CN101926764B - 多拉菌素微乳透皮剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种多拉菌素微乳透皮剂及其制备方法。该多拉菌素微乳透皮剂是由下列重量百分比的组分组成：多拉菌素0.2-2.0％，油相7-22％，乳化剂10-22％，助乳化剂5-50％，防冻剂1-5％，促渗剂1-10％，余量是水。该多拉菌素微乳透皮剂质量稳定、药效好、成本低、环境污染小、安全性高，刺激性小，应用时操作简单、使用方便，临床应用效果好，且缓释期长，能有效地减少给药次数，可用于治疗，也可用于预防，克服重复给药给畜牧业生产带来的麻烦与成本增加。

Description

多拉菌素微乳透皮剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种多拉菌素微乳透皮剂及其制备方法，属于兽药新剂型领域。

背景技术

多拉菌素(doramectin)为20世纪90年代研制开发出的新一代大环内酯类抗寄生虫药，是以环己羧酸(cyclohexanecarboxylic acid)为前体，通过突变生物合成技术，由阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)突变株发酵而成的一种阿维菌素类抗生素，被认为是目前阿维菌素族中最优秀的抗寄生虫药物之一，为内外兼杀剂，对线虫、节肢动物均有良好的驱杀效果。最早发现它驱杀寄生虫的能力是在驱鼠继代的蛇形毛圆线虫和杀兔痒螨的动物模型中，与其它市售的伊维菌素类产品比较，其抗寄生虫范围更广泛、效果更好，而且预防寄生虫再感染的有效时间更长。

微乳是由水相、油相、乳化剂及助乳化剂在适当比例下自发形成的一种透明或半透明的热力学与动力学稳定的分散体系。微乳作为药物载体潜力很大：呈各项同性的透明液体，热力学稳定，可以过滤，易于制备和保存；可同时增溶不同脂溶性药物，延长不溶性药物的释药时间；药物分散性好，利于吸收，可提高药物的生物利用度；对易水解的药物制成油包水型微乳可起到保护作用。

多拉菌素作为一种优良的兽用抗寄生虫药物，其剂型的研究也取得了一定进展，由于其本身的水溶性差，生产注射剂时常常加有助溶剂等刺激性较强的有机溶剂，因此临床应用时有一定刺激性，Goudie等(Doramectin-a potent novelendectocide，Veterinary Parasitology，1993，49(1)：5-15.)报道以芝麻油和乙基油酸脂作为多拉菌素的溶剂，对局部组织刺激反应很小。也有供外用的多拉菌素透皮剂(Gayrard等，Comparison of pharma-cokinetic profiles of doramectin andivermectin pour-on formul-ations in cattle，Veterinary Parasitology，1999，81：47-55)，但含药量小，使用剂量大，对机体刺激性大，操作麻烦。

发明专利ZL200610010055.6“多拉菌素、塞拉菌素水乳剂及其制备方法”研究出一种多拉菌素、塞拉菌素微乳剂、水乳剂、悬浮剂的制备方法，属农药新剂型领域，其选用的溶剂(如二甲苯、甲苯等)刺激性大，对动物全身的急性和慢性毒性较为明显，不宜在兽药领域应用。微乳用于经皮给药是目前药剂学研究的热点，发明专利ZL200610010055.6其制作微乳剂、水乳剂、悬浮剂多用作喷洒，配方中未综合考虑影响动物皮肤透皮吸收的因素，因此未做药物经皮吸收试验，也未做动物临床治疗试验。

发明内容

本发明所要解决的第一个技术问题是提供一种多拉菌素微乳透皮剂，该多拉菌素微乳透皮剂较同类产品刺激性更小，对动物安全无毒，且质量稳定、药效好、成本低、环境污染小、应用时操作简单、使用方便，临床应用效果好，缓释期长，能有效地减少给药次数，可用于治疗，也可用于预防，克服重复给药给畜牧业生产带来的麻烦与成本增加。

本发明所要解决的第二个技术问题是提供一种多拉菌素微乳透皮剂的制备方法。

本发明所要解决的第三个技术问题是多拉菌素微乳透皮剂在制备抗寄生虫药物中的应用。

为解决上述第一个技术问题，本发明所提供的技术方案是：

本发明提供了一种多拉菌素微乳透皮剂，它是由下列重量百分比的组分组成：多拉菌素0.2-2.0％，油相7-22％，乳化剂10-22％，助乳化剂5-50％，防冻剂1-5％，促渗剂1-10％，余量是水。

所述油相选自乙酸乙酯、丙酮、乙醇、环己烷、正丁醇、丁酸乙酯、乙酸正丁酯、乙酸正戊酯、丙酸丁酯、丁酸丁酯、丙酸乙酯、丁酸乙酯、烟酸乙酯、烟酸甲酯等2-6碳酸与1-4碳醇酯化的酯类和烟酸、油酸、亚油酸、棕榈酸、月桂酸、肉豆蔻酸、十烷酸等6-20碳脂肪酸及不饱和脂肪酸中的一种或几种组合。

所述乳化剂选自蓖麻油聚氧乙烯醚(例如：BY-140)、蓖麻油与环氧乙烷缩合物(例如：EL-40)、苯乙基酚聚氧乙烯醚(例如：601#、602#、603#)、三苯乙基苯酚聚氧丙烯聚氧乙烯嵌段聚合物PEP型(例如：1602#)、特殊苯乙基酚甲醛树脂聚氧乙烯醚(例如：400#)、十二烷基苯磺酸钙(例如：500#)、烷基苯磺酸钙(例如：500#-70C)、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(简称为：AES)、异辛醇聚氧乙烯醚磷酸酯(例如：OEP-98)、异辛醇磷酸酯(例如：RP-98)、异辛醇硫酸酯(例如：KT-98)、烷基酚醚磺基琥珀酸酯钠盐(例如：MS-1)、双鲸醇醚磺基琥珀酸单酯二钠盐(简称为：MES)、烯丙氧基羟丙基磺酸钠(例如：COPS-1)、乙烯基磺酸钠(简称为：SVS)等非离子与阴离子表面活性剂中的一种或几种组合。

所述助乳化剂选自丙二醇、乙二醇、二甘醇、正丁醇中的一种或几种组合。

所述防冻剂选自乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、乙二醇中的一种或几种组合。

所述促渗剂选自二甲基亚砜(简称为：DMSO)、二甲基乙酰胺(简称为：DMAc)、二甲基甲酰胺(简称为：DMF)、癸基甲基亚砜(简称为：DCMS)、α-硝基萘(简称为：α-NP)、1-甲基-α-吡咯酮(简称为：1-NMP)、1，5二甲基-α-吡咯酮(简称为：1，5-NMP)、1-乙基-α-吡咯酮(简称为：1-NEP)、5-羧基-α-吡咯酮(简称为：5-NCP)、1-十二烷基-α-吡咯酮(简称为：1-NDOP)、氮酮(简称为：Azone)中的一种或几种组合。

为解决上述第二个技术问题，本发明还提供了一种多拉菌素微乳透皮剂的制备方法，该方法是将所述多拉菌素、油相、乳化剂、助乳化剂、水按照上述多拉菌素0.2-2.0％，油相7-22％，乳化剂10-22％，助乳化剂5-50％，防冻剂1-5％，促渗剂1-10％，余量是水的比例混合，并搅拌均匀，具体包括如下步骤：

a混合油相成份，直至混合物均匀；

b将多拉菌素溶于上述油相中；

c选择溶于油相的乳化剂，将乳化剂与油相混合，直至混合相完全均匀，搅拌过程中加入适量水；

d将助乳化剂滴入油水混合相中，直至形成透明微乳剂，然后加入适量的防冻剂与促渗剂，最后用蒸馏水补足余量。

本发明体外透皮实验应用改进Franz扩散池进行猪皮透皮试验，结果显示1％多拉菌素微乳透皮剂22hr单位累积渗透量为39.45ug，PBS接受液中的单位渗透速率常数(k)为1.586ug/cm².hr，证明该透皮剂有良好的透皮吸收作用。多拉菌素动物组织的有效抗虫浓度为1ng/g(即1ug/kg)，30kg体重动物平均组织共计需药30ug，给药1ml(10mg)，涂布20cm²，每小时透过的药量≥30ug(1.586ug/cm².hr×20cm²)，而多拉菌素对猪、牛、羊、马、狗等动物的消除半衰期t_1/2β≥3.2d(3.2-14.5d)，药物进入体内的消除量相对透皮速率忽略不计，1小时的透过量即可达到抗虫的药量。因此该制剂皮肤给药能达到有效驱虫的血药浓度，可作为动物驱虫的透皮吸收制剂。另外，按以上标准给药和均匀透过率计，药物完全透过皮肤需14d(10000ug÷30ug/hr÷24hr)以上；显示该制剂有很好的缓释效果，既可用于治疗，也可作预防药物。

为解决上述第三个技术问题，本发明还对多拉菌素微乳透皮剂进行动物临床应用试验，试验选择60头自然感染猪疥螨的病猪，随机分为4组，第1，2，3组分别按每公斤体重用0.02ml、0.05ml、0.08ml剂量的1％多拉菌素透皮剂进行耳根部皮肤涂擦给药，第4组为生理盐水涂擦对照组。试验结果表明，用药后3天，第1组感染的试验猪中大部分症状减轻，痂皮部分脱落，第2，3组症状基本消失，皮肤炎症减轻，痂皮全部脱落，蹭栏现象消失，用药7天后，投药病猪除第1组中仍有个别病猪仍有轻微的瘙痒症状，镜检仍有少量活螨虫及虫卵存在外，第2，3组症状完全消失，皮肤恢复弹性，镜检未检出螨虫及其虫卵；而生理盐水对照组临床症状和镜检结果均未改善，且有加重的趋势。多拉菌素各剂量的治愈率分别为80.0％、100％、100％，因此确认该透皮剂对猪的有效治疗剂量为每公斤体重0.05ml。

本发明制备的1％多拉菌素透皮剂是经过皮肤吸收进入机体达到驱杀动物体内外寄生虫的效果，药物经皮肤较长时间地吸收进入血液，不经过肝脏的“首过效应”和胃肠道的破坏，降低了药物口服剂给药的副作用，并可延长药物的吸收与作用时间，减少给药次数。

本发明的优点为：

1.在兽药新剂型领域首次提供了一种多拉菌素微乳透皮剂。

2.专利ZL200610010055.6提供的多拉菌素微乳剂多用作喷洒，配方中未综合考虑影响动物皮肤透皮吸收的因素，本发明通过对动物局部给药，透过皮肤完全渗透吸收，起到良好的治疗效果。

3.本发明通过加入适量的促渗剂，解决了多拉菌素因为分子量大(899.11)、熔点高(116-119℃)而带来的渗透系数较低的问题，透皮试验结果显示该透皮剂有良好的透皮吸收作用。

4.本发明微乳制剂筛选出对动物无毒、无刺激性的有机溶剂和水为介质，稳定性好、透皮性高、疗效稳定；比常规制剂大大降低了有机溶剂的用量，既降低了生产成本，又减少了环境污染，同时使用方便。

具体实施方式

实施例1

本发明多拉菌素微乳剂的组成为：

多拉菌素    0.1g

丁酸乙酯    1.08ml

油酸        0.42ml

三苯乙基苯酚聚氧丙烯聚氧乙烯嵌段聚合物PEP型1602^#    1.35ml

十二烷基苯磺酸钙500^#    0.45ml

丙二醇    2.7ml

氮酮      0.2ml

甘油      0.2ml

蒸馏水    3.5ml

制备包括以下步骤：

a混合丁酸乙酯、油酸直至完全混匀。

b将1602^#、500^#混合直至完全混匀。

c将多拉菌素溶于(a)的油相中，直至混合相均匀透明。

d将含有多拉菌素的混合相加入(b)得到的混合乳化剂中，加适量蒸馏水，搅拌至均匀，再加入相应量的助乳剂、防冻剂、促渗剂，混合至澄清透明状，最后用蒸馏水补足余量。

实施例2

本发明多拉菌素微乳剂的组成为：

多拉菌素                  0.1g

乙酸正丁酯                0.72ml

月桂酸                    0.28ml

蓖麻油聚氧乙烯醚BY-140    1.32ml

十二烷基苯磺酸钙500^#    0.48ml

丙二醇      2.66ml

二甲基亚砜  0.2ml

乙醇        0.2ml

蒸馏水      4.04ml

实施例3

本发明多拉菌素微乳剂的组成为：

多拉菌素    0.1g

丙酸乙酯    1.02ml

油酸        0.48ml

三苯乙基苯酚聚氧丙烯聚氧乙烯嵌段聚合物PEP型1602^#    1.32ml

烷基酚醚磺基琥珀酸酯钠盐MS-1    0.58ml

乙二醇    2.66ml

氮酮      0.1ml

甘油      0.1ml

蒸馏水    3.64ml

实施例4

本发明多拉菌素微乳剂的组成为：

多拉菌素                  0.1g

乙酸正戊酯                1.125ml

油酸                      0.375ml

苯乙基酚聚氧乙烯醚603^#    1.22ml

脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠    0.58ml

正丁醇                    2.66ml

乙醇                      0.3ml

氮酮                      0.1ml

蒸馏水                    3.54ml

实施例5

本发明多拉菌素微乳剂的组成为：

多拉菌素                  0.15g

乙酸正丁酯                0.72ml

亚油酸                    0.28ml

苯乙基酚聚氧乙烯醚601^#    1.32ml

烯丙氧基羟丙基磺酸钠      0.48ml

乙二醇                    2.16ml

甘油                      0.1ml

1-NEP                     0.1ml

蒸馏水                    4.69ml

实施例6

本发明多拉菌素微乳剂的组成为：

多拉菌素                      0.02g

乙酸乙酯                      0.72ml

烟酸                          0.28ml

蓖麻油与环氧乙烷缩合物EL-40   1.32ml

烷基苯磺酸钙500^#-70C          0.48ml

丙二醇                        2.66ml

二甲基乙酰胺                  0.2ml

甘油                          0.2ml

蒸馏水                        4.12ml

实施例7

本发明多拉菌素微乳剂的组成为：

多拉菌素                      0.02g

丁酸丁酯                      0.52ml

棕榈酸                        0.18ml

三苯乙基苯酚聚氧丙烯聚氧乙烯嵌段聚合物PEP型1602^#    0.92ml

烷基苯磺酸钙500^#-70C        0.16ml

正丁醇                      5.00ml

乙醇                        0.1ml

氮酮                        0.1ml

蒸馏水                      3.0ml

实施例8

本发明多拉菌素微乳剂的组成为：

多拉菌素                    0.2g

乙酸正丁酯                  1.85ml

亚油酸                      0.35ml

苯乙基酚聚氧乙烯醚601^#      0.7ml

烯丙氧基羟丙基磺酸钠COPS-1  0.3ml

丙二醇                      2.5ml

聚乙二醇                    0.1ml

α-硝基萘                   1.0ml

蒸馏水                      3ml

实施例9

本发明多拉菌素微乳剂的组成为：

多拉菌素                    0.2g

烟酸乙酯                    1.85ml

肉豆蔻酸                    0.35ml

苯乙基酚聚氧乙烯醚603^#      0.92ml

乙烯基磺酸钠                0.16ml

正丁醇                      2.3ml

聚乙二醇                    0.5ml

氮酮                        0.1ml

蒸馏水                      3.62ml

实施例10

本发明多拉菌素微乳剂的组成为：

多拉菌素                    0.2g

烟酸甲酯                    1.6ml

肉豆蔻酸                    0.6ml

蓖麻油聚氧乙烯醚BY-140      1.65ml

烷基苯磺酸钙500#-70C        0.55ml

二甘醇                      0.5ml

聚乙二醇                    0.1ml

氮酮                        0.1ml

蒸馏水                      4.7ml

实施例111％多拉菌素微乳透皮剂体外透皮实验

1实验方法

1.1试剂和仪器

多拉菌素透皮剂，为实施例1制备得到，浓度为1.0％。

改进Franz扩散池(中国药科大学提供)、JA3003电子天平(中国上海分析仪器厂)、DF-101B型集热式恒温磁力搅拌器(浙江乐清市乐成电器厂)、恒流泵(上海沪西分析仪器厂)、ZWKY-S-1水浴锅(北京永光明医疗仪器厂)。

1.2体外透皮试验方法

①离体皮肤的制备：从刚宰后的肥猪(约5月龄)耳根后取一定大小(3cm×3cm)的皮肤一块，去毛，去除皮下脂肪，用生理盐水洗净，立即使用。

②体外透皮试验：将离体皮肤固定于扩散室与接收室之间(角质层朝向扩散室)，接收室及其系统内加入30ml接收液(含0.25％苯甲酸钠的PBS液)，开启恒流泵，驱除气泡，使接收液与皮肤充分接触。试验装置各系统温度控制在37±0.5℃，恒流泵流速为2.5ml/min，磁力搅拌器转速为200转/min，待系统稳定半小时后，扩散室内加入多拉菌素透皮剂5ml，试验正式开始；于第1h，2h，4h，6h，8h，10h，12h，20h，22h定时从接受液中取样1ml，再精密加入等量新鲜接受液。

1.3药物测定方法

①色谱条件C18反相柱，柱长150mm，柱内径4.6mm；柱温40℃；流动相为甲醇-水(85∶15)或乙腈-甲醇-水(45∶45∶10)；流速，1.0mL/min；进样体积10uL；波长为246nm。

②溶液的制备精密称定多拉菌素对照品25mg，置50ml容量瓶中，加适量甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液(0.5mg.ml^-1)，将接受液经0.45μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。取不含多拉菌素的阴性对照样品，制成阴性对照品溶液。

③标准曲线的建立精密吸取对照品贮备液，用接受液定容，配制一系列不同浓度的溶液(0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3mg/ml)。精密吸取上述溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录峰面积。以多拉菌素含量峰面积(Y)为纵坐标，进样量(μg)为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程为：Y＝1.90647E+7X+33161.7R²＝0.99973，线性范围0.05-0.3mg/mL：结果表明线性良好，符合测定要求。

1.4数据处理

按下式计算药物的单位累积渗透量(Q)、透皮速率(k)。

$Q=\frac{V{C}_n+\underset{i=1}{\overset{n}{\mathrm{\Σ}}}{V}_i{C}_i}{A},$ K＝Q/t_n

式中Q为第n次取样时的累积渗透量，V为接收池的体积，V_i为第i次取样的体积(1ml)，C_i为第i次取样测得的接受液中药物浓度，C_n为第n个取样点浓度(μg/ml)。A为扩散渗透面积(cm²)，t_n为n次取测样时间。

2结果与分析

结果显示1％多拉菌素微乳透皮剂22hr单位累积渗透量为39.45ug，PBS接受液中的单位渗透速率(k)为1.586ug/cm².hr，证明该透皮剂有良好的透皮吸收作用，并以单位累积渗透量Q为纵坐标，时间t为横坐标，求得动力学线性回归方程Y＝1586.0X+4558.1，r＝0.9970。多拉菌素动物组织的有效抗虫浓度为1ng/g(即1ug/kg)，30kg体重动物平均组织共计需药30ug，给药1ml(10mg)，涂布20cm²，每小时透过的药量≥30ug(1.586ug/cm².hr×20cm²)，而多拉菌素对猪、牛、羊、马、犬等动物的消除半衰期t_1/2β≥3.2d(3.2-14.5d)，药物进入体内的消除量相对透皮速率忽略不计，1小时的透过量即可达到抗虫的药量。因此该制剂皮肤给药能达到有效驱虫的血药浓度，可作为动物驱虫的透皮吸收制剂。另外，按以上标准给药和均匀透过率计，药物完全透过皮肤需14d(10000ug÷30ug/hr÷24hr)以上；显示该制剂有很好的缓释效果，既可用于治疗，也可作预防药物。

实施例121％多拉菌素微乳透皮剂临床应用

1实验方法

1.1药物

多拉菌素透皮剂，为实施例1制备得到，浓度为1.0％。

1.2试验动物

选自长沙某猪场自然感染的2～3月龄小猪，体重15～30kg，临床检查表现瘙痒：病猪靠在各种物体上如饲槽、墙壁、栏杆等不断蹭痒，用力摩擦；在头部、眼窝、颊及耳部、颈部、肩部、背部、躯干两侧和四肢一处或多处出现皮肤炎症；皮屑和被毛脱落、皮肤潮红，浆液性浸润，甚至出血，形成痂皮等特征；慢性皮肤增厚，粗糙变硬，失去弹性，形成皱褶和龟裂诊断为疥螨感染。并刮屑进一步经实验室检查确诊：选择病变部位与健康皮肤的交接处，刮取皮肤组织(用手握刀，使刀刃与皮肤表面垂直，刮至皮肤轻微出血)，置培养皿内以加温法检查。共选择60头病猪供作试验。

1.3病猪分组与治疗药效考察

①试验分组及给药方法试验猪60头，随机分为4组，每组15头，第1，2，3组分别为每公斤体重0.02ml、0.05ml、0.08ml剂量的多拉菌素透皮剂试验组，第4组为生理盐水对照组。给药方法系用注射器按使用剂量吸取药液，直接涂擦于猪耳根皮肤处，药量依面积大小而定，以不流失为准。具体参见表1。

表1试验病猪分组

组别	畜数/头	使用药物	剂量(ml/kg)	给药方法
					1	15	1.0％多拉菌素透皮剂	0.02	涂擦于耳根皮肤处
2	15	1.0％多拉菌素透皮剂	0.05	涂擦于耳根皮肤处
					3	15	1.0％多拉菌素透皮剂	0.08	涂擦于耳根皮肤处
4	15	生理盐水对照组	0.08	涂擦于耳根皮肤处

②检查方法每天检查病猪的临床症状，查看瘙痒和皮肤病变是否恢复；一周后取皮肤组织进行实验室检查，查螨虫是否死亡。

2结果与分析

每天定时观察和记录试验猪的相关临床症状，用药后3天，第1组试验猪大部分症状减轻，痂皮脱落，第2、3组症状基本消失，皮肤炎症减轻，痂皮全部脱落，蹭栏现象消失；用药7天后，第1组中仍有个别试验猪呈现轻微瘙痒症状，镜检仍有极少量活螨虫及虫卵存在，第2，3组症状完全消失，皮肤恢复弹性，镜检未检出螨虫及其虫卵；而生理盐水对照组症状和病变没有任何改善，反有加重之势。具体试验结果见表2。

表2多拉菌素透皮剂对猪疥螨的临床疗效

由表2可见，多拉菌素各剂量的治愈率分别为80.0％、100％、100％，经统计学分析，第1组、第4组显著低于其它各给药组(P＜0.05％)，第2组、第3组之间差异不显著(P＞0.05)，即证明1.0％多拉菌素透皮剂对猪的有效剂量为0.05ml/kg体重。

3小结

在整个试验过程中，给药组未见明显的药物不良反应，饮、食欲正常，排便正常，从疥螨治愈率来看，0.05mL/kg和0.08mL/kg剂量组的疥螨治愈率均为100％，但0.02mL/kg剂量组个别猪驱虫效果不理想，可能与剂量不足有关。

显然，本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无法对所有的实施方式予以穷举。凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。

Claims (2)

1.一种多拉菌素微乳透皮剂，其特征在于，它是由下列组分组成：多拉菌素0.1g，丁酸乙酯1.08ml，油酸0.42ml，三苯乙基苯酚聚氧丙烯聚氧乙烯嵌段聚合物PEP型1602^#1.35ml，十二烷基苯磺酸钙500^#0.45ml，丙二醇2.7ml，甘油0.2ml，氮酮0.2ml，蒸馏水3.5ml。

2.如权利要求1所述的多拉菌素微乳透皮剂的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：

a混合丁酸乙酯、油酸，直至混合均匀；

b将三苯乙基苯酚聚氧丙烯聚氧乙烯嵌段聚合物PEP型1602^#和十二烷基苯磺酸钙500^#混合直至混合均匀；

c将多拉菌素溶于(a)的油相中，直至混合相均匀透明；

d将含有多拉菌素的混合相加入(b)得到的混合乳化剂中，加适量蒸馏水，搅拌至均匀，再加入丙二醇、甘油、氮酮，混合至澄清透明状，最后用蒸馏水补足余量。