CN102250163A

CN102250163A - 一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法

Info

Publication number: CN102250163A
Application number: CN2011101506021A
Authority: CN
Inventors: 王峰; 王琳; 张发成
Original assignee: Suzhou Paiteng Biomedical Technology Co Ltd
Current assignee: Suzhou Paiteng Biomedical Technology Co Ltd
Priority date: 2011-06-07
Filing date: 2011-06-07
Publication date: 2011-11-23

Abstract

本发明涉及一种操作简便、污染小、能耗少的从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，工艺步骤为：取鹿蹄草全草，加入到CO₂超临界萃取器中，得萃取物，加入到大孔吸附树脂柱上吸附，60-80%乙醇洗脱，通过强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以0.5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得。采用本发明制备高熊果酚苷，产品纯度高，易于实现产业化放大。

Description

一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法

技术领域

本发明涉及一种高熊果酚苷的制备方法，尤其是一种从植物中提取高熊果酚苷的制备方法。

背景技术

高熊果酚苷(Homoarbutin),分子式：C₁₃H₁₈O₇，分子量：286.281，CAS登录号：25712-94-1,主要存在于鹿蹄草科多种植物中，其中鹿蹄草科植物鹿蹄草 Pyrola calliantha H.Andres中含量丰富。其分子式如下。

现代研究表明，高熊果酚苷具有抗肿瘤作用，同时其也作为合成其它活性衍生物的原料。

鹿蹄草科植物鹿蹄草 Pyrola calliantha H.Andres的全草被作为中药鹿衔草使用，能补肾强骨，祛风除湿，止咳，止血。

现有技术中，尚没有适用于高纯度高熊果酚苷工业化大生产的制备工艺报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种利于大生产操作、产品纯度高的高熊果酚苷的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案。

取鹿蹄草全草，粉碎，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力20-40MPa，温度50-60℃, CO₂流量1-3ml/g生药·min，萃取时间80-120min，得萃取物，加入到大孔吸附树脂柱上吸附，60-80%乙醇洗脱，收集3-8倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，通过强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以0.5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得。

CO₂超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%。

CO₂超临界萃取压力30MPa，温度55℃, CO₂流量2ml/g生药·min。

CO₂超临界萃取时间100min。

大孔吸附树脂选自D101型、D102型、AB-8型大孔吸附树脂中的一种。

大孔吸附树脂洗脱用乙醇的浓度为70%。

大孔吸附树脂洗脱用乙醇的收集量为5柱体积。

强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂选自201×7型、201×4型、D201型强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂中的一种。

强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂选自001×7型、001×4型、D001型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂中的一种。

制备所得高熊果酚苷可采用下列方法检测。

试验例1 HPLC法测定高熊果酚苷纯度

色谱条件

色谱柱：十八烷基硅烷键合胶硅胶为填充剂；流动相：甲醇-水(90∶10)；流速：1mL/min；检测波长：224nm；柱温：30℃。

测定方法

精密称取高熊果酚苷2mg，置于50mL量瓶中，加人甲醇20mL，超声振荡使溶解，甲醇定容至刻度，吸取10μL，注入高效液相色谱仪，采用归一化法测定样品纯度。

采用本发明制备高熊果酚苷，利于大生产操作，能耗小，污染小。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

取鹿蹄草全草10Kg，粉碎，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4%，萃取压力20MPa，温度50℃, CO₂流量1ml/g生药·min，萃取时间80min，得萃取物，加入到D101型大孔吸附树脂柱上吸附，60%乙醇洗脱，收集3倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，通过201×7型强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以0.5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过001×7型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得高熊果酚苷2.5g，经HPLC检测，纯度为95.5%，UV、IR、MS、²HNMR、¹³CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。

实施例2

取鹿蹄草全草10Kg，粉碎，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为6%，萃取压力40MPa，温度60℃, CO₂流量3ml/g生药·min，萃取时间120min，得萃取物，加入到D102型大孔吸附树脂柱上吸附，80%乙醇洗脱，收集8倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，通过201×4型强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以0.5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过001×4型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得高熊果酚苷3.2g，经HPLC检测，纯度为94.4%，UV、IR、MS、²HNMR、¹³CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。

实施例3

取鹿蹄草全草10Kg，粉碎，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力30MPa，温度55℃, CO₂流量2ml/g生药·min，萃取时间100min，得萃取物，加入到AB-8型大孔吸附树脂柱上吸附，70%乙醇洗脱，收集5倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，通过D201型型强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以0.5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过D001型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得高熊果酚苷2.9g，经HPLC检测，纯度为97.6%，UV、IR、MS、²HNMR、¹³CNMR等表征其物理性状的数据与现有技术相一致。

Claims

1.一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述的方法由下列步骤组成：取鹿蹄草全草，粉碎，加入到CO₂超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力20-40MPa，温度50-60℃, CO₂流量1-3ml/g生药·min，萃取时间80-120min，得萃取物，加入到大孔吸附树脂柱上吸附，60-80%乙醇洗脱，收集3-8倍量柱体积洗脱液，减压回收乙醇并浓缩，通过强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂吸附，以0.5mol/L的NaOH溶液洗脱，收集洗脱，滤过，通过强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂，收集流出液，滤过，浓缩，加入甲醇结晶，分离结晶，洗涤、干燥即得。

2.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述CO₂超临界萃取夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%。

3.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述CO₂超临界萃取压力30MPa，温度55℃, CO₂流量2ml/g生药·min。

4.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述CO₂超临界萃取时间100min。

5.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述大孔吸附树脂选自D101型、D102型、AB-8型大孔吸附树脂中的一种。

6.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述大孔吸附树脂洗脱用乙醇的浓度为70%。

7.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述大孔吸附树脂洗脱用乙醇的收集量为5柱体积。

8.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂选自201×7型、201×4型、D201型强碱性苯乙烯型阴离子交换树脂中的一种。

9.根据权利要求1所述一种从鹿蹄草中提取高熊果酚苷的方法，其特征在于所述强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂选自001×7型、001×4型、D001型强酸性苯乙烯型阳离子交换树脂中的一种。