CN102379930B - 一种从虎杖中提取总蒽醌苷元的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种从虎杖中提取总蒽醌苷元的方法，该方法通过将虎杖药材粉碎后加入一定浓度的乙醇，加热回流，过滤，滤液稀释后经低极性溶剂脱脂后加入正丁醇萃取，萃取液蒸干得到正丁醇萃取物，萃取后的水相加入低极性有机溶剂和无机酸水解，水解吼将有机相水洗至中性，蒸干得到水解产物，将水解产物与正丁醇层合并，经由大孔树脂层析，重结晶而获得99%以上的总蒽醌苷元纯品，该方法成本低、工艺简单，提取物纯度高。

Description

一种从虎杖中提取总蒽醌苷元的方法

技术领域

本发明涉及一种提取总蒽醌苷元的方法，具体涉及一种从虎杖中提取总蒽醌苷元的方法。

背景技术

虎杖为科植物，表面棕褐色至灰棕色，有明显的纵皱纹、须根和点状须根痕，分枝顶端及节上有芽痕及鞘状鳞片。节间长2-3cm。质坚硬，不易折断，折断面棕黄色，纤维性，皮部与木部易分离，皮部较薄，木部占大部分，呈放射状，中央有髓或呈空洞状，纵剖面具横隔，气微，味微苦、涩。

虎杖的根茎均可作药用，有活血散痰，祛风解毒，消炎止痛，去湿热黄疸等功效，虎杖的根茎含有游离的蒽醌和蒽醌苷类化合物，如大黄素、大黄酸、大黄酚、大黄素甲醚、大黄素甲醚-8-O-D-葡萄糖甙以及大黄素-8-O-D-葡萄糖甙等等。上述的蒽醌类物质具有消炎抑菌，止泻，清热解毒的作用，均可以用在医疗，保健和日用化工品中，市场前景较好，但目前的提取方法存在提取的总蒽醌苷元纯度不高，提取成本高，提取工艺复杂等问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提取成本较低、提取工艺简单、提取的总蒽醌苷元纯度高的从虎杖中提取总蒽醌苷元的方法。

本发明的上述目的是通过如下技术方案来实现的：一种从虎杖中提取总蒽醌苷元的方法，含以下步骤：

(1) 在虎杖中加入提取溶剂，经加热回流提取后，过滤除去滤渣，将提取液浓缩，得粗提物浓缩液；

(2) 将粗提物浓缩液加水稀释，然后用低极性有机溶剂脱脂，得脱脂后稀释液；

(3) 在脱脂后的稀释液中加入正丁醇萃取后，将正丁醇萃取液浓缩得到正丁醇萃取物；

(4) 向正丁醇萃取后的水相中加入低极性的有机溶剂和无机酸，加热进行水解反应，水解完毕后，取出上层有机相，用水洗至水相呈中性，蒸干有机溶剂得到水解产物；

(5) 将步骤(4)中获得的水解产物与步骤(3)中获得的正丁醇萃取物合并，经大孔树脂层析，醇水系统梯度洗脱，得到总蒽醌苷元粗品；

(6) 将总蒽醌苷元粗品经重结晶得到高纯度总蒽醌苷元产品。

在上述步骤中：

本发明步骤(1)中提取溶剂为乙醇水溶液，其中乙醇的体积百分含量优选为70~90%，乙醇水溶液的用量优选为虎杖质量的3~5倍。其中虎杖药材优选来自出产地的虎杖茎块，经干燥粉碎后再经提取溶剂提取。

本发明步骤(1)中加热回流时间优选为5~8小时，加热温度为75℃-80℃，提取次数优选为3~4次。

本发明步骤(1)中优选将提取液浓缩至原体积的1/15~1/10。

本发明步骤(2)中粗提物浓缩液和水的质量体积比为1g:10~15mL，所述低极性有机溶剂为二氯甲烷或环己烷，最好为二氯甲烷，其用量占粗提物稀释液总体积的0.3~0.5倍，脱脂次数为2-3次，合并萃取液得脱脂后稀释液。

本发明步骤(3)中正丁醇的加入量优选占粗提物稀释液总体积的0.5~1倍，萃取次数优选为1~2次。

本发明步骤(4)中所述的低极性有机溶剂优选为二氯甲烷，其用量优选占粗提物稀释液总体积的1/5~1/4。

本发明步骤(4)中向正丁醇萃取后的水相中加入无机酸调节溶液的pH值优选为4~5，加热进行水解反应优选5~6h，加热温度为60℃-70℃，其中所述的无机酸优选为硫酸或盐酸，最好是硫酸。

本发明步骤(5)中所述大孔树脂为低极性大孔树脂，所述的低极性大孔树脂优选为AB-8或HP-20，最好是HP-20，所述醇水系统包括体积百分含量分别为10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的乙醇水溶液，经大孔树脂层析后，收集乙醇体积百分含量为40-80%段的洗脱液部分，蒸干即得到总蒽醌苷元粗品。

本发明步骤(6)中采用乙醇进行重结晶，乙醇的体积百分含量为90~98%，乙醇的用量为总蒽醌苷元粗品总质量的8~10倍，重结晶时的温度为-5~-10℃，静置时间为5~8小时，然后析晶得到纯度高于99%的总蒽醌苷元产品。

本发明具有如下优点：本发明提取工艺简单，成本低，提取物总蒽醌苷元产品纯度达99%以上，纯度高，可广泛应用在医疗，保健和日用化工品中，市场前景较好。

具体实施方式

    下面结合实施例对本发明作进一步的描述，但它们不是对本发明的限定，其中所采用的原料如无特殊指明，均为市售。

实施例1 

将干燥虎杖根茎磨成粉末，取500克加入2500克体积百分含量为75%的乙醇于水浴中加热回流提取8小时，过滤，过滤再后重复提取2次，合并提取液。提取液浓缩到200克，加入3000mL水稀释，搅匀。往稀释液中加入1200毫升的二氯甲烷萃取，重复两次，合并萃取液，回收二氯甲烷。往下层水层加入1700mL的正丁醇，搅拌萃取，重复两次，合并萃取液，浓缩回收正丁醇，得到10.74克固体。往经正丁醇萃取后的水层加入质量百分含量98%硫酸调节pH值到5，然后加入二氯甲烷650毫升，搅拌，油浴加热水解反应6小时，然后冷却到室温，分出上层有机层，用水洗至水层成中性即止，浓缩回收溶剂得到9.45克固体。将10.74克正丁醇萃取物与9.45克水解产物合并，用1000mL体积百分含量为20%的乙醇水溶液溶解，溶解液经超声除气，过滤，然后经恒流泵上样到已经装好柱并经前处理的500克大孔树脂HP-20层析柱中。上样完毕后，用纯水洗脱3个柱体积除糖，除盐，然后经体积百分含量分别为10%，20%，30%，40%，50%，60%，70%，80%，100%（V乙醇：V水）的醇水系统梯度洗脱，收集40%-80%段的洗脱液，合并，浓缩回收乙醇得到6.32克灰黄色固体粗品。将粗品溶于60克体积百分含量为95%的酒精中，加热回流30分钟，过滤，滤液冷却至室温，然后于-8℃静止保存8个小时析出2.12克橙黄色固体纯品，含量测定表明纯度为99.31%。

实施例2

将干燥虎杖根茎磨成粉末，取700克加入3500克体积百分含量为80%的乙醇于水浴中加热回流提取7小时，过滤，过滤再后重复提取2次，合并提取液。提取液浓缩到250克，加入3000mL水稀释，搅匀。往稀释液中加入1400毫升的二氯甲烷萃取，重复两次，合并萃取液，回收二氯甲烷。往下层水层加入1800mL的正丁醇，搅拌萃取，重复两次，合并萃取液，浓缩回收正丁醇，得到12.86克固体。往经正丁醇萃取后的水层加入质量百分含量为98%的硫酸调节pH值到4.5，然后加入二氯甲烷650毫升，搅拌，油浴加热水解反应5小时，然后冷却到室温，分出上层有机层，用水洗至水层成中性即止，浓缩回收溶剂得到13.43克固体。将12.86克正丁醇萃取物与13.43克水解产物合并，用1000mL体积百分含量为20%的乙醇水溶液溶解，溶解液经超声除气，过滤，然后经恒流泵上样到已经装好柱并经前处理的500克大孔树脂HP-20层析柱中。上样完毕后，用纯水洗脱3个柱体积除糖，除盐，然后分别经以下体积百分含量10%，20%，30%，40%，50%，60%，70%，80%，100%（V乙醇：V水）的醇水系统梯度洗脱，收集40%-80%段的洗脱液，合并，浓缩回收酒精得到8.12克灰黄色固体粗品。将粗品溶于80克体积百分含量98%的乙醇中，加热回流40分钟，过滤，滤液冷却至室温，然后于-5℃静止保存7个小时析出3.31克橙黄色固体纯品，含量测定表明纯度为99.25%。

实施例3

将干燥虎杖根茎磨成粉末，取1000克加入4500克体积百分含量为85%的乙醇于水浴中加热回流提取6小时，过滤，过滤再后重复提取3次，合并提取液。提取液浓缩到400克，加入4500mL水稀释，搅匀。往稀释液中加入1700毫升的二氯甲烷萃取，重复两次，合并萃取液，回收二氯甲烷。往下层水层加入3000mL的正丁醇，搅拌萃取，重复两次，合并萃取液，浓缩回收正丁醇，得到17.24克固体。往经正丁醇萃取后的水层加入质量百分含量为98%的硫酸调节pH值到4.7，然后加入二氯甲烷1000毫升，搅拌，油浴加热水解反应5小时，然后冷却到室温，分出上层有机层，用水洗至水层成中性即止，浓缩回收溶剂得到15.53克固体。将17.24克正丁醇萃取物与15.53克水解产物合并，用1000mL体积百分含量为20%的乙醇水溶液溶解，溶解液经超声除气，过滤，然后经恒流泵上样到已经装好柱并经前处理的500克大孔树脂HP-20层析柱中。上样完毕后，用纯水洗脱3个柱体积除糖，除盐，然后分别经体积百分含量为10%，20%，30%，40%，50%，60%，70%，80%，100%（V乙醇：V水）的醇水系统梯度洗脱，收集40%-80%段的洗脱液，合并，浓缩回收酒精得到10.13克灰黄色固体粗品。将粗品溶于90克95%酒精中，加热回流50分钟，过滤，滤液冷却至室温，然后于-7℃静止保存6个小时析出4.86克橙黄色固体纯品，含量测定表明纯度为99.11%。

实施例4

将干燥虎杖根茎磨成粉末，取600克加入1800克体积百分含量为90%的乙醇于水浴中加热回流提取5小时，过滤，过滤再后重复提取3次，合并提取液。提取液浓缩到500克，加入5000mL水稀释，搅匀。往稀释液中加入1650毫升的环己烷萃取，重复3次，合并萃取液，回收环己烷。往下层水层加入2750mL的正丁醇，搅拌萃取，重复1次，合并萃取液，浓缩回收正丁醇，得到正丁醇萃取物，往经正丁醇萃取后的水层加入质量百分含量98%硫酸调节pH值到4，然后加入二氯甲烷1375毫升，搅拌，油浴加热水解反应6小时，然后冷却到室温，分出上层有机层，用水洗至水层成中性即止，浓缩回收溶剂得到水解产物。将正丁醇萃取物与水解产物合并，用1000mL体积百分含量为20%的乙醇水溶液溶解，溶解液经超声除气，过滤，然后经恒流泵上样到已经装好柱并经前处理的500克大孔树脂HP-20层析柱中。上样完毕后，用纯水洗脱3个柱体积除糖，除盐，然后经体积百分含量分别为10%，20%，30%，40%，50%，60%，70%，80%，100%（V乙醇：V水）的醇水系统梯度洗脱，收集40%-80%段的洗脱液，合并，浓缩回收乙醇得到灰黄色固体粗品，将粗品溶于体积百分含量为95%的酒精中，加热回流30分钟，过滤，滤液冷却至室温，然后于-8℃静止保存8个小时析出橙黄色固体纯品，含量测定表明纯度为99.15%。

以上实施例仅用于阐述本发明，而本发明的保护范围并非仅仅局限于以上实施例。所述技术领域的普通技术人员依据以上本发明公开的内容和各参数所取范围，均可实现本发明的目的。

Claims (1)

1.一种从虎杖中提取总蒽醌苷元的方法，其特征是含以下步骤：  

(1) 在虎杖中加入提取溶剂，经加热回流提取后，过滤除去滤渣，将提取液浓缩，得粗提物浓缩液；  

(2) 将粗提物浓缩液加水稀释得粗提取物稀释液，然后用低极性有机溶剂脱脂，得脱脂后稀释液；  

(3) 在脱脂后的稀释液中加入正丁醇萃取后，将正丁醇萃取液浓缩得到正丁醇萃取物；  

(4) 向正丁醇萃取后的水相中加入低极性的有机溶剂和无机酸，加热进行水解反应，水解完毕后，取出上层有机相，用水洗至水相呈中性，蒸干有机溶剂得到水解产物；  

(5) 将步骤(4)中获得的水解产物与步骤(3)中获得的正丁醇萃取物合并，经大孔树脂层析，醇水系统梯度洗脱，得到总蒽醌苷元粗品；  

(6) 将总蒽醌苷元粗品经重结晶得到高纯度总蒽醌苷元产品;

步骤(1)中提取溶剂为乙醇水溶液，其中乙醇的体积百分含量为70~90%，乙醇水溶液的用量为虎杖质量的3~5倍；

步骤(1)中加热回流时间为5~8小时，加热温度为75℃-80℃，提取次数为3~4次；

步骤(2)中粗提物浓缩液和水的质量体积比为1g:10~15mL，所述低极性有机溶剂为二氯甲烷或环己烷，其用量占粗提物稀释液总体积的0.3~0.5倍，脱脂次数为2~3次，合并萃取液得脱脂后稀释液；

步骤(4)中所述的低极性有机溶剂为二氯甲烷，其用量占粗提物稀释液总体积的1/5~1/4；

步骤(4)中向正丁醇萃取后的水相中加入无机酸调节溶液的pH值为4~5，加热进行水解反应5~6h，加热温度为60℃-70℃，其中所述的无机酸为硫酸或盐酸；

步骤(5)中所述大孔树脂为低极性大孔树脂，所述的低极性大孔树脂为AB-8或HP-20，所述醇水系统包括体积百分含量分别为10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的乙醇水溶液，经大孔树脂层析后，收集乙醇体积百分含量为40~80%段的洗脱液部分，蒸干即得到总蒽醌苷元粗品；

步骤(6)中采用乙醇进行重结晶，乙醇的体积百分含量为90~98%，乙醇的用量为总蒽醌苷元粗品总质量的8-10倍，重结晶时的温度为-5~-10℃，静置时间为5~8小时，然后析晶得到纯度高于99%的总蒽醌苷元产品。

 2.根据权利要求1所述的从虎杖中提取总蒽醌苷元的方法，其特征是：步骤(1)中将提取液浓缩至原体积的1/15~1/10。  

3.根据权利要求1所述的从虎杖中提取总蒽醌苷元的方法，其特征是：步骤(3)中正丁醇的加入量占粗提物稀释液总体积的0.5~1倍，萃取次数为1~2次。