CN102230032B - 一种病原体核酸的等温链多重检测卡 - Google Patents
一种病原体核酸的等温链多重检测卡 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102230032B CN102230032B CN 201110175067 CN201110175067A CN102230032B CN 102230032 B CN102230032 B CN 102230032B CN 201110175067 CN201110175067 CN 201110175067 CN 201110175067 A CN201110175067 A CN 201110175067A CN 102230032 B CN102230032 B CN 102230032B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- nucleic acid
- seq
- pathogen nucleic
- line
- detection
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 64
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 title claims abstract description 58
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 title claims abstract description 57
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 title claims abstract description 57
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 title claims abstract description 43
- 244000052769 pathogen Species 0.000 title claims abstract description 41
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 15
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 14
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 12
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 12
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 claims description 9
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims description 9
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 claims description 9
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 claims description 7
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 7
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims description 6
- 229930003756 Vitamin B7 Natural products 0.000 claims description 6
- 239000011735 vitamin B7 Substances 0.000 claims description 6
- 235000011912 vitamin B7 Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 claims description 5
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 claims description 4
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 10
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 abstract description 8
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 abstract description 7
- 238000011549 displacement method Methods 0.000 abstract description 5
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 abstract 1
- 238000012864 cross contamination Methods 0.000 abstract 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 abstract 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 12
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 208000006379 syphilis Diseases 0.000 description 7
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 6
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 3
- 241000226657 Clarkia concinna Species 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 2
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 238000012549 training Methods 0.000 description 2
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- 208000037581 Persistent Infection Diseases 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000008293 association colloid Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000033629 detection of yeast Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- -1 hepatitis B Chemical class 0.000 description 1
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种病原体核酸的等温链置换多重检测卡。本发明所述病原体核酸的等温链置换多重检测卡利用了核酸等温链置换方法与胶体金检测技术制备得到的检测卡，可以多重检测乙型肝炎病毒DNA、丙型肝炎病毒RNA、人免疫缺陷病毒RNA、梅毒苍白螺旋体DNA。本发明病原体核酸的等温链置换多重检测卡是一种操作简单、快速、灵敏度高、不需要专业仪器设备的检测卡，因待检病原体核酸在检测过程中未被扩增，所以该检测卡具有防止实验室扩增物交叉污染、防止假阳性的优点，可以广泛应用于临床检测、检验检疫、传染病控制、生物技术等领域的高灵敏度的病原体核酸检测，具有广泛的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及病原体核酸的等温链多重检测卡。
背景技术
传统病原体检测方法包括基于血清学对病原体抗体的检测，和分子检测方法、如对病原体核酸的检测。通过酶联免疫方法对病原体抗体的检测有一定优点，如特异性好，重复性高等，但是该方法不能用于诊断活动性的与慢性的感染。自核酸检测方法建立后，该缺点得到了解决，核酸检则方法是直接对病原体的核糖核酸或脱氧核糖核酸的检测，无论是在定性或者定量方法都有一定的优势。尽管核酸检则方法具有高灵敏度、高特异性的优点，但是它们需时长，费用高，而且需要特殊的仪器用需要专业的培训。因此，人们仍然需要寻找快速、灵敏、低成本、操作简易的检测工具。
发明内容
本发明的目的在于根据现有的病原体检测方法中存在的不足，提供一种病原体核酸的等温链多重检测卡，该检测卡结合了多重检测病原体的核酸等温链置换方法和纳米胶体金技术，克服了传统检测方法的操作技术负责、耗时长、需要特殊仪器等缺陷。
本发明目的通过以下技术方案予以实现：
本发明结合胶体金标记核酸的技术，核酸等温链置换技术，多重检测病原体核酸，通过待检测模板诱导的核酸等温链置换方法形成大量的用于检测的带标志的双链混合物，通过在硝酸纤维素膜上包被不同的检测用核酸，链霉亲和素，分别形成检测线和质控线，最终得到准确的检测结果。
本发明所述病原体核酸的等温链多重检测卡涉及的等温链置换核酸检测方法包括具有通过核酸比对后合成的特异性发夹结构，特异性发夹结构为5’端巯基标志，3’端生物素标志，5’端巯基标志用于与胶体金偶联，3’端生物素标志用于检测时于质控线的链霉亲和素结合，该发夹结构的环可与待检病原体核酸互补配对，配对后打开发夹结构。当待检测病原体核酸存在时，发夹结构可被打开，通过等温链置换方法形成带标签的双链混合物（见图1）。因待检测病原体核酸在检测过程中未被扩增，所以本试纸条具有防止实验室扩增物交叉污染，防止假阳性的优点。
具体地，一种病原体核酸的等温链多重检测卡，从左到右依次为：固定于胶板上的样品垫、玻璃纤维、硝酸纤维素膜和吸水纸；该胶体金检测卡标记有可以识别待检病原体核酸特定序列的分子探针的纳米金颗粒；所述分子探针为一段可形成发夹结构的核苷酸序列，其5’端与3’端互补配对形成径结构，突起的环识别待检病原体核酸特定序列，5’端标记了巯基，还含有延伸引物，3’端标记了生物素；所述纳米金颗粒的粒径为25~40nm。
作为一种优选方案，所述固定于胶板上的样品垫、玻璃纤维、硝酸纤维素膜、吸水纸之间的相邻部分彼此重叠1~5mm。
作为一种优选方案，所述硝酸纤维素膜同时包被有检测线用核苷酸序列、一条质控线用链霉亲和素。
作为一种优选方案，所述质控线和检测线相距3mm。
本发明所述病原体核酸的等温链多重检测卡在检测线上包被了四条用于检测乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒、梅毒等病原体核酸的核酸序列，质控线包被有链霉亲和素；在检测卡加样的一端固定有经特殊样品垫处理液处理的样品垫。经收集、处理后的病人血液样品先用于核酸抽提，然后与胶体金颗粒标志的发夹结构混合物混合，在酶的作用下进行核酸等温链置换反应，形成用于检测卡检测用的带标签的双链混合物。双链混合液依靠毛细管作用在检测卡的纤维素膜上向检测线方向侧向层析，当病人样品中存在病原体核酸时，带标签的双链混合物在运行至检测线时，与检测线上出现一条红色色带，结果为阳性。如果样品中没有病原体核酸时，在检测区便没有红色线条出现，结果为阴性。质控线在检测样品时均应出现红色色带，质控线的出现表示检测试纸条工作正常。
本发明所述多重检测乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒、梅毒等核酸的病原体核酸的等温链多重检测卡为特异性在硝酸纤维素膜上包被不同的检测用核酸和链霉亲和素。
本发明所述病原体核酸的等温链多重检测卡主要应用了多重检测病原体核酸的等温链置换方法，该方法主要为一发夹结构，该发夹结构为5’端巯基标志，3’端生物素标志，5’端巯基标志用于与胶体金偶联，3’端生物素标志用于检测时于质控线的链霉亲和素结合，该发夹结构的环可与待检测模互补配对，配对后打开径环结构，在带标志的引物，DNTPs，Klenow聚合酶作用下作等温链置换反应，后形成大量的用于检测的带标志的双链混合物。
本发明所述病原体核酸的等温链多重检测卡可以用于多重检测乙肝病毒核酸、丙肝病毒核酸、人免疫缺陷病毒核酸和梅毒核酸。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明快速、简单、不需特殊仪器设备，不需专业培训，结果清晰易变，适合基层检测，对多重检测乙肝、丙肝、人免疫缺陷病毒、梅毒等核酸、对输血前，输血后的检测起到重要的作用；
因本发明在检测过程中没有扩增病原体核酸，所以可以有效防治实验室扩增交叉污染，防治假阳性。
附图说明
图1为显示试纸条整体结构示意图；
图2为显示试纸条检测样品效果图，其中，A为无HBV，HCV，HIV，TP的检测结果（阴性），B为含有HBV，HCV，HIV，TP的检测结果（阳性）。
具体实施方式
以下结合实施例来进一步解释本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。
本发明所述应用多重检测病原体核酸的等温链置换技术制得：
1、乙肝病毒检测用发夹结构序列如SEQ ID NO:1所示，延伸引物如SEQ ID NO:2所示，检测用T线对应的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
丙肝病毒检测用发夹结构序列如SEQ ID NO:4所示，延伸引物如SEQ ID NO:5所示，检测用T线对应的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示。
人免疫缺陷病毒检测用发夹结构序列如SEQ ID NO:7示，延伸引物如SEQ ID NO:8示，检测用T线对应的核苷酸序列如SEQ ID NO:9示。
梅毒病毒检测用发夹结构序列如SEQ ID NO:10延伸引物如SEQ ID NO:11检测用T线对应的核苷酸序列如SEQ ID NO:12所示。
2、等温链置换体系：
待检测模板： 1ul
发夹结构： 2ul
引物（10uM）： 1ul
Klenow酶: 0.5ul
dNTPs(10mM) 0.5ul
buffer(10X) 2.5ul
ddH2O 17.5ul
42℃ 30min
2、所述病原体核酸的等温链多重检测卡的制备
1．纳米金（胶体金）的制备：
在500ML的圆底烧瓶中加入100ml 0.01%的HAuCL4溶液，磁力搅拌加热至沸腾；然后向上述溶液中加入2ml 1%枸橼酸钠，溶液变为酒红色后，继续煮沸10min，停止加热继续搅拌15min；胶体金溶液4℃避光保存，纳米金通过520nm最大吸光度值鉴定。
2．胶体金试纸条的组装
将标志有检测用T线，质控线的硝酸纤维素膜、吸水纸、结玻璃纤维、样品垫依次固定于PVC板上，相邻部分彼此重叠2mm，经切割成宽4mm后即得到本发明所述的免疫层析胶体金检测卡。
质量控制标准：
(1) C线（质控线）出现红色的线证明胶体金试纸条有效。
(2) T线（检测线）出现红色的线与否，是阳性阴性判别的标准。
结果判定标准：
(1) C线出现红色的线，同时T线出现红色的线，说明被检样品为阳性；
(2) C线出现红色的线，同时T线没有出现红色的线，说明被检样品为阴性；
(2) C线没有出现红色的线，说明纳米生物传感器失效（图2）。
SEQUENCE LISTING
<110> 广州弗赛生物科技有限公司
<120> 一种病原体核酸的等温链多重检测卡
<130>
<160> 12
<170> PatentIn version 3.2
<210> 1
<211> 43
<212> DNA
<213> 发夹结构序列（乙肝）
<400> 1
tcatcaatca atctttttca ctttagtgtg gattcgcact cct 43
<210> 2
<211> 23
<212> DNA
<213> 延伸引物（乙肝）
<400> 2
caattaacta catactcttg gac 23
<210> 3
<211> 15
<212> DNA
<213> 检测用T线（乙肝）
<400> 3
gttaattgat gtatg 15
<210> 4
<211> 48
<212> DNA
<213> 发夹结构序列（丙肝）
<400> 4
caatttcatc attcattcat ttcagtctag ccatggcgtt agtatgag 48
<210> 5
<211> 23
<212> DNA
<213> 延伸引物（丙肝）
<400> 5
ctttctatct ttctatcttg gac 23
<210> 6
<211> 15
<212> DNA
<213> 检测用T线（丙肝）
<400> 6
gaaagataga aagat 15
<210> 7
<211> 51
<212> DNA
<213> 发夹结构序列（HIV）
<400> 7
cttttcatca ataatcttac cttttgctat gtcagttccc cttggttctc t 51
<210> 8
<211> 23
<212> DNA
<213> 延伸引物（HIV）
<400> 8
tcatcaatca atctttcttg gac 23
<210> 9
<211> 15
<212> DNA
<213> 检测用T线（HIV）
<400> 9
agtagttagt tagaa 15
<210> 10
<211> 44
<212> DNA
<213> 发夹结构序列（梅毒）
<400> 10
aatcctttct ttaatctcaa atcaggtaga agggagggct agta 44
<210> 11
<211> 23
<212> DNA
<213> 延伸引物（梅毒）
<400> 11
aatcctttct ttaattcttg gac 23
<210> 12
<211> 15
<212> DNA
<213> 检测用T线
<400> 12
ttaggaaaga aatta 15
Claims (4)
1.一种病原体核酸的等温链多重检测卡，其特征在于所述检测卡从左到右依次为：固定于胶板上的样品垫、玻璃纤维、硝酸纤维素膜和吸水纸；该病原体核酸的等温链多重检测卡标记有识别待检病原体核酸序列的分子探针的纳米金颗粒；所述分子探针为一段形成发夹结构的核苷酸序列，其5’端与3’端互补配对形成茎环结构，突起的环识别待检病原体核酸特定序列，5’端标记了巯基，还含有延伸引物，3’端标记了生物素；所述纳米金颗粒的粒径为25~40nm；所述多重检测卡含有以下4组序列：
（1）发夹结构序列如SEQ ID NO:1所示，延伸引物如SEQ ID NO:2所示，检测用T线对应的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；
（2）发夹结构序列如SEQ ID NO:4所示，延伸引物如SEQ ID NO:5所示，检测用T线对应的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示；
（3）发夹结构序列如SEQ ID NO:7所示，延伸引物如SEQ ID NO:8所示，检测用T线对应的核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示；
（4）发夹结构序列如SEQ ID NO:10所示，延伸引物如SEQ ID NO:11所示，检测用T线对应的核苷酸序列如SEQ ID NO:12所示。
2.根据权利要求1所述的病原体核酸的等温链多重检测卡，其特征在于所述固定于胶板上的样品垫、玻璃纤维、硝酸纤维素膜、吸水纸之间的相邻部分彼此重叠1~5mm。
3.根据权利要求1所述的病原体核酸的等温链多重检测卡，其特征在于所述硝酸纤维素膜同时包被有检测线用核苷酸序列、一条质控线用链霉亲和素。
4.根据权利要求3所述的病原体核酸的等温链多重检测卡，其特征在于所述质控线和检测线相距3mm。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110175067 CN102230032B (zh) | 2011-06-27 | 2011-06-27 | 一种病原体核酸的等温链多重检测卡 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110175067 CN102230032B (zh) | 2011-06-27 | 2011-06-27 | 一种病原体核酸的等温链多重检测卡 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102230032A CN102230032A (zh) | 2011-11-02 |
| CN102230032B true CN102230032B (zh) | 2013-06-12 |
Family
ID=44842637
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201110175067 Expired - Fee Related CN102230032B (zh) | 2011-06-27 | 2011-06-27 | 一种病原体核酸的等温链多重检测卡 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102230032B (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103352076A (zh) * | 2013-06-18 | 2013-10-16 | 西北大学 | 一种基于蓝色聚苯乙烯微球的层析试纸条及其应用 |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103207271A (zh) * | 2012-04-23 | 2013-07-17 | 齐明山 | 一种丙型肝炎抗体确证试剂 |
| CN103436608B (zh) * | 2013-08-08 | 2015-02-25 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 | 基于核酸适体的快速检测方法及试剂盒 |
| CN104032006B (zh) * | 2014-06-12 | 2016-03-23 | 南京邮电大学 | 单个金纳米颗粒表面等离子共振探针及其制备方法 |
| CN106319041B (zh) * | 2016-08-04 | 2019-09-03 | 上海麒盟生物科技有限公司 | 一种纳米微粒多色多重检测试纸的制备方法 |
| CN106520538A (zh) * | 2016-11-18 | 2017-03-22 | 百奥森（江苏）食品安全科技有限公司 | 一种病原体核酸的等温链多重检测卡 |
| CN110042173A (zh) * | 2019-02-28 | 2019-07-23 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 | 一种同时检测四种出血热病毒的纳米金生物传感器及检测方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101942386A (zh) * | 2009-07-08 | 2011-01-12 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 | 核酸纳米金生物传感器及其制备方法 |
| CN101942387A (zh) * | 2009-07-08 | 2011-01-12 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 | 用于检测甲型流感病毒及甲型h1n1流感病毒的核酸纳米金生物传感器 |
-
2011
- 2011-06-27 CN CN 201110175067 patent/CN102230032B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101942386A (zh) * | 2009-07-08 | 2011-01-12 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 | 核酸纳米金生物传感器及其制备方法 |
| CN101942387A (zh) * | 2009-07-08 | 2011-01-12 | 中国科学院广州生物医药与健康研究院 | 用于检测甲型流感病毒及甲型h1n1流感病毒的核酸纳米金生物传感器 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| Qiuping Guo, et al..Sensitive fluorescence detection of nucleic acids based on isothermal circular strand-displacement polymerization reaction.《Nucleic Acids Research》.2009,第37卷(第3期),e20. |
| Sensitive fluorescence detection of nucleic acids based on isothermal circular strand-displacement polymerization reaction;Qiuping Guo, et al.;《Nucleic Acids Research》;20090107;第37卷(第3期);e20 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103352076A (zh) * | 2013-06-18 | 2013-10-16 | 西北大学 | 一种基于蓝色聚苯乙烯微球的层析试纸条及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102230032A (zh) | 2011-11-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102230032B (zh) | 一种病原体核酸的等温链多重检测卡 | |
| Zhuang et al. | Advanced “lab-on-a-chip” to detect viruses–Current challenges and future perspectives | |
| CN103642941B (zh) | 一种乙型肝炎病毒（hbv）核酸定量检测试剂盒 | |
| CN107475446B (zh) | 一种同时检测多种呼吸道病毒的多重pcr检测方法及其探针组和试剂盒 | |
| CN102154498B (zh) | 一种核酸的检测方法 | |
| Wang et al. | Advances in nanomaterials and their applications in point of care (POC) devices for the diagnosis of infectious diseases | |
| CN105441595B (zh) | 一种用于检测hbv-b/c的数字pcr绝对定量分型检测试剂盒 | |
| Zhang et al. | A novel enhanced substrate for label-free detection of SARS-CoV-2 based on surface-enhanced Raman scattering | |
| CN101942386A (zh) | 核酸纳米金生物传感器及其制备方法 | |
| CN107177699A (zh) | 一种人类乳头瘤病毒（hpv）分型快速检测方法 | |
| CN102839223A (zh) | GeXP多重基因表达遗传分析系统在16种常见呼吸道病毒分型检测中的应用 | |
| CN113005228B (zh) | 一种同步检测多项呼吸道病原体的检测试剂盒及其检测方法 | |
| CN101792800A (zh) | 多生物素信号放大方法 | |
| Ekrami et al. | Potential diagnostic systems for coronavirus detection: a critical review | |
| Seok et al. | Trends of respiratory virus detection in point-of-care testing: A review | |
| US20240150856A1 (en) | Multiplexed nucleic acid detection kit for human papillomavirus (hpv) typing, and detection method | |
| CN105463131A (zh) | 人博卡病毒lamp检测试剂盒 | |
| Zare et al. | Development of biosensors for the detection of COVID-19 | |
| WO2021185034A1 (zh) | 新型冠状病毒核酸快速杂交捕获免疫荧光检测试剂盒及制备方法及检测方法 | |
| CN107502680A (zh) | 检测h7n9经典毒株与高致病性变异毒株的多重荧光rt‑pcr试剂盒 | |
| Eissa | Diagnostic biosensors for coronaviruses and recent developments | |
| CN114540526A (zh) | 对五种输入性疟原虫分型检测的引物、探针及方法 | |
| CN111719017A (zh) | 新型冠状病毒环介导等温扩增检测方法及试剂盒 | |
| CN113151579A (zh) | 鸭甲型肝炎病毒1型和鸭星状病毒3型双重实时荧光定量pcr检测用引物及检测方法 | |
| CN111334593A (zh) | 一种同时检测甲氧西林敏感型和甲氧西林耐药型金黄色葡萄球菌的系统及其使用方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| ASS | Succession or assignment of patent right |
Owner name: JIANGYIN TIANRUI BIOTECH LLC Free format text: FORMER OWNER: GUANGZHOU FOOD-SAFE BIOTECHNOLOGY CO., LTD. Effective date: 20121207 |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| COR | Change of bibliographic data |
Free format text: CORRECT: ADDRESS; FROM: 510663 GUANGZHOU, GUANGDONG PROVINCE TO: 214400 WUXI, JIANGSU PROVINCE |
|
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20121207 Address after: 214400, room 85, sanding Road, Jiangyin, Jiangsu, Wuxi 806, China Applicant after: JIANGYIN TIANRUI BIOTECH LLC Address before: 510663 D, science and technology innovation base, Science City, Guangdong, Guangzhou 402 Applicant before: GUANGZHOU FOODSAFE BIO-TECH CO.,LTD. |
|
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20151202 Address after: 510535 Luogang District Kaiyuan Road, Guangdong, Guangzhou No. 190 Patentee after: Zeng Lingwen Address before: 214400, room 85, sanding Road, Jiangyin, Jiangsu, Wuxi 806, China Patentee before: JIANGYIN TIANRUI BIOTECH LLC |
|
| C41 | Transfer of patent application or patent right or utility model | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20170113 Address after: 430000 Hubei City, Wuhan Province, East Lake hi tech Zone, high tech Avenue, No. 888 high agricultural park headquarters A District, building 2, layer 203, No., No. 16 Patentee after: WUHAN ZHONGKE ZHIKANG BIOTECHNOLOGY CO.,LTD. Address before: 510535 Luogang District Kaiyuan Road, Guangdong, Guangzhou No. 190 Patentee before: Zeng Lingwen |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130612 |