CN102028629A - 含胶原修饰脂质体的化妆品主剂和含该主剂的皮肤化妆品 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种化妆品用主剂和使用该主剂的化妆品。能够不损害胶原原有的三螺旋结构，提高对肌肤的亲和性和驻留性，提高作为皮肤化妆品使用时皮肤的水分保持能力，并且提高化合水量，更有效地发挥保湿效果。本发明的化妆品用主剂的特征在于，含有用具有三螺旋结构的水溶性胶原进行表面修饰后的脂质体的水溶液。

Description

含胶原修饰脂质体的化妆品主剂和含该主剂的皮肤化妆品

技术领域

本发明涉及含有胶原修饰脂质体的化妆品主剂、和含有该主剂的皮肤化妆品。

背景技术

所谓胶原，一般是构成我们身体的纤维状蛋白质，在皮肤组织中，真皮的主要成分是胶原。正常皮肤的胶原起到所谓的皮肤中支柱的作用，牢固地支撑表皮，给皮肤带来弹性和张力。这种胶原具有三螺旋结构，由于其结构形状，水分保持能力非常高，而且化合水量也高。

一直以来，出于对这种胶原的高水分保持能力所带来的保湿效果的期待，开发了许多皮肤化妆品和添加物等，但是，由于胶原的平均分子量非常高，达到约20万～约40万，因此，对于提高在各制剂中的溶解性、改善对皮肤的渗透，利用进行加热处理使溶解性提高的明胶、或对该明胶进行切断处理而得到的低分子明胶(所谓的水解胶原)应对。

非专利文献1：Takada，M.，Yuzuriha，T.，Katayama，K.，Iwamoto，K.，Sunamoto，J.，Biochim.Biophys.Acta，802，237(1984)

非专利文献2：Sunamoto，J.，Iwamoto，K.，Takada，M.，Yuzuriha，T.，Katayama，K.，In Polymers in Medicine；Chillini，E.，Giusti，P.A.，Eds.Plenum Publishing Co.New York，1984，p157，Moellerfeld，J.，Press，W.，Ringsdorf

非专利文献3：Hamazaki，H.，Sunamoto，J.，J.Biochim.Biophys.Acta，857，265(1986)

非专利文献4：Sunamoto，J.，Sato，T.，Taguchi，T.，Hamazaki，H.，Macromolecules，25，5567(1992)

这些论文都是通过使疏水性长链烷基或胆固醇与支链淀粉等多糖类化学结合，将这些疏水基修饰的多糖类与脂质体混合，从而疏水性基团自发地整合到脂质体膜上，制备出被疏水基修饰的多糖类包覆的脂质体。因此，这是一种抑制脂质体内容物泄露、并使之稳定的技术。而且，也可以通过上述包覆实现脂质体在血中的稳定性。但是，对于胶原来说，由于在向胶原分子中导入疏水性基团的过程中包括加热工序，导致胶原的三螺旋结构被破坏，因此，这些论文中公开的技术并不适用。而且，包覆方法和目的也不同。因此，尽管从向脂质体包覆高分子物质的观点出发，可以认为是现有技术文献，但是，与本申请相比，在包覆技术和/或目的方面都存在明显差异。

发明内容

本发明的目的在于不损害胶原原有的三螺旋结构，提高对肌肤的亲和性和驻留性，提高作为皮肤化妆品使用时皮肤的水分保持能力，并且提高化合水量，更有效地发挥保湿效果。

反复进行深入研究，结果发现：通过使用使维持了三螺旋结构的水溶性胶原吸附在脂质体表面的胶原修饰脂质体，能够解决上述问题，从而完成了本发明，其中，所述脂质体具有与角质层细胞间脂质结构类似的双分子膜结构。

也就是说，本发明涉及以下内容。

(1)一种化妆品用主剂，其特征在于：含有用具有三螺旋结构的水溶性胶原进行表面修饰后的脂质体的水溶液。

(2)根据上述(1)所述的化妆品用主剂，其特征在于：含有用具有三螺旋结构的水溶性胶原进行表面修饰后的脂质体的水溶液、和透明质酸和/或水解弹性蛋白。

(3)根据上述(1)或(2)所述的化妆品用主剂，其特征在于：具有三螺旋结构的水溶性胶原是去端肽胶原(atelocollagen)。

(4)根据上述(1)～(3)中任一项所述的化妆品用主剂，其特征在于：其经过冻干。

(5)一种皮肤化妆品，其特征在于：含有上述(1)～(3)中任一项所述的化妆品用主剂。

(6)根据上述(5)所述的皮肤化妆品，其特征在于：其经过冻干。

发明效果

本发明的胶原修饰脂质体通过将不进行用于提高在水中的溶解性和分散性的化学处理等、维持了三螺旋结构状态的水溶性胶原吸附到脂质体上而成，使用水分保持能力高的状态的胶原，提供对皮肤的保水效果优异的化妆品。

通常，水溶性胶原由于其带电状态，在与透明质酸共存时形成复合体，溶液形成不均匀的状态，各自原本的保水功能缺失。但是，根据本发明，通过使水溶性胶原吸附在预先控制了表面电荷的脂质体上，能够稳定地保持水溶性胶原的结构，在与透明质酸和水解弹性蛋白共存的条件下，不形成上述复合体，能够得到均匀稳定的组合物。

而且，为了维持胶原所具有的三螺旋结构，对于水溶液、凝胶、乳剂等存在游离水的剂型，通过在胶原的变性温度(鱼类：20～30℃，哺乳类：36～38℃)以下制造、保管，能够实现其稳定化。另一方面，通过进行冻干，使游离水为0％，即使在变性温度以上也能够维持三螺旋结构，使用时添加水溶液将冻干组合物分散，涂布在肌肤上，之后在变性温度以下保管、维持，即使是这种使用时调制的类型，也可以以使胶原三螺旋结构稳定化的制剂来使用。在此，胶原的三螺旋结构，由于存在游离水而在变性温度以上其结构破坏，形成明胶，但是，即使存在水，只要其为化合水，则即使在变性温度以上，三螺旋结构也不会破坏。

具体实施方式

本发明的化妆品用主剂胶原修饰脂质体是通过使水溶性胶原吸附到预先控制了表面电荷的脂质体上，并经过表面处理而得到的。

为了将脂质体的表面电荷控制为正，在作为脂质体膜主要成分的磷脂酰胆碱(表面电荷为0)中添加具有正电荷的磷脂酰乙醇胺、二烷基醚铵盐等，获得控制为正电荷的脂质体。

此外，为了将脂质体的表面电荷控制为负，在作为脂质体膜主要成分的磷脂酰胆碱(表面电荷为0)中添加具有负电荷的磷酸二鲸蜡酯(di phosphate)、磷脂酰肌醇、磷脂酰甘油、磷脂酸等，获得控制为负电荷的脂质体。

为了控制吸附在脂质体表面的水溶性胶原的电荷，可以通过酶处理，获得具有正电荷的胶原；通过碱处理，获得具有负电荷的胶原。

脂质体的分子量，平均来说，可以在约1万～约300万之间适当选择。

吸附在脂质体表面的水溶性胶原，可以按脂质体∶胶原＝1∶0.01～1∶100，优选1∶0.1～1∶10的摩尔比吸附。

本发明中使用的水溶性胶原是不进行用于提高在水中的溶解性和分散性的化学处理等，维持了三螺旋结构的状态的胶原。水溶性胶原的分子量优选为约20万～约40万。此外，从排除末肽偶尔产生的变态反应方面考虑，优选除去了位于胶原分子两末端的末肽的去端肽胶原。

通常，由于制造、保管的复杂性以及提高在水中的溶解性，大部分情况下使用经过加热处理的明胶、或通过化学或酶处理等切割原来的胶原的分子量而使其低分子化的产物，但是，本发明所使用的水溶性胶原使用维持了胶原原有的三螺旋结构的状态的胶原，因此，水分保持能力高。

本发明中的所谓脂质体是通过混合磷脂和水而获得的、由磷脂单层或多层构成的封闭小泡，与细胞的亲和性高。作为脂质体的膜形成基材，可以列举磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酸、溶血磷脂酰胆碱、神经鞘磷脂、蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂等天然或合成的磷脂或者氢化磷脂、胆固醇类，例如胆固醇、胆固醇的烷基酯、植物甾醇、植物甾醇的烷基酯、甘油糖脂、十六烷基半乳糖苷等酰基葡糖苷、磷酸二鲸蜡酯、二烷基型合成表面活性剂、N-酰基-神经鞘氨醇或其硫酸酯、N-酰基糖鞘脂、N-高级酰基谷胱甘肽的一种或两种以上的混合物。此外，为了脂质体的稳定化或相转换温度的改善，可以根据需要配合多元醇、高级醇、高级脂肪酸等。

而且，也可以在脂质体中内包亲水性药效成分和/或亲油性药效成分。作为亲水性药效成分或亲油性药效成分，例如可以列举抗氧化剂、抗菌剂、抗炎症剂、血液循环促进剂、美白剂、防皮肤粗糙剂、防老化剂、保湿剂、激素剂、维生素剂、色素和蛋白质类。

作为脂质体的制造方法，可以列举超声波法、醇注入法、胆酸除去法、逆相蒸发法、挤出(Extruder)法、微射流(Microfluidizer)法等。

并且，通过使之与具有高保湿效果的透明质酸和/或水解弹性蛋白共存，能够制备水分保持能力优异的高功能保水化妆品，由此也能够调节由于皮肤干燥引起的皱纹、皮肤的代谢。

弹性蛋白和胶原都是位于项韧带、血管、皮肤等结缔组织中的重要的蛋白质，具有几乎不溶于水的性质。本发明中的所谓水解弹性蛋白，是通过对项韧带等进行酶处理或草酸处理，使得在水中的溶解性提高的水解弹性蛋白。

在本发明中，配合上述胶原修饰脂质体、或者在胶原修饰脂质体中混合有透明质酸和/或水解弹性蛋白而形成的化妆品用主剂，能够得到皮肤化妆品。

作为本发明的皮肤化妆品，没有特别限定，例如可以列举包括美容液、乳液、霜、化妆水、面膜、洗面剂、按摩剂、粉底液、粉底乳或粉状粉底等的面妆化妆品等的化妆品、以及身体用化妆品。

在本发明的皮肤化妆品中，作为胶原修饰脂质体的配合标准，为皮肤化妆品中的0.001～10wt％，优选为0.01～5wt％。

在本发明的皮肤化妆品中，胶原修饰脂质体与透明质酸和/或水解弹性蛋白的配合比例可以以任意比例使用，但是，透明质酸和/或水解弹性蛋白的总配合比例优选每份皮肤化妆品为0.001～10wt％，更优选为0.005～1wt％。如果配合量超过上述量，水中的分散性变得困难，可能会发生分离、变色或变臭等对稳定性以及作为皮肤化妆品的感官产生不良影响，因此不优选。

除了上述必需成分之外，在不损害本发明效果的范围内，可以适当选择使用通常在化妆品中配合的成分，例如油脂类、烃、蜡类、脂肪酸、合成酯类等、醇类、粉末、表面活性剂、增稠剂、高分子化合物、凝胶化剂、紫外线吸收剂、紫外线散射剂、防氧化剂、色素、颜料、防腐剂、香料、药剂或水等。

作为油脂类，可以列举霍霍巴油、蓖麻油、橄榄油、大豆油、椰子油、棕榈油、可可油、貂油、鳖油等。

作为烃类，可以列举液体石蜡、凡土林、微晶蜡、角鲨烷等。

作为蜡类，可以列举蜂蜡、羊毛脂、巴西棕榈蜡(carnauba wax)、小烛树蜡等。

作为脂肪酸，可以列举肉豆蔻酸、软脂酸、硬脂酸、油酸、异硬脂酸、月桂酸等。

作为合成酯类，可以列举肉豆蔻酸异丙酯、软脂酸异丙酯、油酸丁酯、肉豆蔻酸肉豆蔻酯、肉豆蔻酸辛基十二烷基酯、单硬脂酸丙二醇酯、乳酸肉豆蔻酯、苹果酸异硬脂醇酯、单硬脂酸甘油酯、二硬脂酸二甲基氯化铵等。

油脂类、烃、蜡类、脂肪酸、合成酯类，通常按每份皮肤化妆品共计0～30w/w％的比例配合。

作为醇类，可以列举乙醇、1，3-丁二醇、丙二醇、月桂醇、鲸蜡醇、硬脂醇、油醇等。醇类通常按每份皮肤化妆品0～25w/w％的比例配合。

作为表面活性剂，可以列举聚甘油脂肪酸酯类、山梨糖醇酐脂肪酸酯类、聚氧乙烯脂肪酸酯类、聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯类、聚氧乙烯烷基醚类、椰子油脂肪酸单乙醇胺(coconut oil fatty acidmonoethanol amid)、聚氧乙烯固化蓖麻油、月桂基硫酸钠、焦谷氨酸异硬脂酸聚氧乙烯甘油、烷基苯磺酸钠、聚氧乙烯硬脂醚、二烷基磺基琥珀酸、溴化鲸蜡基吡啶、氯化正十八烷基三甲基铵、单烷基磷酸、N-酰基氨基磺酸酯(N-acylsulfamate)、N-酰基谷氨酰胺、蔗糖脂肪酸酯、聚氧乙烯山梨糖醇酐单硬脂醇酯、聚氧乙烯月桂基醚硫酸钠、聚氧乙烯还原羊毛脂、糖酯等。表面活性剂通常按每份皮肤化妆品0～10w/w％的比例配合。

作为增稠剂，可以列举羧基乙烯基聚合物、甲基聚硅氧烷、葡聚糖、羧甲基纤维素、角叉菜胶、羟丙基甲基纤维素等。增稠剂通常按每份皮肤化妆品0～5w/w％的比例配合。

作为保湿剂，可以列举甘油、丙二醇、1，3-丁二醇、焦谷氨酸、乙酰谷氨酸、原花青素(procyanidin)等。保湿剂通常按每份皮肤化妆品0～25％的比例配合。

作为防腐剂，可以列举苯甲酸、水杨酸、脱氢乙酸或它们盐类、对氧苯甲酸酯类的酚类、三氯生、卤代烃(halocarbon)等。防腐剂通常按每份皮肤化妆品0～0.3w/w％的比例配合。

香料可以使用通常在皮肤化妆品中使用的任意香料。

作为颜料，可以列举氧化铁、二氧化钛、氧化锌、高岭土、滑石等。颜料通常按每份皮肤化妆品0～5w/w％的比例配合。

作为药剂，可以列举小麦胚芽油、维生素A、维生素B2、维生素E、抗坏血酸-2-磷酸镁或钠、D-泛醇、甘草酸二钾、谷胱甘肽、UV吸收剂、螯合剂、植物提取物、微生物代谢物/提取物等。药剂通常按每份皮肤化妆品0～5w/w％的比例配合。

作为水，可以列举自来水、矿泉水、盐水、海水、海洋深层水、超纯水、来自极地冰的水、含矿水、精制水等。水可以按任意比例配合。

此外，本发明的所谓海洋深层水，是表面海水沉降形成层的产物，是低温、纯净、富含营养盐的特有水，其取水海域为1000～4000m，优选为2000～3000m，取水深度为250～500m，优选为300～400m。

由于海洋深层水含有丰富的矿物质，因此保湿性优异，并且渗透感优异，可以认为其能够促进混合于化妆品中的有效成分向皮肤内的渗透。

本发明的皮肤化妆品可以为任意剂型，例如可以为可溶类乳化剂型或分散型的剂型。

在本发明中，为了在胶原的变性温度以上进行保管，可以将上述化妆品用主剂或皮肤化妆品冻干。所谓冻干法表示，以三相点以下的压力，在固液平衡线上产生相变化，水分通过升华从固相(冰)中直接气化而除去，实现水分除去、即干燥。将这种通过升华进行的脱水干燥法称为真空冻干，通过使用这种方法，可以在水分的存在下，使容易随着温度变性的有效成分稳定化。在本发明中，通过将胶原修饰脂质体水溶液冻干，制备由除去了水分的固体成分构成的制剂，在使用时添加水溶液进行振动，获得胶原修饰脂质体的均匀分散液。涂抹在面部的想要涂抹的部位等之后，将分散液保存在20℃以下的条件下。这样一来，能够稳定地提供具有三螺旋结构的胶原，而且伴随脂质体的渗透过程，能够同时实现胶原在皮肤角质层中的吸收。

下面表示本发明的实施例和试验例。

其中，本发明不受本实施例的限定。

[实施例1]

水溶性胶原修饰后的脂质体水溶液

通过挤出法(M.J.Hope，M.B.Bally，G.Webb and P.R.Cullis，Biochim.Biophys.Acta，vol.812，55(1985))制备含有0.9wt％的蛋黄卵磷脂的脂质体水溶液。该脂质体膜以蛋黄卵磷脂∶胆固醇∶磷酸二鲸蜡酯＝4∶4∶2(摩尔比)构成，在pH 7.0带负电荷。该脂质体的平均分子量为约50万～约100万。在18℃，将该水溶液与中性条件下带正电荷的去端肽胶原0.5wt％水溶液按1∶5的比例一边搅拌，一边在上述脂质体水溶液中滴加分子量为约30万的去端肽胶原水溶液，再用分散机搅拌1小时，获得水溶性胶原修饰后的脂质体水溶液。在5℃保管。

[实施例2]

水溶性胶原修饰后的脂质体水溶液

通过挤出法(M.J.Hope，M.B.Bally，G.Webb and P.R.Cullis，Biochim.Biophys.Acta，vol.812，55(1985))制备含有1.2wt％的蛋黄卵磷脂的脂质体水溶液。该脂质体膜以蛋黄卵磷脂∶胆固醇∶磷脂酰乙醇胺＝4∶4∶2(摩尔比)构成，在pH 7.0带正电荷。该脂质体的平均分子量为约50万～约100万。在18℃，将该水溶液与中性条件下带负电荷的分子量约30万的去端肽胶原0.5wt％水溶液按2∶5的比例一边搅拌，一边在上述脂质体水溶液中滴加去端肽胶原水溶液，再用分散机搅拌1小时，获得水溶性胶原修饰后的脂质体水溶液。在5℃保管。

[实施例3]

由水溶性胶原表面修饰后的脂质体、透明质酸和水解弹性蛋白构 成的冻干制剂

在17℃，在40重量份的实施例1中获得的水溶性胶原表面修饰后的脂质体水溶液中，滴加10重量份的0.5wt％透明质酸钠水溶液，接着滴加50重量份的0.1wt％水解弹性蛋白水溶液，在同温度下再搅拌30分钟。在90重量份的该溶液中边搅拌边溶解10重量份的甘露醇。将得到的溶液冻干，得到冻干组合物。在该组合物中添加水，获得由水溶性胶原表面修饰后的脂质体、透明质酸和水解弹性蛋白构成的水溶液，可知没有产生通常观察到的胶原与透明质酸钠的复合体导致的沉淀。

在45℃观察该冻干组合物的水溶性胶原的三螺旋结构的稳定性。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、以及与变性温度以下保存的同一试样的粘度的比较，确认三螺旋结构的稳定性(三螺旋结构一旦破坏，粘度就会降低)。

[表1]

	3小时后	14小时后	30天后
				实施例1的水溶液	×	×	×
实施例3的冻干组合物	○	○	○

×：无法确认三螺旋结构，○：确认三螺旋结构

根据表1的结果可知，冻干组合物具有明显优异的稳定性，达到能够充分耐受制品化的水平。

[实施例4]

水溶性胶原表面修饰后的脂质体美容液

通过LLC法(T.Kaneko and H.Sagitani，Colloids & Surfaces，vol.69，125(1992))，制备含有蛋黄卵磷脂(1.5wt％)、胆固醇(0.3wt％)、磷酸二鲸蜡酯(0.2wt％)、油酸(0.5wt％)、硬脂醇(0.3wt％)、硬脂酸甘油酯(2.0wt％)、精氨酸(0.7wt％)、1，3-丁二醇(5wt％)、二丙二醇(2wt％)、甘油(3wt％)、玉米油(1.5wt％)、鳄梨油(1wt％)、油酸聚甘油酯-5(0.5wt％)和精制水(调整到100wt％)的脂质体美容液。在15℃，在搅拌下在80重量份的该美容液中滴加10重量份的0.5wt％的带正电荷的去端肽胶原水溶液，继续搅拌10分钟，接着再在搅拌下滴加10重量份的0.5％透明质酸钠，再继续搅拌10分钟，得到目的美容液。显微镜观察的结果可知，没有产生通常观察到的胶原与透明质酸钠的复合体。

试验例1

胶原在角质层中的吸收能力试验

使用实施例1中获得的水溶性胶原表面修饰后的脂质体水溶液和与其浓度相同(0.083wt％)的胶原水溶液，测试胶原在人皮肤角质层中的吸收性。n数为8名，将试样涂布在用丙酮/乙醚(1/1)溶液处理过的上臂内侧，用贴片封闭15小时后进行采集、测定。

被角质层吸收的胶原的定量方法：涂布15小时后，用精制水和乙醇擦去残留在皮肤上的试样，用胶带剥离(Tape-stripping)法采集角质层(分别收集2～5层、6～10层和11～15层，作为测定试样)。采集的胶带中除去第1片，从第2片以后作为测定试样。回收采集的胶带的水溶性成分，测定成分中的羟脯氨酸含量，换算成胶原，计算吸收量(测定未涂布的对照部位的羟脯氨酸量，作为空白)。

[表2]

	2～5层	6～10层	11～15层
				胶原修饰脂质体	0.0200％	0.0100％	0.0024％
胶原水溶液	0.0033％	0.0002％	无法检出

根据表2的结果可知，尽管胶原在水溶液中几乎不被角质层吸收，但通过使其吸附到脂质体上，可以促进在角质层中的吸收。

试验例2

实施例2的水溶液的保湿能力试验

实验条件如下所示。

(实验条件)

用SDS溶液处理上臂内侧，形成粗糙的皮肤，两天后开始早晚各涂布一次各试样，开始测定。

n＝6名，使受验者静置在控制为20±1℃/40±5RH％的房间里30分钟后，测定角质水分量。测定结果显示于表2中。测定机器：SkinSurface Hygrometer[SKICON-200](以μS的单位测定角质层水分量)。

[表3]

	试验开始时	2周后	4周后
				对照	11	12.7	14.9
实施例2的水溶液	10.3	18.6	22.3

^*对照表示未涂布部位。

根据表3可知，实施例2的水溶液的改善粗糙皮肤的效果明显高于对照部位。

试验例3

实施例4的美容液的皮肤张力恢复效果

实验条件如下所示。

(实验条件)

用丙酮/乙醚(1/1)溶液处理上臂内侧(以3天的间隔处理2次)，形成粗糙的皮肤，次日起早晚各涂抹一次各试样，开始测定。n＝8名，使受验者静置在控制为20±1℃/40±5RH％的房间里60分钟以上，然后测定皮肤的粘性。其结果显示于表3。测定机器：Dermal Torque Meter(Dia-Stron公司生产)，DTM值(Ur/Ue)越接近1，皮肤粘性越高，表明恢复良好。

[表4]

	试验开始时	3周后	6周后
				对照	0.183	0.196	0.230
实施例4的美容液	0.179	0.233	0.268

^*对照表示未涂抹部位。

根据表4可知，实施例4的美容液有显著差异，与对照相比，能够促进张力快速恢复。

产业上的可利用性

本发明的化妆品用主剂，能够稳定地保持水溶性胶原的结构，即使与透明质酸或水解弹性蛋白共存也不形成复合体，可以得到合适的皮肤化妆品。

Claims (6)

1.一种化妆品用主剂，其特征在于：

含有用具有三螺旋结构的水溶性胶原进行表面修饰后的脂质体的水溶液。

2.根据权利要求1所述的化妆品用主剂，其特征在于：

含有用具有三螺旋结构的水溶性胶原进行表面修饰后的脂质体的水溶液、和透明质酸和/或水解弹性蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的化妆品用主剂，其特征在于：

具有三螺旋结构的水溶性胶原是去端肽胶原。

4.根据权利要求1～3中任一项所述的化妆品用主剂，其特征在于：

其是经过冻干的化妆品用主剂。

5.一种皮肤化妆品，其特征在于：

含有权利要求1～3中任一项所述的化妆品用主剂。

6.根据权利要求5所述的皮肤化妆品，其特征在于：

其是经过冻干的皮肤化妆品。