CN102274328B - 一种治疗银屑病的药物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

一种治疗银屑病的药物，由以下重量份配比的原料制成：黄芩100～500份、关黄柏或黄柏60～400份、硬脂酸100～150份、硬脂醇60～100份、白凡士林100～200份、三乙醇胺10～20份、甘油40～60份、十二烷基硫酸钠8～12份、月桂氮卓酮30～50份、羟苯乙酯0.5～1.5份、亚硫酸氢钠0.5～1.5份。该药物的制备方法，包括黄芩预处理、关黄柏或黄柏预处理、油相的配制、水相的配制、乳化步骤。本发明的治疗银屑病的药物易吸收、疗效高、毒副作用小、便于患者使用和贮存。

Description

一种治疗银屑病的药物及其制备方法

技术领域

本发明涉及药物及其制备方法，尤其涉及一种治疗银屑病的药物及其制备方法。

背景技术

银屑病属于慢性、反复发作的难治性皮肤病，是一种原因不明而常见的无传染性红斑鳞屑性皮肤病，又称牛皮癣，分为寻常性、关节病型、红皮症型和脓疮型四型，以寻常性最常见。祖国医学称之为“白庀”、“庀风”、“松皮癣”等，中医认为本病多因七情内伤，气机壅滞，郁久化火，热毒蕴伏营血；病久或反复发作，阴血耗劫，气血失和，化燥失风，以致血燥。治疗以清热凉血、滋阴养血、活血化瘀为主。西医则认为本病与遗传、感染、代谢障碍、免疫功能失调有关。病理表现系渗出增生性炎性过程，表皮角化过度，角化不全，棘细胞增厚，角质层内有中性多形核白细胞堆积，形成Monro小脓疡。表皮突呈规则性向下延伸，乳头延长水肿，呈杆状。真皮毛细血管扩张，有血管周围浸润，浸润成分主要为小园淋巴细胞，结缔组织细胞及少数多形核白细胞。

银屑病是当前皮肤科领域内重点研究的疾病之一，其发病率有逐年增高的趋势。目前西医治疗该病一般使用皮质类固醇激素、焦油类、维生素A衍生物、维生素D衍生物、蒽林、甲氨蝶呤、环孢素等，由于这些药物只是分别针对银屑病复杂发病机制环节中的一部分，所以治疗难以彻底，同时，多数药物本身对患者机体都有一定毒副作用，而且银屑病的治疗一般需要2～3个月的时间，使其不良反应几乎难以避免。

而中医药治疗银屑病方法众多，方药丰富，给药途径灵活多样，疗效较高且副作用小，显示了中医“辨证论治”之特色和优势，并已取得了显著成绩。目前对银屑病的复发问题尚不能有效解决，而用中药治愈者，则可延缓复发时间。

现代医学认为银屑病的特征性变化为角质形成细胞的过度增殖、异常角化和炎细胞的浸润，清热解毒药能抑制表皮细胞的过度增殖、促进表皮颗粒层形成，防止皮损部位的继发感染，发挥综合作用而达到治疗效果。

寻常型银屑病中医一般分为血热、血虚、血燥、血瘀等证候，临床上中医治疗本病除遵循辨证施治原则外，选用现代医学实验室已证实有很好抑制表皮增生、清热解毒止痒的中药外用是提高银屑病治愈率的重要手段。外用药物虽不能完全达到根治效果，但在内服中药的基础上合理的配合外用药物治疗能使病情获得近期或长期的缓解，在一定程度上改善患者的心理或社会生活质量，达到控制病情、延长缓解期、减少药物的不良反应的效果。

在银屑病的治疗过程中，虽常用内外兼治的方法，但外用药在其中起到了很重要的作用，配合内服中药能收到事半功倍的效果，其作用机理有待于进一步研究。但由于原制剂用中药材粉碎后直接配制，工艺粗糙，不易吸收，致敏性较高，患者在使用过程中容易弄脏衣服，给患者的使用带来诸多不便。

发明内容

本发明旨在克服现有技术的不足，提供一种治疗银屑病的药物(又称双黄解毒乳膏)及其制备方法，以期降低此药物的致敏性，增强疗效，并且方便患者的使用。

本发明所述的治疗银屑病的药物，其特点是，由以下重量份配比的原料制成：黄芩100～500份、关黄柏或黄柏60～400份、硬脂酸100～150份、硬脂醇60～100份、白凡士林100～200份、三乙醇胺10～20份、甘油40～60份、十二烷基硫酸钠8～12份、月桂氮卓酮30～50份、羟苯乙酯0.5～1.5份、亚硫酸氢钠0.5～1.5份。

优选配方为：黄芩230～250份、关黄柏或黄柏150～170份、硬脂酸110～130份、硬脂醇70～90份、白凡士林140～160份、三乙醇胺14～16份、甘油45～55份、十二烷基硫酸钠9～11份、月桂氮卓酮35～45份、羟苯乙酯0.8～1.2份、亚硫酸氢钠0.8～1.2份。

最优配方为：黄芩240份、关黄柏或黄柏160份、硬脂酸120份、硬脂醇80份、白凡士林150份、三乙醇胺15份、甘油50份、十二烷基硫酸钠10份、月桂氮卓酮40份、羟苯乙酯1份、亚硫酸氢钠1份。

本发明所述的治疗银屑病的药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、黄芩预处理：将黄芩加水煎煮1～3次后，合并煎液，过滤、滤液减压浓缩至每2ml药液中含原药材1g，再用乙醇溶液精制至每1ml药液中含原药材1g；

b、关黄柏或黄柏预处理：将关黄柏或黄柏用乙醇溶液回流提取1～3次后，过滤，滤液减压浓缩至每1ml药液中含原药材1g；

c、油相的配制：将硬脂酸、硬脂醇和白凡士林加热熔融后，作为油相；

d、水相的配制：将三乙醇胺和甘油水浴加热至90℃作为水相，将十二烷基硫酸钠、月桂氮卓酮、羟苯乙酯和亚硫酸氢钠加热溶解后加入水相中；

e、乳化：在温度80～90℃左右时，将预处理后的关黄柏或黄柏、黄芩和水相溶液加入到油相中，边加边搅拌，使乳化完全，并充分搅拌均匀即可。

步骤a中所述的乙醇精制为：向减压浓缩后的黄芩煎液中加入乙醇溶液使含醇量达60vt％(vt体积百分比，下同)，搅拌均匀后静置24小时，再于压力0.08MPa，温度60℃条件下减压浓缩。。

步骤a中所述的煎煮加水量为黄芩质量的8倍，煎煮时间为每次1小时。

步骤a中或步骤b中所述的减压浓缩的压力为0.08MPa，温度60℃。

步骤b中所述的对关黄柏或黄柏乙醇回流提取加入的乙醇溶液浓度为75vt％，加入量为关黄柏或黄柏质量的8倍，每次提取1小时。

步骤c中所述的加热温度为90℃。

步骤e中所述的温度为85℃。

本发明所述的治疗银屑病的药物疗效高、毒副作用小、便于患者使用和贮存。通过制剂学、药效学、毒理学和质量控制、稳定性等方面的研究，证明本乳膏剂具有明显的吸收快、质量稳定、安全、有效、方便。

本发明所述的治疗银屑病的药物的制备方法工艺精细，所制备出的治疗银屑病的药物易吸收、疗效高、毒副作用小、便于患者使用和贮存。

双黄解毒乳膏处方主要由黄芩、黄柏二味药组成，方中黄芩味苦性寒，归肺、大小肠、脾、胆经，具清热解毒，燥湿止痒作用，为君药；黄柏味苦性寒，归肾、膀胱经，苦能燥湿，寒能清热，配合君药加强清热燥湿解毒之功效，为臣药。全方施于体表皮肤，直接作用于皮损处，以更好地发挥清热解毒、祛风止痒的作用。同时配合白庀病的不同中医证候，内服清热、凉血、解毒之中药，使内外热毒去、湿热清，则红斑变暗变淡，鳞屑减退，从而获得满意疗效。根据双黄解毒乳膏的处方组成、药理试验结果以及原医院制剂的应用经验，拟定本制剂在临床用于寻常型银屑病血热型者。

本制剂所述的双黄解毒乳膏性质温和，刺激性小，相对不易激惹刺激新发皮疹，避免了目前上市外用药物容易激发皮疹的副作用。

本发明中所述的双黄解毒乳膏的使用方法为：外用，将患处用温水清洗干净后涂抹适量，一日1～2次。拟定疗程为6周。

具体实施方式

实施例1

取黄芩240g加8倍量水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每2ml药液中含原药材1g，加乙醇使含醇量达60vt％，搅匀，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每1ml药液中含原药材1g，备用。取关黄柏160g加8倍量75vt％乙醇回流提取三次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每1ml药液中含原药材1g，备用。取硬脂酸120g、硬脂醇80g、白凡士林150g，水浴加热至90℃熔融，作为油相；另取三乙醇胺15g、甘油50g，水浴加热至90℃作为水相；将十二烷基硫酸钠10g、月桂氮卓酮40g、羟苯乙酯1g和亚硫酸氢钠1g于水中加热溶解后加入水相中。在温度接近85℃时，依次将水相、关黄柏和黄芩浓缩液缓缓加入油相中，边加边搅拌，使乳化完全，并充分搅拌均匀，制成1000g，即得。

实施例2

取黄芩210g加8倍量水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每2ml药液中含原药材1g，加乙醇使含醇量达60vt％，搅匀，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每1ml药液中含原药材1g，备用。取黄柏130g加8倍量75vt％乙醇回流提取三次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每1ml药液中含原药材1g，备用。取硬脂酸110g、硬脂醇70g、白凡士林110g，水浴加热至90℃熔融，作为油相；另取三乙醇胺11g、甘油45g，水浴加热至90℃作为水相；将十二烷基硫酸钠9g、月桂氮卓酮35g、羟苯乙酯0.6g和亚硫酸氢钠0.6g于水中加热溶解后加入水相中。在温度接近85℃时，依次将水相、黄柏和黄芩浓缩液缓缓加入油相中，边加边搅拌，使乳化完全，并充分搅拌均匀，制成1000g，即得。

实施例3

取黄芩290g加8倍量水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每2ml药液中含原药材1g，加乙醇使含醇量达60vt％，搅匀，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每1ml药液中含原药材1g，备用。取黄柏230g加8倍量75vt％乙醇回流提取三次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每1ml药液中含原药材1g，备用。取硬脂酸140g、硬脂醇90g、白凡士林190g，水浴加热至90℃熔融，作为油相；另取三乙醇胺19g、甘油55g，水浴加热至90℃作为水相；将十二烷基硫酸钠11g、月桂氮卓酮45g、羟苯乙酯1.4g和亚硫酸氢钠1.4g于水中加热溶解后加入水相中。在温度接近85℃时，依次将水相、黄柏和黄芩浓缩液缓缓加入油相中，边加边搅拌，使乳化完全，并充分搅拌均匀，制成1000g，即得。

实施例4

取黄芩120g加8倍量水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每2ml药液中含原药材1g，加乙醇使含醇量达60vt％，搅匀，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每1ml药液中含原药材1g，备用。取黄柏350g加8倍量75vt％乙醇回流提取三次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每1ml药液中含原药材1g，备用。取硬脂酸140g、硬脂醇90g、白凡士林190g，水浴加热至90℃熔融，作为油相；另取三乙醇胺19g、甘油55g，水浴加热至90℃作为水相；将十二烷基硫酸钠11g、月桂氮卓酮45g、羟苯乙酯1.4g和亚硫酸氢钠1.4g于水中加热溶解后加入水相中。在温度接近85℃时，依次将水相、黄柏和黄芩浓缩液缓缓加入油相中，边加边搅拌，使乳化完全，并充分搅拌均匀，制成1000g，即得。

实施例5

取黄芩450g加8倍量水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每2ml药液中含原药材1g，加乙醇使含醇量达60vt％，搅匀，静置24小时，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每1ml药液中含原药材1g，备用。取关黄柏100g加8倍量75vt％乙醇回流提取三次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压浓缩(0.08MPa，60℃)至每1ml药液中含原药材1g，备用。取硬脂酸140g、硬脂醇90g、白凡士林190g，水浴加热至90℃熔融，作为油相；另取三乙醇胺19g、甘油55g，水浴加热至90℃作为水相；将十二烷基硫酸钠11g、月桂氮卓酮45g、羟苯乙酯1.4g和亚硫酸氢钠1.4g于水中加热溶解后加入水相中。在温度接近85℃时，依次将水相、关黄柏和黄芩浓缩液缓缓加入油相中，边加边搅拌，使乳化完全，并充分搅拌均匀，制成1000g，即得。

一、动物实验

(一)主要药效学实验

双黄解毒乳膏，具有清热除湿，解毒止痒之功，用于治疗白庀，湿疮，湿毒，顽癣等。我们选择的动物模型和药效指标，主要针对其病理损害特征和其疾病的炎性渗出与增生过程。

第一个模型：盐酸普萘洛尔涂抹豚鼠耳廓引起耳廓皮肤银屑病样病变：表皮过度角化，角化不全，棘细胞增厚，角质内有淋巴细胞、多形核白细胞浸润，偶有小脓疡，可能与普萘洛尔可减少细胞内cAMP有关。

第二个模型：ip雌激素，造成雌性小鼠阴道上皮细胞处于(雌激素期)有丝分裂期，细胞有丝分裂代表细胞增殖功能，若此功能过度则与皮肤银屑病变有关。观察双黄解毒乳膏对阴道上皮细胞有丝分裂的抑制作用，有助于说明双黄解毒乳膏的作用和部分原理。

第三个模型：小鼠尾部皮肤表皮颗粒层形成情况，用双黄解毒乳膏后，观察对颗粒层形成的影响，若有促进表皮颗粒层形成的作用，促进皮肤正常角化，则有利于银屑病治疗。

第四个模型：角叉菜胶致大鼠足跖肿、大鼠腋下棉球肉芽肿和小鼠腹部毛血管通透性试验，分别代表急性、慢性炎型模型和毛血管渗出状况观察模型。列为药效指标，目的是观察双黄解毒乳膏对炎症、毛血管通透性的作用，因为银屑病全过程都有急慢性炎症的问题，此项药效研究对银屑病既有对症意义亦有对因治疗意义。

阳性对照药选用丙酸氯倍他索软膏(2mg/10g)，为国药准字号药物。选择原因有两个：此药在银屑病治疗中，广泛应用，对症治疗疗效确切；银屑病纯中药治疗外用制剂，尚无国家准字号药。

1、对小鼠雌激素期阴道上皮细胞有丝分裂的影响

取健康雌性小鼠50只，体重26.2±1.4g，腹腔注射已烯雌酚0.2mg/只，每日1次，连续3d，使其处于雌激素期，然后依体重均衡随机分5组，每组10只，即：基质对照组、阳性对照药丙酸氯倍他索软膏组(0.02％)、双黄解毒乳膏小、中、大(浓度为0.2、0.4、0.8g生药/g乳膏)三个剂量组，每日涂抹阴道两次，间隔4小时，每次50μl/20g，连续3d，末次给药后1h，腹腔注射秋水仙碱2mg/kg，6h后处死小鼠，取其阴道组织，用10％福尔马林固定，石蜡包埋，HE染色，光镜下计数300个阴道上皮基底细胞的有丝分裂数，其百分率为有丝分裂指数。

表1  双黄解毒乳膏对小鼠雌激素期阴道上皮细胞有丝分裂的影响(

n＝10)

注：与基质对照组比较*P＜0.05。

结果，双黄解毒乳膏中、大剂量和阳性对照药可显著降低小鼠阴道上皮细胞有丝分裂指数(见表1)。

2、对小鼠尾部表皮颗粒层形成的影响

取健康小鼠50只，19.7±1.3g，雌雄各半，依性别、体重均衡随机分为5组，每组10只，分基质对照组，阳性对照药丙酸氯倍他索软膏组(0.02％)，双黄解毒乳膏小、中、大(浓度为0.2、0.4、0.8g生药/g乳膏，每次4、8、16mg生药/cm²)三个剂量组，每日两次涂抹鼠尾，间隔4小时，20mg乳膏/cm²，连续15d，末次给药2h后处死全部小鼠，取距鼠尾根部1.8cm尾背部皮肤一长条，用10％福尔马林固定，石蜡包埋，常规制片，HE染色，于光镜下(400X)观测鼠尾表皮颗粒层形成情况。

表2  双黄解毒乳膏对小鼠尾部表皮颗粒层形成的影响(

n＝10)

注：与基质对照组比较*P＜0.05。

结果，双黄解毒乳膏中、大剂量和阳性对照药可显著促进小鼠尾部表皮颗粒层形成(见表2)。

3、对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀的影响

取大鼠50只，体重144.2±7.1g，雌雄兼用，按体重、性别随机均衡分为基质对照组，阳性对照药丙酸氯倍他索软膏组(0.02％)，双黄解毒乳膏小、中、大(0.2、0.4、0.8g生药/g乳膏，每次4、8、16mg生药/cm²)三个剂量组。各组大鼠右后足涂抹给药，约2cm²，20mg乳膏/cm²，每天2次，连续五天。末次给药30min后，测量右后足跖厚度，然后每鼠右后足跖注射1％角叉菜胶溶液50μl，注射后用千分卡尺测量1h、2h、3h、5h、7h各组大鼠右后足跖厚度，依其致炎前后足跖厚度差值表示肿胀度。

表3  双黄解毒乳膏对大鼠角叉菜胶致右后足跖肿的影响

注：与基质对照组比较*P＜0.05，括号内为抑制率(％)

结果，双黄解毒乳膏和阳性对照药外用对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀均有一定抑制作用，双黄解毒乳膏中、大剂量在前3小时作用更显著(表3)。

4、对大鼠棉球肉芽肿的影响

取健康Wistar大鼠50只，雌雄各半，体重158.1±9.9g。依体重性别均衡随机分为基质对照组、阳性对照药丙酸氯倍他索组、三个不同剂量的双黄解毒乳膏组(浓度为0.2、0.4、0.8g生药/g乳膏，每次4、8、16mg生药/cm²)，每组10只。另取棉球20±1mg，高压灭菌，加入氨苄青霉素(10mg/ml)0.1ml/个，50℃烘干。在乙醚浅麻醉下，无菌操作，于大鼠两前肢腋下切一小口，将两个灭菌棉球分别植入两侧腋窝部皮下，缝合皮肤。给药方法：术后当天各给药组开始腋下涂抹给药，20mg乳膏/cm²(约4-5cm²)，每天2次，连续7天。末次给药2小时后拉颈椎处死大鼠，打开原切口，将棉球及周围结缔组织一起取出，剔去脂肪组织，经60℃烘干至恒重，减去原棉球重，即为肉芽肿重。计算各组肉芽肿重量，做统计学分析。并计算药物对肉芽肿形成的抑制率(％)。

表4  双黄解毒乳膏对大鼠棉球肉芽肿的影响(

n＝10)

注：与基质组比较*P＜0.05

结果，双黄解毒乳膏大剂量和阳性对照药可显著抑制大鼠棉球肉芽肿的形成(见表4)。

5、双黄解毒乳膏对盐酸普萘洛尔致豚鼠耳廓皮肤银屑样皮损模型的影响

盐酸普萘洛尔乳擦剂的制备：取盐酸普萘洛尔5g加50vt％乙醇使其溶解，加入Azone-丙二醇5ml作为复合促进剂，加入PVP-K₃₀5g为成模材料，补加50％乙醇至100ml，即可。

造模取健康白色豚鼠55只，雌雄兼用，每只豚鼠用上述5％盐酸普萘洛尔乳擦剂涂抹两侧耳廓皮肤(0.1ml/cm²)每日两次，连续两周。另取10只健康白色豚鼠为空白组。末次给药后杀死空白组和模型组各5只，分别取双侧耳廓皮肤标本，10％甲醛溶液固定，常规制片，HE染色，光镜下观察以此评价造模质量。

取银屑病成模豚鼠50只，体重412.8±33.8g，雌雄兼用，依体重性别随机分为模型组，阳性对照药(0.02％丙酸氯倍他索)组，双黄解毒乳膏(浓度为0.2、0.4、0.8g生药/g乳膏，每次4、8、16mg生药/cm²)，每组10只。模型组不用任何药物，作为皮肤损害模型自然恢复组。其余各组20mg乳膏/cm²(约4-5cm²)耳廓涂抹，每日给药2次，右侧涂抹基质，左侧抹药。用药2周后，处死动物，取豚鼠两侧耳廓皮肤用10％甲醛固定，常规制片，HE染色，做病理组织学检查。观察耳部皮肤角化层、颗粒层、棘细胞层、基底细胞层及固有层的变化。

结果，模型组豚鼠耳廓有类似人银屑病的组织病理学改变，表皮角质层过度角化，广泛或灶状角化不全，棘层变厚，钉突延长，角质层内有小脓肿，真皮层中-重度炎细胞浸润，并有血管炎表现。双黄解毒乳膏对此模型有治疗作用，以大剂量作用为佳。

6、双黄解毒乳膏对二甲苯致小鼠皮肤毛细血管通透性的影响

取健康小鼠60只，雌雄兼用，体重19.9±1.5g。依体重性别均衡随机分为基质对照组、阳性对照药丙酸氯倍他索组、三个不同剂量的双黄解毒乳膏组(浓度为0.2、0.4、0.8g生药/g乳膏，每次4、8、16mg生药/cm²)，每组12只。腹部去毛(面积为2cm×2cm)，涂抹药物20mg乳膏/cm²，每天两次，连续5d。末次给药1h后，小鼠尾静脉注射0.5％伊文思兰生理盐水溶液0.1ml/10g，立即于小鼠腹部正中部位去毛皮肤上滴二甲苯0.03ml/只，20分钟后处死，剥下腹部皮肤，在滴二甲苯处用打孔器打下相同面积的皮肤(1.0cm孔径)，每块皮肤蓝斑用手术剪剪碎投入具塞试管内，倒入丙酮-硫酸钠提取液(精密称取无水硫酸钠1.5g溶于蒸馏水中成150ml，再缓缓向硫酸钠溶液中加入丙酮350ml，即成)10ml，置暗处放置。每日轻轻摇动试管2-3次，3日后3000r/min离心15min，取上清液于590nm比色测定其吸收值。

表5  双黄解毒乳膏对小鼠皮肤毛细血管通透性的影响

注：与基质对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01

结果，双黄解毒乳膏和阳性对照药外用抑制二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性的增加(表5)。

从实验结果可以看出，双黄解毒乳膏局部外用对小鼠雌激素期阴道上皮细胞的有丝分裂有抑制作用，中、大剂量与基质对照组比较有显著性差异(P＜0.05)。对小鼠尾部颗粒层形成有促进作用，中、大剂量与基质对照组比较有显著性差异(P＜0.05)。说明双黄解毒乳膏有抑制表皮细胞过度增生并诱导表皮颗粒细胞生成，抑制表皮过度角化，提示可能有抗银屑病作用。双黄解毒乳膏还能抑制二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性的增加，从而减轻急性炎症期的炎性渗出。减少大鼠棉球肉芽肿的重量，能够抑制角叉菜胶诱发的足趾肿胀，提示该药对急慢性炎症均有抑制作用。对盐酸普萘洛尔所致豚鼠耳廓皮肤银屑样模型，双黄解毒乳膏对其病理有改善和逆转作用。上述实验结果为双黄解毒乳膏临床治疗白庀提供实验依据。

(二)急性毒性试验

试验依据依《中药、天然药物急性毒性研究指导原则》([Z]GPT2-1，2005)进行。用新西兰种白色家兔，雌雄各半，分为基质对照组，双黄解毒乳膏小、大两个剂量组(浓度0.4g生药/g乳膏、1.2g生药/g乳膏)，每组家兔10只。各剂量组又分完整皮肤和破损皮肤组。脊柱两侧剪毛150cm²。涂敷不同浓度的双黄解毒乳膏、基质均为2.0g，记录观察给药后24h和14天内动物情况。

结果，无一只家兔死亡，各组家兔外观、精神状态、摄食、饮水、毛皮、呼吸均无异常，口眼鼻耳未见分泌物，大、小便也无异常。给药组与基质组比较，完整皮肤、破损皮肤均无红斑、水肿及皮肤颜色变化，病理学检查给药皮肤局部未见病理学改变。依判断标准，未见用药局部皮肤和全身任何毒性反应。

(三)长期毒性试验

Wistar大鼠120只，雌雄各半，6-8周龄，依体重、性别均衡分成基质对照组，小、中、大三个双黄解毒乳膏组(分别为100、200、300mg生药/cm².d，分别相当于成人每日每cm²用量的12.5、25.0、37.5倍)，皮肤去毛区外涂给药，用0.4、0.8、1.2g生药/g乳膏三个浓度，每次125mg乳膏/cm²，每日2次。连续给药6个月。观察每日大鼠精神状态、粪便、皮毛情况；每周测体重、进水量。给药6个月及停药四周后检查体重、脏器系数、血常规(13项)、血生化指标(15项)，并做主要脏器病理检查(30种脏器，包括给药局部皮肤)。

双黄解毒乳膏三个剂量，100、200、300mg生药/cm²·d，每日2次，每次用1/2量(分别相当于成人每日每cm²用量的12.5、25.0、37.5倍)，皮肤给药，每天分上、下午各1次，连续6个月。双黄解毒乳膏各给药组大鼠与基质对照组大鼠比较，摄食量、摄水量、脏器系数均明显无差异，雌性大鼠体重与基质对照组大鼠比较显统计学差异。给药组大鼠血常规的MCH、MCV、HCT、MCHC、RET等指标与基质对照组大鼠比较显统计学差异，给药组大鼠血生化指标CK、TP、ALP、BUN、Cl、GOT、GPT、TBI、ALB、TRI、CRE与基质对照组大鼠比较显统计学差异，但无量效关系，提示在临床研究中注意观察。给药剂量组大鼠其余各血常规、血生化指标与基质对照组大鼠比较未见统计学差异。病理组织学检查未见与药物作用有关的病理改变(病理报告及照片附后)。故认为双黄解毒乳膏皮肤外用在规定剂量与时限内对大鼠无明显毒性。

毒理试验结果表明：双黄解毒乳膏药效起效剂量为8mg生药/cm².d，与临床拟用量(4mg生药/cm²，每日两次)剂量相同。六个月长毒试验结果：初步提供大鼠安全用量为300mg/cm²，为临床人拟用量的37.5倍。病理组织学检查对给药局部皮肤未造成病理性损伤。故可以认为双黄解毒乳膏皮肤外用在规定剂量与时限内对大鼠无明显毒性。

(四)过敏性和局部刺激性试验

4.1过敏性试验(主动过敏试验)

白色豚鼠，雌雄各半，分为基质对照组、2.4-二硝基氯苯阳性对照组，双黄解毒乳膏小、大两个剂量组(浓度为0.4g生药/g乳膏、0.8g生药/g乳膏)，每组10只。皮肤接触致敏，基质与双黄解毒乳膏每次0.2ml，阳性对照药每次为0.2ml，第7天和14天重复一次，共三次。激发方式：致敏14天后，以基质、不同浓度双黄解毒乳膏和0.1％2，4-二硝基氯苯均为0.2ml于致敏对侧皮肤涂敷激发接触。以评分标准评分和致敏性评价标准确定致敏率(见表6、表7)。

表6  双黄解毒乳膏豚鼠皮肤致敏评分结果

表7  豚鼠皮肤过敏反应情况

结果2，4-二硝基氯苯组豚鼠涂药皮肤有水肿、焦痂、破溃，并有站立不稳、呼吸困难、休克等全身症状，有一只豚鼠死亡，致敏率为100％。基质和双黄解毒乳膏组豚鼠涂药的皮肤无红斑、红肿，亦无呼吸困难、站立不稳、休克等症状，致敏率为0％。依皮肤致敏性评价标准评价，双黄解毒乳膏对豚鼠皮肤外用无致敏性。

4.2皮肤刺激性试验

白色家兔，给药前24h，每只家兔对称剪去脊柱两侧毛，左右各3×3cm；破损皮肤以消毒针头(4-6号)对消毒皮肤作“井”字形划痕，以渗血为度。0.4g生药/g乳膏或0.8g生药/g乳膏0.5ml涂于左侧脱毛区，基质0.5ml涂于右侧脱毛区。然后以消毒纱布覆盖，无刺激胶布固定，保证药物贴敷达6h以上，贴敷后以温蒸馏水洗去基质与受试物。每天给药2次，连续7天。末次给药去除药物后30-60min、24h、48h和72h肉眼观察并评分，判断受试物有无刺激和刺激的强度(见表8)。

表8  双黄解毒乳膏对家兔皮肤刺激性的反应评分

局部刺激性试验结果表明：双黄解毒乳膏各剂量受试物对完整皮肤和破损皮肤均无刺激性，涂药局部皮肤组织无任何病理改变。

二、临床实验

双黄解毒乳膏的临床研究采用维A酸乳膏为阳性平行对照，分区组随机、双盲、多中心的临床研究设计方案，考察双黄解毒乳膏治疗白庀病(寻常型银屑病血热型者)的临床疗效和安全性。按照《药品注册管理办法》附件一的要求及统计学计算，将受试例数定为240例，试验组和对照组各120例。以寻常型银屑病血热型者的皮损面积、红斑、鳞屑、瘙痒程度、浸润肥厚程度及相关体征变化情况为疗效性指标，并以治疗前后病理组织切片镜检和电镜检查对照。以血、尿、便常规、心电图、肝、肾功能等为安全性指标，疗程设定为8周。各临床试验中心完成的病例报告表由专业统计分析人员进行分析和统计，作为临床研究总结报告的依据。根据双黄解毒乳膏Ⅱ期、Ⅲ期临床试验的结果，最后确定双黄解毒乳膏临床安全有效的应用剂量和治疗方案。

下面提供几个典型病例

典型病例1.住院号205642，田**，入院：2008年9月5日  出院：2008年9月17日

同时口服中药，药浴，配合使用维A酸软膏，有效率100％，无过敏。

用药前：全身散在蚕豆大小红斑疹，上覆银白色鳞屑。

用药后：全身红斑疹消退，间见淡褐色色素沉着。

典型病例2.住院号108203吴**，入院：2008年7月28日  出院：2008年8月26日

同时口服中药，药浴，阿维A胶囊，黑光，有效率100％，无过敏。

用药前：全身见片状红斑，浸润厚，上覆大量银白色鳞屑，伴瘙痒明显。

用药后：片状红斑消退，见暗红色色素沉着，脱屑不明显，瘙痒无。

Claims (10)

1.一种治疗银屑病的药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤:

a、黄芩预处理:将黄芩加水煎煮1～3次后，合并煎液，过滤、滤液减压浓缩至每2m1药液中含原药材1g，再用乙醇溶液精制至每lml药液中含原药材1g；

b、关黄柏或黄柏预处理:将关黄柏或黄柏用乙醇溶液回流提取1～3次后，过滤，滤液减压浓缩至每lml药液中含原药材1g；

c、油相的配制:将硬脂酸、硬脂醇和白凡士林加热熔融后，作为油相；

d、水相的配制:将三乙醇胺和甘油水浴加热至90℃作为水相，将十二烷基硫酸钠、月桂氮卓酮、轻苯乙酷和亚硫酸氢钠加热溶解后加入水相中；

e、乳化:在温度80～90℃左右时，将预处理过的关黄柏或黄柏、黄芩和水相溶液加入到油相中，边加边搅拌，使乳化完全，并充分搅拌均匀即可；

所述原料的重量份配比：黄芩100～500份、关黄柏或黄柏60～400份、硬脂酸100～150份、硬脂醇60～100份、白凡士林100～200份、三乙醇胺10～20份、甘油40～60份、十二烷基硫酸钠8～12份、月桂氮卓酮30～50份、羟苯乙酯0.5～1.5份、亚硫酸氢钠0.5～1.5份。

2.根据权利要求1所述的治疗银屑病的药物的制备方法，其特征在于，步骤a中所述的乙醇精制为:向减压浓缩后的黄芩煎液中加入乙醇溶液使含醇量达60vt%，搅拌均匀后静置24小时，再于压力0.08MPa,温度60℃条件下减压浓缩。

3.根据权利要求1所述的治疗银屑病的药物的制备方法，其特征在于，步骤a中所述的煎煮加水量为黄芩质量的8倍，煎煮时间为每次1小时。

4.根据权利要求1所述的治疗银屑病的药物的制备方法，其特征在于，步骤a中或步骤b中所述的减压浓缩的压力为0.08MPa,温度60℃。

5.根据权利要求1所述的治疗银屑病的药物的制备方法，其特征在于，步骤b中所述的对关黄柏或黄柏乙醇回流提取所用的乙醇溶液浓度为75vt%，用量为关黄柏或黄柏质量的8倍，每次提取1小时。

6.根据权利要求1所述的治疗银屑病的药物的制备方法，其特征在于，步骤c中所述的加热温度为90℃。

7.根据权利要求1所述的治疗银屑病的药物的制备方法，其特征在于，步骤e中所述的温度为85℃。

8.根据权利要求1所述的治疗银屑病的药物的制备方法，其特征在于，所述原料的重量份配比：黄芩200～300份、关黄柏或黄柏100～320份、硬脂酸110～130份、硬脂醇70～90份、白凡士林140～160份、三乙醇胺14～16份、甘油45～55份、十二烷基硫酸钠9～11份、月桂氮卓酮35～45份、羟苯乙酯0.8～1.2份、亚硫酸氢钠0.8～1.2份。

9.根据权利要求8所述的治疗银屑病的药物的制备方法，其特征在于，所述原料的重量份配比：黄芩240份、关黄柏或黄柏160份、硬脂酸120份、硬脂醇80份、白凡士林150份、三乙醇胺15份、甘油50份、十二烷基硫酸钠10份、月桂氮卓酮40份、羟苯乙酯1份、亚硫酸氢钠1份。

10.一种治疗银屑病的药物，其特征在于，所述治疗银屑病的药物是依权利要求1～9任一所述的制备方法制得。