CN101768202A

CN101768202A - 知母中菝葜皂苷元及其衍生物的制备方法及其医药新用途

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Publication number: CN101768202A
Application number: CN200910258515A
Authority: CN
Inventors: 宋少江
Original assignee: Shenyang Pharmaceutical University
Current assignee: Shenyang Pharmaceutical University; Shandong Luoxin Pharmaceutical Group Co Ltd
Priority date: 2009-02-18
Filing date: 2009-12-12
Publication date: 2010-07-07
Anticipated expiration: 2029-12-12
Also published as: CN101768202B

Abstract

本发明属于医药技术领域，涉及知母中高纯度菝葜皂苷元及其衍生物的制备方法及其医药新用途。将知母药材用含水乙醇或和水提取，采用大孔吸附树脂吸附洗脱，酸水解，重结晶，制备高纯度菝葜皂苷元纯度达98％。与已有技术相比，本发明成本低，产物杂质含量低，制备工艺稳定，易于操作，易于实现，生产过程对环境无污染的优点。本发明还通过化学合成方法合成一系列菝葜皂苷元衍生物，药理实验证明其有抗衰老活性。通过其药理活性开发菝葜皂苷元及其衍生物在制备抗老年性痴呆，抗衰老，抗抑郁，抗肿瘤药物中的新用途。

Description

知母中菝葜皂苷元及其衍生物的制备方法及其医药新用途

技术领域：

本发明属于医药技术领域，涉及知母中高纯度菝葜皂苷元及其衍生物的制备方法及其医药新用途，具体涉及菝葜皂苷元及其衍生物在制备抗老年性痴呆，抗衰老，抗抑郁，抗癌药物中的应用。

背景技术：

老年痴呆症、肿瘤、心脑血管疾病、糖尿病等是危害中老年人健康和生命的重大疾病，而这些疾病不少是青、中年时期的疾病的延续。

目前，业内对老年痴呆症的治疗主要还是以西药为主，包括胆碱能药物、脑细胞代谢激活剂、脑血循环促进剂等，但这些药物在具有疗效的同时也伴随着肝毒性和胃肠反应等副作用。癌症的治疗主要以手术、放疗及化疗为主，但许多化学抗癌药物在作用于靶细胞时往往累及正常细胞，造成严重的副反应。心脑血管疾病属于慢性疾病，需要长期服药，西药虽然见效快，但毒副作用明显，不适于长期服用，因而毒副作用小的中药显然更符合患者的需求。

我国药用生物资源十分丰富，其生理活性物质是研究和发现新药的先导化合物，是开发新药的天然宝库，从天然产物中提取活性物质，开发成安全性好、毒性低的新药具有重要应用价值和广阔发展前景。

百合科植物知母广泛分布于我国黄河以北地区，其根茎中含有甾体皂苷、黄酮、木脂素、生物碱、多糖、甾醇和脂肪油等，其中皂苷为其主要成分。国内外各学者研究发现知母总皂苷及其苷元有很多药理活性，其中包括抗老年性痴呆，抗肿瘤，抗心脑血管疾病，抗抑郁，抗衰老，抗病毒，降血糖等。

目前，知母总甾体皂苷临床应用较多，且疗效显著，但单一成分的甾体皂苷直接应用于临床的药物还没有。近年来并没有见报道对其中药知母中菝葜皂苷元高纯度的提取工艺研究，虽有些研究提取工艺的报道，但并不能进行大规模工业生产，也未见其衍生物的制备方法和其医药用途的相关报道，因而制备菝葜皂苷元新衍生物，从而改善溶解度提高药效是非常重要的。

发明内容：

本发明的一个目的在于提供知母中菝葜皂苷元及其衍生物的制备方法。

本发明的另一个目的在于提供菝葜皂苷元衍生物的医药新用途。本发明是通过如下技术方案实现的：

一、菝葜皂苷元衍生物的结构通式如下：

其中R为F，CI，Br，I，H，SO₄，SOnR₂，O-C(O)-R₁，

其中R为F，CI，Br，I，H，＝O，SO₄，SOnR₂，O-C(O)-R₁，O一单糖或多糖，含N的生物碱类物质及其金属盐；

R′为F，Cl，Br，I，H，＝O，SO₄，SOnR₂，O-C(O)-R₁，O一单糖或多糖，含N的生物碱类物质及其金属盐。

二、知母中高纯度的菝葜皂苷元的制备方法具体步骤如下：

1、按知母药材于20-80％的乙醇的重量份数比例1∶4-1∶6向知母药材中加入乙醇，常温浸泡12-24小时，然后加热至沸腾，保持沸腾1-4小时，之后滤渣取液；按所述知母药材于20-80％的乙醇的重量份数比例1∶6-1∶8向知母药材中加入乙醇，常温浸泡12-24小时，然后加热至沸腾，保持沸腾1-4小时，之后滤渣取液；按所述知母药材于20-80％的乙醇的重量份数比例1∶8-1∶10向知母药材中加入乙醇，常温浸泡12-24小时，然后加热至沸腾，保持沸腾1-4小时，之后滤渣取液；按所述知母药材于水中的重量份数比例1∶6-1∶10向知母药材中加入水，常温浸泡12-24小时，然后加热至沸腾，保持沸腾1-4小时，之后滤渣取液。

2、将分别通过上述操作的提取液混合一起后，减压浓缩，直至不再有乙醇流出或无醇味为止。

3、使浓缩过的液体通过经过活化的极性或非极性大孔吸附树脂柱，使液体中的皂苷吸附到树脂上，并弃去流出液，再用水清洗树脂柱子，直至流出液颜色变浅，并弃出流出液，继用20％-90％的乙醇清洗树脂柱，直到树脂柱子上的皂苷全部被洗脱下来为止，并收集洗脱液。

4、按洗脱液的重量份数与矿酸(如盐酸、硫酸等)的比例为10∶1-1∶1，向洗脱液中加入酸，然后加热至沸腾，保持沸腾1-4小时，取出放凉，抽滤得固体物，将其放干，待用。

5、将无水乙醇与氯仿或二氯甲烷等非极性溶剂(两溶剂比例任意)的混合液加入至上述固体中，使其全部溶解，让其自然析出晶体，抽滤得出晶体，按其同样方法多次重结晶，最后得到白色晶体。mp 194-195℃，Molish反应阳性，Liebermann-Burchard反应阳性。

″C-NMR(300Hz，CDC13)数据如下：

6：30.6(C-1)，28.6(C-2)，66.0(C-3)，34.4(C-4)，37.0(C-5)，27.1(C-6)，27.0(C-7)，35.2(C-8)，40.1(C-9)，35.5(C-10)，21.4(C-11)，40.1(C-12)，40.2(C-13)，56.6(C-14)，32.2(C-15)，81.2(C-16)，63.2(C-17)，16.6(C-18)，24.2(C-19)，42.5(C-20)，14.9(C-21)，109.6(C-22)，26.4(C-23)，26.2(C-24)，27.5(C-25)，65.1(C-26)，16.3(C-27)。

6、将样品在减压条件下加热干燥。

所述的乙醇为工业乙醇。

三、菝葜皂苷元衍生物的制备方法如下：

1、菝葜皂苷元的酯化

(1)菝葜皂苷元的甲酰化

在氩气保护下将菝葜皂苷元溶入重蒸干燥吡啶中，然后将一定浓度甲酸滴加至上述吡啶溶液中，滴加完毕搅拌。减压蒸出吡啶，向剩余物中加入水，乙酸乙酯萃取三次，有机相碱洗，水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥过夜后，蒸出溶剂。柱色谱分离，以石油醚-丙酮梯度洗脱得到甲酯衍生化的菝葜皂苷元。

(2)菝葜皂苷元的其它酯化反应

在氩气保护下将菝葜皂苷元溶入干燥二氯甲烷中，然后加入R-C(O)-OH，DMAP与DCC，一定温度下搅拌，等反应完结束后，过滤除去未反应的DCC和反应后生成的DCU与DMAP等杂质。蒸出溶剂，将反应物研细，用醚溶解搅拌，静置过滤除去杂志，蒸出溶剂。柱色谱分离，以石油醚-丙酮梯度洗脱得到酯化衍生的菝葜皂苷元。

2、菝葜皂苷元的卤素取代

(1)氯代：在氩气保护下将菝葜皂苷元溶入干燥二氯甲烷中，然后加入氯化锌，最后加入亚硫酰二氯，一定温度下搅拌。用饱和的碳酸氢钠终止反应，有机层水洗，干燥，蒸干溶剂。柱色谱分离，以石油醚-丙酮梯度洗脱得到氯代衍生化的菝葜皂苷元。

(2)溴代：在氩气保护下，搅拌加入四氢呋喃溶解的NBS，之后滴加四氢呋喃溶解的三苯基磷，一定温度下搅拌反应，减压蒸出溶剂，残渣用水和醚洗，蒸出溶剂。柱色谱分离，以石油醚-丙酮梯度洗脱得到溴代衍生化的菝葜皂苷元。

(3)碘代：向容器中加入菝葜皂苷元，三苯基磷，咪唑，碘与甲苯，氩气保护下搅拌，一定温度下回流。反应后，除去沉淀，加入Na₂S₂O₃水溶液，除去水层，保留有机层。有机层水洗，无水硫酸钠除水，减压蒸出溶剂。柱色谱分离，以石油醚-丙酮梯度洗脱得到碘代衍生化的菝葜皂苷元。

3、菝葜皂苷元的硫酸酯化及其金属盐

在装有电动搅拌器与冷凝管的三颈瓶中加入新蒸吡啶和菝葜皂苷元。冷阱控温并开动搅拌器。在搅拌下，向吡啶溶液中滴加入氯磺酸(缓慢滴加)。滴加完全后，搅拌反应一段时间，然后将溶液倾倒至冰水中，加入无水乙醇，析出沉淀，抽滤得到固体制得硫酸酯化金属盐衍生物。搅拌反应完成后，加入氢氧化钠溶液调至_PH＝7，放冷析出沉淀，抽滤得到固体制得硫酸酯化菝葜皂苷元衍生物。

4、菝葜皂苷元的羟基消除成双键

在冷凝管的三颈瓶中加入二甲苯，菝葜皂苷元，NaHSO₄，一定温度下搅拌回流反应。反应完成后，减压蒸出溶剂，柱色谱分离，以石油醚-丙酮梯度洗脱得到脱去羟基成为双键的菝葜皂苷元。

5.菝葜皂苷元的羟基的氧化反应

向容器中加入菝葜皂苷元，丙酮，氩气保护下搅拌，冰浴温度滴加NBA。反应后加入Na₂SO₃水溶液，加入过量的水使其沉淀，过滤得产物。柱色谱分离，以石油醚-丙酮梯度洗脱得到羟基氧化的菝葜皂苷元。

6、菝葜皂苷元及其三位羟基衍生物的F环开环后生成的羟基被R′{R′为F，Cl，Br，I等卤族元素，＝O，SO₄，SOnR(R为脂肪链或者芳香族化合物等)，O-C(O)-R(R为脂肪族和芳香族化合物或为OH和O成金属盐等)，O-单糖或多糖，含N的生物碱类物质及其金属盐}取代

无水条件下，向容器中加入菝葜皂苷元或其三位羟基衍生物无水AlCl₃和无水乙醚，冰浴搅拌，滴入溶有LiAlH₄的无水乙醚，反应结束后，冰浴下加入10％的硫酸萃取分离有机层，水层用醚多次萃取，合并有机液，过无水碳酸钠干燥除水，减压蒸出溶剂，柱色谱分离，以石油醚-丙酮梯度洗脱得到F环开环的菝葜皂苷元或其三位羟基衍生物。所得开环产物，可通过以上1，2，3，4，5等所述反应继续进行反应得到其产物。

四、菝葜皂苷元衍生物的医药新用途

将菝葜皂苷元衍生物可与其他药物和一定的药物辅料制成固体或液体制剂，用于抗老年性痴呆，抗肿瘤，抗心脑血管疾病，抗抑郁，抗衰老，抗病毒，降血糖等临床应用及这些疾病的预防。

本发明的优点在于所制备的菝葜皂苷元纯度可达98％(高效液相色谱检测)，LOD≤0.5％，且工艺成本较低，提取纯化周期很短，适合大规模的生产知母皂苷元。

本发明与已有技术相比具有以下优点：

1、成本低

2、杂质含量低

3、工艺稳定，易于操作，易于实现

4、生产过程对环境无污染

五、本发明药物组合物可以通过药学领域常规配制技术和载体，配制成药物组合物，可以制备成片剂、胶囊、颗粒剂、滴丸、注射剂，口服液及外用药等剂型。还可以加入到茶或饮料中，制成保健茶或饮料。

本发明人发现菝葜皂苷元及其衍生物可以用于制药领域和保健品领域。

具体实施方式：

通过下面实施例详细说明本发明。但是应该理解这些实施例只是说明本发明，而不是在任何方面限制本发明的范围。

实施例1：菝葜皂苷元提取

(1)按知母药材于20％的乙醇的重量份数比例1∶6向知母药材中加入乙醇，常温浸泡12小时，然后加热至沸腾，保持沸腾1小时，之后滤渣取液；按所述知母药材于40％的工业乙醇的重量份数比例1∶8向知母药材中加入乙醇，常温浸泡14小时，然后加热至沸腾，保持沸腾2小时，之后滤渣取液；按所述知母药材于60％的工业乙醇的重量份数比例1∶10向知母药材中加入乙醇，常温浸泡20小时，然后加热至沸腾，保持沸腾4小时，之后滤渣取液；按所述知母药材于水中的重量份数比例1∶8向知母药材中加入水常温浸泡18小时，然后加热至沸腾，保持沸腾4小时，之后滤渣取液。

(2)将分别通过上述操作的提取液混合一起后，减压浓缩，直至不再有乙醇流出或无醇味为止。

(3)使浓缩过的液体通过经过活化的极性或非极性的大孔吸附树脂柱，使液体中的皂苷吸附到树脂上，并弃去流出液，再用水清洗树脂柱子，直至流出液颜色变浅，并弃出流出液，继用30％.60％.80％的乙醇清洗树脂柱，直到树脂柱子上的皂苷全部被洗脱下来为止，并收集洗脱液。

(4)按洗脱液的重量份数与硫酸的比例为3∶1，向洗脱液中加入硫酸，然后加热至沸腾，保持沸腾2小时，取出放凉，抽滤得固体物，将其放干，待用。

(5)将无水乙醇与二氯甲烷(两溶剂比例任意)的混合液加入至上述固体中，使其全部溶解，让其自然析出晶体，抽滤得出晶体，按其同样方法多次重结晶，最后得到白色晶体。

(6)将样品在减压条件下加热干燥。

实施例2：菝葜皂苷元提取

(1)按知母药材于20％的乙醇的重量份数比例1∶4向知母药材中加入乙醇，常温浸泡12小时，然后加热至沸腾，保持沸腾1小时，之后滤渣取液；按所述知母药材于40％的工业乙醇的重量份数比例1∶6向知母药材中加入乙醇，常温浸泡14小时，然后加热至沸腾，保持沸腾2小时，之后滤渣取液；按所述知母药材于60％的工业乙醇的重量份数比例1∶8向知母药材中加入乙醇，常温浸泡20小时，然后加热至沸腾，保持沸腾4小时，之后滤渣取液；按所述知母药材于水中的重量份数比例1∶6向知母药材中加入水，常温浸泡16小时，然后加热至沸腾，保持沸腾2小时，之后滤渣取液。

(3)使浓缩过的液体通过经过活化的极性或非极性的大孔吸附树脂柱，使液体中的皂苷吸附到树脂上，并弃去流出液，再用水清洗树脂柱子，直至流出液颜色变浅，并弃出流出液，继用20％，50％，90％的乙醇清洗树脂柱，直到树脂柱子上的皂苷全部被洗脱下来为止，并收集洗脱液。

(4)按洗脱液的重量份数与盐酸的比例为9∶1，向洗脱液中加入盐酸，然后加热至沸腾，保持沸腾2小时，取出放凉，抽滤得固体物，将其放干，待用。

(5)将无水乙醇与三氯甲烷(两溶剂比例任意)的混合液加入至上述固体中，使其全部溶解，让其自然析出晶体，抽滤得出晶体，按其同样方法多次重结晶，最后得到白色晶体。

(6)将样品在减压条件下加热干燥。

实施例3：菝葜皂苷元的衍生物的制备方法

1、菝葜皂苷元的甲酰化

a.在氩气保护下将1g菝葜皂苷元溶入重蒸干燥吡啶中，然后将70％甲酸(体积比)冰浴温度下滴加至上述吡啶溶液中，滴加完毕后室温搅拌。减压蒸出吡啶，向剩余物中加入水，乙酸乙酯萃取三次，有机相1N的氢氧化钠水洗，饱和食盐水洗，无水硫酸钠干燥过夜后，蒸出溶剂。柱色谱分离，以石油醚一丙酮梯度洗脱得到甲酯衍生化的菝葜皂苷元(1a)0.88g，收率为80％.

b.菝葜皂苷元的碳十六酸酯化反应

在氩气保护下将1g菝葜皂苷元溶入干燥二氯甲烷中，然后加入0.6g碳十六酸，0.1gDMAP与0.1gDCC，350C下搅拌，等反应完结束后，过滤出去未反应的DCC和反应后生成的DCU与DMAP等杂质。蒸出溶剂，将反应物研细，用乙醚溶解搅拌，静置过滤除去杂志，蒸出溶剂。柱色谱分离，以石油醚-丙酮梯度洗脱得到酯化衍生的菝葜皂苷元(1b)0.94g，收率为60％。

2、菝葜皂苷元的卤素取代

a.氯代：在氩气保护下将1g菝葜皂苷元溶入干燥二氯甲烷中，然后加入0.1g氯化锌，最后加入2ml亚硫酰二氯，室温下搅拌。用饱和的碳酸氢钠终止反应，有机层水洗，干燥，蒸干溶剂。柱色谱分离，以石油醚一丙酮梯度洗脱得到氯代衍生化的菝葜皂苷元(2a)0.47g，收率为45％。

b.溴代：在氩气保护下，搅拌加入40ml四氢呋喃溶解的1.5gNBS，之后滴加40ml四氢吠喃溶解的1.6g三苯基磷，室温下搅拌反应，减压蒸出溶剂，残渣用水和醚洗，蒸出溶剂。柱色谱分离，以石油醚一丙酮梯度洗脱得到溴代衍生化的菝葜皂苷元(2b)0.38，收率为33％。

c.碘代：向容器中加入1g菝葜皂苷元，1.13g三苯基磷，0.29g咪唑，0.82g碘与50ml甲苯，氩气保护下搅拌，120℃温度下回流。反应后，除去沉淀，加入Na₂S₂O₃水溶液，除去水层，保留有机层。有机层水洗，无水硫酸钠除水，减压蒸出溶剂。柱色谱分离，以石油醚一丙酮梯度洗脱得到碘代衍生化的菝葜皂苷元(2c)0.33g，收率为26％.

3、菝葜皂苷元的硫酸酯化及其金属盐

在装有电动搅拌器与冷凝管的三颈瓶中加入20ml新蒸吡啶和1g菝葜皂苷元。冷阱控温-20℃并开动搅拌器。在搅拌下，向吡啶溶液中滴加入2ml氯磺酸(缓慢滴加)。滴加完全后，搅拌反应16h，然后将溶液倾倒至冰水中，加入100ml无水乙醇，析出沉淀，抽滤得到固体制得硫酸酯化金属盐衍生物。搅拌反应完成后，加入氢氧化钠溶液调至Ph＝7，放冷析出沉淀，抽滤得到固体制得硫酸酯化菝葜皂苷元衍生物(3)0.83g，收率为70％。

4、菝葜皂苷元的羟基消除成双键

在冷凝管的三颈瓶中加入二甲苯，1.467g菝葜皂苷元，0.6gNaHSO₄，135℃温度下搅拌回流反应。反应完成后，减压蒸出溶剂，柱色谱分离，以石油醚一丙酮梯度洗脱得到脱去羟基成为双键的菝葜皂苷元(4)0.38g，收率为40％。IR图谱特征B带吸收大于C带，得25位甲基构型为S.

Compd. Yield/％ mp，Ms M/Z[M+H]⁺ ¹³C-NMR(300MHz，CDCl₃)δ

1a 80％ 445 14.45，16.15，16.60，20.98，23.93，25.10，25.86，26.03，26.44，27.16，30.68×2，31.83，35.10，35.37，35.37，37.31，40.13，40.33，40.76.42.22，56.48，62.15，65.23，71.06，81.10，109.86，160.101b 60％ 655 14.30，15.50，16.10，16.32，20.88，23.93，25.10，25.86，26.10，26.41，27.05，(29.00～29.58)×14，30.65，30.79，31.91，34.04，34.98，35.29，40.21，40.62，42.11，56.36，62.06，65.07，70.36，80.98，109.71，173.412a 45％ 436 14.26，15.98，16.41，20.83，23.84，25.70，25.88，26.36，26.4927.01，27.73，29.88，31.66，33.46，36.44，36.81，39.79，40.1840.24，40.59，42.56，56.34，56.4462.03，65.06，80.91，109.652b 69％ 481 14.53，16.24，16.68，21.13，24.24，25.38，25.98，26.16，26.6626.68，27.28，30.99，31.30，31.95，34.4435.34，37.88，40.2540.45，40.87，42.33，52.43，56.60，62.31，65.33，81.19，109.912c 30％ 527 14.30，16.10，16.32，20.88，23.93，25.10，25.86，26.10，26.4127.05，29.36，30.65，30.79，31.91，34.04，34.98，35.29，40.1140.21，40.62，42.11，48.26，56.36，62.06，65.07，80.98，109.713 70％ 497 14.91，15.98，16.41，20.83，23.84，25.70，25.88，26.36，26.4927.01，27.73，29.99，31.66，34.46，36.44，36.81，39.79，40.1840.24，40.59，42.56，56.34，62.03，65.06，75.44，80.91，109.654 40％ 399 14.30，16.10，16.32，20.88，23.93，25.10，25.86，26.10，26.4127.05，30.65，30.79，31.91，34.04，34.98，35.29，40.11，40.2140.62，42.11，56.36，62.06，65.07，80.98，109.71，127.08，132.28

实施例4：菝葜皂苷元衍生物的药理作用实验：

1、配药

母药浓度为10-2，依次稀释为10-3，10-4，10-5，对应终浓度为10-5，10-6，10-7，10-8a 1a，1b，2a，2b，2c，4的溶剂为氯仿，3的溶剂为DMSO。

2、人脐静脉内皮细胞株的培养及处理

人脐静脉内皮细胞株自实验室获得，加入含10％小牛血清的DMEM培基制成细胞悬液，分种于培养瓶中置CO₂(5％)培养箱中静置培养(37℃)。实验前24h换用含2％小牛血清的DMEM使细胞同步化，然后按实验要求加入不同的药物和AngIIo①对照组(Con组)：用10％DMEM培养液孵育内皮细胞；②AngII损伤组：用含1umol/LAngII的培养液孵育内皮细胞24h；③AngII+药物组：先加入各药物孵育1h后，加入1mol/LAngII继续培养24h；④空白组(Blank组)：只加2％小牛血清的DMEM培养液；⑤氯仿对照组：只加入和药物溶剂相当的氯仿；⑥DMSO对照组：只加入和药物溶剂相当的DMSO。

3、MTT

MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒根据说明使用。以每孔100umol种96孔板，至10000/孔密度，各组内皮细胞给药处理后，每孔加入10微升MTT溶液，在细胞培养箱内继续孵育4小时。每孔加入100微升Formanzan溶解液，在细胞培养箱内再继续孵育。直至在普通光学显微镜下观察发现Formazan全部溶解。用酶标仪595nm波长测定OD值。

4、β一半乳糖苷酶染色

β一半乳糖苷酶染料依据试剂盒(碧云天)进行配制。以每孔1ml种12孔板.各组内皮细胞给药处理后，弃去上清，PBS冲洗1次，每次3min，4％多聚甲醛室温固定15min，PBS冲洗3次，每次3min，X-半乳糖苷酶(X-gal)染液(染液含20mmol/L X-gal、40mmol/L醋酸-磷酸钠、5mmol/L铁氰化钾、5mmol/L亚铁氰化钾、15mmol/L氯化钠、2mmol/L氯化镁)于37℃染色36h，显微镜下观察，蓝色为β-半乳糖苷酶阳性染色。随机挑选2个高倍视野，计数全视野细胞中阳性细胞的个数计算阳性率。

实验结果：(均数±标准差，N＝3)

“——”为数据缺失，为药物细胞毒作用过大，导致细胞死亡脱落。两种药物溶媒在最高浓度均对MTT和β-gal染色结果无明显影响。

结果：综合MTT和β-gal染色结果，以上各化合物皆具有抗衰老作用。

实施例5：菝葜皂苷元衍生物片剂

菝葜皂苷元衍生物400g，菝葜皂苷元80g，淀粉40g，10％的淀粉浆24g，干淀粉23g，硬脂酸镁3g，制成1000片。

将菝葜皂苷元衍生物400g、菝葜皂苷元衍生物40g过80目筛，与淀粉混匀，加淀粉浆制成软材，以14目筛制粒后，置70℃-80℃干燥后于12目筛整粒，加入淀粉及硬脂酸镁混匀后，压片，即得。

实施例6：菝葜皂苷元衍生物胶囊

菝葜皂苷元衍生物300g、知母总皂苷提取物100g，10％淀粉浆适量，制成硬胶囊1000粒。取上述药物过80目筛，将10％淀粉浆与药物混合制成软材后，过14目筛制粒，与70℃干燥至水分3％以下，填入空胶囊中，即得。

实施例7：菝葜皂苷元衍生物滴丸

菝葜皂苷元衍生物1份、PEG60009份。取PEG6000在油浴上加热至约135℃，加入菝葜皂苷元衍生物洗粉，不断搅拌使全部熔融，趁热过滤，置贮液瓶，135℃下保温，用管口内、外分别为9.0mm，9.8mm的滴管滴制，滴速80滴/min，滴入含43％煤油的液体石蜡冷却液中，冷凝成丸，以液体石蜡洗丸，至无煤油味，用毛边纸吸去粘附的液体石蜡，即得。

实施例8：菝葜皂苷元衍生物注射用粉针剂

菝葜皂苷元衍生物90g知母总皂苷提取物20g，甘露醇100g.在无菌条件下将处方量取药品和支持剂甘露醇，加注射用水，加热溶解，加注射用活性炭，加热滤过，-40℃分装1000支，冷冻后，升温、冻干，即得。

实施例9：菝葜皂苷元衍生物口服液

菝葜皂苷元衍生物8.8g.知母总皂苷提取物2.0g，甘露醇10.0g，制成1000mI。将提取物和支持剂甘露醇，加适量水，加热溶解，加入单糖浆，苯甲酸钠，再加适量的水至1000ml，冷藏，过滤，封装于10ml安瓶中，以100℃免菌30分钟，即得。

实施例10：菝葜皂苷元衍生物颗粒剂：

取菝葜皂苷元衍生物200g、淀粉200g、糊精100g、乙醇5ml，上述组分混合后，过筛，干燥，得到颗粒剂。

实施例11：菝葜皂苷元衍生物注射剂：

菝葜皂苷元衍生物10g、氯化钠0.9g、氢氧化钠溶液适量盐酸溶液适量注射用水至100ml，

按处方量称取各组分，加注射用水40ml，搅拌至完全溶解后，加入0.1％活性炭，60℃保温搅拌30min，趁热过滤，除去沽性炭，补加汪封至全量。用0.45拼m滤膜粗滤，再用0.22μm的微孔滤膜过滤。灌封疹热过滤，除去活性炭，补加注射用水100℃流通蒸气中灭菌3Omin，即得菝葜皂苷元衍生物注射液。

实施例12：外用制剂：

菝葜皂苷元衍生物10g卡波普9403g甘油20g三乙醇胺适量蒸馏水至100ml即得。取卡波姆3g加适量水溶胀后，加入甘油，研磨使润湿，加三乙醇胺研磨成透明凝胶基质。另取菝葜皂苷元衍生物，用适量水溶解，搅匀。将上述药液加入凝胶基质中，边加边研磨，加蒸馏水至1的ml，继续搅拌均匀，得透明凝胶剂。

实施例13：冻干制剂：

菝葜皂苷元衍生物10g、氯化钠0.9、氢氧化钠溶液适量、盐酸溶液适量，注射用水至100ml，按处方量称取各组分，加注射用水40ml，搅拌至完全溶解后，加入0.1％活性炭，60℃保温搅拌30m in，趁热过滤，除去活性炭，补加注射用水至全量犷用0.45μm。滤膜粗滤，再用。0.22μm的微孔滤膜过滤，冷冻干燥，即得注射用菝葜皂苷元衍生物。

Claims

1.知母中菝葜皂苷元及其衍生物，其特征在于，结构通式如式(I)、(II)所示：

式(I)中，R为F，Cl，Br，I，H，SO₄，SO_nR₂，O-C(O)-R₁，式(II)中，R为F，Cl，Br，I，H，＝O，SO₄，SO_nR₂，O-C(O)-R₁，O-单糖或多糖，含N的生物碱类物质及其金属盐；R′为F，Cl，Br，I，H，＝O，SO4，SO_nR₂，O-C(O)-R₁，O-单糖或多糖，含N的生物碱类物质及其金属盐，R1为脂肪族和芳香族化合物或为OH和O成金属盐，R2为脂肪链。

2.知母中菝葜皂苷元及其衍生物的制备方法，其特征在于：用含水乙醇或和水提泡知母药材，获得总皂苷提取液；将提取液混合后，减压浓缩；将浓缩液通过经过活化的极性或非极性的大孔吸附树脂柱，弃去流出液，再用水清洗树脂柱子，并弃去流出液，继续用20％-90％的乙醇清洗树脂柱，并收集洗脱液；按洗脱液的重量份数与矿酸的比例为10∶1-1∶1，向洗脱液中加入酸，然后加热至沸腾，再取出放凉，得固体物；将非极性溶剂的混合液加入至上述固体中，使其全部溶解，让其自然析出晶体，抽滤得出晶体，按其同样方法多次重结晶，最后得到白色晶体；干燥样品。

3.根据权利要求2所述的知母中菝葜皂苷元及其衍生物的制备方法，其特征在于：所述的总皂苷提取液通过如下方法获得：按知母药材于20％-80％工业乙醇的重量份数比例1∶4～1∶6向知母药材中加入乙醇，常温浸泡，再加热至沸腾后滤渣取液；按所述知母药材于20％-80％工业乙醇的重量份数比例1∶6～1∶8向知母药材中加入乙醇，常温浸泡，然后加热至沸腾后滤渣取液；按所述知母药材于20％-80％工业乙醇的重量份数比例1∶8～1∶10向知母药材中加入乙醇，常温浸泡，再加热至沸腾后滤渣取液；按所述知母药材于水中的重量份数比例1∶6～1∶10向知母药材中加入水，常温浸泡，再加热至沸腾后滤渣取液。

4.根据权利要求2所述的知母中菝葜皂苷元及其衍生物的制备方法，其特征在于：所述的乙醇为工业乙醇。

5.根据权利要求2所述的知母中菝葜皂苷元及其衍生物的制备方法，其特征在于：所述的矿酸优选盐酸、硫酸。

6.根据权利要求2所述的知母中菝葜皂苷元及其衍生物的制备方法，其特征在于：所述的非极性溶剂优选无水乙醇、氯仿、二氯甲烷中的两种。

7.菝葜皂苷元及其衍生物在制备抗老年性痴呆，抗衰老，抗抑郁，抗癌药物及保健品中的应用。

8.菝葜皂苷元及其衍生物可以和药学上可接受的载体结合制成临床上可接受的片剂、胶囊、颗粒剂、滴丸、注射剂，口服液及外用药剂型。