CN102233094A - 参麦注射液有效成分测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一项定量测定参麦注射液中麦冬有效成分的方法,即将待测样品浓缩,采用有机溶剂提取,并使用高效液相检测;该检测方法简单易于操作,对于全面控制药物质量具有重要作用。
Description
技术领域:本发明涉及一种药物有效成分的含量测定方法,尤其是一种参麦注射液中麦冬有效成分龙脑苷的含量测定方法。
技术背景:
参麦注射液现执行标准为国家药品标准(修订)颁布件WS3-B-3428-98-2004,其鉴别项中仅有对红参(或红参和麦冬共有)的有效成分人参皂甙Rb1、Rg1、Re对照品的鉴别,而且目前对于参麦注射液的鉴别研究均集中在红参这一味药材中,未见有对麦冬的鉴别研究。
文献显示,麦冬中含有多种有效成分,主要为皂苷类和黄酮类(长春中医学院学报,麦冬化学成分及药理作用的研究现状),然而发明人发现上述两类成分均难以被鉴别或不具有特征性,这也是参麦注射液中麦冬鉴别项缺失的原因之一。为了解决麦冬鉴别这个问题,发明人经过大量实验研究发现,市售的参麦注射液中均含有一种麦冬中的化学成分——龙脑苷(中国中药杂志,麦冬的化学成分研究)。龙脑苷在麦冬中含量甚微,发明人曾在数百公斤麦冬中仅提取了1.8g的龙脑苷,但是,令人欣喜的是,根据国家标准WS3-B-3428-98-2004制备的参麦注射液中均含有龙脑苷,龙脑苷能有效保护由缺血/再灌注引起的细胞凋亡,而红参中却没有这个成分,提示可以利用该成分鉴别参麦注射液中的麦冬。
基于上述发现,发明人成功地发明了一种龙脑苷的鉴别和测定方法,并记载于发明专利申请200910155685.6中。但是该方法存在一定的不足之处,主要问题在于龙脑苷含量测定回收率偏低,只有76.0%。这说明此参麦注射液中龙脑苷的含量测定方法并不完善。经过试验研究,发现龙脑苷在正丁醇中的分配比要大于乙酸乙酯,用正丁醇萃取可以增大回收率,但是正丁醇会将吐温的某些成分同时萃取而干扰液相测定,而氯仿萃取处理可以将吐温的干扰因素除去。基于上述发现,我们摸索出更科学的参麦注射液中龙脑苷的含量测定方法,克服了原方法回收率低的缺点,使检测结果更准确。
发明内容:
本发明旨在定量测定参麦注射液中龙脑苷的含量,并克服原技术中回收率低(76%)的缺点,同时缩短了样品处理时间,减少了有机溶剂的使用。
参麦注射液中龙脑苷的含量测定步骤为:
1、色谱条件色谱柱:Alltima C18柱(250×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水(22∶78);流速:1.0ml/min;柱温:35℃;检测器:蒸发光散射检测器。
2、对照品溶液制备:精密称取龙脑苷对照品适量,加甲醇制成每1ml含龙脑苷0.1mg的对照品溶液,摇匀即得。
3、供试品溶液的制备:精密量取本品50ml,水浴浓缩至10ml,置于分液漏斗中,加入氯仿萃取2次,每次加入氯仿的体积为20ml,弃去氯仿萃取液,水相再用水饱和正丁醇萃取4次,每次加入水饱和正丁醇的体积为30ml,合并正丁醇萃取液,浓缩至干后,用80%甲醇转移至5ml容量瓶,定容至刻度,摇匀即得。
4、测定法:精密吸取对照品溶液10μl、20μl,供试品溶液20μl,注入液相色谱仪,测定,以外标两点法对数方程计算,即得。
该方法中的色谱方法和发明专利申请200910155685.6中的方法一致,但是采用了全新的供试品溶液的制备方法。发明人采用多种试剂和提取手段,在大量的试验研究中发现,将乙酸乙酯改为水饱和正丁醇萃取,并增加了浓缩步骤和氯仿萃取步骤。因为在多次试验中发现龙脑苷在正丁醇中的分配比要大于乙酸乙酯,用正丁醇萃取可以增大回收率,但是正丁醇会将吐温的某些成分同时萃取而干扰液相测定,而氯仿萃取处理可以将吐温的某些成分预先除去并且不会除去龙脑苷;先对样品采用浓缩处理又可以减少氯仿和正丁醇的用量,达到绿色环保的要求。
附图说明:
附图1、实施例1专属性考察的高效液相图谱
附图2、实施例2参麦注射液样品中龙脑苷测定的高效液相图谱
具体实施方案:
实施例1、参麦注射液中龙脑苷的含量测定的方法学考察:
1仪器与试药
仪器:Agilent 1100 Series高效液相色谱仪;检测器:迪马SEDEX75蒸发光检测器。溶剂:HPLC分析用乙腈为Merck试剂公司产品;水为注射用水;萃取用氯仿为分析纯,衢州巨化试剂有限公司;萃取用正丁醇为分析纯,浙江杭州双林化工试剂厂;甲醇为分析纯,上海振兴化工一厂。
龙脑苷对照品为自己分离制备所得,经浙江省药检所标定,纯度为99.7%。
参麦注射液由正大青春宝药业有限公司提供,批号为:0910258、1002098、1002108。
2方法与结果
2.1色谱条件色谱柱:Alltima C18柱(250×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水(22∶78);流速:1.0ml/min;柱温:35℃;检测器:蒸发光散射检测器,氮气压力:3.5bar,漂移管温度:40℃。
2.2对照品溶液制备:精密称取龙脑苷对照品适量,加甲醇制成每1ml含龙脑苷0.1mg的对照品溶液,摇匀即得。
2.3供试品溶液的制备:精密量取本品50ml,水浴浓缩至10ml,置于分液漏斗中,加入氯仿萃取2次,每次加入氯仿的体积为20ml,弃去氯仿萃取液,水相再用水饱和正丁醇萃取4次,每次加入水饱和正丁醇的体积为30ml,合并正丁醇萃取液,浓缩至干后,用80%甲醇转移至5ml容量瓶,定容至刻度,摇匀即得。
2.4缺麦冬阴性对照溶液的制备:除去不加麦冬药材,完全按照本品生产工艺和本品供试品溶液的制备方法制备得到缺麦冬阴性对照溶液。
2.5系统适应性试验
精密吸取对照品溶液20μl,注入液相色谱仪,重复6次。计算峰面积的相对标准偏差,结果见表1。
表1系统适应性结果
结果表明,该方法系统适应性良好,相对标准偏差分别为1.69%。
2.6线性关系考察
对照品溶液的配制:精密称取龙脑苷对照品20.7mg置200ml容量瓶中,加甲醇溶解定容至刻度,摇匀,即得,浓度为103.1895μg/ml。
分别精密吸取对照品溶液2μl、4μl、8μl、16μl、20μl,注入液相色谱仪进行测定,以进样量的对数(logW)为横坐标X,以峰面积的对数(logA)为纵坐标Y,进行线性回归,得线性方程为:y=1.682x+4.3324,r=0.99925。线性范围(μg)0.206379-2.06379。
2.7精密度考察
重复性试验取同一批次本品(批号1002098)6份,按照供试品溶液制备方法制得6份供试品溶液,分别精密吸取20μl上述供试品溶液,注入液相色谱仪进行测定,计算含量(μg/ml),测试结果见表2,RSD(n=6)为0.95%,表明该方法重复性良好。
表2重复性测试含量(μg/ml)结果
2.8溶液稳定性试验
取本品(批号1002108)按照要求制得的供试品溶液分别在0h、2.5h、5h、7.5h、10h、15h精密吸取20μl注入液相色谱仪测定,计算含量(μg/ml),测试结果见表3,RSD(n=6)为1.37%,表明供试液至少在15h内稳定。
表3稳定性试验数据列表(μg/ml)
2.9回收率试验精密量取对照品溶液(2.6线性关系考察项下对照品溶液,浓度为103.1895μg/ml)6份,每份2ml,蒸干,每份精密加入已测含量的参麦注射液25ml(批号1002098,以其重复性试验的平均值计,7.5723μg/ml),浓缩至10ml,置于分液漏斗中,然后按照供试品溶液的制备方法,加80%甲醇定容成5ml,制备成加样回收率供试液,分别精密吸取20μ4以上供试品溶液,依法测定,测试结果见表4,加样平均回收率(n=6)为95.08%,RSD为3.06%,说明该方法具有一定准确度。
表4加样回收率试验数据列表
2.10专属性考察将缺麦冬阴性对照溶液、龙脑苷对照品液分别进样分析,分析结果,缺麦冬阴性对照溶液在龙脑苷出峰位置无干扰峰(见附图1),说明待测供试品溶液中龙脑苷出峰位置为龙脑苷,该峰来自麦冬药材中,不是来自红参药材,且无其它干扰峰。
实施例2、样品测定
取本品(批号0910258)按照要求制得的供试品溶液,精密吸取对照品溶液10μl、20μl,供试品溶液20μl,注入液相色谱仪,测定,以外标两点法对数方程计算含量(μg/ml)。结果:0910258样品含量为7.05μg/ml(见附图2)。
Claims (1)
1.参麦注射液中龙脑苷的测定方法,包含供试品溶液和对照品溶液的制备和高效液相检测这两个步骤,对照品溶液为龙脑苷的0.1mmg/1ml甲醇溶液,高效液相的检测条件为反相色谱柱,蒸发光检测器,流动相为22%乙腈水溶液,其特征在于供试品溶液制备方法为:
精密量取参麦注射液50ml,水浴浓缩至10ml,置于分液漏斗中,加入氯仿萃取2次,每次加入氯仿的体积为20ml,弃去氯仿萃取液,水相再用水饱和正丁醇萃取4次,每次加入水饱和正丁醇的体积为30ml,合并正丁醇萃取液,浓缩至干后,用80%甲醇转移至5ml容量瓶,定容至刻度,摇匀即得。
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Cited By (2)
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CN105388228A (zh) * | 2015-12-04 | 2016-03-09 | 正大青春宝药业有限公司 | 一种鉴别不同产地麦冬的方法 |
CN109490272A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-03-19 | 上海拉德钫斯生物科技有限公司 | 一种利用中动脉观察血管干细胞附壁的方法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101077852A (zh) * | 2007-07-05 | 2007-11-28 | 正大青春宝药业有限公司 | 参麦注射液的化学成分的制备及其在治疗心脑血管疾病中的应用 |
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101077852A (zh) * | 2007-07-05 | 2007-11-28 | 正大青春宝药业有限公司 | 参麦注射液的化学成分的制备及其在治疗心脑血管疾病中的应用 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
《中国现代医生》 20081031 覃永安 生脉注射液的抗心律失常作用 第46卷, 第28期 * |
《实用药物与临床》 20070630 杨杰 高效液相色谱仪检测器进展及其在药物分析中的应用 第10卷, 第03期 * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105388228A (zh) * | 2015-12-04 | 2016-03-09 | 正大青春宝药业有限公司 | 一种鉴别不同产地麦冬的方法 |
CN109490272A (zh) * | 2018-12-28 | 2019-03-19 | 上海拉德钫斯生物科技有限公司 | 一种利用中动脉观察血管干细胞附壁的方法 |
CN109490272B (zh) * | 2018-12-28 | 2021-08-27 | 拉德枋斯(广东)生命科学创新研究院有限公司 | 一种利用中动脉观察血管干细胞附壁的方法 |
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