CN102240320B - 一种治疗前列腺增生的益芪胶囊 - Google Patents

Abstract

本发明涉及治疗前列腺增生的益芪胶囊，可有效解决良性前列腺增生治疗的问题，其解决的技术方案是，由益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉制成，益母草提取物与黄芪提取物的重量比为4-6∶6-4，益母草提取物和黄芪提取物粉碎过100目筛，混合均匀，再加入淀粉、滑石粉混匀，淀粉和滑石粉的加入量≤益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉总重量和的10％，淀粉、滑石粉重量比为1∶1，制粒，装入胶囊，即得，本发明制备方法简单，配伍得当，疗效好，无毒副作用，在治疗前列腺增生方面有显著效果，是治疗前列腺增生的创新，具有巨大的经济和社会效益。

Description

一种治疗前列腺增生的益芪胶囊

技术领域

本发明涉及医药，特别是一种治疗前列腺增生的益芪胶囊。

背景技术

前列腺增生症或称良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia，BPH)，国际良性前列腺增生咨询委员会对良性前列腺增生的定义为：存在良性前列腺长大或前列腺移行区长大的客观证据，有下尿路症状(LUTS)或下尿路症状加重以及上尿路受损，存在膀胱出口梗阻(BOO)^[1]。男性自35岁以后前列腺可有不同程度的增生，到50岁以后任何男性都会出现良性前列腺增生；一般50岁以后会出现排尿困难等临床症状，且随着年龄增长其发病率也不断升高。据国外统计，50岁以上发病率约50％，80岁以上人群中80％～100％前列腺增大。

前列腺增生病因复杂，病程迁延难愈，而且由于前列腺组织的特殊解剖结构，药物难以到达病灶，治疗相当困难。对于前列腺增生，20世纪80年代以前手术是唯一治疗BPH的方法，效果较好，但再次手术及并发症的发生率较高，依从性不理想。80年代后药物治疗成为第一线的治疗方法，此外亦有机械扩张、微波射频、激光、高聚焦超声、消融和硬化剂注射等治疗^[4]。药物治疗旨在减轻或缓解BPH患者的病情，减轻或缓解BPH所致的功能性梗阻症状；或使腺体缩小或萎缩来减轻或消除机械性梗阻，主要药物有激素活性药物、α-肾上腺素能受体阻滞剂、生长因子抑制剂(通尿灵)、5α-还原酶抑制剂(包括非那雄胺、度他雄胺)、a₁受体阻断剂(特拉唑嗪、多沙唑嗪等)等。但由于治疗前列腺增生时间较长，需要长期用药，西药的不良反应、疗效不稳、费用高等，常受到很多限制。中医将前列腺增生症归为“癃闭”、“淋证”范畴，以小便不利、点滴而短少为临床特征；常见病机有湿热下注、气滞血瘀、脾肾气虚等；治疗常采用活血化瘀、利尿通淋、清热解毒、补脾益肾等治则，但多治疗周期长，疗效也有待进一步提高。鉴于前列腺增生治疗面临的困境，迫切需要寻求新的治疗前列腺增生的方法和药物。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术缺陷，本发明之目的就是提供一种治疗前列腺增生的益芪胶囊，可有效解决良性前列腺增生治疗的问题。

本发明由益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉制成，益母草提取物与黄芪提取物的重量比为4-6∶6-4，益母草提取物和黄芪提取物粉碎过100目筛，混合均匀，再加入淀粉、滑石粉混匀，淀粉和滑石粉的加入量≤益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉总重量和的10％，淀粉、滑石粉重量比为1∶1，制粒，装入胶囊，即得；

所说的益母草提取物是，称取粉碎后的益母草药材，放入微波提取罐内，加入乙醇提取，乙醇用量为益母草药材重量的20倍，即益母草与乙醇的重量比为1∶20，提取温度50℃，提取时间30min，提取功率200W，得益母草粗提液备用；

S-8大孔吸附树脂纯化：S-8大孔吸附树脂先用乙醇浸泡24小时，用蒸馏水洗涤至无醇后备用；将处理好的大孔吸附树脂湿法装柱，将益母草粗提液以1mL/min流速通过层析柱进行吸附，先用4倍树脂体积的水洗脱杂质，再用8倍树脂体积的无水乙醇洗脱，收集无水乙醇洗脱液，减压浓缩乙醇，干燥粉碎，得益母草提取物，得率3-4％，本品为黄色的粉末，味苦。

所说的黄芪提取物是，称取黄芪药材粗粉，用无水乙醇回流提取2次，第一次加入黄芪药材重量的12倍的无水乙醇提取1.5h，第二次加入黄芪药材重量的8倍的无水乙醇提取1h，合并提取液，过滤，滤液减压回收乙醇至无醇味，静置，过滤，得黄芪提取液(黄芪提取液的浓度为150mg/ml)；取黄芪提取液，过大孔吸附树脂柱，先用4倍树脂体积的水洗脱，继用8倍树脂体积的质量浓度为30％的乙醇洗去杂质，再用8倍树脂体积的质量浓度为70％的乙醇洗脱，收集质量浓度为70％的乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥粉碎，得黄芪提取物，得率2.9-3.5％，本品为淡黄色的粉末，味微苦；

黄芪总皂苷：将黄芪提取物用分光光度法(中国药典2005年版一部附录V)测定，本品含黄芪总皂苷以黄芪甲苷计不少于75.0％。

黄芪甲苷：照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈-水(35∶65)；蒸发光散射检测器。理论塔板数按黄芪甲苷色谱峰计，不低于4000。

本发明为胶囊剂，内容物为淡黄色至黄棕色颗粒，气微，味微苦，破瘀行气，补益脾肺。用于前列腺增生的治疗，治疗时，口服本发明，一次2粒，一日3次。

本发明制备方法简单，配伍得当，疗效好，无毒副作用，在治疗前列腺增生方面有显著效果，是治疗前列腺增生的创新，具有巨大的经济和社会效益。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明的具体实施方式作详细说明。

实施例1

本发明由益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉制成，益母草提取物与黄芪提取物的重量比为4∶6，益母草提取物和黄芪提取物粉碎过100目筛，混合均匀，再加入淀粉、滑石粉混匀，淀粉和滑石粉的加入量为益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉总重量和的10％，淀粉、滑石粉重量比为1∶1，制粒，装入胶囊，即得；

所说的益母草提取物是，称取粉碎后的益母草药材，放入微波提取罐内，加入乙醇提取，乙醇用量为益母草药材重量的20倍，提取温度50℃，提取时间30min，提取功率200W，得益母草粗提液备用；

S-8大孔吸附树脂纯化：S-8大孔吸附树脂先用乙醇浸泡24小时，用蒸馏水洗涤至无醇后备用；将处理好的大孔吸附树脂湿法装柱，将益母草粗提液以1mL/min流速通过层析柱进行吸附，先用4倍树脂体积的水洗脱杂质，再用8倍树脂体积的无水乙醇洗脱，收集无水乙醇洗脱液，减压浓缩乙醇，干燥粉碎，得益母草提取物，得率3％，本品为黄色的粉末，味苦。

所说的黄芪提取物是，称取黄芪药材粗粉，用无水乙醇回流提取2次，第一次加入黄芪药材重量的12倍的无水乙醇提取1.5h，第二次加入黄芪药材重量的8倍的无水乙醇提取1h，合并提取液，过滤，滤液减压回收乙醇至无醇味，静置，过滤，得黄芪提取液(黄芪提取液的浓度为150mg/ml)；取黄芪提取液，过大孔吸附树脂柱，先用4倍树脂体积的水洗脱，继用8倍树脂体积的质量浓度为30％的乙醇洗去杂质，再用8倍树脂体积的质量浓度为70％的乙醇洗脱，收集质量浓度为70％的乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥粉碎，得黄芪提取物，得率2.9％，本品为淡黄色的粉末，味微苦。

实施例2

本发明也可由益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉制成，益母草提取物与黄芪提取物的重量比为5∶5，益母草提取物和黄芪提取物粉碎过100目筛，混合均匀，再加入淀粉、滑石粉混匀，淀粉和滑石粉的加入量为益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉总重量和的9％，淀粉、滑石粉重量比为1∶1，制粒，装入胶囊，即得；

所说的益母草提取物是，称取粉碎后的益母草药材，放入微波提取罐内，加入乙醇提取，乙醇用量为益母草药材重量的20倍，提取温度50℃，提取时间30min，提取功率200W，得益母草粗提液备用；

S-8大孔吸附树脂纯化：S-8大孔吸附树脂先用乙醇浸泡24小时，用蒸馏水洗涤至无醇后备用；将处理好的大孔吸附树脂湿法装柱，将益母草粗提液以1mL/min流速通过层析柱进行吸附，先用4倍树脂体积的水洗脱杂质，再用8倍树脂体积的无水乙醇洗脱，收集无水乙醇洗脱液，减压浓缩乙醇，干燥粉碎，得益母草提取物，得率3.5％，本品为黄色的粉末，味苦。

所说的黄芪提取物是，称取黄芪药材粗粉，用无水乙醇回流提取2次，第一次加入黄芪药材重量的12倍的无水乙醇提取1.5h，第二次加入黄芪药材重量的8倍的无水乙醇提取1h，合并提取液，过滤，滤液减压回收乙醇至无醇味，静置，过滤，得黄芪提取液(黄芪提取液的浓度为150mg/ml)；取黄芪提取液，过大孔吸附树脂柱，先用4倍树脂体积的水洗脱，继用8倍树脂体积的质量浓度为30％的乙醇洗去杂质，再用8倍树脂体积的质量浓度为70％的乙醇洗脱，收集质量浓度为70％的乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥粉碎，得黄芪提取物，得率3％，本品为淡黄色的粉末，味微苦；

实施例3

本发明也可由益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉制成，益母草提取物与黄芪提取物的重量比为6∶4，益母草提取物和黄芪提取物粉碎过100目筛，混合均匀，再加入淀粉、滑石粉混匀，淀粉和滑石粉的加入量为益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉总重量和的8％，淀粉、滑石粉重量比为1∶1，制粒，装入胶囊，即得；

所说的益母草提取物是，称取粉碎后的益母草药材，放入微波提取罐内，加入乙醇提取，乙醇用量为益母草药材重量的20倍，提取温度50℃，提取时间30min，提取功率200W，得益母草粗提液备用；

S-8大孔吸附树脂纯化：S-8大孔吸附树脂先用乙醇浸泡24小时，用蒸馏水洗涤至无醇后备用；将处理好的大孔吸附树脂湿法装柱，将益母草粗提液以1mL/min流速通过层析柱进行吸附，先用4倍树脂体积的水洗脱杂质，再用8倍树脂体积的无水乙醇洗脱，收集无水乙醇洗脱液，减压浓缩乙醇，干燥粉碎，得益母草提取物，得率4％，本品为黄色的粉末，味苦。

所说的黄芪提取物是，称取黄芪药材粗粉，用无水乙醇回流提取2次，第一次加入黄芪药材重量的12倍的无水乙醇提取1.5h，第二次加入黄芪药材重量的8倍的无水乙醇提取1h，合并提取液，过滤，滤液减压回收乙醇至无醇味，静置，过滤，得黄芪提取液(黄芪提取液的浓度为150mg/ml)；取黄芪提取液，过大孔吸附树脂柱，先用4倍树脂体积的水洗脱，继用8倍树脂体积的质量浓度为30％的乙醇洗去杂质，再用8倍树脂体积的质量浓度为70％的乙醇洗脱，收集质量浓度为70％的乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥粉碎，得黄芪提取物，得率3.5％，本品为淡黄色的粉末，味微苦；

本发明益芪胶囊具有活血化瘀、利尿通淋、清热解毒、补脾益肾之功效，可有效用于良性前列腺生的治疗，并经试验得到了充分证明，有关试验资料如下：

一、对小鼠前列腺增生模型的影响

1实验材料

1.1药品与试剂

益芪胶囊，河南中医学院药分学科提供；戊巴比妥钠，中国医药集团上海化学试剂公司；注射用青霉素钠，华北制药股份有限公司；氯化钠注射液，郑州永和制药股份有限公司；丙酸睾酮注射液，上海通用药业股份有限公司；癃闭舒胶囊，石家庄科迪药业有限公司；睾酮(T)测定试剂盒，北京科美东雅生物技术有限公司；雌二醇(E₂)测定试剂盒，北京科美东雅生物技术有限公司。

1.2实验动物

小鼠，昆明种，雄性，20～23g，80只，由河北省实验动物中心提供。

1.3仪器

FA(N)/JA(N)系列电子天平，上海民桥精密仪器有限公司；TGL-16G高速冷冻离心机，上海安亭科学仪器厂；电动匀浆机，宁波新芝生物科技股份有限公司；Sn-895B型智能放免γ测量仪：上海原子核研究所四环仪器一厂。

2 实验方法

取体重20～23g雄性小鼠80只，随机取10只作为空白对照组，做假手术处理；其余小鼠造前列腺增生模型，小鼠称重后腹腔注射2％戊巴比妥钠(30mg/kg)麻醉，常规消毒皮肤，于无菌条件下，经阴囊摘除双侧睾丸，残端处结扎，缝合皮肤，肌内注射青霉素20万u/kg；手术后第3天，取去势成功、状态良好的小鼠50只，随机分为5组用于造前列腺增生模型；造模型5组均每日皮下注射丙酸睾酮5mg/kg/d(溶于大豆油)，连续3周；于造模型第1天，造模型5组分别灌服大、中、小剂量的益芪胶囊混悬液(160mg/kg、120mg/kg、80mg/kg，80mg/ml、60mg/ml、40g/ml，0.2ml/10g)，癃闭舒胶囊混悬液(0.45g/kg，22.5g/ml，0.2ml/10g，剂量相当于临床用量的15倍)及同体积的生理盐水；空白对照组灌服同体积的生理盐水；每日给药1次，连续给药3周。于末次给药后2h(禁食不禁水12h)，小鼠称重后眼眶取血，离心，分离血清，测血清睾酮(T)、雌二醇(E₂)水平；然后脱颈椎处死小鼠，迅速取前列腺组织、胸腺，称前列腺湿重，并计算前列腺指数(前列腺指数＝前列腺湿重mg/小鼠体重g)；将前列腺组织、胸腺、肾脏和脾脏固定于10％福尔马林溶液中，石蜡包埋，切片，HE染色，光镜下观察各组前列腺组织形态变化。

3 统计学处理方法

数据分析用SPSS 13.0for windows统计软件包进行数据资料的统计学处理，计量资料用平均数±标准差表示，组间比较用方差分析(LSD法)。

4实验结果

4.1对前列腺增生模型小鼠前列腺湿重及前列腺指数的影响

实验各组小鼠前列腺湿重及前列腺指数结果如下：

表1益芪胶囊对小鼠前列腺增生模型前列腺重及前列腺指数的影响

^**表示与模型组比P＜0.01

由上表可以看出，与空白组相比，模型组小鼠的前列腺湿重及前列腺指数均明显增加(P＜0.01)，表明模型组小鼠前列腺明显增生，模型复制成功。与模型组相比，癃闭舒组组可显著降低前列腺增生模型小鼠的前列腺湿重及前列腺指数(P＜0.01)；益芪胶囊大、中、小剂量组可显著降低前列腺增生模型小鼠的前列腺湿重及前列腺指数(P＜0.01)，实验结果表明，癃闭舒及大、中、小剂量益芪胶囊均具有抑制丙酸睾酮致前列腺增生模型小鼠前列腺增生的作用。

4.2对前列腺增生模型小鼠血清睾酮、雌二醇水平的影响

实验各组小鼠血清中睾酮、雌二醇水平如下：

表2益芪胶囊对小鼠前列腺增生模型血清睾酮、雌二醇水平的影响

^**表示与模型组比P＜0.01，^*表示与模型组比P＜0.05

从上表可以看出，与空白组相比，模型组小鼠血清中睾酮水平显著升高(P＜0.01)，可能与皮下注射丙酸睾酮注射液有关，而雌二醇水平与空白组相比差异无统计学意义，表明在无性腺存在的条件下，通过皮下注射丙酸睾酮注射液，可使大鼠体内睾酮含量显著升高，而对雌二醇水平无明显影响，使模型小鼠的前列腺组织在外源性雄激素的作用下出现增生。与模型组相比，癃闭舒组可明显降低模型小鼠血清中的睾酮水平(P＜0.05)；益芪胶囊大、小剂量组均可显著降低模型小鼠血清中的睾酮水平(P＜0.01)；乌鸡白凤各组小鼠血清中的雌二醇水平与模型组及空白组相比，有升高的趋势。实验结果表明，癃闭舒和益芪胶囊均具有降低丙酸睾酮致前列腺增生模型小鼠血清中睾酮水平的作用。

4.3对前列腺增生模型小鼠前列腺组织形态的影响

实验各组小鼠前列腺组织的病理观察结果如下：空白组小鼠前列腺的腺上皮、腺腔及间质均正常；模型组小鼠的前列腺的腺上皮，间质有大量纤维组织增生；癃闭舒组小鼠的前列腺的腺上皮，间质基本恢复正常；益芪胶囊小剂量组小鼠的前列腺的腺上皮、腺腔、间质基本恢复正常，间质有炎细胞胞侵润；益芪胶囊中剂量组小鼠前列腺的腺上皮、腺腔均正常，间质有较少炎细胞胞侵润；益芪胶囊大剂量组小鼠的前列腺的腺上皮、腺腔、间质基本恢复正常。

对实验各组小鼠前列腺腺体进行立体剂量学测定，主要测定腺体的体密度(Vv)，测得结果见表：

表3益芪胶囊对前列腺增生模型小鼠前列腺体密度的影响

^**表示与模型组比P＜0.01

通过对实验各组小鼠前列腺病理组织学观察结果分析，可以看出，小鼠前列腺增生动物模型前列腺的主要病理改变为前列腺的腺上皮、间质有大量的纤维组织增生，证明前列腺增生动物模型是成功的。从立体计量学的结果可以看出，模型组小鼠前列腺腺体密度与空白组相比显著增加，腺体明显扩张。用药各组均具有抑制前列腺增生的作用，主要病理改变为腺上皮、间质纤维组织减少，立体计量学证明，腺体的体密度减少，腺腔明显缩小。

4.4对前列腺增生模型小鼠胸腺组织形态的影响

实验各组小鼠胸腺组织的病理观察结果如下：空白组小鼠胸腺的胸腺小叶分界清楚，皮质和髓质均正常；模型组小鼠的胸腺小叶分界清楚，皮质明显萎缩，淋巴细胞稀疏；癃闭舒组小鼠的胸腺小叶分界清楚，皮质萎缩，淋巴细胞密集；益芪胶囊小剂量组小鼠的胸腺小叶分界清楚，皮质萎缩，淋巴细胞较致密；益芪胶囊中剂量组小鼠的胸腺小叶分界清楚，皮质增厚，淋巴细胞密集；益芪胶囊大剂量组小鼠的胸腺小叶分界清楚，皮质增厚，淋巴细胞密集。

采用测微尺测定胸腺皮质最宽处和最窄处求均数为皮质厚度，利用测微尺基线计算压在基线上的淋巴细胞求均数为淋巴细胞数，实验各组测得结果见表：

表4益芪胶囊对前列腺增生模型小鼠胸腺皮质厚度和淋巴细胞数的影响

^**表示与模型组比P＜0.01

通过对实验各组小鼠胸腺病理组织学观察结果分析，可以看出，小鼠前列腺增生动物模型胸腺的主要病理改变为皮质厚度萎缩、淋巴细胞数目的减少，证明前列腺增生动物模型是成功的。利用测微尺得出的结果可以看出，模型组小鼠胸腺的皮质厚度和淋巴细胞与空白组相比显著减少，皮质明显萎缩，淋巴细胞稀疏。癃闭舒组，大、中、小剂量益芪胶囊组均可使皮质增厚，使淋巴细胞密集，测微尺测量淋巴细胞数显著增加。

二、对大鼠前列腺增生模型的影响

1实验材料

1.1药品与试剂

益芪胶囊，河南中医学院药分学科提供；戊巴比妥钠，中国医药集团上海化学试剂公司；注射用青霉素钠，华北制药股份有限公司；氯化钠注射液，郑州永和制药股份有限公司；丙酸睾酮注射液，上海通用药业股份有限公司；癃闭舒胶囊，石家庄科迪药业有限公司；睾酮(T)测定试剂盒，北京科美东雅生物技术有限公司；雌二醇(E₂)测定试剂盒，北京科美东雅生物技术有限公司；表皮生长因子(EGF)试剂盒，上海森雄科技实业有限公司。

1.2实验动物

Wistar大鼠，雄性，280～320g，80只，由河北省实验动物中心提供。

1.3所用仪器

FA(N)/JA(N)系列电子天平，上海民桥精密仪器有限公司；TGL-16G高速冷冻离心机，上海安亭科学仪器厂；电动匀浆机，宁波新芝生物科技股份有限公司；Sn-895B型智能放免γ测量仪，上海原子核研究所四环仪器一厂；Multiscan MK3全自动酶标仪，上海雷勃分析仪器有限公司。

2实验方法

取体重300～320g雄性Wistar大鼠80只，随机取10只作为空白对照组，做假手术；其余大鼠造前列腺增生模型，大鼠称重后腹腔注射2％戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉，常规消毒皮肤，于无菌条件下，经阴囊摘除双侧睾丸，残端处结扎，缝合皮肤，肌内注射青霉素20万u/kg；手术后第8天，取去势成功、状态良好的大鼠50只，随机分为5组用于造大鼠前列腺增生模型；造模型5组均每日皮下注射丙酸睾酮4mg/kg/d(溶于大豆油)，连续30天；于造模型第1天，造模型5组分别灌服大、中、小剂量的益芪胶囊(120mg/kg、90mg/kg、60mg/kg，分配成别60mg/ml、45mg/ml、30mg/ml，2ml/100g)，癃闭舒胶囊混悬液(0.3g/kg，癃闭舒胶囊内容物用生理盐水配成15mg/ml，2ml/100g，剂量相当于临床用量的10倍)及同体积的生理盐水；空白对照组灌服同体积的生理盐水；每日给药1次，连续给药30天。于末次给药后2h(禁食不禁水12h)，大鼠分别称重，迅速取前列腺、胸腺，称其前列腺湿重，计算前列腺指数(前列腺指数＝前列腺湿重g/鼠体重g)；将前列腺分成两部分，电子天平称前列腺左侧叶300mg，加入1ml冰生理盐水，4℃匀浆，以3000rpm离心15min，取前列腺组织匀浆上清液测定前列腺组织中E₂、T、EGF水平；取右侧前列腺组织、胸腺固定于10％福尔马林溶液中，石蜡包埋，切片，HE染色，光镜下观察各组前列腺组织形态变化。

3统计学处理方法

数据分析用SPSS 13.0for windows统计软件包进行数据资料的统计学处理，计量资料用平均数±标准差表示，组间比较用方差分析(LSD法)。

4实验结果

4.1对前列腺增生模型大鼠前列腺重及前列腺指数的影响

实验各组大鼠的前列腺湿重和前列腺指数结果如下：

表5益芪胶囊对大鼠前列腺增生模型前列腺湿重及前列腺指数的影响

^**表示与模型组比P＜0.01

由上表可以看出，与空白组相比，模型组大鼠前列腺湿重和前列腺指数都显著增加(P＜0.01)，表明模型组大鼠前列腺明显增生，模型复制成功。与模型组相比，癃闭舒组、益芪胶囊大、中剂量组均可显著降低前列腺增生模型大鼠的前列腺湿重及前列腺指数(P＜0.01)，益芪胶囊小剂量组可显著降低大鼠前列腺湿重(P＜0.01)，可明显降低前列腺指数(P＜0.05)，表明癃闭舒及大、中、小剂量益芪胶囊均具有抑制去势加皮下注射丙酸睾酮致前列腺增生模型大鼠前列腺增生的作用。

4.2对前列腺增生大鼠模型前列腺中睾酮、雌二醇的影响

实验各组大鼠前列腺中睾酮、雌二醇水平如下：

表6益芪胶囊对大鼠前列腺增生模型前列腺中睾酮、雌二醇水平的影响

^**示与模型组比P＜0.01

从上表可以看出，与空白组相比，模型组大鼠前列腺组织中睾酮水平显著升高(P＜0.01)，可能与皮下注射丙酸睾酮注射液有关，从而使大鼠的前列腺组织在外源性雄激素的作用下出现增生。与模型组相比，癃闭舒组、益芪胶囊大、中、小剂量组均可显著降低模型大鼠前列腺中的睾酮水平(P＜0.01)，实验各组对雌二醇的影响不明显，提示前列腺增生与前列腺内雌雄激素不平衡有关。实验结果表明，癃闭舒和益芪胶囊均具有降低去势加皮下注射丙酸睾酮致前列腺增生模型大鼠前列腺中睾酮水平，提示益芪胶囊抑制模型大鼠前列腺增生的作用可能与调节模型大鼠体内失衡的雌、雄激素比例有关，从而发挥抗前列腺增生作用。

4.3对前列腺增生大鼠模型前列腺中表皮生长因子的影响

实验各组大鼠前列腺中表皮生长因子(EGF)水平如下：

表7益芪胶囊对大鼠前列腺增生模型前列腺中表皮生长因子水平的影响

^**表示与模型组比P＜0.01

从上表可以看出，与空白组相比，模型组大鼠前列腺中的表皮生长因子水平显著升高(P＜0.01)，表明在外源性雄激素的作用下，可以诱导模型大鼠前列腺中的表皮生长因子水平升高。与模型组相比，癃闭舒组及益芪胶囊大、中、小剂量组大鼠前列腺中表皮生长因子水平均显著下降(P＜0.01)，表明癃闭舒及益芪胶囊均具有降低丙酸睾酮之前列腺增生模型大鼠前列腺中表皮生长因子水平的作用，提示益芪胶囊的抗前列腺增生作用可能与其降低模型动物前列腺中的表皮生长因子水平有关。

4.4对前列腺增生模型大鼠前列腺组织形态的影响

实验各组大鼠前列腺组织的病理观察结果如下：空白组大鼠前列腺的腺上皮、腺腔及间质均正常；模型组大鼠前列腺的腺上皮，间质有纤维组织增生；癃闭舒组大鼠前列腺的腺上皮，间质有少量的纤维组织增生；益芪胶囊小剂量组大鼠前列腺的腺上皮，间质有纤维组织增生；益芪胶囊中剂量组大鼠前列腺的腺上皮，间质有较少的纤维组织增生；益芪胶囊大剂量组大鼠前列腺的腺上皮，间质基本恢复正常。

对实验各组动物前列腺进行立体计量学测定分析，主要选择前列腺体密度的测定，测得结果如表：

表8益芪胶囊对前列腺增生模型大鼠前列腺体密度的影响

^**表示与模型组比P＜0.01

通过对实验各组大鼠前列腺的病理组织学观察和立体计量学测定结果分析，可以看出，大鼠前列腺增生动物模型的主要病理改变为前列腺腺上皮、间质纤维组织大量显著增生为主，腺体的体密度增加，实验病理组织学和计量学均证明，大鼠的前列腺显著增生，说明大鼠动物模型是成功的。癃闭舒及益芪胶囊均具有抑制其大鼠前列腺增生的作用，其中以益芪胶囊大剂量组作用最好，主要在病理组织学表现为腺上皮、间质纤维组织显著减少，立体计量学证明，腺体体密度下降，腺腔明显缩小。

4.5对前列腺增生模型大鼠胸腺组织形态的影响

实验各组大鼠胸腺组织的病理观察结果如下：空白组大鼠胸腺的胸腺小叶分界清楚，皮质的淋巴细胞密集；模型组大鼠的胸腺小叶分界清楚，皮质明显萎缩，淋巴细胞稀疏；癃闭舒组大鼠的胸腺小叶分界清楚，皮质增厚，淋巴细胞密集；益芪胶囊小剂量组大鼠的胸腺小叶分界清楚，皮质萎缩，淋巴细胞稀疏；益芪胶囊中剂量组大鼠的胸腺小叶分界清楚，皮质明显增厚，淋巴细胞密集；益芪胶囊大剂量组大鼠的胸腺小叶分界清楚，皮质明显增厚，淋巴细胞密集。

采用测微尺测定胸腺皮质最宽处和最窄处求均数为皮质厚度，利用测微尺基线计算压在基线上的淋巴细胞求均数为淋巴细胞数，实验各组测得结果见表：

表9益芪胶囊对前列腺增生模型大鼠胸腺皮质厚度和淋巴细胞数的影响

^**表示与模型组比P＜0.01

通过对实验各组大鼠胸腺病理组织学观察结果分析，可以看出，大鼠前列腺增生动物模型胸腺的主要病理改变为皮质厚度萎缩、淋巴细胞数目的改变，证明前列腺增生动物模型是成功的。利用测微尺得出的结果可以看出，模型组大鼠胸腺的皮质厚度和淋巴细胞与空白组相比显著减少，皮质明显萎缩，淋巴细胞稀疏。癃闭舒组，大、中剂量益芪胶囊组均可使皮质显著增厚，使淋巴细胞密集，测微尺测量淋巴细胞数显著增加。小剂量益芪胶囊组可使皮质显著增厚，使淋巴细胞增加。

在上述动物试验的基础上，经临床应用，取得了突出的疗效，经对患良性前列腺增生的患者158人进行治疗，口服本发明胶囊，一日3次，一次2粒，每粒0.5g，15天为一疗程，三个疗程后统计疗效，小便不利，点滴而短少的症状消失或好转者为156人，总有效率为98.7％，无明显好转者仅2人，无效仅占1.3％，而且在药物试验期间，无任何不良反应，表明用药稳定可靠、安全、疗效高，是治疗良性前列腺增生药物上的一大创新。

Claims (4)

1.一种治疗前列腺增生的益芪胶囊，其特征在于，由益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉制成，益母草提取物与黄芪提取物的重量比为4-6：6-4，益母草提取物和黄芪提取物粉碎过100目筛，混合均匀，再加入淀粉、滑石粉混匀，淀粉和滑石粉的加入量≤益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉总重量和的10%，淀粉、滑石粉重量比为1：1，制粒，装入胶囊，即得；

所说的益母草提取物是，称取粉碎后的益母草药材，放入微波提取罐内，加入乙醇提取，乙醇用量为益母草药材重量的20倍，即益母草与乙醇的重量比为1：20，提取温度50℃，提取时间30min，提取功率200W，得益母草粗提液备用；

S-8大孔吸附树脂纯化：S-8大孔吸附树脂先用乙醇浸泡24小时，用蒸馏水洗涤至无醇后备用；将处理好的大孔吸附树脂湿法装柱，将益母草粗提液以1mL/min流速通过层析柱进行吸附，先用4倍树脂体积的水洗脱杂质，再用8倍树脂体积的无水乙醇洗脱，收集无水乙醇洗脱液，减压浓缩乙醇，干燥粉碎，得益母草提取物；

所说的黄芪提取物是，称取黄芪药材粗粉，用无水乙醇回流提取2次，第一次加入黄芪药材重量的12倍的无水乙醇提取1.5h，第二次加入黄芪药材重量的8倍的无水乙醇提取1h , 合并提取液,过滤，滤液减压回收乙醇至无醇味，静置，过滤，得黄芪提取液；取黄芪提取液，过大孔吸附树脂柱，先用4倍树脂体积的水洗脱，继用8倍树脂体积的质量浓度为30%的乙醇洗去杂质，再用8倍树脂体积的质量浓度为70%的乙醇洗脱，收集质量浓度为70%的乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥粉碎，得黄芪提取物。

2.根据权利要求1所述的治疗前列腺增生的益芪胶囊，其特征在于，由益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉制成，益母草提取物与黄芪提取物的重量比为4：6，益母草提取物和黄芪提取物粉碎过100目筛，混合均匀，再加入淀粉、滑石粉混匀，淀粉和滑石粉的加入量为益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉总重量和的10%，淀粉、滑石粉重量比为1：1，制粒，装入胶囊，即得；

所说的益母草提取物是，称取粉碎后的益母草药材，放入微波提取罐内，加入乙醇提取，乙醇用量为益母草药材重量的20倍，提取温度50℃，提取时间30min，提取功率200W，得益母草粗提液备用；

S-8大孔吸附树脂纯化：S-8大孔吸附树脂先用乙醇浸泡24小时，用蒸馏水洗涤至无醇后备用；将处理好的大孔吸附树脂湿法装柱，将益母草粗提液以1mL/min流速通过层析柱进行吸附，先用4倍树脂体积的水洗脱杂质，再用8倍树脂体积的无水乙醇洗脱，收集无水乙醇洗脱液，减压浓缩乙醇，干燥粉碎，得益母草提取物，得率3%；

所说的黄芪提取物是，称取黄芪药材粗粉，用无水乙醇回流提取2次，第一次加入黄芪药材重量的12倍的无水乙醇提取1.5h，第二次加入黄芪药材重量的8倍的无水乙醇提取1h , 合并提取液,过滤，滤液减压回收乙醇至无醇味，静置，过滤，得黄芪提取液；取黄芪提取液，过大孔吸附树脂柱，先用4倍树脂体积的水洗脱，继用8倍树脂体积的质量浓度为30%的乙醇洗去杂质，再用8倍树脂体积的质量浓度为70%的乙醇洗脱，收集质量浓度为70%的乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥粉碎，得黄芪提取物，得率2.9%。

3.根据权利要求1所述的治疗前列腺增生的益芪胶囊，其特征在于，由益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉制成，益母草提取物与黄芪提取物的重量比为5：5，益母草提取物和黄芪提取物粉碎过100目筛，混合均匀，再加入淀粉、滑石粉混匀，淀粉和滑石粉的加入量为益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉总重量和的9%，淀粉、滑石粉重量比为1：1，制粒，装入胶囊，即得；

所说的益母草提取物是，称取粉碎后的益母草药材，放入微波提取罐内，加入乙醇提取，乙醇用量为益母草药材重量的20倍，提取温度50℃，提取时间30min，提取功率200W，得益母草粗提液备用；

S-8大孔吸附树脂纯化：S-8大孔吸附树脂先用乙醇浸泡24小时，用蒸馏水洗涤至无醇后备用；将处理好的大孔吸附树脂湿法装柱，将益母草粗提液以1mL/min流速通过层析柱进行吸附，先用4倍树脂体积的水洗脱杂质，再用8倍树脂体积的无水乙醇洗脱，收集无水乙醇洗脱液，减压浓缩乙醇，干燥粉碎，得益母草提取物，得率3.5%；

所说的黄芪提取物是，称取黄芪药材粗粉，用无水乙醇回流提取2次，第一次加入黄芪药材重量的12倍的无水乙醇提取1.5h，第二次加入黄芪药材重量的8倍的无水乙醇提取1h , 合并提取液,过滤，滤液减压回收乙醇至无醇味，静置，过滤，得黄芪提取液；取黄芪提取液，过大孔吸附树脂柱，先用4倍树脂体积的水洗脱，继用8倍树脂体积的质量浓度为30%的乙醇洗去杂质，再用8倍树脂体积的质量浓度为70%的乙醇洗脱，收集质量浓度为70%的乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥粉碎，得黄芪提取物，得率3%。

4.根据权利要求1所述的治疗前列腺增生的益芪胶囊，其特征在于，由益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉制成，益母草提取物与黄芪提取物的重量比为6：4，益母草提取物和黄芪提取物粉碎过100目筛，混合均匀，再加入淀粉、滑石粉混匀，淀粉和滑石粉的加入量为益母草提取物、黄芪提取物、淀粉、滑石粉总重量和的8%，淀粉、滑石粉重量比为1：1，制粒，装入胶囊，即得；

所说的益母草提取物是，称取粉碎后的益母草药材，放入微波提取罐内，加入乙醇提取，乙醇用量为益母草药材重量的20倍，提取温度50℃，提取时间30min，提取功率200W，得益母草粗提液备用；

S-8大孔吸附树脂纯化：S-8大孔吸附树脂先用乙醇浸泡24小时，用蒸馏水洗涤至无醇后备用；将处理好的大孔吸附树脂湿法装柱，将益母草粗提液以1mL/min流速通过层析柱进行吸附，先用4倍树脂体积的水洗脱杂质，再用8倍树脂体积的无水乙醇洗脱，收集无水乙醇洗脱液，减压浓缩乙醇，干燥粉碎，得益母草提取物，得率4%；

所说的黄芪提取物是，称取黄芪药材粗粉，用无水乙醇回流提取2次，第一次加入黄芪药材重量的12倍的无水乙醇提取1.5h，第二次加入黄芪药材重量的8倍的无水乙醇提取1h , 合并提取液,过滤，滤液减压回收乙醇至无醇味，静置，过滤，得黄芪提取液；取黄芪提取液，过大孔吸附树脂柱，先用4倍树脂体积的水洗脱，继用8倍树脂体积的质量浓度为30%的乙醇洗去杂质，再用8倍树脂体积的质量浓度为70%的乙醇洗脱，收集质量浓度为70%的乙醇洗脱液，减压浓缩，干燥粉碎，得黄芪提取物，得率3.5%。