CN102079765B

CN102079765B - 9-o-糖苷-小檗碱盐及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN102079765B
Application number: CN 201010589543
Authority: CN
Inventors: 袁吕江; 叶小利; 李学刚
Original assignee: Southwest University
Current assignee: Southwest University
Priority date: 2010-12-15
Filing date: 2010-12-15
Publication date: 2013-03-20
Anticipated expiration: 2030-12-15
Also published as: CN102079765A

Abstract

本发明属于化学与药学领域，涉及具有下述通式的9-O-糖苷-小檗碱盐，其中R为单糖基或双糖基，X^-为卤素离子；还涉及该9-O-糖苷-小檗碱盐的制备方法，先将小檗碱转化为小檗红碱，再与全乙酰卤代糖反应制得9-O-全乙酰糖苷-小檗碱，最后在碱性条件下反应脱去乙酰基制得9-O-糖苷-小檗碱盐；本发明的9-O-糖苷-小檗碱盐相比小檗碱盐具有更强的抗菌、降血脂、降血糖活性，且其备方法简便易行、产率高、成本低，可作为有效成分用于制备高效、安全的新型抗菌、降血脂、降血糖药物，具有良好的应用前景。

Description

9-O-糖苷-小檗碱盐及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于化学和药学领域，涉及一种小檗碱衍生物，特别涉及9-O-糖苷-小檗碱盐，还涉及该衍生物的制备方法和应用。

背景技术

小檗碱（Berberine），又称黄连素，是从黄连中提取的一种天然抗菌物质，临床上主要用于治疗肠道细菌性感染。近年来的药理研究发现，小檗碱不仅具有抗菌活性，还具有降血脂、降血糖等多种药理活性。构效关系研究结果表明，小檗碱分子中的8-位被烷基或苯基取代或12-位被溴取代后，其抗菌活性变化显著。但到目前为止，国内外尚未见有关小檗碱糖苷衍生物及其药理活性的研究报道。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种小檗碱糖苷衍生物，与小檗碱相比具有更强的抗菌、降血脂、降血糖等药理活性。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

具有下述通式的9-O-糖苷-小檗碱盐：

其中，R为单糖基或双糖基，X^-为卤素离子。

进一步，所述R为葡萄糖基、甘露糖基、麦芽糖基、乳糖基、半乳糖基、果糖基、木糖基或阿拉伯糖基。

进一步，所述R为葡萄糖基、甘露糖基、麦芽糖基、乳糖基、半乳糖基或果糖基。

进一步，所述X^-为氯离子、溴离子或碘离子。

进一步，所述9-O-糖苷-小檗碱盐为下述化合物中的任一种：9-O-葡萄糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-葡萄糖苷-小檗碱氯酸盐，9-O-葡萄糖苷-小檗碱碘酸盐，9-O-甘露糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-麦芽糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-乳糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-半乳糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-果糖苷-小檗碱溴酸盐。

进一步，所述9-O-糖苷-小檗碱盐为下述化合物中的任一种：9-O-葡萄糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-甘露糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-麦芽糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-乳糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-果糖苷-小檗碱溴酸盐。

本发明的目的之二在于提供所述小檗碱糖苷衍生物的制备方法，操作简便易行，产率高，成本低。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

9-O-糖苷-小檗碱盐的制备方法，包括以下步骤：先将小檗碱转化为小檗红碱，再与全乙酰卤代糖反应制得9-O-全乙酰糖苷-小檗碱，最后在碱性条件下反应脱去乙酰基制得9-O-糖苷-小檗碱盐。

本发明的目的之三在于提供所述小檗碱糖苷衍生物在制药方面的应用，从而为疾病的临床治疗提供更多高效、安全的备选药物，以满足临床治疗的多方面需求。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

所述9-O-糖苷-小檗碱盐在制备抗菌药物中的应用。

所述9-O-糖苷-小檗碱盐在制备降血脂药物中的应用。

所述9-O-糖苷-小檗碱盐在制备降血糖药物中的应用。

本发明的有益效果在于：本发明提供了一种小檗碱糖苷衍生物即9-O-糖苷-小檗碱盐，该衍生物与小檗碱盐相比具有更强的抗菌、降血脂、降血糖等药理活性，且制备方法简便易行、产率高、成本低，可作为有效成分单独应用或与其它具有药理活性的化合物和/或提取物组成复方应用，并与药学上可接受的载体按照药学领域的常规方法制成各种剂型（如片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、口服液、糖浆或注射液等）的抗菌药物、降血脂药物或降血糖药物，为感染疾病、高血脂、糖尿病等的临床治疗提供更多高效、安全的备选药物，满足临床治疗的多方面需求。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本发明的优选实施例进行详细的描述。

实施例1、9-O-糖苷-小檗碱盐的制备

包括以下步骤：

a、小檗红碱的制备：称取小檗碱0.11 mol，升温至180℃保温搅拌反应1小时，获得小檗红碱0.1 mol；

b、9-O-乙酰糖苷-小檗碱的制备：将小檗红碱2mmol溶解于N,N-二甲基甲酰胺（DMF）20 mL中，在搅拌条件下加入无水碳酸钾（作为缚酸剂）20mmol，降温至0℃，缓慢滴加全乙酰卤代糖的氯仿溶液20mL，滴加完毕后，室温搅拌反应，用薄层色谱法检测反应进程，反应完毕后，将反应液过滤，滤液经水洗后用氯仿萃取，收集氯仿萃取液，减压蒸馏去除溶剂，残余物干燥，获得9-O-乙酰糖苷-小檗碱；

c、9-O-糖苷-小檗碱的制备：将9-O-乙酰糖苷-小檗碱1mmol溶解于甲醇10 mL中，升温至40℃，缓慢滴加浓度为2.5mol/L的碳酸氢钠溶液1mL，滴加完毕后，40℃保温搅拌反应，用薄层色谱法检测反应进程，反应完毕后，将反应液过滤，滤液用无水硫酸钠干燥后，减压浓缩至糖浆状，再溶于甲醇中冷藏放置，即得颗粒状结晶化合物9-O-糖苷-小檗碱，用核磁共振（NMR）确证化学结构。

总的化学反应式如下：

部分9-O-糖苷-小檗碱盐的制备情况见表1。

表1、部分9-O-糖苷-小檗碱盐的制备情况

9-O-糖苷-小檗碱盐的结构表征数据如下：淡黄色粉末，熔点155℃；¹H NMR(DMSO-d6, 500MHz) δ(ppm)：7.807 (1H, H-1), 7.092 (1H, H-4), 3.151~3.246 (2H, H-5, 被DMSO峰掩盖), 4.888~4.912 (2H, H-6), 9.717 (1H, H-8), 8.148 (1H, H-11), 7.807 (1H, H-12), 8.995 (1H, H-13), 6.168 (2H, 2,3-OCH₂O), 4.148~4.167 (3H, 9-OCH₃), 1.603~2.601 (12H, 2’,3’,4’,6’-OAc), 5.424 (2H, 6’-CH₂)；¹³C NMR δ(ppm)：146.530, 145.405, 132.735, 130.179, 125.345, 123.831, 118.564, 112.251, 86.584, 68.716, 64.367, 63.256, 59.874, 59.572, 55.733, 46.057, 43.528, 31.821, 31.311, 28.586, 28.586, 26.130, 22.178, 21.804, 14.092。

实施例2、9-O-糖苷-小檗碱盐的抗菌活性

采用液体培养基连续稀释法测定9-O-糖苷-小檗碱盐的最小抑菌浓度（MIC）：将9-O-糖苷-小檗碱盐用水溶解制成浓度为1000 ppm/mL的溶液，再用MH肉汤按体积比为1∶2、1∶4、1∶8、：1∶16、1∶32、1∶64、1∶128、1∶256、1∶512、1∶1024、1∶2048、1∶4096、1∶8192进行倍半稀释，另设对照管1（加入小檗碱盐酸盐）和对照管2（不加入任何药物）；每个试验管加入10⁸cfu/mL的试验菌液（金黄色葡萄球菌ATCC25923或大肠杆菌）0.05 mL，混匀后置37℃培养24小时，观察结果。

部分9-O-糖苷-小檗碱盐的抗菌实验结果见表2。由表可知，9-O-糖苷-小檗碱盐的抗菌活性明显优于小檗碱盐酸盐。

表2、部分9-O-糖苷-小檗碱盐的MIC（mg/mL）

实施例3、9-O-糖苷-小檗碱盐的降血脂活性

取体重150~220 g 的健康成年雄性Wistar大鼠200只，随机分为20组：正常对照组（10只）、模型对照组（10只）、小檗碱盐组（30只）和5个9-O-糖苷-小檗碱盐组（每组30只）；首先，各组大鼠在实验环境下喂饲基础饲料观察5~10天，取尾血测定血清总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）水平；其次，除正常对照组以外的各组换用高脂饲料（按质量百分比计由78.8%基础饲料、1%胆固醇、10%蛋黄粉、10%猪油和0.2%胆盐组成）喂饲7~10天，再次取尾血测定血清TC和TG水平，通过与喂饲高脂饲料前的血清TC和TG水平比较，确定高脂血症模型构建成功；再次，小檗碱盐组和9-O-糖苷-小檗碱盐组在给予高脂饲料的同时分别按照5 mg/kg、15 mg/kg、30 mg/kg的剂量灌胃小檗碱盐酸盐或9-O-糖苷-小檗碱盐（每种剂量10只），模型对照组灌胃等量生理盐水，连续给药30天，末次给药后禁食16小时，取尾血测定血清TC和TG水平。

部分9-O-糖苷-小檗碱盐的降血脂实验结果见表3-4。由表可知，9-O-糖苷-小檗碱盐的降血脂活性明显优于小檗碱盐酸盐。

表3、部分9-O-糖苷-小檗碱盐的血清TC水平

表4、部分9-O-糖苷-小檗碱盐的血清TG水平

实施例4、9-O-糖苷-小檗碱盐的降血糖活性

取昆明小鼠200只，随机分为20组：正常对照组（10只）、模型对照组（10只）、小檗碱盐组（30只）和5个9-O-糖苷-小檗碱盐组（每组30只）；正常对照组正常饲养，除正常对照组以外的各组按200 mg/kg的剂量注射四氧嘧啶建立糖尿病模型，48小时后，小檗碱盐组和9-O-糖苷-小檗碱盐组分别按照5 mg/kg、15 mg/kg、30 mg/kg的剂量灌胃小檗碱盐酸盐或9-O-糖苷-小檗碱盐（每种剂量10只），模型对照组灌胃等量生理盐水，连续给药30天后测定血糖。

部分9-O-糖苷-小檗碱盐的降血糖实验结果见表5。由表可知，9-O-糖苷-小檗碱盐的降血糖活性明显优于小檗碱盐酸盐。

表5、部分9-O-糖苷-小檗碱盐的血糖水平

实施例5、9-O-葡萄糖苷-小檗碱盐片的制备

称取9-O-葡萄糖苷-小檗碱盐10 g、球粒状乳糖70 g、硬脂酸镁15 g和微晶纤维素5 g，按照片剂常规制备方法制得9-O-葡萄糖苷-小檗碱盐片200片，每片含9-O-葡萄糖苷-小檗碱盐50 mg。

实施例6、9-O-半乳糖苷-小檗碱盐口服液的制备

称取9-O-半乳糖苷-小檗碱盐10 g、吐温-80 5 g和甜菊糖1 g，加水溶解并稀释至1000 mL，按照口服液常规制备方法制得9-O-半乳糖苷-小檗碱盐口服液200支，每支含9-O-半乳糖苷-小檗碱盐50 mg。

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过参照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述，但本领域的普通技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。

Claims

1.具有下述通式的9-O-糖苷-小檗碱盐：

其中，R为单糖基或双糖基，X^-为卤素离子。

2. 根据权利要求1所述的9-O-糖苷-小檗碱盐，其特征在于：所述R为葡萄糖基、甘露糖基、麦芽糖基、乳糖基、半乳糖基、果糖基、木糖基或阿拉伯糖基。

3. 根据权利要求2所述的9-O-糖苷-小檗碱盐，其特征在于：所述R为葡萄糖基、甘露糖基、麦芽糖基、乳糖基、半乳糖基或果糖基。

4. 根据权利要求1所述的9-O-糖苷-小檗碱盐，其特征在于：所述X^-为氯离子、溴离子或碘离子。

5. 根据权利要求1至4任一权利要求所述的9-O-糖苷-小檗碱盐，其特征在于：为下述化合物中的任一种：9-O-葡萄糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-葡萄糖苷-小檗碱氯酸盐，9-O-葡萄糖苷-小檗碱碘酸盐，9-O-甘露糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-麦芽糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-乳糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-半乳糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-果糖苷-小檗碱溴酸盐。

6. 根据权利要求5所述的9-O-糖苷-小檗碱盐，其特征在于：为下述化合物中的任一种：9-O-葡萄糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-甘露糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-麦芽糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-乳糖苷-小檗碱溴酸盐，9-O-果糖苷-小檗碱溴酸盐。

7. 权利要求1所述的9-O-糖苷-小檗碱盐的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：先将小檗碱转化为小檗红碱，再与全乙酰卤代糖反应制得9-O-全乙酰糖苷-小檗碱，最后在碳酸氢钠碱性条件下反应脱去乙酰基制得9-O-糖苷-小檗碱盐。

8. 权利要求1所述的9-O-糖苷-小檗碱盐在制备抗菌药物中的应用。

9. 权利要求1所述的9-O-糖苷-小檗碱盐在制备降血脂药物中的应用。

10. 权利要求1所述的9-O-糖苷-小檗碱盐在制备降血糖药物中的应用。