CN101953841B - 一种抗猪附红细胞体病的复方长效土霉素注射液及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种抗猪附红细胞体病的复方长效土霉素注射液，包括不同质量份的盐酸土霉素(或其生物碱)、洛克沙砷、对乙酰氨基酚、甘油甲缩醛、聚乙烯吡咯烷酮K12、聚乙烯吡咯烷酮K17、聚乙二醇200、聚乙二醇400、氯化镁、甲醛合次硫酸氢钠、单乙醇胺和注射用水。该注射液将盐酸土霉素(或其生物碱)、洛克沙砷和对乙酰氨基酚配伍使用，发挥各药物组分间的协同作用，从病因和病症两方面治疗猪附红细胞体病，从而达到快速、有效的治疗目的。

Description

一种抗猪附红细胞体病的复方长效土霉素注射液及其制备方法

技术领域

本发明属于兽药技术领域，涉及到一种可以从病因和病症两方面快速、有效治疗猪附红细胞体病的复方长效土霉素注射液及其制备方法。

技术背景

猪附红细胞体病是由猪附红细胞体和小附红细胞体所致的一种只感染猪的传染病，临床以发热、贫血和黄疸为特点。猪附红细胞体寄生于猪的红细胞表面、血浆和骨髓中，破坏血液中的红细胞，使红细胞变形，表面内陷溶血，使其携氧功能丧失而引起猪抵抗力下降，易并发感染其它疾病，从而导致仔猪体质变差，贫血，肠道及呼吸道感染增加；育肥猪日增重下降，急性溶血性贫血；母猪生产性能下降等。

土霉素是20世纪40年代发现的四环素类广谱抗菌药，通过阻止氨酰tRAN与细菌核糖体结合来抑制细菌蛋白质合成，从而达到杀菌、抑菌的作用。临床试验表明：盐酸土霉素对附红细胞体病和呼吸道的疾病，尤其是对附红细胞体和敏感菌的混合感染效果较好。因此兽医临床上常采用土霉素注射液来治疗附红细胞体病。

现存的土霉素注射液具有粘稠度大，药效作用时间短，注射时对机体刺激大等缺点。专利CN101062042A和专利CN101433517A都提供了一种30％(W/V)的复方土霉素注射液，但因其缺乏有效的缓释技术，所以无法延长药效时间，减少注射次数，降低对机体的刺激。专利CN1706391A提供了一种20％长效缓释的土霉素混悬乳剂，但其pH在3-4之间，根据土霉素注射液的质量标准，其pH的范围在8.3-8.8之间。在酸性条件下，土霉素C₆上的羟基和C_5a上的氢发生反式消去反应，会产生橙黄色脱水物，从而使土霉素的效价降低。因此在酸性条件下，长效缓释的土霉素混悬乳剂不利于长期稳定的保存。

发明内容

针对上述现有土霉素注射液制剂存在的缺陷和不足，本发明的目的在于提供一种粘度小，药效作用时间长，对机体刺激小的的一种长效土霉素注射液。于此同时，为了有效的治疗猪附红细胞体病，本发明中加入了针对猪附红细胞体病临床病症的两种辅药，以求达到快速、有效的治疗该病的目的。

实现上述发明目的的技术方案是：一种抗猪附红细胞体病的复方长效土霉素注射液，其特征是：每100mL该注射液中含有10-30g土霉素活性成分、1-4g洛克沙砷、5-11g对乙酰氨基酚、4-8g氯化镁、0.5-0.7g甲醛合次硫酸氢钠、40-60mL复合有机溶媒、2.5-7.5g缓释剂、2-6mL单乙醇胺，其余量为注射用水。

上述原料的体积和为100mL；

所述的土霉素活性成分是盐酸土霉素或其对应的生物碱；

所述的复合有机溶媒是：甘油甲缩醛、聚乙二醇-200、聚乙二醇-400、氮甲基吡咯烷酮、α-吡咯烷酮、丙二醇中的任意一种或两种；

所述的缓释剂是聚乙烯吡咯烷酮K12或聚乙烯吡咯烷酮K17。

本发明复方长效土霉素注射液的优选配比是：15～25g盐酸土霉素或其生物碱，1.5～3.3g洛克沙砷，6～10g对乙酰氨基酚，5～7g氯化镁，0.55～0.65g甲醛合次硫酸氢钠，45～55mL复合有机溶媒，2.5～6.5g缓释剂，3～5mL单乙醇胺，其余量为注射液用水。

本发明复方长效土霉素注射液的最佳配比是每100mL该注射由下列原料组成：

每100mL该注射由下列原料组成：

20g盐酸土霉素或其生物碱，2.5g洛克沙砷，8g对乙酰氨基酚，6g氯化镁，0.6g甲醛合次硫酸氢钠，50mL复合有机溶媒，5g缓释剂，4mL单乙醇胺，其余量为注射液用水。

本发明的另一目的是提供抗猪附红细胞体病的复方长效土霉素注射液的制备方法，包括以下步骤：

1)将氯化镁、甲醛合次硫酸氢钠和注射用水加入可以冲氮，提供厌氧环境和控制温度的配液罐中，搅拌均匀，制成A液；

2)将复合有机溶媒温度控制在50℃-55℃冲入氮气排除配液罐中的氧气；

3)向有机溶媒中加入土霉素活性成分、洛克沙砷和对乙酰氨基酚，不断搅拌，至颜色变成澄黄色、透明的液体，制成B液；

4)将A液和B液混合，加入聚乙烯吡咯烷酮K12或K17，不断搅拌，至溶液成澄黄色、透明液体；

5)将温度降至室温，用单乙醇胺调节液将pH调节至8.3-8.8，灭菌，分装。

上述步骤1)、2)、3)、4)、5)的过程中，均保持冲氮排氧的厌氧环境，以减少土霉素的损耗。

为了延长药物的有效作用时间，本发明中加入了聚乙烯吡咯烷酮K12或K17，形成可生物溶蚀性骨架。在肌肉注射液后，药物可以从凝胶库中依赖凝胶库内外的药物浓度差缓慢的释放，延长药效时间。而聚乙烯吡咯烷酮K12或K17的分子量较小，不会增大注射液的粘稠度，加大对机体的刺激。本发明的复合有机溶媒选择用甘油甲缩醛和聚乙二醇去替代刺激性较大的氮甲基吡咯烷酮和二甲基乙酰胺，以求降低注射后对机体产生的刺激。甘油甲缩醛是一种优良溶剂，可以提高兽药稳定性，降低粘度，减少药物残留和毒副作用，同时也是土霉素的增效剂。聚乙二醇是一种被广泛使用的安全的注射用剂。

猪附红细胞体病在临床上以贫血、黄疸和发热为特点。为了快速、有效的治疗猪附红细胞体病，尽量减少养殖户的经济损失，本发明加入了治疗发热、贫血和黄疸等临床症状所需的对乙酰氨基酚和洛克沙砷。土霉素对附红细胞体和敏感菌的混合感染效果较好；洛克沙砷可以活跃造血机能，协同多种抗生素加强抗球虫和抗菌机能，对猪附红体病引起的贫血、黄疸和腹泻有治疗作用，同时还可以刺激动物生长，提高饲料利用率，改善肉品感官；对乙酰氨基酚具有镇痛解热的作用。本发明将土霉素、洛克沙砷和对乙酰氨基酚三种药物配伍使用，从病因和病症两方面，发挥各种药物的协同作用，达到快速、有效的治疗猪附红体病的目的。

附图说明

图1两组土霉素注射液在猪体内药动力学特征

具体实施方式

下面结合具体实施方式，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。

实施例1

100mL该注射液的配方如下：

盐酸土霉素          30g

洛克沙砷            3g

对乙酰氨基酚        8g

有机溶媒(V甘油甲缩醛∶V聚乙二醇200＝2∶1)  50mL

氯化镁                                     6g

甲醛合次硫酸氢钠                           0.6g

聚乙烯吡咯烷酮K12                          7.5g

单乙醇胺                                   6mL

用注射用水定容至                           100mL

具体操作步骤：

1)称取处方量的氯化镁、甲醛合次硫酸氢钠和注射用水加入可以冲氮提供厌氧环境和控制温度的配液罐中，搅拌均匀，制成A液；

2)称取处方量的复合有机溶媒(由甘油甲缩醛和聚乙二醇200按适当比例组成)，温度控制在50℃-55℃，冲入氮气排除配液罐中的氧气；

3)加入处方量的盐酸土霉素或其生理碱、洛克沙砷和对乙酰氨基酚，不断搅拌，至颜色变成橙黄色、透明的液体，制成B液；

4)将A液和B液混合，加入处方量聚乙烯吡咯烷酮，不断搅拌，至溶液成澄黄色、透明液体；

5)将温度降至室温，用处方量的单乙醇胺调节液将pH调节至8.5-9.0，灭菌，分装。

实施例2

100mL该注射液的配方如下：

盐酸土霉素          25g

洛克沙砷            3g

对乙酰氨基酚        8g

有机溶媒(V甘油甲缩醛∶V聚乙二醇400＝3∶1)        45mL

氯化镁                                           5g

甲醛合次硫酸氢钠                                 0.5g

聚乙烯吡咯烷酮K12                                5g

单乙醇胺                                         5mL

用注射用水定容至                                 100mL

实施例3

100mL该注射液的配方如下：

盐酸土霉素                                       20g

洛克沙砷                                         3g

对乙酰氨基酚                                     10g

有机溶媒(V甘油甲缩醛∶V二甲基乙酰胺400＝3∶1)    40mL

氯化镁                                           4g

甲醛合次硫酸氢钠                                 0.4g

聚乙烯吡咯烷酮K12                                5g

单乙醇胺                                         4mL

用注射用水定容至                                 100mL

实施例4

100mL该注射液的配方如下：

盐酸土霉素                                       30g

洛克沙砷                                         3g

对乙酰氨基酚                                     8g

有机溶媒(V甘油甲缩醛∶V聚乙二醇200＝2∶1)  60mL

氯化镁                                     8g

甲醛合次硫酸氢钠                           0.6g

聚乙烯吡咯烷酮K17                          5g

单乙醇胺                                   6mL

用注射用水定容至                           100mL

实施例5

100mL该注射液的配方如下：

盐酸土霉素                                 25g

洛克沙砷                                   4g

对乙酰氨基酚                               10g

有机溶媒(V甘油甲缩醛∶V丙二醇200＝3∶1)    45mL

氯化镁                                     5g

甲醛合次硫酸氢钠                           0.5g

聚乙烯吡咯烷酮K17                          6g

单乙醇胺                                   5mL

用注射用水定容至                           100mL

实施例6

100mL该注射液的配方如下：

盐酸土霉素                                 20g

洛克沙砷                                   4g

对乙酰氨基酚                               11g

有机溶媒(V聚乙二醇200∶V丙二醇200＝3∶1)  45mL

氯化镁                                    4g

甲醛合次硫酸氢钠                          0.4g

聚乙烯吡咯烷酮K17                         5g

单乙醇胺                                  4mL

用注射用水定容至                          100mL

实施例7

100mL该注射液的配方如下：

盐酸土霉素                                22g

洛克沙砷                                  2g

对乙酰氨基酚                              11g

有机溶媒(V聚乙二醇400∶V丙二醇200＝2∶1)  45mL

氯化镁                                    4g

甲醛合次硫酸氢钠                          0.4g

聚乙烯吡咯烷酮K12                         5g

单乙醇胺                                  4mL

用注射用水定容至                          100mL

实施例8

100mL该注射液的配方如下：

盐酸土霉素                                10g

洛克沙砷                                  1g

对乙酰氨基酚                              5g

有机溶媒(V聚乙二醇400∶V丙二醇200＝2∶1)  40mL

氯化镁                                    4g

甲醛合次硫酸氢钠                          0.4g

聚乙烯吡咯烷酮K17                         2.5g

单乙醇胺                                  2mL

用注射用水定容至                          100mL

实施例9

20g盐酸土霉素或其生物碱，2.5g洛克沙砷，8g对乙酰氨基酚，6g氯化镁，0.6g甲醛合次硫酸氢钠，50mL复合有机溶媒，5g缓释剂，4mL单乙醇胺，其余量为注射液用水。

试验例1局部刺激性考察

取体重2.5-3.0kg的日本大耳白家兔9只，随机分成3组，每组3只。剪去右侧股四头肌部位的兔毛，用碘酊和乙醇消毒后，分别将一组家兔右侧股四头肌注入本发明复方长效土霉素注射液1ml，将一组家兔右侧股四头肌注入等量灭菌生理盐水溶液作阴性对照，将最后一组家兔右侧股四头肌注入复方长效土霉素注射液(公开号CN101062042A)土霉素注射液做阳性对照。于给药后2天，7天，15天分别取每组家兔一只处死，解剖取出股四头肌沿肌纤维平行方向切开肌肉。暴露注药部位，观察注射部位肌肉组织的反应情况。按照表1肌肉组织刺激反应的评定标准进行评定。

表1肌肉刺激反应分级标准

局部刺激性试验结果：

表2长效土霉素注射液家兔股四头肌刺激试验结果

表2表明：本发明的复方长效土霉素注射液比复方长效土霉素注射液(公开号CN101062042A)注射后对机体刺激性较小。

试验例2长效性考察

将6头猪随机分为两组，实验前7天饲喂不含抗菌素的全价料。A组取本发明制备的长效土霉素注射液，以25mg/kg剂量肌肉注射，B组取普通土霉素注射液(公开号CN1123664A)，以25mg/kg剂量肌肉注射。给药后按下列时间点前腔静脉采血：0min(给药前)、5min、10min、15min、30min、60min、2h、4h、8h、12h、24h、48h、72h。将血样注入含有EDTA的离心管中，3000r/min离心15min，制备血浆。使用高效液相色谱仪测定各个血浆的峰面积，并计算土霉素的血药浓度。

本发明抗猪附红细胞体病的复方长效土霉素注射液的长效性考察结果：

表3两组土霉素注射液给猪注射后的血药浓度

如果以血浆土霉素浓度0.5ug/mL为最小有效浓度，则A组能够维持有效血药浓度72个小时，见图1，应三天注射一次；B组能够维持有效血药浓度18个小时，应两天注射3次。因此，A组比B组更加长效。

试验例3药效考察

取患猪附红细胞体病的成年母猪75头，按体重大小随机分成三组，每组25头。第一组按25mg/kg注射本发明复方长效土霉素注射液；第二组按25mg/kg注射复方土霉素注射液(CN101433517A)；第三组为空白对照组，不予治疗。治疗10日，每日记录患畜身体变化情况和死亡动物分布，统计治疗效果。

治疗标准：

无效：指10天后，患畜症状无明显改变，保持治疗前症状。

有效：指10天后，患畜症状优于治疗前。

治愈：指10天后，症状消失，患畜恢复健康。其数字包含在有效数字中。

相对增重率：指使用药物后相对于空白对照组的增重率。

表4治疗考察表

本次试验结果经统计分析，本发明治疗组和复方土霉素注射液(CN101433517A)治疗组与对照组的差异极显著(P＜0.01)。结果表明本发明和复方土霉素注射液(CN101433517A)对猪附红体病的治疗都很有效，但是本发明组比复方土霉素注射液(CN101433517A)组的相对增重率高。这体现出本发明复配的洛克沙砷和对乙酰氨基酚能够减轻猪附红体病的症状，刺激患蓄生长，从而降低广大养殖户的经济损失。

Claims (2)

1.一种抗猪附红细胞体病的复方长效土霉素注射液，其特征是：每100mL该注射液中含有10～30g土霉素活性成分、1～4g洛克沙砷、5～11g对乙酰氨基酚、4～8g氯化镁、0.5～0.7g甲醛合次硫酸氢钠、40～60mL复合有机溶媒、2～7.5g缓释剂、2～6mL单乙醇胺，其余量为注射用水；

所述的土霉素活性成分是盐酸土霉素；

所述的复合有机溶媒是：甘油甲缩醛、聚乙二醇-200、聚乙二醇-400、丙二醇中的任意一种或两种；

所述的缓释剂是聚乙烯吡咯烷酮K12或聚乙烯吡咯烷酮K17。

2.制备权利要求1所述的一种抗猪附红细胞体病的复方长效土霉素注射液，其特征在于，具体包括以下步骤：

1)将氯化镁、甲醛合次硫酸氢钠和注射用水加入可以充氮并提供厌氧环境和控制温度的配液罐中，搅拌均匀，制成A液；

2)将复合有机溶媒温度控制在50℃～55℃充入氮气排除配液罐中的氧气；

3)向有机溶媒中加入土霉素活性成分、洛克沙砷和对乙酰氨基酚，不断搅拌，至颜色变成澄黄色、透明的液体，制成B液；

4)将A液和B液混合，加入聚乙烯吡咯烷酮K12或K17，不断搅拌，至溶液成澄黄色、透明液体；

5)将温度降至室温，用单乙醇胺调节液将pH调节至8.3～8.8，灭菌，分装。

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