CN102579439A - 一种黄藤素组合药物、胶囊剂、制备方法及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种黄藤素组合药物，所述组合药物由黄藤素和药根碱组成；其中黄藤素与药根碱的重量比为5-12:1-3；本发明所提供的黄藤素组合药物胶囊剂对于对于子宫内膜炎症、心率失常和增强非特异性免疫都具有良好的活性，并且本发明采用的剂型，药物溶解度更好。

Description

一种黄藤素组合药物、胶囊剂、制备方法及其应用

技术领域

    本发明涉及一种药物组合，更具体的说涉及一种黄藤素组合药物、胶囊剂、制备方法及其应用。

技术背景

黄藤素（Fibrauretinum）为防己科植物黄藤（Fibraurea tinctoria Lour）茎中提取的一种生物碱。有清热解毒功能。用于妇科炎症、菌痢、肠炎、呼吸道及泌尿道感染、外科感染、眼结膜炎等。孙明莉等在《齐鲁药事》发表的《黄藤素软胶囊溶出度的研究》报道的黄藤素软胶囊溶出度的研究中，研究黄藤素软胶囊体外溶出度及其测定方法，以O.1mol/L盐酸溶液900mL为溶出介质，转速为75r/min，采用HPLC测定黄藤素软胶囊的体外溶出度。30min黄藤素软胶囊的溶出度均大于标示量的80%。廖晓鸣等在《西北药学杂志》发表的《黄藤素泡腾栓的制备及质量控制》中报道了在黄藤素泡腾栓的制备及质量控制中，制备黄藤素阴道泡腾栓并制定其质量控制标准；用半合成脂肪酸甘油酯作为栓剂基质，碳酸氢钠、一水柠檬酸为发泡剂，制备黄藤素泡腾栓。采用HPLC测定主药含量，检查发泡量；结果以黄腾素300g、碳酸氢钠165g、一水柠檬酸165g、半合成脂肪酸酯1280g、聚山梨酯8088g、制成1000粒泡腾栓为组方，HPLC测定含量准确；平均发泡体积符合规定。金朝辉等在《华西药学杂志》发表的《黄藤索缓释片释放度的测定及其释药特性》报道了在黄藤素缓释片释放度的测定及其释药特性中，进行黄藤素缓释片释放度的测定及释药规律的研究。采用紫外分光光度法测定黄藤素缓释片的释放度，并进行释药规律的研究。测定波长为342nm，黄藤素在3.0～10.0μg／mL范围内线性关系良好(r=0.9999)。其体外释放特性符合Higuchi模式。黄藤素缓释片释药机制是扩散和骨架溶蚀协同作用，而非单纯Fick扩散。中国专利申请（98121594.7）公开了一种黄藤素胶囊剂，中国专利申请(03117415.9)公开了一种黄藤素分散片及其制备方法，中国专利申请（200410062216.7）公开了一种黄藤素输液制剂及其制备方法，中国专利申请（200510013624.8）公开了一种黄藤素滴丸及其制备方法，但是上述专利公开的都是黄藤素的单方制剂。

另据报道称黄藤单方制剂也具有一定的毒副作用，何明在《药物不良反应杂志》上发表了《黄藤素注射剂误用致过敏性休克》在黄藤素注射剂误用致过敏性休克中，1例33岁男性患者，疑似泌尿系感染，肌内注射黄藤素注射液2mL后立即出现呼吸困难，昏迷，血压未测及。张桂秀等在《中国误诊学杂志》中发表的《黄藤素片致大疱性表皮坏死松解型药疹》中报道了在黄藤素片致大疱性表皮坏死松解型药疹1例中，1例18岁女性一次性服6片(0.6g)药物，24h发生过敏反应，导致全身大疱性大片状皮损，伴高热、水电解质紊乱、低蛋白血症、过敏性休克，呕吐物为大量大片状胃肠黏膜，严重的多脏器损伤。张美品在《岭南急诊医学杂志》上发表的《肌内注射黄藤素引起过敏性休克1例报告》报道了1例8岁男孩首次注射黄藤素，很短时间内出现卡它症状，继而出现血压低、喉头水肿等休克表现，诊断为黄藤素注射引起的过敏性休克。

发明内容

研究发现，药根碱的抗菌谱广,对细菌、真菌有抑制作用。对白色念珠菌具有强烈抑制作用,对卡尔酵母菌比巴马汀弱,对构成植物病害的某些真菌也有抑制作用。对阴道毛滴虫亦有活性。药根碱能阻断肾上腺素α1受体,且对α1受体呈现部分激动作用，并且能明显增强心肌的正性阶梯现象,对双脉冲刺激及静息后增强效应无影响。本发明将药根碱作为一味辅助药物添加到黄藤素药物组合中不仅能提高药物的抗菌消炎作用，还能避免患者服用药物后的一些过敏性休克反应的发生。本发明的具体内容如下：

一种黄藤素组合药物，所述组合药物由黄藤素和药根碱组成；其中黄藤素与药根碱的重量比为5-12:1-3。

所述黄藤素与药根碱的重量比为5:1。

一种黄藤素组合药物胶囊剂，为上述任一所述黄藤素组合药物中还添加了辅料，分别为：作为填充料的硫酸钙、作为粘合剂的低取代羟丙基纤维素、作为崩解剂的羧甲基纤维素和作为润滑剂的硬脂酸镁。

所述黄藤素、药根碱、硫酸钙、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素和硬脂酸镁的重量比为：5:1:12:3:2:1。

所述黄藤素、药根碱、硫酸钙、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素和硬脂酸镁用水润湿制粒，过100目筛，在胶囊分装时不施加任何压力。

上述任一所述的黄藤素组合药物胶囊剂在制备治疗子宫内膜炎症药物中的应用。

上述任一所述的黄藤素组合药物胶囊剂在制备治疗心率失常药物中的应用。

上述任一所述的黄藤素组合药物胶囊剂在制备增强非特异性免疫药物中的应用。

本发明的有益技术效果是：本发明所提供的黄藤素组合药物胶囊剂对于对于子宫内膜炎症、心率失常和增强非特异性免疫都具有良好的活性，并且本发明采用的剂型，药物溶解度更好。

具体实施方式

实施例1 黄藤素组合药物胶囊剂制备方法的考察

按黄藤素、药根碱、硫酸钙、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素和硬脂酸镁的重量比5:1:12:3:2:1的比例称取药材，按不同工艺实验组制粒，实验组一：纯化水；实验组二：5O%乙醇；实验组三：5%PVP；实验组四：1O%淀粉糊。取各种颗粒，分别用硬胶囊分装机分装，用智能溶出仪按照药典方法检查溶出度，测得各品种不同硬度颗粒相应的溶出度，结果见表1。

表1 不同颗粒硬度对溶出度的影响

分别取供试原粉，按照工艺实验组制粒后，分别用100目、80目、60目和20目筛整粒，得不同粒径的颗粒。取各种颗粒，分别用硬胶囊分装机分装，用智能溶出仪按照药典方法检查溶出度，测得各品种不同粒径颗粒相应的溶出度，结果见表2。

表2 不同颗粒粒径对溶出度的影响

取供试原粉，按不同工艺实验组添加辅料制粒，添加辅料分别为实验组一：2%羧甲基淀粉钠；实验组二：6%羧甲基淀粉钠；实验组三：1O %羧甲基淀粉钠；实验组四：3%低取代羟丙基纤维素；实验组五：内加4%羧甲基淀粉钠、外加2%羧甲基淀粉钠。取各种颗粒，分别用硬胶囊分装机分装，用智能溶出仪按照药典方法检查溶出度，测得各种不同工艺实验组相应的溶出度，结果见表3。

表3 不同工艺处方对溶出度的影响

工艺实验组是影响胶囊剂溶出度的主要可控因素，根据不同的分装条件，选择添加不同的辅料，对于难溶性原粉应根据原粉性质添加适当的助溶剂，提高成品溶出度。大型生产过程中，常用的助溶剂有羧甲基淀粉钠、低取代羟丙基纤维素等。根据试验可以看出，低取代羟丙基纤维素用量有一定比例限制，低于4%效果不明显，高于8%起反作用。另外，制粒时内加助溶剂和外加助溶剂效果也不同，一般内加和外加合用效果较好，低取代羟丙基纤维素用于颗粒较难分散的品种助溶效果较好。

实施例2 黄藤素组合药物胶囊剂的制备

按黄藤素、药根碱、硫酸钙、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素和硬脂酸镁的重量比5:1:12:3:2:1的比例称取药材，黄藤素、药根碱、硫酸钙、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素和硬脂酸镁用水润湿制粒，过100目筛，在胶囊分装时不施加任何压力，得到药物实验组Ⅰ；

按黄藤素、药根碱、硫酸钙、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素和硬脂酸镁的重量比5:3:12:3:2:1的比例称取药材，按上述方法，得到药物实验组Ⅱ；

按黄藤素、药根碱、硫酸钙、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素和硬脂酸镁的重量比12:1:12:3:2:1的比例称取药材，按上述方法，得到药物实验组Ⅲ。

实施例3 黄藤素组合药物胶囊剂对免疫功能活性的考察

    Wistar大鼠20只，雄性，体重200～25Og(龄4～4．5个月)，随机分为实验组及模型对照组，实验组给予实施例2所述的药物实验组Ⅰ黄藤素组合药物胶囊剂灌胃，给药量为0.3g/kg，1次/d，共10d。对照组腹腔内注射等容量灭菌生理盐水。于检测指标前4d，经腹腔注射10％绵羊红细胞lml/只，进行免疫第11d，在戊巴比妥钠腹腔注射麻醉下，开腹，经腹主动脉采血，处死，取脾。

测定外周血中性粒细胞(PMN)吞噬率；测定外周血液淋巴细胞酸性 α-醋酸萘酯酶(ANAE⁺)阳性百分率；测定脾玫瑰花蟛成细胞试验(RFC)； 测定外周血液白细胞移行抑制试验(MIT)；统计学处理采用t检测；具体结果如表4所示。

表4 黄藤素组合药物胶囊剂对大鼠免疫功能的影响

注：* P﹤0.001（与模型对照组比）；** P﹤0.01（与模型对照组比）*** P﹤0.05（与模型对照组比）

据本实验结果，给药黄藤素组合药物胶囊剂后，外周血液中性粒细胞吞噬率提高，说明非特异性免疫增强。脾玫瑰花形成细胞是具有特异性免疫功能的抗原结合细胞或称免疫特异玫瑰花形成细胞。据研究， RFC数目的升高程度与抗体放价成正比。实验组应用黄藤素后， RFC明显高于对照组， 表明黄藤素对特异性体液免疫应答反应有明显的促进作用。淋巴细胞内含有各种酶类，不同淋巴细胞亚群所含酶类不同，T细胞成熟期可显示ANAE⁺的活性。我们应用黄藤素后ANAE⁺明显提高，表明T淋巴细胞数明显增多。T淋巴细胞在植物血凝素(PHA)的作用下被激活释放出能抑制白细胞游走的移行抑制因子，当T淋巴细胞功能增强时，释放的移行抑制因子增多，移行指数降低。

实施例4 黄藤素组合药物胶囊剂对子宫内膜炎症活性的考察

SD大鼠6O只，全雌，随机分为6组，在戊巴比妥钠麻醉下消毒开腹取出左侧子宫，沿子宫角上lcm处作一横切口，将一塑料管(管径2mm，长O.5cm，重2mg，酒精消毒)放置在子宫内与子宫切口缝合固定，伤口处滴人青霉素以防感染。术后当日按照表4所示要求给予灌胃给药实施例2所述的药物实验组Ⅰ，连续lOd。1Od后处死动物，开腹取出两侧子宫称重，按下式计算肿胀度和肿胀抑制率。其中，

肿胀度=致炎侧子宫重一非致炎侧子宫重

肿胀抑制率=[（模型组肿胀度-给药组肿胀度）/模型组肿胀度]×100%

表5 黄藤素组合药物胶囊剂对SD大鼠子宫内膜炎症的影响（

±SD）

注：模型组与假手术组比较＃ P﹤0.01，各给药组与模型组相比较 *P﹤0.01 **P﹤0.01

本试验主要通过观察它对动物子宫内膜炎症的影响，进一步阐述其治疗的可能机制。通过本试验观察到，黄藤素组合药物胶囊剂高剂量组0.3g／kg对子宫内膜炎症动物模型子宫肿胀度有明显抑制作用（P<0.01），肿胀抑制率为88.45％。黄藤素组合药物胶囊剂低剂量组对模型动物子宫肿胀度也有明显影响，肿胀抑制率为56.52％，本实验证实黄藤素组合药物胶囊剂低剂有抑制子宫内膜炎症的作用，有一定的量效关系。

实施例5 黄藤素组合药物胶囊剂对心率失常活性的考察

Wistar大鼠，体重200-260g，随机分为两组，戊巴比妥钠麻醉。气管插管，人工呼吸。分别由舌下静脉给予生理盐水（NS，1ml/kg）和实施例2所述的药物实验组Ⅰ黄藤素组合药物胶囊剂水溶液（0.3g药物/kg）。5min后，按selye法结扎冠左前降支。记录给药前后及结扎冠脉后ECG的变化（如果结扎前后超过10min仍未出现心律失常或出现严重的传导阻滞并持续20min未恢复者，弃之）。

实验结果显示，黄藤素组合药物胶囊剂水溶液能使心律失常的时间缩短。对照组结扎冠脉后，心律失常的开始时间为4.1±0.7min（心律失常表现为早搏、联律、室速、室扑和室颤等），并持续10±1.4min。黄藤素组合药物胶囊剂水溶液组的心律失常的开始时间为5.2±1.0min（n=10,P﹤0.05）,持续时间为4.4±2.0min（P﹤0.01）。但两组室扑室颤发生率（6/10对4/10，n=10,P﹥0.05）的差异无显著意义。说明黄藤素组合药物胶囊剂水溶液有抗大鼠缺血性心律失常作用。

Wistar雄性大鼠，随机分为3组。戊巴比妥钠（50mg/kg）麻醉，气管插管，人工呼吸。由舌下静脉注射实施例2所述的药物实验组Ⅰ黄藤素组合药物胶囊剂水溶液。给药5min后，于左胸4-5肋间开胸，剪开心包膜，挤出心脏。在肺动脉圆锥左缘、左心耳下缘1-2mm处，用1/2无损伤缝合线结扎冠状动脉，造成心肌缺血。5min后，取出胶管，恢复冠脉供血。示波器观察并记录给药前后、复灌前后ECG的变化情况。心肌缺血后出现SaT及T波抬高，复灌后多立即出现心律失常。计算室性心律失常（早搏、室速、室扑和室颤）的发生率和动物死亡率、复灌后立即出现室心律失常（VA）的动物个数及VA的持续时间。

表6  黄藤素组合药物胶囊剂复灌期间室性心律失常的作用（

±SD）

No=1min内显现VA的动物数 与NS组比较*P﹤0.01 **P﹤0.01

表6可见，（10mg/kg）黄藤素组合药物胶囊剂有抗复灌性心率失常作用，可使心律失常开始的时间推迟、持续时间缩短并使VA的发生率下降。

实施例6 黄藤素组合药物胶囊剂对免疫功能活性的考察2

    采用实施例3所述的方法考察实施例2所述的药物实验组Ⅱ黄藤素组合药物胶囊剂对大鼠免疫功能的影响，具体结果如表7所示。

表7 黄藤素组合药物胶囊剂对大鼠免疫功能的影响

注：* P﹤0.001（与模型对照组比）；** P﹤0.01（与模型对照组比）*** P﹤0.05（与模型对照组比）

本实验结果与实施例3相似，据本实验结果，给药黄藤素组合药物胶囊剂后，外周血液中性粒细胞吞噬率提高，说明非特异性免疫增强。

实施例7 黄藤素组合药物胶囊剂对子宫内膜炎症活性的考察

采用实施例4所述的方法考察实施例2所述的药物实验组Ⅱ黄藤素组合药物胶囊剂对SD大鼠子宫内膜炎症的影响，具体结果如表8所示。

表8 黄藤素组合药物胶囊剂对SD大鼠子宫内膜炎症的影响（

±SD）

注：模型组与假手术组比较＃ P﹤0.01，各给药组与模型组相比较 *P﹤0.01 **P﹤0.01

本实验结果与实施例4相似，本实验证实黄藤素组合药物胶囊剂低剂有抑制子宫内膜炎症的作用，有一定的量效关系。

实施例8 黄藤素组合药物胶囊剂对心率失常活性的考察

采用实施例5所述的方法考察实施例2所述的药物实验组Ⅱ黄藤素组合药物胶囊剂对Wistar大鼠抗大鼠缺血性心律失常作用，实验结果与实施例5的实验结果相近。

采用实施例5所述的方法考察实施例2所述的药物实验组Ⅱ黄藤素组合药物胶囊剂对Wistar大鼠心率失常活性的考察，具体结果如表9所示。

表9  黄藤素组合药物胶囊剂复灌期间室性心律失常的作用（

±SD）

No=1min内显现VA的动物数 与NS组比较*P﹤0.01 **P﹤0.01

实验结果与实施例5的实验结果相似。黄藤素组合药物胶囊剂有抗复灌性心率失常作用，可使心律失常开始的时间推迟、持续时间缩短并使VA的发生率下降。

实施例9 黄藤素组合药物胶囊剂对免疫功能活性的考察2

    采用实施例3所述的方法考察实施例2所述的药物实验组Ⅲ黄藤素组合药物胶囊剂对大鼠免疫功能的影响，具体结果如表10所示。

表10 黄藤素组合药物胶囊剂对大鼠免疫功能的影响

注：* P﹤0.001（与模型对照组比）；** P﹤0.01（与模型对照组比）*** P﹤0.05（与模型对照组比）

本实验结果与实施例3相似，据本实验结果，给药黄藤素组合药物胶囊剂后，外周血液中性粒细胞吞噬率提高，说明非特异性免疫增强。

实施例10 黄藤素组合药物胶囊剂对子宫内膜炎症活性的考察

采用实施例4所述的方法考察实施例2所述的药物实验组Ⅲ黄藤素组合药物胶囊剂对SD大鼠子宫内膜炎症的影响，具体结果如表11所示。

表11 黄藤素组合药物胶囊剂对SD大鼠子宫内膜炎症的影响（

±SD）

注：模型组与假手术组比较＃ P﹤0.01，各给药组与模型组相比较 *P﹤0.01 **P﹤0.01

本实验结果与实施例4相似，本实验证实黄藤素组合药物胶囊剂低剂有抑制子宫内膜炎症的作用，有一定的量效关系。

实施例11 黄藤素组合药物胶囊剂对心率失常活性的考察

采用实施例5所述的方法考察实施例2所述的药物实验组Ⅲ黄藤素组合药物胶囊剂对Wistar大鼠抗大鼠缺血性心律失常作用，实验结果与实施例5的实验结果相近。

采用实施例5所述的方法考察实施例2所述的药物实验组Ⅲ黄藤素组合药物胶囊剂对Wistar大鼠心率失常活性的考察，具体结果如表12所示。

表12  黄藤素组合药物胶囊剂复灌期间室性心律失常的作用（

±SD）

No=1min内显现VA的动物数 与NS组比较*P﹤0.01 **P﹤0.01

实验结果与实施例5的实验结果相似。黄藤素组合药物胶囊剂有抗复灌性心率失常作用，可使心律失常开始的时间推迟、持续时间缩短并使VA的发生率下降。

Claims (8)

1.一种黄藤素组合药物，其特征在于：所述组合药物由黄藤素和药根碱组成；其中黄藤素与药根碱的重量比为5-12:1-3。

2.根据权利要求1所述的黄藤素组合药物，其特征在于：所述黄藤素与药根碱的重量比为5:1。

3.一种黄藤素组合药物胶囊剂，其特征在于：权利要求1、2任一所述黄藤素组合药物中还添加了辅料，分别为：作为填充料的硫酸钙、作为粘合剂的低取代羟丙基纤维素、作为崩解剂的羧甲基纤维素和作为润滑剂的硬脂酸镁。

4.根据权利要求3所述的黄藤素组合药物胶囊剂，其特征在于：所述黄藤素、药根碱、硫酸钙、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素和硬脂酸镁的重量比为：5:1:12:3:2:1。

5.权利要求4所述的黄藤素组合药物胶囊剂的制备方法，其特征在于：所述黄藤素、药根碱、硫酸钙、低取代羟丙基纤维素、羧甲基纤维素和硬脂酸镁用水润湿制粒，过100目筛，在胶囊分装时不施加任何压力。

6.权利要求1-4任一所述的黄藤素组合药物胶囊剂在制备治疗子宫内膜炎症药物中的应用。

7.权利要求1-4任一所述的黄藤素组合药物胶囊剂在制备治疗心率失常药物中的应用。

8.权利要求1-4任一所述的黄藤素组合药物胶囊剂在制备增强非特异性免疫药物中的应用。