CN103463308B - 茶多酚硬脂酸酯的应用以及一种治疗银屑病的药物组合物 - Google Patents
茶多酚硬脂酸酯的应用以及一种治疗银屑病的药物组合物 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了茶多酚硬脂酸酯的应用以及一种治疗银屑病的药物组合物,属于茶多酚硬脂酸酯技术领域。所述茶多酚硬脂酸酯和含有茶多酚硬脂酸酯的药物组合物可用于治疗银屑病。
Description
技术领域
本发明属于茶多酚硬脂酸酯技术领域,具体涉及茶多酚硬脂酸酯的应用以及一种治疗银屑病的药物组合物。
背景技术
银屑病(Psoriasis),俗称牛皮癣,是一种由多基因遗传决定的、多环境因素刺激诱导的免疫异常性慢性炎症性增生性皮肤病;银屑病的主要病理改变是表皮角质形成细胞增生过度和异常分化、角化不全、缺乏颗粒层,皮肤新生血管形成和炎性细胞浸润等。其临床表现主要是患处皮肤反复产生多层银白色干燥鳞屑,鳞屑下分布有广泛浸润性红斑和明显的出血点,大多数患者具有瘙痒症状。
银屑病病因不明,发病机制十分复杂且尚未被完全阐明,目前尚无完全根治的方法。该病发病率高且顽固难治,在全球范围内已有超过二千万、在我国已有超过六百万的银屑病患者;近年来该病发病率呈持续升高趋势且病情更趋顽固,易复发常需反复治疗;皮肤瘙痒与皮损的不雅外观,不仅严重影响患者的身体健康,而且给患者及其家庭带来沉重的经济负担和心理负担,患者倍感痛苦,生活质量受到严重影响,该病已成为世界卫生组织及皮肤病研究领域重点研究和防治的疾病之一。
目前,银屑病的药物治疗,包括化学药物、中药、生物制剂及其联合应用的系统及局部治疗;现有治疗药物虽多,常用的如维A酸、地蒽酚、甲氨蝶呤、环孢素、依那西普及地塞米松等糖皮质激素等都存在不足之处:治疗效果大多只能达到近期临床疗效,不能有效延长患者的缓解期,难以控制复发,更难以治愈该病;多数药物具有程度不一的不良反应,患者难以耐受[参见《内蒙古医学杂志》2012,44(6):707-719“银屑病的治疗进展”];而且部分药物价格昂贵;从安全性考虑,局部用药优于系统治疗。因此,从天然产物中筛选并开发安全、高效且经济的新型银屑病治疗药物是十分有意义的工作。
茶叶对皮肤的保护作用及对皮肤病的治疗作用在中医药古籍中早有记载,茶多酚(GreenTeaPolyphenols,GTP)是茶叶中多羟基酚类化合物的总称,大量研究表明,茶多酚毒副作用小,具有广泛的药理作用和优良的抗氧化性能。文献报道了茶多酚对银屑病动物模型的有效治疗作用[参见《ExperimentalDermatology》2007;16:678–684.“Greenteapolyphenolinducescaspase14inepidermalkeratinocytesviaMAPKpathwaysandreducespsoriasiformlesionsintheflakyskinmousemodel”],不足之处是茶多酚容易被氧化导致稳定性差、脂溶性差导致透膜能力弱,给其广泛应用带来困难。
脂溶性茶多酚是研究者为了克服茶多酚的上述不足,通过对其化学改性,研制出的茶多酚的8碳以上的脂肪酸酯,是茶多酚对应组分的一酯化、二酯化或多酯化物的混合物;茶多酚硬脂酸酯(GreenTeaPolyphenolsStearates,GTPS)是脂溶性茶多酚的一种产品,基于其优良的安全性、抗氧化性等特点,目前,市场上流通的茶多酚硬脂酸酯主要被用作食用油酯和食品的抗氧化剂,未见应用茶多酚硬脂酸酯治疗银屑病的报道。
发明内容
本发明的目的是解决上述问题而提供了一种可以治疗银屑病的茶多酚硬脂酸酯以及一种药物组合物。
本发明所采用的技术方案是:
茶多酚硬脂酸酯的应用,所述茶多酚硬脂酸酯可用于治疗银屑病。
一种治疗银屑病的药物组合物,所述药物组合物由下述重量百分比的成分组成:茶多酚硬脂酸酯0.1%~15%,卡波姆934P0.5%~2%,三乙醇胺0.7%~3%,月桂氮卓酮0.5%~2%,无水乙醇5%~40%,丙二醇5%~15%,甘油5%~15%,羟苯乙酯0.01~0.5%,余量为纯化水。
本发明具有以下优点:
本发明将茶多酚硬脂酸酯以及一种以茶多酚硬脂酸酯为主要成分的药物组合物来用于治疗银屑病,价格低廉,使用方便采用皮肤局部给药途径,避免了银屑病系统治疗的不良反应;同时试验结果表明,本发明药物对动物皮肤急性毒性小,安全性高,能使银屑病的病理状态和症状显著改善或消失,治疗效果好;可以克服现有银屑病治疗药物安全性差、治疗效果不理想的不足,适宜用作治疗银屑病的药物,具有较好的开发应用前景。
附图说明
图1是本发明实施例9提供的正常对照组小鼠尾皮肤切片图;
图2是本发明实施例9提供的1%茶多酚硬脂酸酯凝胶剂组涂药60日后小鼠尾皮肤切片图;
图3是本发明实施例9提供的维A酸霜剂组涂药60日后小鼠尾皮肤切片图;
图4是本发明实施例10提供的正常对照组小鼠耳廓皮肤切片图;
图5是本发明实施例10提供的空白凝胶剂组造模成功后小鼠耳廓皮肤切片图;
图6是本发明实施例10提供的造模成功并涂用1%茶多酚硬脂酸酯凝胶剂30日后小鼠耳廓皮肤切片图;
图7是本发明实施例10提供的造模成功并涂用维A酸霜剂30日后小鼠耳廓皮肤切片图。
具体实施方式
下面结合附图和实施方式对本发明作进一步详细的说明。
实施例1
0.2%茶多酚硬脂酸酯凝胶剂
处方组成:
制备方法:
按处方量精密称取各组分;取卡波姆934P撒于煮沸并放冷的纯化水表面,溶胀过夜,得透明凝胶基质,搅拌下缓慢加入三乙醇胺使基质PH值为7,备用;取茶多酚硬脂酸酯、羟苯乙酯溶于无水乙醇;将上述溶液转移至备用的凝胶基质中,混合均匀,水浴80℃下搅拌1h,依次加入丙二醇、甘油、月桂氮卓酮,混合均匀,加纯化水至1000.0g,搅拌均匀,即得。
实施例2
1%茶多酚硬脂酸酯凝胶剂
处方组成:
制备方法:
按处方量精密称取各组分;取卡波姆934P撒于煮沸并放冷的纯化水表面,溶胀过夜,得透明凝胶基质,搅拌下缓慢加入三乙醇胺使基质PH值为7,备用;取茶多酚硬脂酸酯、羟苯乙酯溶于无水乙醇;将上述溶液转移至备用的凝胶基质中,混合均匀,水浴80℃下搅拌1h,依次加入丙二醇、甘油、月桂氮卓酮,混合均匀,加纯化水至1000.0g,搅拌均匀,即得。
实施例3
5%茶多酚硬脂酸酯凝胶剂
处方组成:
制备方法:
按处方量精密称取各组分;取卡波姆934P撒于煮沸并放冷的纯化水表面,溶胀过夜,得透明凝胶基质,搅拌下缓慢加入三乙醇胺使基质PH值为7,备用;取茶多酚硬脂酸酯、羟苯乙酯溶于无水乙醇;将上述溶液转移至备用的凝胶基质中,混合均匀,水浴80℃下搅拌1h,依次加入丙二醇、甘油、月桂氮卓酮,混合均匀,加纯化水至1000.0g,搅拌均匀,即得。
实施例4
10%茶多酚硬脂酸酯凝胶剂
处方组成:
制备方法:
按处方量精密称取各组分;取卡波姆934P撒于煮沸并放冷的纯化水表面,溶胀过夜,得透明凝胶基质,搅拌下缓慢加入三乙醇胺使基质PH值为7,备用;取茶多酚硬脂酸酯、羟苯乙酯溶于无水乙醇;将上述溶液转移至备用的凝胶基质中,混合均匀,水浴80℃下搅拌1h,依次加入丙二醇、甘油、月桂氮卓酮,混合均匀,加纯化水至1000.0g,搅拌均匀,即得。
实施例5
15%茶多酚硬脂酸酯凝胶剂
处方组成:
制备方法:
按处方量精密称取各组分;取卡波姆934P撒于煮沸并放冷的纯化水表面,溶胀过夜,得透明凝胶基质,搅拌下缓慢加入三乙醇胺使基质PH值为7,备用;取茶多酚硬脂酸酯、羟苯乙酯溶于无水乙醇;将上述溶液转移至备用的凝胶基质中,混合均匀,水浴80℃下搅拌1h,依次加入丙二醇、甘油、月桂氮卓酮,混合均匀,加纯化水至1000.0g,搅拌均匀,即得。
实施例6
0%茶多酚硬脂酸酯凝胶剂(空白凝胶剂)
处方组成:
制备方法:
按处方量精密称取各组分;取卡波姆934P撒于煮沸并放冷的纯化水表面,溶胀过夜,得透明凝胶基质,搅拌下缓慢加入三乙醇胺使基质PH值为7,备用;取羟苯乙酯溶于无水乙醇;将上述溶液转移至备用的凝胶基质中,混合均匀,水浴80℃下搅拌1h,依次加入丙二醇、甘油、月桂氮卓酮,混合均匀,加纯化水至1000.0g,搅拌均匀,即得。
实施例7
茶多酚硬脂酸酯凝胶剂家兔破损皮肤急性毒性试验。
取家兔16只,雌雄各半,分别于躯干背部脱毛150cm2,脱毛24小时后,确认脱毛处无异常变化,用1﹟铁砂纸轻轻摩擦脱毛处,使之发红并有组织液渗出,但以不出血为度。将破损皮肤家兔随机分为4组,每组4只,雌雄各半;一组涂敷茶多酚硬脂酸酯空白凝胶剂5g/兔,其它三组分别涂敷重量百分浓度为5.0%、10.0%、15.0%的茶多酚硬脂酸酯凝胶剂3g/兔,涂药处用油纸及纱布固定,24小时后移除受试物,每日观察并记录动物反应与死亡数,连续观察7日,死亡动物及时尸检,有异常者进行组织形态学镜检。
结果显示,4组动物无一死亡,涂药后动物一般情况良好,活动与行为无明显变化,饮食与粪便正常。
实施例8
茶多酚硬脂酸酯凝胶剂家兔完整皮肤急性毒性试验。
取家兔16只,雌雄各半,除不制备破损皮肤,受试药物与试验方法同实施例九破损皮肤急性毒性试验。
结果显示,4组动物无一死亡,涂药后动物一般情况良好,活动与行为无明显变化,饮食与粪便正常。
实施例9
茶多酚硬脂酸酯凝胶剂对小鼠尾鳞片表皮颗粒层形成的影响。
取体重20±2g昆明种健康小鼠60只,随机分为6组,即正常对照组、空白凝胶剂组、三个剂量茶多酚硬脂酸酯凝胶剂试验药物组(浓度分别为0.2%、1.0%、5.0%)、维A酸霜剂阳性药物组(浓度为0.025%),每组10只,雌雄各半。正常对照组不涂药,其它各组分别均匀涂予对应的药物于小鼠尾部,0.1g/鼠,每日二次,连续给药60日,于末次涂药后24h处死动物,取距根部约1.5cm鼠尾背面皮肤一长条,用10%甲醛溶液固定,石蜡包埋,切片,HE染色;于光学显微镜下对每个标本逐个观察鳞片表皮有无颗粒层形成,凡鳞片表皮有连续成行的颗粒细胞者,视为有颗粒层形成的鳞片,计数每100个鳞片中有颗粒层形成的鳞片数,计算每组平均值,比较组间差异,结果见表1。
表1茶多酚硬脂酸酯凝胶剂对小鼠尾鳞片表皮颗粒层形成的影响
注:与空白凝胶剂组比较,*P<0.05,**P<0.01
由上表中可见:与正常对照组(见附图1)比较,茶多酚硬脂酸酯凝胶剂对鼠尾鳞片表皮颗粒层形成具有明显的促进作用(见附图2),且中、高剂量组明显优于上市药物维A酸霜剂(见附图3),表明茶多酚硬脂酸酯可以显著改善银屑病表皮角化不全的病理状态,可以用作治疗银屑病的药物。
实施例10
茶多酚硬脂酸酯凝胶剂对小鼠普萘洛尔诱发银屑病模型的影响。
取体重20±2g昆明种健康小鼠72只,随机分为6组,每组雌雄各半,除正常对照组外,其余小鼠制备普萘洛尔诱发银屑病模型:用棉签均匀涂抹5%普萘洛尔乳剂于每鼠左耳背皮肤(0.3g/㎝2),每日二次,连续涂抹30日,于末次涂药后24h,6组每组随机抽取2只小鼠(雌雄各1只),取耳廓造模处皮肤,常规切片观察,与正常对照组比较,以角化不全、棘层肥厚等组织学改变判定模型成立。
造模成功小鼠50只,随机分为5组,即空白凝胶剂组、三个剂量茶多酚硬脂酸酯凝胶剂试验药物组(浓度分别为0.2%、1.0%、5.0%)、维A酸霜剂阳性药物组(浓度为0.025%),加上正常对照组共6组,每组10只,雌雄各半。此后开始给药,正常对照组不涂药,其它各组分别均匀涂予对应的药物于小鼠造模区域,0.1g/鼠,每日二次,连续涂药30日;从造模开始日至涂药完成日每日观察小鼠耳部造模处的外观变化;于末次涂药后24h处死动物,随即取小鼠左耳背造模处皮肤标本,用10%甲醛溶液固定,石蜡包埋、切片,HE染色;于光学显微镜下(×400)逐个标本观察皮肤的角质层、颗粒层、棘细胞层、基底细胞层、真皮层等变化,并用测微尺测定表皮的厚度,换算成实际厚度(μm),计算每组平均值,比较组间差异性。
结果:肉眼观察:造模小鼠涂抹5%普萘洛尔乳剂10日后,耳部造模处局部出现皮肤发热、红肿、增厚并覆有细小白色鳞屑,造模完成时造模处皮肤发热、红肿、增厚加重,毛发脱落,并覆有较多白色鳞屑,呈现严重银屑病症状;涂用治疗药物30日后,空白凝胶剂组小鼠严重银屑病症状持续,茶多酚硬脂酸酯凝胶剂组、维A酸霜剂组小鼠涂药处发热、红肿、增厚、覆盖鳞屑等银屑病症状均减轻或消失;期间正常对照组小鼠精神状态良好,耳廓皮肤平坦,无红肿、增厚和鳞屑覆盖。
小鼠耳廓皮肤病理切片于光学显微镜下观察:正常对照组无角化不全,颗粒层细胞扁平,棘细胞层缺如,基底层由1-2层细胞构成,真皮层无炎症细胞,组织形态学正常(见附图4);造模成功小鼠镜下可见角质层断裂,颗粒层变薄或消失,角化不全明显,棘层肥厚、由多层细胞构成,基底细胞增生活跃,真皮炎症细胞较多浸润伴真皮纤维化,呈现银屑病病理状态(见附图5);模型小鼠涂用茶多酚硬脂酸酯凝胶剂后,颗粒层细胞显著增多,表皮细胞角化不全和真皮炎症细胞明显减少,棘细胞层变薄,银屑病症状显著减轻或消失(见附图6);模型小鼠涂用维A酸霜剂后,颗粒层细胞增多不明显,表皮细胞角化不全和真皮炎症细胞有所减少,银屑病症状有所减轻,但效果不及茶多酚硬脂酸酯凝胶剂组(见附图7)。各组表皮厚度测定结果见表2。
表2茶多酚硬脂酸酯凝胶剂对小鼠普萘洛尔诱发银屑病模型表皮厚度的影响
组别 | 给鼠量(g/量) | 动物数(只) | 表皮厚度(μm) |
正常对照组 | 0.0 | 10 | 17.13±2.53 |
空白凝胶剂组 | 0.1 | 10 | 67.28±16.48 |
0.2%GTPS凝胶剂组 | 0.1 | 10 | 51.25±13.29* |
1.0%GTPS凝胶剂组 | 0.1 | 10 | 40.09±9.26** |
5.0%GTPS凝胶剂组 | 0.1 | 10 | 30.50±7.87** |
维A酸霜剂组 | 0.1 | 10 | 42.69±10.65** |
注:与空白凝胶剂组比较,*P<0.05,**P<0.01
结果表明:与空白凝胶剂组比较,茶多酚硬脂酸酯凝胶剂能使普萘洛尔银屑病模型小鼠皮肤发热、红肿、增厚、覆盖鳞屑等银屑病症状显著减轻或消失;通过促使普萘洛尔银屑病模型小鼠表皮颗粒层细胞显著增多、细胞角化不全和真皮炎症细胞明显减少、肥厚的棘细胞层变薄从而使表皮变薄,抑制表皮增生过快和异常角化,使皮损趋于消退,显著改善银屑病的病理状态;说明茶多酚硬脂酸酯可以用作治疗银屑病的药物。
实施例11
茶多酚硬脂酸酯凝胶剂对豚鼠磷酸组胺致痒作用的影响。
取体重250±15g的清洁级健康豚鼠60只,随机分为6组,即正常对照组、空白凝胶剂组、三个剂量茶多酚硬脂酸酯凝胶剂组(浓度分别为0.2%、1.0%、5.0%)、维A酸霜剂组(浓度为0.025%),每组10只,雌雄各半。实验前2d,给各组豚鼠右后足背剃毛,面积为1cm×lcm;正常对照组不涂药,其它各组涂予对应的药物,0.2g/鼠,2次/d。实验当日,用粗砂纸擦伤豚鼠右后足背剃毛处,使之发红,但以不出血为度,局部再涂药1次。末次给药后10min,在创面处用微量注射器滴以0.01%磷酸组胺,0.05ml/足,此后每隔3min以0.02%、0.03%、0.04%……递增磷酸组胺浓度,每次0.05ml/足,以出现豚鼠回头舔右后足时所给予的磷酸组胺总量为致痒阈,作为止痒反应强度的观测指标。记录并比较各组致痒阈,结果见表3。
表3茶多酚硬脂酸酯凝胶剂对豚鼠磷酸组胺致痒阈作用的影响
组别 | 给鼠量(g/量) | 动物数(只) | 致痒阈(μg) |
正常对照组 | 0.0 | 10 | 38.16±21.31 |
空白凝胶剂组 | 0.2 | 10 | 40.35±18.24 |
0.2%GTPS凝胶剂组 | 0.2 | 10 | 69.67±36.37* |
1.0%GTPS凝胶剂组 | 0.2 | 10 | 215.36±101.25** |
5.0%GTPS凝胶剂组 | 0.2 | 10 | 305.69±121.33** |
维A酸霜剂组 | 0.1 | 10 | 284.23±113.27** |
注:与正常对照组比较,*P<0.05,**P<0.01
由表3中可见:茶多酚硬脂酸酯凝胶剂能显著提高磷酸组胺对豚鼠的致痒阈,表明茶多酚硬脂酸酯具有明显的止痒作用。
实施例12
茶多酚硬脂酸酯凝胶剂对小鼠低分子右旋糖酐-40致痒作用的影响。
取体重20±2g清洁级健康昆明种小鼠60只,随机分为6组,即正常对照组、空白凝胶剂组、三个剂量茶多酚硬脂酸酯凝胶剂组(浓度分别为0.2%、1.0%、5.0%)、维A酸霜剂组(浓度为0.025%),每组10只,雌雄各半。各组小鼠右后足背部剃毛,面积为1cm×1cm;正常对照组不涂药,其它各组分别均匀涂予对应的药物于剃毛区域,0.1g/鼠,2次/d,连续3d;于末次给药后1h,各组小鼠尾静脉注射0.025%低分子右旋糖酐-40,按1.25mg/kg给药,以小鼠前爪搔抓头部,后爪搔抓躯干,嘴咬全身各部位作为瘙痒指征,观察并记录瘙抓潜伏时间、30min内小鼠瘙抓次数及瘙痒持续总时间。结果见表4。
表4茶多酚硬脂酸酯凝胶剂对低分子右旋糖酐-40致痒作用的影响。
注:与正常对照组比较,*P<0.05,**P<0.01
由表中可见:茶多酚硬脂酸酯凝胶剂能显著延长低分子右旋糖酐-40致痒小鼠瘙抓潜伏时间,减少瘙抓次数,减少瘙痒持续总时间,高剂量组明显优于阳性对照药物,表明茶多酚硬脂酸酯具有明显的止痒作用。
最后所应说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的精神和范围,其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (1)
1.一种治疗银屑病的药物组合物,其特征在于,所述药物组合物由下述重量百分比的成分组成:茶多酚硬脂酸酯0.1%~15%,卡波姆934P0.5%~2%,三乙醇胺0.7%~3%,月桂氮卓酮0.5%~2%,无水乙醇5%~40%,丙二醇5%~15%,甘油5%~15%,羟苯乙酯0.01~0.5%,余量为纯化水;所述药物组合物按下述方法制备:按处方量精密称取各组分;取卡波姆934P撒于煮沸并放冷的纯化水表面,溶胀过夜,得透明凝胶基质,搅拌下缓慢加入三乙醇胺使基质PH值为7,备用;取茶多酚硬脂酸酯、羟苯乙酯溶于无水乙醇;将上述溶液转移至备用的凝胶基质中,混合均匀,水浴80℃下搅拌1h,依次加入丙二醇、甘油、月桂氮卓酮,混合均匀,加纯化水至100%,搅拌均匀,即得。
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