CN101953441A - 一种河蟹饲料及其生产工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种河蟹饲料，所述河蟹饲料包含鱼粉、菜粕、玉米、豆粕、次粉、豆油、小虾米、乌贼膏、磷酸二氢钙、蟹用矿物质、蟹用维生素、粘合剂以及虫草素0.7-14.0mg/kg、虫草酸131.0-2620.0mg/kg、腺苷0.1-2.0mg/kg、超氧化物歧化酶290.0-5800.0IU/kg。本发明所述饲料利用率高，减少了饲料残渣对环境的污染；避免了抗生素残留及其引起耐药性的负面影响，对河蟹及环境安全无危害；能够增强河蟹的免疫力，加快河蟹的生长速度。本发明还提供了所述河蟹饲料的生产工艺，具有成本低廉、操作简便的特点。

Description

一种河蟹饲料及其生产工艺
技术领域
本发明涉及水产养殖饲料加工领域，特别涉及一种河蟹饲料及其生产工艺。
背景技术
河蟹即中华绒螯蟹，拉丁名为Eriocheir sinensis，是我国特有的水产珍品。但随其养殖规模不断扩大、养殖密度不断增加，养殖环境日益恶化，严重威胁河蟹的生长和繁育。目前，河蟹饲料主要是通过在基础饲料中添加抗生素如吉他霉素等来预防河蟹疾病，通过添加促生长剂如喹乙醇等加快河蟹生长。但是将含抗生素和促生长剂的饲料投喂河蟹后，这两类物质会残留在河蟹体内，使河蟹产生耐药性，进而威胁食物链中其他生物的安全；未能被河蟹摄入的饲料残渣散落于水体中，导致抗生素、促生长剂等药物的残留，严重污染了生态环境。河蟹品质与安全问题严重困扰并制约着河蟹养殖业的健康发展。因此，开发一种无抗生素残留、不产生耐药性、能够增强机体抗病能力的河蟹饲料，对实现河蟹养殖业的可持续健康发展具有重要的现实意义。
河蟹的传统养殖饲料是在基础饲料中掺入添加剂制备而成的，基础饲料包括鱼粉、玉米、豆粕、菜粕、乌贼膏、小虾米、磷酸二氢钙、蟹用维生素、蟹用矿物质等，主要为河蟹提供基本生存所需的营养；然后根据不同的研究方向，将具有相关功效的添加剂掺入基础饲料中，实现增产、抗病等目的。
北冬虫夏草，又名蛹虫草，拉丁名为Cordxcepsmilitaris，是虫草属中具有药用价值的大型真菌，人工栽培北冬虫夏草的方法是在培养基中接入北冬虫夏草菌种，经培养得到北冬虫夏草的子实体。子实体中除了富含蛋白质、氨基酸、维生素等物质外，还含有虫草素、虫草酸、腺苷、超氧化物歧化酶等活性成分，具有增强机体免疫力的生理功效。随着北冬虫夏草的市场需求量越来越大，采用培养基栽培子实体的工业化生产逐渐发展起来。大规模生产后，产生了大量摘除子实体后的残余培养基，作为废料被丢弃，既造成浪费，又污染环境。目前，还没有对上述残余培养基作为河蟹饲料的原料进行再利用的研究报道。
发明内容
本发明针对现有技术中抗生素和促生长剂的残留对河蟹生长、人类健康和环境造成危害的现状，提供了一种河蟹饲料。这种河蟹饲料可以避免抗生素、促生长剂残留带来的负面影响，同时能够增强河蟹的免疫力，加快河蟹的生长速度。为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种河蟹饲料，包含鱼粉、菜粕、玉米、豆粕、次粉、豆油、小虾米、乌贼膏、磷酸二氢钙、蟹用矿物质、蟹用维生素和粘合剂，所述饲料还包含虫草素、虫草酸、腺苷和超氧化物歧化酶；在所述河蟹饲料中，所述虫草素的含量为0.7-14.0mg/kg、所述虫草酸的含量为131.0-2620.0mg/kg、所述腺苷的含量为0.1-2.0mg/kg、超氧化物歧化酶290.0-5800.0IU/kg。当然，本发明提供的河蟹饲料还可以包含其他组分，只要在本领域技术人员认知范围内可以作为河蟹饲料组分的物质，都可以按照适用配比添加到本发明所述的河蟹饲料中。
虫草素，即3′-脱氧腺苷，同腺苷作用类似，是一种具有抗菌活性的核苷类物质，对核多聚腺苷酸聚合酶有很强的抑制作用，具有抗病毒、抗菌的活性；虫草酸，分子式为C7H12O6，为1，3，4，5-四羟基环己酸，能抑制各种病菌的成长，促进机体的新陈代谢；超氧化物歧化酶，是一种非常重要的抗氧化酶，它可以帮助体内消除过多的自由基，避免细胞受到氧化、老化或破坏，还能抑制病毒、增强免疫功能。
本发明提供的河蟹饲料，按照干物质的质量百分比计，可以包含鱼粉19-22％、菜粕26-28％、玉米8-11％、豆粕8-11％、次粉9-10％、豆油2.5-3％、小虾米3-4％、乌贼膏6-8％、磷酸二氢钙1.5％、蟹用矿物质3.5％、蟹用维生素1％、粘合剂0.5-1％。当然，只要能够满足河蟹生长的基本营养需求，在本领域技术人员的认知范围内，上述各组分的含量也可以在实际养殖情况允许的范围内进行调整。
在本发明提供的河蟹饲料中，按照干物质质量百分比计，蟹用矿物质中各组分的含量可以为，磷酸二氢钠3.5％、磷酸二氢钾6.0％、碳酸钙3.5％、氯化钾0.8％、硫酸镁3.2％、氯化铝0.35％、硫酸锌0.157％、硫酸锰0.043％、碘化钾0.016％、氯化铜0.014％、氯化钴0.055％、乳酸钙5.15％、柠檬酸铁0.019％，其余为稀释剂。当然，本发明涉及到的蟹用矿物质还可以包含其他组分，只要在本领域技术人员认知范围内可以作为蟹用矿物质组分的物质，都可以添加到本发明提供的河蟹饲料中。
在本发明提供的河蟹饲料中，按照干物质质量百分比计，蟹用维生素中各组分的含量可以为，VE 2％、VC 3.0％、VA 0.7％、VD3 0.08％、VBI 0.07％、VB2 0.14％、VB3 0.28％、VB5 0.02％、VB6 0.07％、VB7 0.05％、VB11 0.02％、VH 0.03％、烟酸0.3％、叶酸0.05％、泛酸钙0.25％、氯化胆碱0.5％、肌醇0.7％、生物素0.05％，其余为稀释剂。当然，本发明涉及到的蟹用维生素还可以包含其他组分，只要在本领域技术人员认知范围内可以作为蟹用维生素组分的物质，都可以添加到本发明提供的河蟹饲料中。
作为优选，粘合剂可以为α-淀粉、小麦面筋、褐藻胶、丙烯酸钠、聚乙烯醇、聚丙烯酸钠、多聚脲甲醛、溶胀胶质面筋；只要在本领域技术人员认知范围内可以作为粘合剂的物质，都可以添加到本发明提供的河蟹饲料中。
作为优选，稀释剂可以为膨润土、沸石粉、麸皮；只要在本领域技术人员认知范围内可以作为稀释剂的物质，都可以添加到本发明提供的河蟹饲料中。
在本发明中，所述虫草素、虫草酸、腺苷和超氧化物歧化酶可以由摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基提供，使得在本发明提供的河蟹饲料中，包含虫草素0.7-14.0mg/kg、虫草酸131.0-2620.0mg/kg、腺苷0.1-2.0mg/kg、超氧化物歧化酶290.0-5800.0IU/kg。当然，本发明涉及到的虫草素、虫草酸、腺苷和超氧化物歧化酶还可以通过其他方式添加到所述河蟹饲料中，只要在本领域技术人员认知和实际情况允许的范围内可以添加的方式，都在本发明的保护范围内。而且只要能够达到提高河蟹免疫力和生长速度的目的，在本领域技术人员的认知范围内，上述四种物质的含量也可以在实际情况允许的范围内进行调整。
本发明涉及到的摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基可以在市场购得或者自行制备，制备可以按照如下方法：常用虫草培养基原料按照比例混合、灭菌、分装，将北冬虫夏草菌进行常规采集、分离、纯化、扩繁，然后接种在所述培养基上，在18-20℃、避光、湿度为60-65％的条件下，培养10-25d左右，待长出菌丝后，将温度升高到21-24℃，湿度保持在85％以上，每天光照不少于10h，通风培养2-8d，当菌蕾生成后，在温度为21-24℃、湿度为85-90％的条件下，增加光照，使菌蕾生长为子实体；子实体长度约2cm时，适当增加通风，再培养15-20d；当虫草子座生长到长度为8cm左右、子实体表面有黄色粉末物质出现时，此子实体成熟可采收；采收子实体后，得到摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基。
所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基在本发明提供的河蟹饲料中的质量百分含量可以为0.1-2％。当然，只要在本领域技术人员认知范围内，所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基在本发明提供的河蟹饲料中的百分含量可以在实际情况允许的范围内进行调整。
作为优选，所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基在本发明提供的河蟹饲料中的质量百分含量为0.5％。
此外，本发明还提供了所述河蟹饲料的生产工艺：原料包含鱼粉、菜粕、玉米、豆粕、次粉、豆油、小虾米、乌贼膏、磷酸二氢钙、蟹用矿物质、蟹用维生素、粘合剂、虫草素、虫草酸、腺苷和超氧化物歧化酶，将所述原料粉碎、过60目筛后，按比例混合，使虫草素的含量为0.7-14.0mg/kg，虫草酸的含量为131.0-2620.0mg/kg，腺苷的含量为0.1-2.0mg/kg，超氧化物歧化酶290.0-5800.0IU/kg；混合后的所述原料经80℃-90℃熟化20-30min，制粒，得到所述河蟹饲料。当然，本发明提供的饲料生产工艺所用原料还可以包含其他组分，只要在本领域技术人员认知范围内可以作为饲料组分的物质，都可以被用于本发明提供的所述饲料生产工艺。
作为优选，以干物质的质量百分比计，原料可以包含鱼粉19-22％、菜粕26-28％、玉米8-11％、豆粕8-11％、次粉9-10％、豆油2.5-3％、小虾米3-4％、乌贼膏6-8％、磷酸二氢钙1.5％、蟹用矿物质3.5％、蟹用维生素1％、粘合剂0.5-1％。
本发明在河蟹基础饲料中，添加了虫草素、虫草酸、腺苷和超氧化物歧化酶，或者直接添加摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基，所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基含有上述四种物质，使得在本发明提供的河蟹饲料中，所述虫草素的含量为0.7-14.0mg/kg，所述虫草酸的含量为131.0-2620.0mg/kg，所述腺苷的含量为0.1-2.0mg/kg，所述超氧化物歧化酶290.0-5800.0IU/kg。用本发明提供的河蟹饲料投喂河蟹，在水族箱中的养殖试验发现，所述河蟹饲料使河蟹肝胰腺中超氧化物歧化酶的含量提高了26.8-90.2％，溶菌酶的含量提高了13.9-112.0％，对河蟹的免疫力起到了显著地增强作用；此外，使河蟹的成活率提高了7.3-22.6％，增重率增加了6.9-32.9％，肥满度增加了5.6-14.1％，饲料系数下降了8.6-18.7％，对河蟹的生长具有显著地促进作用。在池塘养殖试验中，本发明提供的河蟹饲料还使河蟹的亩产量增加了23.6％，具有良好的工业开发应用前景；此外，对所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基进行回收再利用，减少了浪费和环境污染。本发明提供的河蟹饲料的生产工艺，具有成本低廉、操作简便的特点。
具体实施方式
本发明公开了一种河蟹饲料及其生产工艺，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
河蟹基础饲料包括鱼粉、玉米、豆粕、菜粕、乌贼膏、小虾米、磷酸二氢钙、蟹用维生素、蟹用矿物质等，主要为河蟹提供基本生存所需的营养，鱼粉、小虾米、乌贼膏、鱼油还因为有着特殊的腥味，有着很好的诱食作用；乌贼膏富含的固醇类蜕壳刺激素能够有效促进甲壳类动物蜕壳；磷酸二氢钙、蟹用矿物质和蟹用维生素提供生理机能所必需的营养物质，以促进河蟹脱壳以后再长壳。
摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基是人工栽培北冬虫夏草过程中的副产品，可自行制备，也可由市场购得。所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基的制备方法见发明内容，本发明涉及到的摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基，由南京康能生物工程有限公司提供。经江苏省微生物研究所有限责任公司对送检样品的检测，所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基中，虫草素的含量为0.7-1.2mg/g，虫草酸的含量为131.0-145.0mg/g，腺苷的含量为1.0-2.0mg/g，超氧化物歧化酶290-310IU/g。
本发明在所述河蟹基础饲料中，添加了虫草素、虫草酸、腺苷和超氧化物歧化酶四种物质，还可以通过添加含有上述四种物质的所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基，制得本发明提供的河蟹饲料。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1制备本发明提供的河蟹饲料
摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基是人工栽培北冬虫夏草过程中的副产品，由南京康能生物工程有限公司提供。将所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基预粉碎成2mm大小的颗粒，进行低温真空干燥，再经高速气流进行超微粉碎，使得上述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基的细度为120目，保存备用。
称取鱼粉220g、菜粕280g、玉米89g、豆粕105g、次粉100g、豆油30g、小虾米35g、乌贼膏70g、摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基1g、磷酸二氢钙15g、蟹用矿物质35g、蟹用维生素10g、粘合剂α-淀粉10g。饲料总重为1000g。
其中，35g蟹用矿物质中各组分的含量分别为：磷酸二氢钠1.4g、磷酸二氢钾2.4g、碳酸钙1.4g、氯化钾0.32g、硫酸镁1.28g、氯化铝0.14g、硫酸锌0.0628g、硫酸锰0.0172g、碘化钾0.0064g、氯化铜0.0056g、氯化钴0.022g、乳酸钙2.06g、柠檬酸铁0.0076g，其余为稀释剂，稀释剂为膨润土。
10g蟹用维生素中各组分的含量分别为：VE 0.2g、VC 0.3g、VA 0.07g、VD3 0.008g、VB1 0.007g、VB2 0.014g、VB3 0.028g、VB5 0.002g、VB6 0.007g、VB7 0.005g、VB11 0.002g、VH 0.003g、烟酸0.03g、叶酸0.005g、泛酸钙0.025g、氯化胆碱0.05g、肌醇0.07g、生物素0.005g，其余为稀释剂，稀释剂为膨润土。
将上述原料粉碎、干燥、过60目筛；混合后，用常压蒸汽使混合料在80℃-90℃条件下熟化20-30min；再将熟化料压制成颗粒，制得本发明提供的河蟹饲料。
实施例2制备本发明提供的河蟹饲料
制备摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基的方法：称取葡萄糖2g、蛋白胨2g、硫酸镁0.2g、磷酸二氢钾0.1g、柠檬酸三氨0.2g、维生素B 10.02g，在40mL纯净水中充分溶解，放入栽培瓶中；称取90g小麦、4g蚕虫粉放入上述栽培瓶中，搅拌均匀；选用耐高温高压的聚丙烯薄膜和橡皮筋封住栽培瓶口；将上述栽培平放入高压灭菌锅，在121℃、1.05MPa条件下，灭菌3-4h，得到北冬虫夏草子实体的培养基；在无菌条件下，将北冬虫夏草菌种接种在培养基上；将接种后的北冬虫夏草栽培瓶密封，移入经消毒处理的培养室内，将温度保持在20℃、避光、湿度为60-65％的条件下，培养10d左右，待长出菌丝后，将温度升高到22℃，继续培养，待北冬虫夏草子实体产生后升温至23℃，湿度保持在85％以上，每天光照不少于10h，通风培养，当菌蕾生成后，在温度为23℃、湿度为85-90％的条件下，增加光照，使菌蕾生长为子实体；子实体长度约2cm时，适当增加通风，再培养15d左右；当虫草子座生长到长度为8cm左右、子实体表面有黄色粉末物质出现时，此子实体成熟可采收；采收子实体后，得到摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基。残余培养基保存备用。
将所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基预粉碎成3mm大小的颗粒，进行低温真空干燥，再经高速气流进行超微粉碎，使得上述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基的细度为130目，保存备用。
称取鱼粉210g、菜粕275g、玉米105g、豆粕110g、次粉95g、豆油25g、小虾米30g、乌贼膏75g、摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基5g、磷酸二氢钙15g、蟹用矿物质35g、蟹用维生素10g、粘合剂小麦面筋10g。饲料总重为1000g。其中，蟹用矿物质、蟹用维生素中各组分的含量同实施例1，稀释剂为沸石粉。
饲料生产工艺同实施例1。
实施例3制备本发明提供的河蟹饲料
摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基是人工栽培北冬虫夏草过程中的副产品，由南京康能生物工程有限公司提供。将所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基预粉碎成4mm大小的颗粒，进行低温真空干燥，再经高速气流进行超微粉碎，使得上述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基的细度为140目，保存备用。
称取鱼粉220g、菜粕280g、玉米110g、豆粕85g、次粉90g、豆油30g、小虾米40g、乌贼膏65g、摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基10g、磷酸二氢钙15g、蟹用矿物质35g、蟹用维生素10g、粘合剂溶胀胶质面筋10g。饲料总重为1000g。其中，蟹用矿物质、蟹用维生素中各组分的含量同实施例1，稀释剂为麸皮。
饲料生产工艺同实施例1。
实施例4制备本发明提供的河蟹饲料
制备摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基的方法，同实施例2。将所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基预粉碎成5mm大小的颗粒，进行低温真空干燥，再经高速气流进行超微粉碎，使得上述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基的细度为150目，保存备用。
称取鱼粉190g、菜粕260g、玉米110g、豆粕110g、次粉100g、豆油30g、小虾米40g、乌贼膏80g、摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基20g、磷酸二氢钙15g、蟹用矿物质35g、蟹用维生素10g、粘合剂多聚脲甲醛10g。饲料总重为1000g。其中，蟹用矿物质、蟹用维生素中各组分的含量同实施例1，稀释剂为沸石粉。
饲料生产工艺同实施例1。
实施例5用本发明提供的河蟹饲料投喂河蟹，在水族箱中进行养殖试验
试验分组：试验组，用实施例1-4制备的饲料投喂河蟹；对照组，用对比实施例1制备的饲料投喂河蟹。
对比实施例1：制备本发明提供的河蟹饲料，饲料总重以试验中河蟹所需投放量为准，以饲料总重为1000g为例，称取鱼粉220g、菜粕280g、玉米100g、豆粕105g、次粉110g、豆油25g、小虾米30g、乌贼膏60g、磷酸二氢钙15g、蟹用矿物质35g、蟹用维生素10g、粘合剂褐藻胶10g。其中，蟹用矿物质、蟹用维生素中各组分的含量同实施例1，稀释剂为膨润土。饲料生产工艺同实施例1。
试验用蟹及饲养管理：将购于蟹种养殖基地的河蟹蟹种于3％的食盐水浸洗5min后放入50cm×60cm×100cm的玻璃钢水族箱中。暂养一星期后，选择健康，大小为4.0±1.0g左右的河蟹，随机分为5组，每组6个平行，每箱15只蟹，随机分配到30个50cm×60cm×100cm的方形玻璃钢水族箱中。每个水族箱中设置孔径为5cm，孔深为20cm左右的隐蔽物及瓦片，以曝气自来水为水源，养殖水体经过沉淀，过滤，除去残余饲料和粪便回流到蓄水池，经增氧后由水泵抽回到各养殖箱内，每天补充总水量10％-15％的曝气自来水，流速为5L/min。养殖实验时间为75d。试验期间水温为26±1℃，DO≥7.0mg/L，间歇式充氧，pH值为7.5±0.2，NH4 +-N≤0.2mg/L，NO2 -N≤0.05mg/L，H2S≤0.05mg/L。投饲量保持在3％左右，每天早8:00，晚18:00投喂两次，早上投料约三分之一，晚上投料约三分之二。实验期间，通过检查投喂3h后箱底剩余的饲料量来确定河蟹的食欲，一次来调整逐渐增多的饲料投喂量，用此方法使过剩投喂最小化，接近于河蟹饱食量。
样品的收集：生长实验结束后，从各组随机取河蟹的部分新鲜肝胰腺，称重，加入10倍体积0.2mol/L，pH值为7.4的磷酸盐缓冲液，于玻璃匀浆器中冰浴匀浆，以10000r/min冷冻离心20min，取上清液，即为肝胰腺粗酶液。
成活率的计算：成活率(％)＝养殖试验后成活河蟹的只数/养殖试验前投放蟹苗的只数×100。
相对增重率的计算：相对增重率(％)＝(W2-W1)/W1×100式中：F-摄取饲料重量；W1-试验开始蟹苗总重；W2-试验结束后成活河蟹总重。
肥满度的计算：肥满度＝养殖试验后河蟹的平均体重(g)/养殖试验后河蟹的平均体长(cm)。
饲料系数的计算：饲料系数＝F/(W2-W1)式中：F-摄取饲料总重；W1-试验开始蟹苗总重；W2-试验结束后成活河蟹总重。
溶菌酶活力测定：按Hultmark等的改进方法进行测定，将经二次活化的溶壁微球菌接种于液体培养基内37℃恒温摇床培养48h，取出后离心，收集菌体。用0.1mol/L，pH值为6.4的磷酸盐缓冲液配成一定浓度的作用底物，D570nm＝0.3。取3mL该作用底物和50μL待测血清或肝胰腺粗酶液于试管中混匀，测其A0值。然后将试管移入37℃水浴中保温30min，取出后立即置于冰浴中10min以终止反应，测其A值。溶菌酶活力U按下式计算：U＝(A0-A)/A0。式中，A0为反应前的光吸收值，A为反应后光吸收值。
超氧化物歧化酶活性测定：参照南京建成生物研究所生产的试剂盒说明书进行。
水族箱中养殖试验结果：实施例1-4与对比实施例1相比，河蟹的非特异性免疫力，成活率、增重率、肥满度等指标显著提高，饲料系数明显下降。具体试验结果见表1。
表1养殖试验相关指标的测定
同行标有不同大写字母者表示组间差异极其显著(P＜0.01)；同行标有不同小写字母者表示组间差异显著(P＜0.05)；同行标有相同小写字母者表示组间差异不显著(P＞0.05)。
根据上表数据计算发现，本发明的保健饲料可使河蟹肝胰腺中的超氧化物歧化酶的含量提高26.81-90.2％，溶菌酶含量提高13.92-112.07％，成活率提高7.29-23.13％，河蟹增重率增加6.92-32.89％，肥满度增加5.56-14.13％，饲料系数下降8.61-19.62％。综合各项指标，实施例2中，本发明提供的河蟹饲料中，所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基的含量为0.5％时，养殖效果最好。
实施例6对实施例1-4所述残余培养基中活性成分及其含量的测定
江苏省微生物研究所有限责任公司对100g送检样品——摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基中活性成分进行检测，结果见表2：
表2摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基中活性成分含量的测定
  实施例   实施例1   实施例2   实施例3   实施例4
  虫草素mg/g   0.7   0.9   1.2   0.7
  虫草酸mg/g   131.0   135.0   132.0   145.0
  腺苷mg/g   1.0   1.9   1.1   2.0
  超氧化物歧化酶IU/g   290   306   303   310
经江苏省微生物研究所有限责任公司对送检样品的检测，所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基中，虫草素的含量为0.7-1.2mg/g，虫草酸的含量为131.0-145.0mg/g，腺苷的含量为1.0-2.0mg/g，超氧化物歧化酶290-310IU/g。
实施例7制备本发明提供的河蟹饲料
称取鱼粉200g、菜粕260g、玉米110g、豆粕110g、次粉100g、豆油30g、小虾米40g、乌贼膏80g、虫草素0.7mg、虫草酸131.0mg、腺苷0.1mg、超氧化物歧化酶290IU、磷酸二氢钙15g、蟹用矿物质35g、蟹用维生素10g、其余为粘合剂聚丙烯酸钠，饲料总重为1000g。其中，蟹用矿物质、蟹用维生素中各组分的含量同实施例1，稀释剂为麸皮。
饲料生产工艺同实施例1。
实施例8制备本发明提供的河蟹饲料
称取鱼粉200g、菜粕260g、玉米110g、豆粕110g、次粉100g、豆油30g、小虾米40g、乌贼膏80g、虫草素3.5mg、虫草酸655.0mg、腺苷0.5mg、超氧化物歧化酶的酶活力为1450IU、磷酸二氢钙15g、蟹用矿物质35g、蟹用维生素10g、其余为粘合剂聚丙烯酸钠，饲料总重为1000g。其中，蟹用矿物质、蟹用维生素中各组分的含量同实施例1，稀释剂为麸皮。
饲料生产工艺同实施例1。
实施例9制备本发明提供的河蟹饲料
称取鱼粉200g、菜粕260g、玉米110g、豆粕110g、次粉100g、豆油30g、小虾米40g、乌贼膏80g、虫草素14.0mg、虫草酸2620.0mg、腺苷2.0mg、超氧化物歧化酶的酶活力为5800IU、磷酸二氢钙15g、蟹用矿物质35g、蟹用维生素10g、其余为粘合剂聚丙烯酸钠，饲料总重为1000g。其中，蟹用矿物质、蟹用维生素中各组分的含量同实施例1，稀释剂为麸皮。
饲料生产工艺同实施例1。
实施例10用本发明提供的河蟹饲料投喂河蟹，在水族箱中进行养殖试验
投喂河蟹的饲料：空白对照组，实施例5中的对比实施例1；培养基对照组，实施例2；活性成分试验组，实施例7至9。试验用蟹及饲养管理，样品收集，几种养殖评价指标的计算方法、酶活力的测定方法，均同实施例5。试验结果见表3：
表3养殖试验相关指标的测定
Figure BSA00000302471200131
同行标有不同大写字母者表示组间差异极其显著(P＜0.01)；同行标有不同小写字母者表示组间差异显著(P＜0.05)；同行标有相同小写字母者表示组间差异不显著(P＞0.05)。
试验结果表明，在饲料中添加所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基中的活性成分——虫草素、虫草酸、腺苷及超氧化物歧化酶，同样能够达到与实施例2相近甚至更优的效果。但是由于从北冬虫夏草中提取上述几种活性成分的成本较高，不利于工业生产，而本发明中涉及到的摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基，由于在栽培北冬虫夏草的过程中作为废弃料被丢弃，成本低廉，因此具有极大的开发利用价值。
实施例11用本发明提供的河蟹饲料投喂河蟹，在池塘中进行养殖试验
试验分组：试验组用实施例2制备的本发明所述河蟹饲料投喂河蟹；对照组用本实施例中的对比实施例2制备的饲料投喂河蟹。
对比实施例2：制备本发明提供的河蟹饲料，饲料总重以试验中河蟹所需投放量为准，以饲料总重为1000g为例，称取鱼粉220g、菜粕280g、玉米100g、豆粕115g、次粉100g、豆油25g、小虾米30g、乌贼膏60g、磷酸二氢钙15g、蟹用矿物质35g、蟹用维生素10g、粘合剂丙烯酸钠10g。其中，蟹用矿物质、蟹用维生素中各组分的含量同实施例1，稀释剂为沸石粉。饲料生产工艺同实施例1。
试验用蟹及饲养管理：将购于蟹种养殖基地、大小为4.0±1.0g左右的健康河蟹蟹种于3％的食盐水浸洗5min，随机分为3组，分别放养到预消毒、相同条件下的池塘中，养殖密度为1150只/亩。池塘中养殖试验的时间为235d。养殖管理方法、成活率和相对增重率的计算，同实施例5。试验结果见表4。
表4池塘养殖试验相关指标的测定
数据显示，本发明提供的河蟹饲料可使试验组河蟹的规格比对照组增加了4.8％；产量增加了23.6％，差异显著，P＜0.05；成活率提高了15.8％，经济效益增加了35.2％。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种河蟹饲料，包含鱼粉、菜粕、玉米、豆粕、次粉、豆油、小虾米、乌贼膏、磷酸二氢钙、蟹用矿物质、蟹用维生素和粘合剂，其特征在于，所述饲料还包含虫草素、虫草酸、腺苷和超氧化物歧化酶；在所述河蟹饲料中，所述虫草素的含量为0.7-14.0mg/kg，所述虫草酸的含量为131.0-2620.0mg/kg，所述腺苷的含量为0.1-2.0mg/kg，所述超氧化物歧化酶290.0-5800.0IU/kg。
2.如权利要求1所述的饲料，其特征在于，所述饲料包含鱼粉19-22％、菜粕26-28％、玉米8-11％、豆粕8-11％、次粉9-10％、豆油2.5-3％、小虾米3-4％、乌贼膏6-8％、磷酸二氢钙1.5％、蟹用矿物质3.5％、蟹用维生素1％、粘合剂0.5-1％。
3.如权利要求1或2所述的饲料，其特征在于，按照干物质质量百分比计，所述蟹用矿物质中各组分的含量分别为，磷酸二氢钠3.5％、磷酸二氢钾6.0％、碳酸钙3.5％、氯化钾0.8％、硫酸镁3.2％、氯化铝0.35％、硫酸锌0.157％、硫酸锰0.043％、碘化钾0.016％、氯化铜0.014％、氯化钴0.055％、乳酸钙5.15％、柠檬酸铁0.019％，其余为稀释剂。
4.如权利要求1或2所述的饲料，其特征在于，按照干物质质量百分比计，所述蟹用维生素中各组分的含量分别为，VE 2％、VC 3.0％、VA 0.7％、VD3 0.08％、VB1 0.07％、VB2 0.14％、VB3 0.28％、VB5 0.02％、VB6 0.07％、VB7 0.05％、VB11 0.02％、VH0 .03％、烟酸0.3％、叶酸0.05％、泛酸钙0.25％、氯化胆碱0.5％、肌醇0.7％、生物素0.05％，其余为稀释剂。
5.如权利要求1或2所述的饲料，其特征在于，所述粘合剂包括α-淀粉、小麦面筋、褐藻胶、丙烯酸钠、聚乙烯醇、聚丙烯酸钠、多聚脲甲醛、溶胀胶质面筋。
6.如权利要求3或4所述的饲料，其特征在于，所述稀释剂包括膨润土、沸石粉、麸皮。
7.如权利要求1所述的饲料，其特征在于，所述虫草素、虫草酸、腺苷和超氧化物歧化酶由摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基提供。
8.如权利要求7所述的饲料，其特征在于，所述摘除北冬虫夏草子实体后的残余培养基在所述饲料中的质量百分含量为0.1-2％。
9.一种河蟹饲料的生产工艺，其特征在于，原料包含鱼粉、菜粕、玉米、豆粕、次粉、豆油、小虾米、乌贼膏、磷酸二氢钙、蟹用矿物质、蟹用维生素、粘合剂、虫草素、虫草酸、腺苷和超氧化物歧化酶，将所述原料粉碎、过60目筛后，按比例混合，使所述虫草素的含量为0.7-14.0mg/kg，所述虫草酸的含量为131.0-2620.0mg/kg，所述腺苷的含量为0.1-2.0mg/kg，所述超氧化物歧化酶290.0-5800.0IU/kg；混合后的所述原料经80℃-90℃熟化20-30min，制粒，得到所述河蟹饲料。
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