CN102256991A - 尿嘧啶基环丙基核苷酸 - Google Patents

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Abstract

式I化合物，包括其任何可能的立体异构体，其中：R1是氢或卤代；R4是单磷酸酯基、二磷酸酯基或三磷酸酯基；或R4是式(II)的基团；R7是任选取代的苯基、萘基、吲哚基或N-C1-C6烷氧羰基吲哚基；R8是氢、C1-C6烷基、苄基；R8′是氢、C1-C6烷基、苄基；或R8和R8′与它们所连接的碳原子一起形成C3-C7环烷基；R9是C1-C10烷基、苄基或任选取代的苯基；或其药学上可接受的盐或溶剂化物，药物制剂及化合物I作为HCV抑制剂的用途。

Description

尿嘧啶基环丙基核苷酸
技术领域
本发明涉及新的核苷酸，其为丙型肝炎病毒(HCV)的聚合酶的抑制剂及其在治疗或预防HCV中的用途。
发明背景
HCV在肝炎病毒属中是一种属于黄病毒科(Flaviviridae)的单股、正义RNA病毒。RNA多基因的NS5B区编码RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)，其为病毒复制所必需。继最初的急性感染后，因为HCV在肝细胞中优先复制而不是直接细胞病变，大部分感染个体发展成慢性肝炎。具体地说，缺乏强劲的T淋巴细胞应答及高倾向的病毒突变，似乎促进慢性感染的高比例。慢性肝炎可发展成肝纤维化，导致肝硬化、晚期肝病及HCC(肝细胞癌)，使其成为肝移植的首要原因。
有六种主要的HCV基因型并超过50种亚型，其有不同的地理分布。HCV基因型1是在欧洲及美国的主要基因型。HCV的广泛的遗传异质性具有重要的诊断及临床意义，或许可以说明在疫苗研发方面的困难及对目前疗法响应的缺乏。
HCV的传播可以通过与受到污染的血液或血液产品接触而发生，例如输血或静脉毒品注射使用之后。用于血液筛选所导入的诊断试验，已导致输血后HCV的发病率下降。但是，由于缓慢发展成晚期肝病，现有的感染在数十年内将持续存在为严重的医疗及经济负担。
目前的HCV疗法是以(聚乙二醇化)干扰素-α(IFN-α)联合利巴韦林(ribavirin)为基础。这种组合疗法在超过40％感染基因型1HCV的患者及约80％感染基因型2及3的患者中产生持续的病毒性反应。除了对于HCV基因型1的有限的功效外，这种组合疗法在许多患者中有明显的副作用且耐受性差。主要的副作用包括流感样症状、血液异常及神经精神病症状。因此，需要更有效、方便且更好的耐受性的治疗。
HIV药物，特别是HIV蛋白酶抑制剂的用药经历，已经显示次优的药物动力学及复杂的剂量方案，迅速导致未注意的顺应性失败(inadvertent compliance failures)。这反过来又意味着在HIV治疗方案中，各药物的24小时波谷浓度(最低血浆浓度)在一天的大部分时间中经常下降至低于IC90或ED90的阈值。人们认为至少IC50的24小时波谷水平，且更实际地，IC90或ED90，是减缓药物逃避突变(drug escape mutants)的发展所必需的。达到所需的药物动力学及药物代谢以容许这样的波谷水平，提供药物设计的一个严厉挑战。
NS5B RdRp是单股、正义HCV RNA基因组的复制所必需的。此种酶在药物化学家中引起很大的兴趣。NS5B的核苷及非核苷抑制剂为已知的。核苷抑制剂可同时作为链终止剂及作为竞争性抑制剂，其干扰核苷酸结合至聚合酶。作为链终止剂发挥作用时，核苷同系物必须被细胞摄取并在活体内转化成三磷酸酯。此转化成三磷酸酯通常通过细胞激酶介导，其使得对潜在的核苷聚合酶抑制剂有另外的结构要求。此外，此将核苷作为HCV复制的抑制剂的直接评估限制至可在原位磷酸化的细胞基测定法(cell-based assays)。
已进行多种尝试以研发核苷作为HCV RdRp的抑制剂，虽然有少数化合物进入临床研发，但是没有一种化合物自始至终进行至注册。靶向HCV的核苷迄今遭遇的问题是毒性、致突变性、缺乏选择性、疗效差、生物利用度差、次优的剂量疗法及随后的高药物负担、及物品成本。
数个专利及专利申请案以及科学出版物公开具有HCV抑制活性的核苷类似物。WO 2004/002999公开用于治疗黄病毒科感染的经修饰的2’和3’-核苷前药。WO 2008/043704公开4-胺基-1-((2R，3S，4S，5R)-5-叠氮基-4-羟基-5-羟基甲基-3-甲基-四氢呋喃-2-基)-1H-嘧啶-2-酮及酯衍生物作为HCV聚合酶抑制剂。
需要可以克服目前HCV疗法的缺点例如副作用、有限的功效、出现的抗药性、及顺应性失败，以及改进持续的病毒反应的HCV抑制剂。
本发明涉及对于一或多种下面参数具有有用的性质的一组抑制HCV的1-(7-羟基-6-羟基甲基-5-氧杂-螺[2.4]庚-4-基)-1H，3H-嘧啶-2，4-二酮衍生物：抗病毒的功效、抗药性发展的有利的模式(profile)、没有毒性及基因毒性、有利的药物动力学及药效学以及容易配制与给药。化合物1-((4R，6R，7S)-7-羟基-6-羟基甲基-5-氧杂-螺[2.4]庚-4-基)-1H，3H-嘧啶-2，4-二酮，也称为2’-脱氧-2’-螺-环丙基尿苷已公开于J.Am，Chem.Soc.，1992，114，4007-4008中。
本发明化合物由于其缺乏对抗其它病毒特别是对抗HIV活性的事实而也有吸引人之处。感染HIV的患者经常也罹患同时感染例如HCV。使用也可抑制HIV的HCV抑制剂治疗此类患者，可导致出现抗药性HIV株。
发明描述
在一个方面，本发明提供可由式I代表的化合物：
Figure BPA00001388485200031
包括其任何可能的立体异构体，其中：
R1是氢或卤代；
R4是单磷酸酯基、二磷酸酯基或三磷酸酯基；或R4是下式的基团
Figure BPA00001388485200032
R7是苯基，其任选由1、2或3个各自独立地选自卤代、C1-C6烷基、C3-C6烯基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧羰基、羟基和氨基的取代基取代；或R7是萘基；或R7是吲哚基或N-C1-C6烷氧羰基吲哚基；
R8是氢、C1-C6烷基、苄基；
R8′是氢、C1-C6烷基、苄基；或
R8和R8′与它们所连接的碳原子一起形成C3-C7环烷基；
R9是C1-C10烷基、C3-C7环烷基、C3-C6烯基、苄基或苯基，该苯基可任选由1、2或3个各自独立地选自羟基、C1-C6烷氧基、氨基、单-和二C1-C6烷基氨基的取代基取代；
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
在另一个方面，本发明涉及本文指定的式I化合物用于抑制HCV的用途。或者是，提供用于制备本文指定的式I化合物的药物的用途。本发明也涉及从具有上述结构，但是其中R4是氢的中间体开始制备式I化合物的方法。
基团-NH-C(R8)(R8′)-C(＝O)-形成氨基酸残基，其包括天然和非天然的氨基酸残基。这些氨基酸残基(其中R8是氢)具有特别的重要性。在后面的实例中，R8’不是氢，在非对称性碳原子带有的构型可以是L-氨基酸构型。实例是丙氨酸(Ala)、缬氨酸(Val)、异亮氨酸(Ile)及苯丙氨酸(Phe)残基，特别是L-Ala、L-Val、L-Ile和L-Phe。氨基酸残基(其中R8和R8’与它们所连接的碳原子一起形成C3-C7环烷基)的实例是1，1-环丙基氨基酸或1，1-环丁基氨基酸。
式I化合物的亚组是本文定义的那些式I化合物，或式I化合物的亚组，其中R1是氢；或其中R1是碘代。
式I化合物的亚组是本文定义的那些式I化合物，或式I化合物的亚组，其中R4是下式的基团
Figure BPA00001388485200041
式I化合物的亚组是本文定义的那些式I化合物，或式I化合物的亚组，其中：
(a)R7是苯基，其任选由1、2或3个各自独立地选自卤代、C1-C6烷基、C3-C6烯基、C1-C6烷氧基、羟基和氨基的取代基取代；或R7是萘基；或R7是吲哚基；或R7是N-叔丁氧羰基吲哚基；
(b)R7是苯基，其任选由1、2或3个各自独立地选自卤代、C1-C6烷基、C3-C6烯基和C1-C6烷氧基的取代基取代；或R7是萘基；
(c)R7是苯基，其任选由卤代或C1-C6烷基取代，或R7是萘基；
(d)R7是苯基，其由C1-C4烷氧羰基取代；
(e)R7是苯基，其由C1-C2烷氧羰基取代；
(f)R7是苯基，其任选由氯代或C1-C6烷基取代；或R7是萘基；
(g)R7是苯基，其任选由1、2或3个各自独立地选自卤代和C1-C6烷基的取代基取代；
(h)R7是苯基，其任选由1或2个各自独立地选自卤代、C1-C6烷基、C3-C6烯基、C1-C6烷氧基、羟基和氨基的取代基取代；或R7是萘基；或R7是吲哚基；或R7是N-叔丁氧羰基吲哚基；
(i)R7是苯基，其任选由1个选自卤代、C1-C6烷基、C3-C6烯基、C1-C6烷氧基、羟基和氨基的取代基取代；或R7是萘基；或R7是吲哚基；或R7是N-叔丁氧羰基吲哚基；
(j)R7是苯基，其任选由1个选自卤代、C1-C6烷基、C3-C6烯基和C1-C6烷氧基的取代基取代；
(k)R7是萘基；
(l)R7是5-吲哚基或N-叔丁氧羰基-5-吲哚基。
在一个实施方案中，在式I化合物或其任何亚组中是吲哚基的R7基团是5-吲哚基或是N-C1-C6烷氧羰基吲哚基的R7基团是N-叔丁氧羰基-5-吲哚基，特别是N-叔丁氧羰基-5-吲哚基。该吲哚基当在其5-位置连接时可如下表示：
Figure BPA00001388485200061
其中R7a是氢或C1-C6烷氧羰基，或R7a特别是氢或叔丁氧羰基。
式I化合物的亚组是本文定义的那些式I化合物或式I化合物的亚组，其中R8是氢且R8’是甲基或C1-C6烷基，例如异丙基或异丁基。式I化合物的亚组是本文定义的那些式I化合物或式I化合物的亚组，其中部分是甘氨酰基、丙氨酰基或缬氨酰基(Gly、Ala或Val；特别是Gly、L-Ala或L-Val)。
式I化合物的亚组是本文定义的那些式I化合物或式I化合物的亚组，其中
Figure BPA00001388485200063
部分具有结构
Figure BPA00001388485200064
其中R8是氢且R8’是氢、C1-C6烷基、苄基；或
R8是氢且R8’是氢或C1-C6烷基；
R8是氢且R8’是C1-C2烷基；
R8是氢且R8’是甲基。
在一个实施方案中，R8和R8’与它们所连接的碳原子一起形成C3-C7环烷基；或特别是形成C3-C4环烷基；或尤其是形成环丙基。
式I化合物的亚组是本文定义的那些式I化合物或式I化合物的亚组，其中
(a)R9是C1-C10烷基、C3-C7环烷基、C3-C6烯基或苄基；
(b)R9是C1-C8烷基或苄基；
(c)R9是C1-C6烷基或苄基；
(d)R9是C1-C6烷基；
(e)R9是C1-C4烷基；或
(f)R9是甲基、乙基、异丙基、1-甲基-丙基、异丁基、丁基或叔丁基；
(g)R9是苄基；
(h)R9是环戊基、5-己烯基、2，2-二甲基-丁基、辛基、2-丙基-戊基。
有兴趣的是在实验部分中提到的化合物及其药学上可接受的盐或溶剂化物。特别有兴趣的是在实验部分中列出的化合物编号1、3、5、9、10、11、12、13、14、15的化合物。
式I化合物有数个手性中心，特别是在碳原子1’、3’和4’。虽然在这些碳原子的立体化学是固定的，所述化合物在各手性中心可以显示至少75％，优选至少90％，例如超过95％的对映异构纯(enantiomericpurity)。
手性也可以存在于取代基中，例如在R4是
Figure BPA00001388485200071
时，其在携带碳的R8(在此R8和R8’是不同)及在磷原子具有手性。磷中心可以作为Rp或Sp，或这样的立体异构体的混合物，包括外消旋体存在。也可以存在从手性磷中心和手性碳原子所产生的非对映异构体。
在另一个方面，本发明提供式I化合物或其药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，用于治疗或预防HCV感染(或制备用于治疗或预防HCV感染的药物)。在根据本发明的治疗或预防的上下文中，代表性的HCV基因型包括基因型1b(流行于欧洲)或1a(流行于北美)。本发明也提供一种用于治疗或预防HCV感染，特别是基因型1a或1b的方法。
式I化合物是以定义的立体异构体为代表。这样的化合物的绝对构型可以使用本领域已知的方法测定，例如X-射线衍射或NMR和/或从已知立体化学的起始原料得知。根据本发明的药用组合物应优选含有基本立体异构纯的所指立体异构体的制剂。
本文提到的化合物及中间体的纯的立体异构形式被定义为基本上没有所述化合物或中间体的相同基本分子结构的其它对映异构或非对映异构(diastereomeric)形式的异构体。具体地说，术语“立体异构纯”涉及具有至少80％的立体异构体过量(也就是最少90％的一种异构体及最多10％的其它可能的异构体)至最高100％的立体异构体过量(也就是100％的一种异构体且没有其它异构体)的化合物或中间体，更特别是具有90％至最高100％的立体异构体过量的化合物或中间体，甚至更特别是具有94％至最高100％的立体异构体过量，且最特别是具有的97％至最高100％立体异构体过量的化合物或中间体。术语“对映异构纯”和“非对映异构纯”应以相同的方式理解，但是分别是指所提及混合物中的对映异构体过量及非对映异构体过量。
本发明化合物及中间体的纯的立体异构体形式可以通过实施本领域已知的方法而获得。例如，对映异构体可以通过用光学活性酸或碱使其非对映异构的盐进行选择性结晶而彼此分离。其实例是酒石酸、二苯甲酰基酒石酸、二甲苯酰基酒石酸及樟脑磺酸。或者，对映异构体可以通过使用手性固相的层析技术而分离。所述纯的立体化学异构形式也可以衍生自适当的起始原料的对应纯的立体化学性异构形式，条件是该反应以立体专一性进行。如果需要一种特定的立体异构体，优选所述化合物是通过立体专一性的制备方法所合成的。这些方法将有利地使用对映异构体纯的起始原料。
式I化合物的非对映异构性外消旋体可以分别通过常规方法获得。可有利地使用的适当物理分离方法是例如选择性结晶及层析法，例如柱层析法。
药学上可接受的加成盐包括式I化合物的治疗活性无毒的酸及碱加成盐形式。有兴趣的是本文指定的式I化合物或式I化合物的任何亚组的游离形式，即非盐形式。
药学上可接受的酸加成盐可以传统地通过用这样的合适的酸处理碱形式而获得。合适的酸包括例如无机酸例如氢卤酸(例如氢氯酸或氢溴酸)、硫酸、硝酸、磷酸等酸；或有机酸例如醋酸、丙酸、羟基醋酸、乳酸、丙酮酸、草酸(即乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(即丁二酸)、马来酸、富马酸、苹果酸(即羟基丁二酸)、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环己氨基磺酸(cyclamic)、水杨酸、对氨基水杨酸、扑酸(pamoic)等酸。相反地，所述盐形式可以通过用适当的碱处理而转化为游离碱形式。
含有酸性质子的式(I)化合物通过用合适的有机碱和无机碱处理，也可以转化成其无毒的金属或胺加成盐形式。合适的碱盐形式包括例如铵盐、碱金属及碱土金属盐，例如锂、钠、钾、镁、钙盐等，与有机碱所成的盐例如苄星青霉素(benzathine)、N-甲基-D-葡萄胺、海巴明(hydrabamine)盐，及与氨基酸例如精氨酸、赖氨酸等所成的盐。
术语“溶剂化物”包括式I化合物以及其盐可以形成的任何药学上可接受的溶剂化物。这样的溶剂化物是例如水合物、醇盐例如乙醇盐、丙醇盐等。
某些式(I)化合物也可以其互变异构形式存在。例如，酰胺(-C(＝O)-NH-)基团的互变异构形式是亚胺醇(-C(OH)＝N-)，其在具有芳族特征的环中可变成稳定的。尿苷碱是此种形式的实例。此类形式，虽然没有在本文代表的结构式中明确指出，也意欲包含在本发明的范围内。
在本文使用的“C1-C4烷基”作为一个基团或基团的一部分时，是定义具有从1至4个碳原子的饱和直链或支链的烃基，例如甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-丁基、2-甲基-1-丙基、2-甲基-2-丙基。“C1-C6烷基”包括C1-C4烷基和其具有5或6个碳原子的较高级同系物，例如1-戊基、2-戊基、3-戊基、2，2-二甲基丙基、1-己基、2-己基、2-甲基-1-丁基、2-甲基-1-戊基、2-乙基-1-丁基、3-甲基-2-戊基等。在C1-C6烷基中重要的是C1-C4烷基。“C1-C10烷基”包括C1-C6烷基和其具有7、8、9或10个碳原子的较高级同系物，例如庚基、2-庚基、3-庚基、2-甲基己基、辛基、2-辛基、3-辛基、壬基、2-壬基、3-壬基、2-丁基戊基、癸基、2-癸基等。在C1-C10烷基中重要的是C1-C6烷基。
“C1-C6烷氧基”意指-O-C1-C6烷基，其中C1-C6烷基的定义如上。C1-C6烷氧基的实例是甲氧基、乙氧基、正丙氧基或异丙氧基。
“C3-C7环烷基”包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环庚基。重要的是环丙基、环戊基和环己基。
术语“C3-6烯基”作为一个基团或基团的一部分时，是定义具有从3至6个碳原子及具有饱和碳-碳键及至少一个双键的直链及支链的烃基，例如1-丙烯基、2-丙烯基(或烯丙基)、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、2-甲基-2-丙烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、2-甲基-2-丁烯基、2-甲基-2-戊烯基等。在一个实施方案中，连接C3-6烯基至分子其它部分的碳原子是饱和的。在C3-6烯基中重要的是C3-4烯基。在C3-6烯基或C3-4烯基中重要的是且有一个双键的那些基团。
术语“卤代”泛指氟代、氯代、溴代和碘代。
在本文使用的术语“(＝O)”或“氧代”当连接至碳原子时形成羰基。必须注意的是当原子的价数容许时，该原子只能被氧代基团取代。
术语“单磷酸酯、二磷酸酯或三磷酸酯”指下面的基团：
Figure BPA00001388485200101
在本文使用时，在定义中使用的任何分子部分上的基团位置，可以在这样的部分的任何地方，只要其在化学上是稳定的。当任何变量可以在任何部分中上出现一次以上时，各定义是独立的。
每当在本文使用时，术语“式I化合物”或“本发明化合物”或类似的术语意欲包含式I化合物，其包括可能的立体化学异构体形式及其药学上可接受的盐和溶剂化物。
本发明也包括同位素标记的式I化合物或任何式I的亚组，其中一或多个原子被不同于通常在自然界中发现的原子的同位素所替代。这样的同位素的实例包括氢的同位素，例如2H及3H；碳例如11C、13C及14C；氮例如13N及15N；氧例如15O、17O及18O；磷例如31P及32P；硫例如35S；氟例如18F；氯例如36Cl；溴例如75Br、76Br、77Br及82Br；及碘例如123I、124I、125I及131I。同位素标记的本发明化合物可以使用适当同位素标记的试剂或起始原料，通过类似于本文描述的那些方法或通过本领域已知的技术制备。包含在同位素标记的化合物中的同位素的选择取决于该化合物的特殊应用。例如，用于组织分布测试时，并入放射性同位素例如3H或14C。用于成像应用时，正子放射同位素例如11C、18F、13N或15O将是有用的。并入氘可提供较大的代谢稳定性，导致例如增加化合物的活体内半衰期或降低所需的剂量。
通用合成方法
起始原料2’-脱氧-2’-螺环丙基尿苷可以根据J.Am，Chem.Soc.，1992，114，4007-4008中的描述制备。式I化合物，其中R4是基团
Figure BPA00001388485200111
可以通过使该起始原料与氯代氨基磷酸酯(phosphoramidochloridic acid ester)1d反应而制备。后者可以通过醇1a与POCl3在碱存在下反应，因而得到磷酰二氯1b，其再与氨基酸1c反应而制备。
Figure BPA00001388485200112
式I化合物，其中R1是卤代，可通过先将中间体1e转化为其经羟基保护的形式If，其接着例如用N-卤代琥珀酰亚胺卤化成Ig，例如用N-碘代琥珀酰亚胺卤化成Ih而制备。合适的羟基保护基为烷基化的甲硅烷基，特别是受阻烷基化的甲硅烷基，如叔丁基二甲基甲硅烷基、三异丙基甲硅烷基或1，1，3，3-四异丙基-二硅氧烷-1，3-二基(TIPDS)。这些基团通过起始醇与适当的甲硅烷基氯衍生物反应而引入，并且此后可用氟化物化合物如氟化四丁基铵(TBAF)去除，得到化合物Ih。在下图中表示这些反应，其中Pg是羟基保护基团如上述的甲硅烷基。
Figure BPA00001388485200121
在另一个方面，本发明涉及药用组合物，其含有治疗有效量的本文指定的式I化合物及药学上可接受的载体。治疗有效量在本文中是指在感染的患者或面临被感染的风险的患者中，足以以预防方式起作用而对抗HCV感染、稳定或降低HCV感染的量。在另一个方面，本发明涉及制备本文指定的药用组合物的方法，其包括使药学上可接受的载体与治疗有效量的本文特定的式I化合物密切混合。
因此，为了给药目的，本发明化合物或其任何亚组可以配制成多种医药形式。可以列举的合适组合物是通常用于全身性给予的药物的全部组合物。为制备本发明的药用组合物，将作为活性成份的有效量的特定化合物，任选以加成盐形式或金属复合物，以与药学上可接受的载体紧密的混合物形式合并，该载体可以有多种形式，这取决于给药所需的制剂形式。这些药用组合物合适为单一剂量形式，特别适合于口服、直肠、皮下或通过胃肠外注射给药。例如，在制备口服剂量形式的组合物时，在口服液体制剂例如悬浮液、浆剂、酏剂、乳剂及溶液剂的情形下，可以使用任何常用的药用介质，例如水、二醇、油、醇等；或在粉剂、丸剂、胶囊剂及片剂的情形下，可以使用固体载体例如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。因为其给药方便，片剂及胶囊剂代表最有利的口服剂量单位形式，在此情况下明显使用固体药用载体。对于不经肠道的组合物，载体将通常包括无菌的水，至少是大部分，虽然可包含其它成分，例如用于增加溶解度的成分。例如可以制备可注射的溶液，其中该载体包括盐水溶液、葡萄糖溶液或盐水与葡萄糖溶液的混合液。也可以制备可注射的悬浮液，在此情形下可以使用合适的液体载体、助悬剂等。也包括打算在使用前不久将其转化成液体形式制剂的固体形式制剂。在适合用于皮下给药的组合物中，载体任选地含有穿透促进剂和/或合适的湿润剂，任选与少量比例的任何天然的合适添加剂混合，该添加剂在皮肤上不会引起明显的伤害作用。本发明化合物也可以溶液、悬浮液或干粉的形式，使用任何本领域已知的传递系统通过口腔吸入或吹入而给药。
将上述药用组合物配制成单位剂量形式以方便给药及使剂量一致是特别有利的。单位剂量形式在本文中使用时指适合作为单一剂量的物理上分开的单位，各单位含有经计算可产生所需医疗效应的预定量的活性成分以及所需的药用载体。此类单位剂量形式的实例是片剂(包括刻痕片或包衣片)、胶囊剂、丸剂、栓剂、粉末袋、糯米纸囊剂、可注射溶液或悬浮液等，及其隔离的多重药包(segregated multiples)。
式I化合物显现对抗HCV的活性且可以用于治疗及预防HCV感染或与HCV相关的疾病。后者包括进行性肝纤维化、炎症和坏死导致肝硬化、晚期肝病及HCC。而且，相信多种本发明化合物在对抗HCV的突变株时是有活性的。另外，多种本发明化合物显示出良好的药物动力学特征并在生物利用度方面具有吸引人的性质，包括可接受的半衰期、AUC(曲线下面积)及峰值，并缺少不利的现象例如不够快速的开始及组织滞留。
式I化合物对抗HCV的体外抗病毒活性可以根据Lohmann et al.(1999)Science 285：110-113并经Krieger et al.(2001)Journal of Virology75：4614-4624(通过引用结合到本文中)所叙述的进一步的改进方法在细胞HCV复制子系统中测试，其在实施例部分中再进一步举例说明。此模型，虽然不是用于HCV的完全感染模型，但是被广泛地接受作为现有可利用的自主HCV RNA复制的最可靠(robust)及有效的模型。在HCV复制子模型中，应该理解，区分专一性地干扰HCV功能的化合物是重要的，由这些干扰，所述化合物发挥毒性作用或抑制细胞生长的效应，并因此造成降低HCV RNA或连接的报道分子酶浓度。使用氧化还原荧光染料例如刃天青，评估基于例如粒腺体酶活性的细胞毒性的方法是本领域已知的。而且，有细胞计数筛选用于评估连接的报道基因活性的非选择性抑制作用，例如萤火虫荧光素酶。合适的细胞类型可以通过稳定的转染而配备荧光素酶报道基因，其表达依赖于组成型活性基因启动子，且这样的细胞可以作为计数-筛选使用，以排除非选择性抑制剂。
由于其抗病毒的性质，特别是其抗-HCV性质，式I化合物，包括其任何可能的立体异构体、药学上可接受的加成盐或溶剂化物，可用于治疗感染HCV的温血动物特别是人类，及用于预防HCV感染。本发明还涉及治疗感染HCV或有感染HCV的风险的温血动物特别是人类的方法，所述方法包括给予抗HCV有效量的本文指定的式I化合物。
本发明化合物因此可以作为药物使用，特别是作为抗HCV药物。所述作为药物或治疗方法的用途，包括将对抗与HCV感染相关病症的有效量系统给予感染HCV的患者或容易感染HCV的患者。
本发明也涉及本发明化合物在制备用于治疗或预防HCV感染的药物中的用途。
通常考虑抗病毒有效每日量是从约0.01至约700mg/kg，或约0.5至约400mg/kg，或约1至约250mg/kg，或约2至约200mg/kg，或约10至约150mg/kg体重。将所需的剂量在整天的适当间隔下，分成二、三、四或多次亚剂量(sub-dose)给药可能是适宜的。所述亚剂量可以配制为单位剂量形式，例如每单位剂量形式含有约1至约6000mg，或约50至约5000mg，或约100至约2000mg，或约200至约1000mg，或约100至约600mg，或约200至约500mg的活性成份。
本发明也涉及式I化合物，其药学上可接受的盐或溶剂化物，及另一种抗病毒化合物，特别是另一种抗HCV化合物的组合。术语“组合”可涉及含有(a)上述特定的式I化合物及(b)任选的另一种抗HCV化合物，作为组合的制剂供同时、分开或依序使用于治疗HCV感染的产品。
可以在这样的组合中使用的抗HCV化合物包括HCV聚合酶抑制剂、HCV蛋白酶抑制剂、在HCV生命周期中的其它标把的抑制剂、及免疫调节剂及其组合。HCV聚合酶抑制剂包括NM283(伐洛他滨)、R803、JTK-109、JTK-003、HCV-371、HCV-086、HCV-796及R-1479、R-7128、MK-0608、VCH-759、PF-868554、GS9190、XTL-2125、NM-107、GSK625433、R-1626、BILB-1941、ANA-598、IDX-184、IDX-375、MK-3281、MK-1220、ABT-333、PSI-7851、PSI-6130、VCH-916。HCV蛋白酶抑制剂(NS2-NS3抑制剂及NS3-NS4A抑制剂)包括BILN-2061、VX-950(替拉瑞韦)、GS-9132(ACH-806)、SCH-503034(boceprevir)、TMC435350(也称为TMC435)、TMC493706、ITMN-191、MK-7009、BI-12202、BILN-2065、BI-201335、BMS-605339、R-7227、VX-500、BMS650032、VBY-376、VX-813、SCH-6、PHX-1766、ACH-1625、IDX-136、IDX-316。HCV NS5A抑制剂的实例是BMS790052，A-831、A-689、NIM-811及DEBIO-025是NS5B亲环蛋白抑制剂的实例。
在HCV生命周期中的其它标把的抑制剂包括NS3螺旋酶；金属蛋白酶抑制剂；反义寡核苷酸抑制剂例如ISIS-14803及AVI-4065；siRNA’s例如SIRPLEX-140-N；向量编码的短发夹RNA(shRNA)；DNAzymes；HCV专一性核糖酶例如肝核酶(heptazyme)、RPI.13919；进入抑制剂例如HepeX-C、HuMax-HepC；α葡萄糖苷酶抑制剂例如西戈韦、UT-231B等；KPE-02003002；及BIVN 401。
免疫调节剂包括天然及重组的干扰素异构型(isoform)化合物，包括α-干扰素、β-干扰素、γ-干扰素及ω-干扰素，例如Intron A
Figure BPA00001388485200161
Roferon-A
Figure BPA00001388485200162
Canferon-A300
Figure BPA00001388485200163
Advaferon
Figure BPA00001388485200164
Infergen
Figure BPA00001388485200165
Humoferon
Figure BPA00001388485200166
Sumiferon MPAlfaferone
Figure BPA00001388485200168
IFN-beta
Figure BPA00001388485200169
及Feron
Figure BPA000013884852001610
聚乙二醇衍生化的(聚乙二醇化)干扰素化合物，例如PEG干扰素-α-2a(Pegasys
Figure BPA000013884852001611
)，PEG干扰素-α-2b(PEG-Intron
Figure BPA000013884852001612
)及聚乙二醇化的IFN-α-con1；长效制剂和干扰素化合物的衍生作用例如白蛋白-稠合的干扰素albuferonα(白蛋白-干扰素α)；刺激干扰素在细胞中合成的化合物例如瑞喹莫德；白介素；增强1型辅助T细胞反应的发展的化合物例如SCV-07；TOLL-样受体激动剂例如CpG-10101(actilon)及艾托立宾；胸腺素α-1；ANA-245；ANA-246；组胺二盐酸盐；丙帕锗；tetrachlorodecaoxide；阿普林津(ampligen)；IMP-321；KRN-7000；抗体例如西瓦赛(civacir)及XTL-6865；及预防性与治疗性疫苗例如InnoVac C及HCV E1E2/MF59。
其它抗病毒剂包括利巴韦林、金刚烷胺(amantadine)、维瑞密丁(viramidine)、硝唑沙奈；替比夫定；NOV-205；塔利巴林(taribavirin)；内部核糖体进入的抑制剂；广谱病毒抑制剂例如IMPDH抑制剂和麦考酚酸及其衍生物并包括但不限于VX-497(美泊地布(merimepodib))、VX-148和/或VX-944)；或任何上述药物的组合。
用于所述组合的特定药物包括干扰素-α(IFN-α)、聚乙二醇化干扰素-α或利巴韦林，以及基于靶向抗HCV表位的抗体的治疗剂、小干扰的RNA(Si RNA)、核糖酶、DNAzymes、反义RNA、例如NS3蛋白酶、NS3解旋酶及NS5B聚合酶的小分子拮抗剂。
在另一个方面，本发明提供本文特定的式I化合物及抗HIV化合物的组合。后者优选是对药物代谢和/或药物动力学具有正面效应而改善生物利用度的HIV抑制剂。这样的HIV抑制剂的实例是利托那韦(ritonavir)。据此，本发明还提供含有(a)式I化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物；及(b)利托那伟或其药学上可接受的盐的组合。化合物利托那韦、其药学上可接受的盐及其制备方法公开于WO 94/14436中。
本发明还涉及制备本文描述的组合的方法，其包括合并上面指定的式I化合物及另一种药物(例如抗病毒剂，包括抗HCV或抗HIV药物，特别是上述那些药物)的步骤。
所述组合可发现在制备用于在感染HCV的哺乳动物中治疗HCV感染的药物中的用途，所述组合特别是含有上面指定的式I化合物及干扰素-α(IFN-α)、聚乙二醇化干扰素-α或利巴韦林。或者本发明提供治疗感染HCV的哺乳动物特别是人类的方法，其包括将有效量的上面指定的组合给予所述哺乳动物。具体地说，所述治疗包括所述组合的全身性给药，且有效量是指有效治疗与HCV感染相关的临床病症的量。
在一个实施方案中，上述组合被配制成如上所述的药用组合物的形式，其含有上述的活性成分和载体。各活性成分可以分别配制且各制剂可以同时给予，或可提供含有两者的一种制剂，并且如果需要时可提供其它活性成分。在前面实例中，组合也可以配制为组合的制剂供同时、分开或依序用于HCV治疗。所述组合可以采用上述的任何形式。在一个实施方案中，两种成分被配制在一种剂型例如固定剂量组合中。在一个特定实施方案中，本发明提供含有(a)治疗有效量的式I化合物，包括其可能的立体异构形式，或其药学上可接受的盐或其药学上可接受的溶剂化物，及(b)治疗有效量的利托那韦或其药学上可接受的盐，及(c)载体的组合物。
本发明的组合的各个成分可以在治疗过程的不同时间分开给予或以分开或单一的组合形式同时给予。本发明意欲包括同时或交替治疗的所有这样的治疗方案且术语“给药”是据此解释。在一个优选实施方案中，分开的剂型被同时给予。
在一个实施方案中，本发明的组合含有一定量的利托那韦或其药学上可接受的盐，相对于当单独给予所述式I化合物时的生物利用度而言，该量足以在临床上改善式I化合物的生物利用度。或者是，本发明的组合含有一定量的利托那韦或其药学上可接受的盐的量，相对于当单独给予所述式I化合物时的所述至少一种药物动力学变量而言，该量其足以增加式I化合物选自t1/2、Cmin、Cmax、Css、在12小时的AUC或在24小时的AUC的至少一种药物动力学变量。
本发明的组合可以以在所述组合中包含的各成分的特定剂量范围内给予人类，例如如上描述的式I化合物，及利托那韦或药学上可接受的盐的剂量水平可在0.02至10.0g/天范围内。
式I化合物对利托那韦的重量比抗原在从约30∶1至约1∶15，或约15∶1至约1∶10，或约15∶1至约1∶1，或约10∶1至约1∶1，或约8∶1至约1∶1，或约5∶1至约1∶1，或约3∶1至约1∶1，或约2∶1至约1∶1的范围内。式I化合物及利托那韦可以每天一或两次同时给药，优选口服，其中每剂量的式I化合物的量是如上所述；且每次剂量的利托那韦的量是从1至约2500mg，或约50至约1500mg，或约100至约800mg，或约100至约400mg，或40至约100mg的利托那韦。
实施例
下面的实施例旨在说明本发明，而不应解释为对其范围的限制。
在各情形中，给出保留时间(Rt(分钟))及观察到的m/z。当在LC-MS观察两种非对映异构体的分离时，特别指出两个保留时间。当化合物没有给出磷原子的立体化学标示时，该化合物是两种磷-非对映异构体的1∶1混合物。在部分情形中，此种混合物被分离，但是不知道确实的立体化学构型。这样的化合物被标示A和B且可通过其物理化学性质进行特征鉴定。
实施例1：化合物(1)的合成
向于乙醚(250毫升)中的1-萘醇(1.0当量，69.4mmol，10.0g)中加入磷酰氯(1.0当量，69.4mmol，6.5ml)并将溶液冷却至-78℃。加入无水N，N-二异丙基乙胺(DIPEA；1.0当量，69.4mmol，12.1ml)并将所得的溶液放置以升温至室温过夜。将白色浆状物在惰性氛围下过滤并除去全部挥发物，得到无色液体的A，其不再纯化而在下一个步骤中使用。
将A(1.0当量，4.6mmol，1.0g)及2-氨基-丙酸苄酯盐酸盐(1.0当量，4.6mmol，1.2g)于CH2Cl2(40ml)中的溶液冷却至-80℃。逐滴加入无水DIPEA(2.0当量，9.3mmol，1.6ml)。1小时后使反应温热至室温。再持续搅拌1小时并在减压下将溶剂除去。加入无水乙醚并将沉淀物过滤及在氩气氛围下用无水乙醚洗涤两次。将过滤液蒸发至干后得到B，其作为在四氢呋喃(THF)中的0.97M溶液在-18℃储存。
在室温下，向C(1.0当量，0.59mmol，150mg)的无水THF(6ml)溶液中加入叔丁基MgCl(1.5当量，0.89mmol，521μl，在THF中的1.7M溶液)。逐滴加入B(1.4当量，0.83mmol，852μl，在THF中的0.97M溶液)并将混合物在室温下搅拌2.5小时。加入30滴饱和的NH4Cl水溶液并将反应混合物在硅石上蒸发，然后通过柱层析法纯化(在CH2Cl2中的0-5％甲醇)，得到1(74mg，得率＝19％，纯度＝96％)，为非对映异构体的混合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.39-0.61(m，3H)1.01-1.12(m，1H)1.18-1.33(m，3H)3.88-4.09(m，3H)4.16-4.31(m，1H)4.31-4.42(m，1H)4.96-5.16(m，2H)5.35-5.49(m，2H)5.95(s，1H)6.25-6.37(m，1H)7.26-7.35(m，5H)7.36-7.62(m，5H)7.74(d，J＝8.02Hz，1H)7.95(d，J＝7.82Hz，1H)8.11(t，J＝7.92Hz，1H)11.31(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.21分钟，m/z＝620(M-H)-。
下列化合物使用类似于实施例1的程序制备。化合物分离为非对映异构体的混合物。对于化合物(7)，分离非对映异构体并分别测试。
化合物(2)
Figure BPA00001388485200201
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.47-0.62(m，3H)1.04-1.17(m，7H)1.24-1.34(m，3H)2.20(s，3H)3.12-3.25(m，1H)3.86-3.98(m，2H)3.99-4.07(m，1H)4.09-4.23(m，1H)4.24-4.35(m，1H)5.02-5.17(m，2H)5.36-5.46(m，1H)5.48-5.57(m，1H)5.92-5.99(m，1H)6.16-6.30(m，1H)7.23-7.39(m，7H)7.51-7.60(m，1H)11.31(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.64分钟，m/z＝660(M-H)-。
化合物(3)
Figure BPA00001388485200202
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.47-0.62(m，3H)1.01-1.09(m，1H)1.14(d，6H)1.17-1.24(m，3H)3.67-3.84(m，1H)3.85-3.96(m，1H)3.99-4.07(m，1H)4.09-4.23(m，1H)4.23-4.35(m，1H)4.78-4.89(m，1H)5.34-5.44(m，1H)5.51-5.59(m，1H)5.90-5.96(m，1H)5.96-6.07(m，1H)7.11-7.25(m，3H)7.31-7.40(m，2H)7.52-7.63(m，1H)11.31(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.24分钟&2.36分钟，m/z＝522(M-H)-。
化合物(4)
Figure BPA00001388485200211
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.43-0.63(m，3H)1.00-1.11(m，1H)1.31-1.46(m，6H)3.84-3.92(m，1H)3.96-4.06(m，1H)4.09-4.20(m，1H)4.22-4.32(m，1H)5.06(s，2H)5.33-5.43(m，1H)5.47-5.56(m，1H)5.88-6.01(m，2H)7.10-7.23(m，3H)7.24-7.40(m，7H)7.46-7.60(m，1H)11.30(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.07分钟，m/z＝584(M-H)-。
化合物(5)
Figure BPA00001388485200212
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.44-0.67(m，3H)0.99-1.33(m，7H)3.74-3.97(m，2H)3.97-4.10(m，3H)4.10-4.24(m，1H)4.24-4.39(m，1H)5.32-5.45(m，1H)5.51-5.62(m，1H)5.88-5.98(m，1H)5.98-6.12(m，1H)7.11-7.27(m，3H)7.30-7.44(m，2H)7.52-7.66(m，1H)11.31(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.10分钟&2.23分钟，m/z＝508(M-H)-。
化合物(6)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.38-0.61(m，3H)1.01-1.12(m，1H)3.73-3.86(m，2H)3.90-3.98(m，1H)4.00-4.11(m，1H)4.23-4.33(m，1H)4.33-4.43(m，1H)5.09(s，2H)5.35-5.49(m，2H)5.96(s，1H)6.08-6.27(m，1H)7.22-7.61(m，9H)7.74(d，J＝7.69Hz，1H)7.95(d，J＝7.10Hz，1H)8.12(d，J＝7.72Hz，1H)11.30(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.12分钟，m/z＝606(M-H)-。
化合物(7)
Figure BPA00001388485200222
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.46-0.63(m，3H)1.01-1.13(m，1H)1.20-1.31(m，3H)3.84-3.98(m，2H)3.99-4.06(m，1H)4.10-4.23(m，1H)4.24-4.34(m，1H)5.02-5.14(m，2H)5.35-5.44(m，1H)5.53-5.61(m，1H)5.90-5.98(m，1H)6.11-6.24(m，1H)7.14-7.24(m，2H)7.28-7.42(m，7H)7.52-7.61(m，1H)11.31(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.98分钟&3.07分钟，m/z＝604(M-H)-。
Figure BPA00001388485200231
化合物(7a)(异构体A)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.45-0.61(m，3H)；1.01-1.15(m，1H)；1.24(d，J＝6.46Hz，3H)；3.82-3.95(m，2H)；3.96-4.07(m，1H)；4.13-4.24(m，1H)；4.24-4.34(m，1H)；5.09(s，2H)；5.36-5.48(m，1H)；5.58(d，J＝7.63Hz，1H)；5.95(s，1H)；6.20(t，J＝11.35Hz，1H)；7.17(d，J＝7.82Hz，2H)；7.29-7.43(m，7H)；7.55(d，J＝7.63Hz，1H)；11.33(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝4.02分钟，m/z＝604(M-H)-。
化合物(7b)(异构体B)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.48-0.61(m，3H)；1.02-1.13(m，1H)；1.26(d，J＝7.04Hz，3H)；3.86-3.98(m，2H)；3.99-4.05(m，1H)；4.09-4.20(m，1H)；4.24-4.32(m，1H)；5.03-5.13(m，2H)；5.34-5.44(m，1H)；5.57(d，J＝8.02Hz，1H)；5.94(s，1H)；6.18(dd，J＝12.91，10.17Hz，1H)；7.21(d，J＝8.61Hz，2H)；7.30-7.41(m，7H)；7.57(d，J＝8.22Hz，1H)；11.32(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝4.07分钟，m/z＝604(M-H)-。
化合物(8)
Figure BPA00001388485200232
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.46-0.65(m，3H)1.02-1.11(m，1H)1.14(t，J＝7.05Hz，3H)1.18-1.32(m，3H)3.73-3.962(m，2H)3.97-4.09(m，3H)4.11-4.24(m，1H)4.24-4.36(m，1H)5.34-5.46(m，1H)5.53-5.62(m，1H)5.90-5.98(m，1H)6.05-6.18(m，1H)7.17-7.28(m，2H)7.43(d，J＝8.80Hz，2H)7.54-7.62(m，1H)11.33(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.41分钟&2.51分钟，m/z＝542(M-H)-。
化合物(9)
Figure BPA00001388485200241
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.41-0.64(m，3H)0.99-1.14(m，1H)1.16-1.33(m，3H)3.82-3.97(m，2H)4.02(d，J＝5.28Hz，1H)4.08-4.23(m，1H)4.23-4.34(m，1H)5.01-5.15(m，2H)5.34-5.45(m，1H)5.56(d，J＝8.02Hz，1H)5.95(s，1H)6.04-6.17(m，1H)7.19(d，J＝7.43Hz，3H)7.26-7.41(m，7H)7.51-7.62(m，1H)11.31(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝1.98分钟，m/z＝570(M-H)-。
化合物(10)
Figure BPA00001388485200242
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.43-0.66(m，3H)0.83(d，J＝5.09Hz，6H)1.03-1.12(m，1H)1.12-1.34(m，11H)1.53-1.66(m，1H)3.76-4.09(m，5H)4.10-4.24(m，1H)4.24-4.36(m，1H)5.34-5.50(m，1H)5.56(d，J＝7.63Hz，1H)5.92-5.98(m，1H)5.99-6.12(m，1H)7.14-7.24(m，3H)7.36(t，J＝7.53Hz，2H)7.52-7.63(m，1H)11.32(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.53分钟，m/z＝594(M+H)+。
化合物(11)
Figure BPA00001388485200243
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.43-0.63(m，3H)0.86(s，9H)0.99-1.12(m，1H)1.19-1.32(m，3H)3.62-3.71(m，1H)3.72-3.80(m，1H)3.80-3.97(m，2H)4.02(br.s.，1H)4.08-4.24(m，1H)4.24-4.37(m，1H)5.29-5.46(m，1H)5.55(d，J＝7.43Hz，1H)5.94(d，J＝7.24Hz，1H)6.00-6.13(m，1H)7.07-7.25(m，3H)7.35(t，J＝7.73Hz，2H)7.49-7.66(m，1H)11.31(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.08分钟，m/z＝552(M+H)+。
化合物(12)
Figure BPA00001388485200251
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.46-0.63(m，3H)0.81-0.90(m，3H)1.04-1.12(m，1H)1.17-1.36(m，5H)1.45-1.56(m，2H)3.73-4.09(m，5H)4.10-4.24(m，J＝11.32，11.32，5.66，5.46Hz，1H)4.24-4.36(m，1H)5.33-5.46(m，1H)5.52-5.60(m，1H)5.91-5.98(m，1H)5.98-6.09(m，1H)7.10-7.28(m，3H)7.29-7.43(m，2H)7.51-7.65(m，1H)11.29(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.63分钟&2.74分钟，m/z＝538(M+H)+。
化合物(13)
Figure BPA00001388485200252
1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 0.54-0.78(m，3H)0.85-0.98(m，6H)1.20-1.33(m，1H)1.33-1.48(m，3H)1.84-2.01(m，J＝10.05，6.68，3.34，3.34Hz，1H)3.64-4.52(m，9H)5.52-5.78(m，1H)5.99-6.10(m，1H)7.14-7.59(m，6H)8.64(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.57分钟&2.68分钟，m/z＝536(M-H)-。
化合物(14)
Figure BPA00001388485200261
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 11.25-11.38(1H，m)7.54-7.63(1H，m)7.32-7.42(2H，m)7.14-7.25(3H，m)5.97-6.06(1H，m)5.92-5.97(1H，m)5.53-5.60(1H，m)5.36-5.44(1H，m)4.98-5.07(1H，m)4.25-4.37(1H，m)4.09-4.25(1H，m)4.00-4.09(1H，m)3.87-3.98(1H，m)3.67-3.84(1H，m)1.70-1.88(2H，m)1.44-1.69(6H，m)1.16-1.27(3H，m)1.02-1.15(1H，m)0.46-0.64(3H，m)。LC-MS：Rt＝2.65分钟&2.76分钟，m/z＝548(M-H)-。
化合物(15)
Figure BPA00001388485200262
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.42-0.62(m，3H)0.74-0.86(m，3H)1.02-1.10(m，1H)1.11-1.32(m，5H)1.34-1.52(m，2H)3.80-4.01(m，4H)4.06(t，J＝6.36Hz，1H)4.16-4.32(m，1H)4.32-4.42(m，1H)5.38(d，J＝5.48Hz，1H)5.40-5.51(m，1H)5.95(s，1H)6.14-6.35(m，1H)7.40-7.63(m，5H)7.74(d，J＝5.67Hz，1H)7.95(d，J＝6.06Hz，1H)8.05-8.18(m，1H)11.30(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.19分钟，m/z＝588(M+H)+。
化合物(16)
Figure BPA00001388485200271
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.43-0.64(m，3H)1.02-1.11(m，1H)1.19-1.30(m，3H)1.62(s，9H)3.86-3.99(m，2H)4.03(t，J＝6.05Hz，1H)4.11-4.24(m，1H)4.25-4.35(m，1H)5.04-5.13(m，2H)5.33-5.42(m，1H)5.48-5.56(m，1H)5.93-5.99(m，1H)6.00-6.13(m，1H)6.66(d，J＝2.93Hz，1H)7.09-7.21(m，1H)7.23-7.36(m，5H)7.40-7.47(m，1H)7.47-7.58(m，1H)7.69(d，J＝2.93Hz，1H)，7.97(d，J＝8.20Hz，1H)11.28(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝3.54分钟&3.60分钟，m/z＝711(M+H)+。
化合物(17)
Figure BPA00001388485200272
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.42-0.66(m，3H)0.95-1.13(m，4H)2.76-2.87(m，1H)2.87-3.01(m，1H)3.76-4.14(m，7H)5.32-5.43(m，1H)5.50-5.57(m，1H)5.91-6.01(m，1H)6.09-6.27(m，1H)7.00-7.08(m，2H)7.11-7.35(m，8H)7.46-7.56(m，1H)11.30(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.69分钟&2.78分钟，m/z＝586(M+H)+。
化合物(18)
Figure BPA00001388485200281
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.46-0.63(m，3H)1.02-1.13(m，1H)1.17-1.28(m，3H)1.30-1.43(m，2H)1.47-1.60(m，2H)1.94-2.07(m，2H)3.75(s，3H)3.79-4.09(m，5H)4.09-4.24(m，1H)4.25-4.37(m，1H)4.88-5.14(m，4H)5.33-5.44(m，1H)5.55(d，J＝8.00Hz，1H)5.67-5.80(m，1H)5.80-5.90(m，1H)5.89-6.03(m，2H)6.64-6.74(m，1H)6.84-6.94(m，1H)7.13-7.23(m，1H)7.54-7.65(m，1H)11.31(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝3.44分钟&3.51分钟，m/z＝634(M+H)+。
化合物(19)
Figure BPA00001388485200282
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.41-0.62(m，3H)1.00-1.11(m，1H)1.23(s，12H)3.81-3.96(m，2H)3.96-4.05(m，1H)4.06-4.20(m，1H)4.20-4.31(m，1H)5.00-5.12(m，2H)5.31-5.42(m，1H)5.52(d，J＝8.02Hz，1H)5.93(s，1H)5.98-6.11(m，1H)7.00-7.12(m，2H)7.25-7.38(m，7H)7.46-7.61(m，1H)11.29(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.44分钟，m/z＝628(M+H)+。
化合物(20)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.40-0.62(m，3H)1.01-1.10(m，1H)1.19-1.30(m，3H)3.84-3.96(m，2H)3.99-4.06(m，1H)4.08-4.22(m，1H)4.22-4.33(m，1H)5.00-5.12(m，2H)5.39(br.s.，1H)5.45-5.52(m，1H)5.91-6.02(m，2H)6.37(s，1H)6.92(t，J＝10.37Hz，1H)7.27-7.41(m，8H)7.44-7.61(m，1H)11.12(br.s.，1H)11.29(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝1.89分钟，m/z＝611(M+H)+。
化合物(21)
Figure BPA00001388485200292
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.43-0.63(m，3H)0.71-0.85(m，3H)1.01-1.14(m，1H)1.48-1.73(m，2H)3.64-3.80(m，1H)3.85-3.97(m，1H)3.97-4.07(m，1H)4.07-4.23(m，1H)4.24-4.34(m，1H)5.01-5.16(m，2H)5.32-5.46(m，1H)5.50-5.60(m，1H)5.93-5.98(m，1H)6.00-6.11(m，1H)7.08-7.24(m，3H)7.26-7.43(m，7H)7.50-7.62(m，1H)11.30(br.s.，1H).LC-MS：Rt＝2.83分钟&2.94分钟，m/z＝586(M+H)+。
化合物(22)
Figure BPA00001388485200293
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.45-0.63(m，3H)1.02-1.18(m，7H)1.29(d，J＝6.06Hz，3H)2.20(s，3H)3.12-3.28(m，1H)3.85-3.98(m，2H)3.99-4.09(m，1H)4.09-4.23(m，1H)4.23-4.34(m，1H)5.02-5.16(m，2H)5.35-5.45(m，1H)5.45-5.55(m，1H)5.92-6.02(m，1H)6.08-6.24(m，1H)6.93(d，J＝7.63Hz，1H)7.10-7.21(m，2H)7.34(br.s.，5H)7.50-7.63(m，1H)11.32(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.40分钟，m/z＝628(M+H)+。
化合物(23)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.46-0.63(m，3H)0.85(t，J＝6.65Hz，3H)1.04-1.12(m，1H)1.15-1.32(m，13H)1.44-1.56(m，2H)3.73-4.08(m，5H)4.10-4.24(m，1H)4.24-4.36(m，1H)5.35-5.45(m，1H)5.55-5.63(m，1H)5.92-5.98(m，1H)6.05-6.20(m，1H)7.17-7.27(m，2H)7.43(d，J＝8.80Hz，2H)7.55-7.62(m，1H)11.32(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝3.72分钟，m/z＝626(M-H)+-。
化合物(24)
Figure BPA00001388485200302
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.46-0.65(m，3H)0.81(t，J＝7.40Hz，3H)1.02-1.17(m，4H)1.17-1.31(m，3H)1.49(dq，J＝7.28，7.11Hz，2H)3.67-3.87(m，1H)3.87-3.99(m，1H)3.99-4.10(m，1H)4.10-4.24(m，1H)4.24-4.37(m，1H)4.63-4.81(m，1H)5.32-5.44(m，1H)5.50-5.62(m，1H)5.90-5.97(m，1H)5.97-6.07(m，1H)7.12-7.25(m，3H)7.32-7.41(m，2H)7.54-7.62(m，1H)11.30(s，1H).LC-MS：Rt＝2.58分钟&2.69分钟，m/z＝536(M-H)-。
化合物(25)
Figure BPA00001388485200311
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.45-0.63(m，3H)1.04-1.09(m，1H)1.10-1.17(m，6H)1.22-1.33(m，3H)2.09-2.21(m，3H)2.78(spt，J＝6.91Hz，1H)3.84-3.97(m，2H)3.98-4.07(m，1H)4.09-4.24(m，1H)4.24-4.34(m，1H)5.03-5.16(m，2H)5.34-5.45(m，1H)5.48-5.57(m，1H)5.92-6.00(m，1H)6.07-6.17(m，1H)6.93(d，J＝7.82Hz，1H)7.12(d，J＝7.82Hz，1H)7.15(s，1H)7.27-7.39(m，5H)7.58(d，J＝8.02Hz，1H)11.30(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.44分钟，m/z＝628(M+H)+。
化合物(26)
Figure BPA00001388485200312
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 11.27-11.35(1H，m)7.51-7.64(1H，m)7.39-7.48(2H，m)7.17-7.28(1H，m)6.27-6.38(1H，m)5.90-5.97(1H，m)5.53-5.60(1H，m)5.34-5.42(1H，m)4.26-4.38(1H，m)4.14-4.26(1H，m)3.97-4.12(3H，m)3.85-3.96(1H，m)2.34-2.44(2H，m)2.17-2.28(1H，m)2.05-2.17(1H，m)1.67-1.88(2H，m)1.11-1.19(3H，m)1.04-1.11(1H，m)0.46-0.64(3H，m)。LC-MS：Rt＝2.57分钟，m/z＝568(M-H)-。
化合物(27)
Figure BPA00001388485200321
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 11.27-11.36(1H，m)7.50-7.65(1H，m)7.30-7.43(2H，m)7.12-7.25(3H，m)5.86-5.98(2H，m)5.50-5.59(1H，m)5.36-5.45(1H，m)4.24-4.36(1H，m)4.14-4.24(1H，m)3.98-4.11(1H，m)3.87-3.97(1H，m)3.52-3.60(3H，m)1.28-1.42(6H，m)1.02-1.13(1H，m)0.45-0.64(3H，m)。LC-MS：Rt＝1.57分钟，m/z＝510(M+H)+。
化合物(28)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 11.17-11.41(1H，m)7.48-7.64(1H，m)7.30-7.41(2H，m)7.12-7.26(3H，m)5.91-5.96(1H，m)5.74-5.86(1H，m)5.49-5.57(1H，m)5.32-5.41(1H，m)4.77-4.90(1H，m)4.26-4.36(1H，m)4.14-4.25(1H，m)3.99-4.10(1H，m)3.87-3.95(1H，m)1.28-1.41(6H，m)1.11-1.20(6H，m)1.04-1.10(1H，m)0.45-0.63(3H，m)。LC-MS：Rt＝2.41分钟，m/z＝536(M-H)-。
化合物(29)
Figure BPA00001388485200323
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 11.24-11.38(1H，m)7.49-7.65(1H，m)7.29-7.41(2H，m)7.11-7.23(3H，m)6.41-6.56(1H，m)5.90-5.97(1H，m)5.51-5.60(1H，m)5.34-5.44(1H，m)4.26-4.38(1H，m)4.15-4.26(1H，m)3.95-4.08(3H，m)3.87-3.95(1H，m)1.19-1.33(2H，m)1.02-1.17(5H，m)0.92-1.02(1H，m)0.45-0.63(3H，m)。LC-MS：Rt＝1.59分钟，m/z＝522(M+H)+。
化合物(30)
Figure BPA00001388485200331
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 11.23-11.38(1H，m)7.53-7.64(1H，m)7.29-7.43(2H，m)7.11-7.26(3H，m)5.85-6.01(2H，m)5.50-5.62(1H，m)5.34-5.46(1H，m)4.25-4.38(1H，m)4.09-4.25(1H，m)3.99-4.09(1H，m)3.86-3.98(1H，m)3.59-3.77(1H，m)1.30-1.43(9H，m)1.14-1.28(3H，m)1.00-1.13(1H，m)0.44-0.64(3H，m)。LC-MS：Rt＝1.90分钟，m/z＝538(M+H)+。
化合物(31)
Figure BPA00001388485200332
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 11.19-11.38(1H，m)7.52-7.63(1H，m)7.30-7.41(2H，m)7.12-7.24(3H，m)5.90-6.01(2H，m)5.52-5.60(1H，m)5.33-5.43(1H，m)4.79-4.92(1H，m)4.24-4.35(1H，m)4.09-4.24(1H，m)3.99-4.08(1H，m)3.85-3.97(1H，m)3.51-3.67(1H，m)1.45-1.71(2H，m)1.10-1.19(6H，m)1.03-1.10(1H，m)0.75-0.84(3H，m)0.47-0.62(3H，m)。LC-MS：Rt＝2.36分钟&2.46分钟，m/z＝536(M-H)-。
化合物(32)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm11.21-11.40(1H，m)7.49-7.66(1H，m)7.30-7.43(2H，m)7.12-7.25(3H，m)6.21-6.31(1H，m)5.90-5.98(1H，m)5.50-5.59(1H，m)5.36-5.44(1H，m)4.26-4.37(1H，m)4.15-4.26(1H，m)3.98-4.11(3H，m)3.88-3.97(1H，m)2.32-2.45(2H，m)2.17-2.29(1H，m)2.04-2.18(1H，m)1.67-1.88(2H，m)1.11-1.21(3H，m)1.01-1.11(1H，m)0.45-0.65(3H，m)。LC-MS：Rt＝1.76分钟，m/z＝536(M+H)+。
化合物(33)
Figure BPA00001388485200342
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.45-0.65(m，3H)0.93-1.04(m，1H)1.04-1.17(m，5H)1.21-1.35(m，2H)3.86-3.95(m，1H)3.95-4.09(m，3H)4.16-4.26(m，1H)4.27-4.38(m，1H)5.35-5.43(m，1H)5.54-5.62(m，1H)5.94(s，1H)6.50-6.64(m，1H)7.17-7.26(m，2H)7.38-7.47(m，2H)7.50-7.63(m，1H)11.31(s，1H)。LC-MS：Rt＝2.29分钟，m/z＝554(M-H)-。
化合物(34)
Figure BPA00001388485200343
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.44-0.65(m，3H)1.01-1.13(m，1H)1.18-1.33(m，6H)3.84-4.08(m，3H)4.12-4.37(m，4H)4.99-5.16(m，2H)5.31-5.43(m，1H)5.50-5.61(m，1H)5.91-6.00(m，1H)6.00-6.17(m，1H)7.21-7.40(m，6H)7.40-7.50(m，1H)7.50-7.63(m，2H)7.69-7.83(m，1H)11.29(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝2.96分钟，m/z＝644(M+H)+。
实施例2：
(C)的碘化类似物的化合物(F)使用下面的程序制备。
Figure BPA00001388485200351
在室温下，向(D)(1.44g，2.9mmol)的无水DMF(30ml)溶液中，加入N-碘代琥珀酰亚胺(1.63g，7.25mmol，2.5当量)。将反应混合物加热至110℃并在此温度搅拌过夜。冷却至室温后，通过加入NaHSO3在饱和NaHCO3溶液中的7.5％w/v溶液将反应猝灭。将混合物再用饱和NaHCO3溶液(250ml)稀释并用醋酸乙酯(3x200ml)提取。将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩后得到黄色油。通过柱层析法(庚烷/醋酸乙酯10至30％梯度)纯化后得到白色固体的(E)(1.44g，80％)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.54(dt，J＝10.05，5.12Hz，1H)0.62-0.70(m，1H)0.76(dt，J＝10.05，5.12Hz，1H)0.87-1.14(m，29H)3.74-3.82(m，1H)3.96(dd，J＝12.88，2.34Hz，1H)4.09(dd，J＝12.88，3.90Hz，1H)4.53(d，J＝7.80Hz，1H)5.73(s，1H)7.89(s，1H)11.73(s，1H)。LC-MS：Rt＝8.94分钟，m/z＝645(M+Na)+。
在室温下，向(E)(1.24g，1.99mmol)在甲醇(20ml)的悬浮液中，加入氟化铵(369mg，5当量)。使反应混合物在氩气下温热至50℃并搅拌7小时。将混合物浓缩后，将所得的残留物通过柱层析法(二氯甲烷/甲醇酯2.5至10％梯度)纯化。如此得到白色固体的(F)(711mg，92％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.50-0.65(m，3H)1.05(t，J＝5.95Hz，1H)3.56-3.67(m，1H)3.70-3.80(m，2H)4.05-4.15(m，1H)5.13-5.27(m，2H)5.85(s，1H)8.44(s，1H)11.65(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝1.32分钟，m/z＝403(M+Na)+。
实施例3：氨基磷酸酯(35-38)的合成
Figure BPA00001388485200361
将与吡啶共同蒸发而预先干燥的(F)(120mg，0.316mmol)溶解在N-甲基咪唑(0.3ml，3.79mmol，12当量)及无水二氯甲烷(3.2ml)中，并在室温及氩气下加入适当的氯代氨基磷酸酯(phosphoramidochloridate)(1.2当量)的约1M溶液。将反应搅拌3小时。如果需要时加入额外的试剂。起始原料全部消耗后，将反应混合物用二氯甲烷稀释并用0.5M HCl水溶液洗涤。将水层用二氯甲烷萃取，并将合并的有机层干燥(Na2SO4)，过滤并浓缩。将残留物通过柱层析法(二氯甲烷/甲醇1至10％梯度)纯化后得到白色固体的产物36-39(得率68-77％)。
化合物(35)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.50-0.62(m，3H)1.01-1.11(m，1H)1.19-1.31(m，3H)3.84-4.00(m，2H)4.01-4.09(m，1H)4.11-4.33(m，2H)5.02-5.14(m，2H)5.29-5.41(m，1H)5.83-5.95(m，1H)6.00-6.14(m，1H)7.11-7.23(m，3H)7.26-7.40(m，7H)7.93(s，1H)11.69(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝5.27分钟，m/z＝698(M+H)+。
化合物(36)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.44-0.64(m，3H)0.70-0.86(m，3H)1.00-1.12(m，1H)1.46-1.73(m，2H)3.67-3.82(m，1H)3.84-3.98(m，1H)4.00-4.10(m，1H)4.10-4.36(m，2H)4.98-5.15(m，2H)5.27-5.40(m，1H)5.83-5.94(m，1H)5.94-6.07(m，1H)7.09-7.24(m，3H)7.26-7.43(m，7H)7.87-7.99(m，1H)11.69(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝5.58分钟，m/z＝712(M+H)+。
化合物(37)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.48-0.64(m，3H)1.02-1.11(m，1H)1.14(t，J＝6.93Hz，3H)1.18-1.30(m，3H)3.74-3.86(m，1H)3.86-3.97(m，1H)3.98-4.10(m，3H)4.11-4.37(m，2H)5.27-5.42(m，1H)5.84-5.92(m，1H)5.93-6.06(m，1H)7.11-7.27(m，3H)7.31-7.42(m，2H)7.93(s，1H)11.70(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝4.24分钟，m/z＝653(M+NH4)+。
化合物(38)
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 0.49-0.63(m，3H)1.02-1.10(m，1H)1.15(d，J＝5.07Hz，6H)1.18-1.25(m，3H)3.70-3.84(m，1H)3.86-3.97(m，1H)4.02-4.10(m，1H)4.12-4.34(m，2H)4.78-4.90(m，1H)5.29-5.40(m，1H)5.85-5.91(m，1H)5.91-5.99(m，1H)7.12-7.24(m，3H)7.31-7.40(m，2H)7.93(s，1H)11.70(br.s.，1H)。LC-MS：Rt＝4.74分钟，m/z＝667(M+NH4)+。
生物实施例
复制子测定
在针对鉴定抑制HCV功能性细胞复制细胞系(也称为HCV复制子)的化合物的细胞测定中，检查式I化合物抑制HCV RNA复制的活性。细胞测定法是以Lohmann et al.(1999)，Science vol.285pp.110-113的描述并经Krieger et a1.(2001)，Joumal of Virology 75：4614-4624描述的改良，采用多靶筛选策略的双顺反子(bicistronic)表达构件为基础的。
测定法利用稳定转染的细胞系Huh-7luc/neo(以下称为Huh-Luc)。这种细胞系包藏(harbors)RNA编码的双顺反子表达构件，其通过报道蛋白部分(FfL-荧光素酶)及一个可选择的标记部分(neoR，新霉素磷酸转移酶)进行，含有从来自脑心肌炎病毒(EMCV)的内部核糖体进入位点(IRES)转译的HCV型1b的野生型NS3-NS5B区域。所述构件是通过HCV型1b的5’及3’NTRs(非转译区域)邻接(bordered)。复制子细胞在G418(neoR)存在下的持续培养取决于HCV RNA的复制。表达HCVRNA的稳定转染的复制子细胞(其自动复制且高量编码尤其是荧光素酶)用于筛选抗病毒的化合物。
在添加不同浓度的测试及对照化合物存在下，将复制子细胞放入384孔平板内。培养三天后，通过测定荧光素酶活性(使用标准荧光素酶测定底物及试剂与Perkin Elmer ViewLuxTM ultraHTS微量滴定板成像器)测量HCV复制。在对照组培养液中的复制子细胞在没有任何抑制剂时具有高荧光素酶表达。在Huh-Luc细胞上监测化合物对于荧光素酶活性的抑制活性，得到各测试化合物的剂量-反应曲线。然后计算EC50值，该值代表需要降低50％检测到的荧光素酶活性水平的化合物量，或更确定地说，代表复制遗传相关的HCV复制子RNA的能力。
细胞毒性
在Huh7-CMV-Luc复制子测定法中测定细胞毒性。将在巨细胞病毒(CMV)组成启动子(constitutive promotor)控制下，用荧光素酶报道基因稳定转化的复制子细胞(2500个细胞/孔)，在有或无测试化合物浓度存在下培养。在37℃，在潮湿的5％CO2氛围下培养三天后，通过测量Luc活性而量化细胞增殖，并以CC50值表示(细胞毒性，细胞生长的50％抑制浓度)。在384-孔平板上进行测试。
HIV测试法
测试本发明化合物对抗野生型人免疫缺陷病毒(HIV)的功效。使用细胞测定法根据下面程序进行，以评估抗病毒活性。将人T-细胞系MT4用绿色荧光蛋白(GFP)及HIV-专一性启动子，HIV-1长末端重复序列(LTR)进行基因工程改造。称为MT4LTR-EGFP的这种细胞系可以在体外用于评估所研究的化合物的抗-HIV活性。在感染HIV-1的细胞中，产生Tat蛋白，其向上调节LTR启动子且最后导致GFP报告蛋白生产的刺激，使得可以用荧光计测量正在进行的HIV-感染。可以测量有效浓度值例如50％有效浓度(EC50)并且通常以μM浓度表示。EC50值被定义为感染HIV的细胞的荧光降低50％的测试化合物的浓度。使用扫描显微镜进行HIV-1感染的监视。影像分析使得可以非常灵敏地检测病毒感染。在细胞坏死前进行测量，其通常是在感染后约五天发生，具体地说，是在感染后三天进行测量。在表中的IIIB栏列出对抗野生型IIIB株的EC50值。
在表1中的结果说明本发明化合物显示出对抗HCV的活性，同时缺少对抗HIV的活性。它们在毒性方面显示出有利的结果并具有可接受的选择性指数(EC50与CC50之比)。
结果
表1显示上面给出的实施例化合物所得的复制子结果(EC50，复制子)及细胞毒性结果(CC50(μm)(Huh-7))。也给出HIV活性(EC50HIV(μM))以及在HIV细胞系中的细胞毒性(CC50(μM)(MT-4))。
表1
“-”意指未得到测试结果

Claims (15)

1.一种式I化合物：
Figure FPA00001388485100011
包括其任何可能的立体异构体，其中：
R1是氢或卤代；
R4是单磷酸酯基、二磷酸酯基或三磷酸酯基；或R4是下式的基
Figure FPA00001388485100012
R7是苯基，其任选由1、2或3个各自独立地选自卤代、C1-C6烷基、C3-C6烯基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧羰基、羟基和氨基的取代基取代；或R7是萘基；或R7是吲哚基或N-C1-C6烷氧羰基吲哚基；
R8是氢、C1-C6烷基、苄基；
R8′是氢、C1-C6烷基、苄基；或
R8和R8′与它们所连接的碳原子一起形成C3-C7环烷基；
R9是C1-C10烷基、C3-C7环烷基、苄基或苯基，该苯基可任选由1、2或3个各自独立地选自羟基、C1-C6烷氧基、氨基、单-和二C1-C6烷基氨基的取代基取代；
或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
2.根据权利要求1的化合物，其中R4是下式的基团
Figure FPA00001388485100013
3.根据权利要求1-2中任一项的化合物，其中R7是苯基，其任选由1、2或3个各自独立地选自卤代、C1-C6烷基、C3-C6烯基和C1-C6烷氧基的取代基取代；或R7是萘基。
4.根据权利要求1-2中任一项的化合物，其中R7是苯基，其任选由1、2或3个各自独立地选自卤代及C1-C6烷基的取代基取代。
5.根据权利要求1-2中任一项的化合物，其中R7是苯基，其任选由卤代或C1-C6烷基取代；或R7是萘基。
6.根据权利要求1-5中任一项的化合物，其中R8是氢且R8’是氢或C1-C6烷基。
7.根据权利要求1-5中任一项的化合物，其中
Figure FPA00001388485100021
基团具有结构
Figure FPA00001388485100022
其中R8是氢且R8’是氢、C1-C6烷基、苄基。
8.根据权利要求7的化合物，其中R8是氢且R8’是C1-C2烷基。
9.根据权利要求7的化合物，其中R8是氢且R8’是甲基。
10.根据权利要求1-9中任一项的化合物，其中R9是C1-C10烷基、C3-C7环烷基、C3-C6烯基或苄基。
11.根据权利要求10的化合物，其中R9是C1-C8烷基或苄基。
12.根据权利要求10的化合物，其中R9是甲基、乙基、异丙基、1-甲基-丙基、异丁基、丁基、叔丁基、苄基、环戊基、5-己烯基、2，2-二甲基-丁基、辛基、2-丙基-戊基。
13.根据权利要求10的化合物，其中R9是乙基、异丙基、丁基、苄基、环戊基、5-己烯基、2，2-二甲基-丁基或2-丙基-戊基。
14.一种药用组合物，其含有抗病毒有效量的申请专利范围第1-13项中任一项定义的式I化合物及药学上可接受的载体。
15.根据权利要求1-13中任一项的化合物作为HCV抑制剂的用途。
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