CN101803682A - 一种复合微生物菌剂及生产方法和应用 - Google Patents

一种复合微生物菌剂及生产方法和应用 Download PDF

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白子金
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白春生
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潘永荣
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聂鑫
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徐海涛
王跃男
杨忠伟
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Abstract

本发明涉及饲料添加剂，具体的说是一种复合微生物菌剂及生产方法。产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌组成后于培养基中培养至pH值2.5-3.5，所得即为复合微生物菌剂，按重量份数计产朊假丝酵母∶粪肠球菌∶嗜酸乳杆菌∶枯草芽孢杆菌＝1-3∶1-3∶1-3∶1-3；所述复合微生物菌剂可作为动物的饲料添加剂。本发明采用多种菌种组合的方式，对培养基成分、培养温度、各菌种的不同比例而得到不同酸度的强酸态菌群，根据动物的种类、使用的不同饲料，发挥强酸态菌群的优势，提高了动物的抗病力、提高经济效益、优化环境。

Description

一种复合微生物菌剂及生产方法和应用
技术领域
本发明涉及饲料添加剂，具体的说是一种复合微生物菌剂及生产方法和应用。
背景技术
目前现有微生物添加剂产品大多以单一菌种进行培养为主体。复合微生物菌群多采用同一种类、同一属的具有相似或相近的特点的细菌组成复合益生菌，这种复合菌具有细菌的代谢产物成分单一；作用效果不理想；产品效果不稳定；产品质量难控制等问题。这种单一菌群和复合菌群生产出的微生物饲料添加剂具有功效单一、粗糙、缺乏系统性、饲料的酸化程度差的缺点，给微生物饲料添加剂的发展带来很多不便。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种好氧、厌氧、兼性厌氧的复合微生物菌剂及生产方法和应用。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
一种复合微生物菌剂：由产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌组成，而后于培养基中培养至pH值2.5-3.5，即为复合微生物菌剂，按重量份数计产朊假丝酵母∶粪肠球菌∶嗜酸乳杆菌∶枯草芽孢杆菌＝1-3∶1-3∶1-3∶1-3。所述培养基为琼脂0.5～1.5g，牛肉膏0.5～1.5g，酵母提取物2～3g，蔗糖30～45g，消泡剂1.5～3.0g，蛋白胨0.5～1.5g，蒸馏水1000mL。pH3.0～5.0，110～130℃高压灭菌。
将增殖培养后的产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌按重量份数计产朊假丝酵母∶粪肠球菌∶嗜酸乳杆菌∶枯草芽孢杆菌＝＝1-3∶1-3∶1-3∶1-3，将上述菌种混合后按质量百分比10～15％于培养基中恒温发酵，并搅拌同时通氧气，培养的温度初始温度为28℃培养24小时，30℃培养24小时、35℃培养12小时，直至发酵培养至pH值2.5即可。
所述培养基为琼脂0.5～1.5g，牛肉膏0.5～1.5g，酵母提取物2～3g，蔗糖30～45g，消泡剂1.5～3.0g，蛋白胨0.5～1.5g，蒸馏水1000mL。pH3.0～5.0，110～130℃高压灭菌。
复合微生物菌剂的应用：所述复合微生物菌剂可作为动物的饲料添加剂。所述复合微生物菌剂可作为禽、猪、反刍动物、兔、犬或鱼的饲料添加剂。
本发明所具有的优点是：本发明采用多种菌种组合的方式，对培养基成分、培养温度、各菌种的不同比例而得到不同酸度的强酸(Ph2.5-3.5)态菌群，根据动物的种类、使用的不同饲料，发挥强酸态菌群的优势，提高了动物的抗病力、提高经济效益、优化环境。具有良好的经济效益和社会效益。具有很大的实用和推广价值。本发明复合微生物菌剂在经过酸化后作为饲料利于动物消化吸收，所述菌剂中的产朊假丝酵母属于产生大量乳酸的酵母菌，同时它的代谢产物可以为其它细菌所利用。在其生长繁殖过程中需要消耗大量氧气，可以将培养基中的氧气消耗，利于形成厌氧环境，促进嗜酸乳杆菌、粪肠球菌的生长；所述的嗜酸乳杆菌、粪肠球菌属于乳酸菌属中的细菌，它是一种厌氧、兼性厌氧菌，可以产生大量生物酸如乳酸、乙酸、丁酸、聚合生物酸等，利于建立酸性态益生菌群，抑制杂菌的生长，产生乳酸菌素等提高动物体免疫力的物质，增强机体的抗病力；所述的复合菌群中的枯草芽孢杆菌，可以形成芽孢，增加高温环境的抵抗能力，保持优良的活性，可以产生抗菌素，抑制细菌病毒的生长，保持产品优良的效果。同时利用不同底物可以用来生产多肽、氨基酸、抗菌肽等多种蛋白肽类营养物质。并且可以与低聚糖、植物提取物复合制成不同用途的低聚糖、植物提取物复合添加剂。
具体实施方式
实施例1
复合微生物菌剂的制备方法：将增殖培养后的产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌按重量份数计产朊假丝酵母∶粪肠球菌∶嗜酸乳杆菌∶枯草芽孢杆菌＝＝1∶1∶1∶1，将上述菌种混合后按质量百分比10％于培养基中恒温发酵，并搅拌同时通氧气，培养的温度初始温度为28℃培养24小时，30℃培养24小时、35℃培养12小时，直至发酵培养至pH值2.5，即可。
所述培养基为琼脂1g牛肉膏1g、酵母提取物2.5g、蔗糖35g、消泡剂(市购产品，本实施例购自美辰集团股份有限公司)1.5g、蛋白胨1g，蒸馏水加至1000ml pH3.0～5.0，110～130℃高压灭菌。所述酵母提取物为酵母浸粉(市购产品，本实施例酵母浸粉购自北京奥博星生物技术有限公司)。
所述产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌按照常规方法在下述各自的培养基中进行增殖培养。
所述产朊假丝酵母增殖培养于马铃薯浸粉(市购)3g，葡萄糖20g，琼脂粉15g，蒸馏水加至1000ml培养基中，121℃高压灭菌20分钟，备用。
所述粪肠球菌增殖培养于葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母膏0.5％，磷酸氢二钾0.2％，乙酸钠0.5％，柠檬酸铵0.2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，琼脂1.5-2％，pH6.5培养基中，121℃高压灭菌20分钟，备用。
所述嗜酸乳杆菌增殖培养于葡萄糖2％，蛋白胨1％，牛肉膏1％，酵母膏0.5％，磷酸氢二钾0.2％，乙酸钠0.5％，柠檬酸铵0.2％，硫酸镁0.058％，硫酸锰0.025％，琼脂1.5-2％，pH6.5培养基中，121℃高压灭菌20分钟，备用。所述枯草芽孢杆菌增殖培养于蛋白胨10g，琼脂20g，氯化钠5g，肉浸粉10g，水加至1000ml，pH7.2培养基中，121℃高压灭菌20分钟，备用。
将上述复合微生物菌剂作为饲养商品肉鸡的饲料添加剂，饲养量5000只，试验组用上述复合微生物菌剂，对照组未用复合微生物菌剂，测定其肉鸡的耗料量(参见表1)；对免疫力的影响(免疫器官指数)(参见表2)。
其中饲料为肉鸡全价配合饲料。
表1不同处理组肉鸡的耗料量
Figure G2009102489098D00031
由表1可知使用本发明复合微生物菌剂作为饲料添加剂，肉鸡的采食量明显低于未使用组。
表2免疫器官指数的影响
Figure G2009102489098D00032
由表2可知试验组的免疫器官指数明显高于对照组结果表明：采用本发明复合微生态菌剂能够提高饲料利用率，降低采食量；提高免疫力。提高经济效益。
实施例2复合微生物菌剂的制备方法：将增殖培养后的产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌按重量份数计产朊假丝酵母∶粪肠球菌∶嗜酸乳杆菌∶枯草芽孢杆菌＝＝1∶2∶2∶1，将上述菌种混合后按质量百分比15％于培养基中恒温发酵，并搅拌同时通氧气，培养的温度初始温度为28℃培养24小时，30℃培养24小时、35℃培养12小时，直至发酵培养至pH值3，即可。所述培养基为琼脂0.5g，牛肉膏0.5g，酵母提取物2g，蔗糖30g，消泡剂3.0g，蛋白胨0.5g，蒸馏水1000mL。pH3.0～5.0，110～130℃高压灭菌。所述酵母提取物为酵母浸粉。
将上述复合微生物菌剂作为饲养鸭的添加剂，饲养量2400只，试验组用上述复合微生物菌剂，对照组未用复合微生物菌剂，测定其鸭生长速度(参见表3)；对料肉比、成活率与单位增重(参见表4)。
表3肉鸭生长速度的影响
  组别   初生重   14日龄重   35日龄重   44日龄重
  试验组   50.6±3.2   523.3±31.4a   2051.0±283.5a   3225.0±335.2a
  对照组   52.9±4.9   534.7±34.5   2032.3±227.9   2950.0±402.5
表4对料肉比、成活率与单位增重情况
  试验组   对照组
  料肉比   2.64∶1   2.92∶1
  成活率   97.5％   91％
  每只均重   3.225kg   2.95kg
  每只增重   0.275kg   0
实施例3
复合微生物菌剂的制备方法：将增殖培养后的产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌按重量份数计产朊假丝酵母∶粪肠球菌∶嗜酸乳杆菌∶枯草芽孢杆菌＝＝3∶1∶1∶1，将上述菌种混合后按质量百分比12％于培养基中恒温发酵，并搅拌同时通氧气，培养的温度初始温度为28℃培养24小时，30℃培养24小时、35℃培养12小时，直至发酵培养至pH值3.5，即可。所述培养基为琼脂1.5g，牛肉膏1.5g，酵母提取物2g，蔗糖45g，消泡剂2g，蛋白胨1.5g，蒸馏水1000mL。pH3.0～5.0，110～130℃高压灭菌。所述酵母提取物为酵母浸粉。
将上述复合微生物菌剂作为饲养牛的添加剂，饲养量40头，试验组用上述复合微生物菌剂，对照组未用复合微生物菌剂，测定育肥期平均每头牛体重(参见表5)。
表5复合菌剂对育肥期平均每头牛体重的试验结果(kg)
Figure G2009102489098D00041
从表中可以看出，添加40ml/天·头饲喂后复合菌剂，试验组平均日增重2.61kg，对照组平均日增重2.01kg，试验组比对照组多增重0.6kg/天·头，日增重提高了29.85％。
实施例4
复合微生物菌剂的制备方法：将增殖培养后的产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌按重量份数计产朊假丝酵母∶粪肠球菌∶嗜酸乳杆菌∶枯草芽孢杆菌＝＝1∶2∶2∶1，将上述菌种混合后按质量百分比14％于培养基中恒温发酵，并搅拌同时通氧气，培养的温度初始温度为28℃培养24小时，30℃培养24小时、35℃培养12小时，直至发酵培养至pH值3.3，即可。所述培养基为琼脂1.2g，牛肉膏1.3g，酵母提取物2.8g，蔗糖40g，消泡剂2g，蛋白胨0.8g，蒸馏水1000mL。pH3.0～5.0，110～130℃高压灭菌。所述酵母提取物为酵母浸粉。
将上述复合微生物菌剂作为饲养蛋鸡的添加剂，饲养量1000只，试验组用上述复合微生物菌剂，对照组未用复合微生物菌剂，测定生产性能(参见表6)。
表6生产性能
组别 平均产蛋率％   产蛋总重量(kg)   只鸡产蛋重(kg) 饲料消耗(kg) 料蛋比
  试验组   91.24   919.03   5.40   1934.87   2.1∶1
  对照组   87.41   857.05   5.05   1961.10   2.28∶1

Claims (6)

1.一种复合微生物菌剂，其特征在于：由产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌组成，而后于培养基中培养至pH值2.5-3.5，即为复合微生物菌剂，按重量份数计产朊假丝酵母：粪肠球菌∶嗜酸乳杆菌∶枯草芽孢杆菌＝1-3∶1-3∶1-3∶1-3。
2.按权利要求1所述的复合微生物菌剂，其特征在于：所述培养基为琼脂0.5～1.5g，牛肉膏0.5～1.5g，酵母提取物2～3g，蔗糖30～45g，消泡剂1.5～3.0g，蛋白胨0.5～1.5g，蒸馏水1000mL。pH3.0～5.0。
3.一种按权利要求1所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于：将增殖培养后的产朊假丝酵母、粪肠球菌、嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌按重量份数计产朊假丝酵母∶粪肠球菌∶嗜酸乳杆菌∶枯草芽孢杆菌＝＝1-3∶1-3∶1-3∶1-3，将上述菌种混合后按质量百分比10～15％于培养基中恒温发酵，并搅拌同时通氧气，培养的温度初始温度为28℃培养24小时，30℃培养24小时、35℃培养12小时，直至发酵培养至pH值2.5，收集发酵液即可。
4.按权利要求1所述的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述培养基为琼脂0.5～1.5g，牛肉膏0.5～1.5g，酵母提取物2～3g，蔗糖30～45g，消泡剂1.5～3.0g，蛋白胨0.5～1.5g，蒸馏水1000mL。pH 3.0～5.0。
5.按权利要求1所述的复合微生物菌剂的应用，其特征在于：所述复合微生物菌剂可作为动物的饲料添加剂。
6.按权利要求5所述的复合微生物菌剂的应用，其特征在于：所述复合微生物菌剂可作为禽、猪、反刍动物、兔、犬或鱼的饲料添加剂。
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