CN102271660A - 制备持续释放微粒的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明描述制备持续释放微粒的方法的各种实施方式。在一种实施方式中，所述方法包括这样的步骤：形成活性试剂在聚合物中的分散相并将分散相与连续相组合以形成微粒分散体。所述方法还包括这样的步骤：将测定量的稀释组分加入微粒分散体。本文中已发现用各种量的稀释组分制备持续释放微粒的各种实施方式可改变持续型微粒对特定活性试剂的释放速率。

Description

制备持续释放微粒的方法
背景技术
形成自各种天然和合成聚合物和树脂的微粒和微球已成为用于各种活性试剂比如药物、诊断剂等的普及的递送媒介物。可降解的持续释放微粒在用于所谓的“贮库制剂”配制剂中特别有意义，其中希望在一段延长的时间内递送活性试剂。
持续释放微粒配制剂的最佳组成必须在特定时间段内以有效治疗特定病况的治疗量释放有效量的生物学活性试剂。一般地，持续释放组合物包括这样的释放特征，其包括活性试剂自微粒释放入患者系统内的速率。可以有益地修饰所述持续释放微粒的释放特征，其结果使得可以控制包封在微粒中的特定活性试剂的释放速率。
发明概要
一种实施方式包括形成持续释放微粒的方法，包括下述步骤：形成具有用聚合物溶解的活性试剂的分散相；将分散相与连续相混合以形成具有悬浮于连续相中的微粒的微粒分散体；并在微粒已形成之后将测定量的稀释组分加入所述微粒分散体；其中所述稀释组分的量足以改变所述活性试剂的释放速率。
本发明的又一实施方式包括形成持续释放微粒的方法，其包括下述步骤：形成具有活性试剂和聚合物的分散相；将分散相和连续相混合以形成具有悬浮于连续相中的微粒的微粒分散体；并将稀释组分加入所述微粒分散体以产生持续释放微粒，其具有的释放速率不同于未经处理的持续释放微粒的释放速率；其中所述稀释组分的体积是所述连续相体积的至少50％。
又一实施方式包括控制持续释放微粒的释放速率的方法，包括下述步骤：形成具有亮丙立德和聚合物的分散相，其中所述亮丙立德溶于所述聚合物。该方法还包括在混合器将所述分散相与连续相混合以形成微粒分散体，并在微粒已形成之后将测定量的稀释组分加入所述微粒分散体。稀释组分的量还可足以改变特定活性试剂的释放速率。
又一实施方式包括具有改变的释放速率的持续释放组合物，其具有含特定活性试剂和聚合物的分散相，将所述分散相与连续相相组合以形成微粒分散体，并在微粒形成之后将所述微粒分散体暴露于测定量的稀释组分；其中所述稀释组分足以稀释所述连续相以改变特定试剂的释放速率。
附图说明
图1是本发明方法的一种实施方式的示意图；
图2是，根据本发明的一种实施方式，如表3和4中准备且描述的大鼠体内研究中的微粒释放特性的图示。
图3是，根据本发明的一种实施方式，在用如表3和4中准备且描述的亮丙立德微粒进行的大鼠体内研究中的微粒释放特性的图示；
图4是，根据本发明的一种实施方式，如表5和6中准备且描述的微粒的释放特性的图示；
图5是，根据本发明的一种实施方式，表7和8中准备且描述的微粒的释放特性的图示；
图6是，根据本发明的一种实施方式，在如表5和6中准备且描述的体外加速释放条件下亮丙立德乙酸盐自微粒释放的图示；
图7是，根据本发明的一种实施方式，在表7和8中准备且描述的体外加速释放条件下亮丙立德乙酸盐自微粒的释放速率的图示；
图8是，根据本发明的一种实施方式，接受如表9和10中准备且描述的两种的大鼠血清亮丙立德浓度水平的图示；
图9是，根据本发明的一种实施方式，如表9和10中准备且描述的人类血清亮丙立德浓度水平的图示；和
图10是，根据本发明的一种实施方式，如表11中准备且描述的奥曲肽大鼠体内研究的微粒释放特性的图示。
发明详述
本文公开优化包封在持续释放微粒中的生物学活性试剂在温血哺乳动物，包括人类中的释放特征的方法。本文还公开通过用作为连续、无菌过程的一部分所加入的稀释组分处理后形成的微粒来改变生物学活性试剂自微粒的释放速率的方法。
如图1所示，一种实施方式包括优化活性试剂自持续释放微粒的初始释放速率的方法10。在该实施方式中，微粒中亮丙立德乙酸盐的释放特征可以通过调节新鲜形成的微粒所暴露至的溶剂的浓度来修饰。微粒的释放特征可以在微粒于室温下保持在水相中时得以修饰，而不包括可以在干燥、加热或用水重构步骤期间引入残余的溶剂杂质或团聚问题的联合步骤。
在持续释放产品中，最初释放自组合物的药物的量可以是重要的。在初始给药后释放的药物或活性试剂的量常常称为初始进发或释放。为特定药物及其期望用途进行考虑和优化初始进发或释放的量是重要的。
例如，亮丙立德乙酸盐，“亮丙立德”是已知为促性腺激素-释放激素(GnRH)激动剂类似物的生物学活性试剂。GnRH刺激制备黄体化激素(LH)和滤泡刺激激素(FSH)。在释放入血流中的情况下，这些激素类导致男性产生睾酮而女性产生雌激素。因此，在控制所产生的睾酮水平已显示是有效疗法的疾病比如前列腺癌中，会抑制GnRH、LH和FSH产生的活性试剂将是有益的。实际上，控制所产生的睾酮水平可以限制外科阉割的需要。
在治疗应用中，亮丙立德最初自垂体前叶释放LH和FSH。然而，随着继续使用，亮丙立德导致垂体脱敏和下调睾酮产生类激素。在用于治疗中的情况下，亮丙立德在初始升高之后在2至4周内抑制循环的性激素水平。因此，为了亮丙立德的有效性，可以希望药物自递送微粒的很高初始释放速率。根据食品和药物局(Food and Drug Administration)，对于亮丙立德，可以需要高初始释放以实现更快的阉割。使用亮丙立德的化学阉割定义为在28天或更早95％的患者具有的睾酮水平为50ng/dL(0.5ng/mL)或以下。
与之相对，奥曲肽，又一种活性试剂，是用于长期治疗肢端肥大患者，以及患有恶性类癌瘤、血管作用型肠肽肿瘤、潮红和腹泻的患者的生长抑素类似物。血清中的奥曲肽控制生长激素(GH)和胰岛素类生长因子-1(IGF-1)。将奥曲肽用于长期贮库制剂持续释放配制剂的常见缺点是奥曲肽的高峰水平在某些血浆浓度可以具有毒性。在该情况下，较慢的初始进发或释放速率将是优选的。
如图1所示，用于产生含亮丙瑞林微粒的连续过程10可以用来产生所述微粒。该连续过程10可以一般地包括组合分散相12和连续相14。所述分散相12可以包括活性试剂，聚合物，和适宜溶剂。所述连续相14可以一般地包括水溶液。所述分散相12和所述连续相14可以在管道混合器16中组合以形成微粒分散体。所述微粒分散体可以一般地包含新鲜形成的分散于水溶液中的微粒。
出于本申请目的，用于治疗前列腺癌的亮丙立德在持续释放微粒中的配制剂将用作自聚合物持续释放微粒释放的活性试剂的一种实例。鉴于本公开，本领域普通技术人员将明了，活性试剂能够是希望包囊或散布在小聚合物体中的任意试剂。其释放速率能够得以优化以改善临床有效性的活性试剂的其它实例包括肽，酮替芬，硫利达嗪，奥氮平，利培酮，奥昔布宁，奥曲肽，纳曲酮，orntide，或Woc4D，倍他米松，地塞米松，可乐定，维拉帕米，或其药学上可接受的盐。特别有意义的是黄体化激素-释放激素激动剂(LH-RH激动剂)比如亮丙立德，曲普瑞林，戈舍瑞林，那法瑞林，组氨瑞林，和布舍瑞林。还特别有意义的是生长抑素类似物比如奥曲肽，人类、鲑鱼和鳗鱼降钙素，生长激素类，生长激素释放激素类，生长激素释放肽，副甲状腺的激素类和有关的肽，干扰素，红细胞生成素，GM-SSF，G-CSF，胸腺素，抗胰蛋白酶，，和用于区域给药的化疗药物、抗生素和镇痛药以及其中调整释放速率能够增加持续释放配制剂的有效性的其它试剂。
为了将活性试剂掺入所述分散相12，通常必需将所述活性试剂溶于至少一种溶剂。用于活性试剂的溶剂当然会取决于试剂的性质而变化。可以用于所述分散相以溶解所述活性试剂的典型溶剂包括，但不限于，水，甲醇，乙醇，二甲亚砜(DMSO)，二甲基甲酰胺，二甲基乙酰胺，二噁烷，四氢呋喃(THF)，二氯甲烷(DCM)，氯化乙烯，四氯化碳，氯仿，低级烷基醚比如二乙醚和甲基乙基醚，己烷，环己烷，苯，丙酮，乙酸乙酯，甲基乙基酮，乙酸，或其混合物。额外地，酸比如冰乙酸，乳酸，或脂肪酸或丙烯酸可以用于所述过程中以帮助改善活性试剂在聚合物中的溶解和包囊。鉴于本公开，为给定系统选择适宜溶剂是本领域所知的技术。
然后，将活性试剂与聚合物相组合以形成所述分散相12。本领域普通技术人员已知且用于一种实施方式中的聚合物的实例可以参见例如U.S.专利号4,818,542，4,767,628，3,773,919，3,755,558和5,407,609，并入本文通过援引。在对于给定系统选择特别希望的聚合物，为了产生具有所希望的临床特征比如生物可降解性(例如，释放特征)和生物可相容性的产品可以考虑许多因素。一旦本领域普通技术人员已选择了提供所希望的临床特征的一类聚合物，那么可以评价该聚合物的可优化制备过程的希望特征。例如，在某些情况下，可能可以选择与活性试剂相互作用的聚合物，其使得便于处理微粒，增强药物载量，增强溶剂自分散相的除去或者抑制药物自分散相移动至连续相。
适宜的聚合物的实例是乳酸均聚物或乳酸和羟基乙酸的共聚物，或聚(丙交酯-co-乙交酯)，“PLGA”聚合物。乳酸残基与羟基乙酸残基的比率能够变化，并一般是25∶75至85∶15，尽管甚至能够使用10％乙交酯，原因是高丙交酯含量引起较低粘度和较高溶解度。优选的共聚物包含至少约50％乳酸残基，比如50∶50，75∶25，或85∶15聚合物。聚(丙交酯-co-乙交酯)共聚物可商购自许多来源并能够通过常规合成路线容易地制备。Boeringer Inglehiem生产适宜的聚合物，名为R202H，RG 502，RG 502H，RG 503，RG 503H，RG 752，RG 752H，RG 756等。含R202H，RG 752H，或RG 503H的LH-RH微粒可以用于一种实施方式的分散相中。鉴于本公开，本领域普通技术人员将明了如何为给定系统选择适宜的聚合物。
选择优选聚合物的一种考虑因素是聚合物的亲水性/疏水性。聚合物和活性试剂都可以疏水或亲水。在可能的情况下，希望选择亲水聚合物用于亲水活性试剂，而疏水聚合物用于疏水活性试剂。在优选的微粒中，在药物与聚合物亲水羧基基团之间的离子相互作用据信将增强药物载量。然而，通常由于亲水药物可溶于水，如果在聚合物与药物之间不存在亲和力，或固化不够快，则药物载量可以降低。也可能在疏水聚合物中使用亲水药物。
在选择具体聚合物中，也应考虑聚合物疏水性/亲水性对系统中残余溶剂的效果。可以期望亲水聚合物产生含亲水药物，比如亲水肽的低残余溶剂。在亮丙立德微粒的情况下，药物具有帮助自分散相微滴快速且有效地消除疏水溶剂的倾向。此外，已观察到更高的药物载量倾向于相关于较低的残余溶剂浓度。从而，在某些系统中，在将亲水药物掺入亲水聚合物的情况下存在具有较低残余溶剂的间接益处。然而，由于存在除亲水性以外的对残余溶剂的其它影响因素，该效果可以不稳定地适用于非肽药物。但是，应遵从的是增强自分散相微滴消除溶剂而不存在所伴随的药物损失的活性试剂将产生优等产品。
又一考虑因素是聚合物的分子量。聚合物的分子量将明显影响产品特征比如释放速率、释放特征等，其还能够影响产生微粒的过程。更高分子量的聚合物一般地涉及更粘稠的分散相，引起较大颗粒或增加获得小颗粒的困难，和在某些情况下，增加残余的溶剂。通过对比，较低分子量的聚合物一般地涉及较慢的固化，原因是聚合物倾向于更加可溶。在优选的系统中，已发现较高残余的溶剂，较高药物载量和增强的掺入效率是使用较高分子量的聚合物所导致的。本发明过程的一种优势是其与高分子量聚合物形成良好、小、低残余的溶剂微粒并从而形成粘稠分散相的能力。当然，具体选择也将取决于所希望的产品特征。例如，分子量越高，则体内降解时间越长且药物释放的持续时间越长。
另外，所用的具体聚合物浓度能够不仅从产品形态方面而是也从处理方面影响系统。聚合物浓度的增加倾向于与较高药物载量有关，因为粘稠的分散相为了固化需要消除更少的溶剂。增加的固化速率倾向于导致较高的药物保留。此外，粘稠的分散相导致在固化期间更少的药物扩散入连续相。在某些系统中，这还可以引起较高的残余溶剂。在优选的实施方式中，分散相中的聚合物浓度为约5至约40％，更优选约8至约30％。
取决于许多因素来适当选择用于聚合物的溶剂，所述因素包括聚合物性质，活性试剂，毒性，与系统中其它溶剂的相容性和甚至微粒的用途。从而，除了溶解聚合物之外，溶剂必须不与连续相混溶以便形成微滴，具有高度挥发性从而带来最佳蒸发效率，并且出于安全原因希望是非可燃的。适于优选的聚(乳酸)或聚(丙交酯-co-乙交酯)聚合物的溶剂包括二氯甲烷，氯仿，乙酸乙酯，取代的吡咯烷酮等。在某些情况下，活性试剂的溶剂与聚合物的溶剂相同。某些药物，一般是用于成像分析的诊断剂比如放射性无机盐，不可溶或仅微溶于有机溶剂。在这些情况下，细微、亚-亚微米尺寸的粉末能够直接悬浮于聚合物溶液中以形成微粒。尽管该手段很少用于药物递送，但其确实可以用于诊断剂。鉴于本公开，选择本发明过程有用的其它溶剂也属于本领域技术。
在该实施方式中，含有亮丙立德的聚(丙交酯)或聚(丙交酯-co-乙交酯)微粒可以这样制备：用二氯甲烷，甲醇，和冰乙酸溶解溶于R202H聚合物的亮丙立德活性试剂以形成分散相12。分散相可以是真正的均质溶液。另选地，能够各自在其溶剂中制备分开的聚合物和活性试剂溶液，随后混合以形成分散相12。在某些情况下，由于活性试剂和/或聚合物的性质，分散相12必须作为乳液形成。例如，在给定蛋白质药物溶于适宜的活性试剂溶剂的情况下，所得溶液可以完全不与聚合物在特别聚合物溶剂中的溶液混溶。为了提供相对均质的分散相12，其中药物和聚合物散布相对均匀，药物和药物溶剂可以用聚合物和聚合物溶剂乳化以形成分散相乳液。在将分散相12引入连续相14中之后，可以形成水-油-水，或w/o/w，乳液。在其它系统中，分散相12能够这样制备：形成活性试剂在聚合物溶液中的直接悬浮液。
按照描述如下的本发明过程，分散相12可以与连续相14混合以便形成微粒分散体，其具有分散相12分散于连续相14中的微滴或包含物。如本文所用术语“分散”期望具有最宽的含义，其意指分散相的离散区域散布在连续相中。所指的包含物一般地作为大致球形的微滴存在，但是在某些情况下由于特别的乳化条件可以是无规律的包含物。分散相12可以在其中形成微滴或包含物的任意适宜介质可以用作连续相14，特别希望为分散相12溶剂提供最大溶剂汇聚(sink)的那些。
频繁地，连续相14也含有表面活性剂，稳定剂，盐或修饰或推动乳化过程的其它添加剂。典型的表面活性剂包括十二烷基硫酸钠，磺基琥珀酸二辛酯钠盐，司盘，聚山梨酯80，吐温80，普流罗尼克等。特别的稳定剂包括滑石，PVA和胶体氢氧化镁。粘度增进剂包括聚丙烯酰胺，羧甲基纤维素，羟甲基纤维素，甲基纤维素等。缓冲剂盐能够用作药物稳定剂，甚至普通盐也能够用来帮助防止活性试剂迁移入连续相14。与连续相14的盐饱和度有关的一个问题是PVA和其它稳定剂可以具有自连续相沉淀为固体的倾向。在这种情况下可能使用粒状稳定剂。适宜的盐，比如氯化钠，硫酸钠等，和本领域普通技术人员鉴于本公开将明了的其它添加剂。
在一种实施方式中，连续相14包括100-50％水。含水连续相14可以包括稳定剂。优选的稳定剂是聚乙烯醇(PVA)，其量为约0.1％至约5.0％。更特别地，PVA可以以约0.35％的量存在。适用于连续相14的其它稳定剂鉴于本公开将为本领域普通技术人员明了。
特别的聚合物、溶剂和连续相的选择当然取决于活性试剂和所希望的产品特征而变化。一旦确定所希望的产品特征，比如临床应用、释放特征等，仍然可以存在一些选择聚合物、溶剂和连续相的自由度以促进产生过程。
一旦合并分散相12和连续相14，新鲜形成的微粒可以自混合器16连续地转移至第一容器20。在该实施方式中，微粒一般是充分固体的和可过滤的，从而它们适于用中空纤维滤器连续处理微粒，如公开于US专利6,270,802和6,361,798。该方法区别于形成微粒的通用方法，其中分散相和连续相的混合物不快速形成离散的微粒。
与其中微粒需要进一步形成程序的方法相反，该实施方式的微粒在约20秒，更优选小于约10秒，更优选小于约5秒内固化。在亮丙立德-聚合物实施方式中，所述微粒在小于约3秒内固化。在本实施方式中观察到，尽管微粒固化实质上在加入至连续相之后即时发生，但是所形成的微粒仍然易于将额外的残余溶剂转移入连续相。
在优选的亮丙立德/聚合物微粒的情况下，药物载量的目标是基于总固体约12％，即10至21％。实际上，能够获得约9至约17％的药物载量。当然，药物性质，所希望的释放特征，聚合物性质和，当然地，处理过程都能够影响所希望的和真实药物载量。在典型的情况下，用本发明过程希望且可实现基于药物和聚合物的组合重量5％至20％的药物载量。典型的包囊效率为大约75％。
有利地，一旦获得所希望的药物载量并且确定了进料速率、温度等参数，扩展至更大规模的批次，包括生产水平批次，仅需将过程进行得更长。不需要额外的进料管、乳化剂、推进器等来产生较大数量的具有所希望特征的微粒。此外，在本发明连续过程期间产生的微粒在尺度分布、试剂载量等方面格外均匀，无论它们在所述过程期间何时产生。
在一种实施方式中，已发现可以通过变化微粒的溶剂暴露以改变上述形成微粒的一般过程从而改变微粒批次的释放特性或特征。形成之后较低水平的溶剂暴露能够这样实现：将稀释组分18加入新鲜形成的微粒。所述稀释组分18可以是水或聚乙烯醇溶液。令人惊讶地发现，在微粒形成之后加入测定量的稀释组分18可以改变新鲜形成的微粒的释放速率。
如图1所示，在微粒形成并分散于连续相中之后，可以加入稀释组分18。如图1于18a所示，可以在微粒分散体转移至第一容器20时将稀释组分加入其中。在微粒分散体转移至第一容器20时加入稀释组分可以使得微粒分散体和稀释组分可以在达到容器20之前彻底混合并用中空纤维滤器22过滤。
另选地，如18b所示，稀释组分18可以在微粒分散体之前或同时与其同时转移至容器20。一旦处于第一容器中，则可以连续搅拌微粒和稀释组分的混合物。
加入微粒分散体的稀释组分18的量应足以调节用于注射入哺乳动物的最终配制剂的释放特征。稀释组分18不应不利地或剧烈地改变包封在微粒中的活性试剂的溶解度，微粒的颗粒尺寸，或活性试剂在各批次中的包囊效率。对于希望的释放速率计算预先确定的溶剂暴露水平，其相关于预先确定的待加入的稀释组分18量。然后，通过加入稀释组分18获得特定的释放速率。
在一种实施方式中，为了获得具有所希望的释放特征的亮丙立德微粒，加入稀释组分18直至连续相中的确定溶剂浓度小于5000ppm。通过以定义的量和时间加入稀释组分18，释放特征能够作为连续过程的一部分以可预测的和可控的方式得以调节。
加入形成的微粒的稀释组分量可以是连续相14最初体积的至少约50％。在一种实施方式中，水溶液中降低的溶剂暴露可以增加所形成的亮丙立德微粒的释放速率。然而，控制不同活性试剂的释放速率可以需要不同步骤以实现所希望的释放特征。可以容易地调整过程以适应使用具有不同释放特征的不同活性试剂。
来自混合器16的微粒分散体和稀释组分18在第一容器20中合并，而所述微粒/稀释组分混合物通过中空纤维滤器22过滤。微粒返回第一容器20而废弃物质经由管线22a弃于分开的容器中。随着微粒返回容器20，它们连续地与新的微粒/稀释组分混合物混合并循环通过滤器。
在用必需的组合物和时间处理以实现所希望的释放速率之后，然后可以过滤微粒以除去任意剩余的水溶液并用水洗涤除去过程副产物。一旦微粒已形成，对本领域技术人员很明显的是可以进行许多最终调整以制备微粒用于填充容器从而将其准备用于患者给药。
根据本发明的过程通过下述非限制性实例参照附图进行举例说明。
实施例
描述下述实施例以向本领域普通技术人员提供详述如何进行和评价本文要求保护的方法，并不期望限制发明人所认为的发明范围。除非另有指定，份额指重量而温度指℃。
分子量报告为重均(Mw)分子量或数均(Mn)分子量并且通过凝胶渗透色谱法使用(GPC)采用聚苯乙烯(PS)分子量标准测定。实施例1提供本发明方法的一种实施方式的一般描述。聚(d，l-丙交酯)，R202H可商购自Beohringer Ingelheim.
实施例1
亮丙立德乙酸盐微粒如下表1所述制备。通过混合分散相和连续相形成微粒以形成大约7L的微粒分散体。一般地，根据描述于表1的参数，分散相可以是亮丙立德乙酸盐(L.A.)，聚(d，1-丙交酯)(R202H)的溶液，而溶剂是二氯甲烷(DCM)，甲醇(MeOH)，和冰乙酸(A.Acid)。基于温血动物和人类的体内研究，R202H提供3至4个月的亮丙立德持续释放。连续相可以用0.0035g/g聚乙烯醇溶液制备。
将连续相和分散相同时加入流速分别为2L/分和38g/分的线上Silverson混合器。混合器中的混合速度为7000rpm而微粒形成持续时间为3.5分钟。将该微粒分散体连续地递送入含有大约40L稀释相的容器。
所述稀释相还可以含有0.0035g/g聚乙烯醇水溶液，然而如表1所示用溶剂掺料稀释相。稀释相中二氯甲烷的量在各批次变化，特别是对于微粒批次GG090303为约5000ppm而对微粒批次GG091003为约8500ppm。对于全部四个微粒批次，溶剂暴露在含溶剂掺料的稀释相的反应器容器的相应持续时间恒定于100分钟。
在溶剂暴露之后，将悬浮于稀释相的微粒转移至溶剂除去容器(SRV)。将全部微粒批次用环境水洗涤，两种体积变化，持续40分钟，进行80SLPM的空气吹扫；热水洗涤(39℃)，5种体积变化，持续100分钟，进行80SLPM的空气吹扫；并用1.5体积交换冷却30分钟，进行于80SLPM的空气吹扫。引入空气吹扫以在洗涤过程期间帮助顶空溶剂除去。微粒在滤膜上过滤，在真空下冻干。
表1包括用来制备分散相的活性试剂、聚合物和溶剂的浓度，以及用于制备稀释相的各溶剂的浓度和真实量。
表1
表2详细描述通过按照表1制备参数形成的微粒的特性，包括颗粒尺寸，在加速释放条件下的药物释放，和在生理学条件下的药物释放。微粒中的药物载量描述为微粒中活性药物的百分比。其这样确定：将微粒溶于溶剂(ex.二甲亚砜)并将磷酸缓冲剂加入微粒溶液。然后，通过HPLC参照校准标准测试经过滤的溶液。
测定微粒在含有表面活性剂或稀释剂的水中的悬浮液的颗粒尺度分布(Part.Size Dist.)。其通过激光光散射来测定。颗粒尺度分布报告为体积分布(CVF)。
磷酸缓冲溶液(PBS)中进行药物释放速率计算以确定亮丙立德在生理学条件下的释放速率(D.R.(Phys.))。在37℃的温度，在带螺帽的玻璃管中，将按表1配制的微粒悬浮于PBS中。在采样点，将至少80％的释放介质用新鲜介质替换。通过HPLC测试释放介质的药物浓度并计算百分比释放。
能够适当操纵释放条件以加速体内或通过在PBS中释放所实现的释放速率。对于亮丙立德微粒，所用释放介质是0.1M柠檬酸磷酸缓冲剂而温度为55℃。通过振摇水批次进行释放，振摇为170转每分。在各时间点测试样品中经释放的药物以得出在加速条件下的释放速率(D.R.(Acc.))。
表2
根据上述制备步骤和表1中形成的微粒中观察到相似的颗粒尺度分布和药物载量。然而，暴露于最高二氯甲烷溶剂暴露水平的微粒批次显示稍降低的药物载量。
更显著地，亮丙立德的药物释放速率在加速药物释放试验(柠檬酸磷酸缓冲剂，55℃)和在生理学条件下的药物释放(磷酸缓冲溶液，pH7.4，37℃)中随批次有所变化。在加速的试验条件下的药物释放提供释放速率的批次差异的快速比较。在生理学条件下药物释放在多至和超过60天的较长试验时间段内进行以模拟持续释放配制剂在临床应用中的真实持续时间。批次GG091003的微粒，暴露于最高溶剂水平(8500ppm)总是具有最低的释放速率。显著地，在初始时间点期间的释放速率差异更大。一般地，暴露于较高溶剂浓度的亮丙立德乙酸盐制备的微粒批次显示降低的释放速率。因此，为了增加含亮丙立德的微粒的释放速率，希望在形成之后减少溶剂暴露于微粒。
实施例2
按下表3所述，制备亮丙立德乙酸盐微粒。微粒批次的分散相用亮丙立德乙酸盐(L.A.)、二氯甲烷、甲醇和冰乙酸的相容组合物来制备。用分子量14kDa的聚合物批R202H制得两个微粒批次，0C3542和0H8340，分别具有0.7kg至0.4kg的悬浮液中的固体微粒。用分子量18kDa的聚合物批R202H制得三个微粒批次，0D4022、0E5103和0S1723，分别具有0.1kg、0.4kg和0.4kg的悬浮液中的固体微粒。各批次用相似的连续相配制剂和相似制备参数来制备。然而，通过改变批量来改变微粒形成时间，也即0.7kg相对于0.4kg的悬浮液中的微粒，而各批次悬浮液暴露于含溶剂连续相的时间通过变化分散相向反应器容器的流速来改变。
特别地，通过水包油过程形成微粒：将各自的分散相加入0.35％聚乙烯醇水溶液的连续相。线上Silverson混合器的混合速度是7000rpm。在微粒形成之后，分散体连续相中的溶剂浓度为大约7200ppm二氯甲烷和1600ppm甲醇。
在线上混合器中形成之后，将微粒批次连续地转移至溶剂除去容器。对0.4Kg批次微粒形成时间为约40分钟，而对0.7Kg批次微粒形成时间为约70分钟。在微粒形成20分钟之后，以给定流速将分散相合并至连续相，溶剂除去容器达到40L的悬浮液体积。然后，将溶剂除去容器中的悬浮液再循环通过中空纤维膜滤器(封闭系统)并且以向溶剂除去容器中的悬浮液进料速率(2L/min)的相同速率除去渗透物。从而，对0.4Kg批次连续相中的溶剂水平保持稳定40分钟，对于0.7Kg批次为70分钟。
微粒批次用环境水洗涤，两种体积变化，持续40分钟，进行80SLPM的空气吹扫，热水洗涤(39℃)，5种体积变化，持续100分钟，进行80SLPM的空气吹扫，以1.5体积交换冷却30分钟，于80SLPM进行空气吹扫。引入空气吹扫以帮助在洗涤过程期间除去顶空溶剂。
表3
表3中形成的批次的微粒特性如下表4所示。
表4
Figure BDA0000072490610000171
各批次的颗粒尺寸可比拟。在生理学和加速条件下测试药物释放特性，如上文实施例1所述。结果显示具有更长溶剂暴露持续时间，也即增加的溶剂暴露的微粒OC3542和OD4022具有减少的初始释放。在生理学和加速试验条件下，自用低分子量聚合物(Mw＝14kDa)制得的批次OC3542产生的微粒在大多数时间间隔具有最低的释放速率。因此，在高溶剂暴露之后，聚合物分子量越低，亮丙立德的初始释放速率越低。
如表3和4中制备的微粒作为悬浮液以9mg亮丙立德乙酸盐每kg大鼠重量注射。图2比较接受相似剂量的批次0H8340(40分钟溶剂暴露，14kDa)和批次0C3542(70分钟溶剂暴露，14kDa)的大鼠中的血清亮丙立德。尽管两种物质都用分子量14kDa的聚合物制备，0C3542以0.7kg批量进行70分钟溶剂暴露而制备，而0H8340以0.4kg批量和40分钟溶剂暴露制备。该研究显示，由于药物自微粒的较慢早期释放，0C3542最初产生较低的血清药物水平。在大约三周之后第二阶段的释放产生可比拟的药物水平。这确认自批次0C3542微粒的较低初始释放，该批次微粒发生更长溶剂暴露，具有较大批量。
图3比较接受相似剂量的批次0D4022(70分钟溶剂暴露，18kDa)和0E5103(40分钟溶剂暴露，18kDa)的大鼠中的血清亮丙立德。尽管两种物质都用分子量18kDa的聚合物制备，0D4022以0.7kg批量和70分钟溶剂暴露制备，而0E5103以0.4kg批量和40分钟溶剂暴露制备。再次，具有更长持续时间溶剂暴露的批次，0D4022，最初产生较低血清药物水平，这确认在早期暴露阶段期间的较慢释放。
实施例3
亮丙立德微粒用0.206dl/g特性粘度和分子量18kDa的聚合物制备。所述微粒批次用连续处理程序于10g规模制备。制备参数比如分散相组成，连续相组成，分散相流速，连续相流速，和混合器旋转每分对于全部批次保持相同。
特别，通过水包油过程形成微粒：混合各自的分散相和连续相。连续相包含0.35％聚乙烯醇水溶液。线上Silverson混合器的混合速度是7000rpm。
将来自混合器的微粒分散体转移至溶剂除去容器。在各批次中，将一定量的稀释组分加入溶剂除去容器。各批次中的稀释组分是水。将稀释组分加入溶剂除去容器，同时将来自线上混合器的分散体递送入溶剂除去容器。特别，制备批次GC071304而不增加稀释组分，而用等于50％连续相体积的稀释组分制备批次GC060404。自Silverton混合器以大约2Kg/min的速率递送批次GC060404，将悬浮液用室温的水(22至25℃)稀释，同时流速为约1Kg/min。
对于批次GC060304，加入的稀释组分等于约100％连续相体积，其中自混合器以2kg/min的速率递送批次，同时以2kg/min的速率加入稀释组分。对于批次GC061104，以4kg/min的速率加入稀释组分，并使用2kg/min的悬浮液流速，引起悬浮液连续相体积约200％的增加。对于全部试验，混合速度都为7000RPM。
最终，将微粒批次用环境水洗涤，两种体积变化，持续40分钟，进行80SLPM的空气吹扫，热水洗涤(39℃)，5种体积变化，持续100分钟，进行80SLPM的空气吹扫，以1.5体积交换冷却30分钟，于80SLPM进行空气吹扫。引入空气吹扫以帮助在洗涤过程期间除去顶空溶剂。微粒在滤膜上过滤，在真空下冻干。
表5
Figure BDA0000072490610000191
表5中制备的微粒的特性示于下表6。
表6
Figure BDA0000072490610000192
如上文实施例1的描述，在生理学和加速条件下测试药物释放特性。产生自不同组合物的微粒的药物包囊和颗粒尺寸特性是可比拟的。亮丙立德游离碱的包囊效率是80至82％。结果显示，对于稀释组分是对连续相部分0至200％的增加体积的全部批次，药物包囊是可比拟的。平均颗粒尺寸(在50％体积分布下)的范围是25至29μm而90％体积分布的范围是47至50μm。通常，药物包囊和颗粒尺度分布在批次间是相似的。
在生理学条件测量的药物释放速率测量为真实时间药物释放速率(长期)的指示。结果显示随着稀释组分增加和连续相进一步稀释而更快的释放速率。加速释放速率试验条件也随着连续相中稀释组分增加显示稍高的初始释放速率。例如，在连续相部分中具有最高量稀释组分和最低浓度溶剂的批次GC061104，在两种释放条件下显示于全部时间间隔的最快释放。批次GC071304不具有稀释组分的增加。由于样品具有最高溶剂浓度，该样品在生理学条件下于时间间隔3天及以下具有最低释放速率。因此，溶剂暴露的降低在微粒形成之后增加亮丙立德自微粒的释放速率。
图4是于37℃在磷酸缓冲溶液中亮丙立德微粒释放特性的图示，包括如表5和6中准备且描述的批次GC071304，GC060304，和GC061104。图4显示，在批次用不同水平的稀释组分制备的情况下，三条S-形曲线，其表示于37℃在PBS中亮丙立德释放的百分比。尽管全部三条曲线的分离较窄，图4显示微粒批次GC061104，相应于最高的稀释组分添加200％，具有最高的亮丙立德释放速率，特别是在早期时间点。
图6是，于55℃在柠檬酸磷酸缓冲溶液中，在加速释放条件下，如表5和6中准备且描述的亮丙立德乙酸盐微粒的释放特性的图示，包括批次GC071304，GC060304，和GC061104。为微粒批次作图以显示根据加速释放试验条件并按小时时间间隔记录的亮丙立德释放速率。对于第一数据点(1小时和5小时)，微粒批次GC061104显示具有稍高的释放。
实施例4
用亮丙立德和特性粘度0.157dL/g和分子量11.5kDa的R202H制备微粒批次。所述批次以大约10g规模制备。
表7比较各批次的制备参数。对于全部批次，各制备参数都相似除了加入的稀释组分量。
表7
Figure BDA0000072490610000211
Figure BDA0000072490610000221
表8比较按表7制备的微粒批次的特性，含变化量的稀释组分，使用0.157IV聚合物。
表8
不加入稀释组分至连续相而制备的微粒具有相对较低的释放速率。相对用较高分子量聚合物制备的那些微粒，较低分子量的聚合物更敏感于溶剂暴露和所述微粒中的药物含量。三个批次的颗粒尺度分布是可比拟的，变化较小，平均颗粒尺寸为(在50％体积分布下)23至26μm。不用稀释组分制备的批次GC071404显示相对其它两个批次较慢的初始释放。早期释放的该差异也体现在加速的体外释放。
图5比较用具有0.157特性粘度的聚合物形成的微粒在磷酸缓冲溶液中的药物释放速率。在零稀释组分批次中，用0.157IV聚合物形成的微粒显示慢得多的早期释放。对于具有100和200％稀释组分添加的批次，0.157IV聚合物微粒显示较高的释放速率。加入稀释组分最小化溶剂暴露于新鲜形成的微粒的水平并增加低IV聚合物的释放速率。
图7是具有如表7所示的稀释组分变化量的三种样品的图示，在加速体外条件下，将亮丙立德乙酸盐释放百分比对按小时计的时间作图。在头两周于生理学条件下和在加速释放试验条件下头五个小时，具有增加的稀释组分的批次具有更高的释放速率。
实施例5
实施例5详细描述大规模微粒批次，将和不将稀释组分加入连续相。用特性粘度为大约0.21dL/g的R202H聚合物制备三个亮丙立德微粒批次(0E5103，0B6315和0A0307)，测试药代动力学(PK)和效力数据。在人类中用22.5mg剂量测试批次0E5103和0A0307的药代动力学和效力。监测药代动力学(PK)组患者的血液(血清)亮丙立德水平和睾酮抑制而仅监测对剩余患者的效力(睾酮抑制)。为了显示用亮丙立德的化学阉割，95％的患者必须在28天或更早显示睾酮水平在50ng/dL(0.5ng/mL)或之下。
用具有0.206IV和分子量18kDa的R202H制备微粒批次0E5103，而不加入任何稀释组分或进行稀释。该批次的二氯甲烷暴露为大约7200ppm而暴露持续时间为大约40分钟。用具有0.206IV和分子量大约18kDa的聚(D，L-丙交酯)制备微粒批次0B6315。稀释组分这样制备：连续相在溶剂除去容器中时将150％的水加入连续相流。
用具有与批次0B6315相似的IV和分子量的聚(d，l-丙交酯)制备微粒批次0A0307。稀释组分这样制备：在连续相和分散相乳液通过线上混合器加料入溶剂除去容器时，将200％的水加入连续相流。如气体色谱法(GC)所测，二氯甲烷溶剂水平为连续相中大约1500ppm。表9比较制备参数而表10比较如表9中所制备的微粒的特性。
尤其是，0A0307的批量为大约1Kg规模而微粒形成时间为反应器容器中100分钟。批次0E5103具有0.4Kg规模的批量而微粒形成时间为40分钟。分散相的配制剂对于三个批次是相似的，其中0E5103批次具有稍增加的活性试剂和聚合物浓度和降低的溶剂(甲醇)和乙酸浓度。
表9
Figure BDA0000072490610000241
表10
Figure BDA0000072490610000251
加速的体外释放速率显示具有增加的加入稀释组分并因此减少的溶剂暴露的0B6315和0A0307产生具有较未加入稀释组分的0E5103更高的初始释放的微粒。图8比较在两周时间段给予22.5mg亮丙立德每Kg剂量的批次0E5103和0A0307的大鼠中的血清亮丙立德浓度。批次0A03070A0307，具有最低的溶剂暴露，具有较0E5103更高的早期释放，这在血清中产生较高浓度的亮丙立德。
图9是给予根据表9制备的亮丙立德微粒的人类中血清亮丙立德浓度水平(ng/ml)的图示。微粒批次0E5103和0A0307准备且描述于表9中。表10显示血液(血清)亮丙立德浓度的人类临床数据。该实施例的结果显示含稀释组分(0A0307)和低DCM暴露的配制剂由于更快的释放在初始一个月时间段期间具有较高的血液亮丙立德水平。该批次在人类系统中更有效地作为GnRH激动剂以实现睾酮水平的长期降低。接受相同剂量0A0307的患者具有较低血液亮丙立德水平并且在研究后一部分(在一个月之后)期间药物以更快的速率释放。
进行临床试验比较批次0E5103和0A0307以比较在接受具有微粒形成之后所加入的变化水平稀释组分的亮丙立德微粒之后的患者中的睾酮水平。理想地，95％患者应在28天内实现并保持睾酮水平在50ng/dL之下。表11详细描述两种亮丙立德微粒批次的临床试验结果。
表11
  数据组   在28天之后实现睾酮水平小于50ng/dl的％患者
  临床要求   95
  0E5103   79
  0A0307   98
由于批次0E5103的缓慢初始释放，仅79％患者在第28天实现所希望的水平。然而，接受批次0A0307的患者，该批次含200％稀释组分，在第28天于98％的群体中实现所希望的水平。作为结果，通过给予具有亮丙立德的初始较高释放速率的持续释放药物，由于疾病比如前列腺癌中较高的睾酮水平患有不适和疼痛的患者能够得到更有效治疗并且让其疼痛更快速地减少。
实施例6
以大约10g规模用具有固有粘度0.183IV的R202H制备批次例如6。表12比较各批次的制备参数。对于全部批次，分散相组成和连续相组成都相同，对于全部批次目标载量是16.5％L.A。连续相和分散相的流速相同或可比拟。
表12
Figure BDA0000072490610000271
表13比较各微粒批次的特性。
表13
Figure BDA0000072490610000272
对于各批次，微粒中的药物载量是可比拟的。在各批次间颗粒尺寸显示小、典型的变化。平均颗粒尺寸(在50％体积分布下)的范围是22至28μm，而90％的体积分布的范围是40至46μm。通常，颗粒尺寸在各批次间不显示大的差异，而且不存在确定的趋势。
于37℃在PBS中的药物释放期望释放药物持续多于三月。在PBS中监测最少一个月时间段的初始释放。不含稀释组分(GC061404)的批次与用稀释组分制备的批次相比显示较低的初始释放。具有50、100和200％稀释组分的批次显示更快的、可比拟的释放速率。
对于用稀释组分制备的批次，加速释放方法也显示稍高的初始释放(1和5小时)。在用变化稀释度制备的批次间不存在释放的差异。用50％稀释来实现通过稀释的早期释放(1和5小时)的增加。进一步稀释并不显著改善初始释放。
实施例7
用100、200和300％稀释组分使用固有粘度为0.206IV的R202H制备三个微粒批次。对GC071204，GC090904，和GC091004，制备参数示于表14。对于这些批次，制备参数是可比拟的，除了故意变化的稀释组分。
表14
Figure BDA0000072490610000291
表14中制备的批次的特性如下表15中所示。最终的微粒具有71至75％包囊效率而药物载量对各批次是可比拟的。具有100和200％稀释的批次显示可比拟的颗粒尺寸。对于用较高稀释制备的批次，在较早的时间点期间在PBS中观察到稍快的释放速率(或可比拟的释放速率)。加速释放显示可比拟的早期释放。
表15
Figure BDA0000072490610000292
Figure BDA0000072490610000301
实施例8
用100、200和300％稀释组分，用固有粘度0.157IV的R202H和19％L.A.目标载量来制备三个微粒批次。制备参数示于表16。对于各批次，制备参数是可比拟的，除了故意变化的稀释组分。
表16
Figure BDA0000072490610000302
表17显示如上文所制备的微粒批次的特性。最终的批次具有69至73％包囊效率的微粒。各批次的药物载量是可比拟的，为约14％。各批次的颗粒尺寸是可比拟的。对于全部批次，药物释放速率在PBS中是可比拟的而加速释放显示稍高初始释放。
表17
实施例9
实施例9比较具有变化溶剂暴露的奥曲肽微粒。用相似与亮丙立德微粒制备程序的技术制备含奥曲肽的聚(d，l-丙交酯-co-乙交酯)微粒。以大约18mL每分将含有PLGA(85∶15PLGA，来自Alkermes)，奥曲肽，二氯甲烷，甲醇，和冰乙酸的分散相递送通过改进的Silverson线上混合器的分散相入口管，如美国专利5,945,126所解释。分散体中的奥曲肽的目标载量是10％。将0.35％聚乙烯醇在水中的连续相以2L/min递送通过线上Silverson的连续相入口。Silverson混合速度为5500RPM。详述的制备参数可以参见下表18。然后，在保持搅拌下，将产生的大约2L悬浮液暴露至15L连续相。该15L连续相分别包括2000、4000或6000ppm的二氯甲烷。在洗涤之前，将新鲜形成的微粒暴露100分钟。对照批次不进行溶剂暴露而是进行直接洗涤。
表18
  批次   GJ030804   GJ030204   GJ030404   GJ030904
  奥曲肽DP重量，g   0.72   0.72   0.72   0.72
  PLGADP重量，g   6.48   6.48   6.48   6.48
  DCMDP重量，g   10.14   10.14   10.14   10.14
  MeOHDP重量，g   1.02   1.02   1.02   1.02
  A.AcidDP重量，g   0.78   0.78   0.78   0.78
  DCMCP浓度，ppm   0   2000   4000   6000
  MeOHCP浓度，ppm   0   200   400   600
  A.AcidCP浓度，ppm   0   150   300   450
进行加速体内试验，比较各批次的微粒。于60℃，在pH 4.0的乙酸缓冲溶液中进行测试。于37℃，在生理学条件下经过一天，也对于各批次计算释放速率。
表19
Figure BDA0000072490610000321
Figure BDA0000072490610000331
如表19所示，暴露于较高量溶剂的微粒在早期时间点显示释放介质中的较高初始释放。较高初始进发可以造成安全顾虑，原因是胰岛素类生长因子-1(IGF-1)相应于更快的释放速率能过快地降低。在持续型微粒释放配制剂中，奥曲肽的较低初始释放速率是最佳的。不同于亮丙立德，通过使用具有降低的奥曲肽微粒溶剂暴露的配制剂，释放速率得到降低。
图10是在奥曲肽大鼠体内研究中，按表18制备的微粒的释放特性的图示。向大鼠提供5mg奥曲肽微粒批次的剂量。GJ030804并未暴露于在连续相中增加的溶剂并且显示与用较高浓度二氯甲烷制备的批次相比较低的初始进发释放。因为较高溶剂暴露引起较高进发释放速率，据推测具有甚至更低进发的微粒能取决于优选速率通过用水稀释来制备。
实施例10
实施例10比较在改变微粒批量且加和不加稀释组分的情况下对微粒中亮丙立德的药物释放速率的效果。首先，用变化的批量制备批次GC071304、0E5103和0D4022，不将稀释组分加入连续相。如下表20所示，用29g分散相制备8g批次，GC071304，所示分散相包括分子量18kDa的R202H，亮丙立德乙酸盐，二氯甲烷，和甲醇。GC071304的连续相包括1.5L0.35％聚乙烯醇水溶液。微粒形成在50秒内完成，分散相流速为30-35g/min而对连续相为2L/min。在线上混合器中于7000rmp保持搅拌批次，然后在环境和39℃水中洗涤，使用大约10种体积变化。
用上述相同制备参数制备批次0E5103，但是批次规模增加至400g。微粒形成时间为40分钟。增加批量至700g，用上述相同制备参数制备批次0D4022。微粒形成时间为70分钟。成比例地调节在两个后者批次中所用的分散相和连续相的量以产生所考虑的批量。
如下表20所示，用0.206IV聚合物制备三种批次。表21比较上述批次的特性。
表20
  批次   GC071304   0E5103   0D4022
  批量，g   8   400   700
  聚合物Mw，KDa   18   18   18
  L.A.DP浓度，g/g   0.05   0.05   0.05
  R202HDP浓度，g/g   0.25   0.25   0.25
  DCMDP浓度，g/g   0.52   0.53   0.53
  MeOHDP浓度，g/g   0.17   0.17   0.17
  PVACP浓度，g/g   0.0035   0.0035   0.0035
  稀释组分   0   0   0
  微粒形成时间   50秒   40分钟   70分钟
表20中形成的微粒的特性示于表21。
表21
Figure BDA0000072490610000351
在生理学条件下测试的释放速率暴露于37℃下pH 7.4的PBS。用50秒的最短微粒形成时间和最短相应溶剂暴露时间制备的8g批次与400g批次和700g批次相比具有最快的初始释放。具有最长溶剂暴露时间(微粒形成时间为70分钟)的最大批次，700g，具有最慢的初始释放。因此，在生理学和加速条件下已发现，在全部其它因素大致相同的情况下，增加批量或扩大批次，对药物释放速率具有相反效果。
下表22详述，以10、100和1000g规模批次制备微粒。在100g规模，制备三个批次以显示实施例的重现性。各批次这样制备：对分散相用分子量14kDa的0.183IVR202H聚合物，亮丙立德，DCM，MeOH，和冰乙酸而对连续相用水和聚乙烯醇。另外，将大约1500，士500ml的稀释组分加入连续相。特别地，在微粒制备期间以2至4L/min连续地将稀释组分或水加入溶剂除去容器。对于各批次制备参数相同而微粒制备的持续时间对10g批次为1分钟，对100g批次为10分钟而对1000g批次为100分钟。在100g规模，制备三个批次以显示重现性。
表22
  L.ADP浓度，g/g   0.0435
  R202HDP浓度，g/g   0.2087
  DCMDP浓度，g/g   0.53
  MeOHDP浓度，g/g   0.1920
  A.AcidDP浓度，g/g   0.0165
  PVACP浓度，g/g   0.0035
  CP流速，g/min   2000士200
  DP流速，mL/min   30士3
  所加入的稀释组分，m   1500士500
  Silverson rpm   7000士200
  洗涤温度   环境和39℃
  Number of体积替换   12士2
表23
Figure BDA0000072490610000361
Figure BDA0000072490610000371
10、100和1000g批次的药物包囊效率是可比拟的，其值的范围是75至79％。药物载量为12.8至13.7％，此为正常范围。颗粒尺寸结果显示可比拟的尺度分布数据。药物释放速率对10、100和1000g批次是相似的。于10，100，和1000g制备的批次全部显示很低的残余溶剂。因此，通过将稀释组分加入连续相，批次大小相对上述测量释放特征成为次要因素。一旦连续相中的溶剂水平降低至阈值水平，则微粒的释放特性不再取决于批次大小，而不加稀释组分而制备的批次的释放特性却取决于批次大小。
实施例11
实施例11详细描述用稀释组分制备的利培酮微粒的释放特征。首先，用作为生物可相容的和生物可降解的聚合物的27.5g聚(D，L-丙交酯-co-乙交酯)，PLGA制备微粒，其丙交酯∶乙交酯比率为85∶15而固有粘度为0.61g/dL。用27.5g利培酮制备批次。将利培酮和上述聚合物溶于220g二氯甲烷。聚合物、生物学活性试剂和溶剂的该合并的有机溶液构成分散相。分开地，将87.5g聚乙烯醇和69g磷酸氢二钠七水合物溶于25kg纯水以提供连续相。同时地分别于38.5ml/min和4000mL/min将分散相和连续相泵入Silverson线上混合器，将其于4000rpm混合大约5分钟。
随着分散相与连续相混合，在Silverson混合器中形成的混合物固化为加载利培酮的PLGA微粒。将利培酮微粒的悬浮液排至溶剂除去容器(SRV)，其中在室温下将稀释组分加入微粒分散体。以2000mL/min的速率加入稀释组分，持续大约5分钟。用室温和33-37℃水洗涤微粒并在SRV中除去有机溶剂。在洗涤和除去溶剂之后，过滤收集微粒，冻干。经测定微粒具有的药物载量为0.39g利培酮每g微粒。PLGA微粒中的利培酮载量效率为77.5％。评价微粒的释放特性。发现在24小时内于pH7缓冲剂中检测到小于1％的药物初始释放。
实施例12
实施例12详细描述不加水稀释而包封在微粒中的利培酮的释放特征。用27.5g聚(D，L-丙交酯-co-乙交酯)，PLGA制备微粒，其丙交酯∶乙交酯比率为85∶15而固有粘度为0.61g/dL。将27.5g利培酮溶于作为有机溶液一部分的220g二氯甲烷，其充当分散相。分开地，将87.5g聚乙烯醇和69g磷酸氢二钠七水合物溶于25kg纯水制备连续相。分别以38.5ml/min和4000mL/min将分散相和连续相同时泵入Silverson线上混合器。于4000rpm混合经合并的悬浮液。在Silverson混合器中将分散相与连续相混合，所得混合物立即固化为加载利培酮的PLGA微粒。将利培酮微粒的悬浮液排至溶剂除去容器(SRV)。在该实施例中不用稀释组分。在SRV中用室温和33-37℃水洗涤微粒并除去有机溶剂。在洗涤和溶剂除去步骤之后，过滤收集微粒，冻干。经测定微粒具有的含量为0.33g利培酮每g微粒。利培酮在PLGA微粒中的载量效率为66.2％。根据释放特性测试，在24小时内在pH7缓冲剂中大约80-82％利培酮释放自上述微粒。
表24
  实施例   实施例8   实施例9
  聚合物   85∶15PLGA   85∶15PLGA
  目标利培酮，％   10   10
  利培酮DP，g   27.5   27.5
  PLGADP，g   27.5   27.5
  DCMDP，g   220   220
  MeOHDP，g   1.02   1.02
  A.AcidDP，g   0.78   0.78
  PVACP浓度，％   0.35   0.35
  磷酸氢二钠七水合物CP，％   0.27   0.27
  Silverson RPM   4000   4000
  CP流速，ml/min   4000   4000
  DP流速，ml/min   38.5   38.5
  稀释组分流速，ml/min   2000   N/A
  药物载量   0.39   0.33
  药物包囊效率，％   77.5   66.2
  初始释放，％   ＜1   80-82
对于未加入稀释组分而制备的批次，利培酮自微粒的释放速率为80-82％。用稀释组分以2000ml/min稀释的批次在初始给药后具有的释放速率为小于1％。

Claims (19)

1.具有经改变的释放速率的持续释放组合物，包含：
包含特定活性试剂和聚合物的分散相，所述分散相与连续相相组合以形成微粒分散体，而所述微粒分散体在形成微粒之后暴露于测定量的稀释组分；
其中所述稀释组分足以稀释所述连续相以改变所述特定活性试剂的释放速率。
2.权利要求1的持续释放组合物，其中所述稀释组分足以稀释所述连续相以消除增加持续释放组合物批量的不利作用。
3.权利要求1的持续释放组合物，其中将所述稀释组分加入新鲜形成的微粒并转移至第一容器。
4.权利要求1的持续释放组合物，其中在将所述微粒分散体转移至第一容器之后将所述稀释组分加入所述微粒分散体。
5.形成权利要求1的持续释放组合物的方法，包括下述步骤：
形成包含用聚合物溶解的特定活性试剂的分散相；
将所述分散相与连续相混合以形成包含悬浮于连续相中的微粒的微粒分散体；和
在微粒已形成之后将测定量的稀释组分加入所述微粒分散体；
其中所加入的所述稀释组分的量足以改变所述特定活性试剂的释放速率。
6.权利要求5的方法，其中所述方法还包括将所述微粒分散体自混合器转移至第一容器，与此同时将所述稀释组分加入所述第一容器。
7.权利要求5的方法，其中所述稀释组分是水，并且其中所述水以所述连续相的至少50％至大约300％的量加入所述微粒分散体。
8.权利要求5的方法，其中将所述稀释组分和所述微粒分散体同时转移至第一容器。
9.形成权利要求1的持续释放组合物的方法，包括下述步骤：
形成包含所述特定活性试剂和所述聚合物的分散相；
将所述分散相和所述连续相混合以形成包含悬浮于所述连续相中的微粒的微粒分散体；和
将稀释组分加入所述微粒分散体以产生持续释放微粒，其具有的释放速率不同于未经处理的持续释放微粒的释放速率；
其中所述稀释组分的体积是所述连续相体积的至少50％。
10.权利要求9的方法，其中所述特定活性试剂是亮丙立德，所述亮丙立德溶于所述聚合物，并且其中所述稀释组分的体积是所述连续相体积的至少200％。
11.权利要求9的方法，其中所述特定活性试剂是奥曲肽，并且其中所述稀释组分的体积是所述连续相体积的至少100％。
12.权利要求9的方法，其中所述特定活性试剂是利培酮。
13.权利要求10的方法，其中所述连续相包含溶剂，并且其中将所述稀释组分加入所述连续相部分直至所述溶剂具有的浓度小于约5000ppm的溶剂。
14.权利要求9的方法，其中所述方法连续地进行。
15.权利要求9的方法，其中所述微粒在所述分散相与所述连续相混合之后约2至约30秒内形成，并且其中将所述微粒暴露于所述稀释组分持续经测量的时间段。
16.权利要求9的持续释放组合物，其中所述稀释组分足以稀释所述连续相以消除增加所述持续释放组合物的批量的不利作用。
17.控制权利要求1的持续释放组合物的释放速率的方法，其包括下述步骤：
形成包含所述特定活性试剂和所述聚合物的分散相，其中所述特定活性试剂是亮丙立德并且将亮丙立德溶于所述聚合物，
将所述分散相与所述连续相在混合器中混合以形成所述微粒分散体；
在微粒已形成之后，将测定量的稀释组分加入所述微粒分散体；并且
其中所述稀释组分的量足以改变所述亮丙立德的释放速率。
18.权利要求17的方法，其中所述连续相包含溶剂而所加入的所述稀释组分的量足以将所述连续相中的溶剂稀释至小于约5000ppm。
19.权利要求17的方法，其中在转移至第一容器之前将所述微粒分散体保持在混合器中持续特定的时间段。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103191021A (zh) * 2012-01-10 2013-07-10 山东绿叶制药有限公司 一种连续生产微球的设备及其应用

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2471303A (en) 2009-06-24 2010-12-29 Bell Flavors & Fragrances Duft Und Aroma Gmbh Microparticles and method of making microparticles
JP6135292B2 (ja) * 2013-05-10 2017-05-31 ニプロ株式会社 マイクロカプセル製剤の製造方法
JP2016102093A (ja) * 2014-11-28 2016-06-02 ニプロ株式会社 塩基性の求核化合物を含有するマイクロカプセルの製造方法
WO2017083779A1 (en) 2015-11-12 2017-05-18 Graybug Vision, Inc. Aggregating microparticles for therapy
EP3573747A4 (en) * 2017-01-23 2020-12-30 Savior Lifetec Corporation PREPARATION OF MICROPARTICLES OF AN ACTIVE SUBSTANCE
EP3600324A4 (en) 2017-03-23 2020-12-09 Graybug Vision, Inc. COMPOUNDS AND COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF EYE DISORDERS
CN111201040A (zh) 2017-05-10 2020-05-26 灰色视觉公司 用于医学疗法的缓释微粒及其悬浮液
LT4186920T (lt) 2018-06-29 2024-04-25 Akston Biosciences Corporation Itin ilgai veikiantys insulino-fc sulieti baltymai ir naudojimo būdai
WO2021199077A1 (en) 2020-03-30 2021-10-07 Biological E Limited Risperidone microspheres, process for their prepartion and uses thereof
WO2024074585A2 (en) 2022-10-05 2024-04-11 Mireca Medicines Gmbh MICROPARTICLE AND IMPLANT FORMULATIONS FOR cGMP ANALOG THERAPY

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5945126A (en) * 1997-02-13 1999-08-31 Oakwood Laboratories L.L.C. Continuous microsphere process
US20050042294A1 (en) * 2003-07-18 2005-02-24 Thanoo Bagavathikanun C. Prevention of molecular weight reduction of the polymer, impurity formation and gelling in polymer compositions

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5792477A (en) * 1996-05-07 1998-08-11 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Ii Preparation of extended shelf-life biodegradable, biocompatible microparticles containing a biologically active agent
US6270802B1 (en) * 1998-10-28 2001-08-07 Oakwood Laboratories L.L.C. Method and apparatus for formulating microspheres and microcapsules
US6495166B1 (en) 1999-11-12 2002-12-17 Alkermes Controlled Therapeutics Inc. Apparatus and method for preparing microparticles using in-line solvent extraction
US6705757B2 (en) * 1999-11-12 2004-03-16 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Ii Method and apparatus for preparing microparticles using in-line solvent extraction
US20070207211A1 (en) * 2003-04-10 2007-09-06 Pr Pharmaceuticals, Inc. Emulsion-based microparticles and methods for the production thereof

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5945126A (en) * 1997-02-13 1999-08-31 Oakwood Laboratories L.L.C. Continuous microsphere process
US20050042294A1 (en) * 2003-07-18 2005-02-24 Thanoo Bagavathikanun C. Prevention of molecular weight reduction of the polymer, impurity formation and gelling in polymer compositions

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
R. JEYANTHI ET AL: "Effect of solvent removal technique on the matrix characteristics of polylactide/glycolide microspheres for peptide delivery", 《JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE》 *
XIAOSONG LUAN ET AL.: "Key parameters affecting the initial release (burst) and encapsulation efficiency of peptide-containing poly(lactide-co-glycolide) microparticles", 《INTERNATIONAL JOURNAL OF PHARMACEUTICS》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103191021A (zh) * 2012-01-10 2013-07-10 山东绿叶制药有限公司 一种连续生产微球的设备及其应用

Also Published As

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