CN101935293A

CN101935293A - 一种制备精氨酸酮洛芬的方法

Info

Publication number: CN101935293A
Application number: CN2010102753182A
Authority: CN
Inventors: 侯飞; 李保琴; 薛世静; 汪洪湖
Original assignee: Anhui BBCA Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Anhui BBCA Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2010-09-03
Filing date: 2010-09-03
Publication date: 2011-01-05
Anticipated expiration: 2030-09-03
Also published as: CN101935293B

Abstract

本发明提供了一种制备精氨酸酮洛芬的方法，包括如下步骤：1)无菌条件下，将酮洛芬溶解于乙醇溶液中，搅拌下，升温至50～70℃，然后加入精氨酸粉末，反应至溶液澄清；2)然后经无菌过滤、降温结晶、过滤，最后真空干燥。本发明制备方法的优点在于，本发明方法中精氨酸粉末无需溶解，直接加入到酮洛芬的乙醇溶液中即可，反应过程短；并且，酮洛芬与精氨酸为一步成盐反应，操作简单，反应温度不需太高，且收率较高，达到92％以上，适合于工业化生产；本发明采用溶媒结晶法，该方法能除去母液中含有的大量杂质，因此与冻干结晶产品相比纯度更高、产品稳定性好。

Description

一种制备精氨酸酮洛芬的方法

技术领域

本发明涉及药物化学领域，具体的说，涉及一种制备精氨酸酮洛芬的方法。

背景技术

精氨酸酮洛芬为酮洛芬和精氨酸的复盐，也称为酮洛芬精氨酸盐，本品为一种酮洛芬的新型药物组合，具有强效的抗炎、镇痛作用。精氨酸酮洛芬不仅保持了酮洛芬的原有药效，而且改变了其不溶于水的性质，使其具有良好的水溶性，使这一强效的抗炎、镇痛药物可制成粉针剂，不仅减少了用量，提高了速效，而且更降低了酮洛芬对胃肠道的刺激性，扩大了酮洛芬在临床上的使用范围。

目前，国内精氨酸酮洛芬的生产主要采用冻干结晶方法制备精氨酸酮洛芬，例如，中国专利公开号CN1376670，公开日2002-10-30，公开了一种精氨酸酮洛芬的制备方法，其为在反应瓶中依次加入酮洛芬、L-精氨酸和蒸馏水，搅拌反应至澄清液，自-40℃起分段升温真空冷冻干燥，得到白色固体。但是，上述方法的缺点在于：

1、采用的反应温度过低，对工业上生产设备和生产环境都带来了挑战，一般设备无法经受住-40℃的低温，这无疑增加了生产成本；

2、反应物需要在-40℃的温度下事先预冻8小时，然后自-40℃起分段升温，一直升温至30℃，升温共需要30小时，反应所需时间过长，进一步增加了生产成本，降低了生产效率；

3.采用冻干结晶法得到的产品，产品杂质相对较高，且产品多孔、蓬松、性质不稳定。

为了解决上述缺点，本发明提供了一种采用溶媒结晶法制备精氨酸酮洛芬的方法，并将其制成粉针剂。

发明内容

本发明的目的在于提供一种制备精氨酸酮洛芬的方法，该方法工艺简单、生产周期短、成本低，适合于工业化生产。

为了实现本发明的目的，本发明的制备精氨酸酮洛芬的方法，包括如下步骤：

1)无菌条件下，将酮洛芬溶解于乙醇溶液中，搅拌下，升温至50～70℃，然后加入精氨酸粉末反应至溶液澄清；

2)然后经无菌过滤、降温结晶、过滤，最后真空干燥。

其中，步骤1)中酮洛芬与乙醇溶液的质量体积比(g/mL)为1∶3～6；所述乙醇溶液中乙醇的体积分数为95％～100％。

精氨酸与酮洛芬的摩尔比为1∶1.0～2.0，优选为1∶1.0～1.05。

步骤2)中所述降温结晶为：首先以每小时5～10℃的速度降温至25～35℃后，保温搅拌1～3小时；然后再以每小时5～10℃的速度降温至10～15℃。优选的是，首先降温至25～30℃后，保温搅拌1～3小时；然后再次降温。

所述真空干燥的真空度为0.5～1.0kgf/cm²，干燥温度为40～70℃，干燥时间为3～6小时。

本发明所述精氨酸为D-精氨酸、L-精氨酸或DL-精氨酸；所述酮洛芬为左旋酮洛芬、右旋酮洛芬或消旋酮洛芬。

本发明制备方法还包括步骤3)将制备得到的精氨酸酮洛芬按规格进行无菌分装，无菌分装后的产品即为注射用精氨酸酮洛芬粉针剂。

综上所述，本发明的精氨酸酮洛芬的制备方法，其是将酮洛芬溶于乙醇中，然后在常压下与精氨酸粉末进行反应，反应温度为50～70℃，反应时间约为30～60分钟；反应完成后，通过溶媒结晶法降温结晶。

本发明的制备精氨酸酮洛芬粉针剂的方法具有以下优点：

1、本发明中精氨酸粉末无需溶解，直接加入到酮洛芬的乙醇溶液中即可，操作简便，反应过程短；

2、本发明中酮洛芬与精氨酸为一步成盐反应，操作简单，反应温度不需太高；收率较高，达到92％以上，适合于工业化生产；

3、本发明中采用溶媒结晶法使精氨酸酮洛芬结晶，该方法能除去母液中含有的大量杂质，因此与冻干结晶产品相比纯度更高、性质更加稳定。

附图说明

图1为本发明的制备精氨酸酮洛芬粉针剂的工艺流程图。

具体实施方式

以下通过具体实施例来进一步说明本发明，但不用来限制本发明的范围(注：以下实施例均为按图1所示的工艺流程制备)。

实施例1

在无菌条件下，将50.8g酮洛芬(0.2mol)溶于203.2ml 95％乙醇溶液中，在搅拌条件下，升温至50℃，然后加入34.8g精氨酸(0.2mol)粉末反应至溶液澄清为止，反应时间为40分钟；然后经无菌过滤后降温结晶，首先以每小时5℃的速度降温至30℃，保温搅拌3小时，然后再以每小时5℃的速度降温至15℃，抽滤；然后在温度50℃、真空度0.7kgf/cm²的条件下真空干燥5小时，得无菌精氨酸酮洛芬80.5g，总收率为93.8％。

最后将制得的无菌精氨酸酮洛芬按规格进行无菌分装，即得注射用精氨酸酮洛芬粉针剂。

实施例2

在无菌条件下，将50.8g酮洛芬(0.2mol)溶于304.8ml 99％乙醇溶液中，在搅拌条件下，升温至65℃，然后加入33.5g精氨酸(0.192mol)粉末反应至溶液澄清为止，反应时间为35分钟；然后经无菌过滤后降温结晶，首先以每小时10℃的速度降温至25℃，保温搅拌1小时，然后再以每小时10℃的速度降温至10℃，抽滤；然后在温度50℃、真空度0.8kgf/cm²的条件下真空干燥6小时，得无菌精氨酸酮洛芬81.8g，总收率约为97.0％。

实施例3

在无菌条件下，将99.1g酮洛芬(0.39mol)溶于297.2ml无水乙醇中，在搅拌条件下，升温至70℃，然后加入34.0g精氨酸(0.195mol)粉末反应至溶液澄清为止，反应时间为36分钟；然后经无菌过滤后降温结晶，首先以每小时5℃的速度降温至35℃，保温搅拌2.5小时，然后再次以每小时5℃的速度降温至12℃，抽滤；然后在温度50℃、真空度0.9kgf/cm²的条件下真空干燥3小时，得无菌精氨酸酮洛芬78.5g，总收率约为92.6％。

下面，通过对本发明的精氨酸酮洛芬的家兔和豚鼠耳缘静脉刺激性实验、股四头肌刺激实验及过敏性实验，来进一步说明本发明。

试验例1家兔耳缘静脉刺激性实验

1实验方法

1.1动物的分组

取体重2.0～3.0kg家兔8只，雌雄兼用，适应性饲养5天后，随机均分为两组，即对照组和药物组。

1.2给药的剂量

以成人临床最大日用量0.4g/d计，按照体表面积折算，则家兔用量为0.18g/kg。

1.3药液的配制

取0.4g实施例2的注射用精氨酸酮洛芬粉针剂用4mL 0.9％氯化钠注射液溶解，将溶液立即从瓶中抽尽，再用0.9％氯化钠注射液稀释到250mL，按照体表面积折算，则家兔的给药容积为11.66mL/kg。

1.4给药方法

试验前观察家兔耳缘血管正常情况。药物组从左耳缘静脉血管匀速注射药液11.66mL/kg，约8分钟注射完毕；对照组注射等量0.9％氯化钠注射液，每天注射给药1次，连续给药3天。

1.5动物的处理方法

于末次给药后96小时，各组家兔又随机均分为A、B两组，各组分别处死A组中2只家兔，剪下耳片，用10％中性甲醛溶液固定，做病理组织学检查。B组家兔继续正常饲养14天，留作恢复期观察，然后再处死，剪下耳片，用10％中性甲醛溶液固定，做病理组织学检查。

1.6观察指标

肉眼观察：在给药前、用药后、停药后96小时及恢复期对家兔血管注射部位进行肉眼观察。

2实验结果

2.1肉眼观察：用药后，各组家兔耳缘血管除有注射针眼外，血管其他外部没有红肿、充血等现象，停药后观察注射局部也无异常反应，结果如表1所示。

表1血管刺激性试验肉眼观察结果

2.2镜下观察：各组家兔耳缘血管不产生炎症、也不形成瘀血和血管损伤；血管周围组织无明显炎性细胞浸润，也无充血和局部组织坏死，说明注射用精氨酸酮洛芬对家兔耳缘静脉血管无病理性刺激损伤，用药安全。结果如表2～3所示。

表2停药96小时血管刺激性试验病理组织学检查结果

由表2可以看出：对照组和药物组家兔耳缘静脉血管无管壁损伤，无血栓形成，血管周围无局部组织变性坏死、充血水肿及炎细胞浸润，仅在少数血管周围有灶性或散在炎细胞浸润。

表3恢复期血管刺激性试验病理组织学检查结果

由表3可以看出，对照组和药物组家兔耳缘静脉血管无管壁损伤，无血栓形成，血管周围无局部组织变性坏死、充血水肿及炎细胞浸润，仅在少数血管周围有灶性或散在炎细胞浸润。

3结论

通过上述对家兔的刺激试验可以看出，本发明的精氨酸酮洛芬对家兔的血管、皮下组织无明显刺激反应，说明注射用精氨酸酮洛芬临床应用安全。

试验例2家兔股四头肌刺激实验

1实验方法

1.1药液的配制

取0.4g实施例2的注射用精氨酸酮洛芬粉针剂，用4mL 0.9％氯化钠注射液溶解后备用。

1.2给药方法

取体重2.0～3.0kg家兔4只，雌雄兼用，适应性饲养5天。试验前先将家兔左右两侧股四头肌毛剪去约4×3cm²，观察家兔股四头肌外部正常情况。给药：于各家兔左股四头肌内注射上述药液1.0mL/只；右股四头肌内注射1.0mL/只0.9％氯化钠注射液。每天注射给药1次，连续给药3天。

1.3动物的处理方法

于末次给药后96小时，将家兔随机均分为A、B两组，处死A组中2只家兔，剪下注射部位肌肉，用10％中性甲醛溶液固定，做病理学检查。B组家兔继续正常饲养14天，留作恢复期观察，然后再处死，剪下注射部位肌肉，用10％中性甲醛溶液固定，做病理学检查。

1.4观察指标

肉眼观察：在给药前、给药后、末次给药后96小时及恢复期对家兔股四头肌注射部位外部进行肉眼观察。按表4所示的肌肉刺激反应分级标准进行评分。

表4肌肉刺激反应分级标准

2实验结果

2.1肉眼观察结果：用药后，各组家兔股四头肌的外部除有注射针眼外，其他外部没有红肿、充血等现象，停药后观察注射局部也无异常反应，注射部位深部肌肉未见充血、水肿、变性、坏死等任何异样反应。结果见表5～6所示。

表5股四头肌刺激性试验肉眼观察结果

表6肌肉刺激性试验肉眼观察结果积分

2.2镜下观察结果如表7～8所示。

表7停药96小时后对肌肉刺激病理学检查结果

由表7可以看出，实施例2的精氨酸酮洛芬对家兔股四头肌不产生炎症、充血、变性、坏死，肌肉组织无明显炎性细胞浸润，也无充血和局部组织坏死，说明本发明的精氨酸酮洛芬对家兔股四头肌无病理性刺激损伤，用药安全。

表8恢复期对肌肉刺激试验病理学检查结果

由表8可以看出，实施例2的精氨酸酮洛芬对家兔股四头肌不产生炎症、充血、变性、坏死，肌肉组织无明显炎性细胞浸润，也无充血和局部组织坏死，说明本发明的精氨酸酮洛芬对家兔股四头肌无病理性刺激损伤，用药安全。

3结论

通过上述对家兔的刺激试验可以看出，本发明的精氨酸酮洛芬对家兔股四头肌无明显刺激反应，说明本发明的精氨酸酮洛芬临床应用安全。

试验例3精氨酸酮洛芬溶血试验

1实验方法

1.1血球悬浮液的制备

取体重2.5kg家兔1只，从心脏取血，放入加有玻璃球珠的洁净干燥小烧杯中，搅拌去除纤维蛋白原，使成脱纤血液，再加氯化钠注射液约10倍量，摇匀，于离心机1500r/min离心15min，倾去上清液，沉淀的红细胞再用氯化钠注射液按上述方法洗涤3次，至上清液不显现红色为止。量取血球，用氯化钠注射液配成2％血球悬浮液备用。

1.2药液的配制

取0.4g实施例1的注射用精氨酸酮洛芬粉针剂先各用4mL 0.9％氯化钠注射液溶解，将溶液立即从瓶中抽尽，再用0.9％氯化钠注射液稀释到250mL备用。

1.3测试方法

取试管7只，进行编号，1～5号管为供试品管，6号管为阴性对照管，7号管为阳性对照管。按表9所示的配比量依次加入2％红细胞混悬液和氯化钠注射液或蒸馏水，混匀后，立即置37℃恒温箱中进行温育，开始每隔15分钟观察1次，1小时后，每隔1小时观察一次，共观察3小时。

表9各试管中的配比量

2实验结果结果如表10所示。

表10实施例1的精氨酸酮洛芬溶血试验结果

由表10可知：1～6号管血球逐渐下沉，3h后血球分层很明显，各管之间无明显差异，而7号管约1min出现澄明的均匀红色溶液，产生溶血现象；各组溶液在显微镜下观察均没有红血球聚集现象。说明本发明的精氨酸酮洛芬对血球没有破坏作用，不引起溶血现象，也不引起聚集反应。

3结论

通过溶血试验可以看出，本发明的精氨酸酮洛芬不产生溶血现象，说明本发明的精氨酸酮洛芬临床应用安全。

综上所述，注射用精氨酸酮洛芬临床用药安全且性质稳定。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims

1.一种制备精氨酸酮洛芬的方法，包括如下步骤：

2)然后经无菌过滤、降温结晶、过滤，最后真空干燥。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中酮洛芬与乙醇溶液的质量体积比(g/mL)为1∶3～6；所述乙醇溶液中乙醇的体积分数为95％～100％。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中精氨酸与酮洛芬的摩尔比为1∶1.0～2.0。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，精氨酸与酮洛芬的摩尔比为1∶1.0～1.05。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中所述降温结晶为：首先以每小时5～10℃的速度降温至25～35℃后，保温搅拌1～3小时；然后再以每小时5～10℃的速度降温至10～15℃。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述降温结晶为首先降温至25～30℃。

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中所述真空干燥的真空度为0.5～1.0kgf/cm²，干燥温度为40～70℃，干燥时间为3～6小时。

8.根据权利要求1-7任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述精氨酸为D-精氨酸、L-精氨酸或DL-精氨酸；所述酮洛芬为左旋酮洛芬、右旋酮洛芬或消旋酮洛芬。

9.根据权利要求1-8任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述制备方法还包括：3)将制备得到的精氨酸酮洛芬进行无菌分装，制得注射用精氨酸酮洛芬粉针剂。