CN102181372A

CN102181372A - 一种酿酒酵母菌及其应用

Info

Publication number: CN102181372A
Application number: CN 201110038931
Authority: CN
Inventors: 邢国良; 王捷; 姚玉军; 邬晓萍; 陶文沂
Original assignee: NEIMENGGU YUHANGREN HIGH-TECHNOLOGY INDUSTRIAL Co Ltd
Current assignee: NEIMENGGU YUHANGREN HIGH-TECHNOLOGY INDUSTRIAL Co Ltd
Priority date: 2011-02-15
Filing date: 2011-02-15
Publication date: 2011-09-14
Anticipated expiration: 2031-02-15
Also published as: CN102181372B

Abstract

本发明公开了一种酿酒酵母菌及其应用，该菌株用于以沙棘果汁或果浆为原料的沙棘果酒的制备，生产品质优良的沙棘果酒。酿酒酵母菌种分别利用与沙棘果汁相同pH的麦芽汁液体培养基和YPD固体培养基进行富集及分离和保藏，在YPD固体培养基上长出的菌落为白色，表面光滑湿润，中间凸起，菌株细胞为圆形，生殖方式为单端出芽生殖。其适合在酸度较高、糖度不高、不经任何成分调节的沙棘果汁和果浆中进行正常的酒精发酵，而且起酵快、发酵能力强，发酵所得果酒呈鲜亮透明的酒红色，酒香和沙棘果香非常醇厚，口味细腻柔和，具有沙棘果酒的典型性，适用于沙棘果酒及沙棘果醋生产。

Description

一种酿酒酵母菌及其应用

技术领域：

本发明涉及的是微生物的筛选及沙棘果酒的酿造，特别是一种酿酒酵母菌及其应用于沙棘果酒的酿造。

背景技术：

沙棘具有十分丰富的营养价值；同时沙棘还具有优异的生态效益和经济价值。加大对沙棘整株包括树叶、果实等的利用开发，将会更加有效地促进沙棘资源的利用，尽可能地发挥出沙棘价值，提高沙棘的经济效益，促进其产业化发展。沙棘果汁和果浆中含糖低、酸度高，pH只有2.5左右，口感也不太好，这些因素都直接导致了沙棘果汁在利用过程中受到了限制，导致大量的沙棘果汁和果浆无法被利用而浪费。如果能成功以沙棘果汁或果浆为主要原料，成功酿造出品质优良的沙棘果酒，不仅对于加强生态建设，做好三北地区防风固沙、遏制沙尘暴提供强有力的保障，而且能提高沙棘资源的利用率及其商品价值，提高了农民收入，还能充分发挥沙棘特殊的保健功效满足人们对高品质生活的消费需求。

由于沙棘果汁和果浆的酸度高，糖度低，一般的酿酒酵母在其中难以存活，存活下来的酵母发酵能力也比较低，而且发酵出的酒醪口味欠佳，不仅不能突出沙棘果汁特有的香气，而且有碍于利用其生产沙棘保健果醋的研究。因此，选育能很好利用沙棘果汁或果浆发酵的优良酵母菌非常必要也非常有意义。

发明内容：

本发明的目的是提供一种酿酒酵母菌，其能较好地利用酸度高，糖度低且不经任何成分调节的沙棘果汁或果浆发酵酿造沙棘果酒，酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为：CGMCC NO.4354。

酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)的分离源为成熟沙棘果皮，其在YPD培养基上长出的菌落为白色，表面光滑湿润，中间凸起，菌株细胞为圆形，生殖方式为单端出芽生殖。所述YPD培养基的pH为2.00-3.50。

本发明的另一个目的是将该酿酒酵母菌专用于沙棘果汁或果浆为原料酿造品质优良的沙棘果酒。

所述的酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)用于酿造沙棘果酒的工艺，其依次包括有如下步骤：(1)取沙棘果汁或果浆，(2)将所述取沙棘果汁或果浆离心并高温灭菌；(3)接种；(4)酒精发酵；(5)陈酿；(6)过滤；(7)杀菌；最终制得成品。

所述沙棘果汁中的总糖占所述沙棘果汁总量的质量百分比6％-14％，所述沙棘果汁的pH为2.00-3.50；所述沙棘果浆中的总糖占所述沙棘果浆总量的质量百分比为14％-28％，所述沙棘果浆的pH为2.00-3.50。不经任何成分调节，直接将其用来发酵，酿造沙棘果酒。

所述酒精发酵温度为20℃-40℃，发酵时间为3天-8天。

所述接种：在高温灭菌后的所述沙棘果汁或果浆加入所述沙棘果汁或果浆总量的4％(v/v)-16％(v/v)的酿酒酵母菌。

本发明的优点在于：酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)是从成熟的沙棘果皮中，通过对筛选酵母菌的产气性能、产酒精能力及发酵力以及发酵得到的沙棘果酒的感官评价进行综合分析，筛选得到的全新菌株；该菌株适合在酸度较高、糖度不高、不经任何成分调节的沙棘果汁或果浆中进行正常的酒精发酵，而且起酵快、发酵能力强，发酵所得果酒呈鲜亮透明的酒红色，酒香和沙棘果香非常醇厚，口味细腻柔和，具有沙棘果酒的典型性，适用于沙棘果酒及沙棘果醋生产。

附图说明

图1为酿酒酵母菌在YPD固体培养基上的菌落形态；

图2为酿酒酵母的细胞形态(×40)。

图3为数株酵母菌的发酵力比较曲线图。

具体实施方式：

以下的实施例便于更好的理解本发明，但并不限定本发明，下述实施例的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的实验材料，如为特殊说明，均为自常规生化试剂商店购买得到的。

菌株名称：酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)；分类命名：酿酒酵母；已经于2010年11月19日在中国北京市的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)进行了保藏，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮编：100101；保藏编号为：CGMCC No.4354，

下面通过具体的实施例对本发明作进一步详细的描述。

实施例1：酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)的分离鉴定、生物学特性。

实施例1.1：酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)的分离鉴定、生物学特性。

1.材料

1.1实验原料

酵母菌分离源：成熟的沙棘果皮(内蒙古宇航人高技术产业有限责任公司提供)

沙棘果汁：内蒙古宇航人高技术产业有限责任公司提供

1.2实验试剂

1.3实验设备

1.4培养基的配置

1.4.1富集培养基：10°Bx的麦芽汁，用稀盐酸调pH到2.00，115℃灭菌30min。

1.4.2酵母菌分离、保藏培养基(YPD)：酵母膏1％，蛋白胨2％，葡萄糖2％，琼脂2％，去离子水配置，调节pH至2.00，其中琼脂和调好pH的培养基在115℃分开灭菌30min，冷却至60℃将两者混合。

2.酿酒酵母菌的分离

2.1选择性富集培养

无菌称取10g沙棘果皮，放入盛有90mL灭过菌的10°Bx麦芽汁的250mL的三角瓶中，在28℃的培养箱中培养48h。

2.2分离与保藏

取出增殖液用无菌水稀释到10^-5、10^-6、10^-7浓度，取各稀释液0.2mL，均匀涂布于分离培养基平板上，放入28℃培养箱中培养，72h后，选择具有典型酵母菌菌落特征的单菌落划线分离2-3次，待菌落长出后，挑取单菌落进行镜检，将观察到有出芽生殖并为纯种的菌种保藏。

3.酿酒酵母菌的筛选

3.1酵母菌的产气性能比较

采用杜氏管发酵法，将5mL沙棘果汁加入试管中，灭菌冷却后加入酵母菌，于28℃条件下进行培养。观察杜氏管中的产气情况。

3.2酵母菌的产酒精试验

一级扩大培养：取10mL试管一个，装入澄清沙棘果汁5mL，115℃灭菌30min，冷却后取3-4环酵母菌接入试管中，放置28℃培养箱中培养48h。

二级扩大培养：取250mL三角瓶，装入澄清沙棘果汁100mL，115℃灭菌30min，按3％接入上述酵母菌一级扩培液，放置28℃培养箱中。培养48h。

酒精发酵：取250mL三角瓶，装入澄清沙棘果汁100mL，115℃灭菌30min，按10％接入上述酵母菌二级扩培液，纱布封口，放置28℃培养箱中培养1d，然后换用发酵栓在30℃发酵4d，取出蒸馏，用重铬酸钾比色法测定沙棘果汁酒醪最终酒精度，并同时测定其他几种理化指标。

3.3酵母菌发酵力测试

试验方法同酒精发酵，在发酵过程中每24 h测定一次CO₂损失量(每次测定之前摇晃三角瓶以排出CO₂)，随着发酵时间的延续，CO₂的损失量会越来越少，到连续两天内CO₂的损失量小于0.2g时，即表示酵母菌发酵结束。通过绘制酵母的发酵速率曲线，以确定各菌株的发酵力强弱。

3.4沙棘果酒的感官评价

发酵结束后从色泽、滋味、香气、澄清度和典型性等五个方面对不同酵母菌发酵的沙棘果酒进行感官评价。

4.筛选的酵母菌株的分子生物学鉴定

4.1待鉴定菌株染色体DNA快速提取

在1.5mL离心管中加入100μL无菌水，刮取3-4环待鉴定酵母的菌体于离心管中。振荡均匀后8000r/min离心1min，弃上清。在1.5mL离心管中加入裂解液150μL，振荡均匀后放置于恒温金属浴中90℃反应15min得到染色体DNA粗提液。

4.2待鉴定菌株ITS序列的扩增

以染色体DNA粗提液为模板，使用ITS序列通用引物进行扩增。在0.2mL PCR薄壁管中加入染色体DNA粗提液0.5μL、10×PCR缓冲液5μL、2.5mmol/L dNTPs4μL、Taq DNA聚合酶0.5μL，10μmol/L的上下游引物(上游：5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′，下游：5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′)各0.5μL，补水至50μL。

PCR反应条件为：94℃预变性5min；94℃变性30s，54℃退火45s，72℃延伸60s，经过30个循环后，72℃再延伸10min。电泳PCR产物后发现在约0.4kb处出现目的条带。PCR产物纯化按OMEGA纯化试剂盒说明书进行。

4.3ITS序列的测定

PCR产物的核苷酸序列测定按BigDye Terminator v3.1试剂盒说明书进行。待酒精挥发完全后每管加入10μL Hi-Di Formamide溶解DNA。随后在PCR仪上变性：95℃ 4min，94℃ 4min。上机电泳。

4.4BLAST比对

将测序结果用Applied Biosystems公司的Sequence Scanner V1.0软件进行分析后，提交到NCBI-BLAST上进行比对。

5结果与分析

5.1酵母菌的分离

通过富集培养和划线分离，结合菌落的外观形态和镜检结果，共得到酵母菌9株。菌落颜色、形态和菌体细胞形状及生殖特征见表1

表1 酵母菌的分离结果

Table 1 The results of yeast strains isolation

5.2酵母菌的筛选

5.2.1酵母菌的产气性能比较

对分离得到的9株酵母菌通过产气试验进行初步筛选，以实验室保藏的酿酒酵母作为对照，产气情况记录如表2所示，在发酵48h后，分离菌株中，产气能达到约等于杜氏小管满体积的酵母菌有5株，分别是C1、C2、C3、J5和R1。说明这些酵母菌产气性能比较强，可能有较高的发酵度和发酵效率。将这5株酵母菌作为出发菌株进行复筛。

表2 杜氏小管产气情况

Table 2 Gas formation in Du’s small pipe

注：“-”：没有产气或产气量小于杜氏小管体积的1/3；“+”：产气量等于杜氏小管体积的1/3；“++”：产气量等于杜氏小管体积的2/3；“+++”：产气量等于杜氏小管满体积。

5.2.2酵母菌的产酒精试验

按照1.5.2酵母菌的产酒精试验，对于前面筛得的菌株用产酒精能力进行复筛，结果见表3。

表3 酵母菌的产酒精试验结果

Table 3 Alcoholic yield test of yeast strains

总糖是指沙棘果中含各类糖的总量；还原糖是总糖中的葡萄糖和果糖的总量，这两种糖可在酵母作用下发酵产生酒精。沙棘果酒的残糖量影响沙棘果酒的口感和风味，是酿酒工业中控制生产和决定工艺的重要参数。滴定酸是沙棘果中很重要的呈味物质，也是沙棘果酒感官指标的重要体现，滴定酸过高或过低，都会对酒质产生不良的影响。由表3可知，酵母菌R1发酵得到的沙棘果汁酒醪的酒精度是最高的，达到3.99％(原沙棘果汁总糖8.46％)，残糖最低，仅为0.66％，说明R1利用沙棘果汁中的糖较其他酵母彻底，试验菌株C2，J5，C3和C1发酵耗糖能力次之，其发酵醪液的酒精度都高于对照实验室保藏的酿酒酵母。各株菌的发酵液酸度差别不大。

5.2.3酵母菌发酵力测试

对于筛得的数株酵母菌株进行发酵力测试，测定结果比较见图3数株酵母菌的发酵力比较曲线图。

从图3可以发现，筛选菌株C1，C2，C3，J5，R1的发酵力均高于对照的实验室保藏酿酒酵母，在第2天各菌株都达到各自最强的发酵力，其中J5的最强发酵力高于其他菌株，R1次之。

5.2.4沙棘果酒的感官评价

色泽、滋味、香气、澄清度、典型性是评价沙棘果酒优劣的重要感官指标，对后期生成各味协调平衡，口感舒顺，后味绵长，具有独特风格的沙棘保健果醋具有决定性的作用。其中色泽和澄清度为外观质量，对于产品的市场效果起重要影响。沙棘果酒的香气极为复杂多样，它由沙棘果汁的香气和发酵产生的香气混合组成，优质的沙棘果酒应该口感舒适、愉快，给人以美的享受。5株酵母发酵制取的沙棘果酒的感官评价结果见表4。

表4 不同酵母发酵沙棘果酒的感官评价

Table 4 Sensory evaluation of seabuckthorn wine fermented by different yeast strains

从表4中可以看出，由R1发酵产出的果酒呈鲜亮透明的酒红色，而且有醇厚的酒香和果香，口味细腻柔和，具有沙棘果酒的典型性。

对上述各项测试结果(产气性能、产酒精能力、发酵力)及沙棘果酒感官品评的结果进行综合分析，确定菌株R1作为最优菌株。

5.3结果

通过富集培养和划线分离，结合菌落的外观形态和镜检结果，共得到酵母菌9株。对这9株酵母菌通过产气试验进行初步筛选，在发酵48h后，分离菌株中，产气能达到约等于杜氏小管满体积的酵母菌有5株。以这5株酵母菌作为出发菌株，分别接入总糖为8.46％，还原糖为7.22％，pH为2.50，酸度为2.68％的沙棘果汁中，通过产酒精、发酵力实验及对各株菌发酵所得的沙棘果酒进行感官评价进行复筛。结果表明酵母菌R1发酵得到的沙棘果汁酒醪的酒精度是最高的，达到3.99％，残糖最低，仅为0.66％，说明R1利用沙棘果汁中的糖较其他酵母彻底；在发酵第二天R1的发酵力达到最高，仅次于其中一株酵母菌；R1发酵产出的果酒呈鲜亮透明的酒红色，而且有醇厚的酒香和果香，口味细腻柔和，具有沙棘果酒的典型性，克服了目前其他普通酵母菌不能适应沙棘果汁酸度高、糖度低特性的问题，且能较好利用不需要经过任何的成分调节的沙棘果汁发酵酿造沙棘品质优良的沙棘果酒，为工业化生产沙棘果酒提供了一定的指导意义。所以将菌株R1列为目标菌株进行后续研究，并送至中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)进行存活实验与保藏，保藏号为：CGMCC No.4354。

6.菌落特征

在YPD固体培养基上长出的菌落为白色，表面光滑湿润，中间凸起。

7.显微镜下的形态

图1提供的是酿酒酵母菌R1在YPD固体培养基上的菌落形态。

图2提供的是酿酒酵母菌R1的细胞形态(×40)。

实施例1.2：酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)的分离鉴定、生物学特性。

其中在富集培养基：10°Bx的麦芽汁，用稀盐酸调pH到3.50，115℃灭菌30min。

酵母菌分离、保藏培养基(YPD)：酵母膏1％，蛋白胨2％，葡萄糖2％，琼脂2％，去离子水配置，调节pH至3.50，其中琼脂和调好pH的培养基在115℃分开灭菌30min，冷却至60℃将两者混合。

其它部分如实施例1.1所述最终得到酿酒酵母菌R1。

实施例1.3：酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)的分离鉴定、生物学特性。

其中在富集培养基：10°Bx的麦芽汁，用稀盐酸调pH到2.52，115℃灭菌30min。

酵母菌分离、保藏培养基(YPD)：酵母膏1％，蛋白胨2％，葡萄糖2％，琼脂2％，去离子水配置，调节pH至2.52，其中琼脂和调好pH的培养基在115℃分开灭菌30min，冷却至60℃将两者混合。

其它部分如实施例1.1所述最终得到酿酒酵母菌R1。

实施例1.4：酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)的分离鉴定、生物学特性。

其中在富集培养基：10°Bx的麦芽汁，用稀盐酸调pH到2.92，115℃灭菌30min。

酵母菌分离、保藏培养基(YPD)：酵母膏1％，蛋白胨2％，葡萄糖2％，琼脂2％，去离子水配置，调节pH至2.92，其中琼脂和调好pH的培养基在115℃分开灭菌30min，冷却至60℃将两者混合。

其它部分如实施例1.1所述最终得到酿酒酵母菌R1。

实施例2：酿酒酵母菌R1在沙棘果酒酿造中的应用

实施例2.1：酿酒酵母菌R1在沙棘果酒酿造中的应用——沙棘果酒酿造工艺。

1.材料与设备

1.1材料

沙棘果汁：内蒙古宇航人高技术产业有限责任公司提供

酵母菌保藏培养基：YPD固体培养基(如实施例1.1所得)

酵母菌扩大培养基：不经任何调配的沙棘果汁

1.2实验试剂

1.3实验设备

2.实验方法

2.1酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)用于酿造沙棘果酒的工艺，其依次包括有如下步骤：(1)取沙棘果汁：沙棘果汁中的总糖占沙棘果汁总量的质量百分比6％，沙棘果汁的pH为2.00；(2)将沙棘果汁离心并高温灭菌；(3)接种：在高温灭菌后的沙棘果汁加入沙棘果汁总量的4％(v/v)的酿酒酵母菌；(4)酒精发酵：酒精发酵温度为40℃，发酵时间为3天；(5)陈酿；(6)过滤；(7)杀菌；最终制得成品。果汁不经任何成分调节。

酿造所得的沙棘果酒感官评价：沙棘果酒品质优，且酒体澄清透明、呈酒红色，且色泽红润，具有沙棘果酒的典型风味。

实施例2.2：酿酒酵母菌R1在沙棘果酒酿造中的应用——沙棘果酒酿造工艺。

1、材料与设备

材料

沙棘果浆：内蒙古宇航人高技术产业有限责任公司提供

酵母菌保藏培养基：YPD固体培养基(如实施例1.2所得)

酵母菌扩大培养基：不经任何调配的沙棘果浆

实验试剂和实验设备如实施例2.1所述。

2、实验方法

2.1酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)用于酿造沙棘果酒的工艺，其依次包括有如下步骤：(1)取沙棘果浆：沙棘果浆中的总糖占沙棘果浆总量的质量百分比14.00％，沙棘果浆的pH为3.50；(2)将沙棘果浆离心并高温灭菌；(3)接种：在高温灭菌后的沙棘果汁加入沙棘果浆总量的16％(v/v)的酿酒酵母菌；(4)酒精发酵：酒精发酵温度为20℃，发酵时间为8天；(5)陈酿；(6)过滤；(7)杀菌；最终制得成品。果浆不经任何成分调节。

实施例2.3：酿酒酵母菌R1在沙棘果酒酿造中的应用——沙棘果酒酿造工艺。

1、材料与设备

材料

沙棘果汁：内蒙古宇航人高技术产业有限责任公司提供

酵母菌保藏培养基：YPD固体培养基(如实施例1.3所得)

酵母菌扩大培养基：不经任何调配的沙棘果汁

实验试剂和实验设备如实施例2.1所述。

2、实验方法

2.1酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)用于酿造沙棘果酒的工艺，其依次包括有如下步骤：(1)取沙棘果汁：沙棘果汁中的总糖占沙棘果汁总量的质量百分比10％，沙棘果汁的pH为2.52；(2)将沙棘果汁离心并高温灭菌；(3)接种：在高温灭菌后的沙棘果汁加入沙棘果汁总量的10％(v/v)的酿酒酵母菌；(4)酒精发酵：酒精发酵温度为30℃，发酵时间为6天；(5)陈酿；(6)过滤；(7)杀菌；最终制得成品。果汁不经任何成分调节。

实施例2.4：酿酒酵母菌R1在沙棘果酒酿造中的应用——沙棘果酒酿造工艺。

1、材料与设备

材料

沙棘果浆：内蒙古宇航人高技术产业有限责任公司提供

酵母菌保藏培养基：YPD固体培养基(如实施例1.4所得)

酵母菌扩大培养基：不经任何调配的沙棘果浆

实验试剂和实验设备如实施例2.1所述。

2、实验方法

2.1酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)用于酿造沙棘果酒的工艺，其依次包括有如下步骤：(1)取沙棘果浆：沙棘果浆中的总糖占沙棘果浆总量的质量百分比28％，沙棘果浆的pH为2.92；(2)将沙棘果浆离心并高温灭菌；(3)接种：在高温灭菌后的沙棘果浆加入沙棘果浆总量的10％(v/v)的酿酒酵母菌；(4)酒精发酵：酒精发酵温度为28℃，发酵时间为6天；(5)陈酿；(6)过滤；(7)杀菌；最终制得成品。果浆不经任何成分调节。

Claims

1.酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏号为：CGMCC NO.4354。

2.根据权利要求1所述的酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)，其特征在于：所述的酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC NO.4354，其在YPD培养基上长出的菌落为白色，表面光滑湿润，中间凸起，菌株细胞为圆形，生殖方式为单端出芽生殖。

3.根据权利要求2所述的酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)，其特征在于：所述YPD培养基的pH为2.00-3.50。

4.权利要求1所述的酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC NO.4354的应用，其特征在于：该酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)CGMCC NO.4354用于生产以沙棘果或沙棘汁(浆)为原料的沙棘果酒。

5.根据权利要求4所述的酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)用于酿造沙棘果酒的工艺，其特征在于，其依次包括有如下步骤：(1)取沙棘果汁或果浆，(2)将所述取沙棘果汁或果浆离心并高温灭菌；(4)接种；(5)酒精发酵；(6)陈酿；(7)过滤；(8)杀菌；最终制得成品。

6.根据权利要求5所述的酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)用于酿造沙棘果酒的工艺，其特征在于，所述沙棘果汁中的总糖占所述沙棘果汁总量的质量百分比6％-14％，所述沙棘果汁的pH为2.00-3.50；所述沙棘果浆中的总糖占所述沙棘果浆总量的质量百分比为14％-28％，所述沙棘果浆的pH为2.00-3.50。

7.根据权利要求5所述的酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)用于酿造沙棘果酒的工艺，其特征在于，所述酒精发酵温度为20℃-40℃，发酵时间为3天-8天。

8.根据权利要求5所述的酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)用于酿造沙棘果酒的工艺，其特征在于，所述接种：在高温灭菌后的所述沙棘果汁或果浆加入所述沙棘果汁或果浆总量的4％(v/v)-16％(v/v)的酿酒酵母菌。