CN101983339B - 制样装置与制样方法以及细胞分析装置与细胞分析方法 - Google Patents

制样装置与制样方法以及细胞分析装置与细胞分析方法 Download PDF

Info

Publication number
CN101983339B
CN101983339B CN200980112142.4A CN200980112142A CN101983339B CN 101983339 B CN101983339 B CN 101983339B CN 200980112142 A CN200980112142 A CN 200980112142A CN 101983339 B CN101983339 B CN 101983339B
Authority
CN
China
Prior art keywords
sample
cell
organism
amount
certain cell
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN200980112142.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101983339A (zh
Inventor
福田正和
长岡加奈子
石坂正树
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sysmex Corp
Original Assignee
Sysmex Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sysmex Corp filed Critical Sysmex Corp
Priority to CN201510513206.9A priority Critical patent/CN105181407B/zh
Publication of CN101983339A publication Critical patent/CN101983339A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101983339B publication Critical patent/CN101983339B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
    • G01N1/34—Purifying; Cleaning
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
    • G01N15/1429—Signal processing
    • G01N15/1433—Signal processing using image recognition
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
    • G01N15/1468—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry with spatial resolution of the texture or inner structure of the particle
    • G01N15/147—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry with spatial resolution of the texture or inner structure of the particle the analysis being performed on a sample stream
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N35/00—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor
    • G01N35/10—Devices for transferring samples or any liquids to, in, or from, the analysis apparatus, e.g. suction devices, injection devices
    • G01N35/1095—Devices for transferring samples or any liquids to, in, or from, the analysis apparatus, e.g. suction devices, injection devices for supplying the samples to flow-through analysers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/06—Investigating concentration of particle suspensions
    • G01N15/0606—Investigating concentration of particle suspensions by collecting particles on a support
    • G01N15/0618—Investigating concentration of particle suspensions by collecting particles on a support of the filter type
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N2015/1006—Investigating individual particles for cytology
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
    • G01N2015/1493—Particle size
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N35/00—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor
    • G01N2035/00465—Separating and mixing arrangements
    • G01N2035/00475—Filters

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Signal Processing (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Sampling And Sample Adjustment (AREA)
  • Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
  • Computer Vision & Pattern Recognition (AREA)

Abstract

对于流经流动池45的生物体试样中所包含的一定细胞C1进行光学测定，得到生物体试样中所含细胞C1的浓度信息，再根据得到的浓度信息，对生物体试样进行细胞C1的浓度调整，进行制样前处理步骤。即使每个生物体试样中待测细胞浓度存在较大差异，也能够很好地调制出适宜待测细胞分析的测定试样，并且对待测细胞进行精确分析。

Description

制样装置与制样方法以及细胞分析装置与细胞分析方法
技术领域：
本发明涉及制样装置与制样方法以及细胞分析装置与细胞分析方法。
具体涉及：为从生物体制备测定试样所进行的如调整细胞浓度等前处理步骤步骤的改进。
背景技术：
以往的分析从生物体采集的生物体试样中所含细胞的细胞分析装置中，大家所了解的一般是使用流式细胞仪从检测受检者宫颈采集的试样中包含的宫颈上皮细胞，来筛查癌、异型细胞的细胞分析装置。(例如可参照国际公开第2006/103920号说明书。)
上述说明书中记载的细胞分析装置，是将从宫颈采集的试样与各种试剂混合，调制成测定试样，再用鞘液包裹着测定试样在鞘流池内挤压成细流，使测定试样中的细胞排成一列通过。
然后，用激光束照射测定试样，利用该测定试样发出的散射光与荧光，检测各细胞大小与形状。
但是，根据生物体试样不同，各试样中所含待测细胞浓度存在很大差异，特别是从宫颈采集的生物体试样所包含的上皮细胞浓度，在各试样之间存在很大差异。
在这种存在浓度差异的情况下，对生物体所含细胞进行精确分析较为困难。
例如，生物体试样中的待测细胞浓度过低时，无法确保有足够的细胞数量来进行有效解析，这样就很难检测出待测细胞中所包含的癌、异型细胞。而且，非待测细胞和异物等造成的噪声干扰会变得很大。而另一方面，当生物体试样中的待测细胞浓度过高时，则很难检测出生物体试样中所有的待测细胞。
另外，例如在使用规定量的染色液对待测细胞进行染色时，如果生物体试样中的测定对象浓度过低，会导致对待测细胞过度染色，相反，如果生物体试样中的测定对象浓度过高，则会造成对待测细胞的染色不充分。
发明内容：
针对以上情况，本发明要解决的课题就是能提供一种制样装置与制样方法，利用该装置和方法，即使各生物体试样中待测细胞浓度不同，也能够很好地调制出适宜的测定试样，分析待测细胞。本发明还提供一种细胞分析装置与细胞分析方法，即使各生物体试样中待测细胞浓度存在较大差异，也能够精确分析待测细胞。
本发明第一层面所涉及的制样装置，其中：该制样装置包含：从生物体试样和规定的试剂调制出测定试样的制样部件；检测生物体试样所含一定细胞的检测部件以及根据上述检测部件的检测结果，生成反映生物体试样中一定细胞浓度的浓度信息的生成部分；根据上述生成部分生成的上述浓度信息，对上述制样部件执行的调制动作进行控制的动作控制部分。
上述动作控制部分可根据上述生成部分生成的上述浓度信息来决定调制上述测定试样所需的生物体试样的量，并可控制上述制样部件获取所决定量的生物体试样。
上述动作控制部分能够决定用于调制上述测定试样的生物体试样的量，使上述测定试样中的一定细胞的数量保持在一定范围内。
上述动作控制部分可以在生物体试样中一定细胞的浓度越低时，使用于调制上述测定试样的生物体试样的量越多，在生物体试样中一定细胞的浓度越高时，使用于调制上述测定试样的生物体试样的量越少。
上述动作控制手段根据上述生成部分生成的上述浓度信息，决定调制上述测定试样所需上述试剂的量，并可控制上述制样部件获得所决定量的上述试剂。
上述动作控制部分至少可决定生物体试样和试剂其中一方的量，使生物体试样中一定细胞的数量与上述试剂的量的比例保持在一定的范围内。
上述检测部件包括：使生物体试样流过的流动池；对流过上述流动池的生物体试样进行激光照射的光源部件；接受上述光源部件对生物体试样进行激光照射产生的光的受光部件。
上述制样装置还可具有细胞去除部件，该细胞去除部件可将生物体试样中一定细胞以外的细胞的至少一部分去除，
上述检测部件，能够检测出由上述细胞去除部件至少去除了至少一部分一定细胞以外细胞的生物体试样中所包含的一定细胞。
上述制样装置还可配置有能够使生物体试样中的细胞分散的细胞分散部件，
上述检测部件能够检测出被上述细胞分散部件分散了所述细胞的生物体试样中所包含的一定细胞。
上述一定细胞可以为宫颈上皮细胞。
本发明第二层面涉及的制样方法，其中：该制样方法包含：检测生物体试样所含一定细胞的检测步骤；
由上述检测步骤的检测结果生成反映生物体试样中一定细胞浓度的浓度信息，并根据该浓度信息，从生物体试样和一定的试剂调制测定试样的制样步骤。
本发明第三层面涉及的细胞分析装置，其中：该细胞分析装置包含：从生物体试样和一定的试剂调制测定试样的制样部件；
检测生物体试样所包含的一定细胞的第1检测部件；
根据上述第1检测部件的检测结果，生成反映生物体试样中一定细胞浓度的浓度信息的生成部分；
根据上述生成部分生成的上述浓度信息，对上述制样部件执行的调制动作进行控制的动作控制部分；
在上述动作控制部分的控制下，从上述制样部件调制出的上述测定试样中检测一定细胞的第2检测部件；
根据上述第2检测部件的检测结果，对一定细胞进行分析的分析部分。
本发明第四层面涉及的细胞分析方法，其中：该细胞分析方法包含：检测生物体试样所含一定细胞的第1检测步骤；
从上述第1检测步骤的检测结果生成反映生物体试样中所含细胞浓度的浓度信息，并根据该浓度信息，从生物体试样和一定的试剂调制测定试样的制样步骤；
从上述制样步骤调制出的上述测定试样中检测一定细胞的第2检测步骤；
根据上述第2检测步骤的检测结果，对一定细胞进行分析的分析步骤。
本发明第五层面的细胞分析方法是对于流经流动池的生物体试样所包含的一定细胞使用流式细胞法进行光学分析的细胞分析方法，
其特征在于，该细胞分析方法包含：
对生物体试样的一定细胞进行浓度调整，制备测定试样的前处理步骤；
使用由上述前处理步骤得到的调整好一定细胞浓度的上述测定试样，正式开始检测一定细胞的正式测定步骤。
附图说明
图1为第1实施方式所涉及的细胞分析装置斜视图；
图2为测定装置内部结构的框图；
图3为制样装置内部结构的框图；
图4为数据处理装置内部结构的框图；
图5为构成主检测部件的流式细胞仪的功能框图；
图6为流式细胞仪光学系统的侧视图；
图7为调制元器件部分的流体回路图；
图8为对识别/置换部件更为具体的构成进行说明的放大截面图；
图9为识别/置换部件的过滤作用的说明图；
图10为细胞分析装置各控制部件所执行的处理的流程图；
图11为细胞分析装置各控制部件所执行的处理的流程图；
图12为识别/置换处理的流程图；
图13为第2实施方式涉及的细胞分析装置的内部结构的框图；
图14为第2实施方式涉及的细胞分析装置各控制部件执行的处理的流程图前半部分；
图15为第2实施方式涉及的细胞分析装置各控制部件执行的处理的流程图后半部分。
优选实施方式
下面，参照附图就本发明的实施方式进行具体说明。
【第1实施方式】
【细胞分析装置的整体构成】
图1为本发明第1实施方式涉及的细胞分析装置1的斜视图。
该细胞分析装置1用于：让包含有从患者身上采集来的细胞的测定试样流入流动池，然后用激光照射流入该流动池的测定试样，检测来自测定试样的光(前向散射光、侧向荧光等)，通过对这些光信号进行分析来判断细胞中是否存在癌细胞。
更为具体地说就是本实施方式的细胞分析装置1是以宫颈部的上皮细胞为分析对象，用于进行宫颈癌筛查的装置。
如图1所示，上述细胞分析装置1包括以下部分：使用激光对测定试样进行光学测定的测定装置2；对从受检者采集的生物体试样进行清洗、染色等前处理，制作出提供给测定装置2的测定试样的制样装置3；对测定装置2中的测定结果进行分析等的数据处理装置4。
【测定装置的内部构成】
图2为测定装置2的内部结构框图。
如图2所示，该测定装置2包括有：主检测部件6；信号处理部件7；测定控制部件8；I/O接口9。
其中，主检测部件6用于从测定试样中检测出待测细胞和该细胞的细胞核数量及大小等，本实施方式采用了图5及图6所示的流式细胞仪10。
信号处理部件7是由对主检测部件6发出的输出信号进行必要的信号处理的信号处理线路组成。此外，测定控制部件8中包括有：微处理器11和存储部件12，存储部件12由ROM以及RAM等组成。
存储部件12的ROM中存储有对主检测部件6、信号处理部件7的动作进行控制的控制程序和执行该控制程序所需的数据，微处理器11可以将该控制程序载入RAM中，也可以直接从ROM执行该程序。
测定控制部件8的微处理器11，通过I/O接口9，与数据处理装置4和后述制样控制部件16的微处理器19连接，这样，就可以与数据处理装置4以及制样控制部件16的微处理器19之间传输自身处理过的数据和自身处理所需要的数据。
【制样装置的内部构成】
图3为制样装置3的内部构成框图。
如图3所示，该制样装置3包括：副检测部件14、信号处理部件15、制样控制部件16、I/O接口17以及用于对生物体试样自动实施成分调整的调制元器件部分18。
其中，副检测部件14用于检测生物体试样中包含的待测细胞数量，本实施方式中，在该副检测部件14中也采用了基本上与图5及图6所示相同的流式细胞仪10。
信号处理部件15是由对副检测部件14发出的输出信号进行必要的信号处理的信号处理线路组成。制样控制部件16包括：微处理器19、存储部件20、传感驱动器21和驱动部件驱动器22，存储部件20由ROM以及RAM等组成。
本实施方式下的调制元器件部分18由置样部件24；细胞分散部件25；样本吸移部件26；样本定量部件27；试剂定量部件28；识别/置换部件29组成。
其中，置样部件24用来放置装有从患者身上采集的生物体试样和以甲醇为主成分的保存液的多个生物体容器53和生成物容器54(参照图7)，细胞分散部件25用于对生物体容器53中生物体试样与保存液的混合液进行搅拌，并强制性地分散试样中所包含的细胞。
样本吸移部件26的作用是将细胞已经被分散的生物体试样和保存液的混合液从生物体容器53中取出，送入调制元器件部分18的流体回路中去，将调制出的生成物送回到生成物容器54中，或从该生成物容器54中取出调制出的生成物等，样本定量部件27是用来对提供给流体回路的生物体试样和保存液的混合液进行定量的。
试剂定量部件28用于对生物体试样中添加的染色液等试剂进行定量用，识别/置换部件29用于将生物体试样、保存液和稀释液进行混合，在对保存液和稀释液进行置换的同时，分辨待测细胞与除此之外的其他细胞(红血球、白血球等)及细菌等。对于有着上述各部件24～29的调制元器件部分18的流体回路的构成(图7)后面再进行说明。
存储部件20的ROM中存储有对副检测部件14、信号处理部件15、传感驱动器21以及驱动部件驱动器22进行动作控制的控制程序和执行这些控制程序所需的数据，微处理器19能够将这一控制程序加载到RAM中，或者从ROM直接执行这一控制程序。
制样控制部件16中的微处理器19通过I/O接口17与上述测定控制部件8的微处理器11相连，这样，可与测定处理部件8的微处理器11之间传输自身处理过的数据和自身处理所需数据。
另外，制样控制部件16中的微处理器19，通过传感驱动器21和驱动部件驱动器22，与构成调制元器件部分18各部件24～29的传感器和构成驱动部件的驱动马达相连，根据传感器发出的检知信号，执行控制程序，并控制驱动部件的动作。
【数据处理部件的内部构成】
图4为数据处理装置4的内部构成框图。
如图4所示，本实施方式的数据处理装置4是由例如笔记本电脑(台式电脑也可以)等个人计算机构成的，主要包括处理主机31与显示部件32以及输入部件33。
处理主机31包括：CPU34；ROM35；RAM36；硬盘37；读取装置38；输入输出接口39；图像输出接口40。这些部件通过内部总线连接起来，相互之间可以进行通信。
CPU34可执行ROM35中存储的计算机程序以及加载在RAM36中的计算机程序。
ROM35由掩膜(mask)ROM、PROM、EPROM、EEPROM等构成，CPU34所执行的计算机程序以及所用的数据等均存储在其中。
RAM36是由SRAM或者DRAM等构成的，可读取ROM35以及硬盘37中所存各种计算机程序或在执行这些计算机程序时作为CPU34的运行空间来使用。
上述硬盘37中安装有操作系统以及应用程序等各种供CPU34运行的计算机程序以及这些程序运行时所要使用的数据。
另外，硬盘37安装有如美国微软公司制造销售的Windows(注册商标)等提供图形用户界面的操作系统。
硬盘37中还安装有在该操作系统上运行的操作程序41，该操作程序41可以向测定控制部件8和制样控制部件16发送动作命令，接收测定装置2的测定结果并分析处理，以及显示处理后的分析结果等。
读取装置38由软盘驱动器、CD-ROM驱动器、或DVD-ROM驱动器等构成，可以读取存储在移动存储介质上的计算机程序或数据。
输入输出接口39由例如USB、IEEE1394、RS-232C等串行接口、SCSI、IDE、IEEE1284等并行接口、以及由D/A转换器、A/D转换器等组成的模拟接口构成。
输入输出接口39连接着由键盘、鼠标组成的输入部件33，用户通过操作此输入部件，便可对计算机进行数据输入。
另外，输入输出接口39还连接着测定装置2的I/O接口9，这样在测定装置2与数据处理装置4之间就可以进行数据的发送与接收。
图像输出接口40与由LCD或CRT等组成的上述显示部件32连接，将与来自CPU34的图像数据对应的图像信号输出到该显示部件32上。
【主检测部件(流式细胞仪)的构成】
图5为构成上述主检测部件6的流式细胞仪10的功能框图，图6是对这个流式细胞仪10的光学系统进行说明的侧视图。
如图5所示，该流式细胞仪10的透镜系统43用于将光源即半导体激光器44发出的激光束聚光到流经流动池45的测定试样上，聚光透镜46是将来自测定试样中细胞的前向散射光聚光到由光电二极管47组成的散射光检出器中。
图5中将透镜系统43显示为单一透镜，但其具体构成是如图6中所显示的那样。
即本实施方式下的透镜系统43是由从半导体激光器44一侧(图6的左侧)开始，依次为准直透镜43a、柱面镜系统(平凸柱面镜43b+双凹柱面镜43c)以及聚光镜系统(聚光透镜43d+聚光透镜43e)所组成。
再回到图5，侧向用的聚光透镜48用于将来自待测细胞或者该细胞的细胞核的侧向散射光与侧向荧光聚光到二向分色镜49中。该镜49再将侧向散射光反射到散射光检测器-光电倍增管50中，让侧向荧光透过荧光检测器-光电倍增管51。这些光可反映测定试样中细胞及细胞核的特征。
然后，光电二极管47以及各光电倍增管50、51将接收到的光信号转变成电信号，分别输出前向散射光信号(FSC)、侧向散射光信号(SSC)以及侧向荧光信号(SFL)。这些输出信号经无图示的前置放大器放大后被送到测定装置2的信号处理部件7(图2)中。
各种信号FSC、SSC、SFL在测定装置2的信号处理部件7中被处理后，由微处理器11分别将它们从I/O接口9发送到数据处理装置4。
数据处理装置4的CPU34通过执行上述操作程序41，根据各信号FSC、SSC、SFL制作出分析细胞和细胞核用散点图，根据该散点图来判断测定试样中的细胞是否异常，具体说就是判断是否为癌变细胞。
虽然可以使用气体激光器替代半导体激光器44作为流式细胞仪10的光源，但是从低成本、小型化、以及低耗电量方面看，最好使用半导体激光器44。使用该半导体激光器44可以在降低产品成本的同时，实现装置的小型化及低能耗。
本实施方式中使用了有利于收束激光束的波长较短的蓝色半导体激光器。蓝色半导体激光器对PI等荧光励起波长也较为有效。在半导体激光器中，也可以使用低成本且寿命长，供应商可稳定供给的红色半导体激光器。
宫颈上皮细胞的平均大小约为60μm，细胞核的大小为5～7μm。该细胞如果发生癌变，则细胞分裂频率会异常增大，细胞核大小达到10～15μm。这样，N/C的比值(细胞核大小/细胞大小)与正常细胞相比则会变大。
因此，通过检测细胞与细胞核的大小，即可以判断细胞是否发生了癌变。
在本实施方式中，光电二极管47检测来自流经流动池45的测定试样的散射光，同时，光电倍增管51检测来自流经流动池45的测定试样的荧光。
测定装置2的信号处理部件7从光电二极管47发出的散射光信号中取得反映待测细胞大小的散射光信号脉冲宽度，同时，从光电倍增管51发出的荧光信号中取得反映待测细胞的细胞核大小的荧光信号脉冲宽度。
然后，构成分析部件的数据处理装置4的CPU34即可根据上述信号处理部件7得到的反映待测细胞大小的值和反映待测细胞的细胞核大小的值来判断该待测细胞是否存在异常。
具体而言，当用散射光信号脉冲宽度除荧光信号的脉冲宽度得到的值大于一定阈值时，数据处理装置4的CPU34就判定待测细胞异常。
【副检测部件的构成】
制样装置3的副检测部件14用于在进行制样的前处理步骤中，从生物体试样中检测出待测细胞数量，在本实施方式中，采用的是与图5及图6显示的基本同样结构的流式细胞仪10。
本来，本实施方式中的制样装置3就是在测定装置2开始正式测定前，预先进行待测细胞浓度检测的装置，所以副检测部件14只要能够输出对该细胞数进行计数的信号即可。
为此，构成副检测部件14的流式细胞仪10，只要能够获得前向散射光信号(FSC)即可，所以没有获得侧向散射光信号(SSC)和侧向荧光信号(SFL)的光电倍增管50、51，只有光电二极管47用以取得FSC。
副检测部件14的光电二极管47接收到的光信号，被转换成电信号并放大后，发送到制样装置3的信号处理部件15(图3)。
在制样装置3的信号处理部件15中处理后的信号FSC，被发送到制样控制部件16。制样控制部件16的微处理器19根据信号FSC，对待测细胞进行计数。
微处理器19从设置在样本吸移部件26中的流量传感器(图中未标示)中，取得该样本吸移部件26为测定浓度而预先采集的的生物体试样容积，用信号FSC中得到的细胞数除以该容积，算出生物体试样的浓度。
但是，生物体试样浓度本身也不是一定要算出的，在生物体试样采集量一直保持稳定的情况下，细胞数自身就成为反映该浓度的信息。也就是说，制样控制部件16的微处理器19生成的浓度信息，可以包含生物体试样浓度，也可以是与该浓度实际上等价的其他信息。
制样控制部件16的微处理器19根据自身生成的上述浓度信息，发出控制指令，以控制上述调制元器件部分18对生物体试样进行的调制动作(生物体试样和试剂定量等动作)。关于该控制的具体内容后面再说明。
【调制元器件部分的流体回路】
图7为调制元器件部分18的流体回路图。
如图7所示，置样部件24包括圆形的转台24A和使其旋转的驱动部件24B，在转台24A的外周边上，设置有保持部件，该保持部件可以放置装有生物体试样和保存液的混合液的生物体容器53以及装有识别/置换部件29进行识别/置换处理后生成的生成物的生成物容器(微细管)54。
细胞分散部件25包括对生物体容器53中的试样进行搅拌的搅拌棒25A和驱动搅拌棒25A旋转的驱动部件25B，驱动部件25B将搅拌棒25A插入生物体容器53中，并使其转动。
这样，生物体容器53中的生物体试样被搅拌，可以让生物体试样中所包含的细胞分散开来。
样本吸移部件26包括第1吸液管26A和第2吸液管26B，第1吸液管26A用于吸取生物体容器53中的生物体试样，并将其供应给样本定量部件27，同时将识别/置换部件29中生成的生成物送回到生成物容器54中，第2吸液管26B用于将由试剂定量部件28定量的染色液等试剂供给生成物容器54。
第1吸液管26A与下面要讲到的识别/置换部件29的收纳容器57通过管路相连接，待测细胞被识别/置换部件29分辨后的液体可通过该第1吸液管26A送回生成物容器54。
样本定量部件27包括：定量气缸27A和驱使插入该气缸27A中的定量活塞上下移动的驱动部件27B。定量气缸27A经方向切换阀V1与第1吸液管26A通过管路相连接。
用第1吸液管26A从生物体容器53中吸出的生物体试样和保存液的混合液通过方向切换阀V1，导入到定量气缸27A中。被导入的该生物体试样和保存液的混合液通过驱动部件27B驱动的定量活塞的移动，经方向切换阀V1被送入下一个识别/置换部件29。
本实施方式中，样本定量部件27的定量气缸27A还通过管路与给生物体试样调制稀释液的稀释液组件55相连接。
试剂定量部件28包括一对定量气缸28A、28B和驱动分别插入各气缸28A、28B中的定量活塞上下移动的驱动部件28C。各定量气缸28A、28B各自经供给切换阀V2、V3与第2吸液管26B通过管路相连接。
试剂容器中的试剂由各定量气缸28A、28B供应。供给的试剂，通过驱动部件28C驱动定量活塞移动来定量一定量，定量后的试剂经供给切换阀V2、V3被送到第2吸液管26B。
这样，就可以在返回到置样部件24的生成物容器54中的分离完的试样中，分别混和由试剂定量部件28定量的一定量的各种试剂。
本实施方式中，在试剂定量部件28的各定量气缸28A、28B定量的试剂有两种。其中，定量气缸28A计量并加入生物体试样中的试剂是进行PI染色用的染料液，另一个定量气缸28B计量并加入生物体试样中的试剂是对细胞进行RNA处理的Rnase。PI染色是使用含有色素的荧光染色液——碘化丙啶(PI)进行的。PI染色是对细胞核进行有选择的染色，所以可检测出来自细胞核的荧光。RNA处理是为了溶解细胞中的RNA而实施的处理。因为上皮细胞中的RNA和DNA均能被染色液染色，而通过上述RNA处理，RNA溶解，不会被染料液染色，这样就能够正确地检测细胞核中的DNA。
识别/置换部件29包括：上方呈开口状的收纳容器57、可插入收纳容器57并在该收纳容器57中上下自由活动的过滤气缸58及使该过滤气缸58在收纳容器57中上下活动的驱动部件59。
收纳容器57经方向切换阀V1、V7、V4与样本定量部件27的定量气缸27A通过管路相连接。这样，样本定量部件27定量的生物体试样与保存液的混合液可以经方向切换阀V1、V7、V4供给至收纳容器57，并暂时保存在此容器57内。此外，收纳容器57中的分辨完的生物体试样也可经同样路径被送至以1洗液管26A。
而且，上述副检测部件14的流动池45被设置在方向切换阀V4与到废弃部件61之间的管路部分中。这样，副检测部件14就可以对收纳容器57排出的已分辨的生物体试样进行细胞计数。
过滤气缸58由下部装有阻止待测细胞(上皮细胞)通过而让比其直径小的细胞(红血球、白血球等)通过的过滤器60的中空圆筒物构成，该过滤气缸58经切换阀V5通过管路连接着稀释液组件55。
这样，打开切换阀V5，稀释液组件55的稀释液就可以供至过滤气缸58内。
识别/置换部件29的驱动部件59驱动上述过滤气缸58向装有生物体试样与保存液、稀释液的混合液的收纳容器57下面移动，过滤气缸58的过滤器60在收纳容器57内混合液中向下移动。这样，主要包含待测细胞的液体作为残留液留在过滤器60下方，同时主要包含其它细胞、夹杂物的液体作为滤液残留在过滤器60的上方(过滤气缸58的内部)。
另外，过滤气缸58经切换阀V6通过管路连接着滤液废弃部件61。这样，因为过滤气缸58的下降而被过滤的滤液经切换阀V6废弃至外部。
而另一方面，当上述过滤后的残留液为生物体试样浓度测定用时，过滤气缸58中的残留液则在上述滤液废弃完成后，经方向切换阀V4被送到副检测部件14的流动池45，之后，被废弃到废弃部件61。另外，当这一残留液为测定试样调制用时，则从第1吸液管26A中将其送回到生成物容器54。
如图7所示，样本定量部件27的定量气缸27A，经方向切换阀V1、V7，通过管路还与测定装置2的主检测部件6相连接。
这样，生成物容器54中的测定试样，经第1吸液管26A，在样本定量部件27中被定量，经上述切换阀V1、V7，被供应给测定装置2的主检测部件6。
根据上述制样控制部件16(微处理器19)发出的控制指令实行对图7中各部件的驱动部件、切换阀(电磁阀)V1～V7的动作控制。上述制样控制部件16进行的前处理步骤后面再说明。
【识别/置换部件的具体构成】
图8为对识别/置换部件29更为具体的构成进行说明的放大截面图，图9为对识别/置换部件的过滤作用进行说明的说明图。
如图8所示，本实施方式的识别/置换部件29包括：可收纳包含生物体试样的液体L的收纳容器57、能阻止生物体试样中的第1细胞C1通过而让比第1细胞C1直径小的第2细胞C2通过的过滤器60。
另外，识别/置换部件29还包括作为液体分离部件发挥作用的上述过滤气缸58，它是通过让液体L通过上述过滤器60，将液体L分离成主要包含第1细胞C1的第1液体L1和主要包含第2细胞C2的第2液体L2。
收纳容器57中具有筒体部57A和底部57B，中空筒体部57A有朝上下方向的轴心，底部57B有中央部有向下凹陷的内面，底部57B与中空筒体部57A的下部相连，成为一体。
此外，过滤气缸58具有中空筒状气缸63以及封住该气缸63的下端开口的上述过滤器60，中空筒状气缸63通过密封材料62可插入收纳容器57中并上下自由移动。
本实施方式中，设想将宫颈上皮细胞作为第1细胞C1，该上皮细胞的大小约为20～80μm(平均为60μm左右)。此外，比上述第1细胞C1小的第2细胞C2-红血球，其大小约为7～10μm，同样作为第2细胞C2的白血球，其大小约为8～15μm，再有，作为第2细胞C2的细菌等夹杂物的大小约为1～数μm左右。
因此，在本实施方式中，上述过滤器60采用的是通孔直径小于20μm、约为8～20μm的金属制CVD(Chemical Vapor Deposition：化学气象沉积法)过滤器，这样，即使是在向收纳容器57中的液体施加压力的状态下，上皮细胞也不会通过上述过滤器60的通孔。这种金属制CVD过滤器与其它树脂类材质过滤器和虽然是金属网状过滤器相比，具有通孔不易变形，可提高开口率的优点。
过滤器60的孔径设定在8～20μm是因为，如果在8μm以下，常出现细胞和夹杂物一开始就堵塞通孔的现象，如果在20μm以上，在向收纳容器57中的液体施加压力的状态下，上皮细胞常常会通过通孔。过滤器60的孔径最好是在15μ左右。
收纳容器57的底部57B上连接有残留液管路64，残留液管路64用于导入已定量的生物体试样和排出并获取过滤后的残留液L1，在该管路64的中间部分设有上述方向切换阀V4。因此，该残留液管路64与方向切换阀V4构成了获取液体分离部件-过滤气缸58分离出的第1液体L1的液体获取部件。
另外，在气缸63的上壁部，连接着与稀释液组件55相通的稀释液管路65，这个管路65的中间部分设有上述切换阀V5。
此外，在气缸63的上壁部，连接着为了将过滤后的滤液L2废弃至外部、与废弃部件61相连的滤液管路66，该管路66的中间部分设置有上述切换阀V6。为此，该滤液管路66与切换阀V6构成了液体排出部件，该液体排出部件的作用是将液体分离部件——过滤气缸58分离出的第2液体L2排至外部。
在气缸63的上端部分，连接有移动机构67，它用于将马达等构成的上述驱动部件59的旋转运动转换成在该气缸63上下方向的移动。
这个移动机构67的驱动部件59根据制样控制部件16(微处理器19)发出的控制指令，驱动过滤气缸58。
例如，如图9(a)所示，制样控制部件16让过滤气缸58下降，使过滤器60从收纳容器57内的液体L(生物体试样与保存液、稀释液的混合液)液面上方，朝着液体方向向下方移动。
这样，就如图9(b)所示，内部所含细胞基本上都是第1细胞(上皮细胞)C1的液体作为残留液L1留在了收纳容器57中过滤器60的下方，包含其它第2细胞C2(红血球、白血球以及细菌等夹杂物)的液体作为滤液L2留在了过滤器60的上方(过滤气缸58的内部)。
然后，制样控制部件16控制移动机构65的驱动部件59，使朝液体L内移动完毕的过滤器60向上返回一定距离。
具体说就是，制样控制部件16控制移动机构67，让过滤气缸58下降，使过滤器60到达设在底部57B或其附近的下降限度，然后再让过滤器60返回至上方一定距离。通过这个向上方的回移，可以让附着在过滤器60下面的第1细胞(上皮细胞)C1脱离过滤器60。
然后，制样控制部件16先打开切换阀V6，如图9(c)所示，在残留液L1之前先将滤液L2排出，然后再打开方向切换阀V4取得残留液L1。
【分析处理的内容】
图10以及图11是细胞分析装置1各控制部件8、16、31所执行的处理的流程图。
图10中，右侧显示的是数据处理装置4的控制部件(处理主机)31执行的处理流程，左侧显示的是测定装置2的控制部件8执行的处理流程。图11中，用一列显示了制样装置3的控制部件16所执行的处理流程，但是该处理流程在图示中的A、B以及C点是和图10的处理流程相连的。下面，将参照图10和图11，对细胞分析装置1的处理内容进行说明。
首先，一开始，数据处理装置4的控制部件31在上述显示部件32显示菜单画面(步骤S1)。然后，当从输入部件33收到该菜单画面显示的测定开始指令(步骤S2)时，数据处理装置4的控制部件31将测定开始信号发送给测定装置2(步骤S3)。
测定装置2的控制部件8接收到上述测定开始信号后(步骤S4)，将制样开始信号发送给制样装置3(步骤S5及A点)。
制样装置3的控制部件16接收到上述制样开始信号后(步骤S6)，将测定试样调制用的试剂(染色液、RNase)吸入装置内流路，同时用细胞分散部件25将装在生物体容器53中的生物体试样与以甲醇为主成分的保存液的混合液中的细胞分散(步骤S7、8)。
之后，制样装置3的控制部件16将完成分散的混合液从生物体容器53中吸移一定量到装置内流路中(步骤S9)，送入识别/置换部件29的收纳容器57中，由该识别/置换部件29对生物体试样和保存液的混合液进行识别/置换处理(步骤S10)。
【识别/置换处理的内容】
图12是上述识别/置换处理的流程图。
如图12所示，首先，制样装置3的控制部件16在装有生物体试样和保存液的混合液的收纳容器57中加入稀释液进行混合(步骤T1)，并让气缸63下降到其下限位置(步骤T2)。
通过气缸63的下降，如上所述，收纳容器57中的液体L被分辨为主要含有测定对象——第1细胞C1的一定量残留液L1和主要含有其他细胞C2的滤液L2。
然后，在气缸63到达下限位置时，制样装置3的控制部件16让该气缸63上升一定距离(步骤T3)。这样，可以让附着在过滤器60下面的第1细胞(上皮细胞)C1浮游在过滤器60下方的浓缩液中。
所以，在这一处理(步骤T3)中，气缸63的上升移动速度和距离只要能达到使第1细胞C1从过滤器60物理性脱离的程度即可，移动次数也可以是多次。
在上述处理之后，制样装置3的控制部件16先将过滤器60上方的滤液L2排出到外部(步骤T4)，再让气缸63上升至初始位置(步骤T5)，判断气缸63的下降是否是第2次。
在气缸63的下降不是第2次的情况下，制样装置3的控制部件16从混合稀释液开始再次反复进行过滤，如果是第2次的话，就结束该识别/置换处理的处理程序。该识别/置换动作不仅限于2次，也可以是2次以上。
通过该识别/置换处理，可以得到主要包含有待测细胞即第1细胞(上皮细胞)C1、而待测细胞以外的第2细胞C2数量很少的液体。另外，通过该识别/置换处理，可以在生物体容器53供给收纳容器57的液体(生物体试样和保存液的混合液)中，对保存液的浓度用稀释液进行稀释。为此，在后述DNA处理中，可降低保存液的干扰，较好地对待测细胞的DNA进行染色。
再回到图11，上述识别/置换处理(步骤S10)结束后，制样装置3的控制部件16会往副检测部件14的流动池45输送浓缩液(基本上是上皮细胞的残留液L1)(步骤S11)，并使用该副检测部件14，通过流式细胞计量法对浓缩液L1进行预检(步骤S12)。
该预检是在测定装置2进行癌细胞判断的正式测定前，为得到可反映生物体试样中所包含的待测细胞(上皮细胞)C1浓度的浓度信息而进行的，例如，可通过检测浓缩液中所含细胞C1的数量来进行。
【浓度信息的利用】
接下来，制样装置3的控制部件16将浓缩液L1排至废弃部件61(步骤S13)，并算出生物体试样的浓度(步骤S14)，同时，根据该浓度信息，决定为调制用于正式测定的测定试样所需的生物体试样的试样吸出量(步骤S15)。
例如，如果用于预检的生物体试样的吸出量是200μl，预检的结果判断出细胞C1的个数是1万个，那么，生物体试样的浓度就是10000个/200μ1＝50(个/μ1)＝50000(个/m1)。
此外，如果假设在正式测定中检测癌细胞所需的有效细胞数为10万个，那么，即能算出，为确保在该有效细胞数的情况下进行正式测定所需要的生物体试样的采集量是10万个·50000(个/m1)＝2ml。
这样，制样装置3的控制部件16即可从生物体容器53中仅吸出上述必要量的生物体试样(步骤S16)，然后对这些生物体试样再次进行上述识别/置换处理(步骤S17)。
这样，制样装置3的控制部件16根据自身生成的细胞C1的浓度信息，决定调制正式测定用测定试样所需的生物体试样的量，并控制制样装置3的调制元器件部分18取得所决定量的生物体试样。
在这种情况下，制样装置3的控制部件16在生物体试样中的细胞C1的浓度越低时，决定的用于调制测定试样的生物体试样的量越多，在生物体试样中的细胞C1的浓度越高时，决定的用于调制测定试样的生物体试样的量越少。
对于制样装置3的控制部件16来说，由主检测部件43检测出的细胞C1的数量，并不限定是癌细胞检测用有效细胞数的上述10万个，例如，也可以决定用于调制测定试样的生物体试样的量，使有消息报量控制在10万个～15万个等一定的范围内。
而且，对于制样装置3的控制部件16来说，根据自身生成的细胞C1的浓度信息，不仅可以决定生物体试样的量，还可以决定用于调制测定试样的试剂的量，控制制样装置3的调制元器件部分18获取所决定量的试剂。
此外，对于制样装置3的控制部件16来说，可以根据自身生成的细胞C1的浓度信息，决定生物体试样以及试剂中至少一方的量，来将生物体试样中细胞C1的数量与试剂(例如染色液)量的比例控制在一定范围内，并控制制样装置3的调制元器件部分18获取所决定量的生物体试样或试剂。
【测定试样的调制】
接下来，制样装置3的控制部件16，将上述第2次识别/置换处理后得到的浓缩液L1供给生成物容器(微细管)54(步骤S18)，同时将存留在装置中的染色液和RNase从试剂定量部件28供给生成物容器54(步骤S19)，在该生成物容器54中，进行DNA染色和RNA处理，制作测定试样(步骤S20)。
上述处理结束后，制样装置3的控制部件16将得到的测定试样输送给测定装置2的主检测部件6(步骤S21及B点)。
制样装置3的控制部件16，随时要判断是否收到了测定装置2发出的关机信号(步骤S22及BC点)，在没有收到该信号时，回到判定是否收到制样开始信号的步骤S6，如果接收到该信号，则执行关机动作，结束制样处理(步骤S23)。
【测定装置执行的正式测定与数据分析】
回到图10，测定装置2的控制部件8在发出制样开始信号之后，随时判断是否制样装置3有测定试样供应(步骤S24)。
因此，如果制样装置3送出测定试样(B点)，测定装置2的控制部件8便会将该测定试样送至正式测定部件14的流动池45，对测定试样的细胞C1进行上述的正式测定(步骤S25)，并将这一测定数据发送到数据处理装置4(步骤S26)。
另一方面，数据处理装置4的控制部件31，在发送了测定开始信号后，随时判断是否从测定装置2收到测定数据(步骤S27)。
如果从测定装置2收到上述测定数据，数据处理装置4的控制部件31就使用该测定数据对细胞及细胞核进行分析，判断测定试样中的细胞是否有癌变等(步骤S28)。
数据处理装置4的控制部件31在显示部件32显示上述分析结果(步骤S29)，并判断是否有用户输入的关机指示(步骤S30)。
当接到上述关机指示时，数据处理装置4的控制部件31将该关机指示发送给测定装置2(步骤S31)。
测定装置2的控制部件8，随时判断是否收到来自数据处理装置4的上述关机信号(步骤S32)，在没有收到该信号时，返回到判断是否收到测定开始信号的步骤S4，如果收到了该信号，则将关机信号转发给制样装置3(步骤S33)，同时，执行关机，结束测定处理(步骤S34)。
如上所述，本实施方式涉及的细胞分析装置1，是先由制样装置3对生物体试样进行预检，然后根据得出的测定结果，实施包括调整待测细胞C1浓度在内的前处理步骤，所以即使是各生物体试样中待测细胞C1的浓度存在较大差异，也能很好地调制出适合待测细胞C1分析用的测定试样。而且，因为使用该浓度调整后得到的、待测细胞C1浓度已调整完毕的测定试样来进行该待测细胞C1的正式测定，所以即使是各生物体试样中待测细胞C1的浓度存在较大差异，也能够对生物体试样中的该待测细胞C1进行精确分析。
【第2实施方式】
图13是本发明的第2实施方式涉及的细胞分析装置1的内部结构框图。
该第2实施方式的细胞分析装置1与第1实施方式中的不同之处在于它将上述制样装置3进行预检所需的元器件全部一体化装在了测定装置2的内部，其各部件的构成以及功能均与第1实施方式一样。
因此，有关测定装置2各部件的构成及功能，因为在图13的各部件上也标注了用于第1实施方式的参照符号，就不再详细说明了。
图14和图15分别是第2实施方式涉及的细胞分析装置1的各控制部件8、31执行的处理的流程图前半部分和后半部分。图14的D～I分别与图15的D～I相连。
如图14所示，首先，数据处理装置4的控制部件31在上述显示部件32显示菜单画面(步骤S1)。然后，从输入部件33收到该菜单画面所显示的测定开始指示(步骤S2)时，数据处理装置4的控制部件31将测定开始信号发送到测定装置2(步骤S3)。
本实施方式中，测定装置2的控制部件8也执行和第1实施方式中制样装置3的控制部件16同样的处理。
即，测定装置2的控制部件8接收到测定开始信号(步骤S4)，就将测定试样调制用试剂(染色液、RNase)吸入到装置内流路中，同时将装在生物体容器53中的生物体试样与以甲醇为主成分的保存液的混合液中的细胞用细胞分散部件25进行分散(步骤S7、S8)。
之后，在将测定试样送至主检测部件6之前，测定装置2的控制部件8进行与第1实施方式中制样装置3的控制部件16同样的处理(步骤S7～S21)。
然后，测定装置2的控制部件8将该测定试样送至主检测部件6的流动池45后，随即开始对测定试样的细胞C1进行上述正式测定(步骤S25)，并将其测定数据发送到数据处理装置4(步骤S26)。
而数据处理装置4的控制部件31则在测定开始信号发送之后，就开始随时判断是否收到测定装置2发来的测定数据(步骤S27)。
如果从测定装置2接收到上述测定数据，则数据处理装置4的控制部件31便使用该测定数据对细胞及细胞核进行分析，判断测定试样中的细胞是否有癌变(步骤S28)。
另外，数据处理装置4的控制部件31将上述分析结果显示于显示部件32(步骤S29)，并判断是否有用户发来的关机指示(步骤S30)。
如果有上述关机指示，数据处理装置4的控制部件31便向测定装置2发送关机信号(步骤S31)。
测定装置2的控制部件8随时判断是否接收到数据处理装置4发出的上述关机信号(步骤S32)，如果没有收到该信号，则返回到判断是否收到测定开始信号的步骤S4，如果收到该信号，则执行关机，结束测定处理(步骤S34)。
【其它变形例】
此次公开的实施方式应该认为是本发明的一例，绝无限制性。本发明的范围不受上述实施方式的说明所限，仅由权利要求书的范围所示，而且包括与权利要求范围具有同样范围内的所有变形。
例如，试剂存储部件不一定要如图7所示包含在装置内的流体回路中，也可以将存放在装置外存储部件中的试剂通过试剂定量部件28导入到流体回路中。
另外，在上述实施方式中，是在检测宫颈上皮细胞C1的浓度后，重新将生物体试样从生物体容器53中吸移出来供给识别/置换部件29，然后使用再一次分辨后的浓缩液C1制成测定试样，但是本发明不限于此，也可以将在测定上皮细胞C1浓度时使用的浓缩液C1直接作为测定试样的原料使用。
上述实施方式是将宫颈的上皮细胞C1作为待测细胞的，但是本发明不限于此，也可用于对口腔细胞，膀胱、咽喉等其它上皮细胞，甚至脏器上皮细胞的癌变进行判断。
上述实施方式中，用过滤器60来分辨宫颈上皮细胞C1和其它细胞C2，但是本发明不仅限于此，除此以外，例如还可以利用上皮细胞C1与其它细胞C2的比重差采用离心分离法进行分离。
在上述实施方式中，是将主检测部件6和副检测部件14分别独立设置的，但是本发明不限于此，也可以用一个流式细胞仪10兼做检测部件6和14。
而且，计量生物体试样中细胞C1数量的副检测部件14，本发明不限于流式细胞仪10这样的光学式的东西，也可以采用电阻式细胞检测器。
在上述实施方式中，是使用吸液管26A吸取生物体容器53中的液体(生物体试样和保存液的混合液)，然后将吸取的液体经管路供给识别/置换部件29的收纳容器57，但是本发明不限于此，也可以将吸液管26A作成可动式结构，使用吸液管26A吸取生物体容器53中的液体后，让吸液管26A移动至识别/置换部件29的收纳容器57，然后从吸液管26A中将液体吐至收纳容器57。
在上述实施方式中，通过让过滤器60自收纳容器57中液体L(生物体试样与稀释液的混合液)的液面上方朝着该液体向下移动，将液体L分离成液体L1和液体L2，但是本发明不限于此，也可以将过滤器60固定在收纳容器57中一个指定位置，让液体L从该过滤器60中穿过，将液体L分离成液体L1和液体L2。例如，将过滤器60固定在收纳容器57内下方的一定位置上，将其量可以使液面上升到该过滤器60上方的液体L从过滤器60的下方导入收纳容器57，这样使液体L通过过滤器60，然后获得存在于收纳容器57中过滤器60下方的液体。这种情况下，样本定量部件27和切换阀V1、V7、V4构成了液体分离部件，使液体L通过过滤器60，将液体L分离成液体L1和液体L2。这样只让待测细胞——上皮细胞以外的红血球和白血球等细胞通过过滤器60，不让待测细胞-上皮细胞通过过滤器60，而留在收纳容器57中过滤器60下方的液体中，因此也可得到非待测细胞的细胞数很少的液体。
在上述实施方式中，是使用流式细胞仪对制样装置3调制出的测定试样进行测定的，但是本发明不限于此，也可以设置将制样装置3调制出的测定试样涂在载玻片上制作标本涂片的标本涂片制作装置和对制成的标本涂片进行拍摄并分析拍摄图像中上皮细胞的细胞图像处理装置。因为制样装置3可以调制出待测细胞浓度均一的测定试样，所以很容易制成适于分析的标本涂片。
在上述实施方式中，是通过将生物体容器53中的液体(生物体试样与以甲醛为主成分的保存液的混合液)导入识别/置换部件29的收纳容器57后，再将稀释液供给收纳容器57，进行识别/置换处理的方法，来进行以甲醛为主成分的保存液和稀释液的置换，但是本发明不限于此，也可以将适宜调制测定试样时进行PI染色的溶剂与以甲醛为主成分的保存液进行置换。这样可以更好地调制测定试样。
在上述实施方式中，是对识别/置换处理后得到的浓缩液(基本上是待测细胞C1的残留液L1)中待测细胞C1进行计数，来算出生物体试样中待测细胞C1的浓度信息的，但是本发明不仅限于此，也可以对分离、置换处理前的生物体试样中的待测细胞C1进行计数，算出生物体试样中待测细胞C1的浓度信息。
在上述第1实施方式中，是由制样装置3的调制控制部件16对生物体试样中待测细胞C1的浓度信息进行计算处理，并根据得到的浓度信息，进行测定试样的调制处理(包括决定试样吸移量的处理)，上述第2实施方式中，这些处理是由测定装置2的控制部件16来执行的，但是本发明不仅限于此，数据处理装置4的处理主机31也可执行这些处理。

Claims (10)

1.一种制样装置，包括：
从生物体试样和一定试剂调制测定试样的制样部件；
检测生物体试样所含一定细胞的检测部件；
根据所述检测部件的检测结果，生成反映生物体试样中一定细胞的浓度的浓度信息的生成单元；
根据所述生成单元生成的所述浓度信息，对供给所述制样部件的生物体试样的量进行控制的控制单元；
所述制样部件具有：置样部件，用于放置装有生物体试样和以甲醇为主成分的保存液的混合液的生物体容器；识别/置换部件，混合所述混合液和稀释液，在对所述保存液和所述稀释液进行置换的同时，分辨一定细胞和除此之外的其他细胞；
所述控制单元控制所述混合液被从所述生物体容器吸移一定量，并运送至所述检测部件，用所述检测部件检测一定细胞，以获得反映生物体试样中所包含的一定细胞的浓度的浓度信息；
其中，所述控制单元根据所述浓度信息决定所述制样部件制备所述测定 试 样所需要的生物体试样的量，使所述测定试样中的一定细胞数在一定范围内，并控制所述生物体试样被从所述生物体容器重新吸移所决定的量，运送至所述识别/置换部件，让所述识别/置换部件进行识别/置换处理，向生成物容器供应经所述识别/置换处理后所得到的浓缩液；以及
所述控制单元控制供给所述生成物容器的试剂的量，使生物体试样所含一定细胞数与所述试剂的量的比例在一定的范围内；
所述一定细胞是上皮细胞。
2.根据权利要求1所述的制样装置，其特征在于：所述控制单元，控制所述制样部件按照一定的动作来调制测定试样。
3.根据权利要求1或2所述的制样装置，其特征在于：所述控制单元在生物体试样中一定细胞的浓度越低时，供给所述制样部件的生物体试样的量就越多，当生物体试样中一定细胞的浓度越高时，供给所述制样部件的生物体试样的量就越少。
4.根据权利要求1或2所述的制样装置，其特征在于：所述控制单元根据所述生成单元生成的所述浓度信息，控制供给所述制样部件的所述试剂的量。
5.根据权利要求1或2所述的制样装置，其特征在于：所述检测部件包括：能让生物体试样流过的流动池；对流过所述流动池的生物体试样进行激光照射的光源部件；对所述光源部件对生物体试样进行激光照射后所产生的光进行聚光的受光部件。
6.根据权利要求1或2所述的制样装置，其特征在于：所述制样装置还配置有能够使生物体试样中的细胞分散的细胞分散部件；
所述检测部件检测所述细胞已被所述细胞分散部件分散的生物体试样中所含一定细胞。
7.根据权利要求1或2所述的制样装置，其特征在于：所述一定细胞为宫颈上皮细胞。
8.一种制样方法，该制样方法包括以下步骤：
检测步骤，检测生物体试样所含一定细胞；
生成步骤，根据所述检测步骤的检测结果生成反映生物体试样中一定细胞的浓度的浓度信息；
控制步骤，根据生成的浓度信息，控制用于调制测定试样的生物体试样的量；
制样步骤，由所控制的量的生物体试样和一定试剂调制测定试样；
识别/置换步骤，将包含生物体试样和以甲醇为主成分的保存液的混合液与稀释液混合，在对所述保存液和所述稀释液进行置换的同时，分辨一定细胞和除此之外的其他细胞；
在所述控制步骤中，控制吸移一定量的所述混合液，并在所述检测步骤中检测一定细胞，以获得反映生物体试样中所包含的一定细胞的浓度的浓度信息；
其中，在所述控制步骤中根据所述浓度信息决定所述制样步骤中制备所述测定试样所需要的生物体试样的量，使所述测定试样中的一定细胞数在一定范围内，并控制重新吸移所决定的量的生物体试样，并在所述识别/置换步骤中进行识别/置换处理，供应经所述识别/置换处理后所得到的浓缩液；以及
在所述控制步骤中控制供给所述制样步骤中的试剂的量，使生物体试样所含一定细胞数与所述试剂的量的比例在一定的范围内；
所述一定细胞是上皮细胞。
9.一种细胞分析装置，包括：
制样部件，从生物体试样和一定试剂调制测定试样；
第1检测部件，检测生物体试样所包含的一定细胞；
生成单元，根据所述第1检测部件的检测结果，生成反映生物体试样中一定细胞的浓度的浓度信息；
控制单元，根据所述生成单元生成的所述浓度信息，对供给所述制样部件的生物体试样的量进行控制；
第2检测部件，由所述制样部件从所述控制单元所控制的量的生物体试样中制备的所述测定试样中检测出一定细胞；
分析单元，根据所述第2检测部件的检测结果，对一定细胞进行分析；
所述制样部件具有：置样部件，用于放置装有生物体试样和以甲醇为主成分的保存液的混合液的生物体容器；识别/置换部件，混合所述混合液和稀释液，在对所述保存液和所述稀释液进行置换的同时，分辨所述一定细胞和除此之外的其他细胞；
所述控制单元控制所述混合液被从所述生物体容器吸移一定量，并运送至所述第1检测部件，用所述第1检测部件检测一定细胞，以获得反映生物体试样中所包含的一定细胞的浓度的浓度信息；
其中，所述控制单元根据所述浓度信息决定所述制样部件制备所述测定试样所需要的生物体试样的量，使所述测定试样中的一定细胞数在一定范围内，并控制所述生物体试样被从所述生物体容器重新吸移所决定的量，运送至所述识别/置换部件，让所述识别/置换部件进行识别/置换处理，向生成物容器供应识别/置换处理后所得到的浓缩液；以及
所述控制单元控制供给所述生成物容器的试剂的量，使生物体试样所含一定细胞数与所述试剂的量的比例在一定的范围内；
所述一定细胞是上皮细胞。
10.一种细胞分析方法，包括以下步骤：
第1检测步骤，检测生物体试样所含一定细胞；
生成步骤，从所述第1检测步骤中的检测结果生成反映生物体试样中所含一定细胞浓度的浓度信息；
控制步骤，根据生成的浓度信息，控制用于调制测定试样的生物体试样的量；
制样步骤，由所控制的量的生物体试样和一定试剂调制测定试样；
第2检测步骤，从所述制样步骤制备的所述测定试样中检测出一定细胞；
分析步骤，根据所述第2检测步骤的检测结果，对一定细胞进行分析；
识别/置换步骤，将包含生物体试样和以甲醇为主成分的保存液的混合液与稀释液混合，在对所述保存液和所述稀释液进行置换的同时，分辨一定细胞和除此之外的其他细胞；
在所述控制步骤中，控制吸移一定量的所述混合液，并在所述第1检测步骤中检测一定细胞，以获得反映生物体试样中所包含的一定细胞的浓度的浓度信息；
其中，在所述控制步骤中，根据所述浓度信息决定所述制样步骤中制备所述测定试样所需要的生物体试样的量，使所述测定试样中的一定细胞数在一定范围内，并控制重新吸移所决定的量的生物体试样，并在所述识别/置换步骤中进行识别/置换处理，供应经所述识别/置换处理后所得到的浓缩液；以及
在所述控制步骤中控制供给所述制样步骤中的试剂的量，使生物体试样所含一定细胞数与所述试剂的量的比例在一定的范围内；
所述一定细胞是上皮细胞。
CN200980112142.4A 2008-03-31 2009-03-26 制样装置与制样方法以及细胞分析装置与细胞分析方法 Active CN101983339B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510513206.9A CN105181407B (zh) 2008-03-31 2009-03-26 制样装置与制样方法以及细胞分析装置与细胞分析方法

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2008089863 2008-03-31
JP2008-089868 2008-03-31
JP2008089868 2008-03-31
JP2008-089863 2008-03-31
PCT/JP2009/056070 WO2009122999A1 (ja) 2008-03-31 2009-03-26 試料調製装置及び試料調製方法、並びに、細胞分析装置及び細胞分析方法

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201510513206.9A Division CN105181407B (zh) 2008-03-31 2009-03-26 制样装置与制样方法以及细胞分析装置与细胞分析方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101983339A CN101983339A (zh) 2011-03-02
CN101983339B true CN101983339B (zh) 2015-09-23

Family

ID=41135379

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200980112142.4A Active CN101983339B (zh) 2008-03-31 2009-03-26 制样装置与制样方法以及细胞分析装置与细胞分析方法
CN2009801121443A Active CN101983328B (zh) 2008-03-31 2009-03-26 细胞处理装置、制样装置及细胞分析装置
CN201510513206.9A Active CN105181407B (zh) 2008-03-31 2009-03-26 制样装置与制样方法以及细胞分析装置与细胞分析方法

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2009801121443A Active CN101983328B (zh) 2008-03-31 2009-03-26 细胞处理装置、制样装置及细胞分析装置
CN201510513206.9A Active CN105181407B (zh) 2008-03-31 2009-03-26 制样装置与制样方法以及细胞分析装置与细胞分析方法

Country Status (5)

Country Link
US (3) US8415145B2 (zh)
EP (3) EP2264465B1 (zh)
JP (2) JP5613044B2 (zh)
CN (3) CN101983339B (zh)
WO (2) WO2009122999A1 (zh)

Families Citing this family (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2818194T3 (es) 2007-10-02 2021-04-09 Labrador Diagnostics Llc Dispositivos modulares para puntos de atención y usos de los mismos
EP2264465B1 (en) * 2008-03-31 2019-09-11 Sysmex Corporation Sample preparation apparatus, sample preparation method and cell analysis apparatus
JP5030897B2 (ja) * 2008-08-28 2012-09-19 メタウォーター株式会社 微生物計測方法
JP2011095181A (ja) * 2009-10-30 2011-05-12 Sysmex Corp 粒子分析装置
JP5503360B2 (ja) * 2010-01-15 2014-05-28 シスメックス株式会社 試料調製装置
JP5728196B2 (ja) 2010-01-21 2015-06-03 シスメックス株式会社 試料調製装置および試料調製方法
US9023294B2 (en) 2010-02-24 2015-05-05 Kanagawa Academy Of Science And Technology Cell analyzer
JP5784294B2 (ja) * 2010-09-22 2015-09-24 シスメックス株式会社 細胞分析装置および細胞分析方法
CA2819013C (en) * 2010-12-01 2020-04-14 President And Fellows Of Harvard College Apparatus and methods for aliquotting frozen samples
CN106290160A (zh) 2011-01-21 2017-01-04 提拉诺斯公司 样品使用最大化的系统和方法
GB201111080D0 (en) * 2011-06-29 2011-08-10 Ge Healthcare Uk Ltd Syringeless filter device compressor
JP5138801B2 (ja) 2011-07-22 2013-02-06 シスメックス株式会社 癌化情報提供方法および装置
BR112014021135B1 (pt) 2012-02-24 2021-03-02 Instrunor As instrumento de processo de pré-tratamento de célula totalmente automatizado para a preparação de pelo menos uma amostra de célula e arranjo de carrossel e centrífuga
JP6085419B2 (ja) * 2012-03-30 2017-02-22 シスメックス株式会社 検体分析装置
JP5876359B2 (ja) * 2012-03-30 2016-03-02 シスメックス株式会社 癌化情報提供方法および癌化情報提供装置
JP5970223B2 (ja) 2012-03-30 2016-08-17 シスメックス株式会社 癌化情報提供方法および癌化情報提供装置
GB2502287B (en) * 2012-05-21 2016-11-23 Dermal Diagnostics Ltd Cumulative measurement of an analyte
JP5959988B2 (ja) * 2012-08-16 2016-08-02 シスメックス株式会社 癌化情報取得装置、細胞分析装置、および細胞採取適否判定装置、ならびに、癌化情報取得方法および細胞採取適否判定方法。
JP5699118B2 (ja) * 2012-11-14 2015-04-08 シスメックス株式会社 細胞分析装置、癌化情報提供方法、ｄｎａ量ヒストグラムの作成方法および検査方法
JP5892967B2 (ja) * 2013-03-29 2016-03-23 シスメックス株式会社 細胞分析装置、細胞測定装置の管理方法およびコンピュータプログラム
JP6364712B2 (ja) 2013-07-05 2018-08-01 株式会社サタケ 微生物濃縮器
JP6378599B2 (ja) * 2013-10-11 2018-08-22 シスメックス株式会社 細胞分析方法および細胞分析装置
JP6306708B2 (ja) * 2014-07-22 2018-04-04 株式会社日立ハイテクノロジーズ 細胞分散装置およびそれを用いた自動継代培養システム
CN104568539B (zh) * 2014-12-16 2017-05-10 何向锋 一种组织细胞自动分离器
CN106323707A (zh) * 2015-07-09 2017-01-11 衢州职业技术学院 一种血小板环境扫描电镜观察样本的改良制备方法
EP3220298A1 (en) 2016-03-14 2017-09-20 Fenwal, Inc. Cell processing system and method with process parameter control
US11191879B2 (en) 2016-05-27 2021-12-07 Fenwal, Inc. Cell processing system and method with preliminary process evaluation
US10654000B2 (en) 2016-07-13 2020-05-19 Fenwal, Inc. Cell processing system and method with centralized data management, monitoring and/or control
US11249077B2 (en) 2016-09-30 2022-02-15 Arkray, Inc. Method for magnetically labeling particles and labeling apparatus
JP7005176B2 (ja) 2017-05-31 2022-01-21 シスメックス株式会社 試料調製装置、試料調製システム、試料調製方法及び粒子分析装置
US10895582B2 (en) 2017-09-07 2021-01-19 Sysmex Corporation Sample preparing apparatus, sample preparing system, sample preparing method, and particle analyzer
CN111337696B (zh) * 2018-12-18 2024-03-29 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 一种体外诊断设备及其样本分析方法
US20230256440A1 (en) * 2020-06-26 2023-08-17 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Target particle ejection from recirculating fluid ejection channels
CN111944681A (zh) * 2020-08-12 2020-11-17 德州职业技术学院（德州市技师学院） 一种微生物样本储存装置
CN113341127B (zh) * 2021-05-31 2022-04-08 黄埔海关技术中心 一种高灵敏度多真菌毒素同步快检机器人及检测方法
CN113252632B (zh) * 2021-06-25 2021-10-19 成都瀚辰光翼生物工程有限公司 样本浓度处理方法、装置、样本处理设备及可读存储介质
JP7490739B2 (ja) 2021-09-29 2024-05-27 シスメックス株式会社 試料調製装置の制御方法、試料調製装置の制御装置、試料調製システム及び試料調製方法
CN114113660A (zh) * 2021-12-22 2022-03-01 中元汇吉生物技术股份有限公司 系统建压方法、分析仪及计算机可读存储介质
CN115407078B (zh) * 2022-11-01 2023-01-31 丹娜(天津)生物科技股份有限公司 具有样本前置处理功能的分析仪及样本前置处理方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5560889A (en) * 1994-05-09 1996-10-01 Toa Medical Electronics Co., Ltd. Sample treatment apparatus

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0448837B1 (en) * 1990-03-02 1998-08-19 Cytyc Corporation Method and apparatus for controlled instrumentation of particles with a filter device
US5282978A (en) * 1990-07-09 1994-02-01 Cytyc Corporation Specimen processor method and apparatus
US5269918A (en) * 1990-07-09 1993-12-14 Cytyc Corporation Clinical cartridge apparatus
JPH07306202A (ja) * 1992-04-01 1995-11-21 Maruzen Petrochem Co Ltd 細胞核ｄｎａの損傷検出方法
JPH076746U (ja) * 1993-06-29 1995-01-31 武藤化学薬品株式会社 プレパラート作製用細胞分離器
JP3487615B2 (ja) * 1993-08-18 2004-01-19 上坂 伸宏 血液検査用フィルター
JP3022097B2 (ja) * 1993-10-21 2000-03-15 三井造船株式会社 フィルタ
GB9422504D0 (en) * 1994-11-08 1995-01-04 Robertson Patricia M B Blood testing
US5942700A (en) * 1996-11-01 1999-08-24 Cytyc Corporation Systems and methods for collecting fluid samples having select concentrations of particles
WO1998053297A1 (en) * 1997-05-23 1998-11-26 Morphometrix Technologies Inc. Method for preparing specimens from cellular suspension
JP3517359B2 (ja) 1998-09-14 2004-04-12 テルモ株式会社 細胞分離・回収装置および細胞の分離・回収方法
JP2000146782A (ja) * 1998-11-12 2000-05-26 Yoshio Kawai 自動固定標本作製装置および方法
US20020086431A1 (en) * 2000-08-21 2002-07-04 Markham Walter Bruce Sample preparation and slide plating apparatus and method
US6905594B2 (en) * 2002-10-11 2005-06-14 G6 Science Corp. Filter apparatus and methods to capture a desired amount of material from a sample suspension for monolayer deposition, analysis or other uses
EP2305832B1 (en) * 2003-03-28 2022-03-09 Inguran, LLC Method for providing sex-sorted animal sperm
JP2005102648A (ja) * 2003-10-01 2005-04-21 Mitsubishi Electric Corp 微生物検査装置および微生物検査方法
US7687032B2 (en) * 2004-05-06 2010-03-30 Cytyc Corporation Filter assembly for molecular testing
US20060078998A1 (en) * 2004-09-28 2006-04-13 Singulex, Inc. System and methods for sample analysis
CN1834659A (zh) * 2005-03-17 2006-09-20 希森美康株式会社 试料分析装置和试料分析方法以及血液分析装置
EP1867997B1 (en) * 2005-03-29 2015-04-29 Sysmex Corporation Specimen analyzing method and specimen analyzing device
CN101151517A (zh) * 2005-03-29 2008-03-26 希森美康株式会社 鉴别癌症/异型细胞和粒子团的方法及细胞分析仪
US8039050B2 (en) * 2005-12-21 2011-10-18 Geo2 Technologies, Inc. Method and apparatus for strengthening a porous substrate
JP2007319019A (ja) * 2006-05-30 2007-12-13 Sysmex Corp 細胞処理方法及び細胞処理装置
US20070278154A1 (en) * 2006-05-30 2007-12-06 Sysmex Corporation Cell processing method and cell processing apparatus
EP2264465B1 (en) * 2008-03-31 2019-09-11 Sysmex Corporation Sample preparation apparatus, sample preparation method and cell analysis apparatus

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5560889A (en) * 1994-05-09 1996-10-01 Toa Medical Electronics Co., Ltd. Sample treatment apparatus

Also Published As

Publication number Publication date
US8189177B2 (en) 2012-05-29
CN101983328B (zh) 2013-04-24
US20110014646A1 (en) 2011-01-20
EP2261632A1 (en) 2010-12-15
JPWO2009122999A1 (ja) 2011-07-28
CN101983339A (zh) 2011-03-02
US20130183747A1 (en) 2013-07-18
JPWO2009123000A1 (ja) 2011-07-28
EP3570041B1 (en) 2021-10-13
JP5613044B2 (ja) 2014-10-22
CN105181407A (zh) 2015-12-23
JP5441888B2 (ja) 2014-03-12
US20110014685A1 (en) 2011-01-20
EP2264465B1 (en) 2019-09-11
US9329109B2 (en) 2016-05-03
WO2009122999A1 (ja) 2009-10-08
EP2264465A4 (en) 2017-06-28
CN101983328A (zh) 2011-03-02
WO2009123000A1 (ja) 2009-10-08
EP2264465A1 (en) 2010-12-22
US8415145B2 (en) 2013-04-09
CN105181407B (zh) 2020-06-30
EP3570041A1 (en) 2019-11-20
EP2261632A4 (en) 2017-12-13
EP2261632B1 (en) 2019-09-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101983339B (zh) 制样装置与制样方法以及细胞分析装置与细胞分析方法
JP7005176B2 (ja) 試料調製装置、試料調製システム、試料調製方法及び粒子分析装置
EP1975625B1 (en) Sample analyzer, sample analyzing method, and computer program product
CN101074914B (zh) 尿中粒子分析仪及其方法
EP2348322B1 (en) Sample preparation apparatus
CN111474107B (zh) 尿分析装置及尿或体液中异型细胞的分析方法
CN1985168A (zh) 具有可拆卸盒的便携式样本分析仪
CN104805004A (zh) 血细胞分析装置
CN110068697A (zh) 样本分析装置
CN104020282A (zh) 尿分析装置、样本分析方法及尿分析装置用控制系统
US9784729B2 (en) Canceration information providing method and canceration information providing device
CN104422646A (zh) 样本分析方法及样本分析装置
US20190072578A1 (en) Sample preparing apparatus, sample preparing system, sample preparing method, and particle analyzer
Dzik Principles of counting low numbers of leukocytes in leukoreduced blood components
WO2010087403A1 (ja) 細胞分散装置及び試料前処理装置
CN108982337B (zh) 尿分析装置及尿分析方法
JP7490739B2 (ja) 試料調製装置の制御方法、試料調製装置の制御装置、試料調製システム及び試料調製方法
JP7185743B2 (ja) 試料調製装置、及び試料調製方法
Ma et al. Hematology Analyzers and Reagents
KR20200126405A (ko) 생물학적 세포를 포함하는 생물학적 샘플을 분석하는 방법 및 그 분석 방법을 실현하기 위한 분석 장치

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant