CN102008604B - 一种降脂、护肝中药保健茶及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种具有降脂、护肝作用的中药保健茶，由何首乌、黄芪、茶等原料药和辅料制成；通过人体实验证明：本发明中药保健茶能够显著降低血清总胆固醇及血清甘油三酯含量；通过动物实验证明其对化学性肝损伤具有辅助保护作用，并且对人体无任何毒副作用。

Description

一种降脂、护肝中药保健茶及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种中药保健茶及其制备方法，特别涉及具有降脂、护肝作用的中药保健茶及其制备方法。
背景技术
随着我国经济的飞速发展，人民生活水平的提高，饮食结构的改变，西方社会的“文明病”已开始在我国大量出现，其中高血脂就是一种常见的心血管系统疾病。高血脂(或称脂质代谢紊乱)与动脉粥样硬化有着密切的关系，由动脉粥样硬化而诱发的各种心脏疾病是世界上危害人类健康最危险因素之一。同时，高血脂也能引发脂肪肝。饮酒是中国几千年来的传统文化，这一传统文化也导致我国是肝病发生率较高的国家之一。现今高血脂并化学性肝损伤的患者是越来越多，因此开发降脂健肝的保健食品是我国科研人员和企业一项至关重要的任务和责任。
目前降脂药物从结构上主要分如下几类：①胆汁酸耦合剂；②烟酸类；③苯氧酸类；④HMGCoA还原酶抑制剂；⑤ACAT(酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶)抑制剂。其中烟酸类和苯氧酸类的药物以降甘油三酯为主，其它几种以降低总胆固醇为主。HMG CoA还原酶抑制剂类药目前在美国和欧洲广泛使用，是一类很有效的降脂药物。它的发现和发展是80年代降血脂药物方面的一项突出成绩，可用于杂合体家族性高脂血症、原发性中度高脂血症、家族性III型高脂血症等。1995年其占有降脂药物市场份额63％，预计2005年将达到78％。目前作为降脂的一线药他丁类就属于此类药。但以上西药毒副作用较大，如最为有效者是一种联合用药---他汀类药物加烟酸，它可较其余并用疗法更易使患者达到脂质控制指标。然这种并用疗法有可能提高患者发生疾病和横纹肌溶解的风险和发生率。故医患双方在具体应用时均需谨慎。除毒副作用大外，西药降血脂药价格贵。我国是发展中国家，经济相对落后，老百姓防病治病一般会考虑到到价格的问题。中药及其制剂价格相对便宜，且毒副作用小得多。本发明就是以中药为原料的保健食品，无毒副作用，可长期食用。以乌龙茶为辅料，做成茶剂顺应了中国人的传统习俗，患者在饮茶的同时也辅助降低血脂和护肝，方便了患者，容易被接受。
发明内容
本发明第一个目的在于公开一种具有降脂、护肝作用的中药组合物。
本发明第二个目的在于公开一种具有降脂、护肝作用的保健茶。
本发明第三个目的在于公开一种具有降脂、护肝作用的保健茶的制备方法。
本发明第一个目的是通过如下技术方案实现的：
本发明所述降脂、护肝中药组合物，由如下重量比的原料药制成：
何首乌600-1200重量份  黄芪600-1200重量份  葛根300-900重量份
泽泻300-900重量份     山楂600-1200重量份  甘草600-1200重量份。
本发明所述降脂、护肝中药组合物，优选由如下重量比的原料药制成：
何首乌700-1100重量份  黄芪700-1100重量份  葛根400-800重量份
泽泻400-800重量份     山楂700-1100重量份  甘草700-1100重量份。
本发明所述降脂、护肝中药组合物，更优选由如下重量比的原料药制成：
何首乌750-900重量份  黄芪750-900重量份  葛根500-700重量份
泽泻500-700重量份    山楂750-900重量份  甘草750-900重量份。
本发明所述降脂、护肝中药组合物，最优选由如下重量比的原料药制成：
何首乌875重量份  黄芪875重量份  葛根625重量份
泽泻625重量份    山楂875重量份  甘草875重量份。
上述何首乌优选为生何首乌。
上述各中药原料药均可以从《中国部颁标准》、《中国药典》或《中药大词典》等中选择功能近似的药物替换，如黄芪可以由党参等补气药替换。
本发明还提供了上述降脂、护肝的中药组合物制剂的制备方法，该方法为：上述原料药按上述比例经常规工艺方法提取后加入药学可接受的辅料制成药剂学可接受的任意常规剂型，包括胶囊剂、片剂、颗粒剂、凝胶剂、缓释剂、口服液、散剂或丸剂；所述常规工艺方法包括直接粉碎、水提取或醇提取或先水提取再醇提取或先醇提取后再水提取，经上述常规提取后还可以过大孔树脂柱进一步富集有效成分；
上述常规工艺水提取方法可以为：每次4-20倍量，提取1-4次，每次1-3小时；
上述常规工艺醇提取方法可以为：30-80％乙醇、4-15倍量、分别提取1-3小时；
所述过大孔树脂柱方法为：提取液滤过，滤液通过大孔树脂，先用4-6倍量水或20％以下浓度的乙醇洗脱，洗脱液弃取，再用加50-80％乙醇1-10倍洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇至无醇味，得纯化提取液。
为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如：填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：PEG6000，PEG4000，虫蜡等。为使上述剂型能够实现中药药剂学，需在制备这些剂型时加入药学可接受的其它辅料(范碧亭《中药药剂学》，上海科学出版社1997年12月第1版中各剂型记载的辅料)。
本发明进一步提供一种具有降脂、护肝作用的中药保健茶，由如下重量比的原料药和辅料制成：
原料药组成为：
何首乌600-1200重量份  黄芪600-1200重量份  葛根300-900重量份
泽泻300-900重量份     山楂600-1200重量份  甘草600-1200重量份；
辅料：茶300-800重量份；所述茶优选为绿茶或花茶，最优选为乌龙茶。
本发明所述降脂、护肝的中药保健茶，优选由如下重量比的原料药和辅料制成：
原料药组成为：
何首乌700-1100重量份  黄芪700-1100重量份  葛根400-800重量份
泽泻400-800重量份     山楂700-1100重量份  甘草700-1100重量份；
辅料：乌龙茶350-700重量份。
本发明所述降脂、护肝的中药保健茶，更优选由如下重量比的原料药和辅料制成：
原料药组成为：
何首乌750-900重量份  黄芪750-900重量份  葛根500-700重量份
泽泻500-700重量份    山楂750-900重量份  甘草750-900重量份。
辅料为：乌龙茶400-650重量份。
本发明所述降脂、护肝的中药保健茶，最优选由如下重量比的原料药和辅料制成：
原料药组成为：
何首乌875重量份  黄芪875重量份  葛根625重量份
泽泻625重量份    山楂875重量份  甘草875重量份；
辅料为：乌龙茶500重量份。
上述何首乌优选为生何首乌。
上述本发明降脂、护肝保健茶的制备方法包括如下步骤：
步骤1：将生何首乌、黄芪(黄芪组方量的2/7-5/7部分)、山楂、甘草(甘草组方量的2/7-5/7部分)用4-12倍量药材的水浸泡，煎煮1-4小时，得提取液，过滤，得滤液；再4-12倍量药材的纯化水，煎煮1-4小时，得提取液，过滤，与第一次滤液合并混匀，再将滤液离心，得滤液A；
步骤2：泽泻和葛根经2-6倍量50-90％乙醇浸泡后，通入蒸汽加热，至80℃时，恒温加热，回流提取1-4小时，得提取液，再加入2-6倍量50-90％乙醇回流提取1-4小时，所得提取液与第一次乙醇提取液合并，过滤，得滤液B，将滤液B加热回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10-1.15(60℃)，得到浓缩液；
步骤3：将滤液A与醇提浓缩液合并混匀，得合并液备浓缩；将合并液泵入真空浓缩罐，通入蒸汽加热，在60℃，真空度0.06MPa，压力0.03MPa下浓缩至相对密度为1.25-1.30(60℃)，得浸膏备用；
步骤4、将剩余的黄芪、甘草和乌龙茶粉碎，过24目筛，灭菌，将浸膏与粗粉混合搅拌，制成软材；
步骤5、所得软材制粒，过14目筛后，热气流温度调至90℃，干燥20-40分钟，整粒，包装，即得。
上述本发明降脂、护肝保健茶的制备方法优选包括如下步骤：
步骤1：将生何首乌、黄芪(组方量的4/7部分)、山楂、甘草(组方量的4/7部分)用8倍量药材的水浸泡1小时后，向提取罐中通入蒸汽加热，至100℃开始计时，恒温煎煮2小时，得提取液，用200目不锈钢筛网过滤，得到第一次滤液；再向提取罐中注入8倍量药材的纯化水，煎煮2小时，得提取液过200目不锈钢筛网，所得滤液与第一次滤液合并混匀，再将滤液加入蝶式离心机，高速(10000转/分)离心，得滤液A；
步骤2泽泻和葛根经4倍量70％乙醇浸泡后，通入蒸汽加热，至80℃时，恒温加热，回流提取2小时，得提取液，再加入4倍量70％乙醇回流提取2小时，所得提取液与第一次提取液合并，用200目不锈钢筛网过滤，得滤液B，将滤液B泵入浓缩罐中，加热回收乙醇，直至回收完全，浓缩至相对密度为1.10-1.15(60℃)，得到浓缩液。
步骤3：将滤液A与醇提浓缩液合并混匀，得合并液备浓缩；将合并液泵入真空浓缩罐(型号JN300)中，通入蒸汽加热，在60℃，真空度0.06MPa，压力0.03MPa下浓缩至相对密度为1.25-1.30(60℃)，得浸膏备用。
步骤4、将剩余的黄芪(组方量的3/7部分)、甘草(组方量的3/7部分)和乌龙茶用DKDK-40型高效万能粉碎机粉碎成粗粉，过24目筛，再经Co60(4KGY)灭菌后转入洁净区，将浸膏与粗粉在双浆混合机(WSH-150型)中混合搅拌，直至混料手捏成团，触之即散，制成软材；
步骤5、所得软材通过摇摆式颗粒机(YK-160)制粒，过14目筛后，将所得湿粒转入卧式多室沸腾干燥床，热气流温度调至90℃，干燥约30分钟，当沸腾层温度持续在40℃左右时即可，得到干粒再用旋振筛(XZS-400)整粒(过14目筛)，送包装工序。
本发明中药组合物具有良好的降脂、护肝作用。通过人体实验证明：本发明中药保健茶能够显著降低血清总胆固醇及血清甘油三酯含量，对总胆固醇、甘油三酯下降有效率分别为66.07％，60.71％，显著高于对照组，总有效率显著高于对照组；通过动物实验证明其对化学性肝损伤具有辅助保护作用，并且对人体健康无明显影响。
下述实验例及实施例对本发明做进一步解释，但不构成对本发明的限制。
下述实验例中所述降脂健肝茶为实施例1方法所制备的产品。
实验例1降脂健肝茶降血脂功能人体试食试验报告
1.材料和方法
1.1样品由北京同仁堂兴安盟中药材有限责任公司提供的同仁堂牌降脂健肝茶，内容物为棕绿色粗粉，每袋茶重2.5g，每包24袋，共900包，每包重量2.5×24±5.4g。人体推荐量为成人每次2袋，每日2次，常温、防潮保存，供试验用。
1.2受试对象按知情自愿原则选择符合下述标准者作为受试者参加人体试食试验。
1.2.1受试者纳入标准
1.2.1.1单纯血脂异常的人群，保持平常饮食，半年内采血2次，如两次血清总胆固醇(TC)均为≥5.2mmol/L或血清甘油三酯(TG)≥1.65mmol/L，均可作为被选对象，在参考动物实验结果基础上，选择相应指标异常者为受试对象。
1.2.1.2受试者最好为非住院的高血脂症患者，自愿参加试验。受试期间保持平日的生活和饮食习惯，空腹取血测定各项指标。
1.2.2受试者排除标准
1.2.2.1年龄在18岁以下或65岁以上者。
1.2.2.2妊娠或哺乳期妇女，对保健食品过敏者。
1.2.2.3合并有心、肝、肾和造血系统等严重疾病，精神病患者。
1.2.2.4短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者。
1.2.2.5不符合纳入标准，未按规定食用受试样品，无法判定功效或资料不全影响功效或安全性判断者。
1.3试验设计与分组按卫生部2003年颁布的《保健食品检验与评价技术规范》规定中辅助降血脂功能人体试食试验检验方法进行。本试验按照随机双盲的原则，采用自身对照和两组间对照设计，将已选择的120名受试者随机分为试食组和对照组，每组各60人，分组时兼顾考虑年龄、性别、饮食等因素。
1.4食用剂量及时间  试食组每人每日口服同仁堂牌降脂健肝茶2次，每次2袋，开水冲泡，连续服用30天。试食期间维持常规饮食、体力活动及生活习惯。对照组服用与试食组袋数相同的安慰剂，其他条件与试食组相同。
1.5主要仪器、试剂及测试环境要求
Microlab300半自动生化分析仪(荷兰威图科学分公司)：2003年生产
KX21三分类血细胞分析仪(Sysmex公司)：2003年生产
Clinitek100尿分析仪(Bayer公司)：2003年生产
Sysmex血细胞分析稀释液(Sysmex公司)批号：G4026
Bayer尿分析试剂带(Bayer公司)批号：3G10D
总蛋白试剂盒(批号：261323)、白蛋白试剂盒(批号：251252)、谷丙转氨酶试剂盒(批号：220091)、总胆固醇试剂盒(批号：180041)、血尿酸试剂盒(批号：330091)、肌酐试剂盒(批号：320454)、尿素氮试剂盒(中生北控生物科技股份有限公司  批号：280290)、高密度脂蛋白试剂盒(批号：190051)、血糖试剂盒(批号：20050510)
1.6观察指标
受试者试食前后的医学体检及医学观察由天津市第三中心医院(三甲级)完成。
1.6.1一般情况  受试者在试食期间的精神状况、饮食情况、睡眠情况、大小便情况、血压、心率、身高、体重等。
1.6.2安全性观察
1.6.2.1血、尿、便常规检查  血常规项目为红细胞计数、白细胞计数、血小板、血红蛋白等检测；尿常规项目为尿比重、颜色、尿pH、尿蛋白、尿糖、酮体、胆红素、尿胆原、亚硝酸盐、白细胞、潜血；便常规项目为外观性状、红细胞、白细胞、潜血、寄生虫、虫卵。
1.6.2.2肝、肾功能检查  血清总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血糖、肌酐、尿素氮。
1.6.2.3胸透、心电图、腹部B超(肝、胆、胰、脾、肾)
1.6.3功效性观察
1.6.3.1功能指标
血清总胆固醇含量、甘油三酯含量、高密度脂蛋白胆固醇含量。
1.6.3.2功效判定标准
观察血清总胆固醇有效率、甘油三酯有效率、高密度脂蛋白胆固醇有效率及总有效率。
有效：血清总胆固醇降低＞10％；血清甘油三酯降低＞15％；高密度脂蛋白胆固醇上升＞0.104mol/L。
无效：未达到有效标准。
1.7功效性观察的质量控制70％服用情况记录表格复核；电话提示和社区医生入户进行随访，每人1-2次/周。
1.8数据统计  使用SPSS11.5分析受试者试食前后各项指标的均值和标准差，并对试食试验前后结果进行配对t检验、试食组和对照组两组试验结果进行成组t检验。性别均衡性、一般情况、有效率、总有效率用x2及确切概率法检验。
1.9结果判定
1.9.1血清总胆固醇、甘油三酯二项指标阳性，高密度脂蛋白胆固醇不显著低于对照组，可判定该受试样品具有辅助降血脂功能作用。
1.9.2血清总胆固醇、甘油三酯二项中任一项指标阳性，高密度脂蛋白胆固醇不显著低于对照组，可判定该受试样品具有辅助降低血清总胆固醇或辅助降低甘油三酯作用。
2.结果
2.1试食组与对照组均衡性比较
除去试验过程中试食组退出4人，对照组退出3人，实际受试者为113名，年龄在20-64岁，平均年龄49.60±9.29岁，男性39人，女性74人。均为血清胆固醇、甘油三酯异常人群。由表1可见，试食前试食组血脂水平、年龄、性别与对照组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。表明两组试食前血脂水平、年龄、性别具有均衡可比性。
表1试食前两组血脂、年龄、性别均衡性比较
2.2试食组与对照组一般情况比较
对试食者精神、睡眠、饮食、大小便情况进行了问诊调查，按良好、一般、差分级统计，并测量血压、心率。胸透、心电图、腹部B超未见异常，并且由表2可见，大部分试食者一般情况良好，试食组试食后精神状态、饮食情况正常；两组试食前后自身比较，所有指标差异均无统计学意义(P＞0.05)，表明试食同仁堂牌降脂健肝茶对人体一般情况无不良影响。
表2试食前后两组其他一般情况比较
2.3试食前后两组血常规、尿常规、便常规及生化指标等的自身对照
表3两组试食前后血、尿、便常规及血生化改变
Figure G2009101698433D00092
两组受试者的红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板、血清总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酐、血糖、尿素氮基本处于正常范围内，且两组试食前后自身比较无显著改变(P＞0.05)。两组试食前后尿常规、便常规均正常。
2.4同仁堂牌降脂健肝茶对高血脂人群功效指标的影响
2.4.1试食同仁堂牌降脂健肝茶对血清总胆固醇的影响
表4试食前后对血清总胆固醇(mmol/L)的影响
Figure G2009101698433D00101
由表4可见，试食前后试食组与对照组相比较，血清总胆固醇含量差异无统计学意义(P＞0.05)；试食后试食组血清总胆固醇含量显著低于对照组(P＜0.01)；试食组试食前后自身配对比较血清总胆固醇含量差异具有统计学意义(P＜0.01)，试食后低于试食前；对照组试食前后自身配对比较血清总胆固醇含量差异无统计学意义(P＞0.05)。
2.4.2试食同仁堂牌降脂健肝茶对血清甘油三酯的影响
表5试食前后对血清甘油三酯(mmol/L)的影响
由表5可见，试食前试食组与对照组比较血清甘油三酯含量差异无统计学意义(P＞0.05)；试食后试食组血清甘油三酯含量与对照组相比较差异具有统计学意义(P＜0.01)；试食组试食前后自身配对比较血清甘油三酯含量差异具有统计学意义(P＜0.05)；对照组试食前后自身配对比较血清甘油三酯含量差异无统计学意义(P＞0.05)。
2.4.3试食同仁堂牌降脂健肝茶对血清高密度脂蛋白胆固醇的影响
表6试食前后对血清高密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)的影响
由表6可见，试食前试食组与对照组相比血清高密度脂蛋白胆固醇含量差异无统计学意义(P＞0.05)；试食后两组的血清高密度脂蛋白胆固醇含量差异无统计学意义(P＞0.05)；试食后试食组自身配对比较血清高密度脂蛋白胆固醇含量差异无统计学意义(P＞0.05)；试食后对照组自身配对比较血清高密度脂蛋白胆固醇含量差异无统计学意义(P＞0.05)。
2.4.4试食同仁堂牌降脂健肝茶的有效率比较
表7试食有效率情况比较
Figure G2009101698433D00111
由表7可见，试食组总有效率为58.93％，对照组总有效率为3.51％，两组总有效率比较差异具有统计学意义(P＜0.01)。
3.小结：
113例高血脂受试者，其中试食组56人、对照组57人，按要求分别服用由北京同仁堂兴安盟中药材有限责任公司提供的同仁堂牌降脂健肝茶和安慰剂，服用30天后，试食组试血清总胆固醇及血清甘油三酯含量显著低于对照组(P＜0.05)；试食组试食前后自身配对比较血清总胆固醇及血清甘油三酯含量差异具有统计学意义(P＜0.05)，试食后明显低于试食前；试食后试食组与对照组相比血清高密度脂蛋白胆固醇含量差异无统计学意义(P＞0.05)；试食组试食前后自身比较血清高密度脂蛋白胆固醇含量差异也无统计学意义(P＞0.05)。试食组总胆固醇、甘油三酯下降有效率分别为66.07％，60.71％，显著高于对照组，总有效率试食组显著高于对照组。两组受试者的红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板、血清总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酐、血糖、尿素氮均基本处于正常范围内，且两组试食前后自身比较无显著改变(P＞0.05)；两组受试者的精神状况、睡眠情况、饮食情况、血压也无明显改变(P＞0.05)；两组试食前后尿常规、便常规也无改变，说明同仁堂牌降脂健肝茶对人体健康无明显影响。
实验例2降脂健肝茶对化学性肝损伤保护作用动物实验报告
1.1、样品：同仁堂牌降脂健肝茶，为袋泡茶，由北京同仁堂兴安盟中药材有限责任公司提供。人体推荐量为10.0g/60kg.BW.日。
1.2、实验动物：由军科院实验动物中心提供的二级雌性SD小鼠40只，体重18-22克，合格证号为SCXK-(军)2002-001 0051423。
1.3、实验动物饲养环境：饲料由军科院实验动物中心提供，SPF级实验动物房合格证号：医动字第015号，室温20.4-22.4℃，相对湿度52-62％。
1.4、剂量：剂量分别为：①0.83g/kg.BW、②1.67g/kg.BW、③3.33g/kg.BW(相当于人体推荐量的5、10、20倍)。高剂量组受试液配制：称取样品75.0g，加蒸馏水1000ml，置于85℃恒温水浴中30min，倒出提取液，再加入蒸馏水1000ml，以同样方法提取一次，将两次提取液合并，用旋流浓缩仪37℃浓缩至225ml，浓度为0.333g/ml；中、低剂量组受试液：分别取高剂量组受试液50ml、25ml，加蒸馏水至100ml，浓度分别为0.167g/ml、0.083g/ml。另设蒸馏水空白对照和50％乙醇模型对照。用乙醇(分析纯)造成肝损伤模型，乙醇浓度为50％(以蒸馏水稀释)，灌胃量12ml/kg.BW。
1.5、主要仪器与试剂：UV-1201紫外可见分光光度计、Vitalab Selectra2全自动生化分析仪；丙二醛(MDA)试剂盒、还原型谷胱甘肽(GSH)试剂盒、组织蛋白试剂盒(双缩脲法)均由南京建成生物工程研究所提供：甘油三酯(TG)试剂盒由中生北控生物科技股份有限公司提供。
1.6、实验方法：采用酒精性肝损伤模型，选用昆明种雌性小鼠50只，分高、中、低三个剂量组和一个空白对照组、一个模型对照组，三个剂量组每日灌胃给予受试物，灌胃量20ml/kg.BW，空白对照组和模型对照组给予等量蒸馏水。实验结束时将模型对照组和三个剂量组一次灌胃给予50％乙醇12ml/kg.BW，空白对照组给予蒸馏水，禁食16h后处死动物取肝脏，进行各项生化指标检测及组织病理学检查。
1.7、检测指标
10％肝匀浆中过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG)及组织蛋白含量的测定：均采用试剂盒提供的方法进行测定。
肝脏组织病理学检查
病理观察材料：从动物肝左叶中部做横切面取材、冰冻切片、苏丹III染色、镜下观察脂滴在肝脏中的分布、范围和面积。
病理观察方法：每例动物肝组织用40倍物镜连续记录70个视野，每个视野根据阳性细胞多少和分布的范围，按0、1、2、3、4分进行评分，将70个视野所得分数的平均值作为该例肝组织的脂肪染色评分。
病理诊断标准：病理组织学观察以肝细胞染色作为观察指标，并根据病理改变程度“0”、“1”、“2”、“3”、“4”量化，进行肝损伤程度的评价。肝细胞脂肪染色共分为五级：
肝细胞内脂滴散在、稀少 0分  含脂滴的肝细胞不超过1/4 1分
含脂滴的肝细胞不超过1/2 2分 含脂滴的肝细胞不超过3/4 3分
肝组织几乎被脂滴代替    4分
1.8、实验数据统计：实验数据统计采用SPSS11.5FOR WINDOWS软件包处理。模型对照组与剂量组的数据经方差齐性检验，方差齐，进行方差分析，如P值小于0.05，则用LSD法进行两两比较；若方差不齐，则进行数据转换，仍不齐，改用秩和检验，如P值小于0.05，则用Dunnett’s T3(Wilcoxon)法进行两两比较。空白对照组与模型对照组则采用T检验。
2结果
2.1同仁堂牌降脂健肝茶对小鼠体重的影响：见表8。
表8同仁堂牌降脂健肝茶对小鼠体重的影响(X±S)
Figure G2009101698433D00131
由表8可见，以不同剂量的同仁堂牌降脂健肝茶提取液灌胃小鼠30天，各组动物生长、活动正常。各组动物增重与模型对照组比较，差异无显著性(P＞0.05)。
2.2同仁堂牌降脂健肝茶对10％肝匀浆MDA、GSH、TG含量的影响：见表9。
表9同仁堂牌降脂健肝茶对10％肝匀浆MDA、GSH、TG含量的影响(X±S)
Figure G2009101698433D00132
Figure G2009101698433D00141
由表9可见，以不同剂量的同仁堂牌降脂健肝茶提取液灌胃小鼠30天，高剂量组肝匀浆中MDA浓度，低、高剂量组肝匀浆中TG浓度均低于模型对照组，且差异有显著性(P＜0.05)。
2.3同仁堂牌降脂健肝茶对肝脏组织病理学检查结果的影响：见表10。
表10同仁堂牌降脂健肝茶对肝脏组织病理学检查结果的影响
Figure G2009101698433D00142
由表10可见，以不同剂量的同仁堂牌降脂健肝茶提取液灌胃小鼠30天，三个剂量组的脂肪变性评分均低于模型对照组，且差异有显著性(P＜0.05)。
3小结：
以0.83g/kg.BW、1.67g/kg.BW、3.33g/kg.BW剂量的同仁堂牌降脂健肝茶提取液灌胃小鼠30天，各组动物生长活动良好，各组动物增重与模型对照组相比，差异无显著性(P＞0.05)；高剂量组肝匀浆中MDA浓度，低、高剂量组肝匀浆中TG浓度均低于模型对照组，且差异有显著性(P＜0.05)；三个剂量组的脂肪变性评分均低于模型对照组，且差异有显著性(P＜0.05)。由此可见，同仁堂牌降脂健肝茶具有对化学性肝损伤有辅助保护作用的功能。
实验例3同仁堂牌降脂健肝茶毒理学试验报告
1材料和方法
1.1样品：同仁堂牌降脂健肝茶，样品为棕绿色粗粉，由北京同仁堂兴安盟中药材有限责任公司提供。样品制备：称取样品200.00g，加蒸馏水至2000ml，置于90℃恒温水浴中40min，倒出提取液，再加入蒸馏水2000ml，以同样方法提取一次，将两次提取液合并，用旋流浓缩仪37℃浓缩至200ml，浓度为1.0g/ml，作为浸提原液进行以下试验。
1.2实验动物：二级昆明种小鼠，由军科院实验动物中心提供，合格证号为SCXK-(军)2002-001 0049764(用于小鼠睾丸染色体畸变试验，小鼠骨髓嗜多红细胞微核试验)。二级昆明种小鼠，由军科院实验动物中心提供，合格证号为SCXK-(军)2002-001 0049568：二级Wistar大鼠，由军科院实验动物中心提供，合格证号为SCXK-(军)2002-001 0049446(用于经口急性毒性试验)。
1.3实验动物环境：饲料由军科院实验动物中心提供，SPF级实验动物室合格证号：医动字第015号。温度：20~30℃，湿度：55~70％。
1.4经口急性毒性试验：
1.4.1小鼠经口急性毒性试验：选用18-22克二级昆明种小鼠20只，雌雄各半，采用浸提原液进行试验，以20.0g/kg.BW.的剂量经口一次染毒，灌胃量为0.2ml/10g.BW，给药后连续观察14天。记录重度表现及死亡情况。
1.4.2大鼠经口急性毒性试验：选用180-220克二级Wistar大鼠20只，雌雄各半，采用浸提原液进行试验，以20.0g/kg.BW的剂量经口一次染毒，灌胃量为2.0ml/100g.BW，给药后连续观察14天。记录中毒表现及死亡情况。
1.5遗传毒性试验：
1.5.1Ames试验：采用经鉴定符合要求的鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型TA97a、TA98、TA100、TA102四株试验菌株进行试验。多用氯联苯(PCB)诱导大鼠后制备的肝匀浆作为体外代谢活化系统。试验设0.2、0.5、1.0、2.5、5.0mg/皿5个剂量，将浸提原液灭菌后再以无菌蒸馏水稀释至所需浓度，同时设空白对照和阳性对照。在项层琼脂中加入0.1mL试验菌株增菌液、0.1mL受试物溶液和0.5mLS-9混合液(当需要代谢活化时)，混合后倒入底层培养基平板上，每个剂量及对照均做3个平行样。在37℃培养48h，计数每皿回变菌落数。如果受试物的回变菌落数是空白对照菌落数2倍以上，并具有剂量-反应关系则定为阳性。整套试验在相同条件下重复进行一次。
1.5.2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验：采用间隔24h两次经口灌胃法进行试验。用体重25-30克小白鼠50只，随机分为5组，每组10只，雌雄各半。以40mg/kg.BW剂量的环磷酰胺为阳性对照，对照组给等量蒸馏水。同仁堂牌降脂健肝茶剂量分为2.50、5.00、10.00gkg.BW，用蒸馏水将浸提原液配至所需溶度，灌胃量为0.2ml/10g.BW。末次给同仁堂牌降脂健肝茶后6h，颈椎脱臼处死动物，取胸骨骨髓用小牛血清稀释涂片，甲醇固定，Giemsa染色。在光学显微镜下，每只动物计数1000个嗜多染红细胞(PCE)，微核发生率以含微核的PCE千分率计，并进行统计处理，统计方法用泊松分布，另外计算PCE/RBC比例。
1.5.3小鼠睾丸染色体畸变试验：用体重25-30克的性成熟雄性小鼠25只，随机分为5组，每组5只。以12.0mg/kg.BW剂量(ipQd×1)的阿霉素为阳性对照，阴性对照组给等量蒸馏水。同仁堂牌降脂健肝茶剂量分别为2.50、5.00、10.00g/kg.BW，用蒸馏水将浸提原液配至所需浓度，每日灌胃一次，灌胃量为0.2ml/10g.BW，连续5天，于首次给予受试物后的第十三天，5组同时腹腔注射秋水仙素一次(4mg/kg.BW)，6h后处死动物，取双侧睾丸制片，Giemsa染色，每组分析5只动物的染色体，每只动物分析100个中期相细胞，计算睾丸染色体畸变发生率(以百分率计)，用SPSS10.0 for Windows中x2进行统计处理。
2结果
2.1急性毒性试验(结果见表11)：由表11可见，同仁堂牌降脂健肝茶以20.0g/kg.BW的剂量灌胃两种性别的大、小鼠，观察14天，实验期间未见明显的中毒表现，亦无死亡。受试物对两种性别的大、小鼠的经口急性毒性(LD50)均大于20.0g/kg.BW，根据急性毒性分级，同仁堂牌降脂健肝茶属无毒物。
表11同仁堂牌降脂健肝茶对大、小鼠的急性毒性
2.2遗传毒性试验：
2.2.1Ames试验(结果见表12、13)：由表12、13可见，同仁堂牌降脂健肝茶各剂量组回变菌落数均未超过空白对照菌落数2倍，亦无计量-反应关系，对鼠伤寒沙门氏菌TA97a、TA98、TA100、TA102四株试验菌株，在加与不加S-9时，均无致突变作用。
表12同仁堂牌降脂健肝茶Ames试验结果(第一次实验)
Figure G2009101698433D00162
Figure G2009101698433D00171
注：以上结果为三个平皿回变菌落数的平均数±标准差。
表13同仁堂牌降脂健肝茶Ames试验结果(重复实验)
Figure G2009101698433D00172
注：以上结果为三个平皿回变菌落数的平均数±标准差。
2.2.2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验(结果见表14)：由表14可见，同仁堂牌降脂健肝茶各剂量组微核率与阴性对照组比较差异均无显著性(P＞0.05)，而环磷酰胺组与阴性对照组比较差异有极显著性(P＜0.01)。未见同仁堂牌降脂健肝茶对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核产生影响。
表14同仁堂牌降脂健肝茶对小鼠骨髓微核发生率的影响
Figure G2009101698433D00181
*与阴性对照组比较差异有极显著性(P＜0.01)
2.2.3小鼠睾丸染色体畸变试验(结果见表15)：由表15可见，同仁堂牌降脂健肝茶各剂量组小鼠睾丸染色体畸变发生率与阴性对照组比较差异无显著性(P＞0.05)，而阿霉素阳性对照组与阴性对照组比较差异有极显著性(P＜0.01)。因此，未见同仁堂牌降脂健肝茶对小鼠睾丸染色体畸变产生影响。
表15同仁堂牌降脂健肝茶对小鼠睾丸染色体畸变发生率的影响
Figure G2009101698433D00182
*与阴性对照组比较差异有极显著性(P＜0.01)
3小结：
3.1急性毒性试验：同仁堂牌降脂健肝茶对两种性别的大、小鼠经口急性毒性LD50均大于20.0g/kg.BW，根据急性毒性分级，同仁堂牌降脂健肝茶属无毒物。
3.2遗传毒性试验：
3.2.1Ames试验：结果为阴性。
3.2.2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验：结果为阴性。
3.2.3小鼠睾丸染色体畸变试验：结果为阴性。
下述实施例均能够实现上述实验例所述的效果
具体实施方式
实施例1：保健茶
原料：生何首乌875g  黄芪875g  葛根625g
      泽泻    625g  山楂875g  甘草875g
辅料：乌龙茶500g
制备方法：
1、原辅料的前处理：
按配方量准确称取黄芪、甘草，按提取和粉碎(4∶3)的比例划分两部分，将提取的部分与生何首乌、山楂混合一起置入型号为TQ500的多功能提取罐中，加入8倍药材量的纯化水浸泡，待煎煮；
将需要粉碎的部分甘草、黄芪和乌龙茶净选，备用；
按照配方量准确称泽泻和葛根，置入装好回流装置型号为TQ300的另一多功能提取罐中，加入4倍量的70％药用乙醇浸泡，备用；
2、提取：
将生何首乌、黄芪(部分)、山楂、甘草(部分)用8倍量药材的水浸泡1小时后，向提取罐中通入蒸汽加热，至100℃开始计时，恒温煎煮2小时，得提取液，用200目不锈钢筛网过滤，得到第一次滤液；再向提取罐中注入8倍量药材的纯化水，煎煮2小时，得提取液过200目不锈钢筛网，所得滤液与第一次滤液合并混匀，再将滤液加入蝶式离心机，高速(10000转/分)离心，得滤液A；
泽泻和葛根经4倍量70％乙醇浸泡后，通入蒸汽加热，至80℃时，恒温加热，回流提取2小时，得提取液，再加入4倍量70％乙醇回流提取2小时，所得提取液与第一次提取液合并，用200目不锈钢筛网过滤，得滤液B，将滤液B泵入浓缩罐中，加热回收乙醇，直至回收完全，浓缩至相对密度为1.10-1.15(60℃)，得到浓缩液。将滤液A与醇提浓缩液合并混匀，得合并液备浓缩。
3、浓缩：
将合并液泵入真空浓缩罐(型号JN300)中，通入蒸汽加热，在60℃，真空度0.06MPa，压力0.03MPa下浓缩至相对密度为1.25-1.30(60℃)，得浸膏备用。
4、粉碎
将备于粉碎的黄芪、甘草和乌龙茶用DKDK-40型高效万能粉碎机粉碎成粗粉，过24目筛，再经Co60(4KGY)灭菌后转入洁净区，备制软材。
5、软材制备：在洁净区，将浸膏与粗粉在双浆混合机(WSH-150型)中混合搅拌，制成软材，直至混料手捏成团，触之即散，送下一工序。
6、成型：
所得软材通过摇摆式颗粒机(YK-160)制粒，过14目筛后，将所得湿粒转入卧式多室沸腾干燥床，热气流温度调至90℃，干燥约30分钟，当沸腾层温度持续在40℃左右时即可，得到干粒再用旋振筛(XZS-400)整粒(过14目筛)，送包装工序。
7、包装
通过颗粒包装机，将所得颗粒用热封型茶叶滤纸进行包装，分装成1000袋，2.5g/袋。
实施例2：保健茶
原料：生何首乌905g  黄芪775g  葛根625g
      泽泻    685g  山楂775g  甘草775g；
辅料：乌龙茶420g
制备方法同实施例1。
实施例3：保健茶
原料：生何首乌760g  黄芪875g  葛根525g
      泽泻    685g  山楂875g  甘草765g；
辅料：乌龙茶600g
制备方法同实施例1。
实施例4：保健茶
原料：生何首乌1075g  黄芪875g     葛根525g
      泽泻725g       山楂1075g    甘草775g；
辅料：乌龙茶600g
制备方法同实施例1。
实施例5：颗粒剂
生何首乌875g  黄芪875g  葛根625g
泽泻625g      山楂875g  甘草875g。
将生何首乌、黄芪(组方量的4/7部分)、山楂、甘草(组方量的4/7部分)用8倍量药材的水浸泡1小时后，向提取罐中通入蒸汽加热，至100℃开始计时，恒温煎煮2小时，得提取液，用200目不锈钢筛网过滤，得到第一次滤液；再向提取罐中注入8倍量药材的纯化水，煎煮2小时，得提取液过200目不锈钢筛网，所得滤液与第一次滤液合并混匀，再将滤液加入蝶式离心机，高速(10000转/分)离心，得滤液A；
泽泻和葛根经4倍量70％乙醇浸泡后，通入蒸汽加热，至80℃时，恒温加热，回流提取2小时，得提取液，再加入4倍量70％乙醇回流提取2小时，所得提取液与第一次提取液合并，用200目不锈钢筛网过滤，得滤液B，将滤液B泵入浓缩罐中，加热回收乙醇，直至回收完全，浓缩至相对密度为1.10-1.15(60℃)，得到浓缩液。
将滤液A与醇提浓缩液合并混匀，得合并液备浓缩；将合并液泵入真空浓缩罐(型号JN300)中，通入蒸汽加热，在60℃，真空度0.06MPa，压力0.03MPa下浓缩至相对密度为1.25-1.30(60℃)，得浸膏备用。
将剩余的黄芪(组方量的3/7部分)、甘草(组方量的3/7部分)用DKDK-40型高效万能粉碎机粉碎成粗粉；将浸膏与粗粉混合搅拌，经常规工艺制成颗粒剂。
实施例6：胶囊剂
生何首乌905g  黄芪775g  葛根625g
泽泻685g      山楂775g  甘草775g；
经常规工艺制成胶囊剂。
实施例7：片剂
生何首乌760g  黄芪875g  葛根525g
泽泻685g      山楂875g  甘草765g；
经常规工艺制成片剂。
实施例8：散剂
原料：生何首乌1075g  黄芪875g   葛根525g
      泽泻725g       山楂1075g  甘草775g；
经常规工艺制成散剂。

Claims (5)

1.一种具有降脂、护肝作用的中药保健茶，其特征在于该中药保健茶的制备方法包括如下步骤：
选取如下重量比的原料药和辅料：
原料药为：
生何首乌700-1100重量份  黄芪700-1100重量份  葛根400-800重量份
泽泻400-800重量份  山楂700-1100重量份  甘草700-1100重量份；
辅料主要为：乌龙茶350-700重量份；
制备方法包括如下步骤：
步骤1：将生何首乌、用量为组方量的2/7-5/7部分的黄芪、山楂、用量为组方量的2/7-5/7部分的甘草，用4-12倍量药材的水浸泡，煎煮1-4小时，得提取液，过滤，得滤液；再4-12倍量药材的纯化水，煎煮1-4小时，得提取液，过滤，与第一次滤液合并混匀，再将滤液离心，得滤液A；
步骤2：泽泻和葛根经2-6倍量50-90％乙醇浸泡后，通入蒸汽加热，至80℃时，恒温加热，回流提取1-4小时，得提取液，再加入2-6倍量50-90％乙醇回流提取1-4小时，所得提取液与第一次乙醇提取液合并，过滤，得滤液B，将滤液B加热回收乙醇，浓缩至60℃测相对密度为1.10-1.15，得到浓缩液；
步骤3：将滤液A与醇提浓缩液合并混匀，得合并液备浓缩；将合并液泵入真空浓缩罐，通入蒸汽加热，在60℃，真空度0.06MPa，压力0.03MPa下浓缩至60℃测相对密度为1.25-1.30，得浸膏备用；
步骤4、将剩余的黄芪、甘草和乌龙茶粉碎，过24目筛，灭菌，将浸膏与粗粉混合搅拌，制成软材；
步骤5、所得软材制粒，过14目筛后，热气流温度调至90℃，干燥20-40分钟，整粒，包装，即得。
2.如权利要求1所述的中药保健茶，其特征在于该中药保健茶由如下重量比的原料药和辅料制成：
原料药为：
生何首乌875重量份  黄芪875重量份  葛根625重量份
泽泻625重量份  山楂875重量份  甘草875重量份；
辅料为：乌龙茶500重量份。
3.一种具有降脂、护肝作用的中药保健茶的制备方法，其特征在于该制备方法包括如下步骤：
选取如下重量比的原料药和辅料：
原料药为：
生何首乌700-1100重量份  黄芪700-1100重量份  葛根400-800重量份
泽泻400-800重量份  山楂700-1100重量份  甘草700-1100重量份；
辅料主要为：乌龙茶350-700重量份；
制备方法包括如下步骤：
步骤1：将生何首乌、用量为组方量的2/7-5/7部分的黄芪、山楂、用量为组方量的2/7-5/7部分的甘草，用4-12倍量药材的水浸泡，煎煮1-4小时，得提取液，过滤，得滤液；再4-12倍量药材的纯化水，煎煮1-4小时，得提取液，过滤，与第一次滤液合并混匀，再将滤液离心，得滤液A；
步骤2：泽泻和葛根经2-6倍量50-90％乙醇浸泡后，通入蒸汽加热，至80℃时，恒温加热，回流提取1-4小时，得提取液，再加入2-6倍量50-90％乙醇回流提取1-4小时，所得提取液与第一次乙醇提取液合并，过滤，得滤液B，将滤液B加热回收乙醇，浓缩至60℃测相对密度为1.10-1.15，得到浓缩液；
步骤3：将滤液A与醇提浓缩液合并混匀，得合并液备浓缩；将合并液泵入真空浓缩罐，通入蒸汽加热，在60℃，真空度0.06MPa，压力0.03MPa下浓缩至60℃测相对密度为1.25-1.30，得浸膏备用；
步骤4、将剩余的黄芪、甘草和乌龙茶粉碎，过24目筛，灭菌，将浸膏与粗粉混合搅拌，制成软材；
步骤5、所得软材制粒，过14目筛后，热气流温度调至90℃，干燥20-40分钟，整粒，包装，即得。
4.如权利要求3所述的中药保健茶的制备方法，其特征在于该中药保健茶由如下重量比的原料药和辅料制成：
原料药为：
生何首乌875重量份  黄芪875重量份  葛根625重量份
泽泻625重量份  山楂875重量份  甘草875重量份；
辅料为：乌龙茶500重量份。
5.如权利要求1或2所述的中药保健茶在制备降低血清总胆固醇、血清甘油三酯或辅助治疗化学性肝损伤的保健品中的应用。
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