CN1995056B

CN1995056B - 新的莪术醇糖苷类化合物及其制备与应用

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Publication number: CN1995056B
Application number: CN2006101544111A
Authority: CN
Inventors: 梁广; 李校堃; 姚崇舜; 杨树林
Original assignee: Wenzhou Medical College
Current assignee: Wenzhou Medical College
Priority date: 2006-10-31
Filing date: 2006-10-31
Publication date: 2011-06-15
Anticipated expiration: 2026-10-31
Also published as: CN1995056A

Abstract

本发明涉及用于治疗癌症、抗菌和抗病毒的新化合物莪术醇糖苷类化合物物及其制备方法和应用。本发明主要对莪术醇进行糖苷化修饰，提供一系列新的莪术醇糖苷类化合物，及其制备方法和应用。莪术醇具有良好的抗肿瘤、抗菌和抗病毒活性，本发明在保留莪术醇原骨架的前提下，在其C-6位羟基上引入糖分子基团(糖苷)，因为糖分子的引入，该类新化合物具有更高的水溶性和体内运转能力、更好的生物相容性、更好的药效和更低的毒副作用，更重要的是，该类新化合物可能对于某些肿瘤或病原体细胞具有靶向性。

Description

新的莪术醇糖苷类化合物及其制备与应用

一.技术领域

本发明涉及用于治疗癌症、抗菌和抗病毒的新化合物-------莪术醇糖苷类化合物物及其制备方法和应用。

二.技术背景

莪术醇(Curcumol)又名姜黄环奥醇、姜黄醇，属倍半萜类化合物，是莪术挥发油中的重要成分。莪术挥发油(莪术油)已经收载于1977年中国药典(第463页)，主治淤血闭经、等。莪术醇作为莪术油中主要的活性成分之一，也具有抗肿瘤、抗菌、抗早孕、抗病毒、保肝和活血化淤等药理作用。

莪术醇(Curcumol)分子式为C₁₅H₂₄O₂，[CAS]4871-97-0，分子量236.134，熔点141～142℃，无色针状结晶(无水乙醇)，熔点142～144℃2，[α]^D ₂₅＝-40.15，易溶于乙醚、氯仿，微溶于石油醚，几乎不溶于水。莪术醇无紫外吸收，亦无荧光吸收。莪术醇(Curcumol)的结构式如下：

莪术醇的抗癌机理可能是它可以抑制肿瘤细胞的核代谢，同时使机体的特异性免疫增强，产生明显的免疫保护作用。临床上，莪术醇主要用于宫颈癌的治疗，采用局部瘤体注射给药获得较好疗效。莪术醇能显著抑制肿瘤细胞Hela、Mcf-7、MM231的RNA合成，浓度为50μg/mL时对胃癌SGC-7901、肝癌HePG2 细胞抑制率可达到60％以上。莪术醇对正常细胞生长无影响，长期应用，对主要脏器无损害。如：莪术醇提取物给大鼠和狗灌胃7天，动物体重、血象、心电、肝肾功能及组织镜检均无明显影响。

莪术醇抗菌和抗病毒的作用也正逐渐引起注意，并有希望成为它在临床上的新应用。莪术醇在试管内能显著抑制金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠杆菌、伤寒杆菌的生长；对呼吸道合胞体病毒(RSV)有直接抑制作用，对流感病毒A，A3型有直接灭活作用；此外，尚能对其它病毒如风湿病毒，水痘病毒、副流感病毒，副粘病毒和柯萨奇病毒等也有抑制作用。

可见，经过多年的药理和临床研究，莪术醇在抗肿瘤、抗菌和抗病毒等方面已经显示出确切的疗效和广阔的前景。但是，目前莪术醇的应用还具有一定的局限性，其主要原因在于：1.水溶性极低，制剂研究困难；2.以局部注射或瘤体注射给药时会出现疼痛和胸闷等副作用；3.药效还有待进一步提高；4.生物利用度不高，抗肿瘤、抗菌和抗病毒的靶向性不够。

三.发明内容：

本发明专利的目的在于保留莪术醇原骨架的前提下，在其C-6位羟基上引入糖分子基团(糖苷)。与莪术醇相比，该类莪术醇糖苷衍生物具有：

1.更高的溶解性和体内运转能力。糖基上丰富的羟基不仅可以解决莪术醇的水溶性低和制剂难的问题，而且很容易将莪术醇带入水相中溶解和在血液中运输，当该类衍生物到达病灶细胞后，糖基可以被细胞膜上的酶水解，分解后的脂溶性的莪术醇可以很方便地穿过细胞膜进入细胞内发挥作用；

2.更好的生物相容性和生物利用度，糖是生物体内最重要和最丰富的分子种类之一，糖基的引入使得该类衍生物更容易被生物体所接受，另外，莪术醇C-6 位的糖苷化可以减缓莪术醇在体内的代谢速度，起到药物缓释的效果，提高生物利用度；

3.更好地药效。

4.提高药物靶向性。某些肿瘤组织、细胞或病原体细胞的表面富含亲和某种糖的酶或其他分子，根据该类衍生物的糖基不同，药物在体内各种组织中的浓度也不同，因此莪术除糖苷对于特异性亲和糖的肿瘤或病原体细胞具有优良的靶向杀伤性。

5.更小的毒副作用。水溶性增强，可以方便地改变制剂的类别，消除疼痛，糖基的引入，也将增加生物亲和性，减少毒副作用。

四.具体实施例

莪术醇糖苷类化合物的制备

莪术醇是莪术油中含量较多的组分，对市售的莪术醇进行进一步分离纯化后，可以获得纯度达95％以上的莪术醇，作为该发明专利中莪术醇结构糖基化修饰的原料。

(1).莪术醇(C-6位上羟基)糖苷衍生物的制备

莪术醇分子中6-羟基可以看做是6-羰基单缩酮后的产物，由于6位碳上即联有羟基有联有氧桥，因此，由于空间效应和氧桥的供电子效应，其稳定性和反应活性均比一般的羟基化合物稍弱，反应过程中应小心地控制好反应条件。

反应过程如下：

步骤1：溴代乙酰化糖的合成

(以葡萄糖的结构式为例)

冰浴冷却下向配有机械搅拌器、温度计、滴液漏斗的500mL四颈圆底烧瓶中加入适量的乙酸酐，冰浴，缓慢滴加催化剂量的高氯酸，滴毕控制温度在30～40℃之间，分批加入比例量葡萄糖粉末。反应完后再冷却到0℃，加入适量的红磷，于4h内滴加比例量液溴。待反应完全后加入150mL氯仿，过滤除去未反应的红磷，滤液用冰水洗3次，再用饱和碳酸氢钠洗涤至中性，有机层用分子筛干燥。滤除分子筛减压蒸去氯仿，得到淡黄色糖浆状产物，糖浆结晶后用无水乙醚重结晶得白色针状结晶，即溴代乙酰化糖。

步骤2：莪术醇糖苷衍生物的乙酰化前体的合成。

如前所定义的糖类分子

反应前将莪术醇溶解于适当的有机溶剂，加入少量无机干燥剂干燥，过滤，减压蒸干溶剂。然后在烧瓶中，按反应比例加入α-溴代乙酰化糖(自制)和莪术醇，少量的溶剂和催化剂，在50℃以内剧烈搅拌反应1.5～3小时，加入少量水稀释反应液，终止反应，静止分层，水层用二氯甲烷萃取两次，合并有机层，用水洗涤至中性，加入无水硫酸钠干燥，过滤减压浓缩，残留物粗品经桂胶柱层析纯化得到莪术醇糖苷衍生物的乙酰化前体。

步骤3：莪术醇(C-6位上羟基)糖苷衍生物的合成。

R如前所定义

冰浴冷却下向配有回流冷凝管、温度计和恒压滴液漏斗的三颈圆底烧瓶中加入适量的上述乙酰化前体化合物和少量氯仿，搅拌片刻溶解，再向体系内缓慢滴加含有甲醇钠的甲醇溶液，于0℃反应2h后，旋干溶剂，得粗品。粗产物用95％的乙醇重结晶，得白色针状结晶，即通式或结构式(I)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)或(VII)的莪术醇糖苷衍生物(R如前所定义)。

(2).具体实施方案：

以不同的糖类化合物为反应原料时，反应的原料比例应根据具体情况来调整。

以下的实施例仅为了进一步说明本发明，而不是限制本发明。

实施例一：莪术醇-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(II)的制备；

①在冰浴冷却下向配有机械搅拌器、温度计、滴液漏斗的500mL四颈圆底烧瓶中加入216g(200mL，2.12mol)的乙酸酐，待冷却到0℃，缓慢滴加1.2mL(70％～72％，0.02mol)的高氯酸。滴毕控制温度在30～40℃之间，分批加入干燥的50g(0.28mol)葡萄糖粉末。反应完后再冷却到0℃，加入15.5g(0.5mol)红磷，于4h内滴加90.5g(29mL，1.13mol)液溴，待反应完全后加入150mL氯仿，过滤除去未反应的红磷，滤液用100mL冰水洗3次，再用饱和碳酸氢钠洗涤至PH为7左右，有机层用分子筛干燥。滤除分子筛减压蒸去氯仿，得到淡黄色糖浆状产物，糖浆结晶后用无水乙醚重结晶得白色针状结晶，即1-溴-2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃葡萄糖(2)，收率97％，熔点86～87℃。

②将莪术醇溶解于50ml氯仿中，加入少量无水硫酸镁干燥，过滤，减压蒸干溶剂。取干燥后的莪术醇1.18g(0.005mol)、1-溴-2，3，4，6-四乙酰化-α-D-吡喃葡萄糖(2)2.46g(0.006mol)、四丁基溴化铵1.93g(0.006mol)置于二口烧瓶中，加入30mL氯仿作为溶剂，在40～50℃以内剧烈搅拌下慢慢滴加1.0mol/L的K₂CO₃溶液18mL，反应1.5小时后，冷却，加入30ml水稀释反应液，静止分层，水层用二氯甲烷萃取二次，合并有机层，用水洗涤至中性，加入无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物粗品经桂胶柱层析纯化得到莪术醇-6-O-β-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-D-吡喃葡萄糖)苷(3)2.38g，收率84.3％。C₂₉H₄₂O₁₁，元素分析：C61.40％，H7.51％(理论值：C61.47％，H7.47％)；质谱：566.27(100％)。

③在冰浴冷却下向配有回流冷凝管、温度计和恒压滴液漏斗的三颈圆底烧瓶中加入1.70g(0.003mol)的3和15mL氯仿，搅拌片刻溶解，再向体系内缓慢滴加含有0.0097mol甲醇钠的15ml甲醇溶液，于0℃反应2 h后，旋干溶剂，得粗品。粗产物用95％的乙醇重结晶，得白色针状结晶0.98g，即莪术醇-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(II)，收率82.2％。C₂₁H₃₄O₇，元素分析：C62.92％，H8.54％(理论值：C63.30％，H8.60％)；质谱：398.23(100％)。

采用BrukerACF-300型核磁共振仪，以CDCl₃为溶剂检测II的1HNMR和13CNMR，显示出21个碳信号，34个质子信号(详细谱图数据请联系专利发明入)，进一步说明得到的产物是我们的目标物，即莪术醇-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(II)。

合成总产率69.3％(以莪术醇的起始量计算)。

实施例二：莪术醇-6-O-β-D-吡喃半乳糖苷(III)的制备；

①在冰浴冷却下向配有机械搅拌器、温度计、滴液漏斗的500mL四颈圆底烧瓶中加入216g(200mL，2.12mol)的乙酸酐，待冷却到0℃，缓慢滴加1.2mL(70％～72％，0.02mol)的高氯酸。滴毕控制温度在30～40℃之间，分批加入干燥的50g(0.28mol)半乳糖粉末。反应完后再冷却到0℃，加入15.5g(0.5mol)红磷，于4h内滴加90.5g(29mL，1.13mol)液溴，待反应完全后加入150mL氯仿，过滤除去未反应的红磷，滤液用100mL冰水洗3次，再用饱和碳酸氢钠洗涤至PH为7左右，有机层用分子筛干燥。滤除分子筛减压蒸去氯仿，得到淡黄色糖浆状产物，糖浆结晶后用无水乙醚重结晶得白色针状结晶，即1-溴-2，3，4，6-四-O-乙酰基-α-D-吡喃半乳糖(5)，收率93％。C₁₄H₁₉BrO₉，元素分析：C41.13％，H4.71％，Br19.40％(理论值：C40.89％，H4.66％，Br19.43％)；质谱：410.02(100％)

②将莪术醇溶解于50ml氯仿中，加入少量无水硫酸镁干燥，过滤，减压蒸干溶剂。取干燥后的莪术醇1.18g(0.005mol)、1-溴-2，3，4，6-四乙酰化-α-D-吡喃半乳糖(5)2.46g(0.006mol)、四丁基溴化铵1.93g(0.006mol)置于二口烧瓶中，加入30mL氯仿作为溶剂，在40～50℃以内剧烈搅拌下慢慢滴加18mL 1.0mol/L的K₂CO₃溶液，反应1.5小时后，冷却，加入30ml水稀释反应液，静止分层，水层用二氯甲烷萃取二次，合并有机层，用水洗涤至中性，加入无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物粗品经桂胶柱层析纯化得到莪术醇-6-O-β-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-D-吡喃半乳糖)苷(6)2.34g，收率79.2％。C₂₉H₄₂O₁₁，元素分析：C61.52％，H7.51％(理论值：C61.47％，H7.47％)；质谱：566.31(100％)。

③在冰浴冷却下向配有回流冷凝管、温度计和恒压滴液漏斗的三颈圆底烧瓶中加入1.70g(0.003mol)的6和15mL氯仿，搅拌片刻溶解，再向体系内缓慢滴加含有0.0097mol甲醇钠的15ml甲醇溶液，于0℃反应2h后，旋干溶剂，得粗品。粗产物用95％的乙醇重结晶，得白色针状结晶1.03g，即莪术醇-6-O-β-D-吡喃半乳糖苷(III)，收率86.5％。C₂₁H₃₄O₇，元素分析：C63.35％，H8.63％(理论值：C63.30％，H8.60％)；质谱：398.27(100％)。

采用BrukerACF-300型核磁共振仪，以CDCl₃为溶剂检测II的1HNMR和13CNMR，显示出21个碳信号，34个质子信号(详细谱图数据请联系专利发明人)，进一步说明得到的产物是我们的目标物，即莪术醇-6-O-β-D-吡喃半乳糖苷(III)。

合成总产率68.5％(以莪术醇的起始量计算)。

实施例三：莪术醇-6-O-β-D-吡喃木糖苷(IV)的制备；

①在冰浴冷却下向配有机械搅拌器、温度计、滴液漏斗的500mL四颈圆底烧瓶中加入216g(200mL，2.12mol)的乙酸酐，待冷却到0℃，缓慢滴加1.2mL(70％～72％，0.02mol)的高氯酸。滴毕控制温度在30～40℃之间，分批加入干燥的42g(0.28mol)木糖粉末。反应完后再冷却到0℃，加入15.5g(0.5mol)红磷，于4h内滴加90.5g(29mL，1.13mol)液溴，待反应完全后加入150mL氯仿，过滤除去未反应的红磷，滤液用100mL冰水洗3次，再用饱和碳酸氢钠洗涤至PH为7左右，有机层用分子筛干燥。滤除分子筛减压蒸去氯仿，得到淡黄色糖浆状产物，糖浆结晶后用无水乙醚重结晶得白色针状结晶，即1-溴-2，3，4-三-O-乙酰基-α-D-吡喃木糖(8)，收率85％。C₁₁H₁₅BrO₇，元素分析：C38.97％，H4.49％，Br23.58％(理论值：C38.96％，H4.46％，Br23.56％)；质谱：338.07(100％)

②将莪术醇溶解于50ml氯仿中，加入少量无水硫酸镁干燥，过滤，减压蒸干溶剂。取干燥后的莪术醇1.18g(0.005mol)、1-溴-2，3，4，6-四乙酰化-α-D-吡喃木糖(8)2.03g(0.006mol)、四丁基溴化铵1.93g(0.006mol)置于二口烧瓶中，加入30mL氯仿作为溶剂，在40～50℃以内剧烈搅拌下慢慢滴加18mL 1.0mol/L的K₂CO₃溶液，反应2小时后，冷却，加入30ml水稀释反应液，静止分层，水层用二氯甲烷萃取二次，合并有机层，用水洗涤至中性，加入无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物粗品经桂胶柱层析纯化得到莪术醇-6-O-β-(2，3，4-三-O-乙酰基-D-吡喃木糖)苷(9)2.02g，收率81.8％。C₂₆H₃₈O₉，元素分析：C62.96％，H7.70％(理论值：C63.14％，H7.74％)；质谱：494.23(100％)。

③在冰浴冷却下向配有回流冷凝管、温度计和恒压滴液漏斗的三颈圆底烧瓶中加入1.48g(0.003mol)的9和15mL氯仿，搅拌片刻溶解，再向体系内缓慢滴加含有0.0097mol甲醇钠的15ml甲醇溶液，于0℃反应2h后，旋干溶剂，得粗品。粗产物用95％的乙醇重结晶，得白色针状结晶1.02g，即莪术醇-6-O-β-D-吡喃木糖苷(IV)，收率92.4％。C₂₀H₃₂O₆，元素分析：C65.21％，H8.78％(理论值：C65.19％，H8.75％)；质谱：368.27(100％)。

采用BrukerACF-300型核磁共振仪，以CDCl₃为溶剂检测II的1HNMR和13CNMR，显示出20个碳信号，32个质子信号(详细谱图数据请联系专利发明入)，进一步说明得到的产物是我们的目标物，即莪术醇-6-O-β-D-吡喃木糖苷(IV)。

合成总产率75.6％(以莪术醇的起始量计算)。

实施例四：莪术醇-6-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷(V)的制备；

①在冰浴冷却下向配有机械搅拌器、温度计、滴液漏斗的500mL四颈圆底烧瓶中加入216g(200mL，2.12mol)的乙酸酐，待冷却到0℃，缓慢滴加1.2mL(70％～72％，0.02mol)的高氯酸。滴毕控制温度在30～40℃之间，分批加入干燥的42g(0.28mol)阿拉伯糖粉末。反应完后再冷却到0℃，加入15.5g(0.5mol)红磷，于4h内滴加90.5g(29mL，1.13mol)液溴，待反应完全后加入150mL氯仿，过滤除去未反应的红磷，滤液用100mL冰水洗3次，再用饱和碳酸氢钠洗涤至PH为7左右，有机层用分子筛干燥。滤除分子筛减压蒸去氯仿，得到糖浆状产物，糖浆结晶后用无水乙醚重结晶得白色粉末结晶，即1-溴-2，3，4-三-O-乙酰基-α-D-吡喃阿拉伯糖(11)，收率90.7％。C₁₁H₁₅BrO₇，元素分析：C38.99％，H4.48％，Br23.53％(理论值：C38.96％，H4.46％，Br23.56％)；质谱：338.01(100％)

②将莪术醇溶解于50ml氯仿中，加入少量无水硫酸镁干燥，过滤，减压蒸干溶剂。取干燥后的莪术醇1.18g(0.005mol)、1-溴-2，3，4，6-四乙酰化-α-D-吡喃阿拉伯糖(11)2.03g(0.006mol)、四丁基溴化铵1.93g(0.006mol)置于二口烧瓶中，加入30mL氯仿作为溶剂，在40～50℃以内剧烈搅拌下慢慢滴加18mL 1.0mol/L的K₂CO₃溶液，反应1.5小时后，冷却，加入30ml水稀释反应液，静止分层，水层用二氯甲烷萃取二次，合并有机层，用水洗涤至中性，加入无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物粗品经桂胶柱层析纯化得到莪术醇-6-O-β-(2，3，4-三-O-乙酰基-D-吡喃阿拉伯糖)苷(12)2.17g，收率87.8％。C₂₆H₃₈O₉，元素分析：C63.20％，H7.78％(理论值：C63.14％，H7.74％)；质谱：494.29(100％)。

③在冰浴冷却下向配有回流冷凝管、温度计和恒压滴液漏斗的三颈圆底烧瓶中加入1.48g(0.003mol)的12和15mL氯仿，搅拌片刻溶解，再向体系内缓慢滴加含有0.0097mol甲醇钠的15ml甲醇溶液，于0℃反应2.5h后，旋干溶剂，得粗品。粗产物用95％的乙醇重结晶，得白色针状结晶0.99g，即莪术醇-6-O- β-D-吡喃阿拉伯糖苷(V)，收率89.7％。C₂₀H₃₂O₆，元素分析：C65.23％，H8.79％(理论值：C65.19％，H8.75％)；质谱：368.17(100％)。

采用BrukerACF-300型核磁共振仪，以CDCl₃为溶剂检测II的1HNMR和13CNMR，显示出20个碳信号，32个质子信号(详细谱图数据请联系专利发明人)，进一步说明得到的产物是我们的目标物，即莪术醇-6-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷(V)。

合成总产率78.7％(以莪术醇的起始量计算)。

实施例五：莪术醇-6-O-β-麦芽糖苷(VI)的制备；

①在冰浴冷却下向配有机械搅拌器、温度计、滴液漏斗的500mL四颈圆底烧瓶中加入216g(200mL，2.12mol)的乙酸酐，待冷却到0℃，缓慢滴加1.2mL(70％～72％，0.02mol)的高氯酸。滴毕控制温度在30～40℃之间，分批加入干燥的95.2g(0.28mol)麦芽糖粉末。反应完后再冷却到0℃，加入15.5g(0.5mol)红磷，于4h内滴加90.5g(29mL，1.13mol)液溴，待反应完全后加入150mL氯仿，过滤除去未反应的红磷，滤液用100mL冰水洗3次，再用饱和碳酸氢钠洗涤至PH为7左右，有机层用分子筛干燥。滤除分子筛减压蒸去氯仿，得到淡黄色糖浆状产物，糖浆结晶后用无水乙醚重结晶得白色针状结晶，即1-溴-2，2’，3，3’，4’，6，6’-七-O-乙酰基-α-麦芽糖(14)，收率79.2％。C₂₆H₃₅BrO₁₇，元素分析：C44.61％，H5.00％，Br11.40％(理论值：C44.65％，H5.04％，Br11.42％)；质谱：698.11(100％)。

②将莪术醇溶解于50ml氯仿中，加入少量无水硫酸镁干燥，过滤，减压蒸干溶剂。取干燥后的莪术醇1.18g(0.005mol)、1-溴-2，2’，3，3’，4’，6，6’-七-O-乙酰基-α-麦芽糖(14)4.19g(0.006mol)、四丁基溴化铵1.93g(0.006mol)置于二口烧瓶中，加入30mL氯仿作为溶剂，在40～50℃以内剧烈搅拌下慢慢滴加18mL1.0mol/L的K₂CO₃溶液，反应2小时后，冷却，加入30ml水稀释反应液，静止分层，水层用二氯甲烷萃取二次，合并有机层，用水洗涤至中性，加入无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物粗品经桂胶柱层析纯化得到莪术醇-6-O-β-(2，2’，3，3’，4’，6，6’-七-O-乙酰基-α-麦芽糖)苷(15)3.98g，收率93..2％。C₄₁H₅₈O₁₉，元素分析：C57.52％，H6.80％(理论值：C57.60％，H6.84％)；质谱：854.27(100％)。

③在冰浴冷却下向配有回流冷凝管、温度计和恒压滴液漏斗的三颈圆底烧瓶中加入2.56g(0.003mol)的15和15mL氯仿，搅拌片刻溶解，再向体系内缓慢滴加含有0.015mol甲醇钠的15ml甲醇溶液，于0℃反应2h后，旋干溶剂，得粗品。粗产物用95％的乙醇重结晶，得白色针状结晶1.33g，即莪术醇-6-O-β-麦芽糖苷(VI)，收率79.2％。C₂₇H₄₄O₁₂，元素分析：C57.80％，H7.86％(理论值：C57.84％，H7.91％)；质谱：560.15(100％)。

采用BrukerACF-300型核磁共振仪，以CDCl₃为溶剂检测II的1HNMR和13CNMR，显示出27个碳信号，44个质子信号(详细谱图数据请联系专利发明人)，进一步说明得到的产物是我们的目标物，即莪术醇-6-O-β-麦芽糖苷(VI)。

合成总产率73.8％(以莪术醇的起始量计算)。

实施例六：莪术醇-6-O-β-(N-乙酰-D-葡糖胺)苷(VII)的制备；

①在冰浴冷却下向配有机械搅拌器、温度计、滴液漏斗的500mL四颈圆底烧瓶中加入216g(200mL，2.12mol)的乙酸酐，待冷却到0℃，缓慢滴加1.2mL(70％～72％，0.02mol)的高氯酸。滴毕控制温度在30～40℃之间，分批加入干燥的61.8g(0.28mol)N-乙酰-D-葡糖胺粉末。反应完后再冷却到0℃，加入15.5g(0.5mol)红磷，于4h内滴加90.5g(29mL，1.13mol)液溴，待反应完全后加入150mL氯仿，过滤除去未反应的红磷，滤液用100mL冰水洗3次，再用饱和碳酸氢钠洗涤至PH为7左右，有机层用分子筛干燥。滤除分子筛减压蒸去氯仿，得到淡黄色糖浆状产物，糖浆结晶后用无水乙醚重结晶得白色针状结晶，即1-溴-3，4，6-三-O-乙酰基-α-N-乙酰-D-葡糖胺(17)，收率76％。C₁₄H₂₀BrNO₈，元素分析：C41.03％，H4.95％，Br19.47％(理论值：C40.99％，H4.91％，Br19.48％)；质谱：411.01(100％)

②将莪术醇溶解于50ml氯仿中，加入少量无水硫酸镁干燥，过滤，减压蒸干溶剂。取干燥后的莪术醇1.18g(0.005mol)、1-溴-3，4，6-三-O-乙酰基-α-N-乙酰-D-葡糖胺(17)2.45g(0.006mol)、四丁基溴化铵1.93g(0.006mol)置于二口烧瓶中，加入30mL氯仿作为溶剂，在40～50℃以内剧烈搅拌下慢慢滴加18mL1.0mol/L的K₂CO₃溶液，反应2小时后，冷却，加入30ml水稀释反应液，静止分层，水层用二氯甲烷萃取二次，合并有机层，用水洗涤至中性，加入无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩，残留物粗品经桂胶柱层析纯化得到莪术醇-6-O-β-(3，4，6-三-O-乙酰基-N-乙酰-D-葡糖胺)苷(18)2.34g，收率82.9％。C₂₉H₄₃NO₁₀，元素分析：C61.62％，H7.70％(理论值：C61.58％，H7.66％)；质谱：565.29(100％)。

③在冰浴冷却下向配有回流冷凝管、温度计和恒压滴液漏斗的三颈圆底烧瓶中加入1.70g(0.003mol)的18和15mL氯仿，搅拌片刻溶解，再向体系内缓慢滴加含有0.0097mol甲醇钠的15ml甲醇溶液，于0℃反应2h后，旋干溶剂，得粗品。粗产物用95％的乙醇重结晶，得白色针状结晶1.06g，即莪术醇-6-O-β-(N-乙酰-D-葡糖胺)苷(VII)，收率80.7％。C₂₃H₃₇O₇，元素分析：C62.80％，H8.50％(理论值：C62.85％，H8.48％)；质谱：439.26(100％)。

采用BrukerACF-300型核磁共振仪，以CDCl₃为溶剂检测II的1HNMR和13CNMR，显示出23个碳信号，37个质子信号(详细谱图数据请联系专利发明人)，进一步说明得到的产物是我们的目标物，即莪术醇-6-O-β-(N-乙酰-D-葡糖胺)苷(VII)。

合成总产率66.9％(以莪术醇的起始量计算)。

(3).抗肿瘤活性测试实例：

以下的实施例仅为了进一步说明本发明，尤其是说明本发明中的新化合物的药理活性，而不是限制本发明。

仅以权利要求2～7中的II、III、IV、V、VI、VII等六种新化合物为例，通过MTT法(四甲基偶氮唑盐比色法)，测试这六种莪术醇糖苷对不同肿瘤细胞的抑制活性，以IC₅₀(半数抑制浓度)值来表示抗肿瘤活性的强弱。结果如表1：

表1：莪术醇糖苷对各种肿瘤细胞株的半数抑制浓度(IC₅₀，μg/mL)

Claims

1.具有通式I的莪术醇-6-O-糖苷化合物或其药理上可以接受的盐：

其中，R为单糖或寡糖基团，其中寡糖选自乳糖、蔗糖和麦芽糖。

2.根据权利要求1的化合物或其药理上可以接受的盐，其中，单糖选自D/L-葡萄糖、D/L-阿洛糖、D/L-阿卓糖、D/L-甘露糖、D/L-古洛糖、D/L-艾杜糖、D/L-半乳糖、D/L-塔罗糖、D/L-木糖、D/L-核糖、D/L-阿拉伯糖、D/L-来苏糖、以及果糖。

3.根据权利要求1的化合物或其药理上可以接受的盐，其特征在于R为葡萄糖时即得到具有结构式II的莪术醇-6-O-β-D-吡喃葡萄糖苷化合物：

4.根据权利要求1的化合物或其药理上可以接受的盐，其特征在于R为半乳糖时即得到具有结构式III的莪术醇-6-O-β-D-吡喃半乳糖苷化合物：

5.根据权利要求1的化合物或其药理上可以接受的盐，其特征在于R为木糖时即得到具有结构式IV的莪术醇-6-O-β-D-吡喃木糖苷化合物：

6.根据权利要求1的化合物或其药理上可以接受的盐，其特征在于R为阿拉伯糖时即得到具有结构式V的莪术醇-6-O-β-D-吡喃阿拉伯糖苷化合物：

7.根据权利要求1的化合物或其药理上可以接受的盐，其特征在于R为麦芽糖时即得到具有结构式VI的莪术醇-6-O-β-D-吡喃麦芽糖苷化合物：

8.根据权利要求1的化合物或其药理上可以接受的盐，其特征在于R为N-乙酰-D-葡糖胺时即得到具有结构式VII的莪术醇-6-O-β-(N-乙酰-D-葡糖胺)苷化合物：

9.权利要求1的化合物或其药理上可以接受的盐采用通常的方法制成的用于治疗癌症、抗菌和抗病毒的药物，其为内服的片剂、胶囊或口服液，或者注射用的液剂或粉剂，或者外用的膏剂或药液。

10.权利要求9的药物，其中权利要求1的化合物是权利要求3至8中之任一所述的化合物。

11.权利要求1的化合物或其药理上可以接受的盐在制能用于抑制Hela、HL60、PC-3、A549、HepG2、COC-1或K562肿瘤细胞的药中的应用。

12.权利要求11的应用，其中权利要求1的化合物是权利要求3至8中之任一所述的化合物。