CN102485016B - 南极大磷虾蛋白肽混合物的制备方法 - Google Patents
南极大磷虾蛋白肽混合物的制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
南极大磷虾蛋白肽混合物的制备方法，涉及大磷虾蛋白肽混合物的制备。本发明提供一种制备高品质低氟南极磷虾蛋白多肽混合物的方法。本发明采用南极磷虾冷冻，匀浆，其特征是在南极磷虾匀浆液中添加1％～2％质量比例的木瓜蛋白酶制剂，混匀，在50～60℃搅拌温度条件下反应3h～5h，随后采用离心分离制得液相A和沉淀物B；将沉淀物B加入等体积的水溶解获得悬浮液，悬浮液经过300目筛绢过滤，得到悬浮液C和残渣D，残渣D用水洗涤一次，得到残渣E和悬浮液F，合并悬浮液C和悬浮液F，悬浮液C和悬浮液F进行离心分离得到液相G和沉淀物H，液相A、液相G和沉淀物H经干燥成为低氟大磷虾蛋白肽混合物干基。
Description
技术领域
本发明涉及大磷虾蛋白肽混合物制备方法。
背景技术
南极大磷虾(Euphausia superba)是重要的海洋生物资源。天然生长的南极大磷虾肌肉干样中粗蛋白含量64.44％，粗脂肪含量5.14％，灰分含量10.90％，无氮浸出物含量19.52％；18种氨基酸总量为57.16g/100g，其中8种人体必需氨基酸含量为25.88g/100g，占氨基酸总量的45.25％；必需氨基酸指数(EAAI)为54.94％，其构成比例符合FAD/WHO标准；4种鲜味氨基酸含量为23.06g/100g，占氨基酸总量的35.98％。磷虾在海洋中有数以百万吨的产量和优质的蛋白质量，被誉为地球上最大的一个动物蛋白库，具有较大的开发潜力，因而成为世界的捕捞对象，也是一种有前景的鱼粉蛋白替代源。南极磷虾粉在鲑鳟鱼类的水产养殖中已普遍运用，饲料中添加一定量的南极磷虾粉或壳粉对鲑鳟鱼类、鲷科鱼类以及中型、大型淡水和海水观赏鱼，具有诱食、促生长和增强体色作用。充分利用这一重要资源对于远洋渔业的发展具有重要的战略意义。
由于海水的富氟环境以及虾壳对氟的富集作用，据资料报道，南极大磷虾整体中氟的平均含量为1232mg/kg；氟含量的90％集中分布在腹壳、尾足以及头胸部，肌肉中的氟含量为250mg/kg，但是南极大磷虾死亡后，虾壳中的氟会迅速渗透到肌肉中。因此，南极大磷虾的氟含量过高是人类利用其作为食品和水产饲料源的主要瓶颈。欧盟和我国关于鱼用饲料氟含量的最新规定是氟含量不能超过350mg/kg饲料。目前南极大磷虾食用前的脱氟研究以及南极大磷虾蛋白质提取过程中的脱氟研究很少，国内仅有尚处于公布阶段的专利申请号200910019197.2，该专利申请阐述的技术方案是将南极磷虾冷冻，粉碎，碱性条件下提取蛋白质，酸性条件下沉淀分离蛋白质，通过酸洗方法进行降氟处理，但是酸碱提取蛋白的方法，反应条件较为剧烈，对蛋白质有一定的逆转破坏作用，从而对制得的蛋白的品质产生一定的影响，而且酸碱提取蛋白的方法需要耗费大量的水资源来洗去酸和碱，耗能也大；国外采用一种电极富集的方法来降低南极大磷虾的氟含量，结果表明去壳和不去壳的冻干磷虾粉经过铝电极处理120分钟后，折算成活体磷虾的氟含量分别达到95ppm和15ppm，但该处理方法需要特殊的电极，不利于工业上大规模生产。
发明内容
本发明目的在于提供一种温和的制备高品质低氟南极磷虾蛋白多肽混合物的方法。
本发明的技术方案采用南极磷虾冷冻，匀浆，其特征是在南极磷虾匀浆液中添加1～2％质量比例的酶活为80,000U/g的木瓜蛋白酶制剂，混匀，在50℃～60℃搅拌温度条件下反应3h～5h，酶解结束后煮沸15min以灭酶活，随后采用离心分离制得液相A和沉淀物B；将沉淀物B加入等体积的水溶解获得悬浮液，悬浮液经过300目筛绢过滤，得到悬浮液C和残渣D，残渣D用水洗涤一次，得到残渣E和悬浮液F，合并悬浮液C和悬浮液F，悬浮液C和悬浮液F进行离心分离得到液相G和沉淀物H，液相A、液相G和沉淀物H经干燥成为低氟大磷虾蛋白肽混合物干基。
本发明的突出特点是在南极磷虾匀浆液中添加1％～2％质量比例的木瓜蛋白酶，可使南极大磷虾中氟的绝对含量减少76.93％，产品干基中氟离子浓度为344.45mg/kg，相当于含水量为88％～90％的膏状的产品湿基中的氟离子浓度为27.56mg/kg～41.33mg/kg，均低于欧盟和我国关于鱼用饲料氟含量的最新规定350mg/kg，避免高氟对产品的危害，还避免了碱法和酸法对蛋白质性质的破坏作用，最大限度的保存了南极大磷虾中的活性蛋白和不饱和脂肪酸，能有效实现南极大磷虾蛋白的合理高效使用，弥补了现有技术的缺陷。本发明的方法简便有效，制备的低氟大磷虾蛋白肽混合物营养价值高，粗蛋白含量为61.31g/100g干基，其中多肽占总氮物质的33.81％，总糖含量为13.01g/100g干基，粗脂质含量为8.56g/100g干基，不饱和脂肪酸含量为2.37g/100g干基，其中DHA+EPA含量高达2.02g/100g干基。本方法适用于工业化应用，反应条件温和，得到的产品营养价值高，尤其适合海水鱼、虾、蟹类幼体培育中的饲料添加剂或者营养强化剂。
具体实施方式
本发明以冷冻南极大磷虾为原料，将南极磷虾从冰箱中取出，用匀浆粉碎机进行粉碎匀浆，在匀浆液中添加1～2％质量比例的酶活为80,000U/g的木瓜蛋白酶，例如在匀浆液中添加质量百分比为1.5％的酶活为80,000U/g的木瓜蛋白酶，添加的木瓜蛋白酶后反应温度应该控制在50℃～60℃之间，例如反应温度控制在58℃，并在反应过程中进行搅拌，搅拌反应控制在3h～5h之间加速酶解反应的进行，酶解结束后煮沸15min以灭酶活，采用离心分离制的液相A和沉淀物B；将沉淀物B加入等体积的水溶解成悬浮液，悬浮液用300目筛绢过滤，得到悬浮液C和残渣D，残渣D用水洗涤一次，得到残渣E和悬浮液F，合并悬浮液C和F，悬浮液C和F进行离心分离得到液相G和沉淀物H。液相A、液相G和沉淀物H经干燥即为低氟优质南极大磷虾蛋白肽混合物干基。这种低氟南极大磷虾蛋白肽混合物干基为淡橘红色的粉末状物质，蛋白质含量为61.31％，多肽占总氮物质的33.81％，总糖含量13.01％，粗脂肪含量为8.56％，酶解后的产品中多不饱和脂肪酸2.37％，DHA+EPA含量占干基物质的2.02％，含氟量低，营养价值高，可作为优质南极大磷虾蛋白粉饲料添加剂。虾肉蛋白大分子水解为小分子蛋白多肽混合物，更易被消化吸收。
Claims (1)
1.南极大磷虾蛋白肽混合物的制备方法，采用南极磷虾冷冻，匀浆，其特征是在南极磷虾匀浆液中添加1～2％质量比例的酶活为80,000U/g的木瓜蛋白酶制剂，混匀，在50℃～60℃搅拌温度条件下反应3h～5h，酶解结束后煮沸15min以灭酶活，随后采用离心分离制得液相A和沉淀物B；将沉淀物B加入等体积的水溶解获得悬浮液，悬浮液经过300目筛绢过滤，得到悬浮液C和残渣D，残渣D用水洗涤一次，得到残渣E和悬浮液F，合并悬浮液C和悬浮液F，悬浮液C和悬浮液F进行离心分离得到液相G和沉淀物H，液相A、液相G和沉淀物H经干燥成为低氟大磷虾蛋白肽混合物干基。
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