CN109053836B - 木犀草素7-o-琥珀酰葡糖苷和芹菜素-7-o-琥珀酰葡糖苷及其应用 - Google Patents

木犀草素7-o-琥珀酰葡糖苷和芹菜素-7-o-琥珀酰葡糖苷及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了以下式(1)所述的木犀草素‑7‑O‑琥珀酰葡萄糖苷(7‑SGL)和芹菜素‑7‑O‑琥珀酰葡萄糖苷(7‑SGA)及药学上可接受的盐为活性成分的药物，及其在制备脑神经保护药物方面的应用，特别涉及两种7位琥珀酰黄酮苷及药学上可接受的盐在制备神经保护药物方面的应用，属于医药技术领域。本发明所提供的木犀草素‑7‑O‑琥珀酰葡萄糖苷(7‑SGL)和芹菜素‑7‑O‑琥珀酰葡萄糖苷(7‑SGA)作为新型的黄酮糖苷衍生物(区别于已报道的异黄酮类、二氢黄酮类化合物)具有水溶性高、毒性低、生物相容性好，尤其是在治疗脑神经性疾病方面具有显著疗效，为神经性疾病提供了新的药物选择。
Figure DDA0001764762540000011

Description

木犀草素7-O-琥珀酰葡糖苷和芹菜素-7-O-琥珀酰葡糖苷及 其应用
技术领域
本发明属于医药技术领域，涉及一种木犀草素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGL)与芹菜素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGA)及药学上可接受的盐在制备心血管疾病药物方面的应用，特别涉及一种7-SGL(7-SGA)及药学上可接受的盐在制备抗脑缺血药物方面的应用。
背景技术
黄酮类化合物(flavonoids compounds)是植物次生代谢产物，广泛地存在于自然植物中，以游离态或与糖结合为苷的形式存在，不仅数量种类繁多，而且结构类型复杂多样，表现出多种多样的药理活性，能防治心脑血管系统的疾病和呼吸系统的疾病，具有抗炎抑菌、降血糖、抗氧化、抗辐射、抗癌、抗肿瘤以及增强免疫能力等药理作用。近年来，黄酮类化合物的研究进入了一个新的层次，随着对其构效关系的深入研究，发现了部分药理作用的作用机制，为其在医药、食品领域的应用提供了理论依据，加快了黄酮类化合物的开发利用。目前已报道的绝大多数黄酮类(大类)化合物水溶性偏低、细胞毒性较强，极大地限制了其在医药行业及工业开发上的应用。因此开发高水溶性、低毒的黄酮类化合物具有显著意义。
木犀草素及芹菜素均是黄酮苷元，两者均显示了广泛的药理活性；然而，两者的水溶性极低，细胞毒性极强，因此两者的药理活性均仅停留在纸面上，目前尚未有关于木犀草素或芹菜素相关创新药物被开发。因此，开发新型的高水溶性、低毒的木犀草素及芹菜素衍生物具有显著意义。
广义上的黄酮类化合物(大类)可分为以下几类：黄酮(小类)、二氢黄酮(黄烷酮)、异黄酮、二氢异黄酮、查尔酮、二氢查尔酮……等。目前，已报道多种高水溶性黄酮类(大类)化合物的合成与药理活性研究，在新药开发上显示了较为理想的应用前景：主要包括异黄酮衍生物(Journal of agriculture and food chemistry,2006,54,3819-3826；FoodScience and Biotechnology,2008,17(1):172-175；Biotechnology and appliedbiochemistry,2015,62(2):255-259)及二氢黄酮衍生物(natural product research,DOI:10.1080/14786419.2018.1431633)等；该类化合物(上述的高水溶性异黄酮衍生物及二氢黄酮衍生物)在抗骨质疏松、抗菌、抗心肌缺血等方面显示了较好的疗效，然而药理结果显示，其在脑神经保护方面活性一般。如何开发高水溶性、低毒的、具有神经保护作用的木犀草素(或芹菜素)衍生物是本发明的关键所在。
发明内容
本发明要解决的技术问题提供一种木犀草素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGL)和芹菜素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGA)，及其在制备治疗心血管疾病药物方面的应用。
为解决本发明的技术问题，本发明的技术方案是：一种7-SGL(和7-SGA)，所述的7-SGL(和7-SGA)具有下式(1)所示的结构：
Figure BDA0001764762520000021
为解决本发明的技术问题，本发明的另一技术方案是：一种治疗脑神经疾病药物，包括活性成分为式(1)所示的7-SGL(和7-SGA)，以及药学上可接受的药用辅料。
优选的，包括活性成分为式(1)所示的7-SGL(和7-SGA)或其盐，以及药学上可接受的药用辅料组合制成临床适用的片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂。
优选的，7-SGL(和7-SGA)盐指7-SGL(和7-SGA)与盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、马来酸、烷基或芳基磺酸形成的盐。
为解决本发明的技术问题，本发明的另一技术方案是：所述的7-SGL和7-SGA在制备心血管疾病药物的用途，所述脑神经性疾病包括头痛、神经衰弱、脑梗塞、脑缺血、心力衰竭以及神经功能紊乱。
优选的，所述脑神经疾病为脑缺血。
本发明所述式(1)化合物，由具有7-O琥珀酰糖苷化功能的菌种，例如解淀粉芽孢杆菌FJ18(保藏编号为CCTCC NO：M2016272),在非水相中制备7-SGL与7-SGA而得，反应化学式见下式：
Figure BDA0001764762520000031
合成方法为：以芹菜素/木犀草素和糖基供体为原料，在解淀粉芽孢杆菌FJ18的催化作用下，芹菜素/木犀草素7位酚羟基发生琥珀酰糖基化反应，形成7-SGL/7-SGA。具体分为以下步骤：
步骤(1)：将解淀粉芽孢杆菌FJ18，进行常规培养、发酵，发酵液过滤获得湿菌体；
步骤(2)：以芹菜素/木犀草素和糖基供体为原料，用磷酸缓冲溶液及非水相溶剂配制得到原料溶液；
步骤(3)：将步骤(1)湿菌体或用载体固定化后的湿菌体加入到步骤(2)的溶液中进行催化反应。
所述的磷酸缓冲溶液浓度为10～150mmol/L，pH为8.0。所述的原料溶液，其组分中，芹菜素/木犀草素的浓度为0.01～2g/L，糖基供体的溶液浓度为5～50g/L，非水相溶剂体积百分比为5～20％。所述的非水相溶剂选自甲醇、乙醇、乙腈、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、丙酮中的任意一种。所述的非水相溶剂为二甲基亚砜或乙醇。所述的糖基供体选自麦芽糖、乳糖、蔗糖、葡萄糖、糊精中的任意一种。所述的糖基供体为蔗糖或葡萄糖。
本发明所述7-SGL与7-SGA作为两种新化合物，此前未有报道。
神经保护实验方法：本发明研究7-SGL(和7-SGA)对小鼠海马神经元细胞HT22细胞OGD/R损伤的保护作用，以此来验证式(1)所述的7-SGL(和7-SGA)及药学上可接受的盐在制备心血管疾病药物方面的应用，尤其是在脑缺血疾病中的应用。方法为选取对数生长期的HT22细胞，调整细胞密度为4×104/mL，每孔100uL接种于96孔板，置5％CO2的恒温培养箱于37℃培养至细胞贴壁，分为三组：模型组(OGD/R)、正常组(Normal，NA)和药物组，其中根据预实验筛选结果，药物组设置三组浓度，分别为1μM、5μM、10μM，造模前24小时及造模过程中给药。模型组和药物组按照2.1项方法进行造模，正常组使用正常培养基，置5％CO2的恒温培养箱于37℃培养，待模型组和药物组建立氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤模型后，每孔加入20uL MTT(5mg/mL)，置5％CO2恒温培养箱中于37℃避光孵育4小时，小心吸弃上清液，每孔加入150uL DMSO溶液，摇床低速振荡20min，使其溶解，使用酶标仪在492nm处检测OD值(A)。此外另设空白对照组，不加细胞，其余操作和正常组或模型组相同。实验中96孔板周围一圈用无菌PBS填充以防止边缘效应。计算细胞存活率。
细胞存活率(％)＝(模型组A或药物组A-空白对照组)/(正常组A-空白对照组)×100％
与正常组相比，实验中建立的氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤模型导致了细胞大量死亡(p<0.001),并且模型组的存活率达50％，该方法符合建立模型标准；与模型组相比，在1、5、10μM 7-SGL(7-SGA)的干预下，HT22细胞存活率有显著提升(p<0.001)。7-SGL与7-SGA对小鼠海马神经元HT22细胞具有显著的保护作用，且保护机制明晰。
水溶性实验方法：在HPLC上建立标曲，37℃下分别测定木犀草素、木犀草素-7-O-琥珀酰葡糖苷(7-SGL)、芹菜素、芹菜素-7-O-琥珀酰葡糖苷(7-SGA)饱和水溶液的溶解度。
实验结果：木犀草素水溶性为0.010g/L,7-SGL水溶性为11.34g/L；芹菜素水溶性为0.005g/L，7-SGA水溶性为0.967g/L。
结果表明，相比于原型木犀草素，7-SGL的水溶性提高了约1134倍；相比于原型芹菜素，7-SGA的水溶性提高了约174倍。
细胞毒性实验方法：采用MTT分析实验，选用小鼠正常海马神经元细胞HT22为研究对象(因为7-SGA和7-SGL神经保护活性显著)，选择木犀草素、7-SGL、芹菜素、7-SGA等4个待测化合物，每个化合物选择三个待测计量(0.022,0.066,0.200μM)。HT22细胞与待测化合物共培养24小时后，加入20μL MTT溶液，37℃下共孵育4h。490nm下测定细胞活力。
实验结果：在中高剂量(0.066,0.2μM)下，原型药物木犀草素和芹菜素均HT22细胞显示了较强的抑制作用，其中木犀草素的抑制作用更强；而7-SGL和7-SGA在各种测试剂量下均未显示抑制作用，同时还对HT22细胞显示了一定的保护作用。
有益效果：
1.本发明提供了一种新化合物即式(1)所述的7-SGL与7-SGA；
2.本发明所提供的7-SGL与7-SGA作为新型的黄酮糖苷衍生物具有水溶性高、细胞毒性低，且在在脑神经疾病尤其是脑缺血疾病方面具有显著疗效，为脑神经疾病提供了新的药物选择。
附图说明
图1是木犀草素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGL)的1H NMR谱图。
图2是木犀草素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGL)的13C NMR谱图。
图3是木犀草素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGL)的HMBC谱图。
图4是芹菜素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGA)的1H NMR谱图。
图5是芹菜素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGA)的13C NMR谱图。
图6是芹菜素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGA)的HMBC谱图。
图7是7-SGL(7-SGA)显著增加造模小鼠海马神经元HT-22细胞存活率。
图8是7-SGL(7-SGA)的起效机制(HO-1、NRF2及Keap1的表达和定位)。
图9是木犀草素、7-SGL、芹菜素、7-SGA对正常小鼠海马神经元HT-22细胞存活率影响。
具体实施方式
为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明优选实施方案进行描述，但是应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点，而不是对本发明权利要求的限制。
实施例1
解淀粉芽孢杆菌FJ18的发酵及静息细胞的制备
将冻存的解淀粉芽孢杆菌FJ18菌种的发酵接种到种子培养基中：酵母膏5.0g/L，蛋白胨10.0g/L，NaCl 10.0g/L，pH 7.0，于30℃，200rpm培养12小时。扩大培养基、发酵培养基，其组分和含量均为：蔗糖20g/L，酵母粉15g/L.KH2PO41.0g/L，CaCl2 0.8g/L。以NaOH调节pH至8.0。种子液按0.5％(v/v)接种到扩大培养基、发酵培养基，于30℃，200rpm培养12小时。10000rpm离心15分钟后收集菌体细胞，以生理盐水洗涤l～2次，得解淀粉芽孢杆菌FJ18的静息细胞。
实施例2
将实施例2中的菌体细胞发酵液过滤，得到湿菌体。以二甲基亚砜、木犀草素(或芹菜素)、蔗糖、磷酸缓冲配置原料溶液，即反应溶液。反应溶液中有机溶剂二甲基亚砜的比例为20％(v/v)，芹菜素/木犀草素1g/L，磷酸缓冲的摩尔浓度为150mmol/L，磷酸缓冲的pH8.0，蔗糖浓度为50g/L。将上述所得的湿菌体分散于反应溶液中，加入到反应器中，于30℃，200rpm条件下培养24h后，10000rpm离心10分钟得反应溶液上清，HPLC检测分析测得木犀草素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGL)及芹菜素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGA)转化率均>95％。
产物用大孔树脂进行分离，取适量树脂，用乙醇浸泡24h后，除去树脂碎片和杂物。湿法装柱
Figure BDA0001764762520000062
用1L乙醇冲洗，再用蒸馏水洗至无醇味；接行酸碱处理，即先后用体积分数5％的HCl溶液与质量分数2％的NaOH溶液分别以2BV/h流速通过树脂柱，并静止置2～4h后，用蒸馏水洗至pH值中性。为避免DMSO溶解转化产物降低上样吸附率，所以转化液用5倍体积的去离子水(pH4.0，冰醋酸调节)稀释至DMSO<2％后加样。加样量20mg/g湿树脂，加样流速20mL/min。用10倍柱床体积的去离子水(pH4.0，冰醋酸调节)淋洗过量未反应的糖基供体(蔗糖)，直到洗脱液用浓硫酸检测不出糖为止，流速20mL/min。选用甲醇加去离子水作流动相进行洗脱，调整甲醇和去离子水的体积比，在洗脱流速20mL/min时，确定洗脱液中甲醇比例。浓缩干燥：经HPLC检测，合并洗脱液，用旋转蒸发仪对其减压真空浓缩，加热温度40℃。最后将固体置于真空干燥箱中，40℃干燥6h。
解淀粉芽孢杆菌FJ18非水相中制备7-SGL与7-SGA的反应化学式见下式：
Figure BDA0001764762520000061
经核磁共振质谱分析鉴定从NMR图谱上看，获得的结构与预期产物的结构一致。以上结果证实该反应中生成了两种新型的黄酮7-O-琥珀酰葡萄糖苷衍生物。其中木犀草素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGL)的核磁共振波谱数据为：
1H-NMR(DMSO-d6,400MHz)δ：7.32-7.41(2H,m,2'and 6'-H),6.84(1H,d,J＝8.4Hz,5'-H),6.71(1H,d,J＝2.4Hz,8-H),6.68(1H,s,3-H),6.38(1H,d,J＝2Hz,6-H),5.04(1H,d,J＝7.2Hz,1”-H)，4.32(1H,d,J＝10.4Hz,6”-HA),3.95-4.14(1H,m,6”-HB),3.62-3.73(1H,m,2”-H),3.18-3.30(2H,m,3”and 5”-H),3.05-3.15(1H,m,4”-H),2.46-2.55(2H,m,2”'-H),2.30-2.38(2H,m,3”'-H).
13C-NMR(DMSO-d6,400MHz)δ：181.9(C-4),173.2(C-4”),172.0(C-1”'),164.5(C-2),162.6(C-7),161.1(C-5),156.9(C-9),149.9(C-4'),145.8(C-3'),121.4(C-1'),119.1(C-6'),115.9(C-5'),113.5(C-2'),105.4(C-10),103.2(C-3),99.6(C-1”),99.5(C-6),94.6(C-8),76.1(C-3”),73.9(C-2”),73.0(C-5”),69.8(C-4”),63.6(C-6”),28.5(C-2”',C-3”').
芹菜素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGA)的核磁共振波谱数据为：
1H-NMR(DMSO-d6,400MHz)δ：7.96(2H,d,J＝8.8Hz,2'and 6'-H),6.95(2H,d,J＝8.8Hz,3'and 5'-H)，6.87(1H,s,3-H)，6.83(1H,d,J＝2Hz,8-H)，6.46(1H,d,J＝2Hz,6-H),5.12(1H,d,J＝7.2Hz,1”-H)，4.43(1H,d,J＝10.4Hz,6”-HA),4.04-4.15(1H,m,6”-HB),3.70-3.85(1H,m,5”-H),3.30-3.45(2H,m,2”and 3”-H),3.15-3.30(1H,m,4”-H),2.50-2.65(2H,m,2”'-H),2.35-2.0(2H,m,3”'-H).
13C-NMR(DMSO-d6,400MHz)δ：182.0(C-4),173.2(C-4”),172.0(C-1”'),164.3(C-2),162.6(C-7),161.3(C-5),161.1(C-4'),156.9(C-9),128.5(C-2',C-6'),121.0(C-1'),115.9(C-3',C-5'),105.4(C-10),103.1(C-3),99.6(C-1”,C-6),94.7(C-8),76.2(C-3”),74.0(C-5”),73.0(C-2”),69.8(C-4”),63.6(C-6”),28.6(C-2”',C-3”').
实施例3
本发明的木犀草素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGL)及芹菜素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGA)在脑神经疾病方面的应用。
选取对数生长期的HT22细胞，调整细胞密度为4×104/mL，每孔100uL接种于96孔板，置5％CO2的恒温培养箱于37℃培养至细胞贴壁，吸弃上清液，用无血清的EBSS清洗细胞两次后，加入无血清的EBSS，置于5％CO2、0.5％O2、94.5％N2的三气培养箱中孵育2小时，造成细胞缺氧缺糖(OGD)损伤。细胞缺氧缺糖(OGD)后，吸弃上清液，加入正常培养基，置5％CO2的恒温培养箱中于37℃继续培养6小时，形成缺氧复氧环境，即建立氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤模型。
选取对数生长期的HT22细胞，调整细胞密度为4×104/mL，每孔100uL接种于96孔板，置5％CO2的恒温培养箱于37℃培养至细胞贴壁，分为三组：模型组(OGD/R)、正常组(Normal，NA)和药物组，其中根据预实验筛选结果，药物组设置三组浓度，分别为1μM、5μM、10μM，造模前24小时及造模过程中给药。模型组和药物组按照2.1项方法进行造模，正常组使用正常培养基，置5％CO2的恒温培养箱于37℃培养，待模型组和药物组建立氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤模型后，每孔加入20uL MTT(5mg/mL)，置5％CO2恒温培养箱中于37℃避光孵育4小时，小心吸弃上清液，每孔加入150uL DMSO溶液，摇床低速振荡20min，使其溶解，使用酶标仪在492nm处检测OD值(A)。此外另设空白对照组，不加细胞，其余操作和正常组或模型组相同。实验中96孔板周围一圈用无菌PBS填充以防止边缘效应。
细胞存活率(％)＝(模型组A或药物组A-空白对照组)/(正常组A-空白对照组)×100％
利用核蛋白提取试剂盒提取实验中HT22细胞中的核蛋白后，采用BCA法测定样品中蛋白含量。每个样品取20μg上样，使用10％SDS-PAGE电泳分离，转至PVDF膜上，1％BSA封闭1小时后，加入不同的一抗，于4℃孵育过夜，再加入二抗室温孵育1小时，加入ECL发光液显影，使用tanon化学发光成像系统采集图像。
细胞培养孔板中加入细胞爬片后培养，培养一段时间后取出爬片，加入含有山羊血清和Triton X-100的封闭液室温封闭1小时后，加入一抗，于4℃孵育过夜，次日取出，复温1小时，使用PBS缓冲液冲洗3次，每次5分钟，滴加对应荧光二抗，于37℃孵育1小时，再使用PBS缓冲液冲洗3次，每次5分钟，滴加hoechst溶液(5μg/ml)避光反应15分钟，PBS缓冲液冲洗数次后，采用荧光显微镜观察相应蛋白的表达并拍照。并采用Image-Pro软件进行蛋白荧光强度分析，实验中采用荧光强度表示蛋白表达。
实验中采用SPSS 18.0统计软件进行数据处理，计量数据结果用x±s表示，用t检验进行两组间的比较，采用方差分析对多组间差异进行比较，实验结果P<0.05表示组别间差异有统计学意义。
MTT法检测细胞活力结果显示，与正常组相比，实验中建立的氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤模型导致了细胞大量死亡(p<0.001),并且模型组的存活率达50％，该方法符合建立模型标准；与模型组相比，在1、5、10μM 7-SGL(7-SGA)的干预下，HT22细胞存活率有显著提升(p<0.001)，实验结果如图7。
Western blot结果显示，在7-SGL(7-SGA)的干预下，与清除氧自由基相关的HO-1蛋白表达提高，如图8.B；同时细胞核中NRF-2蛋白表达也有所提高，如图8.A。免疫荧光试验中，在荧光显微镜下观察到细胞核显蓝色荧光，NRF-2显绿色荧光，Keap-1显红色荧光，实验结果显示，在10μM 7-SGL(7-SGA)作用下，NRF-2脱离与Keap-1形成复合体的表达更多的发生在细胞核中，如图8.C。7-SGA与7-SGL在提高氧糖剥夺/复氧(OGD/R)损伤模型细胞存活率上功效显著，且两种新化合物通过上调细胞核中NRF-2表达，提高诱导酶HO-1的水平的抗氧化机制也被证实。
实施例4
水溶性实验方法：在HPLC上建立标曲，37℃下分别测定木犀草素、木犀草素-7-O-琥珀酰葡糖苷(7-SGL)、芹菜素、芹菜素-7-O-琥珀酰葡糖苷(7-SGA)饱和水溶液的溶解度。
实验结果：木犀草素水溶性为0.010g/L,7-SGL水溶性为11.34g/L；芹菜素水溶性为0.005g/L，7-SGA水溶性为0.967g/L。
结果表明，相比于原型木犀草素，7-SGL的水溶性提高了约1134倍；相比于原型芹菜素，7-SGA的水溶性提高了约174倍。
细胞毒性实验方法：采用MTT分析实验，选用小鼠正常海马神经元细胞HT22为研究对象(因为7-SGA和7-SGL神经保护活性显著)，选择木犀草素、7-SGL、芹菜素、7-SGA等4个待测化合物，每个化合物选择三个待测计量(0.022,0.066,0.200μM)。HT22细胞与待测化合物共培养24小时后，加入20μL MTT溶液，37℃下共孵育4h。490nm下测定细胞活力。
实验结果：在中高剂量(0.066,0.2μM)下，原型药物木犀草素和芹菜素均HT22细胞显示了较强的抑制作用，其中木犀草素的抑制作用更强；而7-SGL和7-SGA在各种测试剂量下均未显示抑制作用，同时还对HT22细胞显示了一定的保护作用。
实施例5
片剂的制备
处方(以1000片的处方量计)：
实施例3中所得木犀草素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGL)[或芹菜素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGA)]纯品60g；
蔗糖60g；
玉米淀粉80g；
硬脂酸镁2g。
制备方法：将活性成分与蔗糖、玉米淀粉混合，加水湿润，搅拌均匀，干燥，粉碎过筛，加入硬脂酸镁，混合均匀，压片。平均片重202mg/片，活性成分含量为60mg。
实施例6
注射液的制备
处方：(以1000支的处方量计)
实施例3中所得的木犀草素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGL)[或芹菜素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGA)]纯品10g；
丙二醇100g；
注射用水加至1000ml。
将处方量的木犀草素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGL)[或芹菜素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷(7-SGA)]纯品溶解于丙二醇中，加注射用水至1000ml，混合均匀，过滤，将所获得的溶液在无菌条件下分装于安瓿瓶中，制成1ml/瓶注射液，活性成分含量为10mg/mL。

Claims (6)

1.一种木犀草素-7-O-琥珀酰葡萄糖苷（7-SGL），其特征在于，所述的7-SGL具有下式（1）所示的结构：
Figure 396873DEST_PATH_IMAGE002
。
2.一种治疗脑神经疾病药物，其特征在于，包括权利要求1所述的活性成分为式（1）所示的7-SGL，以及药学上可接受的药用辅料。
3.根据权利要求2所述的治疗脑神经疾病药物，其特征在于，包括活性成分为式（1）所示的7-SGL 或其盐，以及药学上可接受的药用辅料组合制成临床适用的片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂。
4.根据权利要求3所述的治疗脑神经疾病药物，其特征在于，所述7-SGL盐指7-SGL与盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、马来酸、烷基或芳基磺酸形成的盐。
5.根据权利要求1所述的7-SGL在制备脑神经性疾病药物的应用，其特征在于，所述脑神经性疾病包括头痛、神经衰弱、脑梗塞、脑缺血、心力衰竭以及神经功能紊乱。
6.根据权利要求1所述的7-SGL在制备脑神经疾病药物的应用，其特征在于，所述脑神经疾病为脑缺血。
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