼠血清甘油三酯含量检测。

图10是实施例4中各实验组小鼠肝匀浆谷胱甘肽含量检测。

图11是实施例4中各实验组小鼠肝匀浆甘油三酯含量检测。

图12是实施例4中各实验组小鼠肝匀浆丙二醛含量检测。

图13是实施例4中各实验组小鼠肝脏油红染色的病理组织学图谱(20X)；其中A是正常组；B是模型组；C是复方用药组；D是阳性对照组。

图14是实施例5中各实验组小鼠肝体重指数。

图15是实施例5中各实验组小鼠血清甘油三酯的含量。

图16是实施例5中各实验组小鼠血清胆固醇的含量。

图17是实施例5中各实验组小鼠血清高密度脂蛋白的含量。

具体实施方式

发明人经过广泛而深入的研究，发现了一种含有多种物质的组合物，这些物质之间可以产生协同作用，对脂肪肝具有保护作用，为脂肪肝人群提供新型药品或保健食品带来可能。在此基础上完成了本发明。

如本文所用，术语“含有”或“包括”包括了“包含”、“基本上由……构成”、和“由……构成”。

如本文所用，术语“基本上由……构成”指在组合物中，除了含有必要成分或必要组份之外，还可含有少量的且不影响有效成分的次要成分和/或杂质。例如，可以含有甜味剂以改善口味、抗氧化剂以防止氧化，以及其他本领域常用的添加剂。

如本文所用，术语“有效量”是指可对人和/或动物产生功能或活性的且可被人和/或动物所接受的量。

如本文所用，“重量份”或“重量份数”可互换使用，所述的重量份可以是任何一个固定的以毫克、克数或千克数表示重量(如1mg、1g、2g、5g、或1kg等)。例如，一个由1重量份组分a和9重量份组分b构成的组合物，可以是1克组分a+9克组分b，也可以是10克组分a+90克组分b等构成的组合物。在所述组合物，某一组分的百分比含量＝(该组分的重量份数/所有组分的重量份数之和)×100％。因此，由1重量份组分a和9重量份组分b构成的组合物中，组分a的含量为10％，组分b为90％。

组合物

如本发明所用，“组合物”或“本发明提供的组合物”可以互换使用，都是含有下述成分：

30-180重量份芝麻素，1-6重量份五味子乙素，150-900重量份枳椇子提取物，150-900重量份葛花提取物，0.0012-0.0072重量份维生素B12，和14-84重量份维生素E。

其中所述的芝麻素和五味子乙素的分子结构如下：

其中所述的枳椇子提取物和葛花提取物可以通过商购得到，例如但不限于，陕西嘉禾植物化工有限责任公司提供的枳椇子提取物和汉中天然谷生物科技有限公司提供的葛花提取物，它们的物料比都可为20∶1，所述的枳椇子提取物是将枳椇果实通过水醇溶液提取得到，所述的葛花提取物是将葛花通过水醇溶液提取得到。

如本发明所用，枳椇子的拉丁名为Hovenia bulcis Thunb.；葛花的拉丁名为Flos Puerariae(Pueraria lobata(Willd.)Ohwi)。

药物和食品

如本发明所用，“药物”和“食品”是指本发明提供的组合物和药学上或食品学上可接受的载体形成的物质。所述的食品可以是饮食补充剂。

所述的药物可以是药学上常规的制剂形式，例如但不限于，颗粒剂、胶囊、片剂、粉末剂、口服液、混悬液、或乳剂。

如本文所用，术语“药学上可接受的”或“食品学上可接受的”的成分是适用于人和/或动物而无过度不良副反应(如毒性、刺激和变态反应)的，即有合理的效益/风险比的物质。

如本文所用，术语“药学上可接受的载体”指用于治疗剂给药的载体，包括各种赋形剂和稀释剂。该术语指这样一些药剂载体：它们本身并不是必要的活性成分，且施用后没有过分的毒性。合适的载体是本领域普通技术人员所熟知的。在Remington’s Pharmaceutical Sciences(Mack Pub.Co.，N.J.1991)中可找到关于药学上可接受的赋形剂的充分讨论。在组合物中药学上可接受的载体可含有液体，如水、盐水、甘油和乙醇。另外，这些载体中还可能存在辅助性的物质，如填充剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、泡腾剂、润湿剂或乳化剂、矫味剂、pH缓冲物质等。

用途

本发明提供的组合物可以有效预防或治疗急性酒精性肝损伤，可以显著缩短小鼠的醉酒时间和降低醉酒百分率，具有显著的解酒毒作用；对于慢性酒精性脂肪肝，随着用药时间的延长，醉酒时间缩短，同时可以显著提高血清乙醇脱氢酶(ADH)的活性，ADH是乙醇的氧化还原酶，加速酒精的代谢，为乙醛进一步代谢成为无毒的乙酸提供了可能；降低血清甘油三酯(TG)的含量抑制脂肪在肝细胞内的沉积。

现代药理研究表明，饮酒后，吸收进入体内的乙醇90％在肝脏内代谢，代谢过程中产生大量的自由基可导致干细胞的变性、坏死和炎性细胞的浸润。还原性谷胱甘肽(GSH)含量的多少是衡量机体抗氧化能力大小的重要因素。丙二醛(MDA)是脂质过氧化反应的终产物，它既能反映机体内的氧化反应，也能作为机体损伤的损害因子，本发明提供的组合物能抑制GSH(谷胱甘肽)的耗竭，有效抑制乙醇引起的TG(甘油三酯)和MDA(丙二醛)的升高；对于高脂膳食诱导的脂肪肝，可以有效的抑制由于高脂饲料引起的血清TG(甘油三酯)、CHO(胆固醇)的升高，同时可以有效的抑制高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的降低。

本发明提供的组合物对于酒精性脂肪肝和膳食性脂肪都有很好的效果。

本发明组合物的使用剂量和使用方法取决于诸多因素，包括患者的年龄、体重、性别、自然健康状况、营养状况、活性成分强度、服用、代谢速率、病症的严重程度以及诊治医师的主观判断。建议剂量如为开始每日33.33-100mg/kg，维持量为每日16.67-33.33mg/kg。

本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本案说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以任何可提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。

本发明的主要优点在于：

1、本发明提供的组合物的各成分之间具有协同作用，对酒精性肝损伤具有非常好的效果。

2、本发明提供的组合物的各成分之间具有协同作用，对脂肪肝具有非常好的效果。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则所有的百分数、比率、比例、或份数按重量计。

本发明中的重量体积百分比中的单位是本领域技术人员所熟知的，例如是指在100毫升的溶液中溶质的重量。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

在本发明实施例中，使用的材料如下：

1.实验动物及饲料昆明种SPF级小白鼠242只，体重18-25g；大白鼠40只，体重180-220g，所有实验动物购自上海斯莱克实验动物中心，SPF级动物环境饲养。高脂饲料(配方：78.8％基础饲料、1％胆固醇、10％蛋黄粉和10％猪油、0.2％胆盐)和基础饲料购自上海斯莱克实验动物有限责任公司。

2.实验药品与试剂无水乙醇购自上海振兴化工一厂，用时以蒸馏水稀释至56％和50％备用。枳椇子提取物(20∶1)购自陕西嘉禾植物化工有限责任公司(20∶1是指每20分生药枳椇子得到1分枳椇子提取物，通过水和乙醇提取)，芝麻素购自陕西嘉禾植物化工有限责任公司，北五味子乙素(又名五味子乙素)(2％)购自陕西嘉禾植物化工有限责任公司、水飞蓟素(80％UV)购自陕西嘉禾植物化工有限公司，葛花提取物(20∶1)购自汉中天然谷生物科技有限公司(20∶1是指每20克葛花生药提取到到一份葛花提取物，通过水和乙醇提取)，50％VE醋酸酯购自上海诚一食品原料有限公司(即VE和醋酸酯的复合物，其中VE的含量占50％)，1％麦芽糊精B12(即1％B12麦芽糊精，B12是用麦芽糊精稀释，含量在复合物中占1％)购自上海励成食品工业有限公司，鱼油(EPA％＝53.8，DHA％＝27.5)购自南京森海生物油脂厂。

枳椇子低、中、高剂量组以枳椇子提取物分别以人体推荐剂量(300mg)的5，10，30倍配成，用量分别为25，50，150mg/(kg.BW)。

本发明组合物(以下实施例中称复方)主要由枳椇子提取物、芝麻素、北五味子乙素、葛花提取物、1％麦芽糊精、维生素B12、和50％VE醋酸酯等原料组成：

所用试剂盒：血清乙醇脱氢酶(ADH)、丙二醛(MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)、胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)全部购自南京建成生物工程研究所，使用时按照各自试剂盒说明书使用。

在本发明实施例中，分析方法如下：

全血3600rpm，离心10分钟，小鼠血清，测ADH、TG；大鼠血清，测TC、TG、HDL-C、LDL-C。

取小鼠肝脏，用PBS制成10％肝匀浆，测其蛋白含量，测定肝脏组织中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG)含量。

组织病理学观察：固定的肝脏组织样脱水后用OCT包埋，冰冻切片，厚16um。随后用油红-苏木精染色，75％甘油明胶封片，0lympus BX显微镜进行观察。

在本发明实施例中，统计学处理为：统计资料采用SPSS10.0统计软件进行统计分析，统计方法采用卡方检验、秩和检验和t检验。

实施例1

急性毒理实验

按照国家标准试验进行了急性毒理实验，选取昆明种小鼠，20-25g，雌雄各10只，以标准饲料喂养，自由饮水，适应性喂养1周后进入实验，实验前所有小鼠禁食不禁水16h后，然后按照高剂量组的10倍给予复方，连续观察两个星期，观察小鼠的状态及大小便情况(袁伯俊.药物毒理学实验方法与技术[M].化学工业出版社，2007.)。

小鼠给药后连续观察两个星期，未见任何异常情况，根据国家标准试验中急性毒理实验的判定，可知该复方不会产生任何副作用。

实施例2

复方对乙醇诱导急性酒精性肝损伤的预防功效

枳椇子又称万寿果，很多研究报导具有很好的醒酒效果，所以选取枳椇子提取物单方作为阳性对照。选取SPF级昆明种雄性小鼠84(18-22g)只，根据体重随机分为A，B，C，D，E，F，G 7个组，每组12只，各组小鼠以标准饲料喂养，自由饮水，适应性喂养1周后进入实验。实验前各组小鼠禁食不禁水10h，，A组(模型组)给予蒸馏水，B组(复方低剂量组)，C组(复方中剂量组)，D组(复方高剂量组)，E组(枳椇子低剂量组)，F组(枳椇子中剂量组)，G组(枳椇子高剂量组)分别给予设定剂量的药物，45min后，各组动物给予56％乙醇溶液(15ml/kg BW)。观察小鼠从灌酒至醉酒的情况。小鼠是否醉酒以翻正反射是否消失为指标(徐淑云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M].第2版.北京：人民卫生出版社，1991.657)，保持背部向下姿势30s以上者认为醉酒，统计各实验组动物醉酒百分率及醉酒时间。结果见图1和2。

图1中，复方中剂量组(C组)、复方高剂量组(D组)的醉酒时间与给酒组(A组)比较具有差异极显著性，复方低剂量组(B组)与给酒组(A组)醉酒时间没有差异，枳椇子中剂量组(F组)、枳椇子高剂量组(G组)与给酒组(A组)醉酒时间比较具有差异极显著性，枳椇子低剂量组(E组)与给酒组(A组)醉酒时间没有差异性。

结果表明，复方高剂量组能使小鼠平均醉酒时间从250mins降到50mins，具有很好的醒酒效果。

图2中显示的醉酒百分率经卡方检验结果，复方中剂量组(C组)和枳椇子高剂量组(G组)与给酒组(A组)有显著差异，而复方低剂量组(B组)、枳椇子低剂量组(E组)、枳椇子高剂量组(F组)与给酒组(A组)没有差异性，只有复方高剂量组(D组)与给酒组(A组)存在差异极显著性。

结果表明，复方高剂量不管在醉酒时间和醉酒百分率上都具有很好的效果，优于其它的组别，可见在用于预防醉酒方面复合物高剂量具有显著的醒酒效果。

实施例3

复方对乙醇诱导急性酒精性肝损伤的治疗功效

选取SPF级昆明种雄性小鼠84只(18-22g)，根据体重随机分为A，B，C，D，E，F，G 7个组，每组12只，各组小鼠以标准饲料喂养，自由饮水，适应性喂养1周后进入实验。实验前各组小鼠禁食不禁水10h，，A组(模型组)给予蒸馏水，B组(复方低剂量组)，C组(复方中剂量组)，D组(复方高剂量组)，E组(枳椇子低剂量组)，F组(枳椇子中剂量组)，G组(枳椇子高剂量组)分别给予设定剂量的药物，同时各组动物给予56％乙醇溶液(15ml/kg BW)。观察小鼠从灌酒至醉酒的情况。小鼠是否醉酒以翻正反射是否消失为指标(徐淑云，卞如濂，陈修.药理实验方法学[M].第2版.北京：人民卫生出版社，1991.657)，保持背部向下姿势30s以上者认为醉酒，记录各实验组醉酒动物个数及醉酒时间。结果见图3和4。

给药组与给酒组在醉酒时间上都存在差异极显著性，醉酒百分率经卡方检验，给药组与给酒组都存在差异极显著性。复方给药组随着用量的增大，醉酒时间具有显著的缩短趋势。

从醉酒时间和醉酒百分率两个方面来看，复方高剂量组功效都优于其他组，且预防和治疗都具有显著的功效，复方高剂量组预防醉酒时间49min，治疗醉酒时间55min，醉酒百分率都是33％。枳椇子高剂量组预防醉酒时间109min，醉酒百分率64％，治疗醉酒时间84min，醉酒百分率42％。

因此，根据该复方对酒精性肝损伤的功效，接下来的对慢性酒精性脂肪肝和膳食性脂肪肝选择了复方高剂量组进行试验。

实施例4

复方高剂量组对乙醇诱导的慢性酒精性脂肪肝的功效

水飞蓟素在中国是一种中药，在欧美保健品市场上，是保肝类功能食品的功效成分，所以我们选取了水飞蓟素作为保肝的阳性对照。根据该复方对急性肝损伤的预防和治疗功效，分别选出复方和枳椇子提取物的最佳剂量即高剂量。选取SPF级昆明种雄性小鼠84只(18-22g)，根据体重随机分为A，B，C，D，E，F，G 7个组，每组12只，各组小鼠以标准饲料喂养，自由饮水，适应性喂养1周后进入实验。各组经口灌胃每天上午给予受试样品，A组(正常对照组)给予相应蒸馏水，B组(复方对照组)给予复方高剂量，C组(枳椇子对照组)给予枳椇子提取物，D组(模型组)给予乙醇溶液，E组(复方组)给予复方高剂量和乙醇溶液，F组(枳椇子组)给予枳椇子提取物和乙醇溶液，G组(阳性对照组)给予水飞蓟素和乙醇溶液，动物每周称重两次，按体重调整受试样品剂量。前10days给予50％乙醇溶液12ml/kg BW，后35days给予50％乙醇溶液10ml/kg BW。45days后，禁食16小时处死动物，进行肝功能各项指标及酶活的检测和肝脏病理组织学观察(赵敏，杨杏芬，黄俊明，池莉平，王凤岩.小鼠酒精性肝损伤模型的动态研究[J].中国公共卫生，2005，21(9)：1101-1102.)。

1.小鼠酒精性脂肪肝模型的建立

已有很多研究表明，小鼠每天给予50％乙醇溶液，连续给药30days或者45days可以造成酒精性脂肪肝模型。动物经适应性饲养后，开始给酒，每周称重两次按体重调整给酒量，前10days给予50％乙醇溶液12ml/kg BW，后35days给予50％乙醇溶液10ml/kg BW。45days后禁食16h处死小鼠。由实验结果(图7)得出模型组肝体重指数与正常组具有差异极显著性，即连续给酒后造成了肝脏的肥大，这也是酒精性脂肪肝的一个典型症状。

2.各组小鼠醉酒时间随时间的变化趋势

由实验结果可以看出，各实验组小鼠醉酒时间随着时间的延长醉酒时间下降，可以理解为小鼠对酒精的一个适应过程。可以看出第一天给酒时，小鼠醉酒时间都低于急性酒精性肝损伤预防和治疗的醉酒时间，是因为急性肝损伤给酒是15ml/kg.bw，而慢性酒精性脂肪肝是12ml/kg.bw。可以看出模型组的醉酒时间都高于其它给酒的同时给药的实验组，而复合物组的效果都优于其它两个组，水飞蓟素在欧美保肝市场上是主要的用药组分，所以选作保肝的阳性对照。发明人的实验结果(图6)可以看出，它的解酒毒效果低于枳椇子组和复方用药组，可能其效果主要体现在保肝上。

3.各组小鼠肝体重指数

由实验结果(图7)可以看出，各实验组小鼠体重没有差异，在肝体重指数方面，模型组(D组)与正常对照组(A)组有差异极显著性，其余各组即复方高剂量加酒组(E组)、枳椇子加酒组(F组)和水飞蓟素加酒组(G组)与高脂组(D组)没有差异显著性，由此也可以看出长期给酒可以造成肝脏的肥大。

4.肝功能相关指标的检测

由实验结果(图8)可以看出，复合物对照组(B组)及枳椇子对照组(C组)与正常对照组(A组)乙醇脱氢酶的活性没差异，其余各组都能显著提高乙醇脱氢酶的活性，但是复合物的效果都优于其它用药组(即E组ADH活性最高)。

由实验结果(图9)可以得到，复合物对照组(B组)与枳椇子对照组(C组)血清甘油三酯与正常对照组(A组)没有区别，其余各组与正常对照组有显著差异。复合物加酒组(E组)与模型组(D组)有显著差异，而枳椇子加酒组(F组)(F值大于0.05)和水飞蓟素加酒组(G组)与模型组(D组)没有差异。由此可知复合物组能显著抑制由乙醇引起的血清甘油三酯的升高。

由实验结果(图10)可以看出，复合物对照组(B组)、枳椇子对照组(C组)及模型组(D组)与正常对照组(A组)肝匀浆还原性谷胱甘肽没有差异，复合物加酒组(E组)及水飞蓟素加酒组(G组)与模型组(D组)存在差异显著性，枳椇子加酒组(F组)与模型组(D组)没有差异(F值大于0.05)，可见复合物能抑制由乙醇引起的还原性谷胱甘肽的耗竭。

由实验结果(图11)可以看出复合物对照组(B组)及枳椇子对照组(C组)与正常对照组(A组)肝匀浆甘油三酯没有差异，其余各组与正常对照组存在极显著差异，可能原因是因为长期大量的给小鼠灌胃酒精造成肝脏的损伤，导致肝脏甘油三酯的变化。复合物加酒组(E组)与模型组(D组)肝匀浆甘油三酯存在显著差异，而枳椇子加酒组(F组)与水飞蓟素加酒组(G组)与模型组(D组)没有差异(T检验的结果)，由此可知复合物能抑制乙醇引起的肝脏甘油三酯的升高。

由实验结果(图12)可以看出，复合物对照组(B组)、枳椇子对照组(C组)及模型组(D组)与正常对照组(A组)肝匀浆丙二醛没有差异，复合物加酒组(E组)及水飞蓟素加酒组(G组)与正常对照组(A组)存在差异极显著，枳椇子加酒组(F组)与正常对照组(A组)有显著差异(T检验的结果)，可见该复合物还是优于枳椇子，能抑制由乙醇引起的丙二醛的上升。

5.肝脏病理组织学观察

由图13肝脏油红染色可知，模型组小鼠肝脏组织中有明显的脂滴富集，复方用药组小鼠脂滴明显减少，与阳性对照组即水飞蓟素用药组效果一样。

实施例5

复方高剂量组对高脂饲料诱导的膳食性脂肪肝的功效

鱼油特别是深海鱼油，是降血脂的一种常见食疗食品，所以选取了鱼油作为对膳食性脂肪肝功效的阳性对照。选取SPF级昆明种雄性大鼠40只(180-220g)，根据体重随机分为A，B，C，D4个组，每组10只，A组为正常组，B组为模型组即阴性对照组，C组为复方高剂量组，D组为鱼油组即阳性对照组。各组小鼠以标准饲料喂养，自由饮水，适应性喂养1周后进入实验。A组每天给予基础饲料，B、C、D组给予高脂饲料，同时C、D组每天分别灌胃给予复方和鱼油。63day后，禁食16小时处死动物，取血清检测肝功能相关指标(秦红波，曹浩强，华志元，李相成，倪全法.高脂饮食致大鼠非酒精性脂肪肝模型的建立[J].南京医科大学学报，2008，28(8)：973-976.)，(杨晓红，徐富翠，余鸿，梅欣明.大鼠非酒精性脂肪肝模型构建的方法探讨[J].四川解剖学杂志.2009，17(3)：6.)。

高脂组(B组)与正常组(A组)肝体重指数、血清胆固醇存在差异极显著性(见图14、16)，血清甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇存在差异显著性(见图15、17)，表明大鼠膳食性脂肪肝建立成功。

高脂组(B组)与正常组(A组)肝体重指数具有差异极显著性(见图14)，复方组(C组)和鱼油组即阳性对照组(D组)与高脂组(B组)比较没有差异性，与正常组有差异极显著性。

高脂组(B组)与正常组(A组)血清甘油三酯具有差异极显著性(见图15)，复方组(C组)和鱼油组即阳性对照组(D组)与高脂组(B组)具有差异极显著性。

高脂组(B组)与正常组(A组)血清胆固醇具有差异极显著性，复方组(C组)和鱼油组即阳性对照组(D组)与高脂组(B组)具有差异显著性(见图16)。

高脂组(B组)与正常组(A组)血清高密度脂蛋白胆固醇具有差异显著性，复合物组(C组)与高脂组(B组)血清高密度脂蛋白胆固醇具有差异极显著性(见图17)，鱼油组即阳性对照组(D组)与高脂组(B组)血清高密度脂蛋白胆固醇没有差异。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并非用以限定本发明的实质技术内容范围，本发明的实质技术内容是广义地定义于申请的权利要求范围中，任何他人完成的技术实体或方法，若是与申请的权利要求范围所定义的完全相同，也或是一种等效的变更，均将被视为涵盖于该权利要求范围之中。

Claims (10)

1.一种保护肝脏并具醒酒功能的组合物，其特征在于，所述的组合物由下述成分组成：

30－180重量份芝麻素，

1－6重量份五味子乙素，

150－900重量份枳椇子提取物，

150－900重量份葛花提取物，

0.0012－0.0072重量份维生素B12，和

14－84重量份维生素E。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的组合物由下述成分组成：

60－180重量份芝麻素，

2－6重量份五味子乙素，

300－900重量份枳椇子提取物，

300－900重量份葛花提取物，

0.0024－0.0072重量份维生素B12，和

28－84重量份维生素E。

3.如权利要求1或2任一所述的组合物，其特征在于，所述的枳椇子提取物是枳椇子的水醇提取物；所述的葛花提取物是葛花的水醇提取物。

4.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述的维生素E是维生素E醋酸酯。

5.一种如权利要求1所述组合物的制备方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：

将30－180重量份芝麻素，1－6重量份五味子乙素，150－900重量份枳椇子提取物，150－900重量份葛花提取物，0.0012－0.0072重量份维生素B12，和14－84重量份维生素E混合。

6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：

将60－180重量份芝麻素，2－6重量份五味子乙素，300－900重量份枳椇子提取物，300－900重量份葛花提取物，0.0024－0.0072重量份维生素B12，和28－84重量份维生素E混合。

7.一种如权利要求1－4任一所述的组合物的用途，用于制备预防、和/或治疗酒精性肝损伤的药物或食品。

8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述的酒精性肝损伤是急性酒精性肝损伤。

9.一种如权利要求1－4任一所述的组合物的用途，其特征在于，用于制备预防、和/或治疗脂肪肝的药物或食品。

10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述的脂肪肝是慢性酒精性脂肪肝、和/或膳食性脂肪肝。

Images