CN103352076A - 一种基于蓝色聚苯乙烯微球的层析试纸条及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种基于蓝色聚苯乙烯微球的层析试纸条及其应用,属于层析试纸条技术,主要解决现有层析试纸条灵敏度低,现有胶体金作为信号标记物成本较高的问题。该层析试纸条包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸收垫和底板,所述结合垫喷涂包裹有蓝色染料的聚苯乙烯微球-DNA探针1复合物,所述硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线,所述检测线上喷涂链霉亲和素-DNA探针2复合物,所述质控线上喷涂有链霉亲和素-DNA探针3复合物。该层析试纸条具有成本低廉,灵敏度较高的优点,除实现定性测量之外,还可实现定量测量,与胶体金作为信号标记物相比,具有比较好的抗干扰能力,能使用大量的血样。
Description
技术领域
本发明涉及层析试纸条技术领域,尤其是涉及一种基于蓝色聚苯乙烯微球的层析试纸条及其应用。
背景技术
目前,在生物分子、环境污染物和危险品等的层析检测方面,一般用胶体金作为信号标记物进行检测,虽然检测比较快速,并且可以单份检验,不需要特殊设备,但是,胶体金价格相对较贵,容易团聚,且灵敏度不是特别高。近年来国内有人尝试用食品染料作为信号标记物,尝试在层析试纸条平台上实现生物分子检测,但灵敏度不高。
发明内容
本发明的目的在于提供一种基于蓝色聚苯乙烯微球的层析试纸条及其应用,该层析试纸条具有成本低廉,灵敏度较高的优点,除实现定性测量之外,还可实现定量测量,并且,与胶体金作为信号标记物相比,具有比较好的抗干扰能力,能使用大量的血样。
本发明所采用的一种技术方案为:
一种基于蓝色聚苯乙烯微球的层析试纸条,包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸收垫和底板,所述样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫顺次粘接在底板上,所述结合垫喷涂包裹有蓝色染料的聚苯乙烯微球-DNA探针1复合物,所述硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线,所述检测线上喷涂链霉亲和素-DNA探针2复合物,所述质控线上喷涂有链霉亲和素-DNA探针3复合物。
优选的,所述包裹有蓝色染料的聚苯乙烯微球的直径为100-1000nm。
本发明还提供了一种基于蓝色聚苯乙烯微球的层析试纸条的应用方法,包括如下步骤:
S1:将待测样品溶液滴加在层析试纸条的样品垫上;
S2:待质控线均变蓝时,即得测试结果;
S3:将显示测试结果的层析试纸条在照片分析装置上进行分析,得出目标DNA的定量结果。
优选的,所述照片分析装置包括外壳、拍摄探头、样品台和CCD图像处理装置,所述样品台设置于外壳内底部中央,所述拍摄探头设置于外壳内顶部中央,所述拍摄探头通过数据线连接于外壳外部的CCD图像处理装置。
本发明所具有的优点:
(1)首次使用包裹蓝色染料分子的聚苯乙烯微球作为信号标记物,在层析试纸条平台上实现快速检测目标生物分子的目的。
(2)与胶体金技术相比,能能降低成本,提高灵敏度;有望取代胶体金实现在层析试纸条平台上检测各种生物分子,环境污染物,危险品等。
(3)与近年出现的染料分子作为信号标记物层析试纸条技术比较,能提高灵敏度。
(4)与胶体金作为信号标记物相比,具有比较好的抗干扰能力,能使用大量的血样。
(5)与传统的层析试纸条相比,除实现定性测量之外,还可实现定量测量。
附图说明
图1为本发明基于聚苯乙烯微球的层析试纸条的结构示意图;
图2为本发明照片分析装置的结构示意图;
其中:1样品垫;2结合垫;3硝酸纤维素膜;31检测线;32质控线;4吸收垫;5底板;6外壳;7拍摄探头;8CCD图像处理装置;9样品台。
具体实施方式
为阐明对本发明特征的理解,下面结合实施实例对本发明做进一步阐述。
如图1所示,一种基于蓝色聚苯乙烯微球的层析试纸条,包括样品垫1、结合垫2、硝酸纤维素膜3、吸收垫4和底板5,所述样品垫1、结合垫2、硝酸纤维素膜3和吸收垫4顺次粘接在底板5上,所述结合垫2喷涂包裹有蓝色染料的聚苯乙烯微球-DNA探针1复合物,所述聚苯乙烯微球的直径为100-1000nm。所述硝酸纤维素膜3上设置有检测线31和质控线32,所述检测线31上喷涂链霉亲和素-DNA探针2复合物,所述质控线32上喷涂有链霉亲和素-DNA探针3复合物。
上述的基于蓝色聚苯乙烯微球的层析试纸条的应用方法,包括如下步骤:
S1:将待测样品溶液滴加在层析试纸条的样品垫上;
S2:待质控线均变蓝时,即得测试结果;
S3:将显示测试结果的层析试纸条在照片分析装置上进行分析,得出目标DNA的定量结果。
如图2所示,所述照片分析装置包括外壳6、拍摄探头7、样品台9和CCD图像处理装置8,所述样品台9设置于外壳6内底部中央,所述拍摄探头7设置于外壳6内顶部中央,所述拍摄探头7通过数据线连接于外壳外部的CCD图像处理装置8。
使用过程中,由于结合垫用来喷涂蓝色染料聚苯乙烯微球-DNA探针1复合物。硝酸纤维素膜上有检测线和质控线。检测线上喷涂链酶亲合素-DNA探针2复合物。质控线上喷涂链酶亲合素-DNA探针3复合物。将样品溶液滴加在样品垫上,当样品中有待测DNA序列存在时,样品溶液由于毛细管作用向右流动。首先到达结合垫,使固定在结合垫上的蓝色染料聚苯乙烯微球-DNA探针1复合物释放出来,同时目标DNA与DNA探头1发生杂交反应,形成蓝色聚苯乙烯微球-DNA探针2-目标DNA结合物。此结合物继续向右流动,到达检测线后,此结合物上的目标DNA序列单链部分与固定在检测线上的DNA探针2发生杂交反应,形成一条蓝色条带。多余的蓝色聚苯乙烯微球-DNA探针1复合物继续向右流动,到达质控线,质控线上固定的链酶亲合素-DNA探针3复合物会直接跟蓝色据苯乙烯微球-DNA探针1复合物上的DNA探针1分子杂交,形成第二条蓝色条带,用以显示该装置工作正常与否。多余的蓝色聚苯乙烯微球复合物以及未发生杂交反应的目标DNA分子被吸收垫吸收。通过肉眼辨别检测线是否出现蓝色条带可以实现目标DNA序列的定性分析。
另外,在本发明装置中可以实现其他生物分子,比如说疾病相关的蛋白质的定性定量即时检测。还可以实现环境污染物(农药,重金属离子等等)和危险品的即时快速检测。
定性测量后,若需要定量测量,则将经过定性测量的层析试纸条放置在如图2所示的样品台上,经拍摄探头拍照,并将拍摄结果传送至CCD图像处理装置中,对图像进行处理分析,得出样品溶液的含量。
Claims (4)
1.一种基于蓝色聚苯乙烯微球的层析试纸条,包括样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸收垫和底板,所述样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸收垫顺次粘接在底板上,其特征是,所述结合垫喷涂包裹有蓝色染料的聚苯乙烯微球-DNA探针1复合物,所述硝酸纤维素膜上设置有检测线和质控线,所述检测线上喷涂链霉亲和素-DNA探针2复合物,所述质控线上喷涂有链霉亲和素-DNA探针3复合物。
2.根据权利要求1所述的一种基于蓝色聚苯乙烯微球的层析试纸条,其特征是,所述包裹有蓝色染料的聚苯乙烯微球的直径为100-1000nm。
3.一种根据权利要求1或2所述的一种基于蓝色聚苯乙烯微球的层析试纸条的应用方法,其特征是,包括如下步骤:
S1:将待测样品溶液滴加在层析试纸条的样品垫上;
S2:待质控线均变蓝时,即得测试结果;
S3:将显示测试结果的层析试纸条在照片分析装置上进行分析,得出目标DNA的定量结果。
4.根据权利要求3所述的一种基于蓝色聚苯乙烯微球的层析试纸条的应用方法,其特征是,所述照片分析装置包括外壳、拍摄探头、样品台和CCD图像处理装置,所述样品台设置于外壳内底部中央,所述拍照探头设置于外壳内顶部中央,所述拍摄探头通过数据线连接于外壳外部的CCD图像处理装置。
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