CN102065858A

CN102065858A - 使用唑尼沙胺和阿坎酸治疗阿尔茨海默病和相关病症的组合组合物

Info

Publication number: CN102065858A
Application number: CN2009801227024A
Authority: CN
Inventors: 丹尼尔·科恩; 伊利亚·楚马科夫; 谢尔盖·纳比罗钦; 奥克萨纳·盖拉斯门科; 娜莎莉·肖莱
Original assignee: Pharnext SA
Current assignee: Pharnext SA
Priority date: 2008-04-29
Filing date: 2009-04-29
Publication date: 2011-05-18
Anticipated expiration: 2029-04-29
Also published as: JP5933258B2; US20110269764A1; US20190298698A1; AU2009242113B2; US10350195B2; AU2009242113A1; US10874644B2; US20160136136A1; CN104127434B; IL208981B; CN104127434A; IL264736B; CN102065858B; CA2722295A1; NZ589304A; IL208981A0; EA024147B1; ES2764480T3; WO2009133128A1; ES2764480T8

Abstract

本发明涉及用于治疗阿尔茨海默病和相关病症的组合物和方法。更具体来说，本发明涉及调节突触功能以治疗所述疾病的组合疗法。

Description

使用唑尼沙胺和阿坎酸治疗阿尔茨海默病和相关病症的组合组合物

本发明涉及用于治疗阿尔茨海默病(AD)和相关病症的组合物和方法。

AD是原型皮层性痴呆，其特征为可归因于与皮层相关区域有关的记忆损伤并伴有言语困难(语言障碍，其中存在语言和语言理解受损)、运动障碍(在不存在运动或感觉缺损的情况下不能协调和执行某些有意的运动和姿势)以及认识失能(不能识别物体、人、声音、形状或气味)。也可能涉及特殊症状例如痉挛性截瘫(影响下肢的虚弱症)(1-4)。

阿尔茨海默病的发病率随着年龄急剧增加。目前，AD是最常见的痴呆症病因。它的临床特征是认知功能的整体下降，其缓慢发展，并最终使患者卧床不起、失禁并依赖于监护护理。平均来说，死亡发生在诊断后9年(5)。

阿尔茨海默病的发病率随着年龄急剧增加。联合国人口规划项目估计，到2050年超过80岁的人口数量将达到3亿7千万。目前，据估计年龄超过85岁的人中有50％患有AD。因此，在50年内，全世界将有超过1亿人患有痴呆症。需要经常性护理和其他服务的人口的巨大数量，将严重影响医疗、财政和人力资源(6)。

记忆损伤是疾病的早期特点，并涉及情景记忆(日常事件的记忆)。在疾病后期涉及语义记忆(言语和视觉意义的记忆)。相比较而言，工作记忆(涉及用于暂时储存和操作信息的结构和过程的短期记忆)和程序记忆(无意识记忆，是技术和过程的长期记忆)保留到更晚。随着疾病发展，出现了语言受损、视觉和空间缺损、认识失能和运用失能等其他特征。

阿尔茨海默病的经典描述具有足够的特征性，允许鉴定约80％的病例(7)。然而，确实存在着临床异质性，这不仅对于临床管理来说是重要的，而且为功能不同形式的特异性药物治疗提供了进一步的暗示(8)。

AD的病理标志物包括含有β-淀粉样蛋白(Aβ)的淀粉样蛋白斑块、含有Tau的神经原纤维缠结(NFT)以及神经元和突触机能障碍和丧失(9-11)。最近十年，关于AD的病因已经提出了两种主要假说：“淀粉样蛋白级联假说”，其陈述神经变性过程是由淀粉样蛋白前体蛋白(APP)的异常加工所触发的一系列事件(12)，以及“神经元细胞骨架退化假说”(13)，其提出细胞骨架改变是触发事件。解释AD发展的最广泛接受的理论仍然是淀粉样蛋白级联假说(14-16)，AD研究人员主要聚焦于确定成为与Aβ蛋白相关的毒性的基础的机制。相比之下，由于基础和实践两方面的考虑，与淀粉样蛋白相比，Tau蛋白受到的制药工业的关注要少得多。此外，突触密度改变与其他两者相比是与认知受损最相关的病理损伤。研究显示，淀粉样蛋白病理学似乎以神经递质特异性的方式发展，其中胆碱能末梢表现得最易受伤害，其次是谷氨酸能末梢，最后是GABA能末梢(11)。

发明简述

本发明的目的是提供用于治疗AD和相关病症的新的治疗手段。

本发明人已经鉴定到参与AD发生的分子途径，并为开发改善AD和相关病症的新疗法、特别是开发使用新的或以前在其他适应症中使用过的已有分子的组合疗法，提供了新的靶。更具体来说，本发明人已经鉴定了几种药物，其单独或组合时能够有效影响这种途径，并代表了用于治疗AD和相关病症的新的和有效的疗法。

因此，本发明提供了用于治疗AD疾病和相关病症的新的组合物和方法。

更具体来说，本发明涉及适合用于在需要的对象中治疗阿尔茨海默病或相关病症的组合物，其中所述组合物包含改善突触功能的药物。

本发明的另一个目的涉及适合用于在需要的对象中治疗阿尔茨海默病或相关病症的组合物，其中所述组合物包含至少两种改善突触功能的药物的组合，用于组合、单独或顺序给药。

更具体来说，改善突触功能的一种或多种药物与由选自下列的基因编码的蛋白结合或调节该蛋白的活性：ABAT、ABI1、ABL1、ADORA2A、ADORA2B、AKT、AMPK、ANKRA、APBA1、ARHGAP26、ATG5、BASSOON、BDNF、BECLIN1、BIN1、BK通道(KCNMA1、KCNMB1)、CACNA1C、CACNA2D3、CACNA2D4、CADPS2、钙调磷酸酶、钙调蛋白、CASK、CASR、CAST、CBL、CDC2、CDC42、CDC42BPB、CDC42EP3、CDH13、CDH2、CDK5、CITRON、CNGB3、皮层肌动蛋白、CRAM、CREB、CRMP、CTNNB1、DAB1、DCC、DEPDC2、DHFR、DLG2、DYN1、DYN3、EDNRA、内吞蛋白、EPHA3、EPHBR、EPHEXIN、EPHRINA、EPHRINB、ERBB4、ERK1、ERK2、FES、FYN、GABBR1、GABBR2、GABRA2、GABRG2、GAT1、GLRA1、GEPHYRIN、GIPC1、GIPC2、GLUD1、GRANUPHILIN、GRIA2、GRIA3、GRID1、GRID2、GRIK1、GRIK2、GRIN2B、GRIN3A、GRIP、GRM3、GRM5、GRM6、GRM7、GRM8、HOMER、HTR1B、HTR1D、KALIRIN、KCNA2、KCHIP1、KCHIP2.2、KCND2、KCNJ3、KCNJ12、KTN1、KYNU、LYN、MAML3、MINT1、MUC1、MUNC13、MUNC18A、MYO6、MYOL、NAV1、NBEA、NCAM1、NCK1、NCK2、NETRIN1、NFKB1、NGEF、NGF、NGFR、NIL16、NLGN1、NOC2、NOS1、NOTCH1、NOTCH2、NOTCH3、NPC1、NPC2、NPIST、NRG3、NRP1、NRP2、NRX3、NTF3、NTF5、NWASP、OPCML、OPRK1、PAK6、PAK7、PAR1、PARK2、PDE11A、PDE3A/3B、PDE4A/4B/4D、PI3K、PIAS1、PICALM、PICK1、PIP5K、PKA、PKCA、PLD2、PLEXA1、PP1C、PPFIBP1、PRKG1、PSD95、PTN、PTPRF、PYK2、RAB3B、RABPHILIN、RAC1、RAP1、RAS、RASGRF2、RBPJ、REELIN、RGNEF、RHOA、RHOG、RIM2、RIMS1、RIMS2、ROBO2、ROCK2、RPH3AL、SACM1L、SAPAP、SCN1A、SCN1B、SEC24D、SEMA3A、SEMA3C、SEMA3E、SEMA4C、SIAH1A、SLC12A1、SLC12A2、SLC12A5、SLC1A2、SLC6A1、SLC6A18、SLC9A1、SLIT1、SNAP25、SORBS2、SRC、SRGAP3、STX2、STXBP6、SUM1、SV2C、突触泡磷酸酶、突触融合蛋白1A、SYT12、TACE、TBR1、TRIO、TRKB、TROMBIN、TSPO、UBE2A、ULK4、UNC13C、UNC5C、VAMP2、VAMP5、VELI、粘着斑蛋白、WASPIP、WAVE、WWOX、YAP和YES1。

这些药物的具体和优选实例包括但不限于选自阿坎酸、阿仑膦酸盐、阿芬太尼、阿米洛利、氨氯地平、阿加曲班、氨曲南、巴氯芬、布克力嗪、布美他尼、丁丙诺啡、利多卡因、氯唑沙宗、西洛他唑、西那卡塞、达沙替尼、地西卢定、二羟丙茶碱、依来曲普坦、麦角胺、氟硝西泮、磷苯妥英、伊马替尼、酮替芬、米力农、硝普纳、哌加他尼、喷他佐辛、苯巴比妥、苯乙双胍、普瑞巴林、丙硫氧嘧啶、磺胺异噁唑、他达拉非、替马西泮、特比萘芬、噻加宾、托吡酯、氨苯喋啶、氨己烯酸和唑尼沙胺或其组合的化合物。

在具体实施方案中，本发明的组合物进一步包含至少一种调节血管发生的药物，用于组合、单独或顺序使用。

可替选地或此外，本发明的组合物还可以包含至少一种调节细胞应激反应的药物，用于组合、单独或顺序使用。

典型情况下，本发明的组合物进一步包含可药用的载体或赋形剂。

本发明的另一个目的在于用于治疗阿尔茨海默病或相关病症的药物的生产方法，所述方法包括测试候选药物对突触功能的活性以及筛选改善突触功能的候选药物的步骤。

本发明还涉及用于治疗阿尔茨海默病或相关病症的组合物的生产方法，所述方法包括制备调节突触功能的药物与调节血管发生或细胞应激反应的药物的组合，以及配制所述药物组合，用于将其同时、单独或顺序给药于需要的对象。

本发明还涉及治疗阿尔茨海默病或相关病症的方法，所述方法包括向需要的对象同时、单独或顺序给药改善突触功能的一种或多种药物的组合。

本发明还涉及治疗阿尔茨海默病或相关病症的方法，所述方法包括向需要的对象同时、单独或顺序给药调节突触功能的药物和调节血管发生的药物和/或调节细胞应激反应的药物。

本发明还涉及改善突触功能的药物用于制造治疗阿尔茨海默病或相关病症的药物中的用途。

本发明还涉及至少两种改善突触功能的药物的组合用于制造治疗阿尔茨海默病或相关病症的药物中的用途，其中所述至少两种药物一起、单独或顺序给药。

正如在本申请中讨论的，上述疗法以及组合疗法为在人类对象中治疗AD提供了新的和有效的手段。

附图说明

图1：在β-淀粉样蛋白中毒的大鼠原初皮层神经元培养物中所选药物对轴突长出的影响。p＜0.01；

p＜0.00001：与介质显著不同。^*：p＜0.05；^****：p＜0.0001：与Aβ_25-35显著不同。双侧Student′st检验。

图2：在β-淀粉样蛋白中毒的大鼠原初皮层神经元培养物中苯乙双胍药物对轴突长出的影响。

p＜0.01：与介质显著不同。^*：p＜0.05；^**：p＜0.001：与Aβ_25-35显著不同。双侧Student′s t检验。

Aβ_25-3520μM产生显著中毒，与介质处理的神经元相比高于25％(图1-A和B和图2，红色)。这种中毒被10ng/ml的BDNF有效地阻止，其被当作神经保护作用的阳性对照。

这种中毒也被阿坎酸(图1A)或唑尼沙胺(图1B)和苯乙双胍(图2)药物显著阻止。

发明详述

本发明提供了用于治疗AD或相关病症的新的治疗手段。本发明公开了药物或药物组合的新用途，它们允许有效校正所述疾病，并可以用于患者治疗。

术语“AD相关病症”是指阿尔茨海默病(AD)、AD型老年痴呆(SDAT)、帕金森病、路易体痴呆、血管性痴呆、轻度认知功能障碍(MCI)、年龄相关记忆损伤(AAMI)以及与衰老相关的问题、脑炎后帕金森综合征、ALS和唐氏综合征。

在本文中使用时，障碍的“治疗”包括由障碍引起的症状的治疗、阻止、预防、延迟或减少。术语治疗具体来说包括疾病进展和相关症状的控制。

术语“改善”当指称突触功能时，包括与对象中现有的功能相比突触功能的任何增加。这样的改善可以包括恢复、即到达正常水平，或较低的但仍然足以改善患者状况的增加。这样的改善可以使用已知的生物学测试来评估或验证，例如在实验部分中描述的。

此外，在本发明的上下文中特定化合物的名称意味着不仅包括具体命名的分子，而且包括其任何可药用的盐、水合物、酯、醚、异构体、外消旋物、缀合物或前体药物。

术语“组合”是指其中至少两种或更多种药物被共同给药于对象以引起生物学效应的疗法。在本发明的组合疗法中，至少两种药物可以一起或单独地、在同时或顺序给药。此外，至少两种药物可以通过不同的途径和方案给药。因此，组合的药物尽管可以配制在一起，但它们也可以单独配制。

正如上面所讨论的，本发明涉及使用改善突触功能的药物或药物组合在需要的对象中治疗阿尔茨海默病或相关病症的组合物和方法。

通过全面整合覆盖了描述阿尔茨海默病的不同方面的细胞生物学研究、表达情况实验和遗传关联性研究结果的实验数据，以及细胞信号传导和功能途径中存在的联系，本发明人已经揭示，突触功能代表了在患有AD的对象中发生改变的重要机制。位于所述功能网络中并与阿尔茨海默病有关的基因通过下述标准进行选择：

(1)-与作为原因造成了阿尔茨海默病的家族性病例的基因(APP、ApoE、早老素、tau蛋白)直接相互作用，

(2)-通过标准(1)选择的基因的功能性配偶体，

(3)-通过标准(2)选择的基因的最接近的功能性配偶体。

通过该过程，本发明人能够确定，负责突触功能的网络是在阿尔茨海默病中起作用的主要功能网络。

更具体来说，本发明人确定了突触丧失是阿尔茨海默病的功能相关的标志，其最终导致了进行性认知降低、记忆丧失和痴呆症。重要的是，突触丧失与表现为神经原纤维缠结或淀粉样蛋白斑块沉积的发生的其他AD-特异性细胞病变标志物相比，与阿尔茨海默病特征性的认知缺损的相关性更好。因此，突触组织和突触塑性代表了在阿尔茨海默病情况下治疗性干预的重要靶。

APP蛋白是轴突运输的并在突触前末梢中加工，导致Aβ在突触中的高度积累。Aβ42寡聚体以及淀粉样蛋白斑块本身对于抑制长期增效作用来说是重要的，并是在AD患者中造成记忆损伤的主要原因。

我们的数据整合过程揭示出一组涉及AD中突触畸变的基因，它们在形式上可被分成三个主要功能组：参与突触后致密物(“PSD”)的组织和突触后膜处神经信号正确传导的蛋白；确保神经递质释放的蛋白；以及参与轴突生长和突触结构的发育成熟的蛋白。

因此，在具体实施方案中，本发明涉及了组合物和方法，其中使用了改善参与突触后致密物的蛋白的活性的药物。

兴奋性突触的传入部分——突触后致密物，由支架蛋白与在广泛的认知功能包括记忆形成和学习中起作用的神经递质受体的紧密整合的网络构成。

在通过我们的研究所鉴定到的基因中，DLG2基因编码MAGUK家族蛋白，其在成簇的膜结合受体、细胞粘附分子和基于肌动蛋白的细胞骨架之间产生界面。我们还鉴定到了一大组谷氨酸和生长因子受体，其与兴奋性突触处的DLG2蛋白或DLG2/PSD95蛋白复合物直接相互作用，即由早老素加工和功能性调控的ErbB4和TrkB受体(17-18)、离子型谷氨酸受体的红藻氨酸型(GRIK2)和NMDA型(GRIN3A、GRIN2B)、δ型(GRID1、GRID2)谷氨酸受体和G-蛋白偶联的代谢型谷氨酸受体(GRM3、GRM7和GRM8)。此外，我们鉴定到了几种参与突触受体的下游信号传导的效应/调节蛋白——citron、Rho/Rac效应蛋白、RASGRF2关联AMPA受体，用于激活RAS/ERK激酶、PARK2和YES1激酶。

通过我们的分析揭示的其他AD相关的功能重要基因包括突触前γ-Neurexin(NXR3)和突触后neuroliginl(NLGN1)蛋白，它们形成功能性复合物，参与兴奋性突触处突触前膜和后膜的动态共调节。

一般来说，可能涉及阿尔茨海默病的PSD蛋白群体被参与兴奋性谷氨酸能突触的组构的受体所富集；我们的数据开采筛选只检测到了几种抑制性神经元受体-GABA(A)和GABA(B)。

在另一个具体实施方案中，本发明涉及了组合物和方法，其中使用了改善参与神经递质优选在突触前膜处释放的调节的蛋白的活性的药物。

神经递质在受限的、高度特化的突触前质膜的活性区域处的释放由动作电位启动，并受到电压依赖性、钙选择性的Ca_v通道(神经递质释放的正调节物)和MaxiK通道、大的传导性、电压和钙敏感性钾通道(神经递质释放的负调节物)的组合和相反作用的控制。两种类型的通道都被我们的分析选为用于治疗阿尔茨海默病的相关治疗靶。此外，突触前膜处神经递质的释放可以受到影响PRKG1激酶和/或突触前GABA(B)受体活性的药物的同时施加的调节。

我们的分析还揭示了参与神经递质释放结构的组构、负责突触小泡的成熟、停靠以及与构成活性区的蛋白的融合的一组蛋白——参与突触小泡融合的STX2和STXBP6蛋白，突触小泡的成熟和引发所必需的BIN1、RAB3B、UNC13C蛋白，以及RIMS1/2支架蛋白。通过我们的分析鉴定到的蛋白代表了直接参与突触小泡的胞吐/胞饮和再循环，以及它们的功能活性依赖性调节物的两类结构蛋白。

在另一个具体实施方案中，本发明涉及组合物和方法，其中使用了改善参与轴突生长和导向的调控的蛋白的活性的药物。

参与轴突生长和导向的调控的蛋白允许神经元前体细胞和轴突朝向适合的目的地移动，以确保正确的位置和连通；它们也参与新建立的突触的发育成熟以及AD疾病中轴突和突触的降解。这些过程对于执行认知功能发挥了基础作用，并且似乎对于Aβ沉积的毒性效应极为易感。

轴突生长和导向的连续步骤受到细胞外或膜连接的Netrin、Semaphorin、Ephrins、DLL和Slit分子及其相应的功能受体的组合作用的紧密控制，所述功能受体中的大部分是通过我们的数据开采手段揭示的。大多数轴突生长受体的活化的功能性结果与它们差异性调节小的GTPase RhoA、Rac1和Cdc42的活性的能力紧密相关，其中RhoAGTPase主要负责轴突退缩和生长锥萎陷(19)。

在所选的基因中，DCC轴突导向Netrin受体参与神经元吸引和排斥两者，而UNC5C netrin受体更倾向于具有神经元排斥活性(20)；semaphorin和ephrin在神经系统发育过程中介导生长锥萎陷和排斥，在成年人CNS中的突触塑性方面发挥重要作用(21-25)。Slit蛋白同时参与轴突排斥和分支这两种紧密相关的过程，并调节netrin受体的活性(26)。最后，Notch受体似乎通过RBPJ依赖性和RBPJ非依赖性两种控制肌动蛋白细胞骨架组构的ABL1/DAB1/TRIO途径影响轴突导向(27)。

在本发明中，本发明人提出了新的组合物，其可用于改善在阿尔茨海默病和其他神经变性疾病中改变的突触功能。在特定实施方案中，本发明的组合物和方法使用了药物，所述药物通过它们与如上列出的一个基因或蛋白的相互作用或调节如上列出的一个基因或蛋白来改善突触功能。

更具体来说，本发明的组合物包含一种药物或多种药物，它们通过结合由选自下列的基因编码的蛋白或调节这些蛋白的活性，来改善突触功能：ABAT、ABI1、ABL1、ADORA2A、ADORA2B、AKT、AMPK、ANKRA、APBA1、ARHGAP26、ATG5、BASSOON、BDNF、BECLIN1、BIN1、BK通道(KCNMA1、KCNMB1)、CACNA1C、CACNA2D3、CACNA2D4、CADPS2、钙调磷酸酶、钙调蛋白、CASK、CASR、CAST、CBL、CDC2、CDC42、CDC42BPB、CDC42EP3、CDH13、CDH2、CDK5、CITRON、CNGB3、皮层肌动蛋白、CRAM、CREB、CRMP、CTNNB1、DAB1、DCC、DEPDC2、DHFR、DLG2、DYN1、DYN3、EDNRA、内吞蛋白、EPHA3、EPHBR、EPHEXIN、EPHRINA、EPHRINB、ERBB4、ERK1、ERK2、FES、FYN、GABBR1、GABBR2、GABRA2、GABRG2、GAT1、GLRA1、GEPHYRIN、GIPC1、GIPC2、GLUD1、GRANUPHILIN、GRIA2、GRIA3、GRID1、GRID2、GRIK1、GRIK2、GRIN2B、GRIN3A、GRIP、GRM3、GRM5、GRM6、GRM7、GRM8、HOMER、HTR1B、HTR1D、KALIRIN、KCNA2、KCHIP1、KCHIP2.2、KCND2、KCNJ3、KCNJ12、KTN1、KYNU、LYN、MAML3、MINT1、MUC1、MUNC13、MUNC18A、MYO6、MYOL、NAV1、NBEA、NCAM1、NCK1、NCK2、NETRIN1、NFKB1、NGEF、NGF、NGFR、NIL16、NLGN1、NOC2、NOS1、NOTCH1、NOTCH2、NOTCH3、NPC1、NPC2、NPIST、NRG3、NRP1、NRP2、NRX3、NTF3、NTF5、NWASP、OPCML、OPRK1、PAK6、PAK7、PAR1、PARK2、PDE11A、PDE3A/3B、PDE4A/4B/4D、PI3K、PIAS 1、PICALM、PICK1、PIP5K、PKA、PKCA、PLD2、PLEXA1、PP1C、PPFIBP1、PRKG1、PSD95、PTN、PTPRF、PYK2、RAB3B、RABPHILIN、RAC1、RAP1、RAS、RASGRF2、RBPJ、REELIN、RGNEF、RHOA、RHOG、RIM2、RIMS 1、RIMS2、ROBO2、ROCK2、RPH3AL、SACM1L、SAPAP、SCN1A、SCN1B、SEC24D、SEMA3A、SEMA3C、SEMA3E、SEMA4C、SIAH1A、SLC12A1、SLC12A2、SLC12A5、SLC1A2、SLC6A1、SLC6A18、SLC9A1、SLIT1、SNAP25、SORBS2、SRC、SRGAP3、STX2、STXBP6、SUM1、SV2C、突触泡磷酸酶、突触融合蛋白1A、SYT12、TACE、TBR1、TRIO、TRKB、TROMBIN、TSPO、UBE2A、ULK4、UNC 13C、UNC5C、VAMP2、VAMP5、VELI、粘着斑蛋白、WASPIP、WAVE、WWOX、YAP和YES1。

所有上面列出的基因和蛋白的序列可以从基因文库获得，并可以通过本技术领域已知的技术分离。此外，这些基因和蛋白的活性可以通过其本身在本技术领域中已知的技术来评估，正如在实验部分中讨论的。

本发明还描述了可用于调节这些靶基因和蛋白的药物。本发明公开了单独但优先组合地调节上述途径并可用于治疗所述疾病的特定药物的鉴定和活性。具体来说，我们鉴定了在文献中已经存在但在人类对象中正用于治疗其他疾病的小分子。

就此而言，在最优选实施方案中，本发明的组合物至少包含ABAT的抑制剂(优选为氨己烯酸)；和/或ABL1的抑制剂(优选为伊马替尼)；和/或ADORA2B的调节剂(优选为二羟丙茶碱)；和/或AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和/或CACNA1C的抑制剂(优选为氨氯地平)；和/或CACNA2D3的抑制剂(优选为普瑞巴林)；和/或CASR的调节剂(优选为西那卡塞)；和/或CNGB3的调节剂(优选为阿米洛利)；和/或DHFR的抑制剂(优选为氨苯喋啶)，和/或EPHA3的抑制剂(优选为达沙替尼)，和/或EDNRA内皮素受体的拮抗剂(优选为磺胺异噁唑)，和/或GABBR2和谷氨酸能受体的调节剂(优选选自巴氯芬和阿坎酸)，和/或GABRA2的调节剂(优选选自苯巴比妥和氨曲南)，和/或GRIK1的拮抗剂(优选为托吡酯)，和/或GRIN2B和GRIN3A的调节剂(优选为阿坎酸)，和/或HTR1B和HTR1D的调节剂(优选选自麦角胺和依来曲普坦)，和/或KCND2的拮抗剂(优选为利多卡因)，和/或KCNMA1的调节剂(优选为氯唑沙宗)，和/或NOS 1的调节剂(优选选自酮替芬和丙硫氧嘧啶)，和/或NRP2的抑制剂(优选为哌加他尼)，和/或OPCML的调节剂(优选为阿芬太尼)，和/或OPRK1的调节剂(优选选自丁丙诺啡和喷他佐辛)，和/或凝血酶受体PAR1的抑制剂(优选为阿加曲班)，和/或PDE11A和PDE4A、PDE5A磷酸二酯酶的抑制剂(优选为他达拉非)，和/或PDE3A/3B和PDE4A/4B磷酸二酯酶的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为西洛他唑)，和/或PDE4D的抑制剂(优选为米力农)，和/或PRKG1的活化剂(优选选自硝普纳、他达拉非和西洛他唑)，和/或RHOA的调节剂(优选选自阿仑膦酸盐和特比萘芬)，和/或钠通道SCN1A的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙胺)，和/或SCN1A/B的抑制剂(优选为磷苯妥英)，和/或SLC6A1的抑制剂(优选为噻加宾)，和/或SLC9A1的调节剂(优选为布克力嗪)，和/或SLC12A1的抑制剂(优选为布美他尼)，和/或TROMBIN的抑制剂(优选为地西卢定)，和/或TSPO的调节剂(优选选自氟硝西泮和替马西泮)，和/或YES1的抑制剂(优选为达沙替尼)。

正如上面所讨论的，本发明具体提出了设计针对AD和相关病症的机制的组合疗法。就此而言，最优选的靶和药物组合的实例在下文公开。

更优选情况下，本发明的组合物包含下述药物组合中的至少一种，用于组合、单独或顺序给药：

-AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和钠通道SCN1A的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙胺)，

-AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和GABA能和谷氨酸能受体的调节剂(优选为阿坎酸)，

-AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和EDNRA内皮素受体的拮抗剂(优选为磺胺异噁唑)，

-GABA能和谷氨酸能受体的调节剂(优选为阿坎酸)和EDNRA内皮素受体的拮抗剂(优选为磺胺异噁唑)，

-钠通道SCN1A的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙胺)和EDNRA内皮素受体的拮抗剂(优选为磺胺异噁唑)，

-GABA能和谷氨酸能受体的调节剂(优选为阿坎酸)和PDE3A/3B和PDE4A/4B磷酸二酯酶的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为西洛他唑)，

-钠通道SCN1A的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙胺)和腺苷受体ADORA2B的调节剂(优选为二羟丙茶碱)，

-钠通道SCN1A的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙胺)和凝血酶受体PAR1的抑制剂(优选为阿加曲班)，

-AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和腺苷受体ADORA2B的调节剂(优选为二羟丙茶碱)，

-AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和PDE3A/3B和PDE4A/4B磷酸二酯酶的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为西洛他唑)，

-PDE11A和PDE4A、PDE5A磷酸二酯酶的抑制剂(优选为他达拉非)和PDE3A/3B和PDE4A/4B磷酸二酯酶的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为西洛他唑)，或

-钠通道SCN1A的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙胺)和PDE3A/3B和PDE4A/4B磷酸二酯酶的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为西洛他唑)。

本发明的组合物的最优选的实例包括选自阿坎酸、阿仑膦酸盐、阿芬太尼、阿米洛利、氨氯地平、阿加曲班、氨曲南、巴氯芬、布克力嗪、布美他尼、丁丙诺啡、利多卡因、氯唑沙宗、西洛他唑、西那卡塞、达沙替尼、地西卢定、二羟丙茶碱、依来曲普坦、麦角胺、氟硝西泮、磷苯妥英、伊马替尼、酮替芬、米力农、硝普纳、哌加他尼、喷他佐辛、苯乙双胍、苯巴比妥、普瑞巴林、丙硫氧嘧啶、磺胺异噁唑、他达拉非、替马西泮、特比萘芬、噻加宾、托吡酯、氨苯喋啶、氨己烯酸和唑尼沙胺或其组合的化合物。

本发明的组合疗法的最优选的实例包括组合使用至少下列化合物：

-苯乙双胍和唑尼沙胺，

-苯乙双胍和阿坎酸，

-苯乙双胍和磺胺异噁唑，

-阿坎酸和磺胺异噁唑，

-唑尼沙胺和磺胺异噁唑，

-阿坎酸和西洛他唑，

-阿坎酸和唑尼沙胺，

-阿坎酸和西洛他唑，

-唑尼沙胺和二羟丙茶碱，

-唑尼沙胺和阿加曲班，

-苯乙双胍和二羟丙茶碱，

-苯乙双胍和西洛他唑，

-他达拉非和西洛他唑，或

-唑尼沙胺和西洛他唑。

本发明的最优选的组合物包含至少一种化合物，所述化合物选自唑尼沙胺、二羟丙茶碱、他达拉非、阿加曲班、阿坎酸、西那卡塞、特比萘芬、西洛他唑、巴氯芬、苯乙双胍、氨氯地平和磺胺异噁唑，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于同时、单独或顺序给药。

在更优选实施方案中，本发明的组合物包含至少两种化合物的组合，所述化合物选自唑尼沙胺、二羟丙茶碱、他达拉非、阿加曲班、阿坎酸、西那卡塞、特比萘芬、西洛他唑、巴氯芬、苯乙双胍、氨氯地平和磺胺异噁唑，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于同时、单独或顺序给药。

在另一个实施方案中，本发明的组合物包含至少两种化合物的组合，所述化合物选自唑尼沙胺、二羟丙茶碱、他达拉非、阿加曲班、阿坎酸、西那卡塞、特比萘芬、西洛他唑、巴氯芬、苯乙双胍、氨氯地平和磺胺异噁唑，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，其中所述组合物改善在神经变性疾病中改变的突触功能，所述神经变性疾病选自阿尔茨海默病(AD)、帕金森病(PD)、肌萎缩性侧索硬化(ALS)和多发性硬化(MS)。

在另一个优选实施方案中，本发明的组合物包含至少两种化合物的组合，所述化合物选自唑尼沙胺、二羟丙茶碱、他达拉非、阿加曲班、阿坎酸、西那卡塞、特比萘芬、西洛他唑、巴氯芬、苯乙双胍、氨氯地平和磺胺异噁唑，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于治疗阿尔茨海默病(AD)。

优选情况下，用于在需要的对象中治疗阿尔茨海默病或相关病症的组合物，包含下述药物组合中的至少一种，用于组合、单独或顺序给药：

-苯乙双胍和唑尼沙胺，

-苯乙双胍和阿坎酸，

-苯乙双胍和磺胺异噁唑，

-阿坎酸和磺胺异噁唑，

-唑尼沙胺和磺胺异噁唑，

-阿坎酸和西洛他唑，

-阿坎酸和唑尼沙胺，

-阿坎酸和西洛他唑，

-唑尼沙胺和二羟丙茶碱，

-唑尼沙胺和阿加曲班，

-苯乙双胍和二羟丙茶碱，

-苯乙双胍和西洛他唑，

-他达拉非和西洛他唑，或

-唑尼沙胺和西洛他唑。

在最优选实施方案中，本发明的组合物至少包含唑尼沙胺和阿坎酸，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于同时、单独或顺序给药。

在另一个优选实施方案中，本发明的组合物至少包含唑尼沙胺和/或阿坎酸，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于治疗阿尔茨海默病或相关病症。

在另一个具体实施方案中，本发明的组合物进一步包含至少一种调节突触功能的药物，用于组合、单独或顺序使用。

优选情况下，附加的调节突触功能的药物选自ABAT的抑制剂(优选为氨己烯酸)；和/或ABL1的抑制剂(优选为伊马替尼)；和/或ADORA2B的调节剂(优选为二羟丙茶碱)；和/或AMPK的调节剂(优选为苯乙双胍)和/或CACNA1C的抑制剂(优选为氨氯地平)；和/或CACNA2D3的抑制剂(优选为普瑞巴林)；和/或CASR的调节剂(优选为西那卡塞)；和/或CNGB3的调节剂(优选为阿米洛利)；和/或DHFR的抑制剂(优选为氨苯喋啶)，和/或EPHA3的抑制剂(优选为达沙替尼)，和/或EDNRA内皮素受体的拮抗剂(优选为磺胺异噁唑)，和/或GABBR2和谷氨酸能受体的调节剂(优选选自巴氯芬和阿坎酸)，和/或GABRA2的调节剂(优选选自苯巴比妥和氨曲南)，和/或GRIK1的拮抗剂(优选为托吡酯)，和/或GRIN2B和GRIN3A的调节剂(优选为阿坎酸)，和/或HTR1B和HTR1D的调节剂(优选选自麦角胺和依来曲普坦)，和/或KCND2的拮抗剂(优选为利多卡因)，和/或KCNMA1的调节剂(优选为氯唑沙宗)，和/或NOS1的调节剂(优选选自酮替芬和丙硫氧嘧啶)，和/或NRP2的抑制剂(优选为哌加他尼)，和/或OPCML的调节剂(优选为阿芬太尼)，和/或OPRK1的调节剂(优选选自丁丙诺啡和喷他佐辛)，和/或凝血酶受体PAR1的抑制剂(优选为阿加曲班)，和/或PDE11A和PDE4A、PDE5A磷酸二酯酶的抑制剂(优选为他达拉非)，和/或PDE3A/3B和PDE4A/4B磷酸二酯酶的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为西洛他唑)，和/或PDE4D的抑制剂(优选为米力农)，和/或PRKG1的活化剂(优选选自硝普纳、他达拉非和西洛他唑)，和/或RHOA的调节剂(优选选自阿仑膦酸盐和特比萘芬)，和/或钠通道SCN1A的抑制剂和BK通道的活化剂(优选为唑尼沙胺)，和/或SCN1A/B的抑制剂(优选为磷苯妥英)，和/或SLC6A1的抑制剂(优选为噻加宾)，和/或SLC9A1的调节剂(优选为布克力嗪)，和/或SLC12A1的抑制剂(优选为布美他尼)，和/或TROMBIN的抑制剂(优选为地西卢定)，和/或TSPO的调节剂(优选选自氟硝西泮和替马西泮)，和/或YES 1的抑制剂(优选为达沙替尼)。

在其他实施方案中，所述附加的调节突触功能的药物选自与由选自下列的基因编码的蛋白结合或调节该蛋白的活性的一种或多种药物：

ABAT、ABI1、ABL1、ADORA2A、ADORA2B、AKT、AMPK、ANKRA、APBA1、ARHGAP26、ATG5、BASSOON、BDNF、BECLIN1、BIN1、BK通道(KCNMA1、KCNMB1)、CACNA1C、CACNA2D3、CACNA2D4、CADPS2、钙调磷酸酶、钙调蛋白、CASK、CASR、CAST、CBL、CDC2、CDC42、CDC42BPB、CDC42EP3、CDH13、CDH2、CDK5、CITRON、CNGB3、皮层肌动蛋白、CRAM、CREB、CRMP、CTNNB1、DAB1、DCC、DEPDC2、DHFR、DLG2、DYN1、DYN3、EDNRA、内吞蛋白、EPHA3、EPHBR、EPHEXIN、EPHRINA、EPHRINB、ERBB4、ERK1、ERK2、FES、FYN、GABBR1、GABBR2、GABRA2、GABRG2、GAT1、GLRA1、GEPHYRIN、GIPC1、GIPC2、GLUD1、GRANUPHILIN、GRIA2、GRIA3、GRID1、GRID2、GRIK1、GRIK2、GRIN2B、GRIN3A、GRIP、GRM3、GRM5、GRM6、GRM7、GRM8、HOMER、HTR1B、HTR1D、KALIRIN、KCNA2、KCHIP1、KCHIP2.2、KCND2、KCNJ3、KCNJ12、KTN1、KYNU、LYN、MAML3、MINT1、MUC1、MUNC13、MUNC18A、MYO6、MYOL、NAV1、NBEA、NCAM1、NCK1、NCK2、NETRIN1、NFKB1、NGEF、NGF、NGFR、NIL16、NLGN1、NOC2、NOS1、NOTCH1、NOTCH2、NOTCH3、NPC1、NPC2、NPIST、NRG3、NRP1、NRP2、NRX3、NTF3、NTF5、NWASP、OPCML、OPRK1、PAK6、PAK7、PAR1、PARK2、PDE 11A、PDE3A/3B、PDE4A/4B/4D、PI3K、PIAS1、PICALM、PICK1、PIP5K、PKA、PKCA、PLD2、PLEXA1、PP1C、PPFIBP1、PRKG1、PSD95、PTN、PTPRF、PYK2、RAB3B、RABPHILIN、RAC1、RAP1、RAS、RASGRF2、RBPJ、REELIN、RGNEF、RHOA、RHOG、RIM2、RIMS1、RIMS2、ROBO2、ROCK2、RPH3AL、SACM1L、SAPAP、SCN1A、SCN1B、SEC24D、SEMA3A、SEMA3C、SEMA3E、SEMA4C、SIAH1A、SLC12A1、SLC12A2、SLC12A5、SLC1A2、SLC6A1、SLC6A18、SLC9A1、SLIT1、SNAP25、SORBS2、SRC、SRGAP3、STX2、STXBP6、SUM1、SV2C、突触泡磷酸酶、突触融合蛋白1A、SYT12、TACE、TBR1、TRIO、TRKB、TROMBIN、TSPO、UBE2A、ULK4、UNC13C、UNC5C、VAMP2、VAMP5、VELI、粘着斑蛋白、WASPIP、WAVE、WWOX、YAP和YES 1。

本发明人已经确立，上述药物和药物组合提供了改进和协同的生物学效应，使得引起AD和相关病症的功能性调节异常得到有效校正或正常化。

上面提到的化合物名称与它们的CAS编号一起列于下面的表中。正如前面讨论过的，应该理解，本发明涵盖了上述化合物及其任何可药用盐、水合物、酯、醚、异构体、外消旋物、缀合物或前体药物的使用。可以制备前体药物(例如通过将药物与适合的载体偶联)以提供对治疗的药物动力学参数的更好的控制。

表1

药物名称	CAS编号
		阿坎酸	77337-76-9

阿仑膦酸盐	66376-36-1
		阿芬太尼	71195-58-9
阿米洛利	2016-88-8
		氨氯地平	88150-42-9
阿加曲班	74863-84-6
		氨曲南	78110-38-0
巴氯芬	1134-47-0
		巴柳氮	80573-04-2
布克力嗪	82-95-1
		布美他尼	28395-03-1
丁丙诺啡	52485-79-7
		利多卡因	137-58-6
氯唑沙宗	95-25-0
		西洛他唑	73963-72-1
西那卡塞	226256-56-0
		达沙替尼	302962-49-8
地西卢定	120993-53-5
		二羟丙茶碱	479-18-5
依来曲普坦	143322-58-1
		麦角胺	113-15-5
氟硝西泮	1622-62-4
		磷苯妥英	93390-81-9
伊马替尼	152459-95-5

酮替芬	34580-14-8
		米力农	78415-72-2
硝普纳	15078-28-1
		哌加他尼	222716-86-1
喷他佐辛	359-83-1
		苯巴比妥	50-06-6
苯乙双胍	114-86-3
		普瑞巴林	148553-50-8
丙硫氧嘧啶	51-52-5
		磺胺异噁唑	127-69-5
他达拉非	171596-29-5
		替马西泮	846-50-4
特比萘芬	91161-71-6
		噻加宾	115103-54-3
托吡酯	97240-79-4
		氨苯蝶啶	396-01-0
氨己烯酸	60643-86-9
		唑尼沙胺	68291-97-4

可药用盐的实例包括可药用酸加成盐、可药用碱加成盐、可药用金属盐、铵和烷基化铵盐。酸加成盐包括无机酸以及有机酸的盐。适合的无机酸的代表性实例包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、磷酸、硫酸、硝酸等。适合的有机酸的代表性实例包括甲酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、丙酸、苯甲酸、肉桂酸、柠檬酸、富马酸、乙醇酸、乳酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、草酸、苦味酸、丙酮酸、水杨酸、琥珀酸、甲磺酸、乙磺酸、酒石酸、抗坏血酸、扑酸、双亚甲基水杨酸、乙二磺酸、葡糖酸、柠康酸、天冬氨酸、硬脂酸、棕榈酸、EDTA、乙醇酸、对氨基苯甲酸、谷氨酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、高氯酸盐、硼酸盐、乙酸盐、苯甲酸盐、羟基萘甲酸盐、甘油磷酸盐、酮戊二酸盐等。可药用无机酸加成盐或有机酸加成盐的其他实例列于例如J.Pharm.Sci.1977，66，2中，其在此引为参考。金属盐的实例包括锂、钠、钾、镁的盐等。铵和烷基化铵盐的实例包括铵、甲基铵、二甲基铵、三甲基铵、乙基铵、羟乙基铵、二乙基铵、丁基铵、四甲基铵的盐等。有机碱的实例包括赖氨酸、精氨酸、胍、二乙醇胺、胆碱等。

本发明的疗法可以单独或作为药物组合执行，和/或与靶向相同途径或具有不同作用方式的任何其他疗法结合执行。它可以提供在家里、医生办公室、诊所、医院的门诊部或医院，以便医生可以密切观察疗法的效应并做出任何需要的调整。

在特定实施方案中，本发明的组合物进一步包含至少一种调节血管发生、优选增加血管发生的药物，用于组合、单独或顺序使用。更优选情况下，所述至少一种调节血管发生的药物选自沙丁胺醇、阿仑膦酸盐、安贝生坦、氨基己酸、巴柳氮、贝卡普勒明、卡麦角林、氯吡格雷、双氢麦角胺、依普利酮、非诺多泮、乙酸氟氢可的松、吉非罗齐、橙皮素、来氟米特、L-组氨酸、碘赛罗宁、马立马司他、美洛昔康、米帕林、醋甲唑胺、甲巯咪唑、孟鲁司特、奈替米星、硝酸甘油、苯基丁酸、乙胺嘧啶、舒尼替尼、硫乙拉嗪、替罗非班、拓扑替康、阿糖腺苷和华法林(参见下面表2)。

表2

药物名称	CAS编号
		沙丁胺醇	18559-94-9
阿仑膦酸盐	66376-36-1
		安贝生坦	177036-94-1
氨基己酸	60-32-2
		巴柳氮	80573-04-2
贝卡普勒明	165101-51-9
		卡麦角林	81409-90-7
氯吡格雷	113665-84-2
		双氢麦角胺	6190-39-2
依普利酮	107724-20-9
		非诺多泮	67227-57-0
氟氢可的松	127-31-1

吉非罗齐	25812-30-0
		橙皮素	520-33-2
来氟米特	75706-12-6
		L-组氨酸	71-00-1
碘赛罗宁	6893-02-3
		马立马司他	154039-60-8
美洛昔康	71125-38-7
		米帕林	83-89-6
醋甲唑胺	554-57-4
		甲巯咪唑	60-56-0
孟鲁司特	158966-92-8
		奈替米星	56391-56-1
硝酸甘油	55-63-0
		乙胺嘧啶	58-14-0
苯基丁酸钠	1716-12-7
		舒尼替尼	557795-19-4
硫乙拉嗪	1420-55-9
		替罗非班	144494-65-5
拓扑替康	119413-54-6
		阿糖腺苷	24356-66-9
华法林	81-81-2

可替选地，或除了前述实施方案之外，本发明的组合物可以进一步包含至少一种调节细胞应激反应、优选抑制细胞应激反应的药物，用于组合、单独或顺序使用。最优选的调节细胞应激反应的药物选自阿拉伯糖醇、甘露醇、间羟胺、奥美拉唑、丙胺卡因、雷帕霉素、利福布汀、硫鸟嘌呤和海藻糖(参见下面表3)。

表3

药物名称	CAS编号
		阿拉伯糖醇	488-82-4，7643-75-6，6018-27-5
甘露醇	69-65-8
		间羟胺	54-49-9
奥美拉唑	73590-58-6
		丙胺卡因	721-50-6
雷帕霉素	53123-88-9
		利福布汀	72559-06-9
硫鸟嘌呤	154-42-7
		海藻糖	99-20-7

在特定实施方案中，本发明涉及组合物，其包含改善突触功能的药物、增加血管发生的药物和抑制细胞应激反应的药物，用于同时、单独或顺序给药。

本发明的组合物典型地包含一种或几种可药用的载体或赋形剂。疗法的持续时间取决于被治疗的疾病的阶段、使用的组合、患者的年龄和状况、以及患者对治疗如何反应。

组合的每种组分的给药剂量、频率和方式可以独立地控制。例如，一种药物可以口服给药，而第二种药物可以肌肉内给药。组合疗法可以包含恢复期的断续循环方式提供，以便患者的身体有机会从任何尚无法预料的副作用恢复。药物也可以配制在一起以便一次给药投送所有药物。

组合中的每种药物的给药可以通过任何适合的方式，使得与其他组分组合的药物的浓度能够校正AD所涉及的途径的功能。

尽管组合的活性成分可以作为纯的化学物质给药，但优选情况下将它们作为药物组合物、在本文中也称为药物制剂提供。可能的组合物包括适合于经口、直肠、局部(包括透皮、经颊和舌下)或非肠道(包括皮下、肌肉内、静脉内和真皮内)给药的组合物。

更通常情况下，这些药物制剂以“患者包”的形式开给患者，所述患者包在单一包装、通常为泡罩包装中含有定量投配单元或其他在不同治疗期间使用的用于给药计量单位药剂的手段。患者包与药剂师从散料供应中分出患者的药物供应的传统处方相比的优势在于，患者总是能够得到患者包中包含的包装标签，而这在传统处方中一般是缺失的。已经显示，包含包装标签增加了患者对医生指导的顺从性。因此，本发明还包括本文前述的药物组合物，其与适合于所述制剂的包装材料组合。在这样的患者包中，用于组合治疗的制剂的预期使用方法，可以从说明书、器具、附文、适应症和/或用于帮助制剂最适合地用于治疗的其他手段推断出来。这样的措施使患者包特别适合于和适用于使用本发明的组合进行治疗。

药物可以以任何适合的量被包含在任何适合的载体物质中，并且可以以组合物总重量的1-99重量％的量存在。组合物可以提供在适合于经口、非肠道(例如静脉内、肌肉内)、直肠、皮肤、鼻、阴道、吸入、皮肤(贴片)或眼给药途径的剂型中。因此，组合物可以采用例如片剂、胶囊、丸剂、粉剂、颗粒、混悬剂、乳液、溶液、包括水凝胶在内的凝胶剂、糊剂、软膏、霜剂、膏药、浸液、渗透投送装置、栓剂、灌肠剂、注射剂、植入物、喷剂或气雾剂的形式。

药物组合物可以按照常规药物实践进行配制(参见例如《Remington：药物科学与实践》(第20版)(Remington：The Science and Practice of Pharmacy(20th ed.))，A.R.Gennaro主编，Lippincott Williams & Wilkins，2000和《制药技术百科全书》(Encyclopedia of Pharmaceutical Technology)，J.Swarbrick和J.C.Boylan主编，1988-1999，Marcel Dekker，New York)。

本发明的药物组合物可以配制成在给药后基本上立即地或在给药后任何预定的时间或时期内释放活性药物。

受控释放制剂包括(i)在较长时期内在体内产生基本上恒定的药物浓度的制剂；(ii)在预定延迟期后在较长时期内在体内产生基本上恒定的药物浓度的制剂；(iii)通过在体内维持相对恒定、有效的药物水平同时使得与活性药物的血浆水平波动相关的不想要的副作用最小化，在预定时期内维持药物作用的制剂；(iv)通过例如将受控释放组合物在空间上放置在患病组织或器官附近或其中，使药物作用局部化的制剂；以及(v)通过使用将药物投送到特定靶细胞类型的载体或化学衍生物发挥定向药物作用的制剂。

采用受控释放制剂形式的药物的给药，在药物单独或组合地具有下述特征的情况下是特别优选的：(i)狭窄的治疗指数(即产生有害副作用或毒性反应的血浆浓度与产生疗效的血浆浓度之间的差值小；一般来说，治疗指数TI被定义为中值致死剂量(LD50)与中值有效剂量(ED50)的比)；(ii)在胃肠道中狭窄的吸收窗口；或(iii)非常短的生物半衰期，使得为了将血浆水平维持在治疗水平需要在一天中频繁用药。

可以采取许多策略中的任一种以便获得受控释放，其中所研究的药物的释放速率超过其代谢速率。受控释放可以通过适当选择各种配制参数和成分、包括例如各种类型的受控释放组合物和涂层来获得。因此，使用适合的赋形剂将药物配制成药物组合物，其在给药后以受控的方式释放药物(单一或多个单位片剂或胶囊组合物、油溶液、混悬剂、乳液、微胶囊、微球、纳粒、贴片和脂质体)。

用于经口使用的固体剂型

用于经口使用的剂型包括在与无毒性的可药用赋形剂的混合物中包含活性成分的片剂。这些赋形剂可以是例如惰性稀释剂或填充剂(例如蔗糖、微晶纤维素、包括马铃薯淀粉在内的淀粉、碳酸钙、氯化钠、磷酸钙、硫酸钙或磷酸钠)；造粒剂和崩解剂(例如包括微晶纤维素在内的纤维素衍生物、包括马铃薯淀粉在内的淀粉、交联羧甲基纤维素钠、藻酸盐或藻酸)；粘合剂(例如阿拉伯树胶、藻酸、藻酸钠、明胶、淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮或聚乙二醇)；和润滑剂、助流剂和抗粘附剂(例如硬脂酸、二氧化硅或滑石粉)。其他可药用赋形剂可以是着色剂、调味剂、增塑剂、保湿剂、缓冲剂等。

片剂可以是未包衣的，或它们可以通过已知技术包衣，以任选地延迟在胃肠道中的崩解和吸收，从而在较长时期内提供持续作用。包衣可以适合于以预定样式释放活性药物(例如以便获得受控释放制剂)，或者它可以适用于直到通过胃之后才释放活性药物(肠溶包衣)。包衣可以是糖包衣、薄膜包衣(例如基于羟丙基甲基纤维素、甲基纤维素、甲基羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、丙烯酸酯类共聚物、聚乙二醇和/或聚乙烯吡咯烷酮)或肠溶包衣(例如基于甲基丙烯酸共聚物、乙酸邻苯二甲酸纤维素、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、乙酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素、邻苯二甲酸聚乙酸乙烯酯、虫胶和/或乙基纤维素)。可以使用延时材料例如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。

固体片剂组合物可以包括包衣，其适用于保护组合物免于不想要的化学变化(例如在活性药物释放前的化学降解)。包衣可以以与《制药技术百科全书》(Encyclopedia of Pharmaceutical Technology)中描述的相似的方式被施用于固体剂型上。

在片剂中，几种药物可以混合在一起，也可以分区。例如，第一种药物包含在片剂内部，第二种药物位于外部，使得主要部分的第二种药物在第一种药物释放之前释放。

用于经口使用的制剂也可被提供成可咀嚼片剂，或作为其中活性成分与惰性固体稀释剂(例如马铃薯淀粉、微晶纤维素、碳酸钙、磷酸钙或高岭土)混合的硬明胶胶囊，或作为其中活性成分与水或油介质例如液体石蜡或橄榄油混合的软明胶胶囊。粉剂和颗粒可以使用在上面关于片剂和胶囊下所提到的成分以常规方式制备。

用于经口使用的受控释放组合物可以被构建成例如通过控制活性药物的溶出和/或扩散来释放活性药物。

溶解或扩散受控释放可以通过药物的片剂、胶囊、丸粒或颗粒制剂的适合包衣，或通过将药物掺入到适合的基质中来实现。受控释放包衣可以包括一种或多种上面提到的包衣物质，和/或例如虫胶、蜂蜡、glycowax、蓖麻蜡、巴西棕榈蜡、硬脂醇、单硬脂酸甘油酯、二硬脂酸甘油酯、棕榈酸硬脂酸甘油酯、乙基纤维素、丙烯酸树脂、dl-聚乳酸、乙酸丁酸纤维素、聚氯乙烯、聚乙酸乙烯酯、乙烯吡咯烷酮、聚乙烯、聚甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸甲酯、2-羟基甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸酯水凝胶、1，3-丁二醇、甲基丙烯酸乙二醇酯和/或聚乙二醇。在受控释放基质制剂中，基质材料也可以包括例如水合甲基纤维素、巴西棕榈蜡和硬质醇、卡巴浦尔934、硅酮、三硬脂酸甘油酯、丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸甲酯、聚氯乙烯、聚乙烯和/或卤代氟烃。

含有一种或多种要求保护的药物组合的受控释放组合物，也可以采用漂浮片剂或胶囊的形式(即在口服给药后，在胃内容物顶部漂浮一段时间的片剂或胶囊)。药物的漂浮片剂制剂可以通过将药物与赋形剂和20-75％w/w的水凝胶剂例如羟乙基纤维素、羟丙基纤维素或羟丙基甲基纤维素的混合物成粒来制备。然后可以将获得的颗粒压制成片剂。在与胃液接触后，片剂在其表面周围形成基本上不透水的凝胶剂阻挡层。这种凝胶剂阻挡层参与维持密度小于1，从而允许片剂保持漂浮在胃液中。

用于经口给药的液体

适合于通过添加水制备水性混悬剂的粉剂、可分散粉剂或颗粒，是用于经口给药的方便剂型。作为混悬剂的制剂提供了活性成分与分散或润湿剂、助悬剂和一种或多种防腐剂的混合物。适合的助悬剂是例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、藻酸钠等。

非肠道组合物

药物组合物也可以通过注射、输注或植入(静脉内、肌肉内、皮下等)，以剂型、制剂或通过适合的投送装置或含有常规的无毒的可药用载体和佐剂的植入物的形式非肠道给药。这样的组合物的配制和制备对于药物制剂领域的专业人员来说是众所周知的。

用于非肠道使用的组合物可以提供成单位剂量形式(例如在单剂安瓿中)或提供成含有几份剂量小管，并且其中可以添加适合的防腐剂(参见下文)。组合物可以采取溶液、混悬剂、乳液、输注装置或用于植入的投送装置的形式，或者它可以作为干粉存在，在使用前用水或其他适合的介质重构。除了活性药物之外，组合物可以包含适合的非肠道可接受的载体和/或赋形剂。活性药物可被掺入到微球、微胶囊、纳粒、脂质体等中，用于受控释放。组合物可以包含助悬剂、增溶剂、稳定剂、pH调节剂和/或分散剂。

本发明的药物组合物可以采取适合于无菌注射的形式。为了制备这样的组合物，将适合的活性药物溶解或悬浮在非肠道可接受的液体介质中。在可以使用的可接受介质和溶剂中包括水、通过加入适量的盐酸、氢氧化钠或适合的缓冲液调整到适合pH的水、1，3-丁二醇、林格液和等渗氯化钠溶液。水性制剂也可以包含一种或多种防腐剂(例如对羟基苯甲酸的甲酯、乙酯或正丙酯)。在其中一种药物仅仅少量或微溶于水的情况下，可以加入溶解增强剂或增溶剂，或溶剂可以包含10-60％w/w的丙二醇等。

受控释放非肠道组合物可以采取水性混悬剂、微球、微胶囊、磁性微球、油溶液、油混悬剂或乳液的形式。可替选地，活性药物可被掺入到可生物相容的载体、脂质体、纳粒、植入物或输注装置中。用于制备微球和/或微胶囊的材料是例如可生物降解/可生物蚀刻的聚合物，例如聚催乳素、聚(氰基丙烯酸异丁酯)、聚(2-羟基乙基-L-谷氨酰胺)。在配制受控释放非肠道制剂时可以使用的生物相容载体是糖类(例如葡聚糖)、蛋白(例如白蛋白)、脂蛋白或抗体。用于植入物的材料可以是不可生物降解的(例如聚二甲基硅氧烷)或可生物降解的(例如聚己内酯、聚乙醇酸或聚原酸酯)。

直肠组合物

对于直肠使用来说，适用于组合物的剂型包括栓剂(乳液或混悬剂类型)和直肠明胶胶囊(溶液或混悬剂)。在典型的栓剂制剂中，活性药物与适合的可药用栓剂基质组合，所述基质为例如可可脂、酯化的脂肪酸、甘油化的明胶以及各种水溶性的或水可分散的基质例如聚乙二醇。可以掺入各种添加剂、增强剂或表面活性剂。

经皮和局部组合物

药物组合物也可以在含有常规的无毒的可药用载体和赋形剂、包括微球和脂质体的剂型或制剂中，局部给药于皮肤上，用于经皮吸收。制剂包括霜剂、软膏、洗剂、搽剂、凝胶剂、水凝胶剂、溶液、混悬剂、棒剂、喷剂、糊剂、膏药和其他类型的经皮药物投送系统。可药用的载体或赋形剂可以包括乳化剂、抗氧化剂、缓冲剂、防腐剂、保湿剂、渗透增强剂、螯合剂、成凝胶剂、软膏基质、香料和皮肤保护剂。

乳化剂可以是天然存在的树胶(例如阿拉伯树胶或黄蓍树胶)。

防腐剂、保湿剂、渗透增强剂可以是对羟苯甲酸酯例如对羟基苯甲酸的甲酯或丙酯，以及苯扎氯铵、甘油、丙二醇、脲等。

上面描述的用于局部给药于皮肤上的药物组合物，也可以用于局部给药在身体待治疗部分上或其附近的情况中。组合物可以适用于直接施用或利用特制的药物投送装置施用，例如敷料或可替选的石膏、衬垫、海绵、条板或其他适合的柔性材料形式。

治疗的剂量和持续时间

应该理解，组合的药物可以在相同或不同的药物制剂中同时或顺序给药。如果进行顺序给药，在给药第二种(或附加)活性成分时的延迟不应该导致活性成分组合的有效效果的益处的丧失。对本发明的组合的最低要求是，该组合应该意欲用于组合使用活性成分的组合的有效效果的益处。组合的意欲使用，可以通过器具、附文、适应症和/或用于帮助使用本发明的组合的其他手段推断出来。

尽管本发明的活性药物可以以分剂量给药，例如每日2到3次，但组合中的每种药物的单一日剂量是优选的，在单一药物组合物中所有药物的单一日剂量(单位剂量形式)是最优选的。

术语“单位剂量形式”是指适合作为人类对象的单一剂量的物理离散的单位(例如胶囊、片剂或装药的注射器筒)，每个单位包含根据计算能够产生所需疗效的预定量的活性物质或多种活性物质，以及所需的药物载体。

给药可以是每日一次到几次，持续几日到几年，甚至可以持续患者的一生。在大多数情况下指示长期或至少周期性重复的长期给药。

此外，关于特定患者的药物基因组学(基因型对药物动力学、药效学或治疗效能情况的影响)信息可以影响使用的剂量。

除了当对应于特别受损的AD疾病病例时可能需要较高剂量之外，组合中每种药物的优选剂量通常将在不高于长期维持性治疗所通常开出的或在大型3期临床研究中被证明是安全的剂量范围内。

最优选的剂量将对应于用于长期维持性治疗所开出的剂量的1％到最高10％的量。例如：

-口服达沙替尼从约1到10mg/天，口服阿坎酸从约7到70mg，每天三次，

-口服氨曲南从约20到1400mg/天，分四剂，口服噻加宾从约0.3到3mg/天，

-口服氯唑沙宗从约5到50mg，每天3或4次，口服他达拉非从约0.05到0.5mg/天，

-口服氯唑沙宗从约5到50mg，每天3或4次，口服西洛他唑从约1到10mg/天，

-口服氯唑沙宗从约5到50mg，每天3或4次，口服特比萘芬从约2.5到25mg，每天1或2次，

-口服氯唑沙宗从约5到50mg，每天3或4次，口服达沙替尼从约1到10mg/天，

-口服达沙替尼从约1到10mg/天，口服特比萘芬从约2.5到25mg，每天1或2次，

-口服西那卡塞从约0.3到3mg/天，口服阿坎酸从约7到70mg，每天三次，

-口服氨曲南从约20到1400mg/天，分四剂，口服氨己烯酸从约20到200mg，每天1或2次，

-口服托吡酯从约2到60mg/天，口服二羟丙茶碱从约6到60mg/天，分2或3剂。

应该理解，实际给药的药物的量将由医生根据相关的情况确定，所述情况包括待治疗的病症或多种病症、所给药的具体组合物、个体患者的年龄、体重和反应、患者症状的严重性以及所选的给药途径。因此，上述剂量范围只是打算为本文中的讲授提供一般性指导和支持，而不是打算限制本发明的方法。

给出了下列实施例，它们是用于说明的目的而不是限制。

实施例

1.使用体外测定法进行药物验证

体外测定法是用于改进作用于涉及AD的途径的药物及其组合的有力工具。本发明的药物及其组合，通过在按照本发明中鉴定到的AD网络而改造的特定体外测定法上的作用而进行了最适化。随后在AD体内模型中对这些分子或其组合进行了测试。

这些体外实验从APP基因表达水平的研究开始，然后测定药物对暴露于Aβ蛋白毒性效应的细胞的神经保护潜力。对所涉及途径中的药物进行单独测试，然后测定它们的组合作用。在随后的阶段中，将作用于单独途径中的靶最有效的组合进行组合，并在神经保护试验中进行测试。

在AD中，蛋白形成纤维状Aβ蛋白(淀粉样蛋白)的不溶性β-折叠片层的聚集体。从可溶形式向纤维状形式的构象变化似乎是随着Aβ的较高浓度而增加的自发事件，所以任何高于正常量的Aβ的生产(或较大的、可溶性低的Aβ形式的生产)将倾向于增加蛋白斑的形成。一旦Aβ蛋白斑开始形成，其他分子可以与新生的蛋白斑相互作用，最终产生成熟的蛋白斑，其附近区域的神经元细胞死亡。考虑到这一点，我们优先测试药物对暴露于淀粉样β蛋白下的细胞的存活性的影响。

细胞培养

原代大鼠皮层神经元按照Singer等，1999的描述进行培养。简单来说，将妊娠15天的怀孕雌性大鼠通过颈椎脱位处死(Rats Wistar；Janvier)，并从子宫取出胎畜。取出皮层并放置在用冰冷却的Leibovitz培养基(L15；Invitrogen)中，所述培养基含有1％青霉素-链霉素(PS；Invitrogen)和1％牛血清白蛋白(BSA；Sigma)。通过用在不含钙和镁的PBS中稀释的胰蛋白酶在37℃下处理20分钟(胰蛋白酶EDTA1X；Invitrogen)使皮层解离。通过加入含有II级DNAase I(0.1mg/mlRoche Diagnostic)和10％胎牛血清(FCS；Invitrogen)的Dulbecco改性的Eagle培养基(DMEM；Invitrogen)终止反应。然后通过使细胞3次通过10ml移液管进行机械解离。然后将细胞在10℃下以180x g离心10分钟。舍弃上清液，将细胞沉淀重新悬浮在确定培养基中，所述培养基由补充有B27(2％；Invitrogen)、L-谷氨酰胺(0.2mM；Invitrogen)、1％PS溶液和10ng/ml脑源性神经营养因子(BDNF，Pan Biotech)的神经元基础培养基(Invitrogen)构成。活细胞在Neubauer细胞计数器上使用锥虫蓝排斥试验进行计数。将细胞以30000个细胞/孔的密度接种在96孔板中(板用聚L-赖氨酸(10μg/ml；Sigma)预包覆)，并在37℃下在加湿空气(95％)/CO₂(5％)气氛下进行培养。

培养6天后，将细胞与药物(5种浓度)温育。1小时后，在不含BDNF的确定培养基中通过20μM的β-淀粉样蛋白(25-35；Sigma)与药物一起使细胞中毒。使皮层神经元中毒2天。BDNF(10ng/ml)被用作阳性(神经保护性)对照。每种条件进行两份独立的培养，每种条件6个孔。

轴突长度定量

将细胞用冷的乙醇(95％)和乙酸(5％)溶液固定10分钟。在用0.1％皂草苷通透化后，将细胞用含有10％山羊血清的PBS阻断2小时。然后将细胞与针对微管相关蛋白2(MAP-2；Sigma)的单克隆抗体温育。该抗体特异性地揭示细胞体和轴突。使用的第二抗体是Alexa Fluor488山羊抗小鼠IgG(Molecular probe)。神经元的核用荧光染料(Hoechst溶液，SIGMA)揭示。使用InCell Analyzer^TM 1000(GE Healthcare)，以20x放大倍数对每个孔照20张照片。所有图像在相同条件下获得。轴突的长度使用Developer软件(GE Healthcare)定量。

结果

图1中显示的结果是从两批独立的培养物中提取出来的，每种条件6个孔。所有值表示成平均值±标准误差平均值。对原始数据进行了双侧Student′s t检验分析。结果表示成与对照(介质)相比的轴突长度的百分率。

将药物与大鼠原代皮层神经元温育1小时，然后使用20μM Aβ_25-35进行中毒，持续2天(40)。

在该温育后2天，对反映出轴突细胞生长的轴突长度的网络进行定量。本发明人观察到3种药物明显发挥了对这种Aβ_25-35中毒作用的神经保护效应(图1和图2)。

体内试验

在体外测试中有活性的化合物及其组合，在阿尔茨海默病的体内模型中进行了测试。与阿尔茨海默病相关的突变体人类淀粉样β蛋白前体(APP)转入基因的过表达，是在大量研究中用作AD疾病模型的转基因小鼠的脑中促进Aβ沉积的最可靠的手段。当它们衰老时，这些突变APP小鼠发展出强烈的淀粉样蛋白病理学和其他AD样特点，包括突触密度降低、反应性神经胶质增生和一些认知缺陷。许多突变APP小鼠模型几乎不显示出明显的神经元丧失和神经原纤维缠结(NFT)病理学的迹象。对于该BRI-Aβ42转入基因半合的小鼠能够存活并可育，具有正常寿命。转基因的BRI-Aβ42mRNA以小鼠朊病毒蛋白启动子特征性的样式表达，检测到的最高的转入基因表达水平是在小脑颗粒细胞和海马中，其次是皮层、脑桥、丘脑和中脑。在转基因融合蛋白中，Aβ1-42融合到BRI蛋白C末端的furin类切割位点处，使得切割导致Aβ1-42有效分泌到细胞腔或细胞外空间中。因此，这些小鼠特异性表达Aβ1-42同种型。半合的BRI-Aβ42小鼠随着衰老积累不可用去污剂溶解的β-淀粉样蛋白，并早在3月龄时就在小脑发生具核蛋白斑。前脑病理学的发生出现较晚，细胞外Aβ蛋白斑直到12月龄时才一致地出现在海马和内嗅/梨状皮质中。淀粉样β-蛋白沉积物(具核蛋白斑)早在3个月时就可以在转基因小鼠小脑的分子层中观察到，并且随着衰老变得更加明显；在6月龄时，在内嗅/梨状皮质和海马中看到了偶发细胞外蛋白斑，但是直到超过12月龄时才能一致地发现。最老的小鼠在小脑、皮层、海马和嗅球中显示出广泛分布的具核和扩散蛋白斑的病理学。细胞外淀粉样蛋白斑块显示出致密的淀粉样蛋白核心，并具有辐射状的纤丝；在这些蛋白斑外周观察到许多束营养不良的轴突。蛋白斑伴有反应性神经胶质增生。

药物处理

转基因Tg(Prnp-ITM2B/APP695*42)A12E mc小鼠(43)从Jackson Laboratory获得(http://jaxmice.jax.org/strain/007002.html)。将所发现的具有最高Aβ42血浆水平的小鼠、BRI-Aβ42A(12e)株系维持在混合的B6C3背景上。成年雄性转基因小鼠可以自由接近食物和水。依照得到批准的研究动物护理和使用委员会议定书(Institutional Animal Care and Use Committee protocol)，将小鼠称重并腹膜内注射或强饲对照溶液(安慰剂)或以不同剂量制备的PXT药物，每日一次，连续进行10到20周。

存活率分析

存活率使用Kaplan-Meier方法进行分析。对于所有两两多重比较测试使用了Holm-Sidak方法(post hoc)。对无关死亡进行审查。所有比较在同窝仔畜之间进行，以限制来自背景株系差异的任何潜在的影响因子。

行为测试

行为测试按照已由几位作者发表的方法(32-35)设计和执行。

Morris水迷宫(MWM)中的空间学习和记忆

本实验在直径90cm、由白色塑料制成并装填有乳状有色水的圆形水池中进行。直径8cm的由透明塑料制成的逃离平台浸没在水平面下0.5cm。视觉线索由印刷成A4大小的字母的不同几何形状形式提供，并放置在周围的四个壁上(距离水池50到70cm)。在4天内，每天对每只小鼠进行4次试验(试验之间的间隔为5到7分钟，总共16次试验)。每个试验从四个不同起始点之一进行。小鼠的运动使用Videotrack软件(View Point)监测。确定了找到逃离平台所花费的时间(逃离潜伏期；最高60秒)。在找到平台后，允许小鼠在其上面坐15秒。不能在60秒内发现平台的小鼠被引导到平台，并允许它在其上停留15秒。对于这种情况，在记录中输入60秒的逃离潜伏期。除了第1天的第一次试验之外，对每天的所有四次试验进行平均，用于统计学分析。在第9天(最后一次训练后第5天)，对小鼠进行60秒的探索试验，其中将平台取出并允许小鼠搜寻它。记录每只动物在每个四分之一圆中花费的时间(四分之一圆搜索时间)。使用了3、7、10和12月龄的几组雄性小鼠。

少数小鼠表现出强烈干扰测试的冷淡行为(例如不动地躺在水中并拒绝游泳)，这些动物在数据分析中被排除。

所有行为试验在安静和弱光环境下进行。

辐射臂水迷宫中的工作记忆测试

在由直径100cm、装有水的水池(也用于Morris水迷宫和平台识别任务)中安装铝制插入物以产生6个辐射状分布的游泳臂组成的装置的帮助下，获得了工作记忆的这种基于认知的灵敏性测量。测试包括每天5次1分钟的试验，连续进行9-12天。在每天测试开始时，将透明的被浸没的平台放置在6个游泳臂之一的末端(随机选择，每天改变)。对于前四次习得试验中的每次来说，将动物放置在一个不含平台的臂中(随机顺序)，并允许其搜寻平台。在60秒试验中，每当动物进入另一个不含平台的臂，将其轻轻放回到其起始位置并记录错误。在4次试验后，允许动物休息30分钟，然后进行第5次(记忆力)试验，从最后一个不含平台的游泳臂开始。对于每个试验，记录错误(臂选择不正确)的次数和逃离潜伏期(到达平台的时间，最大60秒)。

在圆形平台测试中的空间参考学习和记忆

装置由直径69cm的圆形平台构成，在其外周周围等距离间隔有16个“逃离”孔，在该装置的帮助下进行了该基于认知的任务测试。逃离避难处安装在一个孔的下方，并用黑色幕帘围住平台，幕帘上放置有各种视觉提示。在单一的5分钟试验开始时，将动物放置在平台中央并提供令其厌恶的刺激(亮光、鼓风)。记录错误(头伸入非逃离孔)的总数和逃离潜伏期(到达逃离孔的时间)。

在平台认知测试中的认知能力

该基于认知的搜索任务评估物体分辨和认知能力。靶物体是直径9cm的圆形平台，装有10cmx40cm黑旗，其位于直径100cm的圆形水池中水表面上方0.8cm处。测试包括每天4次60秒的试验，连续进行4天。在每一天，对于每次试验，将靶物体放置在水池的不同四分之一圆中，对于所有4次试验，在沿着水池外周的相同位置处释放动物。对于每次试验记录总潜伏期(最大60秒)。

修改的Irwin检查

使用了全面的筛选即修改的Irwin方法来确定是否有任何小鼠表现出与其基因型相关的生理、行为或感觉运动缺损。为了调查运动技能、协调性和肌肉强度，将小鼠放置在紧系在两个30cm高的柱子之间的线上，并评估它们在线上的平衡能力。此外，确定了它们用四只爪握紧并悬挂在线上至少5秒钟和爬回到线上的能力。

血管淀粉样蛋白沉积的定量

为了对脑淀粉样蛋白血管病变(CAA)进行定量，将以30μm间隔通过腔壁或小脑皮层软脑膜获得的5μm的石蜡包埋切片，用生物素化的Ab9抗体(抗AJ31-16抗体，1∶500)在4℃下免疫染色过夜(在每个年龄组中每种基因型n＝5-7只小鼠，每只小鼠n＝6个切片)。阳性染色的血管使用修改的Vonsattel’s评分系统(36)进行目测评估。CAA严重性分值通过将CAA血管数量乘以CAA严重性等级进行计算。

组织学：免疫组织化学和免疫荧光

将3到12月龄的Tg和WT小鼠麻醉，并用0.9％NaCl和4％多聚甲醛在0.1mol/L磷酸缓冲盐水(PBS)(pH 7.4)中的溶液，或10％福尔马林和4％多聚甲醛在0.1mol/L PBS(pH 7.4)中的溶液相继进行穿过心脏的灌流。取出脑和脊髓，并储存在4％多聚甲醛中。将一些样品包埋在石蜡中，并在滑动切片机上以10μm的厚度切片。在低温恒温器上切出冷冻切片(14μm)，并固定在铬矾包被的载片上。通过用含有0.3％H2O2的甲醇对切片处理30分钟，淬灭了内源过氧化物酶。将切片在10％马血清中阻断。使用第一抗体，并在4℃下、在1％马血清存在下温育过夜。所有生物素化或荧光素偶联、德克萨斯红偶联和AMCA偶联的第二抗体、荧光染料、ABC试剂盒和作为过氧化物酶活性的发色团的3，3′-二氨基联苯胺都来自Vector Laboratories公司。与第二抗体的温育在室温下进行1小时。所有清洗步骤(3-10分钟)和抗体稀释使用磷酸缓冲盐水(0.1mol/L PBS，pH 7.4)或Tris缓冲盐水(0.01mol/L Tris，0.15mol/L NaCl，pH 7.4)进行。与ABC复合物的温育和用3，3′-二氨基联苯胺的检测按照制造商的手册进行。苏木精复染色按照标准步骤进行。每次测定使用每种基因型、年龄和性别最少三只小鼠(37)。

脑提取物的制备

在最后一次注射后90到120分钟之间，将脑快速收获在冰上并在-80℃下冷冻。在冷冻后称重来自每只小鼠的右侧脑半球。半球质量通过中值绝对偏差的分析允许我们排除与组中的其他样品相比超过4个中值绝对偏差的样品。将脑半球匀浆化，并按照制造商的说明书制备含有全部蛋白的细胞裂解物，用于酶测定试剂盒(R&D Systems，Inc.)。简单来说，将脑皮层在800μl含有低盐的1x提取缓冲液(R&D试剂盒)中匀浆化，并在冰上温育10分钟。然后将匀浆液在4℃下以13,000g离心15分钟。每种样品中的蛋白浓度按照源自双缩脲的测定法(Pierce)进行估算。APP、Aβ40和Aβ42的水平分别通过Western免疫印迹和三明治ELISA技术测量，如(28)所述。此外，可以从同样的提取物中测量α-、β-和γ-分泌酶的活性。

小鼠脑皮层提取物中总APP水平的测定

在每块凝胶中上样相等蛋白量的脑提取物，每种样品每道30μg。每块凝胶包括8种处理：对照，7.5mg/kg剂量的药物1，以及几种剂量的药物2。为了使得凝胶内偏差最小化，每块凝胶包括三套所有处理组。每个印记用22C11抗体探测。每个印记也用β-肌动蛋白抗体进行探测，用于对转移效率进行归一化。将APP条带信号的强度用β-肌动蛋白的强度进行归一化。两个样品“对照”被上样在每个凝胶/印记中，用于测试印记之间的偏差。印记的分析以两种方式进行：逐个印记(n＝3)，以测试凝胶间偏差；以及组合的印记(n＝9或10)，如(38-39)中所述。使用n＝3进行的逐个印记分析与使用n＝9或10进行的最终分析显示出相同的趋势。显示了组合分析的结果。

Aβ三明治ELISA

对于脑AβELISA来说，独立地测定了前脑和后脑的Aβ水平，嗅球不被包含在分析中。对于血浆Aβ分析来说，在心脏穿刺后将血液收集在EDTA涂层的管中。将血样在4℃以3000rpm离心10分钟，并将血浆分成等份试样并储存在-80℃下直到使用。Aβ水平通过末端特异性三明治ELISA来测定，使用Ab9(抗Aβ1-16Ab)作为Aβ40的捕获抗体，13.1.1-HRP(抗Aβ35-40Ab)作为Aβ40的检测抗体，2.1.3(抗Aβ35-42Ab)作为Aβ42的捕获抗体，Ab9-HRP作为Aβ42的检测抗体(在每个年龄组中每个基因组n＝5-7只小鼠)。将Aβ水平与以前使用相同小鼠组的结果作为内部对照进行归一化，以使可能的ELISA可变性最小化，如(28)中所述。

Western印迹

将速冻的前脑样品在含有1％蛋白酶抑制剂混合物(Roche)的放射免疫沉淀测定(RIPA)缓冲液(Boston BioProducts，Worcester，MA)中匀浆。将匀浆液在4℃以100,000x g离心1小时。上清液中的蛋白浓度使用BCA蛋白测定法(Pierce)测定。将蛋白样品(20μg)在Bis-Tris12％XT凝胶或Bis-Tris 4-12％XT凝胶(Bio-Rad，Hercules，CA)上运行，并转移到0.2μm硝酸纤维素膜上。将印记在0.1M PBS中微波处理2分钟，共两次，并用Ab 82E1(抗Aβ1-16抗体，1∶1000；IBL，Gunma，日本)和抗APP C末端20个氨基酸的抗体(1∶1000)进行探测，如(28)中所述。将印记切成条，并用抗β-肌动蛋白抗体(1∶1000；Sigma)作为上样对照重新探测。使用ImageJ软件计算相对条带强度。

实质淀粉样蛋白沉积的定量

将半脑浸泡固定在10％福尔马林中并进行石蜡包埋加工。将脑组织切片(5μm)用抗总Aβ抗体(Ab)进行免疫染色。将切片用苏木精复染色。使用每个脑通过海马、梨状皮层(前囟，-1.70到-2.80mm)或小脑(副绒球、袢状脚(crus ansiform)和简单小叶(simple lobules)；前囟，-5.40到-6.36mm)的6个切片用于定量(在每个年龄组中每种基因型n＝5-7只小鼠)。Aβ蛋白斑载荷使用MetaMorph软件(Molecular Devices，Palo Alto，CA)测定。对于具核蛋白斑的定量来说，将那些用于Aβ载荷分析的连续切片用硫黄素S(ThioS)染色，并对海马、内嗅/梨状皮层或小脑中的ThioS阳性蛋白斑的数量进行计数。所有上述分析以不知情方式进行。

体内数据的统计学分析

来自所有实验的结果使用STATISTICA 8.0(Statsoft)进行分析)。Aβ水平、淀粉样蛋白斑载荷和CAA严重性通过使用带有post hoc Holm-Sidak多重比较检验或双尾Student′s t检验的ANOVA进行分析。如果数据组不满足参数检验假定，进行Kruskal-Wallis检验然后进行post hoc Dunn′s多重比较，或进行Mann-Whitney秩和检验。为了测试双转基因小鼠中的Aβ水平是否与单转基因同窝仔畜中的Aβ水平的累加和一致，使用了不含截距检验的多重线性回归。所有的比较在同窝仔畜之间进行。

排除对照(0mg/kg)样品后进行了药物反应模拟。ED50对应于在实验中诱导出最大药物诱导反应的50％所需的剂量(mg/kg)。它使用用于ED50对数的Hill方程模型来计算。

参考文献目录

1.Crook R.，Verkkoniemi A.等，(1998).A variant of Alzheimer′s disease with spastic paraparesis and unusual plaques due to deletion of exon 9 of presenilin 1.(由于早老素1外显子9的缺失而具有痉挛性截瘫和不寻常蛋白斑的阿尔茨海默病变体)Nat Med.4(4)：452-5.

2.Houlden H.，Baker M.等，(2000).Variant Alzheimer′s disease with spastic paraparesis and cotton wool plaques is caused by PS-1 mutations that lead to exceptionally high amyloid-beta concentrations.(具有痉挛性截瘫和棉绒状蛋白斑的阿尔茨海默病变体由导致异常高的β淀粉样蛋白浓度的PS-1突变引起)Ann Neurol.48(5)：806-8.

3.Kwok J.B.，Taddei K.等，(1997).Two novel(M233T and R278T)presenilin-1 mutations in early-onset Alzheimer′s disease pedigrees and preliminary evidence for association of presenilin-1mutations with a novel phenotype.(早期发作的阿尔茨海默病系谱中两个新的(M233T和R278T)早老素-1突变以及早老素-1突变与新表型的关联的初步证据)Neuroreport.8(6)：1537-42.

4.Verkkoniemi A.，Kalimo H.等，(2001).Variant Alzheimer disease with spastic paraparesis：neuropathological phenotype.(具有痉挛性截瘫的阿尔茨海默病变体：神经病理学表型)J Neuropathol Exp Neurol.60(5)：483-92.

5.Citron M.(2004).Strategies for disease modification in Alzheimer′s disease.(在阿尔茨海默病中用于改变疾病的策略)Nat Rev Neurosci.5(9)：677-85.

6.Suh Y.H.和Checler F.(2002).Amyloid precursor protein，presenilins，and alpha-synuclein：molecular pathogenesis and pharmacological applications in Alzheimer′s disease.(淀粉样蛋白前体蛋白、早老素和α-synuclein：分子病理发生和在阿尔茨海默病中的药理学应用)Pharmacol Rev.54(3)：469-525.

7.Blacker D.，Albert M.S.等，(1994).Reliability and validity of NINCDS-ADRDA criteria for Alzheimer′s disease.The National Institute of Mental Health Genetics Initiative.(NINCDS-ADRDA标准判据用于阿尔茨海默病的可靠性和有效性。国立精神健康遗传学研究所首创)Arch Neurol.51(12)：1198-204.

8.Rossor M.N.，Fox N.C等，(1996).Clinical features of sporadic and familial Alzheimer′s disease.(散发性和家族性阿尔茨海默病的临床特点)Neurodegeneration.5(4)：393-7.

9.Glenner G.G.，Wong C.W.等，(1984).The amyloid deposits in Alzheimer′s disease：their nature and pathogenesis.(阿尔茨海默病中的淀粉样沉积物：其性质和病理发生)Appl Pathol.2(6)：357-69.

10.Ballatore C，Lee V.M.等，(2007).Tau-mediated neurodegeneration in Alzheimer′s disease and related disorders.(阿尔茨海默病和相关病症中由Tau介导的神经变性)Nat Rev Neurosci.8(9)：663-72.

11.Bell K.F.和Claudio Cuello A.(2006).Altered synaptic function in Alzheimer′s disease.(阿尔茨海默病中改变的突触功能)Eur J Pharmacol.545(1)：11-21.

12.Hardy J.A.和Higgins G.A.(1992).Alzheimer′s disease：the amyloid cascade hypothesis.(阿尔茨海默病：淀粉样蛋白级联假说)Science.256(5054)：184-5.

13.Braak H.和Braak E.(1991).Neuropathological stageing of Alzheimer-related changes.(阿尔茨海默病相关变化的神经病理学分级)Acta Neuropathol.82(4)：239-59.

14.Golde T.E.(2005).The Abeta hypothesis：leading us to rationally-designed therapeutic strategies for the treatment or prevention of Alzheimer disease.(Aβ假说：引领我们合理设计治疗策略，用于阿尔茨海默病的治疗或预防)Brain Pathol.15(1)：84-7.

15.Hardy J.和Selkoe D.J.(2002).The amyloid hypothesis of Alzheimer′s disease：progress and problems on the road to therapeutics.(阿尔茨海默病的淀粉样蛋白假说：通往治疗之路的进展和问题)Science.297(5580)：353-6.

16.Selkoe D.J.(2000).The genetics and molecular pathology of Alzheimer′s disease：roles of amyloid and the presenilins.(阿尔茨海默病的遗传学和分子病理学：淀粉样蛋白和早老素的作用)Neurol Clin.18(4)：903-22.

17.Huang Y.Z.，Won S.等，(2000).Regulation of neuregulin signaling by PSD-95interacting with ErbB4at CNS synapses.(通过CNS突触处PSD-95与ErbB4的相互作用调控神经调节蛋白信号传导)Neuron.26(2)：443-55.

18.Naruse S.，Thinakaran G.等，(1998).Effects of PS1 deficiency on membrane protein trafficking in neurons.(PS1缺陷对神经元中膜蛋白运输的影响)Neuron.21(5)：1213-21.

19.Leeuwen F.N.，Kain H.E.等，(1997).The guanine nucleotide exchange factor Tiam1 affects neuronal morphology；opposing roles for the small GTPases Rac and Rho.(鸟嘌呤核苷酸交换因子Tiam1影响神经元的形态；小GTPases Rac和Rho的相反作用)J Cell Biol.139(3)：797-807.

20.Guan K.L.和Rao Y.(2003).Signalling mechanisms mediating neuronal responses to guidance cues.(介导神经元对导向指令的响应的信号传导机制)Nat Rev Neurosci.4(12)：941-56.

21.Comeau M.R.，Johnson R.等，(1998).A poxvirus-encoded semaphorin induces cytokine production from monocytes and binds to a novel cellular semaphorin receptor，VESPR.(痘病毒编码的信号素诱导单核细胞生产细胞因子并与新的细胞信号素受体VESPR结合)Immunity.8(4)：473-82.

22.Hall K.T.，Boumsell L.等，(1996).Human CD100，a novel leukocyte semaphorin that promotes B-cell aggregation and differentiation.(人类CD100，一种促进B-细胞聚集和分化的新的白细胞信号素)Proc Natl Acad Sci USA.93(21)：11780-5.

23.Kolodkin A.L.，Matthes D.J.等，(1993).The semaphorin genes encode a family of transmembrane and secreted growth cone guidance molecules.(信号素基因编码一组跨膜和分泌的生长锥导向分子)Cell.75(7)：1389-99.

24.Luo Y.，Shepherd L等，(1995).A family of molecules related to collapsin in the embryonic chick nervous system.(在鸡胚神经系统中与脑衰蛋白相关的分子家族)Neuron.14(6)：1131-40.

25.Messersmith E.K.，Leonardo E.D.等，(1995).Semaphorin III can function as a selective chemorepellent to pattern sensory projections in the spinal cord.(信号素III可以起到选择性化学排斥物的作用以形成感觉投射样式)Neuron.14(5)：949-59.

26.Brose K.和Tessier-Lavigne M.(2000).Slit proteins：key regulators of axon guidance，axonal branching，and cell migration.(Slit蛋白：轴突导向、轴突分支和细胞迁移的关键调节物)Curr Opin Neurobiol.10(1)：95-102.

27.Le Gall M.，De Mattei C等，(2008).Molecular separation of two signaling pathways for the receptor Notch.(两个用于受体Notch的信号传导途径的分子分离)Dev Biol.313(2)：556-67.

28.Lahiri D.K.等，(2007)Experimental Alzheimer′s Disease Drag Posiphen[(Phenserine]Lowers Amyloid-betaPeptide Levels in Cell Culture and Mice.(实验性阿尔茨海默病药物Posiphen[(苯基丝氨酸]降低细胞培养物和小鼠中的β-淀粉样肽水平)Journal of Pharmacology and experimental therapeutics 320：386-396.

29.PJ.Mitchell等，(2007)A quantitative method for analysis of in vitro neurite outgrowth.(用于分析体外轴突生长的定量方法)Journal of Neuroscience Methods 164 350-362

30.Sang Tae KIM等，(2006)Neuroprotective Effect of Some Plant Extracts in Cultured CT105-Induced PC12 Cells.(某些植物提取物在经培养的由CT105诱导的PC12细胞中的神经保护效应)Biol.Pharm.Bull.29(10)2021-2024

31.McGowan E.等，(2005)Aβ42Is Essential for Parenchymal and Vascular Amyloid Deposition in Mice.(Aβ42对于小鼠中实质和血管淀粉样沉积是必需的)Neuron 47：191-199.

32.Leighty R.E.等，(2008)Use of artificial neural networks to determine cognitive impairment and therapeutic effectiveness in Alzheimer′s transgenic mice.(在阿尔茨海默病转基因小鼠中使用人工神经网络确定认识缺损和治疗效果)Journal of Neuroscience Methods 167：358-366

33.Ashe KH(2001)Learning and memory in transgenic mice modelling Alzheimer′s disease.(模拟阿尔茨海默病的转基因小鼠中的学习和记忆)Learning and Memory 8：301-308.

34.Carlson GA等，(1997)Genetic modification of the phenotypes produced by amyloid precursor protein overexpression in transgenic mice.(由淀粉样蛋白前体蛋白在转基因小鼠中的过表达产生的表型的遗传修饰)Human Molecular Genetics 6：1951-1959.

35.Hsiao K等，(1996)Correlative memory deficits，Abeta elevation，and amyloid plaques in transgenic mice.(转基因小鼠中相关联的记忆损伤、Aβ升高和淀粉样蛋白斑块)Science 274：99-102.

36.Greenberg S.M.和Vonsattel J.P.(1997)Diagnosis of cerebral amyloid angiopathy.Sensitivity and specificity of cortical biopsy.(脑淀粉样血管病的诊断。皮层活组织检查的灵敏性和特异性)Stroke28(7)：1418-22

37.Schindowski K.等，(2006)Alzheimer′s Disease-Like Tau Neuropathology Leads to Memory Deficits and Loss of Functional Synapses in a Novel Mutated Tau Transgenic Mouse without Any Motor Deficits.(阿尔茨海默病类的Tau神经病在没有任何运动缺损的新的突变的Tau转基因小鼠中引起记忆损伤和功能性突触的丧失)Am JPathol.169：599-616.

38.Lahiri DK等，(2004)Dietary supplementation with melatonin reduces levels of amyloid beta-peptides in the murine cerebral cortex.(补充褪黑素的饮食降低了鼠类脑皮层中β-淀粉样肽的水平)Journal of Pineal Research 36：224-231.

39.Basha MR等，(2005)The fetal basis of amyloidogenesis：exposure to lead and latent overexpression of amyloid precursor protein and beta-amyloid in the aging brain.(淀粉样病变的胎儿基础：暴露于铅和衰老脑中的淀粉样蛋白前体蛋白和β-淀粉样蛋白的潜伏过表达)Journal of Neuroscince 25：823-829.

40.Singer C，Figueroa-Masot X.，Batchelor R.和Dorsa D.Mitogen-activated protein kinase pathway mediates estrogen neuroprotection after glutamate toxicity in primary cortical neurons.(促细胞分裂原激活的蛋白激酶途径在初级皮层神经元中介导谷氨酸毒性后雌激素的神经保护作用)J.Neuroscience，1999，19(7)：2455-2463.

Claims

1.一种组合物，其包含至少两种化合物的组合，所述化合物选自唑尼沙胺、二羟丙茶碱、他达拉非、阿加曲班、阿坎酸、西那卡塞、特比萘芬、西洛他唑、巴氯芬、苯乙双胍、氨氯地平和磺胺异噁唑，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于同时、单独或顺序给药。

2.一种组合物，其包含至少两种化合物的组合，所述化合物选自唑尼沙胺、二羟丙茶碱、他达拉非、阿加曲班、阿坎酸、西那卡塞、特比萘芬、西洛他唑、巴氯芬、苯乙双胍、氨氯地平和磺胺异噁唑，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，其中所述组合物改善在神经变性疾病中改变的突触功能，所述神经变性疾病选自阿尔茨海默病(AD)、帕金森病(PD)、肌萎缩性侧索硬化(ALS)和多发性硬化(MS)。

3.权利要求1的组合物，其包含至少两种化合物的组合，所述化合物选自唑尼沙胺、二羟丙茶碱、他达拉非、阿加曲班、阿坎酸、西那卡塞、特比萘芬、西洛他唑、巴氯芬、苯乙双胍、氨氯地平和磺胺异噁唑，或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于治疗阿尔茨海默病(AD)。

4.一种组合物，其包含下述药物组合中的至少一种，用于组合、单独或顺序给药：

5.权利要求1的组合物，其用于在需要的对象中治疗阿尔茨海默病或相关病症，其中所述组合物包含下述药物组合中的至少一种，用于组合、单独或顺序给药：

-苯乙双胍和唑尼沙胺，

-苯乙双胍和阿坎酸，

-苯乙双胍和磺胺异噁唑，

-阿坎酸和磺胺异噁唑，

-唑尼沙胺和磺胺异噁唑，

-阿坎酸和西洛他唑，

-阿坎酸和唑尼沙胺，

-阿坎酸和西洛他唑，

-唑尼沙胺和二羟丙茶碱，

-唑尼沙胺和阿加曲班，

-苯乙双胍和二羟丙茶碱，

-苯乙双胍和西洛他唑，

-他达拉非和西洛他唑，或

-唑尼沙胺和西洛他唑。

6.前述权利要求任一项的组合物，其中所述组合物进一步包含至少一种调节突触功能的药物，用于组合、单独或顺序使用。

7.权利要求6的组合物，其中所述至少一种调节突触功能的药物选自ABAT的抑制剂(优选为氨己烯酸)；和/或ABL1的抑制剂(优选为伊马替尼)；和/或CACNA2D3的抑制剂(优选为普瑞巴林)；和/或CASR的调节剂(优选为西那卡塞)；和/或CNGB3的调节剂(优选为阿米洛利)；和/或DHFR的抑制剂(优选为氨苯喋啶)，和/或EPHA3的抑制剂(优选为达沙替尼)，和/或GABRA2的调节剂(优选选自苯巴比妥和氨曲南)，和/或GRIK1的拮抗剂(优选为托吡酯)，和/或HTR1B和HTR1D的调节剂(优选选自麦角胺和依来曲普坦)，和/或KCND2的拮抗剂(优选为利多卡因)，和/或KCNMA1的调节剂(优选为氯唑沙宗)，和/或NOS1的调节剂(优选选自酮替芬和丙硫氧嘧啶)，和/或NRP2的抑制剂(优选为哌加他尼)，和/或OPCML的调节剂(优选为阿芬太尼)，和/或OPRK1的调节剂(优选选自丁丙诺啡和喷他佐辛)，和/或PDE4D的抑制剂(优选为米力农)，和/或PRKG1的活化剂(优选为硝普纳)，和/或RHOA的调节剂(优选为阿仑膦酸盐)，和/或SCN1A/B的抑制剂(优选为磷苯妥英)，和/或SLC6A1的抑制剂(优选为噻加宾)，和/或SLC9A1的调节剂(优选为布克力嗪)，和/或SLC12A1的抑制剂(优选为布美他尼)，和/或TROMBIN的抑制剂(优选为地西卢定)，和/或TSPO的调节剂(优选选自氟硝西泮和替马西泮)，和/或YES1的抑制剂(优选为达沙替尼)。

8.权利要求6的组合物，其中所述至少一种调节突触功能的药物选自与由选自下列的基因编码的蛋白结合或调节该蛋白的活性的一种或多种药物：ABAT、ABI1、ABL1、ADORA2A、ADORA2B、AKT、AMPK、ANKRA、APBA1、ARHGAP26、ATG5、BASSOON、BDNF、BECLIN1、BIN1、BK通道(KCNMA1、KCNMB1)、CACNA1C、CACNA2D3、CACNA2D4、CADPS2、钙调磷酸酶、钙调蛋白、CASK、CASR、CAST、CBL、CDC2、CDC42、CDC42BPB、CDC42EP3、CDH 13、CDH2、CDK5、CITRON、CNGB3、皮层肌动蛋白、CRAM、CREB、CRMP、CTNNB1、DAB1、DCC、DEPDC2、DHFR、DLG2、DYN1、DYN3、内吞蛋白、EDNRA、EPHA3、EPHBR、EPHEXIN、EPHRINA、EPHRINB、ERBB4、ERK1、ERK2、FES、FYN、GABBR1、GABBR2、GABRA2、GABRG2、GAT1、GLRA1、GEPHYRIN、GIPC1、GIPC2、GLUD1、GRANUPHILIN、GRIA2、GRIA3、GRID1、GRID2、GRIK1、GRIK2、GRIN2B、GRIN3A、GRIP、GRM3、GRM5、GRM6、GRM7、GRM8、HOMER、HTR1B、HTR1D、KALIRIN、KCNA2、KCHIP1、KCHIP2.2、KCND2、KCNJ3、KCNJ12、KTN1、KYNU、LYN、MAML3、MINT1、MUC1、MUNC13、MUNC18A、MYO6、MYOL、NAV1、NBEA、NCAM1、NCK1、NCK2、NETRIN1、NFKB1、NGEF、NGF、NGFR、NIL16、NLGN1、NOC2、NOS1、NOTCH1、NOTCH2、NOTCH3、NPC1、NPC2、NPIST、NRG3、NRP1、NRP2、NRX3、NTF3、NTF5、NWASP、OPCML、OPRK1、PAK6、PAK7、PAR1、PARK2、PDE11A、PDE3A/3B、PDE4A/4B/4D、PI3K、PIAS1、PICALM、PICK1、PIP5K、PKA、PKCA、PLD2、PLEXA1、PP1C、PPFIBP1、PRKG1、PSD95、PTN、PTPRF、PYK2、RAB3B、RABPHILIN、RAC1、RAP1、RAS、RASGRF2、RBPJ、REELIN、RGNEF、RHOA、RHOG、RIM2、RIMS1、RIMS2、ROBO2、ROCK2、RPH3AL、SACM1L、SAPAP、SCN1A、SCN1B、SEC24D、SEMA3A、SEMA3C、SEMA3E、SEMA4C、SIAH1A、SLC12A1、SLC12A2、SLC12A5、SLC1A2、SLC6A1、SLC6A18、SLC9A1、SLIT1、SNAP25、SORBS2、SRC、SRGAP3、STX2、STXBP6、SUM1、SV2C、突触泡磷酸酶、突触融合蛋白1A、SYT12、TACE、TBR1、TRIO、TRKB、TROMBIN、TSPO、UBE2A、ULK4、UNC 13C、UNC5C、VAMP2、VAMP5、VELI、粘着斑蛋白、WASPIP、WAVE、WWOX、YAP和YES1。

9.前述权利要求任一项的组合物，其中组合物进一步包含至少一种调节血管生成的药物，用于组合、单独或顺序使用。

10.权利要求9的组合物，其中所述至少一种调节血管生成的药物选自沙丁胺醇、阿仑膦酸盐、安贝生坦、氨基己酸、巴柳氮、贝卡普勒明、卡麦角林、氯吡格雷、双氢麦角胺、依普利酮、非诺多泮、乙酸氟氢可的松、吉非罗齐、橙皮素、来氟米特、L-组氨酸、碘赛罗宁、马立马司他、美洛昔康、米帕林、醋甲唑胺、甲巯咪唑、孟鲁司特、奈替米星、硝酸甘油、苯基丁酸、乙胺嘧啶、舒尼替尼、硫乙拉嗪、替罗非班、拓扑替康、阿糖腺苷和华法林。

11.前述权利要求任一项的组合物，其中组合物进一步包含至少一种调节细胞应激反应的药物，用于组合、单独或顺序使用。

12.权利要求11的组合物，其中所述至少一种调节细胞应激反应的药物选自阿拉伯糖醇、甘露醇、间羟胺、奥美拉唑、丙胺卡因、雷帕霉素、利福布汀、硫鸟嘌呤和海藻糖。

13.前述权利要求任一项的组合物，其包含可药用的载体或赋形剂。

14.前述权利要求任一项的组合物，其中所述组合物重复地给药于对象。

15.一种生产用于治疗阿尔茨海默病或相关病症的药物的方法，所述方法包括测试候选药物对突触功能的活性以及选择改善突触功能的候选药物的步骤。

16.权利要求15的方法，其包括确定所述候选药物是否与权利要求8中定义的基因或蛋白结合或调节该基因或蛋白的活性。

17.一种生产用于治疗阿尔茨海默病或相关病症的组合物的方法，所述方法包括制备调节突触功能的药物和调节血管发生或细胞应激反应的药物的组合，用于向需要的对象同时、单独或顺序给药。

18.一种治疗阿尔茨海默病或相关病症的方法，所述方法包括向需要的对象同时、单独或顺序给药调节突触功能的药物和调节血管发生或细胞应激反应的药物。

19.一种组合物，其至少包含唑尼沙胺和阿坎酸或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于同时、单独或顺序给药。

20.一种组合物，其至少包含唑尼沙胺和/或阿坎酸或其盐或前体药物或衍生物或持续释放制剂，用于治疗阿尔茨海默病或相关病症。