CN102351958A - 黄芪多糖钙络合物的制备方法及用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及黄芪多糖钙络合物的制备方法及用途，可有效解决水溶性差，补钙吸收率低，影响服用效果的问题，方法是，将黄芪药材加入水中提取，过滤，得黄芪多糖溶液；在黄芪多糖溶液中逐滴加入CaCl2离子溶液，边滴加边搅拌，直到饱和为止，同时滴加NaOH离子溶液进行络合反应，使溶液达到pH值为9-11时停止，再放置搅拌0.5-2小时，得黄芪多糖钙络合物溶液，再用透析袋进行透析，或进行浓缩过滤，然后加入质量浓度为95%的乙醇至乙醇含量达到80-85%，静置8-24h，经过滤或离心分离，得沉淀物，沉淀物经干燥粉碎成颗粒，即为黄芪多糖钙络合物，本发明水溶性好，吸收率高，是中药上的一大创新。
Description
技术领域
本发明涉及医药，特别是一种黄芪多糖钙络合物的制备方法及用途。
背景技术
多糖是醛糖和酮糖通过糖苷缩合而成的天然多聚体，广泛存在于高等植物、藻类和微生物中，是生物有机体基本组成成分，与维持生命的许多重要功能密切相关。黄芪多糖可作为免疫促进剂或调节剂，同时具有抗病毒、抗肿瘤、抗衰老、抗辐射、抗应激、抗氧化等作用。目前市场上常见的补钙产品钙源吸收形式多为离子钙，钙离子在人体胃肠内往往容易与其他阴离子发生反应，产生沉淀，水溶性差，降低了钙离子的浓度，影响吸收，服用效果受到不良影响。
发明内容
针对上述情况，为克服现有技术之不足，本发明之目的就是提供一种黄芪多糖钙络合物的制备方法及用途，可有效解决水溶性差，补钙吸收率低，影响服用效果的问题。
本发明解决的技术方案是，由以下步骤实现：
（1）制黄芪多糖溶液：以黄芪药材为原料，按比例每100g的干燥黄芪药材加入800-3000mL的蒸馏水或饮用水中，70-98℃提取2-3次，每次2-8小时，过滤后得黄芪多糖溶液；
（2）配制CaCl2离子溶液和NaOH离子溶液：将CaCl2加入水中，配制成浓度为2mol/L的CaCl2离子溶液；将NaOH加入水中，配制成浓度为2mol/L的NaOH离子溶液；
（3）络合反应：在步骤（1）制备的黄芪多糖溶液中逐滴加入步骤（2）中制得的浓度为2mol/L的CaCl2离子溶液80-150mL，边滴加边搅拌，直到饱和为止，同时滴加步骤（2）中制得的浓度为2mol/L的NaOH离子溶液进行络合反应，使溶液达到pH值为9-11时停止加入氢氧化钠溶液，再放置搅拌0.5-2小时，得黄芪多糖钙络合物溶液，所得的黄芪多糖钙络合物溶液用透析袋进行透析，透析的截留分子量为8000-14000，得透析液，或对黄芪多糖钙络合物溶液进行浓缩过滤，得除去小分子后的滤液，透析液或除去小分子后的滤液中加入质量浓度为95%的乙醇至乙醇含量达到80-85%，静置8-24h，经过滤或离心分离，得沉淀物，沉淀物经干燥粉碎成颗粒，即为黄芪多糖钙络合物。
本发明有效克服了现有钙离子在人体胃肠内往往容易与其他阴离子发生反应，产生沉淀，降低了钙离子的浓度，影响吸收，服用效果受到影响的问题，从而开发出了一种水溶性好，吸收率高的生物大分子补钙制剂，是中药上的一大创新。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明的具体实施方式作详细说明。
实施例1
本发明在具体实施中，是由以下步骤实现的：
（1）制黄芪多糖溶液：取干燥黄芪100g，粉碎，每100g黄芪粉内加入2000mL的蒸馏水，85℃提取3次，每次5小时，过滤除去残渣，合并滤液，得黄芪多糖溶液；
（2）配制CaCl2离子溶液和NaOH离子溶液：将CaCl2加入水中，配制成浓度为2mol/L的CaCl2离子溶液；将NaOH加入水中，配制成浓度为2mol/L的NaOH离子溶液；
（3）络合反应：在步骤（1）制备的黄芪多糖溶液中逐滴加入步骤（2）中制得的浓度为2mol/L的CaCl2离子溶液100mL，边滴加边搅拌，同时滴加步骤（2）中制得的浓度为2mol/L的NaOH离子溶液进行络合反应，使溶液达到pH值为9时停止加入氢氧化钠溶液，再放置搅拌0.5小时，得黄芪多糖钙络合物溶液，所得的黄芪多糖钙络合物溶液用截留分子量为8000-14000的透析袋进行透析，得透析液，或利用纳滤装置对黄芪多糖钙络合物溶液进行浓缩过滤，得除去小分子后的滤液，透析液或除去小分子后的滤液中加入质量浓度为95%的乙醇至乙醇含量达到80%，静置10h，经过滤或离心分离，得沉淀物，沉淀物经干燥后，用粉碎机粉碎成颗粒，即为灰白色的黄芪多糖钙络合物。
实施例2
本发明在实施中，还可由以下方法实现：
步骤同实施例1，取干燥的黄芪药材粗粉200g，加水3000mL，89℃水浴提取3次，每次6小时，过滤去掉残渣，滤液合并，加入2mol/L的CaCl2溶液，用2mol/L的NaOH溶液调节pH值为10，室温下放置9小时，得黄芪多糖钙络合物溶液，所得的黄芪多糖钙络合物溶液用截留分子量为8000-14000的透析袋进行透析，得透析液，或利用纳滤装置对黄芪多糖钙络合物溶液进行浓缩过滤，得除去小分子后的滤液，透析液或除去小分子后的滤液中加入质量浓度为95%的乙醇至乙醇含量达到82%，静置18h，经过滤或离心分离，得沉淀物，沉淀物经干燥后，用粉碎机粉碎成颗粒，即为灰白色的黄芪多糖钙络合物。
实施例3
本发明在实施中，也是由以下方法实现：
按实施例1步骤制备，其中原料用黄芪药材50g，加水1500mL，95℃水浴提取2次，每次7小时，过滤去掉残渣，滤液合并，加入2mol/L的CaCl2溶液，并同时加入2mol/L的NaOH溶液调pH值为11，搅拌1小时，室温下放置13小时，得黄芪多糖钙络合物溶液，所得的黄芪多糖钙络合物溶液用截留分子量为8000-14000的透析袋进行透析，得透析液，或利用纳滤装置对黄芪多糖钙络合物溶液进行浓缩过滤，得除去小分子后的滤液，透析液或除去小分子后的滤液中加入质量浓度为95%的乙醇至乙醇含量达到85%，静置22h，经过滤或离心分离，得沉淀物，沉淀物经干燥后，用粉碎机粉碎成颗粒，即为灰白色的黄芪多糖钙络合物。
本发明的黄芪多糖钙络合物，服用时当钙离子与黄芪多糖形成一种螯合型盐时，钙不以离子形式被吸收，它不会被人体的酸碱环境破坏，也不会受到食物中植酸、草酸的影响，在胃肠道粘膜直接吸收，避免了体内结石，同时黄芪多糖提高了机体免疫力。为了充分开发黄芪药材资源，而且在不需加压条件下使黄芪多糖与钙发生络合反应生成具有不同功能的黄芪多糖钙络合物作为食品添加剂和医用，从而提供一种用黄芪做原料提取黄芪多糖，再与钙离子络合反应生成黄芪多糖钙络合物，用乙醇沉淀、分离、干燥制备出药用黄芪多糖钙络合物。
本发明的黄芪多糖钙络合物是利用中药材黄芪作原料，在不需加压的条件下，通过络合反应获得该产物，该产品作为食品添加剂或医药用，尤其作为预防和治疗骨质疏松症药物有着实用价值，因为采用天然原料生产，可以无毒无副作用，另外其生产方法简单，易于大规模生产。
本发明的黄芪多糖钙络合物可作食品添加剂，也可以药用，它是一种预防和治疗骨质疏松症的药物，还可以提高免疫及预防和治疗心血管疾病，并可作保护大脑神经的药物，黄芪多糖钙络合物抗骨质疏松的作用其结果如下：
用维甲酸制造小鼠骨质疏松模型，灌服维甲酸七天小鼠的后腿站立不起，十二天后不能行走，实验组灌服黄芪多糖钙络合物，对照组灌服罗钙全和注射降钙素，用药十五天后所用的实验动物注射硫喷妥钠麻醉进行X-光拍照，观察其骨骼的病理变化。结果表明灌服黄芪多糖钙络合物小鼠的骨骼、关节发白，发亮，与注射降钙素情况不相上下，而对照组和罗钙全组小鼠全身多处骨折，关节点发黑。用硫酸喷妥钠麻醉后，空白对照组、阳性药物对照组都大批死亡，如罗钙全组小鼠死亡接近50%，而黄芪多糖钙络合物组几乎全部存活下来，而且活得健康活泼这说明黄芪多糖钙络合物不但有防治骨质疏松作用，还有提高免疫和保护大脑神经的作用。并经动物试验取得了满意的效果，有关试验资料如下：
A、黄芪多糖钙络合物动物活性实验情况：
取昆明种小鼠159只，体重20±5g，雌雄各半，分11组。
实验药品为：
A. 钙片 碳酸钙制剂
B. 维酸钾 用于制造骨质疏松模型。
C. 降钙素 治疗骨质疏松特效药。
D. 罗钙全 维生素D3的生物活性药。
E. 活性钙 市售
F. 氨基酸螯合钙 由河南中医学院提供
G. 黄芪多糖钙络合物 本发明制剂
实验过程：用以上各药除降糖素肌肉注射外，其余全部以灌胃方式给药。给药剂量，维酸钾每日一次，每鼠2mg。阳性对照药降钙素每鼠肌注0.05ml，三天一次。罗钙全灌胃为0.5ml,内含0.00125μg，每三天一次。活性钙与钙片（碳酸钙制剂）均每鼠每天2.5mg，溶于0.5ml水中，氨基酸螯合钙0.5ml。实验用黄芪多糖钙络合物分二个组，一个高剂量组400mg/kg，一个低剂量组300mg/kg。
小鼠骨骼生长情况：实验12天后，用硫喷妥钠麻醉，拍照X光片，骨骼生长情况列入下表。小鼠用硫喷妥钠麻醉后，各组都有死亡，其中，氨基酸螯合钙实验组和罗钙全实验组死亡率最高，黄芪多糖络合钙实验组死亡最少，该实验在两年内共重复八次，每年进行4次实验，实验结果趋势相同，平均实验数据见下表：
| 组别 | 原有只数 | 死亡只数 | 小鼠状态 | 骨骼状况* |
| 维甲酸+钙片（碳酸钙制剂） | 15 | 6 | 差 | 一般 |
| 维甲酸+活性钙 | 15 | 6 | 差 | 一般 |
| 维甲酸+黄芪多糖钙（L） | 12 | 1 | 活泼 | 关节点亮 |
| 维甲酸+黄芪多糖钙（H） | 12 | 1 | 活泼 | 关节点亮 |
| 维甲酸+氨基酸螯合钙 | 15 | 8 | 奄奄一息 | 发黑 |
| 维甲酸+降钙素 | 15 | 5 | 差 | 一般 |
| 维甲酸+罗钙全 | 15 | 7 | 差 | 一般 |
| 维甲酸 | 15 | 6 | 不活动，差 | 发黑 |
| 黄芪多糖钙（L） | 15 | 1 | 活泼 | 发白发亮 |
| 黄芪多糖钙（H） | 15 | 1 | 活泼 | 关节点亮 |
| 对照 | 15 | 4 | 差，不活泼 | 一般 |
*骨骼发白发亮为骨密度高，发黑为骨质疏松
黄芪多糖钙络合物组几乎全部存活下来，骨骼发白、发亮，而且活得健康活泼，说明黄芪多糖钙络合物不但有防治骨质疏松作用，还有提高免疫和保护大脑神经的作用。
B、黄芪多糖钙络合物毒理学实验
NIH系小鼠（体重20-30g）30只，雌雄混合，分二组，一组为对照组一组为黄芪多糖微量元素钙络合物实验组，两组所有饲料相同。以4.0g/kg的剂量给实验组小鼠灌服黄芪多糖微量元素钙络合物。灌胃15天，无一死亡。观察其外观行为无异常，将小鼠处死，观察内脏无异常，并将心、肝、肾做成石蜡切片，在显微镜下进行镜检，结果未发现任何异常。仅算出口服最大耐受量为8.1g·kg-1KD50 kg-1,属无毒物质。
上述实验结果清楚的表明，本发明黄芪多糖钙络合物具有防治骨质疏松及提高免疫力和保护大脑神经的作用且无毒副作用，开拓了黄芪多糖钙络合物在制备防治骨质疏松、提高免疫力和保护大脑神经作用药物中的应用（新用途），是中药上有一大创新，经济和社会效益巨大。
Claims (5)
1.一种黄芪多糖钙络合物的制备方法,其特征在于，由以下步骤实现：
（1）制黄芪多糖溶液：以黄芪药材为原料，按比例每100g的干燥黄芪药材加入800-3000mL的蒸馏水或饮用水中，70-98℃提取2-3次，每次2-8小时，过滤后得黄芪多糖溶液；
（2）配制CaCl2离子溶液和NaOH离子溶液：将CaCl2加入水中，配制成浓度为2mol/L的CaCl2离子溶液；将NaOH加入水中，配制成浓度为2mol/L的NaOH离子溶液；
（3）络合反应：在步骤（1）制备的黄芪多糖溶液中逐滴加入步骤（2）中制得的浓度为2mol/L的CaCl2离子溶液80-150mL，边滴加边搅拌，直到饱和为止，同时滴加步骤（2）中制得的浓度为2mol/L的NaOH离子溶液进行络合反应，使溶液达到pH值为9-11时停止加入氢氧化钠溶液，再放置搅拌0.5-2小时，得黄芪多糖钙络合物溶液，所得的黄芪多糖钙络合物溶液用透析袋进行透析，透析的截留分子量为8000-14000，得透析液，或对黄芪多糖钙络合物溶液进行浓缩过滤，得除去小分子后的滤液，透析液或除去小分子后的滤液中加入质量浓度为95%的乙醇至乙醇含量达到80%-85%，静置8-24h，经过滤或离心分离，得沉淀物，沉淀物经干燥粉碎成颗粒，即为黄芪多糖钙络合物。
2.根据权利要求1所述的黄芪多糖钙络合物的制备方法,其特征在于，将所述的干燥黄芪粉碎成粉，每100g黄芪粉内加入2000mL的蒸馏水，85℃提取3次，每次5小时，过滤除去残渣，合并滤液，得黄芪多糖溶液；在黄芪多糖溶液中逐滴加浓度为2mol/L的CaCl2离子溶液100mL，边滴加边搅拌，同时滴加浓度为2mol/L的NaOH离子溶液进行络合反应，使溶液达到pH值为9，停止加入氢氧化钠溶液，再放置搅拌0.5小时，得黄芪多糖钙络合物溶液，所得的黄芪多糖钙络合物溶液用截留分子量为8000-14000的透析袋进行透析，得透析液，或利用纳滤装置对黄芪多糖钙络合物溶液进行浓缩过滤，得除去小分子后的滤液，透析液或除去小分子后的滤液中加入质量浓度为95%的乙醇至乙醇含量达到80%，静置10h，经过滤或离心分离，得沉淀物，沉淀物经干燥后，用粉碎机粉碎成颗粒，即为灰白色的黄芪多糖钙络合物。
3.根据权利要求1所述的黄芪多糖钙络合物的制备方法,其特征在于，将所述的干燥黄芪粉碎成粉，每200g黄芪粉中加水3000mL，89℃水浴提取3次，每次6小时，过滤去掉残渣，滤液合并，得黄芪多糖溶液；加入2mol/L的CaCl2溶液，用2mol/L的NaOH溶液调节pH值为10，室温下放置9小时，得黄芪多糖钙络合物溶液，所得的黄芪多糖钙络合物溶液用截留分子量为8000-14000的透析袋进行透析，得透析液，或利用纳滤装置对黄芪多糖钙络合物溶液进行浓缩过滤，得除去小分子后的滤液，透析液或除去小分子后的滤液中加入质量浓度为95%的乙醇至乙醇含量达到82%，静置18h，经过滤或离心分离，得沉淀物，沉淀物经干燥后，用粉碎机粉碎成颗粒，即为灰白色的黄芪多糖钙络合物。
4.根据权利要求1所述的黄芪多糖钙络合物的制备方法,其特征在于，将所述的干燥黄芪粉碎成粉，每50g黄芪粉中加水1500mL，95℃水浴提取2次，每次7小时，过滤去掉残渣，滤液合并，加入2mol/L的CaCl2溶液，并同时加入2mol/L的NaOH溶液调pH值为11，搅拌1小时，室温下放置13小时，得黄芪多糖钙络合物溶液，所得的黄芪多糖钙络合物溶液用截留分子量为8000-14000的透析袋进行透析，得透析液，或利用纳滤装置对黄芪多糖钙络合物溶液进行浓缩过滤，得除去小分子后的滤液，透析液或除去小分子后的滤液中加入质量浓度为95%的乙醇至乙醇含量达到85%，静置22h，经过滤或离心分离，得沉淀物，沉淀物经干燥后，用粉碎机粉碎成颗粒，即为灰白色的黄芪多糖钙络合物。
5.权利要求1或2或3或4所述的黄芪多糖钙络合物在制备防治骨质疏松、提高免疫力和保护大脑神经作用药物中的应用。
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