CN102178028A

CN102178028A - 一种大豆肽生产方法

Info

Publication number: CN102178028A
Application number: CN 201110164075
Authority: CN
Inventors: 梁运祥; 葛向阳; 陈正军; 戴丽君; 叶倩
Original assignee: WUHAN BAIAN BIOLOGICAL TECHNOLOGY CO LTD
Current assignee: WUHAN BAIAN BIOLOGICAL TECHNOLOGY CO LTD
Priority date: 2011-06-17
Filing date: 2011-06-17
Publication date: 2011-09-14
Anticipated expiration: 2031-06-17
Also published as: CN102178028B

Abstract

本发明涉及一种大豆肽生产方法，是以发酵豆粕为原料，再利用动物源性的蛋白酶生产大豆多肽的一种生产方法，包括：1）液体酶解：将发酵豆粕与水按重量比为1:4－8混合，加入胰蛋白酶，保温酶解；2）高温灭酶；3）过滤：将酶解液过滤分离得到大豆蛋白粗品；4）脱色除味；5）精炼；6）喷雾干燥，灭菌制成成品；所述脱色除味是用经过预处理的大孔树脂过滤。本发明优点是：1）以发酵豆粕为原料，消除了原料中的蛋白酶抑制剂；2)可以完成对豆粕中大豆蛋白质的预水解；3）大量减少了外加酶的量，有效的降低了成本、获得较高的水解率。

Description

一种大豆肽生产方法

技术领域

本发明涉及一种大豆肽生产方法，是以发酵豆粕为原料，再利用动物源性的蛋白酶生产大豆多肽的一种生产方法，属于微生物技术领域。

背景技术

大豆肽是大豆的深加工产品。大豆蛋白是最优良的植物蛋白，但是因为大豆中含有多种抗营养因子，降低了人体对它的吸收利用率。由于大豆蛋白资源丰富、价格低廉、营养丰富,同时对其深加工后的大豆多肽具有比大豆蛋白更丰富的加工特性、营养特性和生理功能,以大豆，豆粕或大豆蛋白为主要原料，用酶解法或微生物发酵法生产的，且分子量分布在10000Da以下的肽称为大豆多肽。大豆多肽的氨基酸组成与大豆蛋白质完全一样，必需氨基酸平衡且含量丰富。大豆多肽与传统大豆食品蛋白相比，虽然大豆肽的生产工艺较复杂、生产成本相对较高，但是其具有易消化吸收、能迅速供给机体能量、低豆腥味等特性，特别是具有降低血清胆固醇、降血压和促进脂肪代谢、抗疲劳、抗氧化等独特的生理功能。因此大豆肽相对大豆蛋白具有更加诱人的市场应用前景，如：食品、医药领域等。

由于大豆多肽的众多功效和应用前景，对其生产和利用已有大量研究。目前根据生产方法特点，现有技术主要采用的是液体酶解的方法。

液体酶解法是将大豆粉或大豆分离蛋白加水混合，然后直接加入一种或多种复合蛋白酶进行保温酶解，水解完成后，再依次通过加热灭酶、冷却、分离、浓缩和干燥，最后制成大豆肽产品。在酶解过程中，在不同阶段加入不同的酶，这些酶有毛酶来源的蛋白酶、黑曲霉来源的酸性蛋白酶、米曲霉来源的中性蛋白酶、细菌来源的蛋白酶（Alcalase、Alcakase、Protamex等）、植物来源的蛋白酶（木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶等）但是液体酶解的方法均存在生产成本偏高的问题，从而限制了大豆肽产品的应用。成本高的原因：一是，液体酶解法对大豆粉等低价格粗原料水解吸收率低，因此，使用高纯度高价格的原料，一般采用大豆分离蛋白作为生产原料，等量蛋白原料成本较大豆粉增加了5倍以上;二是，液体酶解法使用的酶量大，外购酶的成本高。因此，需要一种新的生产工艺来降低大豆肽生产成本。发明专利CN 1827772A中提到采用两段法、即通过固体发酵和液体酶解相结合的方法降低了大豆肽的生产成本。而本专利吸收专利CN 1827772A的一部分优点，进行了创新。一是本专利直接使用发酵豆粕作为原料（市场成熟购买方便），不但避免原料固体发酵的设备厂房的成本投入，而且可以减少或消除大豆粉中含有的各种酶抑制剂对水解酶的影响。二是本专利使用的水解酶是动物源的胰蛋白酶与专利CN 1827772A中的植物源复合蛋白酶不同，因此，所得到的功能小肽不同。

发明内容

本发明的目的在于：吸收液体酶解法的优点，克服了它的不足，提供一种利用发酵豆粕作为原料，生产大豆多肽。从而1）以发酵豆粕为原料，消除了原料中的蛋白酶抑制剂；2)可以完成对豆粕中大豆蛋白质的预水解；3）大量减少了外加酶的量，有效的降低了成本、获得较高的水解率。

本发明的技术方案是：一种大豆肽生产方法，它是以发酵豆粕为原料，其工艺步骤包括：1）液体酶解：将发酵豆粕与水按重量比为1:4－8混合，加入胰蛋白酶，保温酶解；2）高温灭酶；3）过滤：将酶解液过滤分离得到大豆蛋白粗品；4）脱色除味；5）精炼；6）喷雾干燥，灭菌制成成品；所述脱色除味是用经过预处理的大孔树脂过滤。

在上述方案的基础上进一步的技术方案是：

所述大豆肽生产方法，所述液体酶解步骤中，所加入胰蛋酶的量为每克发酵豆粕添加30-800U的胰蛋白酶；酶解温度是45－65℃，酶解液pH7.8-9.0,酶解时间为1－8小时。

所述大豆肽生产方法，所述高温灭酶是在保温酶解后，升温至70－80℃，维持15-35分钟。

所述大豆肽生产方法，所述过滤是通过板框过滤机去除酶解液中的固体杂质，从而得到大豆肽粗滤液。

所述大豆肽生产方法，所述脱色除味是将大豆粗滤液按1－5ml/min的洗脱流速通过大孔树脂脱色除味，得到大豆肽清液。

所述大豆肽生产方法，大孔树脂选自于为AB-8，或DM-130，或D101类型的树脂。

所述大豆肽生产方法，所述精炼是将大豆肽清液用超滤膜按分子量进行分级分离，得到不同分子量和不同功能大豆肽溶液；截留分子量分别为：200Da，或1000Da，或5000Da，或8000Da。

所述大豆肽生产方法，所述喷雾干燥是在干燥器中将不同分子量的大豆肽溶液在0.08－0.15mpa压力条件下进行喷雾干燥，干燥中，进口温度130－140℃，干燥器内温度102－110℃，出口温度75－90℃，经灭菌最终获得粉状大豆肽产品。

一种用于大豆肽生产方法中的脱色除味的大孔树脂的预处理方法，其大孔树脂选自于AB-8，或DM-130，或D101类型的树脂，预处理步骤是：先将树脂用10%NaCl溶液浸泡24小时，充分溶胀后，除去上浮的树脂碎片；然后，经水洗后湿法半流体装柱，以免混入气泡；再用95%乙醇冲洗至流出液，加适量水无白色浑浊出现为止；再用去离子水洗去乙醇，去醇后再用3%HCl(V/V)冲洗, 最后用去离子水洗至中性，烘干备用。

本发明优点是：克服了现有技术的不足，提供一种利用发酵豆粕作为原料，生产大豆多肽。从而1）以发酵豆粕为原料，消除了原料中的蛋白酶抑制剂；2)可以完成对豆粕中大豆蛋白质的预水解的；3）大量减少了外加酶的量，有效的降低了成本、获得较高的水解率。

具体实施方式

实施例1: 一种大豆肽生产方法，它是以发酵豆粕为原料，其工艺步骤为：1）液体酶解：将发酵豆粕与水按重量比为1:4－8混合，加入胰蛋白酶，保温酶解；2）高温灭酶；3）过滤：将酶解液过滤分离得到大豆蛋白粗品；4）脱色除味；5）精炼；6）喷雾干燥，灭菌制成成品；所述脱色除味是用经过预处理的大孔树脂过滤。具体是：

1）液体酶解：取发酵豆粕原料300公斤,按发酵豆粕与水重量比为1:8混合，加入胰蛋白酶，所加入胰蛋酶的量为每克发酵豆粕添加30-800U的胰蛋白酶；酶解温度是45－65℃，酶解液pH7.8-9.0,酶解时间为1－8小时，本实施例酶的加入量为每克干料加入650U的酶酶解温度55℃，酶解液pH8.5，酶解5小时；

2）高温灭酶：在保温酶解后，升温至70－80℃，维持15-35分钟，本实施例升温至75℃，维持30分钟；

3）过滤：通过板框过滤机去除酶解液中的固体杂质，从而得到大豆肽粗滤液；

4）脱色除味：将大豆粗滤液按1－5ml/min的洗脱流速通过大孔树脂脱色除味，得到大豆肽清液；本实施例将大豆肽粗液按5ml/min的流速通过活化后的大孔树脂；大孔树脂选自于为AB-8，也可以选DM-130，或D101类型的树脂

5) 精炼：是将大豆肽清液用超滤膜按分子量进行分级分离，得到不同分子量和不同功能大豆肽溶液；截留分子量分别为：200Da，或1000Da，或5000Da，或8000Da；本实施例用超滤膜按分子量进行分级分离，截留分子量分别为： 1000Da，也可为200Da，或5000Da，或8000Da

6）喷雾干燥：是在干燥器中将不同分子量的大豆肽溶液在0.08－0.15mpa压力条件下进行喷雾干燥，干燥中，进口温度130－140℃，干燥器内温度102－110℃，出口温度75－90℃，经灭菌最终获得粉状大豆肽产品。本实施例在0.08mpa压力条件下进行喷雾干燥，干燥中，进口温度130℃，干燥器内温度102℃，出口温度75℃。

实施例2:与上述实施例1不同的是：1)取发酵豆粕原料150公斤,发酵豆粕与水重量比为1:1所加入胰蛋酶的量为每克发酵豆粕添加30U的胰蛋白酶；酶解温度45℃、pH 7.8，酶解7小时；2) 高温灭酶：在保温酶解后，升温至70℃，维持35分钟；4) 将大豆肽粗液按1ml/min的流速通过活化后的大孔树脂；大孔树脂选自于为DM-130，也可以选AB-8，或D101类型的树脂；用超滤膜按分子量进行分级分离，截留分子量分别为：5000Da，也可为200Da，或1000Da，或8000Da。

实施例3: 与上述实施例1不同的是：取发酵豆粕原料350公斤,发酵豆粕与水重量比为1:6所加入胰蛋酶的量为每克发酵豆粕添加800U的胰蛋白酶；酶解温度65℃、pH 9，酶解6小时；2）高温灭酶：在保温酶解后，升温至80℃，维持15-20分钟；将大豆肽粗液按3ml/min的流速通过活化后的大孔树脂；大孔树脂选自于为D101，也可以选AB-8，或D101类型的树脂；用超滤膜按分子量进行分级分离，截留分子量分别为：200Da，也可为1000Da，或5000Da，或8000Da。

实施例4: 与上述实施例1不同的是：取发酵豆粕原料200公斤,发酵豆粕与水重量比为1:7所加入胰蛋酶的量为每克发酵豆粕添加500U的胰蛋白酶；酶解温度50℃、pH 9，酶解5小时；2）高温灭酶：在保温酶解后，升温至76℃，维持15-15分钟；将大豆肽粗液按4ml/min的流速通过活化后的大孔树脂；大孔树脂选自于为DM-130，也可以选AB-8，或D101类型的树脂，用超滤膜按分子量进行分级分离，截留分子量分别为： 8000Da，也可为200Da，或1000Da，或5000Da。

实施例5：一种用于大豆肽生产方法中的脱色除味的大孔树脂的预处理方法，其大孔树脂选自于AB-8，也可以是DM-130，或D101类型的树脂，预处理步骤是：先将树脂用10%NaCl溶液浸泡24小时，充分溶胀后，除去上浮的树脂碎片；然后，经水洗后湿法半流体装柱，以免混入气泡；再用95%乙醇冲洗至流出液，加适量水无白色浑浊出现为止；再用去离子水洗去乙醇，去醇后再用3%HCl(V/V)冲洗, 最后用去离子水洗至中性，烘干备用。

本发明的权利要求保护范围不限于上述实施例。

Claims

1.一种大豆肽生产方法，其特征在于，以发酵豆粕为原料，其工艺步骤包括：1）液体酶解：将发酵豆粕与水按重量比为1:4－8混合，加入胰蛋白酶，保温酶解；2）高温灭酶；3）过滤：将酶解液过滤分离得到大豆蛋白粗品；4）脱色除味；5）精炼；6）喷雾干燥，灭菌制成成品；所述脱色除味是用经过预处理的大孔树脂过滤。

2.根据权利要求1所述大豆肽生产方法，其特征在于，所述液体酶解步骤中，所加入胰蛋酶的量为每克发酵豆粕添加30-800U的胰蛋白酶；酶解温度是45－65℃，酶解液pH7.8-9.0,酶解时间为1－8小时。

3.根据权利要求1所述大豆肽生产方法，其特征在于，所述高温灭酶是在保温酶解后，升温至70－80℃，维持15-35分钟。

4.根据权利要求1所述大豆肽生产方法，其特征在于，所述的过滤是通过板框过滤机去除酶解液中的固体杂质，从而得到大豆肽粗滤液。

5.根据权利要求1所述大豆肽生产方法，其特征在于：所述的脱色除味是将大豆粗滤液按1-5ml/min的洗脱流速通过大孔树脂脱色除味，得到大豆肽清液。

6.根据权利要求5所述大豆肽生产方法，其特征在于，所述的大孔树脂选自于为AB-8，或DM-130，或D101类型的树脂。

7.根据权利要求1所述大豆肽生产方法，其特征在于：所述的精炼是将大豆肽清液用超滤膜按分子量进行分级分离，得到不同分子量和不同功能大豆肽溶液；截留分子量分别为：200Da，或1000Da，或5000Da，或8000Da。

8.根据权利要求1所述大豆肽生产方法，其特征在于：所述喷雾干燥是在干燥器中将不同分子量的大豆肽溶液在0.08－0.15mpa压力条件下进行喷雾干燥，干燥中，进口温度130－140℃，干燥器内温度102－110℃，出口温度75－90℃，经灭菌最终获得粉状大豆肽产品。

9.一种用于权利要求1所述大豆肽生产方法中的脱色除味的大孔树脂的预处理方法，其特征在于，大孔树脂选自于AB-8，或DM-130，或D101类型的树脂，预处理步骤是：先将树脂用10%NaCl溶液浸泡24小时，充分溶胀后，除去上浮的树脂碎片；然后，经水洗后湿法半流体装柱，以免混入气泡；再用95%乙醇冲洗至流出液，加适量水无白色浑浊出现为止；再用去离子水洗去乙醇，去醇后再用3%HCl(V/V)冲洗, 最后用去离子水洗至中性，烘干备用。