CN102240283A

CN102240283A - 牛蒡子苷元在制备治疗过敏性哮喘药物中的应用

Info

Publication number: CN102240283A
Application number: CN2011101179068A
Authority: CN
Inventors: 苏刘花
Original assignee: Nanjing Zelang Agricultural Development Co Ltd
Current assignee: Nanjing Zelang Agricultural Development Co Ltd
Priority date: 2011-05-06
Filing date: 2011-05-06
Publication date: 2011-11-16

Abstract

本发明涉及牛蒡子苷元在制备治疗过敏性哮喘药物中的应用。本发明对已知化合物牛蒡子苷元发掘了新的医药用途，开拓了一个新的应用领域。本发明的牛蒡子苷元配制成的药物主要为口服剂型，既可单独作为药用有效成分，也可与其他无排斥作用的组分配伍。

Description

牛蒡子苷元在制备治疗过敏性哮喘药物中的应用

技术领域：

本发明属于制药领域，涉及牛蒡子苷元在制备治疗过敏性哮喘药物中的应用。

背景技术：

牛蒡子苷元化合物，结构通式为：

牛蒡子苷元(arctigenin)是从菊科两年生草本植物牛蒡属牛蒡的干燥成熟果实牛蒡子(Arctium lappa L.)中提取分离而来的木脂素类化合物，牛蒡叶中也有少量存在。文献“牛蒡根化学成分及活性研究进展”报道了现代药理学研究证明牛蒡子苷元具有抗炎、抗病毒、抗肿瘤等生理作用，且文献“牛蒡子苷及牛蒡子苷元的药理作用研究进展”报道因其可有效地减弱由伴刀豆球蛋白和脂多糖以剂量依赖方式诱导的T、B淋巴细胞的增殖，具有很好的免疫调节作用。除此以外，文献“牛蒡子在食品工业中应用及其开发前景”报道其也有较强的PAF受体拮抗作用和Ca²⁺拮抗作用。PAF(platelet-activating factor)是血小板活化因子的简称，是一种强烈的支气管平滑肌致痉因子，是参与过敏性哮喘发病调节的重要炎性介质。现已发现人体内许多炎性细胞受到不同的刺激后均可以释放PAF，如嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、肥大细胞等。图书“哮喘病学”报道PAF在过敏性哮喘中的作用表现为以下三点：气道中的合成量增加、诱发持续性气道反应性增高、诱发气道的通气障碍。牛蒡子苷元因其免疫调节作用和PAF受体拮抗作用可作为抗过敏性哮喘的潜力药物。

过敏性哮喘是由多种细胞特别是肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T淋巴细胞参与的慢性气道炎症，在易感者中此种炎症可引起反复发作的喘息、气促、胸闷和(或)咳嗽等症状，并伴随有一系列的并发症，如慢性支气管炎、肺间质纤维化、阻塞性肺气肿、慢性肺源性心脏病甚至呼吸衰竭、呼吸骤停等致命性病症。近十余年来，美国、英国、澳大利亚、新西兰等国家哮喘患病率和死亡率有上升趋势，全世界约有一亿哮喘患者，已成为严重威胁公众健康的一种主要慢性疾病。我国哮喘的患病率约为1％，儿童可达3％，据测算全国约有1千万以上哮喘患者。牛蒡子苷元的抗过敏性哮喘的作用还未见报道。

牛蒡子苷元可由多种方法制备，中国专利申请号200410015465.0、200810121888.9、200910220575.3、201010017679.7等专利文献中均有记载。

发明内容：

1.本发明的目的在于提供一种化合物牛蒡子苷元在制备抗过敏性哮喘药物中的应用。

2.本发明的目的通过试验说明牛蒡子苷元在制备抗过敏性哮喘药物中的应用。

3.本发明的目的通过试验说明牛蒡子苷元在制备抑制肥大细胞脱颗粒反应的药物中的应用。

4.本发明的目的通过试验说明牛蒡子苷元在制备改善肺功能药物中的应用。

5.本发明的目的通过试验说明牛蒡子苷元在制备拮抗组胺介质作用药物中的应用。

为了更好地理解本发明的实质，下面将用牛蒡子苷元的药理试验及结果来说明其在制药领域中的新用途，即牛蒡子苷元对过敏性哮喘大鼠的治疗作用。

附图说明：

图1为牛蒡子苷元对组胺所致小鼠皮肤通透性增高的影响

图2为牛蒡子苷元对1秒钟用力呼气量与用力肺活量比值(FEV1/FVC)的影响

图3为牛蒡子苷元对最大呼气流量预计值百分比(PEF％)的影响

一、形态法检测含药血清对致敏大鼠原代腹腔肥大细胞脱颗粒的影响(药物对介质释放的抑制作用)

方法：雄性wistar大鼠35只，随机分成7组，即正常对照组、不同采血点给药组以及阳性药组，每组5只。致敏前禁食12h，分别灌服生理盐水、牛蒡子苷元溶液100mg/kg和阳性药色甘酸钠溶液150mg/kg，给药组分别于给药后1h、2h、3h后采血分离血清，空白血清为灌服生理盐水所制备的血清。-70℃冷冻干粉，实验时将1.5ml血清的冻干粉溶解于0.75ml的蒸馏水中。

采用卵蛋白30μg，4％Al(OH)₃凝胶10μg，混匀后腹腔注射致敏动物，正常对照组注射等量生理盐水。致敏13天后，股动脉放血处死动物，分离并制备原代腹腔肥大细胞悬液。各组每只标本加入0.5ml的肥大细胞悬液，正常组加入1mlHank氏液，模型组加入0.75ml Hank氏液，空白血清组和不同采血点药物血清组分别加入0.75ml空白血清、药物血清干粉复溶液，摇匀后放置5min。除正常组外每组均加入抗原0.25ml激发肥大细胞脱颗粒(卵蛋白生理盐水溶液60μg/ml)，摇均。置37℃水浴5min，以1500r/min离心5min，吸取试管底部的肥大细胞，滴1、2滴于中性红染色的载玻片上，加盖玻片，37℃温箱中孵育3min，高倍镜下观察肥大细胞脱颗粒的情况。

每个样本做复片，每张片子查看60个细胞。正常肥大细胞为圆形，核不着色，细胞内有均匀分布的石榴红色颗粒。若颗粒自细胞膜内向外流出，颗粒褪色和出现空泡者为阳性，60个细胞中1/3有此变化为(+)，1/3～2/3有上述变化者为(++)，2/3以上者为(+++)，此为等级资料，按等级序值法测定其等级序值。结果详见表1。

表1含药血清对肥大细胞脱颗粒的影响(n＝10)

注：^*P＜0.05，^**P＜0.01，与空白血清组比较

结果：肥大细胞脱颗粒是过敏性哮喘的重要病理生理机制。肥大细胞脱颗粒后，原先存储于其二级颗粒中的组胺等炎性介质被释放到细胞外，可发挥促平滑肌收缩、血管扩张、增强毛细血管通透性和黏膜腺体分泌等效应，介导过敏性哮喘的发生发展。

通过观察药物对肥大细胞脱颗粒的影响可以反映药物对介质释放的作用。表1示含药血清对肥大细胞脱颗粒的影响。可以看出，同空白血清组相比，给药后2h的含药血清组可以显著抑制致敏大鼠腹腔肥大细胞脱颗粒。实验结果表明牛蒡子苷元可显著抑制肥大细胞脱颗粒，且给药后2h是血药浓度的一个高峰值，这是牛蒡子苷元治疗过敏性哮喘的机制之一。

二、牛蒡子苷元对组胺所致大鼠皮肤通透性增高的影响(药物拮抗介质作用)

方法：wistar大鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，10只/组，分别为正常对照组、造模组、牛蒡子苷元组50mg/kg、牛蒡子苷元组100mg/kg、牛蒡子苷元组150mg/kg以及阳性药扑尔敏组100mg/kg。于实验前一天背部剃毛。实验时，牛蒡子苷元组尾静脉注射50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg，阳性对照组静注扑尔敏100mg/kg，正常对照组和造模组静注等量生理盐水。给药后1h，于背部皮内注射5μg组胺，除正常对照组外，每只动物注射两点，之后立即给每只动物尾静脉注射0.5％伊文思蓝溶液0.1ml/10g。30min后处死动物，测量每个蓝斑的两个互相垂直的直径，计算其平均值，并计算抑制百分率。

抑制百分率(％)＝(1-给药组蓝斑平均直径/造模组蓝斑平均直径)*100％

表2牛蒡子苷元对组胺所致小鼠皮肤通透性增高的影响

注：^*P＜0.05，^**P＜0.01，与造模组比较

结果：组胺是肥大细胞颗粒中预先存储的介质之一，随肥大细胞脱颗粒而被释放，可产生促平滑肌收缩、增强毛细血管通透性等生理作用。在过敏性哮喘的病理过程中，释放的组胺可激发气道炎症进而激发哮喘，对过敏性哮喘的发生、发展起重要作用。表2可以看出：牛蒡子苷元100mg/kg、150mg/kg灌胃给药能够显著抑制组胺所致大鼠皮肤通透性增高(p＜0.01)，其蓝斑直径明显减小，抑制百分率大于30％。其中牛蒡子苷元150mg/kg的作用优于扑尔敏100mg/kg。由此可得，牛蒡子苷元可以产生拮抗组胺的作用。

三、牛蒡子苷元对过敏性哮喘所致肺功能损伤的治疗作用

方法：Hartley品系豚鼠，体重200～250g，50只，雌雄兼用。分为5组，每组10只：正常对照组、造模组、牛蒡子苷元50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg组。除正常对照组豚鼠外，其余各组豚鼠在第0天和第7天ip给予0.5ml含20μg卵白蛋白的Al(OH)3凝胶致敏。致敏后第28天开始ig给药，连续2周给药：①模型组和牛蒡子苷元组分别为生理盐水1ml/kg或牛蒡子苷元50、100和150mg/kg，30min后雾化吸入1ml卵白蛋白(1g/L)6min；②正常对照组给生理盐水1ml/kg，30min后雾化吸入1ml生理盐水6min。30min后，进行肺功能测定，指标包括1秒钟用力呼气量(FEV1)及FEV1占预计值百分比、最大呼气流量(PEF)及PEF占预计值百分比。

表3牛蒡子苷元对FEV1/FVC及PEF％的影响

注：^*P＜0.05，^**P＜0.01，与造模组比较

结果：过敏性哮喘发作时，患者的各项有关呼气流速的指标均下降，主要的指标有1秒钟用力呼气量与用力肺活量比值(FEV₁/FVC)及最大呼气流量预计值百分比(PEF％)。表3可以看出：牛蒡子苷元50mg/kg灌胃给药治疗2周、100mg/kg灌胃给药治疗1周、100mg/kg灌胃给药治疗2周、150mg/kg灌胃给药治疗1周、150mg/kg灌胃给药治疗2周均可显著提高豚鼠的FEV₁/FVC值；而牛蒡子苷元50mg/kg灌胃给药治疗1周、50mg/kg灌胃给药治疗2周、100mg/kg灌胃给药治疗1周、100mg/kg灌胃给药治疗2周、150mg/kg灌胃给药治疗1周、150mg/kg灌胃给药治疗2周均可显著提高豚鼠的PEF％。

肺功能下降严重甚至可危及生命。整体来看，牛蒡子苷元50mg/kg、100mg/kg和150mg/kg可显著提高肺功能，从而起到很好的治疗过敏性哮喘的作用。

本发明的优点在于：

1.本发明对已知化合物牛蒡子苷元发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域。

2.本发明的牛蒡子苷元安全低毒且药理作用强，预示着很好的药用前景。

3.本发明的牛蒡子苷元可用多种方法从植物中提取，可用单体或者混合物，且可用盐或与其它分子的复合物。

4.本发明的牛蒡子苷元配制成的药物主要为口服制剂，既可单独作为药用有效成分，也可与其它无排斥作用的组分配伍。

具体实施方式：

实施例1：

由已知方法提取、制备牛蒡子苷元。在中国专利201010017679.7中介绍了提取和制备方法。取牛蒡子苷元20g，加入片剂(包括分散片，包衣片等)适当辅料，按片剂(包括分散片，包衣片等)工艺制备成抗过敏性哮喘药片剂。

实施例2：

由已知方法提取、制备牛蒡子苷元。在中国专利201010017679.7中介绍了提取和制备方法。取牛蒡子苷元20g，加入胶囊剂适当辅料，按胶囊剂工艺制备成抗过敏性哮喘药胶囊剂。

实施例3：

由已知方法提取、制备牛蒡子苷元。在中国专利201010017679.7中介绍了提取和制备方法。取牛蒡子苷元20g，加入乳剂(包括纳米乳，微乳等)适当辅料，按乳剂(包括纳米乳，微乳等)工艺制备成抗过敏性哮喘药乳剂。

实施例4：

由已知方法提取、制备牛蒡子苷元。在中国专利201010017679.7中介绍了提取和制备方法。取牛蒡子苷元20g，加入颗粒剂适当辅料，按颗粒剂工艺制备成抗过敏性哮喘药颗粒剂。

实施例5：

由已知方法提取、制备牛蒡子苷元。在中国专利201010017679.7中介绍了提取和制备方法。取牛蒡子苷元20g，加入缓释控释剂适当辅料，按缓释控释剂工艺制备成抗过敏性哮喘药缓释控释剂。

实施例6：

由已知方法提取、制备牛蒡子苷元。在中国专利201010017679.7中介绍了提取和制备方法。取牛蒡子苷元20g，加入口服液适当辅料，按口服液工艺制备成抗过敏性哮喘药口服液。

实施例7：

由已知方法提取、制备牛蒡子苷元。在中国专利201010017679.7中介绍了提取和制备方法。取牛蒡子苷元20g，加入脂质体剂型适当辅料，按脂质体工艺制备成抗过敏性哮喘药脂质体剂型。

Claims

1.牛蒡子苷元在制备治疗过敏性哮喘药物中的应用。

2.如权利要求1所述的牛蒡子苷元在制备治疗过敏性哮喘药物中的应用，其特征是牛蒡子苷元在制备抑制肥大细胞脱颗粒反应的药物中的应用。

3.如权利要求1所述的牛蒡子苷元在制备治疗过敏性哮喘药物中的应用，其特征是牛蒡子苷元在制备拮抗组胺介质作用药物中的应用。