CN102372752A

CN102372752A - 一种从秦艽中提取龙胆苦苷的方法

Info

Publication number: CN102372752A
Application number: CN2010102630708A
Authority: CN
Inventors: 李法庆; 杨成东; 刘东锋
Original assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Suzhou Baozetang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2010-08-26
Filing date: 2010-08-26
Publication date: 2012-03-14

Abstract

本发明公开了一种从秦艽中提取龙胆苦苷的方法，方法是把秦艽粉碎，加入10-15倍水溶液加热提取2-3次，提取液加入大孔树脂吸附，洗脱液采用纳滤膜浓缩，浓缩液过聚酰胺树脂柱纯化，下柱液乙酸乙酯萃取浓缩结晶，重结晶，真空低温干燥得产品。采用本发明生产龙胆苦苷，生产量大、成本低，工艺易操作。本发明适合工业化生产。

Description

一种从秦艽中提取龙胆苦苷的方法

技术领域：

本发明涉及一种从秦艽中提取龙胆苦苷的方法，尤其是涉及一种用树脂柱和生物膜手段分离龙胆苦苷的方法。

背景技术：

龙胆苦苷，环烯醚萜苷类物质。

分子式：C₁₆H₂₀O₉；

理化性质：白色针状结晶(乙酸乙酯)，含结晶水熔点121℃。无结晶水熔点191℃。溶于水、乙醇、乙酸乙酯，不溶于乙醚、石油醚。在酸碱条件下或受热易分解。

龙胆苦苷具有保护肝脏、抗氧化、抗炎、镇痛及抗肿瘤等作用。药理研究表明，龙胆苦苷对化学性及免疫性肝损伤具有保护作用。因此，对于这样一种有效部位明确、药理活性明显的中药，对其运用现代化的方法进行分离纯化具有一定的实际意义。天然龙胆苦苷主要从龙胆科植物秦艽根部得来，也有从叶或花中提取。

秦艽龙胆科植物秦艽Gentiana macrophylla Pall.、麻花秦艽Gentiana straminea Maxim.、粗茎秦艽Gentiana cras-sicaulis Duthie ex Burk.或小秦艽Gentiana dahurica Fisch.的干燥根。性味辛、苦，平。主要用于祛风湿，清湿热，止痹痛。

纳滤膜是允许溶剂分子或某些低分子量溶质或低价离子透过的一种功能性的半透膜。它是一种特殊而又很有前途的分离膜品种，它因能截留物质的大小约为纳米而得名。纳滤膜浓缩无需加热，适合受热易分解的物质。是近几年在制药领域得到了认可和运用。

目前，提取龙胆苦苷多是有机试剂提取，再大孔树脂分离或硅胶柱分离，随着科技的进展，分离方法也有运用逆流色谱分离和超临界萃取。

如专利(申请号CN200810176032.1)“一种从白花龙胆花中提取龙胆苦苷的工艺”，该专利公开的方法是将干燥的白花龙胆花粉碎后，在室温下利用乙醇作为提取溶剂进行冷浸提取，经浓缩、大孔树脂吸附、干燥后得到纯度较高的龙胆苦苷。

再如专利“一种制备高纯度龙胆苦苷的方法”，该专利公开的方法是采用逆流色谱制备龙胆苦苷。

还有专利“一种龙胆苦苷的制备方法”，该专利公开的方法是取条叶龙胆根及根茎粉末，加入到超临界萃取器中，甲醇作为夹带剂，得萃取物，通过大孔吸附树脂吸附，乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，加入乙酸乙酯-水-甲醇结晶。

一些文献还采用了微波和超声加速提取效率，还有一些文献只详细比较了不同大孔树脂吸附量及解析率。

如上所述现有提取工艺存在工艺不完整性、生产成本高或处理量小等问题。

发明内容：

本发明要解决技术问题是提供一种操作简便、生产成本低的提取龙胆苦苷的方法。

发明人经三年实验摸索，为进一步降低成本，减少能耗和污染，以现有工艺为基础，优化出本发明技术方案。

本发明采用技术方案如下：

一种从秦艽中提取龙胆苦苷的方法，其特征在于包含以下步骤：

1)提取：取秦艽药材粉碎10-60目，加入10-15倍量水加热搅拌提取2-3小时，提取2-3次，滤过合并得提取液；

2)大孔树脂吸附：把上述提取液加入大孔树脂柱吸附，水洗无糖色，40-60％乙醇洗脱龙胆苦苷，得洗脱液；

3)膜浓缩：上述洗脱液，加入纳滤膜系统纳滤，至无醇，得浓缩液；

4)聚酰胺分离：把上述浓缩液，加入聚酰胺柱吸附，收集下柱液；

5)萃取：将上述下柱液加入乙酸乙酯萃取3-4次，减压回收乙酸乙酯至1/5-1/8体积，放置结晶；

6)重结晶：将上述重结晶滤出，用乙酸乙酯回流溶解结晶，滤出真空低温干燥即得龙胆苦苷。

所述步骤1)中加热温度不超过60℃。

所述步骤2)中大孔树脂型号可选S-8、ADS-7、HZ806或SPD-800中的一种，洗脱剂用量5-7倍柱体积。

所述步骤3)纳滤膜为截留分子量200的中空复合膜。

所述步骤4)中的聚酰胺为120-200目。

本发明采用水提取龙胆苦苷，温度低充分搅拌，也可以提取出有效成分，这样可以降低醇提成本，同时也无需浓缩可以直接上柱，节约能源，减少SO₂污染，大孔树脂纯化后，膜浓缩浓缩温度低，有效的减少了龙胆苦苷的分解，再加聚酰胺柱分离，和单纯树脂柱分相比，含量可以提高50-80％，在后续只需结晶即可得到高含量产品，和超临界萃取及逆流色谱分离比较，具有生产量大、工艺操作简单的优势。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式：

具体实施方式：

实施例1：

秦艽药材粉碎10目，取10千克，投入200L中试提取罐中，加入100kg水加热50℃，搅拌提取3小时，抽取上清液，再加同样条件提取2次，合并提取液过滤，常温加入10L S-8大孔树脂柱吸附，流速15L/H，吸附结束后，水洗树脂柱无糖色，50L60％乙醇洗脱龙胆苦苷，得洗脱液，加入截留分子量200的纳滤膜浓缩，进口压力保持0.5mpa，至无醇，加入2L聚酰胺树脂柱，流速控制为1L/h，收集下柱液，转入分离器中加入等体积的乙酸乙酯搅拌萃取4次，收集乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯至原体积的1/8，放置结晶，滤出结晶物，再用乙酸乙酯回流溶解重结晶，得针状结晶物，低温真空干燥，得龙胆苦苷110g，含量98.2％。

实施例2：

秦艽药材粉碎60目，取10千克，投入200L中试提取罐中，加入150kg水加热60℃，搅拌提取2小时，抽取上清液，再加同样条件提取2次，合并提取液过滤，常温加入10LADS-7大孔树脂柱吸附，流速20L/H，吸附结束后，水洗树脂柱无糖色，70L40％乙醇洗脱龙胆苦苷，得洗脱液，加入截留分子量200的纳滤膜浓缩，进口压力保持0.6mpa，至无醇，加入2L聚酰胺树脂柱，流速控制为1.5L/h，收集下柱液，转入分离器中加入2倍体积的乙酸乙酯搅拌萃取3次，收集乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯至原体积的1/5，放置结晶，滤出结晶物，再用乙酸乙酯回流溶解重结晶，得针状结晶物，低温真空干燥，得龙胆苦苷108g，含量98.7％。

实施例3：

秦艽药材粉碎20目，取10千克，投入200L中试提取罐中，加入100kg水加热40℃，搅拌提取3小时，抽取上清液，再加同样条件提取2次，合并提取液过滤，常温加入10L HZ806大孔树脂柱吸附，流速10L/H，吸附结束后，水洗树脂柱无糖色，60L50％乙醇洗脱龙胆苦苷，得洗脱液，加入截留分子量200的纳滤膜浓缩，进口压力保持0.4mpa，至无醇，加入2L聚酰胺树脂柱，流速控制为1L/h，收集下柱液，转入分离器中加入等体积的乙酸乙酯搅拌萃取4次，收集乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯至原体积的1/6，放置结晶，滤出结晶物，再用乙酸乙酯回流溶解重结晶，得针状结晶物，低温真空干燥，得龙胆苦苷115g，含量95％。

实施例4：

秦艽药材粉碎40目，取10千克，投入200L中试提取罐中，加入150kg水加热50℃，搅拌提取2小时，抽取上清液，再加同样条件提取1次，合并提取液过滤，常温加入10L SPD-800大孔树脂柱吸附，流速10L/H，吸附结束后，水洗树脂柱无糖色，60L55％乙醇洗脱龙胆苦苷，得洗脱液，加入截留分子量200的纳滤膜浓缩，进口压力保持0.6mpa，至无醇，加入2L聚酰胺树脂柱，流速控制为1L/h，收集下柱液，转入分离器中加入等体积的乙酸乙酯搅拌萃取4次，收集乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯至原体积的1/5，放置结晶，滤出结晶物，再用乙酸乙酯回流溶解重结晶，得针状结晶物，低温真空干燥，得龙胆苦苷102g，含量98％。

实施例5：

秦艽药材粉碎20目，取100千克，投入3000L提取罐中，加入1500kg水加热50℃，搅拌提取3小时，抽取上清液，再加同样条件提取2次，合并提取液过滤，常温加入100L S-8大孔树脂柱吸附，流速130L/H，吸附结束后，水洗树脂柱无糖色，600L50％乙醇洗脱龙胆苦苷，得洗脱液，加入截留分子量200的纳滤膜浓缩，进口压力保持0.6mpa，至无醇，加入20L聚酰胺树脂柱，流速控制为25L/h，收集下柱液，转入萃取罐中加入等体积的乙酸乙酯搅拌萃取3次，收集乙酸乙酯层，减压回收乙酸乙酯至原体积的1/6，放置结晶，滤出结晶物，再用乙酸乙酯回流溶解重结晶，得针状结晶物，低温真空干燥，得龙胆苦苷1076g，含量98.5％。

Claims

1.一种从秦艽中提取龙胆苦苷的方法，其特征在于包含以下步骤：

2.如权利要求1所述从秦艽中提取龙胆苦苷的方法，其特征在于所述步骤1)中加热温度不超过60℃。

3.如权利要求1所述从秦艽中提取龙胆苦苷的方法，其特征在于所述步骤2)中大孔树脂型号可选S-8、ADS-7、HZ806或SPD-800中的一种，洗脱剂用量5-7倍柱体积。

4.如权利要求1所述从秦艽中提取龙胆苦苷的方法，其特征在于所述步骤3)纳滤膜为截留分子量200的中空复合膜。

5.如权利要求1所述从秦艽中提取龙胆苦苷的方法，其特征在于所述步骤4)中的聚酰胺为120-200目。