CN101778651A

CN101778651A - 用于治疗结核病的杂环化合物

Info

Publication number: CN101778651A
Application number: CN200880103188A
Authority: CN
Inventors: 卢伊斯·巴勒尔-帕格斯; 戴维·巴罗斯-阿吉雷; 朱利亚·卡斯特罗-皮切尔; 莫德斯托·J·雷缪南-布兰科; 乔斯·M·菲安多-罗曼
Original assignee: Glaxo Group Ltd
Current assignee: Glaxo Group Ltd
Priority date: 2007-06-22
Filing date: 2008-06-19
Publication date: 2010-07-14
Also published as: JP2010530865A; EP2167196A1; WO2009000745A1; US20100184751A1; EP2005995A1

Abstract

本发明涉及式(I)的三环含氮化合物或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物，包含它们的组合物，它们在治疗结核病中的用途，以及制备此类化合物的方法。

Description

用于治疗结核病的杂环化合物

技术领域

本发明涉及化合物，包含它们的组合物，它们在治疗(包括治疗结核病)中的用途，以及制备所述化合物的方法。

发明背景

PCT专利公开WO02/08224、WO02/50061、WO02/56882、WO02/96907、WO2003087098、WO2003010138、WO2003064421、WO2003064431、WO2004002992、WO2004002490、WO2004014361、WO2004041210、WO2004096982、WO2002050036、WO2004058144、WO2004087145、WO2006002047、WO2006014580、WO2006010040、WO2006017326、WO2006012396、WO2006017468、WO2006020561、WO2006081179、WO2006081264、WO2006081289、WO2006081178、WO2006081182、WO01/25227、WO02/40474、WO02/07572、WO2004024712、WO2004024713、WO2004035569、WO2004087647、WO2004089947、WO2005016916、WO2005097781、WO2006010831、WO2006021448、WO2006032466、WO2006038172、WO2006046552、WO2006099884、WO2006105289、WO2006081178、WO2006081182、WO2006134378、WO2006137485、WO2007016610、WO2007081597、WO2007071936、WO2007115947、WO2007118130、WO2007122258、WO2007138974、WO2008006648、WO2008003690和WO2008009700公开了具有抗菌活性的喹啉、二氮杂萘(naphthyridine)、吗啉、环己烷、哌啶和哌嗪衍生物以及稠合三环化合物。WO2004104000公开了能够选择性作用于大麻素受体的稠合三环化合物。

用于治疗结核病(TB)的合成药物已经面世半个多世纪了，但是该疾病的发病率仍在全世界范围内继续上升。在2004年，估计每天有24,500人患有该流行病，且接近5,500人死于TB(World Health Organization，GlobalTuberculosis Control：Surveillance，Planning，Financing.WHO Report 2006，Gcneva，Switzerland，ISBN 92-4156314-1)。同时感染有HIV使得发病率升高(Williams，B.G.；Dye，C.Science，2003，301，1535)，且在非洲31％的AIDS患者死亡的原因是TB(Corbett，E.L.；Watt，C.J.；Catherine，J.；Walker，N.；Maher D.；Williams，B.G.；Raviglione，M.C.；Dye，C.Arch.Intl.Med.，2003，163，1009，SeptkoWitz，A.；Raffalli，J.；Riley，T.；Kiehn，T.E.；Armstrong，D.Clin.Microbiol.Rev.1995，8，180)。当与结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis，MDR-TB)的多药物抗性菌株的出现相结合时，该问题的规模被放大。自从WHO宣布TB为“全球性的健康问题”到现在已经过了十多年了(World HealthOrganization，Global Tuberculosis Control：Surveillance，Planning，Financing.WHO Report 2006，Geneva，Switzerland，ISBN 92-4156314-1)。

结核病治疗的限制和预防是公知的。当前可用的疫苗BCG于1921年面世，且不能保护儿童期后的大多数人。确实感染有流行疾病的患者目前可接受下列组合治疗：服用异烟肼、利福平、吡嗪酰胺和乙胺丁醇2个月，然后继续服用异烟肼和利福平另外4个月。需要每日给药，且较差的顺应性使得多药物抗性的菌株出现和传播，该菌株对治疗造成困难。进来出版的综述详细地讨论了到目前为止的TB的许多方面，如发病机理、流行病学、药物发现和疫苗开发(Nature Medicine，Vol 13(3)，第263-312页)。

迫切需要较短过程的更加活性的药物，该药物服用频率可减少，并且提供很大程度上阻止抗药性的出现，即，该药物有效抵抗TB的多药物抗性菌株(MDR-TB)。因此，需要发现并开发新的药物(chemical entity)以治疗TB(最近的合成前沿综述于：Ballell，L.；Field，R.A.；Duncan，K.；Young，R.J.Antimicrob.Agents Chemother.2005，49，2153)中。

发明详述

本发明提供式(I)化合物或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物在制备用于治疗哺乳动物结核病的药物中的用途：

其中：

R^1a和R^1b独立地选自氢；卤素；氰基；(C_1-6)烷基；(C_1-6)烷硫基；三氟甲基；三氟甲氧基；羧基；任选被(C_1-6)烷基或(C_1-6)烷氧基-取代的(C_1-6)烷基所取代的羟基；(C_1-6)烷氧基-取代的(C_1-6)烷基；羟基(C_1-6)烷基；任选被1个或2个(C_1-6)烷基、甲酰基、(C_1-6)烷基羰基或(C_1-6)烷基磺酰基N-取代的氨基；或氨基羰基，其中该氨基任选被(C_1-4)烷基所取代；

R²为氢或(C_1-4)烷基，或R²与R⁶一起形成如下所定义的Y；

A为基团(ia)或(1b)：

其中：R³为如对R^1a或R^1b所定义或R³为氧代基团，且n为1或2；或A为基团(ii)

其中：W¹、W²和W³各自为CR⁴R⁸；

或W²和W³为CR⁴R⁸，且W¹表示W³和N之间的化学键；

X为O、CR⁴R⁸或NR⁶；

一个R⁴为如对R^1a和R^1b所定义，且其余的R⁴和R⁸为氢，或一个R⁴和R⁸一起为氧代基团且其余的R⁴和R⁸为氢；

R⁶为氢或(C_1-6)烷基；或R⁶与R²一起形成Y；

R⁷为氢；卤素；任选被(C_1-6)烷基取代的羟基；或(C_1-6)烷基；

Y为CR⁴R⁸CH₂；CH₂CR⁴R⁸C＝O；CR⁴R⁸；CR⁴R⁸(C＝O)；或(C＝O)CR⁴R⁸；

或当X为CR⁴R⁸时，R⁸和R⁷一起表示化学键；

U选自CO和CH₂，和

R⁵为任选取代的二环碳环或杂环体系(B)：

在每个环中含有至多4个杂原子，其中

环(a)和环(b)中至少一个为芳香环；

X¹为C或N，当其为芳香环的部分时，或X¹为CR¹⁴，当其为非芳香环的部分时；

X²为N、NR¹³、O、S(O)_x、C＝O或CR¹⁴，当其为芳香环或非芳香环的部分时，或X²还可为CR¹⁴R¹⁵，当其为非芳香环的部分时；

X³和X⁵独立地为N或C；

Y¹不存在或为含有1-4个基团的连接基，其中各基团独立地选自N、NR¹³、O、S(O)_x、C＝O和CR¹⁴，当其为芳香环或非芳香环的部分时，或Y¹还可为CR¹⁴R¹⁵，当其为非芳香环的部分时；

Y²为含有2至6个基团的连接基，Y²的各基团独立地选自N、NR¹³、O、S(O)_x、CO、CR¹⁴，当其为芳香环或非芳香环的部分时，或Y²还可为CR¹⁴R¹⁵，当其为非芳香环的部分时；

R¹⁴和R¹⁵各自独立地选自：H；(C_1-4)烷硫基；卤素；羧基(C_1-4)烷基；(C_1-4)烷基；(C_1-4)烷氧基羰基；(C_1-4)烷基羰基；(C_1-4)烷氧基(C_1-4)烷基；羟基；羟基(C_1-4)烷基；(C_1-4)烷氧基；硝基；氰基；羧基；氨基或氨基羰基，其任选被(C_1-4)烷基单-或二-取代；或

R¹⁴和R¹⁵可一起表示氧代基团；

各R¹³独立地为H；三氟甲基；任选被羟基、(C_1-6)烷氧基、(C_1-6)烷硫基、卤素或三氟甲基取代的(C_1-4)烷基；(C_2-4)链烯基；(C_1-4)烷氧基羰基；(C_1-4)烷基羰基；(C_1-6)烷基磺酰基；氨基羰基，其中该氨基任选被(C_1-4)烷基单或二取代；

各x独立地为0、1或2；且

R⁹为氟或羟基。

在本发明的一方面中，提供了式(I)化合物或其可药用盐或N-氧化物在制备用于治疗哺乳动物结核病的药物中的用途。

在本发明的一方面中，提供了式(I)化合物或其可药用盐在制备用于治疗哺乳动物结核病的药物中的用途。

本发明还提供一种治疗哺乳动物(尤其是人)结核病的方法，该方法包括向有此治疗需要的哺乳动物给药有效量的式(I)化合物、或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物。

在本发明的一方面中，提供了治疗哺乳动物(尤其是人)结核病的方法，该方法包括向有此治疗需要的哺乳动物给药有效量的式(I)化合物、或其可药用盐或N-氧化物。

在本发明的一方面中，提供了治疗哺乳动物(尤其是人)结核病的方法，该方法包括向有此治疗需要的哺乳动物给药有效量的式(I)化合物、或其可药用盐。

本发明还提供式(I)化合物、或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物，其用于治疗哺乳动物结核病。

在本发明的一方面中，提供了式(I)化合物、或其可药用盐或N-氧化物，其用于治疗哺乳动物结核病。

在本发明的一方面中，提供了式(I)化合物、或其可药用盐，其用于治疗哺乳动物结核病。

本发明还进一步提供药物组合物在制备用于治疗哺乳动物结核病的药物中的用途，该药物组合物包含式(I)化合物、或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物，以及可药用载体。

在本发明的一方面中，提供了药物组合物在制备用于治疗哺乳动物结核病的药物中的用途，该药物组合物包含式(I)化合物、或其可药用盐或N-氧化物，以及可药用载体。

在本发明的一方面中，提供了药物组合物在制备用于治疗哺乳动物结核病的药物中的用途，该药物组合物包含式(I)化合物、或其可药用盐，以及可药用载体。

在一方面，提供了药物组合物在制备用于治疗哺乳动物(例如人)结核病的药物中的用途，该药物组合物包含式(I)化合物或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物，以及可药用载体、赋形剂或稀释剂。

在另一方面，提供了用于治疗哺乳动物(例如人)结核病的药物组合物，该药物组合物包含式(I)化合物或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物，以及可药用载体、赋形剂或稀释剂。

在本发明的一方面中，所涉及的″哺乳动物″被限定为人。

在一方面，R^1a和R^1b各自独立地为氢、(C_1-4)烷氧基、(C_1-4)烷硫基、(C_1-4)烷基、氰基、羧基、羟基甲基或卤素。在另一方面，R^1a和R^1b各自独立地为氢、甲氧基、甲基、氰基或卤素。

在一个实施方案中，R^1a和R^1b各自为氢、甲氧基、甲基、或卤素如氯或氟。在一个实施方案中，仅有一个基团R^1a或R^1b不为氢，如R^1a为氯、氟或甲氧基且R^1b为氢。在一个实施方案中，R^1a和R^1b都不为氢。在另一实施方案中，R^1a和R^1b都为卤素，如R^1a为氟且R^1b为氯或氟。

在一方面，R²为氢。

在一方面，R³为氢；任选取代的羟基；任选取代的氨基；卤素；(C_1-4)烷基；1-羟基-(C_1-4)烷基；任选取代的氨基羰基。在另一方面，R³基团为氢；CONH₂；1-羟基烷基，例如CH₂OH；任选取代的羟基，例如甲氧基；任选取代的氨基；和卤素如氟。在另一方面，R³为氢、羟基或氟。在另一方面，R³为氢。

在一方面，与基团R⁹相连的碳原子的立体化学为S构型。

在一方面，当A为(ia)时，n为1。在一方面，R³位于3-或4-位。在另一方面，A为(ia)，n为1，和R³位于3-位。在另一方面，A相对于NR²基团为顺式。

在一个实施方案中，A为基团(ia)，其中n为1且R³为氢或羟基。

在一方面，当A为(ii)时，X为CR⁴R⁸，R⁸为H且R⁴为H或OH，以及在一个实施方案中，OH相对于R⁷为反式。在一方面，W¹为化学键。在一方面，R⁷为H。在一个实施方案中，W¹为化学键，X、W²和W³各自为CH₂且R⁷为H。

在一个实施方案中，U为CH₂。

在一个实施方案中，R⁵为具有8-11个环原子的芳香杂环(B)，且所述环原子包括其中至少一个为N或NR¹³的2-4个杂原子，其中，在另外的具体实施方案中，Y²包含2-3个杂原子，其中一个为S和1-2个为N，有一个N键接于X³。

在一个实施方案中，杂环(B)具有芳香环(a)和非芳香环(b)，所述芳香环(a)选自任选取代的苯并环、吡啶并环和哒嗪并环，以及Y²具有3-5个原子，例如4个原子，包括至少一个杂原子，有O、S、CH₂或NR¹³键接于X⁵，其中R¹³不为氢，以及或者NHCO通过N键接于X³，或者通过O、S、CH₂或NH键接于X³。在一方面，该环(a)包含芳族氮。在另一方面，环(a)为吡啶或吡嗪。环(B)的实例包括任选取代的下列基团：

(a)和(b)为芳香环

1H-吡咯并[2，3-b]-吡啶-2-基、1H-吡咯并[3，2-b]-吡啶-2-基、3H-咪唑并[4，5-b]-吡啶-2-基、3H-喹唑啉-4-酮-2-基(4(1H)-喹唑啉酮-2-基或4-氧代-1，4-二氢-2-喹唑啉基)、苯并咪唑-2-基、苯并[1，2，3]-噻二唑-5-基、苯并[1，2，5]-噁二唑-5-基、苯并呋喃-2-基、苯并噻唑-2-基、苯并[b]噻吩-2-基、苯并噁唑-2-基、苯并吡喃-4-酮-3-基、咪唑并[1，2-a]吡啶-2-基、咪唑并-[1，2-a]-嘧啶-2-基、吲哚-2-基、吲哚-6-基、异喹啉-3-基、[1，8]-二氮杂萘-3-基、噁唑并[4，5-b]-吡啶-2-基、喹啉-2-基、喹啉-3-基、喹喔啉-2-基、茚满-2-基、萘-2-基、1，3-二氧代-异吲哚-2-基、苯并咪唑-2-基、苯并噻吩-2-基、1H-苯并三唑-5-基、1H-吲哚-5-基、3H-苯并噁唑-2-酮-6-基、3H-苯并噁唑-2-硫酮-6-基、3H-苯并噻唑-2-酮-5-基、3H-喹唑啉-4-酮-6-基、4-氧代-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-3-基、苯并[1，2，3]噻二唑-6-基、苯并[1，2，5]噻二唑-5-基、苯并[1，4]噁嗪-2-酮-3-基、苯并噻唑-5-基、苯并噻唑-6-基、噌啉-3-基、咪唑并[1，2-a]哒嗪-2-基、咪唑并[1，2-b]哒嗪-2-基、吡唑并[1，5-a]吡嗪-2-基、吡唑并[1，5-a]吡啶-2-基、吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-基、吡唑并[5，1-c][1，2，4]三嗪-3-基、吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮-2-基、吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮-3-基、喹唑啉-2-基、喹喔啉-6-基、噻唑并[3，2-a]嘧啶-5-酮-7-基、噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基、噻吩并[3，2-b]吡啶-6-基、噻唑并[5，4-b]吡啶-6-基、4-氧代-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-基、1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-3-基、噻唑并[4，5-b]吡啶-5-基、[1，2，3]噻二唑并[5，4-b]吡啶-6-基、2H-异喹啉-1-酮-3-基、1，8-二氮杂萘-2-基、2，1，3-苯并噁二唑-5-基、2(1H)-喹喔啉酮-3-基；

(a)为非芳香环

(2S)-2，3-二氢-1H-吲哚-2-基、(2S)-2，3-二氢-苯并[1，4]二氧杂环己二烯(dioxine)-2-基、3-(R，S)-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-3-基、3-(R)-2，3-二氢-[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-b]吡啶-3-基、3-(S)-2，3-二氢-[1，4]二氧杂环己二烯并(dioxino)[2，3-b]吡啶-3-基、2，3-二氢-苯并[1，4]二噁烷-2-基、3-取代的-3H-喹唑啉-4-酮-2-基；

(b)为非芳香环

1，1，3-三氧代-1，2，3，4-四氢1l6-苯并[1，4]噻嗪-6-基、苯并[1，3]二氧杂环戊烯(dioxol)-5-基、2，3-二氢-苯并[1，4]二氧杂环己二烯-6-基、2-氧代-2，3-二氢-苯并噁唑-6-基、3-取代的-3H-苯并噁唑-2-酮-6-基、3-取代的-3H-苯并噁唑-2-硫酮-6-基、3-取代的-3H-苯并噻唑-2-酮-6-基(3-取代的-2-氧代-2，3-二氢-1，3-苯并噻唑-6-基)、4H-苯并[1，4]噁嗪-3-酮-6-基(3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基)、4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮-6-基(3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基)、4H-苯并[1，4]噁嗪-3-酮-7-基、4-氧代-2，3，4，5-四氢-苯并[b][1，4]硫氮杂(thiazepine)-7-基、5-氧代-2，3-二氢-5H-噻唑并[3，2-a]嘧啶-6-基、1H-吡啶并[2，3-b][1，4]噻嗪-2-酮-7-基(2-氧代-2，3-二氢-1H-吡啶并[2，3-b]噻嗪-7-基)、2，3-二氢-1H-吡啶并[2，3-b][1，4]噻嗪-7-基、2-氧代-2，3-二氢-1H-吡啶并[3，4-b]噻嗪-7-基、2，3-二氢-[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-b]吡啶-6-基、2，3-二氢-[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基、2，3-二氢-[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-b]吡啶-7-基、3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基、3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基、3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噁嗪-6-基、3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-基、3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-基、3，4-二氢-1H-喹啉-2-酮-7-基、3，4-二氢-1H-喹喔啉-2-酮-7-基、6，7-二氢-4H-吡唑并[1，5-a]嘧啶-5-酮-2-基、5，6，7，8-四氢-[1，8]二氮杂萘-2-基、2-氧代-3，4-二氢-1H-[1，8]二氮杂萘-6-基、6-氧代-6，7-二氢-5H-8-硫杂-1，2，5-三氮杂-萘-3-基、2-氧代-2，3-二氢-1H-吡啶并[3，4-b][1，4]噁嗪-7-基、2-氧代-2，3-二氢-1H-吡啶并[2，3-b][1，4]噁嗪-7-基、6，7-二氢-[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-d]嘧啶-2-基、[1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基、3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-基、2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己二烯-7-基、2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基、2，3-二氢呋喃并[2，3-c]吡啶-5-基、2，3-二氢-1-苯并呋喃-5-基、6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]哒嗪-3-基、6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基、6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基、6，7-二氢-5H -吡喃并[2，3-c]哒嗪-3-基、2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]吡啶-7-基、5，6-二氢呋喃并[2，3-c]哒嗪-3-基、1，2，3-苯并噻二唑-6-基、7-氧代-1，5，6，7-四氢-1，8-二氮杂萘-2-基。

在一个实施方案中，R¹³为H，当其在环(a)中时，或R¹³还为(C_1-4)烷基如甲基或异丙基，当其在环(b)中时。在另一实施方案中，在环(b)中，R¹³为H，当NR¹³键接于X³时，和R¹³为(C_1-4)烷基，当NR¹³键接于X⁵时。

在一个实施方案中，R¹⁴和R¹⁵独立地选自氢、卤素、羟基、(C_1-4)烷基、(C_1-4)烷氧基、硝基和氰基。在另一实施方案中，R¹⁵为氢。

在一个实施方案中，各R¹⁴选自氢、氯、氟、羟基、甲基、甲氧基、硝基和氰基。在另一实施方案中，R¹⁴选自氢、氟或硝基。

在一个实施方案中，R¹⁴和R¹⁵各自为H。

在一个实施方案中，R⁵选自：

[1，2，3]噻二唑并[5，4-b]吡啶-6-基、1H-吡咯并[2，3-b]吡啶-2-基、2，3-二氢-[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-b]吡啶-6-基、2，3-二氢-[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-b]吡啶-7-基、2，3-二氢-[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基、2，3-二氢-苯并-1，4-二氧杂环己二烯-6-基、2-氧代-2，3-二氢-1H-吡啶并[2，3-b][1，4]噁嗪-7-基、2-氧代-2，3-二氢-1H-吡啶并[2，3-b][1，4]噻嗪-7-基、3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基、3-甲基-2-氧代-2，3-二氢-苯并噁唑-6-基、3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基、3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噁嗪-6-基、3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噻嗪-6-基(4H-苯并[1，4]噻嗪-3-酮-6-基)、4-氧代-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-2-基、6-硝基-苯并[1，3]二氧杂环戊烯-5-基、7-氟-3-氧代-3，4-二氢-2H-苯并[1，4]噁嗪-6-基、8-羟基-1-氧代-1，2-二氢-异喹啉-3-基、8-羟基喹啉-2-基、苯并[1，2，3]噻二唑-5-基、苯并[1，2，5]噻二唑-5-基、苯并噻唑-5-基、噻唑并-[5，4-b]吡啶-6-基、3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-基、7-氯-3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-基、7-氟-3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-基、2-氧代-2，3-二氢-1H-吡啶并[3，4-b][1，4]噻嗪-7-基、[1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基、3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-基、5-氰基(carbonitro)-2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己二烯-7-基、2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基、2，3-二氢呋喃并[2，3-c]吡啶-5-基、5-氟-2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己二烯并-7-基、2，3-二氢-1-苯并呋喃-5-基、6-氧代-二氢-5H-哒嗪并[3，4-b][1，4]噻嗪-3-基、7-氧代-1，5，6，7-四氢-1，8-二氮杂萘-2-基、喹喔啉-2-基、1，8-二氮杂萘-2-基、异喹啉-3-基、喹啉-3-基、2(1H)-喹喔啉酮-3-基、4(1H)-喹唑啉酮-2-基、(3H-喹唑啉-4-酮-2-基或4-氧代-1，4-二氢-2-喹唑啉基)、7-氯-3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噁嗪-6-基、喹喔啉-6-基、2，3-二氢-1-苯并呋喃-5-基、1-(1-甲基乙基)-1H-1，2，3-苯并三唑-5-基、2，1，3-苯并噁二唑-5-基、喹啉-2-基、1H-吲哚-6-基、4-氟-1H-苯并咪唑-2-基、6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]哒嗪-3-基、6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基、6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基、6，7-二氢-5H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3-基、2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]吡啶-7-基、7-氰基(carbonitro)-2，3-二氢-1-苯并呋喃-5-基、5，6-二氢呋喃并[2，3-c]哒嗪-3-基、3-甲基-2-氧代-2，3-二氢-1，3-苯并噻唑-6-基、1，2，3-苯并噻二唑-6-基、5，7-二氟-1H-吲哚-2-基或6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-d]嘧啶-2-基；

在另一实施方案中，R⁵选自3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噁嗪-6-基、3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-基、6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基、6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基、6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]哒嗪-3-基、2，3-二氢-[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基、[1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基、2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己二烯-6-基、2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基、3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-基、2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]吡啶-7-基或6，7-二氢-5H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3-基。

在一方面，本发明中所用的化合物包括实施例中所述的那些化合物以及它们的盐、溶剂合物或N-氧化物。

在另一方面，本发明中所用的化合物包括：

(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)；

(4R/S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4R)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2类对映异构体)；

(4S)-4-({4-[(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己二烯-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)；

(4S)-4-({4-[(3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)；

(4R)-4-({4-[(3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2类对映异构体)；

(4S)-3-氟-4-羟基-4-[(4-{[(3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)；

(4R)-3-氟-4-羟基-4-[(4-{[(3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2类对映异构体)；

(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)；

(4R)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2类对映异构体)；

(4S)-3-氟-4-羟基-4-({4-[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)；

(4R)-3-氟-4-羟基-4-({4-[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2类对映异构体)；

(4R/S)-3-氯-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4R/S)-3-氯-4-({4-[(3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4R/S)-3-氯-4-羟基-4-[(4-{[(3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4R/S)-3-氯-4-羟基-4-({4-[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-3，8-二氟-4-羟基-4-({4-[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-4-({4-[(6，7-二氢-5H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)；

(4S)-4-({4-[(6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)；

(4S)4-({4-[[(6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)；

(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，8-二氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)；

(4R)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，8-二氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2类对映异构体)；

(4S)-3-氟-4-羟基-4-({4-[(2-喹喔啉基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(对映异构体E1)；

(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(对映异构体E1)；

(4R/S)-8-氯-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4R/S)-8-氯-3-氟-4-羟基-4-({4-[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)；

4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2对映异构体)；

4-({4-[(6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)；

4-({4-[(6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2对映异构体)；

4-({4-[(6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)；

4-({4-[(6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2对映异构体)；

3，4-二氟-4-[(4-{[(3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噁嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)；

4-({4-[(6，7-二氢-5H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)；

(4S)-4-({4-[6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-d]嘧啶-2-基甲基]氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)；

(4S)-3-氟-4-羟基-4-[(4-{[(7-氧代-6，7-二氢-1H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噁嗪-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-3，4-二氟-4-[(4-{[(7-氧代-6，7-二氢-1H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噁嗪-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-3，4-二氟-4-[(4-{[(7-氧代-1，5，6，7-四氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-3-氟-4-羟基-4-[(4-{[(7-氧代-1，5，6，7-四氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-3-氟-4-羟基-4-[(4-{[(8-羟基-1-氧代-1，2-二氢-3-异喹啉基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

或选自表1或2的化合物；

或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物。

在另一方面，本发明中所用的化合物包括：

(4S)4-({4-[(6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)；

(4S)-4-({4-[(2，1，3-苯并噻二唑-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-3-氟-4-羟基-4-({4-[(3-异喹啉基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-3-氟-4-羟基-4-({4-[(3-喹啉基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H -吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-4-[(4-{[(7-氯-3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噁嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

5-{[(1-{[(4S)-3-氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基]甲基}-4-哌啶基)氨基]甲基}-2，3-二氢-1-苯并呋喃-7-甲腈；

(4S)-4-({4-[(1，3-苯并噻唑-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-3-氟-4-羟基-4-({4-[(6-喹喔啉基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-4-({4-[(1，2，3-苯并噻二唑-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-4-({4-[(2，1，3-苯并噁二唑-5-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-3-氟-4-羟基-4-[(4-{[(8-羟基-2-喹啉基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-3-氟-4-羟基-4-({4-[(2-喹啉基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-4-({4-[(1，2，3-苯并噻二唑-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-4-[(4-{[(5，7-二氟-1H-吲哚-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

(4S)-3-氟-4-羟基-4-({4-[([1，2，3]噻二唑并[5，4-b]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

3-氟-4-羟基-4-[((3R)-3-{[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]甲基}-1-吡咯烷基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；和

或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物。

在一方面，本发明的新的化合物包括表A的化合物：

表A

(4S)-3-氟-4-羟基-4-[(4-{[(7-氧代-1，5，6，7-四氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；和

(4S)-3-氟-4-羟基-4-[(4-{[(8-羟基-1-氧代-1，2-二氢-3-异喹啉基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮。

本发明进一步提供表A的化合物，其用于治疗。

本发明还进一步提供表A的化合物，其用于治疗哺乳动物的细菌感染，包括结核病。

本发明还进一步提供表A的化合物在制备用于治疗哺乳动物的细菌感染(包括结核病)的药物中的用途。

本发明还进一步提供一种治疗哺乳动物(尤其是人)的细菌感染(包括结核病)的方法，该方法包括向有此治疗需要的哺乳动物给药有效量的表A的化合物。

术语和定义

本文中所用的术语″(C_1-6)烷基″指的是含有1-6个碳原子的直链或支链烷基。实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基和己基。本文中所用的术语“(C_1-4)烷基”指的是具有1-4个碳原子的直链或支链烷基。实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基。

本文中所用的术语“(C_2-4)链烯基”指的是含有双键且具有2-4个碳原子的不饱和的直链或支链烯基。实例包括但不限于乙烯基、丙-1-烯基、丙-2-烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、1-甲基-丙-1-烯基和2-甲基-丙-1-烯基。

本文中所用的术语″卤代″或″卤素″是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)和碘(I)。

本文中所用的术语“卤代烷基”是指如上所定义的烷基，其中烷基中的1-3个氢原子被卤素代替。“卤代烷基”的实例包括但不限于三氟甲基。

本文中所用的术语“(C_1-6)烷氧基”是指具有1-6个碳原子的直链或支链烷氧基。“(C_1-6)烷氧基”的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁-1-氧基、丁-2-氧基、2-甲基丙-2-氧基、戊氧基、己氧基等。本文中所用的术语“(C_1-4)烷氧基”是指具有1-4个碳原子的直链或支链烷氧基。“(C_1-4)烷氧基”的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁-1-氧基、丁-2-氧基、2-甲基丙-2-氧基等。

本文中所用的术语″任选被(C_1-6)烷基取代的羟基″是指-OH基团，其中H原子任选被(C_1-6)烷基代替。″任选被(C_1-6)烷基取代的羟基″的实例包括但不限于羟基、甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、丁氧基、戊氧基、己氧基等。

本发明的化合物包含杂环基基团且可以两个或更多个互变异构体存在，这取决于杂环基团的性质；所有此类互变异构体包括在本发明的范围内。

本发明的一些化合物可从溶剂如水溶剂和有机溶剂中结晶或重结晶。在此类情况下，可形成溶剂合物。本发明在其范围内包括化学计量的溶剂合物(包括水合物)以及含有可变量水的化合物，其可通过如冻干的方法制备。

此外，应当理解，短语如″式(I)化合物或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物″和″式(I)化合物或其可药用盐或N-氧化物″都意欲包括式(I)化合物、式(I)化合物的N-氧化物、式(I)化合物的可药用盐、式(I)化合物的溶剂合物，或这些的任何可药用组合。因此，在此用于示例性说明的目的的非限制性实例，″式(I)化合物或其可药用盐或其溶剂合物″和″式(I)化合物或其可药用盐″可包括还以溶剂合物存在的式(I)化合物的可药用盐。

在本发明中有用的化合物包括碳环或杂环体系，且可以以两个或更多个互变异构体形式存在，这取决于碳环或杂环体系的性质。所有所述互变异构体形式均包括在本发明的范围内。

在本发明中有用的一些化合物可从溶剂如水溶剂和有机溶剂中结晶或重结晶。在此类情况下，可形成溶剂合物。本发明在其范围内包括化学计量的溶剂合物(包括水合物)以及含有可变量水的化合物，其可通过如冻干的方法制备。

由于式(I)化合物意欲在药物组合物中使用，因此很容易理解，在具体的实施方案中，它们基本上以纯的形式提供，例如至少60％纯度，更适宜地至少75％纯度，且特别是至少85％，尤其至少98％纯度(％为基于重量的百分数)。化合物的不纯产物(impure preparation)可用于制备在药物组合物中使用的更纯的形式；这些化合物的较低纯度的产物应当含有至少1％，更适宜地至少5％，且更特别地10-59％的式(I)化合物或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物。

根据本发明的具体化合物包括在实施例中提及的那些化合物以及它们的可药用N-氧化物、盐和溶剂合物。

上述式(I)化合物的可药用盐包括酸加成盐或季铵盐，例如它们与无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸或磷酸形成的盐，或与有机酸，例如乙酸、富马酸、琥珀酸、马来酸、柠檬酸、苯甲酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、萘磺酸或酒石酸形成的盐。式(I)化合物还可制备成N-氧化物。本发明意欲包括所有这些盐、溶剂合物或N-氧化物。

某些式(I)化合物可以光学异构体的形式存在，例如非对映异构体以及以所有比例的异构体的混合物，例如外消旋混合物。本发明包括所有此类形式，尤其是纯的异构体形式。例如本发明包括在连接点NR²、R³和/或R⁹上的对映异构体和非对映异构体。不同的异构体可通过常规方法彼此分离或拆分，或任一给定的异构体可通过常规合成方法或通过立体定向合成或不对称合成而获得。

本发明另一方面提供一种制备式(I)化合物、及其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物的方法，该方法包括使式(IIA)化合物：

与化合物HA-N(R²⁰)R²’反应，其中W为离去基团，R²⁰为UR⁵或可转化为UR⁵的基团，且R²为R²或可转化为R²的基团，且A、R^1a、R^1b、R²、R⁹、U和R⁵如在式(I)中所定义，得到式(IIB)化合物：

且其后任选或若必要将R²⁰和R²’转化为UR⁵和R²，转化(interconverting)任一可变基团，和/或形成其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物。

该反应在胺偶联的常规条件下进行，例如在合适的碱如碳酸钠或三乙胺存在下，在合适的溶剂如乙醇或N，N-二甲基甲酰胺中，在环境温度至60℃之间的温度下一起反应。当R⁹为OH时，用碱处理可得到环氧化物，可将其与胺反应，得到(IIB)。该反应可通过不需分离的所述环氧化物进行。

该离去基团可为任何常规的基团，如甲磺酰基或甲基苯磺酰基。合适地，R²⁰和R²之一为N-保护基团，如叔丁氧基羰基、苄氧基羰基或9-芴基甲氧羰基。该保护基可以用本领域技术人员公知的多种方法除去(例如参见“Protective Groups in Organic Synthesis，T.W.Greene and P.G.M.Wuts，Wilcy-Interscience，1999)，例如使用如三氟乙酸或盐酸的常规酸水解来除去。

本发明还提供了式(IIB)化合物，其中R²⁰为氢。

其中R²⁰为氢的式(IIB)的游离胺可通过下列常规方法转化为NR²UR⁵：如使用酰基衍生物R⁵COW或R⁵SO₂W形成酰胺或磺酰胺，对于其中U为CO或SO₂的化合物，或其中U为CH₂的化合物，通过使用烷基卤化物R⁵CH₂-卤化物在碱的存在下进行烷基化反应，使用酰基衍生物R⁵COW进行酰化/还原反应，或使用醛R⁵CHO在常规条件下进行还原烷基化反应(参见例如Smith，M.B.；March，J.M.Advanced Organic Chemistry，Wiley-Interscience)。含有所需的R⁵基团的适宜的试剂为已知的化合物或可类似于已知化合物制备，参见例如WO02/08224、WO02/50061、WO02/56882、WO02/96907、WO2003087098、WO2003010138、WO2003064421、WO2003064431、WO2004002992、WO2004002490、WO2004014361、WO2004041210、WO2004096982、WO2002050036、WO2004058144、WO2004087145、WO06002047、WO06014580、WO06010040、WO06017326、WO06012396、WO06017468、WO06020561和EP0559285。

当R⁵含有NH基团时，在R⁵衍生物与式(IIB)的游离胺偶联过程中，其可用合适的N-保护基团如叔丁氧羰基、苄氧基羰基或9-芴基甲氧基羰基保护。该保护基团可通过常规方法如用三氟乙酸处理来除去。

适宜地，对于在式(I)、(IIA)或(IIB)化合物上的R⁹的连接位置的对映异构体的拆分通过任何常规方法如制备型高效液相色谱进行。

式(IIA)化合物可通过下列方案1制备：

方案1

TsCl＝甲苯磺酰氯

TsO＝甲苯磺酸基(tosylate)

该溴代-二氮杂萘(1)在Suzuki条件下转化为甲基乙烯基-类似物(2)。该甲基使用NaOCl官能化得到氯代类似物(3)，将其环化得到乙烯基三环二氮杂萘酮(naphthyridone)(4)。将该乙烯基三环二氮杂萘酮(4)转化为二羟基化的类似物(5)使用AD-mix-α和/或β(其为锇酸钾、铁氰化钾和以手性方式对烯烃进行二羟基化已知的手性生物碱-衍生的配体的混合物)，参见K.B.Sharpless等人，Chem.Rev.，1994，94，2483。也可使用其他的手性配体，如二氢奎宁蒽醌-1，4-二基二醚。将该伯羟基方便地官能化为式(IIA)化合物的离去基团W，例如用甲苯磺酰氯/氧化二丁基锡官能化为甲苯磺酸酯(6)。

本发明还提供了式(5)化合物。

其中R^1a为F且R^1b为H的乙烯基衍生物(4)的另一合成路线如方案2中所示：

方案2

DMSO＝二甲亚砜

(CH₂O)_n＝多聚甲醛

BOC＝叔丁氧基羰基

Ms₂O＝甲基磺酸酐

通过使用丙二酸二甲酯的钠盐的铜催化的反应，可将溴化物如(1)转化为二酯(8)，而三氟甲磺酸酯如(7)可通过与丙二酸二甲酯的钠盐反应直接转化为(8)。使用Krapcho等人的条件(J.Org.Chem.，1987，52(9)，1880)，通过将二酯和LiCl的混合物在DMSO/水中，于100℃加热24小时，可将该二酯转化为单酯(9)。与多聚甲醛缩合得到丙烯酸酯(10)，然后依次使用氨基哌啶(Z为H或OH)进行Michael加成，将酯还原为醇，并环化，得到三环衍生物(11)。然后进行酸-催化的retro-Michael反应，得到目标烯烃(4)，然后可根据方案1中所述的方法将其进行进一步的转化。

R^1a、R^1b、R²、A、R⁵和R⁹的转化(interconversion)是常规的。在含有任选保护的羟基基团的化合物中，适宜的可被除去而不影响分子中的其余部分的常规羟基保护基团包括酰基和烷基甲硅烷基。可通过常规方法除去N-保护基团。

R⁹羟基可在合成中的任一化合物上(at any point)转化为氟，如在中间体(5)上，通过用氟化试剂如三氟化(二乙基氨基)硫处理转化为氟。

R^1a和R^1b基团的转化可方便地在式(I)化合物，或更早地在中间体如中间体(5)或在其中R²⁰为氢的式(IIB)的游离胺上进行。例如R^1a或R^1b甲氧基通过使用锂和二苯基膦(描述于Ireland等人，J.Amer.Chem.Soc.，1973，7829中的通用方法)或HBr处理而转化为R^1a或R^1b羟基。羟基使用适宜的含有离去基团的烷基衍生物(如卤化物)进行烷基化，得到R^1a或R^1b取代的烷氧基。通过常规的方法使R^1a卤素转化为其它的R^1a，例如使用金属催化(例如使用铜)的偶联反应，转化为羟基、烷基硫基(alkylthiol)(通过硫醇)和氨基，综述参见Synlett(2003)，15，2428-2439和Angewandte Chemie，International Edition，2003，42(44)，5400-5449。R^1a氟可通过在甲醇中用甲氧基钠处理转化为甲氧基。R^1b卤素如溴可通过M.A.Alonso等人，Tetrahedron 2003，59(16)，2821或P.Imming等人，Eur.J.Med.Chem.，2001，36(4)，375中的一般方法引入。R^1b卤素如氯可通过用N-氯琥珀酰亚胺处理来引入。R^1a或R^1b卤素如溴可通过用氰化亚铜(I)于N，N-二甲基甲酰胺中处理转化为氰基。R^1a或R^1b羧基可通过R^1a或R^1b氰基的常规水解得到，并且该羧基通过常规的还原转化为羟基甲基。

式HA-N(R²⁰)R²′、(1)和(7)的化合物为已知化合物或可用类似于已知化合物的方法而制备，参见例如WO2004/035569、WO2004/089947、WO02/08224、WO02/50061、WO02/56882、WO02/96907、WO2003087098、WO2003010138、WO2003064421、WO2003064431、WO2004002992、WO2004002490、WO2004014361、WO2004041210、WO2004096982、WO2002050036、WO2004058144、WO2004087145、WO2003082835、WO2002026723、WO06002047和WO06014580。

如方案3中所示，式(XIII)(HA-NH(R²⁰)的羟基-氨基甲基吡咯烷(A为(ii)，X为CR⁴R⁸，W¹为化学键，W²和W³都为CH₂，R⁴和R⁷为H，且R⁸为OH)可由双保护的手性中间体(XVI)制备，并通过制备型HPLC分离。所述苄氧基羰基保护基团通过氢化除去，得到(XV)，并且氨基官能团转化为三氟乙酰胺(XIV)。所述叔丁氧基羰基(Boc)保护基团使用HCl除去，得到吡咯烷盐酸盐(III)。

方案3

DMAP＝4-二甲基氨基吡啶

中间体(XVI)可通过方案4的一般方法制备：

方案4

试剂和条件：(a)N-羟基苄基胺盐酸盐，多聚甲醛，甲苯，EtOH，80℃；(b)Pd(OH)₂，H₂(50psi)，MeOH，室温；(c)苄氧基羰基-琥珀酰亚胺，Et₃N，二氯甲烷，室温。

在方案5中，式(XVII)(HA-NH(R²⁰)的氨基甲基吡咯烷(A为(ii)，X为CR⁴R⁸，W¹为化学键，W²和W³都为CH₂，R⁴、R⁷和R⁸都为H)可由市售可得的Boc-保护的氨基甲基吡咯烷制备，并转化为三氟乙酰胺。

方案5

MAP＝4-二甲基氨基吡啶

式(XXI)(HA-NH(R²⁰)的氨基甲基吗啉中间体(A为(ii)，X为O，W¹、W²和W³各自为CH₂)可由手性的二氯苄基中间体(XXIII)(WO2003082835)(方案6)通过下面方法制备：首先用Boc-保护基团保护氨基官能团，得到(XXII)，通过氢化除去二氯苄基基团，得到(XXI)，用苄氧基羰基保护吗啉N-原子(允许通过色谱法纯化)，得到(XX)，并氢化得到所需的吗啉衍生物(XXI)。

方案6

式(I)化合物的更详细制备描述在实施例中。

通过类似于其它的抗菌剂(例如其它的抗结核药)的方法，本发明中有用的化合物可配制成以任何方便的途径给药于人或兽药的剂型。

因此，在另一方面，本发明提供了药物组合物，其包含式(I)化合物或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物以及可药用载体、稀释剂或赋形剂。

本发明的药物组合物包括适于口服、局部或肠胃外使用的那些剂型，并可用于治疗哺乳动物包括人的细菌感染。

该组合物可配制成通过任何途径给药。该组合物可为片剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、锭剂、乳膏，或液体制剂，如口服或无菌肠胃外溶液或悬浮剂。

本发明的局部制剂可以例如软膏剂、乳膏或洗剂、眼膏剂和眼或耳滴剂、可浸渗的敷料(impregnated dressings)和气雾剂的形式存在，并可含有适宜的常规添加剂如防腐剂、有助于药物渗透的溶剂，和在软膏剂和乳膏中的软化剂。

该制剂也可含有相容的常规载体，如乳膏或软膏剂基质和用于洗剂的乙醇或油醇。此类载体可以以制剂的从约1％至高达约98％的量存在。更常见地，它们构成了制剂的高达约80％。

口服给药的片剂和胶囊剂可为单位剂量制剂形式，并可以含有常规赋形剂，例如粘合剂，如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨糖醇、西黄蓍胶或聚乙烯吡咯烷酮；填充剂，如乳糖、蔗糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨糖醇或甘氨酸；压片润滑剂，如硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇或二氧化硅；崩解剂，如马铃薯淀粉；或可接受的润湿剂，如十二烷基硫酸钠。片剂可以按照通常药物实践中公知的方法进行包衣。口服液体制剂可以是例如含水或含油混悬剂、溶液、乳剂、糖浆剂或酏剂形式，或者也可以是在使用前用水或其它适宜载体重新配制(reconstitution)的干燥产品形式。这种液体制剂可以含有常规添加剂，例如助悬剂，如山梨糖醇、甲基纤维素、葡萄糖糖浆、明胶、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、硬脂酸铝凝胶或者氢化食用脂肪；乳化剂，如卵磷脂、脱水山梨糖醇单油酸酯或阿拉伯胶；非水载体(其可包括食用油)，如杏仁油，酯油(oily ester)如甘油、丙二醇或乙醇；防腐剂，如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯，或者山梨酸，并且如果需要的话，还含有常规调味剂或着色剂。

栓剂可含有常规的栓剂基质，例如可可脂或其它的甘油酯。

对于肠胃外给药，使用所述化合物和无菌载体(vehicle)，优选为水，制备液体单位剂型。取决于所用的载体和浓度，该化合物可悬浮于或溶解于所述载体中。在制备溶液中，该化合物可溶于注射用水中，并在填充至合适小瓶或安瓿前过滤除菌，然后密封。

有利地，可将试剂如局部麻醉剂、防腐剂和缓冲试剂溶于载体中。为了增加稳定性，可将该组合物填充至小瓶中后冷冻，并在真空下除去水。然后将此冻干的粉末密封在小瓶中，在使用前，可使用随带的小瓶注射用水来重新配制该液体。肠胃外混悬剂可以基本上相同的方法制备，除了将化合物悬浮于载体中，而不是溶解在其中，并且除菌不能通过过滤来实现。该化合物可在悬浮于无菌载体前通过暴露于环氧乙烷中来除菌。有利地，组合物中包括表面活性剂或湿润剂以有利于该化合物的均匀分布。

根据给药方法，该组合物可含有从0.1重量％，优选10-60重量％的活性物质。当该组合物包含剂量单位时，各单位优选含有50-1000mg的活性组分。对于成人治疗使用的剂量优选为每天100至3000mg，例如每天1500mg，这取决于给药的途径和频率。该剂量相当于每天1.5至50mg/kg。合适的剂量为每天5至30mg/kg。

式(I)化合物在本发明的组合物中可为仅有的治疗剂，或其与其它治疗剂组合(combination)。因此，在另一方面中，本发明提供组合，其包括式(I)化合物或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物，以及其它治疗剂。

当式(I)化合物或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物与具有抗相同疾病状态活性的第二种治疗剂组合使用时，化合物各自的剂量可不同于当单独使用该化合物时的剂量。本领域的技术人员会容易地知道适宜的剂量。可以理解的是，在治疗中使用的所需的本发明化合物的量会随着正在治疗的病症的性质，以及患者的年龄和状况而变化，且最终由主治医师或兽医决定。

该组合可适宜地以药物制剂的形式存在。包含该组合和可药用载体的药物制剂在制备用于治疗哺乳动物的结核病的药物中的用途构成了本发明的另一方面。此类组合的各个组分可依次或同时以分开的或组合的药物制剂通过任何适宜的途径给药。

当依次给药时，本发明的化合物或第二治疗剂可以首先给药。当同时给药时，该组合可以以相同或不同的药物组合物给药。当在相同制剂中组合时，可以理解，这两种化合物必须是稳定的且彼此以及与制剂的其它组分是可配伍的。当分开配制时，它们可以任何适宜的制剂，便利地以对于本领域中此类化合物已知的类似的方式提供。

下列的实施例示例性地说明了某些式(I)化合物的制备，以及某些式(I)化合物抗结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)的活性。

实施例和试验

概要

实施例中的缩写：

rt＝室温

MS＝质谱

ES＝电喷雾质谱

LCMS或LC-MS＝液相色谱质谱

HPLC＝高效液相色谱(Rt指保留时间)

MDAP或Mass directed autoprep＝质谱控制自动制备型HPLC(massdirected制备型HPLC)(使用ZQ质谱仪(Waters))

一些试剂也在本文中缩写。DMF指的是N，N-二甲基甲酰胺，TFA指的是三氟乙酸，THF指的是四氢呋喃，Pd/C指的是钯/炭催化剂和DCM指的是二氯甲烷。

质子核磁共振(¹H NMR)波谱以400或250MHz记录，并且化学位移以距内标四甲基硅烷(TMS)的低磁场的百万分之几(δ)记录。NMR数据的缩写如下：s＝单峰，d＝二重峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰，dd＝双二重峰，dt＝双三重峰，app＝表观(apparent)，br＝宽峰。CDCl₃为氘代氯仿。质谱使用电喷雾(ES)离子化技术而获得。所有的温度以摄氏度记录。MP-碳酸盐是指大孔聚苯乙烯碳酸甲基三乙基铵(macroporous triethylammoniummethylpolysryrene carbonate)(Argonaut Technologies)。Chiralpak AD和AD-H柱包含用于制备柱的硅胶(5μm粒径AD-H，21x250mm；20μM粒径AD，101.6x250mm)，其涂覆有直链淀粉三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)(ChiralTechnologies USA)。Chiralcel OD柱包含用于制备柱的硅胶(20μm粒径；77x240mm)，其涂覆有纤维素三(3，5-二甲基苯基氨基甲酸酯)。测定的保留时间取决于色谱方法的准确条件。如果在下面的实施例中标出，它们表示洗脱顺序。

AD mix α通过将锇酸钾(K₂OsO₄.2H₂O)(0.52g)、(3a，9R，3″′a，4″′b，9″′R)-9，9′-[1，4-二氮杂萘二基双(氧基)]双[6′-(甲氧基)-10，11-二氢奎宁定(dihydrocinchonan)][(DHQ)₂PHAL](5.52g)混合，然后加入铁氰化钾[K₃Fe(CN)₆](700g)和粉末碳酸钾(294g)而制备。将该混合物在混合器中搅拌30分钟。这得到约1kg的AD mix α，其从Aldrich可商购(参见K.BarrySharpless等人，J.Org.Chem.，1992，57(10)，2771)。AD mix β为使用(9S，9″′S)-9，9′-[1，4-二氮杂萘二基双(氧基)]双[6′-(甲氧基)-10，11-二氢奎宁定][(DHQD)₂PHAL]制备的相应的混合物。当提及AD mix α/β时，指的是α和βmix的1∶1混合物。

为由酸洗涤的硅藻土组成的过滤助剂，且其为Manville Corp.，Denver，Colorado的商标。

Chiralcel OD为基于多糖的手性HPLC柱(Chiral Technologies Inc.)。

涉及金属氢化物包括氢化锂、氢化铝锂、氢化二-异丁基铝、氢化钠、硼氢化钠和三乙酰氧基硼氢化钠的反应是在氩气下进行的。

本领域的技术人员应当理解，如果需要可使用乙酸乙酯代替特定的溶剂进行萃取步骤。

差示扫描量热法(DSC)

DSC是在TA Instrument Q100型差示扫描量热仪上进行。将样品称重并置于Al DSC盘中。将该盘使用供应商(the ventor)提供的手压机(hand press)密封。以15℃/分钟的速率将样品从25℃升温(ramp)至300℃。

X-射线粉末衍射(XRPD)

PXRD General Area Detector Diffraction System

样品使用下列参数扫描：

扫描范围：2-56°2-θ

发生器功率：40kV，40mA

辐射源：Cu Ka

扫描类型：耦合扫描(Coupled scan)

帧数(Number of frames)：4帧

每帧时间：5分钟

样品振幅(Oscillation)：0.1-0.5mm振幅，这取决于样品大小

检测器距离：25cm

滤色片/单色器：Single Goebel Mirror

检测器类型：General Area Detector Diffraction

如被技术熟练化学技术人员所理解，以与其它制备的相似方法或按其它制备的通用方法进行的制备可以包括常规参数如时间、温度、处理条件的变化、试剂量的微小变化等。

实施例1(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)盐酸盐

(a)吡啶-三(1-甲基乙烯基)环硼氧烷(1∶1)

在氩气下于室温下，将镁屑(20.83g，868mmol)在THF(1.2升)中的悬浮液用2-溴丙烯(20ml)处理，并稍许加热来引发该反应。在反应开始时，停止外部的加热，并用大约1.5小时的时间，通过以三批加入另外的2-溴丙烯(53ml)将反应混合物保持在约50-60℃。将含有异丙烯基溴化镁的混合物冷却至环境温度。该方法的其余步骤按照对相应的吡啶-三(三乙烯基)环硼氧烷(1∶1)所述的进行(J.Org.Chem.2002，67，4968)。在氩气下，将异丙烯基溴化镁的溶液(大约826mmol，在1.2升的THF中)和另外一批异丙烯基溴化镁(250mmol)在500mlTHF(市售可得的物质)中的溶液加入到冷却至-78℃下的硼酸三甲酯(217ml，1937mmol)在1升THF中的溶液中。加入完成(大约1小时)后，将混合物于-78℃保持1小时，随后用5分钟加入1M HCl(550ml)。将混合物温热至环境温度，然后加入盐水(500ml)和乙醚(500ml)。将水相进一步用乙醚(3x 500ml)萃取，并将合并的有机萃取液用水(500ml)、盐水(500ml)洗涤，干燥(硫酸钠)并蒸发成大约1/8的体积。加入吡啶(220ml)，并将混合物搅拌4小时。蒸发得到油状物(86.4g，83％)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.80(9H，s)，5.45(3H，s)，5.65(3H，s)，7.62(2H，t)，8.02(1H，m)，8.85(2H，d).

可使用催化量的碘引发2-溴丙烯与镁的反应。在加入吡啶前通过

过滤可将过量的硼酸和其衍生物从反应混合物中除去。

(b)7-氟-8-(1-甲基乙烯基)-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘

方法A

将8-溴-7-氟-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘(8.53g，33.2mmol)(对于合成，参见WO2004058144，实施例53(g))和四(三苯基膦)合钯(0)(1.92g，1.7mmol)在除气的二甲氧基乙烷(300ml)中的溶液在氩气下搅拌30分钟。加入碳酸钾(4.58g，33.2mmol)、水(90ml)和吡啶-三(1-甲基乙烯基)环硼氧烷(1∶1)(3.8g，13.3mmol)，并将混合物加热回流10小时。将混合物冷却，并用水(500ml)和乙醚(500ml)处理。分离各相，并将水相进一步用乙醚(3x 500ml)萃取。将合并的有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-50％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到黄色油状物(6.9g，95％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 219(MH⁺)。

方法B

向烧瓶中装填THF(50ml)和镁屑(1.9g，2eq)，排除空气。将混合物于室温下搅拌30-60分钟。加入第一批10-20％的2-溴丙烯(6.9ml，9.4g，总共1.3eq)的THF(20mL)溶液。使用催化量的碘并加热至40℃以引发Grignard反应，然后使其自然冷却。当Grignard反应开始时，观察到升温。加入剩余的2-溴丙烯，同时保持温度低于62℃。加入后，将生成的混合物保持在～50℃，并于～47℃加热以确保反应完成。

向单独的烧瓶中装填THF(20ml)。以一批加入固体氯化锌(20g，2.5eq)，观察到温度升高。将混合物冷却至～10℃。

将上述新近制备的Grignard试剂(在THF中)以保持温度低于25℃的速度慢慢地转移到ZnCl₂混合物中。将生成的混合物温热至室温，加入另外20mlTHF，并于室温下搅拌～2小时。

向上述反应混合物中以一批加入固体四(三苯基膦)合钯(0)[Pd(PPh₃)₄，1.3g，2％mol]并以一批加入固体8-溴-7-氟-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘(15.0g，1cq)。没有观察到发热。将反应混合物加热回流直至使用HPLC监测反应完成。

将该反应冷却至～10℃，并用100ml的10％柠檬酸水溶液终止(放热)。加入乙酸乙酯(100ml)用于萃取。将有机层用100ml水洗涤，并将水层用100ml乙酸乙酯萃取。将合并的有机溶液浓缩至干，得到深色油状物，并进一步通过硅胶柱纯化，使用庚烷/乙酸乙酯(1/0，3/1，2/1)作为洗脱液，得到产物(11.8g，～93％产率，并且根据HPLC的面积比确定为～97％纯度)。

可用溴化锌代替氯化锌，并且钯催化剂的浓度可降低至0.5％。可使用4％柠檬酸水溶液代替水进行洗涤步骤。

(c)8-[1-(氯甲基)乙烯基]-7-氟-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘

方法A

在氩气下，将7-氟-8-(1-甲基乙烯基)-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘(7.3g，33.5mmol)的叔丁醇(500ml)溶液用氯化铈(III)七水合物(12.5g，33.5mmol)处理，随后滴加次氯酸钠溶液(12％w/v，21.1ml，33.5mmol)。形成黄色悬浮液。15分钟后，加入另外的次氯酸钠(12％w/v，21.1ml，33.5mmol)。搅拌10分钟后，加入饱和的亚硫酸钠水溶液(200ml)。搅拌5分钟后，加入水(500ml)，并将混合物用乙醚(3x500ml)萃取。将合并的有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-50％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到产物(4.9g，58％)。

可通过用盐水和乙酸乙酯洗涤代替经硫酸镁干燥，将有机萃取物干燥。

方法B

将7-氟-8-(1-甲基乙烯基)-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘(31.86g，146mmol)的叔丁醇(2L)溶液用氯化铈(III)七水合物(54.4g，146mmol)处理，搅拌15分钟，然后用15分钟加入次氯酸钠溶液(12％w/v，139ml，221mmol)来处理。搅拌15分钟后，加入饱和的亚硫酸钠水溶液(800ml)。再搅拌30分钟后，加入水，并将混合物用乙醚(1x500ml，2x2L)萃取。将合并的有机萃取液干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-100％二氯甲烷的己烷溶液梯度洗脱，得到产物(17.5g，48％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 253(MH⁺)。

(d)3-氟-4-亚甲基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮

将8-[1-(氯甲基)乙烯基]-7-氟-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘(4.9g，19.5mmol)和碘化钠(29g，195mmol)在丙酮(100ml)中的混合物加热回流18小时。将混合物蒸发，并将残余物在水(200ml)和二氯甲烷(200ml)之间分配。将水相进一步用二氯甲烷(2x200ml)萃取，并将合并的二氯甲烷萃取物用水(2x 200ml)洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发。将生成的固体用乙酸乙酯(50ml)研磨，并过滤，并用乙酸乙酯(20ml)洗涤，得到褐色固体。然后将该物质溶于乙酸乙酯中，并通过二氧化硅填料过滤。蒸发得到固体(1.4g，36％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 203(MH⁺)。

如果必要的话，可将产物用正己烷处理并沉淀出来，并将固体通过与冷的丙酮一起搅拌来纯化。

(e)3-氟-4-羟基-4-(羟基甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮

方法A

将3-氟-4-亚甲基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(37.1g，183mmol)、叔丁醇(1.5升)、水(1.5升)和AD mixα(Aldrich)(246g)的混合物在室温下剧烈搅拌16小时。加入亚硫酸钠(300g)，并将混合物搅拌30分钟。分离各相，并将水相用10％甲醇的乙酸乙酯溶液(总体积1升)萃取三次。将合并的有机萃取液干燥并蒸发，得到固体(45g，100％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 237(MH⁺)。

方法B

向1L的3-颈烧瓶中加入亚铁氰化钾(III)(24.50g)、碳酸钾(颗粒，10.25g)、锇酸钾(VI)二水合物(25mg)和水(125ml)。将此混合物于室温下搅拌10分钟，向其中加入预先溶于2-丁醇(125ml)中的二氢奎宁蒽醌-1，4-二基二醚((DHQ)₂AQN)(200mg)溶液。将生成的混合物搅拌15分钟，向其中加入3-氟-4-亚甲基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(4.60g)。将生成的混合物在环境温度下搅拌18小时。向该混合物中加入Na₂SO₃(37.25g)，并在室温下搅拌30分钟。向该混合物中加入水(100mL)和甲醇(10mL)，用3x250mL的乙酸乙酯萃取。将合并的乙酸乙酯部分用盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并真空浓缩，得到树胶状的标题化合物。手性HPLC表明4R/4S的比例为13.3/86.7。

在上述与(DHQ)₂AQN的反应中，可使用叔丁醇代替2-丁醇，并且在萃取步骤中还可用叔丁醇代替乙酸乙酯。如果必要的话，可将产物溶于温热的甲苯中，并冷却沉淀出固体产物。

(f){1-[(3-氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

方法A

将3-氟-4-羟基-4-(羟基甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(25.09g，106.3mmol)在二氯甲烷(1升)、THF(1升)和N，N-二甲基甲酰胺(100ml)中的溶液用三乙胺(22.7ml，159mmol)、对甲苯磺酰氯(20.2g，106.3mmol)和氧化二丁基锡(1.32g，5.23mmol)处理。在室温下搅拌16小时后，加入水(400ml)，然后分离有机相，用碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，干燥并蒸发，得到含有一些相应的环氧化物和DMF的粗品的甲苯磺酸酯(大约3∶1的4S∶4R)(43.8g)。将该物质溶于乙醇(1.1升)中，并用碳酸钠(33.4g)和4-哌啶基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(28.3g，142mmol)处理。将混合物搅拌过周末，然后蒸发几乎至干。将残余物在水和5％甲醇的二氯甲烷溶液之间分配。分离各相，并将水相进一步用两份的5％甲醇的二氯甲烷溶液萃取。将合并的有机萃取液干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化(2kg)，用2-5％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到产物(39.94g，90％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 419(MH⁺)。

方法B

将3-氟-4-羟基-4-(羟基甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(总共3.65g，其中1.32g具有对映异构体比例4R/4S：15.7/84.3以及2.33g具有对映异构体比例4R/4S：17/83)、甲苯磺酰氯(2.94g)、氧化二丁基锡(IV)(192mg)、四氢呋喃(无水的，146mL)、二氯甲烷(无水的，146mL)、三乙胺(3.31mL)和N，N-二甲基甲酰胺(无水的，14.6mL)在室温下搅拌成悬浮液18小时。将混合物用水、饱和的NaHCO₃水溶液和盐水洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，得到相应的甲苯磺酸酯。

将上述的甲苯磺酸酯、4-哌啶基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(4.13g)、Na₂CO₃(4.87g)在乙醇(160mL)中的混合物以悬浮液在室温下搅拌2.5天。将该混合物与另外一批由1.50g的3-氟-4-羟基-4-(羟基甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(其中对映异构体比例4R/4S：17/83)类似制备的产物合并。将生成的混合物过滤，并将Na₂CO₃滤饼用乙醇洗涤。将滤液真空浓缩，并溶于300mL的5％甲醇的二氯甲烷溶液中。将生成的溶液用饱和的NaHCO₃水溶液(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并真空浓缩，得到胶状物。在二氯甲烷中研磨，得到1.27g的标题化合物(14％产率，对映异构体比例4R/4S：15/85)。将滤液通过硅胶柱色谱法纯化，得到2.00g的标题化合物(22％产率，对映异构体比例4R/4S：52/48)。将上述Na₂CO₃滤饼用水处理，用5％甲醇的二氯甲烷溶液萃取，得到3.85g的标题化合物(42％产率，对映异构体的比例：0/100)。

将2.0g标题化合物(对映异构体的比例4R/4S：15/85)溶于45mL的热的乙醇中。将该溶液在室温下保持1.5天，在0℃下冷冻5小时，在-20℃下冷冻1天，并过滤，得到1.12g的物质，测定其对映异构体比例4R/4S为0/100。

将1.050g的标题化合物(其具有对映异构体比例4R/4S为15/85)和400mg的标题化合物(其具有对映异构体比例4R/4S为52/48)(所测的该生成的混合物的对映异构体比例4R/4S为24/76)溶于40mL的热的乙醇中。将该溶液逐渐冷却至室温，在环境温度下保持2.5天，在0℃下冷冻15分钟，过滤，并用3x 1.5mL冷的乙醇洗涤，并干燥，得到580mg标题化合物(其具有所测的对映异构体比例4R/4S为0/100)。滤液具有测定的对映异构体比例4R/4S为48/52。

与对甲苯磺酰氯的反应以及与4-哌啶基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯的反应都可以在二氯甲烷中进行。在与4-哌啶基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯的反应中，可使用碳酸钾代替碳酸钠。如果必要的话，可在该反应中加入三乙胺以促使反应完成。

由粗产物制备高对映异构体纯度(4S)的标题化合物的纯化方案如下：

1.将甲醇，随后将水加入到反应物料中，并搅拌5-10分钟。

2.分离有机层。

3.用10％甲醇的DCM溶液萃取水层。

4.合并有机层，并用盐水溶液洗涤。

5.在25-35℃下减压除去溶剂至少于其体积的1/10。

6.将10％乙酸乙酯的正己烷溶液加入到该残余物中。

7.在室温下搅拌10-12小时。

8.过滤该固体，并在真空下于50-60℃干燥6-8小时。

9.加料步骤8的产物和乙腈。

10.将反应物料于60-70℃搅拌1-2小时。

11.将反应物料在室温下搅拌10-12小时。

12.升温至50-60℃，并搅拌2-3小时，或者直至通过分析型手性hplc表明由过滤样品所得到的固体中存在的不希望的异构体：＜1.0％。

13.于50-60℃过滤分离的固体，并用乙腈洗涤该固体。

14.将固体吸干30-45分钟。

15.在真空下在干燥箱中于50-60℃干燥该物质。

在下面的步骤(g)中可以使用生成的{1-[(3-氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸(4S)-1，1-二甲基乙基酯，而排除使用手性色谱的步骤

(g)4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮

将{1-[(3-氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(47.94g，115mmol)的二氯甲烷/甲醇(870ml/610ml)溶液在冰浴中冷却，并用盐酸的1，4-二噁烷溶液(4M，1.5升)处理。将生成的混合物于室温下搅拌1.5小时，然后部分地蒸发。过滤，用少量二氯甲烷洗涤，并真空干燥，得到固体的标题化合物的盐酸盐(51.55g)。将标题化合物盐酸盐(50.5g)溶于水(500ml)中，并用饱和的碳酸钠水溶液处理直至pH为8(约100ml)。将混合物蒸发至干，并将生成的固体用15％甲醇的氯仿溶液(3x500ml)萃取。将萃取物分别蒸发，得到22g，10g和4g的固体物质，通过光谱分析表明它们基本上是相同的。

将标题化合物(96.5g)在Chiralpak AD柱上进行法色谱纯化，用乙腈∶异丙醇∶异丙胺80∶20∶0.1洗脱，首先得到E1对映异构体(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(66.1g)，然后得到E2对映异构体(4R)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(24.4g)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 319(MH⁺)。

或者，该反应可使用浓HCl的二氯甲烷溶液作为溶剂进行。可从丙酮中沉淀出盐酸盐形式的产物，在将其用无水乙酸钠中和后，将其直接用于下面的步骤(h)中。

(h)标题化合物

方法A

将4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(5.7g，18mmol)和2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-甲醛(对于合成，参见WO2004058144，实施例2(c)或WO03/087098，实施例19(d))(3.0g，18mmol)在二氯甲烷/甲醇(75ml/7ml)中的溶液在氩气下在冰浴中冷却，搅拌，并用三乙酰氧基硼氢化钠(7.6g，35.9mmol)处理。加入另外的二氯甲烷/甲醇(50ml/5ml)，并将混合物于0℃搅拌1小时。加入饱和的碳酸氢钠水溶液(150ml)，并然后加入盐水(100ml)。将生成的混合物用10％甲醇/二氯甲烷(2x100ml)，然后用20％甲醇/二氯甲烷(100ml)萃取。将有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发，得到黄色的泡沫状物质(7.6g)。将其进行硅胶色谱法纯化，用0-25％2M氨的甲醇溶液/乙酸乙酯洗脱，得到标题化合物的游离碱(约3∶1的4S∶4R)(6.8g，81％)。

方法B

在氩气下，将(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)(1.0g，3.14mmol)和2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-甲醛(对于合成，参见WO2004058144，实施例2(c)或WO03/087098，实施例19(d))(0.52g，3.14mmol)在二氯甲烷/甲醇(13ml/1ml)中的溶液于0℃下用三乙酰氧基硼氢化钠(1.33g，6.29mmol)处理。然后将该反应温热至室温，并于室温下搅拌2.5小时。加入饱和的碳酸氢钠水溶液(20ml)，并然后加入盐水(25ml)。将生成的混合物用10％甲醇/二氯甲烷(3x20ml)、然后用20％甲醇/二氯甲烷(15ml)、然后用10％甲醇/二氯甲烷(20ml)萃取。将有机萃取液用硫酸镁干燥，并蒸发，得到黄色固体/油状物(1.42g)。将其进行硅胶色谱法纯化，使用0-10％2M氨的甲醇溶液/二氯甲烷洗脱，得到标题化合物的游离碱(0.969g，66％)。

该还原烷基化反应也可在DMF中代替在DCM/甲醇中进行。在反应物料中可包括分子筛。

可使用10％甲醇的氯仿溶液进行该萃取，并可将产物通过从丙酮中沉淀来代替硅胶色谱法进行纯化。

标题化合物的游离碱的NMR

δH(CDCl₃，400MHz)1.35-1.55(2H，m)，1.85-1.95(2H，m)，2.37(1H，t)，2.45-2.60(2H，m)，2.85-2.92(2H，m)，2.95-3.02(1H，d)，3.20(1H，d)，3.75(2H，s)，4.25-4.29(2H，m)，4.32-4.35(2H，m)，4.38-4.42(2H，m)，6.75-6.80(2H，m)，7.88(1H，d)，8.05(1H，s)，8.35(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 468(MH⁺)。

向无定形的游离碱的标题化合物(361.0mg)中加入四氢呋喃(1.5mL)。使该加入的物质完全溶于溶剂中。将该溶液保持原状几分钟，开始出现结晶。将该浆料保持原状过夜，并使用偏振光显微镜分析该固体，其显示存在结晶物质。过滤该固体，用四氢呋喃洗涤，并于50℃在少量氮气流下在真空干燥箱中干燥过夜。所获得的结晶游离碱的重量为约271.9mg。

熔解开始：184.7℃(通过DSC测定)。

XRPD峰(以2θ度给出数值)：9.5±0.2(2θ)，12.5±0.2(2θ)，13.2±0.2(2θ)，14.7±0.2(2θ)，17.6±0.2(2θ)，19.7±0.2(2θ)。

将(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)(25mg，0.05mmol)溶液用过量的盐酸的乙醚溶液处理，得到二盐酸盐(21mg)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 468(MH⁺)。

将乙腈(500μL)加入到标题化合物的结晶游离碱(10.1mg)中。向该浆料中加入富马酸(1.0当量，0.2M的乙醇溶液)。将该浆料在HPLC管形瓶中在室温下(24℃)振荡48小时。然后将该固体过滤，并于50℃在真空干燥箱中干燥过夜，得到富马酸盐。

熔解开始：140.6℃(通过DSC测定)。

将(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)(919mg)的二氯甲烷(25ml)溶液用盐酸的乙醚溶液(1M，2.4ml，2.4mmol)处理，得到固体的标题盐酸盐(1.0g)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 468(MH⁺)。

将(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)(48g)溶于500ml回流的甲醇中。将该溶液冷却至50℃，并以一批加入6N HCl(17.1ml，1当量)。将该溶液进一步冷却至30℃，并于50℃减压浓缩。将生成的黄色固体在高真空下于50℃干燥18小时，得到54g的标题盐酸盐。

或者，该标题盐酸盐可通过用吡啶盐酸盐在甲醇中处理游离碱而制备，并且产物通过将溶液缓慢地加入到丙酮中沉淀出来。

由3-维X-射线衍射数据确定标题化合物的立体化学(通过由甲醇和甲苯中的溶液缓慢蒸发进行重结晶，得到单斜的针状结晶)为4S。

将丙酮(3000μL)加入到无定形游离碱(367.0mg)中。将生成的溶液于室温下搅拌30分钟，然后加入盐酸(1M的1，4-二噁烷溶液，1.0当量)。将该浆料在室温下搅拌过夜。过滤该固体，用丙酮洗涤，并于50℃在低氮气流量下在真空干燥箱中干燥。标题的结晶HCl盐的产率为87.5％(346.7mg)。

熔解开始：215.6℃(通过DSC测定)。

XRPD峰(以2θ度给出的数值)：5.3±0.2(2θ)，9.2±0.2(2θ)，13.4±0.2(2θ)，13.9±0.2(2θ)，14.9±0.2(2θ)，16.0±0.2(2θ)，16.6±0.2(2θ)。

将1，4-二噁烷：10体积％水(500uL)加入到标题结晶HCl盐(～30mg)中。将生成的浆料在750rpm旋涡速度下于40℃保持1小时，然后由0-40℃进行温度循环～48小时(以-1℃/min速度降温至0℃，保持1小时，以+1℃/min速度升温至40℃，保持1小时)。最后，将产物以-1℃/min速度降温至23℃，并以500rpm旋涡速度保持1小时。在室温下通过过滤分离生成的固体和上清液。将该固体在周围的实验室条件下真空干燥。

在大约229℃开始熔解/分解(通过DSC测定)。

实施例1B(4R/S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐

(a)4-甲基苯磺酸[(4R/S)-3-氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基]甲基酯

将(4R/S)-3-氟-4-羟基-4-(羟基甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(553mg，2.3mmol)(外消旋物质，按照类似于实施例1(e)方法A的方法，使用AD mix α/β，由3-氟-4-亚甲基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮制备)在二氯甲烷/四氢呋喃/N，N-二甲基甲酰胺(19ml/19ml/2ml)中的混合物用三乙胺(0.5ml，3.5mmol)、对甲苯磺酰氯(446mg，2.3mmol)和氧化二丁基锡(29mg，0.1mmol)处理，并于室温搅拌过夜。然后加入水，分离有机相，并用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤，分离，经硫酸镁干燥并真空蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-100％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液，然后使用0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱，得到白色固体(321mg，35％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 391(MH⁺)。

(b)(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)(1-{[(4R/S)-3-氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基]甲基}-4-哌啶基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

将4-甲基苯磺酸[(4R/S)-3-氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基]甲基酯(100mg，0.25mmol)、(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)-4-哌啶基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(84mg，0.24mmol)(对于合成，参见WO2004058144，实施例99(h))、碳酸钠(77mg，0.7mmol)和乙醇(2.5ml)的混合物于室温搅拌过夜，然后真空蒸发。将残余物用水处理，并将混合物用二氯甲烷萃取两次。将合并的有机萃取液经硫酸镁干燥并真空蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-100％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液，然后使用0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱，得到黄色油状物(88mg，64％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 568(MH⁺)。

(c)标题化合物

将(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)(1-{[(4R/S)-3-氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基]甲基}-4-哌啶基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(88mg，0.15mmol)的二氯甲烷(1.5ml)溶液用三氟乙酸(1.5ml)处理。搅拌1小时后，将混合物真空蒸发。将残余物溶于1∶1甲醇∶二氯甲烷中，并用MP-碳酸盐树脂处理。搅拌2小时后(pH7)，将混合物过滤，交替用甲醇和1∶1的二氯甲烷∶甲醇洗涤。蒸发，得到黄色的油状物(56mg，77％)。此外消旋物质的光谱数据与上述手性物质(实施例1)相同。将此物质用过量的盐酸(1M)的乙醚溶液处理，并将生成的固体分离，得到标题化合物(66mg)。

实施例2(4R)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2类对映异构体)二盐酸盐

将(4R)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2对映异构体)(127mg，0.4mmol)和2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-甲醛(对于合成，参见WO2004058144，实施例2(c))(66mg，0.4mmol)的氯仿/甲醇(1ml/1ml)溶液在3A分子筛存在下于65℃加热4小时。将冷却的混合物用三乙酰氧基硼氢化钠(169mg，0.8mmol)处理，并搅拌16小时。将混合物通过硅藻土过滤，蒸发，然后将残余物在20％甲醇的二氯甲烷溶液和饱和的碳酸氢钠水溶液之间分配。将水相进一步用20％甲醇的二氯甲烷溶液萃取(两次)，并将合并的萃取液干燥并蒸发。将其进行硅胶色谱法纯化，使用二氯甲烷/甲醇/饱和的氨水(95∶5∶5)洗脱，得到标题化合物的游离碱(144mg，77％)，显示其与相应的E1对映异构体(实施例1)具有相同的光谱特征。

将该物质(144mg，0.31mmol)溶于氯仿中，并用盐酸的乙醚溶液处理，然后蒸发至干，得到固体的标题化合物(163mg)。

实施例3A(4S)-4-({4-[(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己二烯-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)二盐酸盐

将(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)(40mg，0.126mmol)和2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己二烯-6-甲醛(20mg，0.126mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(2ml)溶液用三乙酰氧基硼氢化钠(80mg，0.375mmol)处理。搅拌过夜后，将混合物用饱和的碳酸钠水溶液碱化，并用10％甲醇的二氯甲烷溶液萃取。将合并的有机萃取液干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-20％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱，得到标题化合物的游离碱(25mg，42％)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.45-1.65(2H，m)，1.90-2.00(2H，m)，2.40(1H，t)，2.55-2.65(2H，m)，2.85(1H，d)，2.95(2H，m)，3.28(1H，d)，3.72(2H，s)，4.28(4H，s)，4.35(1H，d)，4.42(1H，d)，6.75-6.88(3H，m)，7.92(1H，d)，8.38(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 467(MH⁺)。

将该物质溶于二氯甲烷中，并用盐酸的1，4-二噁烷溶液处理，随后将生成的固体用乙醚研磨，得到标题化合物(22mg)。

实施例3B(4S)-4-({4-[(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己二烯-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)盐酸盐

将(4S)-4-({4-[(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己二烯-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)用盐酸(1当量)处理，并然后蒸发，得到盐酸盐。

实施例4A(4S)-4-({4-[(3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)二盐酸盐

按照类似于实施例10的方法(三乙酰氧基硼氢化钠，N，N-二甲基甲酰胺作为溶剂)，其由(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)(40mg，0.126mmol)和3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-甲醛(对于合成，参见WO2004058144，实施例126(e))制备，得到标题化合物的游离碱，为油状物(28mg，47％)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.45-1.65(2H，m)，1.90-2.10(4H，m)，2.40(1H，t)，2.50-2.65(3H，m)，2.75(1H，t)，2.85(1H，d)，3.00(2H，m)，3.28(1H，d)，3.80(2H，s)，4.20(2H，m)，4.35(1H，d)，4.45(1H，d)，6.82(1H，d)，6.98(1H，s)，7.90(1H，d)，8.06(1H，s)，8.36(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 466(MH⁺)。

将该物质溶于二氯甲烷中，并用4M HCl的1，4-二噁烷溶液处理，随后将生成的固体用乙醚研磨，得到标题化合物(27mg)。

实施例4B(4S)-4-({4-[(3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)盐酸盐

将(4S)-4-({4-[(3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)用盐酸的乙醚溶液(0.55ml)处理，并然后蒸发，得到盐酸盐。

实施例5(4R)-4-({4-[(3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2类对映异构体)盐酸盐

将(4R)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2对映异构体)(49mg，0.154mmol)和3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-甲醛(对于合成，参见WO2004058144，实施例126(e))(25mg，0.154mmol)的二氯甲烷/甲醇(2ml/0.2ml)溶液用三乙酰氧基硼氢化钠(65mg，0.31mmol)处理。1小时后，将混合物蒸发，并将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-20％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱。该部分纯化的物质按照类似方法再次进行色谱法纯化，得到标题化合物的游离碱的单乙酸盐(16mg，18％)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.50-1.70(2H，m)，1.90-2.10(7H，m)，2.40(1H，t)，2.55(1H，t)，2.65(1H，m)，2.75(2H，t)，2.85(1H，d)，3.00(2H，m)，3.28(1H，d)，3.85(2H，s)，4.20(2H，m)，4.35(1H，d)，4.40(1H，d)，6.82(1H，d)，6.98(1H，s)，7.90(1H，d)，8.06(1H，s)，8.36(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 466(MH⁺)。

通过用一当量的盐酸的1，4-二噁烷溶液处理将该物质转化为标题化合物(17mg)。

实施例6(4S)-3-氟-4-羟基-4-[(4-{[(3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)二盐酸盐

将(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)(40mg，0.126mmol)和3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-甲醛(对于合成，参见WO2004058144，实施例7(d))的N，N-二甲基甲酰胺(1ml)溶液用三乙酰氧基硼氢化钠(82mg，0.38mmol)处理。搅拌过夜后，加入另外的三乙酰氧基硼氢化钠(30mg)。4小时后，将混合物用饱和的碳酸钠水溶液碱化，并用10％甲醇的二氯甲烷溶液萃取。将合并的有机萃取液干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-20％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到标题化合物的游离碱。

δH(CDCl₃，250MHz)1.40-1.65(2H，m)，1.80-2.00(2H，m)，2.40(1H，t)，2.45-2.65(2H，d)，2.85(1H，d)，2.90-3.05(2H，m)，3.25(1H，d)，3.45(2H，s)，3.85(2H，s)，4.40(2H，q)，6.80(1H，d)，6.95(1H，d)，7.58(1H，d)，7.90(1H，d)，8.37(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 497(MH⁺)。

将该物质溶于甲醇/氯仿中，并用盐酸的1，4-二噁烷溶液处理，得到标题化合物，为淡黄色固体(43mg)。

实施例7(4R)-3-氟-4-羟基-4-[(4-{[(3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2类对映异构体)二盐酸盐

将(4R)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2对映异构体)(49mg，0.154mmol)和3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-甲醛(对于合成，参见WO2004058144，实施例7(d))(30mg)的氯仿/甲醇(1ml/1ml)溶液用3A分子筛处理，并在氩气下加热回流4小时。将冷却的混合物用三乙酰氧基硼氢化钠(65mg，0.30mmol)处理。将混合物搅拌过夜，通过硅藻土过滤，然后在20％甲醇/二氯甲烷和饱和的碳酸氢钠水溶液之间分配。将水相进一步用20％甲醇/二氯甲烷萃取，并将合并的萃取物干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用二氯甲烷/甲醇/饱和的880氨水(95∶5∶5)洗脱，得到标题化合物的游离碱，其光谱特征与相应的E1对映异构体(实施例6)的光谱特征相同。

将该物质溶于氯仿中，并用盐酸的乙醚溶液处理。蒸发，得到标题化合物(53mg)。

实施例8A(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)二盐酸盐

将(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)(40mg，0.126mmol)和2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-甲醛(23mg，0.13mmol)(对于合成，参见WO2004058144，实施例60(i))的N，N-二甲基甲酰胺(1ml)溶液用三乙酰氧基硼氢化钠(82mg，0.38mmol)处理。搅拌过夜后，将混合物用饱和的碳酸钠水溶液碱化，并用10％甲醇的二氯甲烷溶液萃取。将合并的有机萃取液干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-20％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到标题化合物的游离碱。

δH(CDCl₃，250MHz)1.40-1.65(2H，m)，1.85-2.00(2H，m)，2.38(1H，t)，2.45-2.65(2H，d)，2.85(1H，d)，2.90-3.05(2H，m)，3.15-3.22(2H，m)，3.25(1H，d)，3.78(2H，s)，4.30-4.50(4H，m)，6.80(1H，d)，7.00(1H，s)，7.90(1H，d)，8.00(1H，s)，8.37(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 484(MH⁺)。

将该物质溶于甲醇/氯仿中，并用盐酸的1，4-二噁烷溶液处理，得到标题化合物，为淡黄色固体(32mg)。

实施例8B(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)盐酸盐

将(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)用盐酸的乙醚溶液(0.46ml)处理，并然后蒸发，得到盐酸盐。

实施例9(4R)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2类对映异构体)盐酸盐

将(4R)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2对映异构体)(55mg，0.173mmol)和2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-甲醛(31mg，0.173mmol)(对于合成，参见WO2004058144，实施例60(i))的二氯甲烷/甲醇(2ml/0.2ml)溶液用三乙酰氧基硼氢化钠(73mg，0.35mmol)处理。1小时后，将混合物蒸发，并将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-20％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到标题化合物的游离碱的单乙酸盐(41mg，49％)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.50-1.70(2H，m)，1.90-2.00(5H，m)，2.38(1H，t)，2.50(1H，t)，2.65(1H，m)，2.78(1H，d)，2.95(1H，d)，3.05(1H，d)，3.15(2H，m)，3.20(1H，d)，3.85(2H，s)，4.46-4.52(4H，m)，6.80(1H，d)，7.00(1H，s)，7.88(1H，d)，7.98(1H，s)，8.36(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 484(MH⁺)。

通过用一当量的盐酸的1，4-二噁烷溶液处理将该物质转化为标题化合物(37mg)。

实施例10A(4S)-3-氟-4-羟基-4-({4-[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)二盐酸盐

将(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)(40mg，0.126mmol)和[1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-甲醛(21mg，0.126mmol)(对于合成，参见WO2004058144，实施例61)的N，N-二甲基甲酰胺(2ml)溶液用三乙酰氧基硼氢化钠(81mg，0.382mmol)处理。搅拌过夜后，加入另外的三乙酰氧基硼氢化钠，并将混合物搅拌7小时。将混合物用饱和的碳酸钠水溶液碱化，并用10％甲醇的二氯甲烷溶液萃取。将合并的有机萃取液干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-20％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱，得到标题化合物的游离碱(32mg，54％)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.38-2.03(6H，m)，2.40(1H，t)，2.50-2.68(2H，m)，2.85(1H，d)，2.90-3.05(2H，m)，3.29(1H，d)，3.83(2H，s)，4.39(2H，q)，5.73(2H，s)，6.84(1H，d)，7.20(1H，s)，7.90(1H，d)，8.01(1H，s)，8.37(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 470(MH⁺)。

将该物质溶于二氯甲烷中，并用盐酸的1，4-二噁烷溶液处理，随后将生成的固体用乙醚研磨，得到标题化合物(37mg)。

实施例10B(4S)-3-氟-4-羟基-4-({4-[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)盐酸盐

通过用一当量的5M盐酸的水溶液处理将(4S)-3-氟-4-羟基-4-({4-[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮转化为标题化合物。

实施例11(4R)-3-氟-4-羟基-4-({4-[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2类对映异构体)盐酸盐

将(4R)-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2对映异构体)(48mg，0.151mmol)和[1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-甲醛(25mg，0.151mmol)(对于合成，参见WO2004058144，实施例61)的二氯甲烷/甲醇(2ml/0.2ml)溶液用三乙酰氧基硼氢化钠(64mg，0.30mmol)处理。1小时后，将混合物蒸发，并将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-20％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到标题化合物的游离碱的单乙酸盐(38mg，54％)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.60-1.80(2H，m)，1.95-2.05(5H，m)，2.40(1H，t)，2.50(1H，t)，2.78(1H，m)，2.85(1H，d)，2.95(1H，d)，3.08(1H，d)，3.25(1H，d)，3.95(2H，s)，4.60(2H，s)，5.78(2H，s)，6.82(1H，d)，7.20(1H，s)，7.90(1H，d)，7.98(1H，s)，8.37(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 470(MH⁺)。

通过用一当量的盐酸的1，4-二噁烷溶液处理将该物质转化为标题化合物(38mg)。

实施例12(4R/S)-3-氯-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐

(a)[3-氯-6-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘-4-基]丙二酸二甲酯

方法1

于0℃，向丙二酸二甲酯(82ml，715mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(1400ml)溶液中加入氢化钠(60％在油中的分散相)(28.6g，715mmol)。将混合物搅拌0.5小时，并超声处理0.5小时，随后加入1，1，1-三氟-甲磺酸3-氯-6-甲氧基-[1，5]二氮杂萘-4-基酯(对于合成，参见WO2004058144，实施例1(b))(88.88g，238.5mmol)。然后将反应混合物于50℃加热12小时。将该反应冷却，用乙酸乙酯、水和HCl(2M)(340ml)处理。将有机相用水洗涤两次，干燥并减压除去溶剂。将残余物用甲苯处理，并搅拌1小时。过滤，得到所需的化合物。将甲苯溶液进行硅胶柱色谱法纯化，使用己烷和乙酸乙酯梯度溶液进行洗脱，得到另外的所需的化合物(总产率：62.72g，81％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 325(MH⁺)。

方法2

(i)8-溴-7-氯-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘

在0℃下向3-氯-6-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘-4(1H)-酮(3-氯-6-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘-4-醇(对于合成，参见WO2004058144，实施例1(a))(43g，204.8mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(500ml)溶液中滴加三溴化磷(23.3ml，245.8mmol)。然后将反应混合物于10℃搅拌0.5小时，并然后于25℃搅拌1小时。然后将混合物倒入到1600ml的水中，并用碳酸钾碱化为pH 7。滤出形成的固体，用水洗涤并真空干燥，得到所需化合物(51g，91％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 274(MH⁺)

(ii)[3-氯-6-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘-4-基]丙二酸二甲酯

向丙二酸二甲酯(68.6ml，600mmol)的1，4-二噁烷(600ml)溶液中加入氢化钠(60％在油中的分散体)(22g，550mmol)。将混合物于75℃搅拌2小时，然后加入8-溴-7-氯-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘(54.5g，200mmol)和溴化亚铜(I)(10g，69.7mmol)。然后将反应混合物于100℃加热12小时。将该反应冷却，用乙酸乙酯、水和HCl(2N)(175ml)处理。将水相用乙酸乙酯萃取。将有机相用水洗涤两次，干燥并减压除去溶剂。将残余物进行硅胶柱色谱法纯化，使用己烷和乙酸乙酯梯度溶液进行洗脱，得到所需化合物(63g，97％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 325(MH⁺)。

(b)[3-氯-6-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘-4-基]乙酸甲酯

向[3-氯-6-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘-4-基]丙二酸二甲酯(56g，173mmol)的二甲亚砜(1210ml)溶液中加入氯化锂(14.9g，350mmol)和水(3.2ml，180mmol)。将混合物于100℃加热16小时，然后冷却并用乙酸乙酯和水处理。将有机相用水洗涤两次，将水相用乙酸乙酯萃取，并将其用水洗涤。将合并的有机相干燥并减压除去溶剂。将残余物进行硅胶柱色谱法纯化，使用己烷和乙酸乙酯梯度溶液进行洗脱，得到所需化合物(43g，94％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 267(MH⁺)。

(c)2-[3-氯-6-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘-4-基]-2-丙烯酸甲酯

向[3-氯-6-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘-4-基]乙酸甲酯(43g，162mmol)的环己烷(1060ml)溶液中加入氯化苄基三乙基铵(71.2g，313mmol)、碳酸钾(42g，304mmol)和多聚甲醛(42g)。然后将反应混合物于80℃加热24小时，冷却并用乙酸乙酯和水处理。将水相用乙酸乙酯萃取。将合并的有机相干燥并减压除去溶剂。将残余物进行硅胶柱色谱法纯化，使用己烷和乙酸乙酯梯度溶液进行洗脱，得到所需化合物(40g，89％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 279(MH⁺)。

(d)(2R/S)-2-[3-氯-6-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘-4-基]-3-[(3R，4S)-4-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基-3-羟基-1-哌啶基}丙酸甲酯

将2-[3-氯-6-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘-4-基]-2-丙烯酸甲酯(10g)、[(3R，4S)-3-羟基-4-哌啶基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(对于合成，参见WO2004058144，实施例34(a)，顺-4-叔丁氧基羰基氨基-3-羟基-哌啶对映异构体1)(8.05g)和1，1，3，3-四甲基胍(1ml)在N，N-二甲基甲酰胺(40ml)中的混合物于80℃加热4小时，冷却并蒸发至干。进行色谱法纯化，使用甲醇/二氯甲烷洗脱，得到产物(17.4g 98％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 495(MH⁺)。

(e)((3R，4S)-1-{(2R/S)-2-[3-氯-6-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘-4-基]-3-羟基丙基}-3-羟基-4-哌啶基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

在氩气下，在-70℃下，将(2R/S)-2-[3-氯-6-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘-4-基]-3-[(3R，4S)-4-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基-3-羟基-1-哌啶基}丙酸甲酯(17.4g，35.2mmol)的THF(400ml)溶液通过滴加1M的氢化铝锂的THF溶液(40.5ml，40.5mmol)来处理，并逐渐温热至0℃。将该溶液在此温度下搅拌2小时，用水(3mL)、2N氢氧化钠(5.7ml)和水(6.6mL)处理，在室温下搅拌1小时并过滤。将滤液蒸发，并将残余物进行色谱法纯化，使用甲醇/二氯甲烷洗脱，得到产物(8.75g，53％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 467(MH⁺)。

(f)3-氯-4-亚甲基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮

在氩气下，在0℃下，将((3R，4S)-1-{(2R/S)-2-[3-氯-6-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘-4-基]-3-羟基丙基}-3-羟基-4-哌啶基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(8.75g，18.7mmol)和二异丙基乙基胺(4.9ml)的二氯甲烷(90ml)溶液用对甲苯磺酸酐(6.7g，20.6mmol)处理。3小时后，在室温下加入另外的对甲苯磺酸酐(0.7g)。2.5天后，将混合物用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤。将水相用二氯甲烷(2x)萃取，并将合并的有机萃取液干燥并蒸发。将残余物进行色谱法纯化，使用甲醇/二氯甲烷洗脱，首先得到部分纯化的标题化合物(0.84g，21％)，然后得到{(3R，4S)-1-[(3-氯-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基)甲基]-3-羟基-4-哌啶基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(3.93g，48％)。将该部分纯化的标题化合物(0.84g)进一步通过色谱法纯化，使用甲醇/二氯甲烷洗脱，得到纯的产物(0.57g)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 219(MH⁺)。

(g)(4R/S)-3-氯-4-羟基-4-(羟基甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮

将3-氯-4-亚甲基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(565mg，2.6mol)的叔丁醇/水(25ml/25ml)溶液用AD-mix α/β(3.5g/3.5g)处理，并搅拌过夜。加入亚硫酸钠(5g)，并将混合物搅拌1小时。加入乙酸乙酯、饱和的碳酸氢钠水溶液和盐水。分离各相，并将水相用乙酸乙酯再萃取两次。将合并的有机萃取液干燥并蒸发。将粗物质进行色谱法纯化，得到产物(300mg)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 253(MH⁺)。

(h)4-甲基苯磺酸[(4R/S)-(3-氯-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基)]甲基酯

将(4R/S)-3-氯-4-羟基-4-(羟基甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(300mg，1.2mmol)在二氯甲烷/四氢呋喃/N，N-二甲基甲酰胺(10ml/10ml/2ml)中的悬浮液用三乙胺(0.25ml，1.8mmol)、对甲苯磺酰氯(220mg，1.2mol)和氧化二丁基锡(15mg，0.06mmol)处理。3小时后，加入水，并分离各相。将有机相用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤，然后干燥并蒸发，得到产物(465mg)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 407(MH⁺)。

(i)(1-{[(4R/S)-3-氯-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基]甲基}-4-哌啶基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

将4-甲基苯磺酸[(4R/S)-(3-氯-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基)甲基酯(465mg，1.15mmol)、4-哌啶基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(218mg，1.1mmol)和碳酸钠(350mg，3.3mmol)在乙醇(12.5ml)中的混合物于室温搅拌过夜。1天后，加入另外的4-哌啶基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(100mg)。1小时后，将混合物蒸发，并将残余物在20％甲醇/二氯甲烷和水之间分配。将有机萃取物干燥并蒸发。将粗物质进行色谱法纯化，得到产物(410mg，82％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 435.5(MH⁺)。

(j)(4R/S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氯-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮

将(1-{[(4R/S)-3-氯-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基]甲基}-4-哌啶基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(410mg)溶于二氯甲烷/三氟乙酸(5ml/4ml)中。30分钟后，将混合物蒸发。将残余物溶于甲醇中，并用Amberlyst树脂处理。1小时后，将混合物过滤，并将滤液蒸发至干。将粗物质在硅胶上进行色谱法纯化，使用0-20％的2M氨/甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到产物(300mg，95％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 335.5(MH⁺)。

(k)标题化合物

将(4R/S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氯-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(50mg，0.15mmol)和2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-甲醛(对于合成，参见WO2004058144，实施例2(c))(25mg，0.15mmol)的氯仿/甲醇(2ml/2ml)溶液于室温下搅拌2小时，然后用三乙酰氧基硼氢化钠(96mg，0.45mmol)处理。2小时后，将反应混合物蒸发，并将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-20％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到标题化合物的游离碱的单乙酸盐(55mg，70％)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.50(1H，m)，1.62(1H，m)，1.85-1.95(2H，t)，2.00(3H，s)，2.35(1H，t)，2.50(1H，t)，2.65(1H，m)，2.85(1H，d)，2.90(1H，d)，3.05(1H，d)，3.45(1H，d)，3.85(2H，s)，4.39(2H，m)，4.45(3H，m)，4.50(1H，d)，6.84(1H，s)，6.87(1H，d)，7.90(1H，d)，8.01(1H，s)，8.40(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 484(MH⁺)。

将该物质溶于二氯甲烷中，并用盐酸的1，4-二噁烷溶液处理，随后将生成的固体用乙醚研磨，得到标题化合物。

实施例13(4R/S)-3-氯-4-({4-[(3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐

将(4R/S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氯-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(50mg，0.15mmol)和3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-甲醛(对于合成，参见WO2004058144，实施例126(e))(25mg，0.15mmol)的氯仿/甲醇(2ml/2ml)溶液于室温下搅拌2小时，然后用三乙酰氧基硼氢化钠(96mg，0.45mmol)处理。2小时后，将反应混合物蒸发，并将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-20％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到标题化合物的游离碱的单乙酸盐(70mg，88％)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.58(1H，m)，1.70(1H，m)，1.85-2.05(7H，m)，2.38(1H，t)，2.55(1H，t)，2.70-2.80(3H，m)，2.85(1H，d)，2.90(1H，d)，3.05(1H，d)，3.45(1H，d)，3.90(2H，s)，4.20(2H，t)，4.35(1H，d)，4.50(1H，d)，6.86(1H，d)，7.02(1H，s)，7.90(1H，d)，8.05(1H，s)，8.40(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 482(MH⁺)。

实施例14(4R/S)-3-氯-4-羟基-4-[(4-{[(3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐

将(4R/S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氯-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(50mg，0.15mmol)和3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-甲醛(对于合成，参见WO2004058144，实施例7(d))(29mg，0.15mmol)的氯仿/甲醇(2ml/2ml)溶液于室温下搅拌2小时，然后用三乙酰氧基硼氢化钠(96mg，0.45mmol)处理。2小时后，将反应混合物蒸发，并将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-20％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到标题化合物的游离碱的单乙酸盐(77mg，95％)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.58(1H，m)，1.70(1H，m)，1.90-2.05(6H，m)，2.38(1H，t)，2.50(1H，t)，2.75(1H，m)，2.90(1H，d)，3.10(1H，d)，3.35(1H，d)，3.50(2H ，s)，3.95(2H，s)，4.35(1H，d)，4.55(1H，d)，6.85(1H，d)，6.97(1H，d)，7.58(1H ，d)，7.90(1H，d)，8.42(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 514(MH⁺)。

实施例15(4R/S)-3-氯-4-羟基-4-({4-[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐

将(4R/S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氯-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(50mg，0.15mmol)和[1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-甲醛(25mg，0.15mmol)(对于合成，参见WO2004058144，实施例61)的氯仿/甲醇(2ml/2ml)溶液于室温下搅拌2小时，然后用三乙酰氧基硼氢化钠(96mg，0.45mmol)处理。2小时后，将反应混合物蒸发，并将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-20％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到标题化合物的游离碱的单乙酸盐(73mg，95％)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.58(1H，m)，1.68(1H，m)，1.95(2H，t)，2.00(3H，s)，2.38(1H，t)，2.50(1H，t)，2.73(1H，m)，2.85(1H，d)，2.90(1H，d)，3.08(1H，d)，3.35(1H，d)，3.92(2H，s)，4.37(1H，d)，4.50(1H，d)，5.76(2H，s)，6.85(1H，d)，7.20(1H，s)，7.90(1H，d)，8.05(1H，s)，8.42(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 486(MH⁺)。

实施例16A(4S)-3，8-二氟-4-羟基-4-({4-[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐

(a)2-氯-5-氟-6-(甲氧基)-3-吡啶甲酸

将2，6-二氯-5-氟-3-吡啶甲酸(51.12g，243mmol)的甲醇(400ml)溶液用甲氧基钠的甲醇溶液(25％w/v，100ml，535mmol)处理，并将混合物加热回流4小时。将冷却的混合物用水(400ml)处理，并使用盐酸水溶液(2M)酸化至pH为2，然后浓缩至约400ml。过滤，用水洗涤，并经P₂O₅真空干燥18小时，得到白色固体的产物(32.65g，65％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 208(MH⁺)。

(b)[2-氯-5-氟-6-(甲氧基)-3-吡啶基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

将2-氯-5-氟-6-(甲氧基)-3-吡啶甲酸(32.65g，159mmol)在甲苯/三乙胺/叔丁醇(300ml/26.4ml/75ml)中的混合物用叠氮化磷酸二苯酯(37.7ml，174.8mmol)处理，并于100℃加热2小时。将混合物用饱和的碳酸氢钠水溶液(500ml)处理，然后用乙酸乙酯(3x500ml)萃取。将合并的有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发。将残余物进行色谱法纯化，使用0-40％二氯甲烷的石油醚溶液洗脱，得到白色固体的产物(36.35g，83％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 221/223(M(-t-Bu)H⁺).

(c)[2-[1-(乙氧基)乙烯基]-5-氟-6-(甲氧基)-3-吡啶基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

将除气的[2-氯-5-氟-6-(甲氧基)-3-吡啶基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(20g，72.2mmol)的1，4-二噁烷(200ml)溶液用双(三叔丁基膦)合钯(0)(1.05g)、氟化铯(21.93g)和三丁基[1-(乙氧基)乙烯基]锡烷(26.9ml)处理，然后于100℃加热过夜。将冷却的混合物用10％氟化钾水溶液处理。搅拌0.5小时后，将混合物通过硅藻土过滤，用1，4-二噁烷洗涤。将乙酸乙酯和水加入到滤液中。分离各相，并将水相用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发。将残余物快速进行色谱法纯化，使用25-50％二氯甲烷的己烷溶液洗脱，得到淡褐色油状的产物(22.2g，99％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 313(MH⁺)。

(d)[5-氟-2-(氟乙酰基)-6-(甲氧基)-3-吡啶基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

在0℃下，在氩气下，用5分钟的时间，将[2-[1-(乙氧基)乙烯基]-5-氟-6-(甲氧基)-3-吡啶基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(6.72g，21.54mmol)、乙腈(70mL)和饱和的碳酸氢钠水溶液(15ml)的混合物通过分批加入[1-(氯甲基)-4-氟-1，4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷双(四氟硼酸盐)(Selectfluor^TM)(8.9g，25.05mmol)来处理。加入后，将混合物于室温下搅拌0.5小时，然后用饱和的碳酸氢钠水溶液(50mL)处理，搅拌10分钟，然后用水(100ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x 200ml)萃取。将合并的有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发。将残余物进行色谱法纯化，使用0-50％二氯甲烷的己烷溶液洗脱，得到白色固体的产物(3.72g，57％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 247(M(-t-Bu)H⁺).

(e)[2-[3-(二甲基氨基)-2-氟丙烯酰基]-5-氟-6-(甲氧基)-3-吡啶基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

将[5-氟-2-(氟乙酰基)-6-(甲氧基)-3-吡啶基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(3.72g，12.32mmol)的无水甲苯(20ml)溶液用{(二甲基氨基)[(1，1-二甲基乙基)氧基]甲基}二甲基胺(Bredereck′s试剂)(3.05ml，14.78mmol)处理，并于40℃加热2小时。将混合物蒸发，并将残余物用3x 200ml己烷研磨，并将剩余的固体真空干燥，得到产物(2.15g，49％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 358(MH⁺)。

(f)8-溴-3，7-二氟-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘

在氩气下，将[2-[3-(二甲基氨基)-2-氟丙烯酰基]-5-氟-6-(甲氧基)-3-吡啶基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(2.15g，6.02mmol)的三氟乙酸/二氯甲烷(20ml/20ml)溶液于室温下搅拌0.5小时并蒸发。将残余物用～50ml 2M氨的甲醇溶液处理直至碱性，并蒸发。将该残余物真空干燥，然后进行色谱法纯化，使用0-10％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱，得到固体(3.64g)，8-羟基-3，7-二氟-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘。将8-羟基-3，7-二氟-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘(3.64g)溶于N，N-二甲基甲酰胺(20ml)中，并用三溴化磷(0.68ml，7.22mmol)处理。1小时后，加入另外的三溴化磷(0.68ml，7.22mmol)。0.5小时后，将混合物用水稀释，并用固体碳酸钾碱化。过滤，并真空干燥，得到产物(0.95g，57％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 275/277(MH⁺)。

(g)3，7-二氟-8-(1-甲基乙烯基)-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘

在氩气下，将8-溴-3，7-二氟-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘(1.14g，4.15mmol)和四(三苯基膦)合钯(0)(240mg，0.21mmol)在除气的二甲氧基乙烷(40ml)的溶液中搅拌30分钟。加入碳酸钾(570mg，4.2mmol)、水(12ml)和吡啶-三(1-甲基乙烯基)环硼氧烷(1∶1)(470mg，1.66mmol)。将混合物加热回流5小时。将冷却的混合物用水(100ml)和乙醚(200ml)处理。分离各相，并将水相进一步用乙醚(2x200ml)萃取。将合并的有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-50％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到白色固体(820mg，84％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 237(MH⁺)。

(h)8-[1-(氯甲基)乙烯基]-3，7-二氟-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘

将3，7-二氟-8-(1-甲基乙烯基)-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘(820mg，3.5mmol)的叔丁醇(50ml)溶液在氩气下用氯化铈(III)七水合物(1.29g，3.5mmol)处理，随后用次氯酸钠溶液(12％w/v，2.6ml，4.2mmol)处理。搅拌30分钟后，加入饱和的亚硫酸钠水溶液(20ml)。搅拌15分钟后，将混合物用乙醚(3x200ml)萃取。将合并的有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-50％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到白色固体(320mg，34％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 271/273(MH⁺)。

(i)3，8-二氟-4-亚甲基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮

将8-[1-(氯甲基)乙烯基]-3，7-二氟-2-(甲氧基)-1，5-二氮杂萘(320mg，1.18mmol)和碘化钠(885mg)在乙腈(20ml)中的混合物加热回流20小时。将冷却的混合物蒸发，然后用水稀释，并用二氯甲烷萃取。将有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到产物(168mg，65％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 221(MH⁺)。

(j)3，8-二氟-4-羟基-4-(羟基甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮

在氩气下，将3，8-二氟-4-亚甲基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(631mg，2.9mmol)的叔丁醇/水(30ml/30ml)溶液用AD mixα(4.3g)处理。搅拌18小时后，将反应混合物用饱和的亚硫酸钠溶液(30ml)处理。搅拌10分钟后，将混合物用20％甲醇的二氯甲烷溶液(3x300ml)萃取。将有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发，得到白色固体(710mg，97％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 255(MH⁺)。

(k)4-甲基苯磺酸[3，8-二氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基]甲基酯

将3，8-二氟-4-羟基-4-(羟基甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(710mg，2.79mmol)的二氯甲烷(35ml)和四氢呋喃(35ml)溶液用三乙胺(0.58ml，4.19mmol)、对甲苯磺酰氯(586mg，3.07mmol)和氧化二丁基锡(35mg，0.14mmol)处理。在室温下在氩气下搅拌6小时后，将混合物蒸发，并加入水(200ml)。将水相用二氯甲烷(3x200ml)萃取，并将合并的有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发，得到所需的化合物(1.2g，100％)，将其不需进一步纯化而使用。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 409(MH⁺)。

(l)(1-{[3，8-二氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基]甲基}-4-哌啶基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

将粗的4-甲基苯磺酸[3，8-二氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基]甲基酯(1.2g，2.79mmol)的乙醇(40mL)溶液用碳酸钠(889mg，8.38mmol)和4-哌啶基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(615mg，3.07mmol)处理。将反应混合物于室温下在氩气下搅拌18小时，蒸发并用水(200ml)处理。将水层用10％甲醇的二氯甲烷溶液(3x 200mL)萃取，并将合并的有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发。将残余物进行色谱法纯化，使用0-10％的甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脱，得到黄色固体(1.1g，91％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 437(MH⁺)。

(m)(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3，8-二氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮

向(1-{[3，8-二氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基]甲基}-4-哌啶基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(1.11g，2.5mmol)的氯仿(20mL)溶液中加入4M HCl的1，4-二噁烷溶液(20ml)。将反应混合物搅拌15分钟，然后加入甲醇(20mL)，并搅拌15分钟，蒸发并再溶于水(40ml)中。加入碳酸钠(～1g)直至碱性。将水层用20％甲醇的二氯甲烷溶液(4x 200ml)萃取。将合并的有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发，得到粗产物(864mg，100％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 337(MH⁺)。

将一部分该物质(740mg，估计E1∶E2的比例约为3∶1)通过制备型手性

HPLC拆分成两个对映异构体E1和E2，使用Chiralpak AD柱，使用50∶50∶0.1-CH₃CN∶异丙醇∶异丙胺洗脱，得到553mg的所需E1(4S)对映异构体(＞99.5％ee)，其为第一洗脱的对映异构体。

(n)标题化合物

方法A

将4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3，8-二氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(109mg，0.32mmol)和[1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-甲醛(54mg，0.32mmol)(对于合成，参见WO2004058144，实施例61)的氯仿/甲醇(5ml/0.5ml)溶液在氩气下搅拌1小时，然后用三乙酰氧基硼氢化钠(206mg，0.97mmol)处理。搅拌10分钟后，将反应混合物用饱和的碳酸氢钠溶液(20ml)处理。将水层用10％甲醇的二氯甲烷溶液(3x 100ml)萃取。将合并的有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发。将残余物进行色谱法纯化，使用0-20％的甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脱，得到标题化合物的游离碱(对映异构体的比例未测定(uncharacterised))，为黄色固体(100mg，63％)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.50(2H，m)，1.93(2H，m)，2.42-2.60(4H，m)，2.80-3.00(3H，m)，3.25(1H，d)，3.80(2H，s)，4.40(2H，s)，5.30(1H，s)，5.74(2H，s)，7.17(1H，s)，7.64(1H，d)，7.94(1H，s)，8.41(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 488(MH⁺)。

将该物质用4M盐酸的1，4-二噁烷溶液(103ul，2当量)处理，得到标题化合物(57mg)。

方法B

在室温下，在氩气下，将(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3，8-二氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)(180mg，0.536mmol)和[1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-甲醛(89mg，0.536mmol)(对于合成，参见WO2004058144，实施例61)的氯仿/甲醇(5ml/0.5ml)溶液搅拌1小时，随后用三乙酰氧基硼氢化钠(341mg，1.608mmol)处理。搅拌1小时后，将反应混合物用饱和的碳酸氢钠溶液(20ml)处理。将水层用10％甲醇的二氯甲烷溶液(3x 200ml)萃取。将合并的有机萃取液经硫酸镁干燥并蒸发。将残余物进行色谱法纯化，使用0-20％的甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脱，最初得到82mg，然后通过将标题化合物的游离碱的混合级分再次进行色谱法纯化，又得到13mg，为黄色固体(95mg，36％)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.44-1.50(2H，m)，1.87-1.96(2H，m)，2.42-2.60(3H，m)，2.80-3.00(3H，m)，3.25(1H，d)，3.80(2H，s)，4.44(2H，s)，5.30(1H，s)，5.74(2H，s)，7.17(1H，s)，7.64(1H，d)，7.94(1H，s)，8.41(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 488(MH⁺)。

通过用HCl处理该物质转化为标题化合物(黄色固体，12mg)。

实施例16B(4S)-3，8-二氟-4-羟基-4-({4-[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮盐酸盐

将(4S)-3，8-二氟-4-羟基-4-({4-[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮的甲醇溶液用6N盐酸(1当量)处理，并然后蒸发，得到盐酸盐。

实施例17(4S)-4-({4-[(6，7-二氢-5H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)二盐酸盐

(a)4-溴-2-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-6-({[4-(甲氧基)苯基]甲基}氧基)-3(2H)-哒嗪酮和5-溴-2-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-6-({[4-(甲氧基)苯基]甲基}氧基)-3(2H)-哒嗪酮

将4-甲氧基苄醇(6.2ml，50mmol)的无水乙醚(120ml)溶液通过滴加三溴化磷(2.07ml，22mmol)处理，回流1小时，冷却，用水洗涤两次，干燥并蒸发溶剂。将由此生成的4-甲氧基苄基溴化物加入到4-溴-1，2-二氢-3，6-哒嗪二酮(对于制备，参见B.Kasnar等，Nucleosides&Nucleotides(1994)，13(1-3)，459-79或实施例30(a))(4g，21mmol)和碳酸钾(8.28g，60mmol)在无水DMF(60ml)中的混合物中并在室温下搅拌过夜。将混合物用乙酸乙酯稀释，用水洗涤3次，经硫酸镁干燥，并蒸发至小体积。滤出一些固体，并用乙酸乙酯洗涤。将滤液蒸发至干，并将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用20％乙酸乙酯/己烷，并然后使用100％乙酸乙酯洗脱。得到两种较小极性的所需产物(3.233g)，两种较大极性的所需产物(1.626g)以及它们的混合物(1.351g)。总产量6.30g，70％。

较小极性的产物MS(+ve离子电喷雾)m/z 431和433(MH⁺，15％)，121(100％)。

较大极性的产物MS(+ve离子电喷雾)m/z 431和433(MH⁺，15％)，121(100％)。

(b)(2E)-3-[2-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-6-({[4-(甲氧基)苯基]甲基}氧基)-3-氧代-2，3-二氢-4-哒嗪基]-2-丙酸丁酯和(2E)-3-[1-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-3-({[4-(甲氧基)苯基]甲基}氧基)-6-氧代-1，6-二氢-4-哒嗪基]-2-丙酸丁酯

将氩气通入到4-溴-2-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-6-({[4-(甲氧基)苯基]甲基}氧基)-3(2H)-哒嗪酮和5-溴-2-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-6-({[4-(甲氧基)苯基]甲基}氧基)-3(2H)-哒嗪酮(1.35g，3.14mmol)在无水1，4-二噁烷(7.5ml)中的混合物中20分钟。然后将该溶液用双(三叔丁基膦)合钯(0)(32mg，0.0628mmol)、三(二亚苄基丙酮)合二钯(0)(29mg，0.0314mmol)、二环己基甲基胺(0.74ml，3.45mmol)和丙烯酸正丁基酯(0.543ml，3.78mmol)处理，在氩气下于室温下搅拌1小时，并于95℃加热过夜。将混合物冷却，并在乙酸乙酯和水之间分配，分离，并将水层再次用乙酸乙酯萃取。将合并的有机溶液干燥并蒸发，并将残余物进行色谱法纯化，使用15％乙酸乙酯/己烷，并然后使用35％乙酸乙酯/己烷洗脱。

较小极性的产物((2E)-3-[2-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-6-({[4-(甲氧基)苯基]甲基}氧基)-3-氧代-2，3-二氢-4-哒嗪基]-2-丙烯酸丁酯)(838mg，55％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 479(MH⁺，70％)，121(100％)。

较大极性的产物((2E)-3-[1-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-3-({[4-(甲氧基)苯基]甲基}氧基)-6-氧代-1，6-二氢-4-哒嗪基]-2-丙烯酸丁酯)(580mg，39％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 479(MH⁺，70％)，121(100％)。

(c)3-(2-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-3，6-二氧代-1，2，3，6-四氢-4-哒嗪基)丙酸丁酯

将(2E)-3-[2-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-6-({[4-(甲氧基)苯基]甲基}氧基)-3-氧代-2，3-二氢-4-哒嗪基]-2-丙酸丁酯(838mg)的乙醇(15ml)/1，4-二噁烷(10ml)溶液用10％Pd/C(400mg)处理，并于常压和室温下，在氢气下搅拌2小时。将催化剂使用硅藻土滤出，并将滤液蒸发，并再溶于1，4-二噁烷中，并将溶液蒸发至干，得到无色油状的产物(0.56g，89％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 361(MH⁺，60％)，121(100％)。

(d)5-(3-羟基丙基)-1-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-1，2-二氢-3，6-哒嗪二酮

将3-(2-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-3，6-二氧代-1，2，3，6-四氢-4-哒嗪基)丙酸丁酯(0.56g，1.56mmol)溶于无水THF(30ml)中。将该溶液在氩气下冷却至-30℃，并通过滴加1M氢化铝锂的THF溶液(1.8ml，1.8mmol)来处理，并逐渐温热至0℃，并在冰浴中搅拌30分钟。加入2M盐酸直至pH为3，并将混合物在水和乙酸乙酯之间分配。将水层再次用乙酸乙酯萃取，并将合并的有机溶液干燥并蒸发。将残余物进行色谱法纯化，使用乙酸乙酯洗脱，得到白色固体的产物(300mg，67％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 291(MH⁺，30％)，121(100％)。

(e)4-(3-羟基丙基)-1，2-二氢-3，6-哒嗪二酮

将5-(3-羟基丙基)-1-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-1，2-二氢-3，6-哒嗪二酮(2.734g)用苯甲醚(10ml)和TFA(100ml)处理，并于40℃搅拌过夜。将溶液冷却，蒸发至干，并在高真空下保持30分钟。将残余物溶于甲醇(150mL)中，回流12小时，冷却并蒸发。将残余物在高真空下保持1小时，使用乙醚研磨，并滤出固体。在真空下干燥得到固体的产物(1.48g，92％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 171(MH⁺，100％)。

(f)6，7-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3(5H)-酮

将4-(3-羟基丙基)-1，2-二氢-3，6-哒嗪二酮(1.48g，8.7mmol)于THF(105ml)中的悬浮液保持在超声浴中5分钟，然后在氩气下冰浴中冷却，加入三苯基膦(3.67g，14mmol)，接着加入偶氮二羧酸二异丙基酯(2.76ml，14mmol)。30分钟后，蒸发溶剂，残余物保持在高真空下过夜。进行色谱法纯化，首先使用2.5％甲醇/二氯甲烷洗脱，直到氧化三苯基膦除去，然后用5％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到产物，为灰白色固体(1.049g，79％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 153(MH⁺，100％)。

(g)3-(1-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-3，6-二氧代-1，2，3，6-四氢-4-哒嗪基)丙酸丁酯

将(2E)-3-[1-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-3-({[4-(甲氧基)苯基]甲基}氧基)-6-氧代-1，6-二氢-4-哒嗪基]-2-丙酸丁酯(580mg)于乙醇(15ml)/1，4-二噁烷(5ml)中的溶液用10％Pd/C(400mg)处理，并在常压氢气下室温下搅拌2小时。使用硅藻土滤出催化剂，蒸发滤液，并再溶于1，4-二噁烷中，并将溶液蒸发至干，得到产物(0.43g，98％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 361(MH⁺，50％)，121(100％)。

(h)4-(3-羟基丙基)-1-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-1，2-二氢-3，6-哒嗪二酮

将3-(1-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-3，6-二氧代-1，2，3，6-四氢-4-哒嗪基)丙酸丁酯(0.43g，1.19mmol)溶于无水THF(20ml)中。将该溶液在氩气中冷却至-30℃，用1M的氢化铝锂的THF溶液(1.4ml，1.4mmol)逐滴处理，逐渐温热至0℃，并在冰浴中搅拌30分钟。加入2M盐酸直到pH为3，并将混合物在水和乙酸乙酯之间分配。将水层再次用乙酸乙酯萃取，干燥合并的有机溶液并蒸发。得到的固体用乙酸乙酯研磨，滤出，用乙酸乙酯洗涤并在真空下干燥，得到产物(241mg，70％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 291(MH⁺，10％)，121(100％)。

(i)2-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-6，7-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3(5H)-酮

将4-(3-羟基丙基)-1-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-1，2-二氢-3，6-哒嗪二酮(2.624g，9.1mmol)于THF(100ml)中的悬浮液保持在超声浴中15分钟。加入三苯基膦(3.57g，13.6mmol)，然后在氩气下将反应混合物冷却至-10℃，并加入偶氮二甲酸二异丙基酯(2.68ml，13.6mmol)，并将该混合物逐渐温热至室温。1小时后，蒸发溶剂。在硅胶上进行色谱法纯化，首先使用乙酸乙酯洗脱以除去副产物，然后用10％乙醇/乙酸乙酯洗脱，得到含有少量的氧化三苯基膦的产物(2.55g)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 273(MH⁺，50％)，121(100％)。

(j)6，7-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3(5H)-酮

将2-{[4-(甲氧基)苯基]甲基}-6，7-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3(5H)-酮(2.75g，10.1mmol)用苯甲醚(10ml)和TFA(100ml)处理，并在70℃下加热24小时。冷却该溶液并蒸发，将残余物溶解于2.5％甲醇/二氯甲烷中。将其施加到硅胶柱上，然后用此溶剂混合物洗脱，然后用5％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到灰白色固体的产物(1.36g，88％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 153(MH⁺，100％)。

(k)三氟甲磺酸6，7-二氢-5H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3-基酯

将6，7-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3(5H)-酮(152mg，1mmol)于DMF(2.5ml)中的溶液在氩气中用冰冷却，用氢化钠(60mg，60％油中的分散体，1.5mmol)处理，并搅拌1小时，温热至室温。加入N-苯基-二(三氟甲磺酰)亚胺(505mg，1.4mmol)，并继续搅拌2小时。混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液和水洗涤(2次)，将水相再次用乙酸乙酯萃取，并将其再用水洗涤。将合并的有机物干燥并蒸发。在硅胶上进行色谱法纯化，使用40％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到产物，为白色固体(228mg，80％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 285(MH⁺，100％)。

(l)3-乙烯基-6，7-二氢-5H-吡喃并[2，3-c]哒嗪

将氩气通入到三氟甲磺酸6，7-二氢-5H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3-基酯(228mg，0.8mmol)于1，2-二甲氧基乙烷(6.5ml)中的溶液鼓泡15分钟。加入四(三苯基膦)合钯(0)(50mg，0.0475mmol)，并将溶液在氩气中搅拌20分钟。然后混合物用碳酸钾(111mg，0.8mmol)，水(1.9ml)和2，4，6-三乙烯基环三硼氧烷：吡啶络合物(180mg，0.75mmol)(此试剂的制备，参见F.Kerins和D.F.O’Shea，J.Org.Chem.2002，67，4968-4971)处理。在80℃下搅拌2小时后，将混合物冷却并在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。分离各层，水层部分用20％甲醇/二氯甲烷萃取两次。将合并的有机溶液干燥，蒸发，残余物进行硅胶色谱法纯化，使用乙酸乙酯洗脱，得到产物，为白色固体(100mg，77％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 163(MH⁺，100％)。

(m)6，7-二氢-5H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3-甲醛

将3-乙烯基-6，7-二氢-5H-吡喃并[2，3-c]哒嗪(100mg，0.617mmol)于1，4-二噁烷(5.5ml)/水(1.1ml)中的溶液在冰/水中冷却，并用高碘酸钠(306mg，1.43mmol)和4％四氧化锇的水溶液(0.55ml)处理。1小时后混合物温热至室温，并且在搅拌总共4.75小时后，蒸发溶剂。加入1，4-二噁烷并蒸发，接着加入二氯甲烷，将混合物暂时保持在超声浴中。将整个混合物施加到硅胶柱上，使用乙酸乙酯洗脱，得到产物(55mg，54％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 165(MH⁺，100％)。

(n)标题化合物

将(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)(40mg，0.126mmol)、6，7-二氢-5H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3-甲醛(25.7mg，0.157mmol)和3A分子筛的氯仿/甲醇(1mL/1mL)溶液于65℃，在氩气下搅拌5小时，然后冷却，并用三乙酰氧基硼氢化钠(53mg，0.25mmol)处理。在室温下搅拌过夜后，将混合物通过硅藻土过滤，使用1∶1的二氯甲烷∶甲醇混合物洗涤，过滤，蒸发，并在碳酸氢钠和20％甲醇的二氯甲烷溶液之间分配。将水层萃取两次。将合并的有机层干燥并蒸发。将残余物进行色谱法纯化，使用二氯甲烷/甲醇/NH₄OH95/5/0.5的混合物洗脱，得到标题化合物的游离碱(20mg，34％)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.35-1.60(2H，m)，1.90-2.00(2H，m)，2.02-2.08(2H，m)，2.39(1H，dt，J 11.2and 2.4Hz))，2.50-2.63(2H，m)，2.82-3.01(5H，m)，3.26(1H，d，J 13.6Hz)，3.98(2H，s)，4.37-4.45(4H，m)，6.81(1H，d，J 10.0Hz)，7.28(1H，s)，7.89(1H，d，J10.0Hz)，8.37(1H，d.J1.6Hz).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 467(MH⁺)。

将该物质溶于氯仿/甲醇中，并用1M盐酸的乙醚溶液(2当量)处理，并蒸发，得到白色固体的标题化合物(30mg)。

实施例18(4S)-4-({4-[(6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)二盐酸盐

(a)2-[(3，6-氯-4-哒嗪基)硫基]乙醇

将3，4，6-三氯哒嗪(25g)于四氢呋喃(200ml)和三乙胺(19ml)中的溶液在0℃(冰浴冷却)下用2-巯基乙醇(8.33ml)处理5分钟。添加完毕后，将该混合物在室温下搅拌72小时。将该混合物与碳酸氢钠水溶液和二氯甲烷一起搅拌，并收集固体，用水、乙醚和戊烷洗涤，并在真空下干燥，得到固体(22.9g)。合并的含水部分和有机部分蒸发至一半体积，又得到固体，其按如上洗涤并干燥(5.0g)。得到固体总的产量(27.9g；91％)，由NMR确定其中含有一些溴代-类似物(5-10％)。

(b)3-氯-6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪

将2-[(3，6-氯-4-哒嗪基)硫基]乙醇(13g)(提前在50℃真空中干燥)于无水1，4-二噁烷(250ml)中的溶液用氢化锂(3g)分批处理，并在105-110℃下加热24小时。冷却反应混合物，并用冰-水终止。将溶液用5M盐酸调节至pH 10-11并蒸发。加入水，混合物用二氯甲烷萃取4次，干燥(硫酸钠)，蒸发，并在硅胶上进行色谱法纯化，使用0-100％乙酸乙酯-己烷洗脱，得到白色固体(1.61g)(含有约10％的溴代物)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 189/91(Cl MH⁺)；233/5(Br MH⁺).

δH(CDCl₃，400MHz)3.23(2H，m)，4.67(2H，m)，7.26(1H，s)(对于主要的氯-化合物)。

(c)3-乙烯基-6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪

将3-氯-6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪(1.0g)于二甲氧基乙烷(25ml)中的溶液在氩气中除气，然后加入四(三苯基膦)合钯(0)(135mg)、碳酸钾(0.695g)、2，4，6-三乙烯基环三硼氧烷吡啶络合物(0.8g)和水(3.7ml)。将该混合物在105℃下加热过夜。再加入2，4，6-三乙烯基环三硼氧烷吡啶络合物(0.4g)和四(三苯基膦)合钯(0)(30mg)，并继续加热24小时。冷却混合物，用碳酸氢钠水溶液处理，用DCM萃取4次，干燥(硫酸钠)，蒸发并在硅胶(70g)上进行色谱法纯化，使用0-100％乙酸乙酯-己烷洗脱，得到固体(0.56g)(87％纯度，通过LC-MS)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 181(MH⁺)。

(d)6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-甲醛

将3-乙烯基-6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪(320mg)于1，4-二噁烷/水(20ml/5ml)中的溶液用四氧化锇的水溶液(4％w/v，2ml)和高碘酸钠(1.08g)处理，起初在冰浴中搅拌，然后温热至室温。2.5小时后，将该混合物蒸发至干并溶于1，4-二噁烷和氯仿中。加入硅胶，将混合物蒸发至干，加至硅胶柱(50g)上并进行色谱法纯化，使用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱，得到白色固体(116mg，36％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 183(MH⁺)。

(e)标题化合物

将(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)(50mg，0.16mmol)和6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-甲醛(32mg，0.18mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(2ml)中的溶液搅拌2.5小时，然后用三乙酰氧基硼氢化钠(100mg)处理。再1.5小时后，加入另外的6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-甲醛(8mg)、三乙酰氧基硼氢化钠(100mg)和甲醇(2ml)。搅拌过夜后，将混合物用饱和的碳酸氢钠水溶液碱化，并用10％甲醇的二氯甲烷溶液萃取四次。将合并的有机萃取液干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-20％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱，得到标题化合物的游离碱(25mg，42％)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.35-1.60(2H，m)，1.85-2.00(2H，m)，2.38(1H，t)，2.45-2.65(3H，m)，2.85-3.05(3H，m)，3.18-3.25(2H，m)，3.95(2H，s)，4.35-4.45(2H，m)，4.60-4.68(2H，m)，6.80(1H，d)，7.30(1H，s)，7.88(1H，d)，8.35(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 485(MH⁺)。

将该物质溶于甲醇/二氯甲烷中，并用4M盐酸的1，4-二噁烷溶液处理，随后将生成的固体用乙醚研磨，得到标题化合物(41mg)。

实施例19(4S)4-({4-[(6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)二盐酸盐

(a)3-氯-6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]哒嗪

将2-[(3，6-二氯-4-哒嗪基)硫基]乙醇(34g，0.15mol)于无水1，4-二噁烷(700ml)中的溶液用氢化锂(1.52g，0.18mol)处理，并加热回流过夜。加入另外的氢化锂(1.15g)，将该混合物再加热回流过夜。冷却反应混合物，用冰-水终止，并过滤。滤液蒸发至四分之一体积。加入水。将水层酸化，用二氯甲烷萃取4次，干燥(硫酸钠)，蒸发并在硅胶上进行色谱法纯化，使用0-50％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液洗脱，由前面的级分得到黄色固体(170mg，0.5％)。用乙酸乙酯-己烷研磨，得到纯的产物(98mg)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 189/91(MH⁺)。

δH(CDCl₃，400MHz)3.29(2H，m)，4.51(2H，m)，6.86(1H，s).

[由后面的级分得到异构体3-氯-6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪(4.2g)-参见实施例18b]

(b)3-乙烯基-6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]哒嗪

将3-氯-6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]哒嗪(450mg，2.4mmol)于二甲氧基乙烷(12ml)中的溶液用四(三苯基膦)合钯(0)(61mg)、碳酸钾(313

mg)、2，4，6-三乙烯基环三硼氧烷吡啶络合物(375mg)和水(1.5ml)处理。将该混合物在96℃下加热过夜。将该混合物蒸发至干，用碳酸氢钠水溶液处理，并用DCM萃取4次，干燥(硫酸钠)，蒸发并在硅胶(50g)上进行色谱法纯化，使用1∶1乙酸乙酯-己烷洗脱，得到固体(200mg，46％)，其中含有少量不纯的产物。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 181(MH⁺)。

(c)6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]哒嗪-3-甲醛

将3-乙烯基-6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]哒嗪(200mg，1.11mmol)于1，4-二噁烷/水(10ml/2ml)中的溶液用四氧化锇的水溶液(4％w/v，1ml)和高碘酸钠(0.55g)处理，最初在冰浴中搅拌1.5小时，然后温热至室温。1.5小时后，该混合物用碳酸氢钠溶液处理，蒸发至干，并溶于1，4-二噁烷和氯仿中。加入硅胶，将该混合物蒸发至干，加至硅胶柱(20g)上，并进行色谱法纯化，使用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱，得到浅黄色固体(63mg，31％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 183(MH⁺)。

(d)标题化合物

将(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)(46mg，0.14mmol)、6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]哒嗪-3-甲醛(26mg，0.14mmol)和3A分子筛在N，N-二甲基甲酰胺(2ml)中的混合物搅拌4小时，然后用甲醇(4ml)处理。再搅拌3小时后，加入三乙酰氧基硼氢化钠(92mg)。搅拌过夜后，将混合物于65℃下加热，在0.5小时后，加入另外的三乙酰氧基硼氢化钠(92mg)。将混合物于65℃加热4小时，然后冷却至室温，用饱和的碳酸氢钠水溶液碱化，并用10％甲醇的二氯甲烷溶液萃取四次。将合并的有机萃取液干燥，并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-25％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱，得到标题化合物的游离碱。

δH(CDCl₃，250MHz)1.40-1.60(2H，m)，1.90-2.00(2H，m)，2.40(1H，t)，2.50(1H，t)，2.62(1H，m)，2.88(1H，d)，2.90-3.05(2H，m)，3.22-3.30(3H，m)，4.00(2H，s)，4.40(2H，m)，4.48-4.52(2H，m)，6.80(1H，d)，6.88(1H，s)，7.88(1H ，d)，8.35(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 485(MH⁺)。

将该物质溶于甲醇/二氯甲烷中，并用4M盐酸的1，4-二噁烷溶液处理，随后将生成的固体用乙醚研磨，得到标题化合物(28mg)。

实施例20A和21(4S)-和(4R)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，8-二氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1和E2类对映异构体)盐酸盐

(a)(4R/S)-3，8-二氟-4-羟基-4-(羟基甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮

将3，8-二氟-4-亚甲基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(219mg，1mmol)的叔丁醇/水(10ml/10ml)溶液用AD mix α/β(0.75g/0.75g)处理。6小时后，将反应混合物用饱和的亚硫酸钠溶液(10ml)处理。10分钟后，将混合物用20％甲醇的二氯甲烷溶液(3x 200ml)萃取。将水相浓缩(至大约20ml)，并进一步用20％甲醇的二氯甲烷溶液(3x 200ml)萃取。将有机萃取液干燥并蒸发，得到白色固体(206mg，82％)。

(b)(1-{[(4R/S)-3，8-二氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基]甲基}-4-哌啶基)(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

将(4R/S)-3，8-二氟-4-羟基-4-(羟基甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(206mg，0.811mmol)在二氯甲烷(10mL)、THF(10ml)和N，N-二甲基甲酰胺(1ml)中的溶液用三乙胺(0.17ml，1.2mmol)、对甲苯磺酰氯(170mg，0.9mmol)和氧化二丁基锡(10mg，0.04mmol)处理。在室温下搅拌6小时后，加入水(100ml)，并分离有机相。将水相进一步用二氯甲烷(3x 100ml)萃取，并将合并的有机萃取液干燥并蒸发，得到油状物(0.42g)。将其溶于乙醇(10ml)中，然后用(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)-4-哌啶基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(284mg，0.8mmol)(对于该中间体的制备，参见WO2004058144，实施例99(h))和碳酸氢钠(258mg，2.43mmol)处理。18小时后，加入另外的碳酸氢钠(258mg，2.43mmol)。再24小时后，将反应混合物用水稀释，并用10％甲醇的二氯甲烷溶液(3x 100ml)萃取。将有机萃取液干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-10％甲醇的二氯甲烷溶液梯度进行洗脱，得到黄色油状物(400mg，84％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 586(MH⁺)。

(c)(4R/S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，8-二氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐

将(1-{[(4R/S)-3，8-二氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基]甲基}-4-哌啶基)(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(400mg，0.68mmol)的二氯甲烷/甲醇(20ml/5ml)溶液用盐酸的1，4-二噁烷溶液(4M，20ml)处理。0.5小时后，将混合物蒸发。将残余物用饱和的碳酸氢钠水溶液(50ml)处理，并用20％甲醇的二氯甲烷溶液萃取三次。将合并的有机萃取液干燥并蒸发。将残余物进行硅胶色谱法纯化，使用0-20％甲醇的乙酸乙酯溶液洗脱，得到外消旋的标题化合物的游离碱，为黄色固体(214mg，65％)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.40-1.65(2H，m)，1.92-2.00(2H，m)，2.40(1H，t)，2.55-2.68(2H，m)，2.85(1H，d)，2.95-3.00(2H，m)，3.30(1H，d)，3.80(2H，s)，4.30(2H，m)，4.35(2H，m)，4.40(1H，d)，4.48(1H，d)，6.82(1H，s)，7.65(1H，d)，8.10(1H，s)，8.45(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z486(MH⁺)。

通过用盐酸的1，4-二噁烷溶液(4M，0.22ml)处理游离碱(214mg)的溶液，随后蒸发将该物质转化为标题的外消旋的二盐酸盐(196mg)。

(d)标题化合物

通过制备型HPLC，将部分的(4R/S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，8-二氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐(157mg)拆分成两个对映异构体E1和E2，使用Chiralpak AD-H柱，使用0.1∶25∶75异丙胺∶异丙醇∶乙腈洗脱，得到E1对映异构体(Rt 5.6分钟)，然后得到游离碱形式的E2对映异构体(Rt 12.8分钟)(每种对映异构体＞98％ee)。通过将其溶于甲醇中，并加入1当量的6.0N HCl的水溶液，并蒸发至干以将每种对映异构体转化为标题盐酸盐E1(47mg)和E2(45mg)。

实施例20B(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，8-二氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)二盐酸盐

通过用HCl处理将(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，8-二氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮对映异构体E1转化为二盐酸盐。

实施例22(4S)-3-氟-4-羟基-4-({4-[(2-喹喔啉基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(对映异构体E1)二盐酸盐

将(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)(80mg，0.25mmol)和2-喹喔啉甲醛(30mg，0.20mmol)在二氯甲烷/甲醇(0.5mL/0.1mL)中的混合物用三乙酰氧基硼氢化钠(127mg，06ml)处理。一小时后，将反应混合物用饱和的碳酸氢钠水溶液(2mL)和氯仿(1ml)处理。将混合物振荡5分钟。将水层进一步用二氯甲烷/甲醇(1mL/0.2ml)萃取。将合并的有机萃取液加入到柱顶部，并进行色谱法纯化，使用0-30％甲醇/二氯甲烷梯度洗脱，得到标题化合物的游离碱，为澄清的油状物(30mg，33％)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.45-1.73(2H，m)，1.90-2.10(2H，m)，2.40(1H，t)，2.55(1H，t)，2.70(1H，m)，2.90(1H，d)，2.95-3.07(2H，m)，3.27(1H，d)，4.25(2H，s)，4.35(1H，d)，4.45(1H，d)，6.85(1H，d)，7.25-7.32(2H，m)，7.88(1H，d)，8.05-8.15(2H，m)，8.38(1H，s)，8.90(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 461(MH⁺)。

通过下列方法将该物质转化为标题二盐酸盐(30mg)：用盐酸的乙醚溶液(1M，1ml)处理游离碱(30mg)的氯仿(1mL)溶液，随后用乙醚(～5mL)稀释，冷却至0℃保持5分钟，离心分离，倾析上清液，并真空干燥剩余的白色固体。

实施例23A(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(对映异构体E1)二盐酸盐

(a)乙酸{5-({[4-(甲氧基)苯基]甲基}氧基)-4-[(苯基甲基)氧基]-2-吡啶基}甲基酯

在0℃下，将三苯基膦(39.3g，150mmol)于四氢呋喃(600ml)中的溶液用(E)-1，2-二氮烯二甲酸双(1-甲基乙基)酯(bis(1-methylethyl)(E)-1，2-diazenedicarboxylate)(30ml，152mmol)处理。10分钟后，加入乙酸[5-({[4-(甲氧基)苯基]甲基}氧基)-4-氧代-1，4-二氢-2-吡啶基]甲基酯(33.5g，110mmol)(合成参见WO2004058144，实施例60(c))。10分钟后，加入苄醇(13g，120mmol)，并将混合物搅拌过夜。蒸发并在硅胶上进行色谱法纯化，使用20-50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱，得到油状物(26.3g，61％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 394(MH⁺)。

(b)乙酸{5-羟基-4-[(苯基甲基)氧基]-2-吡啶基}甲基酯三氟乙酸盐

将乙酸{5-({[4-(甲氧基)苯基]甲基}氧基)-4-[(苯基甲基)氧基]-2-吡啶基}甲基酯(26.3g，67mmol)于二氯甲烷(700ml)中的溶液用三乙基甲硅烷(10ml，62.6mmol)和三氟乙酸(35ml)处理。16小时后，将混合物蒸发，并用甲苯/乙酸乙酯(250ml/5ml)研磨，得到白色固体，将其通过过滤分离并真空干燥来(22.5g)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 274(MH⁺)。

(c)乙酸(4-[(苯基甲基)氧基]-5-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-2-吡啶基)甲基酯

将乙酸5-羟基-4-[(苯基甲基)氧基]-2-吡啶基}甲基酯三氟乙酸盐(22.5g)和三乙胺(24ml)的二氯甲烷(700ml)溶液用1，1，1-三氟-N-苯基-N-[(三氟甲基)磺酰基]甲磺酰胺(22.8g)处理。4小时后，将反应混合物用水、盐水洗涤，然后干燥并蒸发，得到油状物。进行硅胶色谱法纯化，使用20-50％乙酸乙酯的石油醚溶液洗脱，得到白色固体(23.3g)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 406(MH⁺)。

(d)乙酸(5-[(1，1-二甲基乙基)硫基]-4-[(苯基甲基)氧基]-2-吡啶基}甲基酯

向乙酸(4-[(苯基甲基)氧基]-5-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-2-吡啶基)甲基酯(12.15g，30mmol)的甲苯(500ml)溶液中加入(R)-(+)-2，2′-双(二苯基膦基)-1，1’-联萘(1.87g，3mmol)。将反应混合物用氩气清洗。加入乙酸钯(663mg，3mmol)，并将混合物搅拌10分钟。加入2-甲基-2-丙硫醇钠盐(4.69，41.8mmol)，并将反应混合物再次用氩气清洗，然后于80℃加热7小时，然后冷却。将溶剂蒸发。将残余物在1∶1的水和EtOAc混合物之间分配。将有机层分离，并用盐水洗涤，经硫酸镁干燥并通过硅藻土过滤。将残余物进行色谱法纯化，使用4∶1的己烷∶EtOAc混合物洗脱，得到产物(8.3g，80％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 346(MH⁺)。

(e)乙酸{5-[(1，1-二甲基乙基)硫基]-4-氧代-1，4-二氢-2-吡啶基}甲基酯

将乙酸(5-[(1，1-二甲基乙基)硫基]-4-[(苯基甲基)氧基]-2-吡啶基}甲基酯(6g)的1，4-二噁烷/水(100ml/50ml)溶液在大气压下使用10％钯/碳(7g)氢化过夜。过滤并蒸发，得到白色固体(4.46g，95％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 255(MH⁺)。

(f)2-(羟基甲基)-5-巯基-4(1H)-吡啶醇盐酸盐

将乙酸{5-[(1，1-二甲基乙基)硫基]-4-氧代-1，4-二氢-2-吡啶基}甲基酯(240mg，0.94mmol)和浓盐酸(2ml)的混合物于80℃加热过夜。将溶剂蒸发，得到淡黄色固体，

MS(+ve离子电喷雾)m/z 158(MH⁺)。

(g)2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]吡啶-7-甲醛

将2-(羟基甲基)-5-巯基-4(1H)-吡啶醇盐酸盐(2.0g)、二溴乙烷(2.2mL)、碳酸钾(5.26g，38mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(120ml)中的混合物于70℃加热过夜。然后将反应混合物于80℃再加热24小时，然后冷却。将溶剂蒸发，并将残余物在水和乙酸乙酯之间分配。将水层用乙酸乙酯洗涤(3x)，并将合并的有机层经硫酸镁干燥，然后蒸发，得到油状物(2.5g)。将该物质(2.5g)和二氧化锰(5g)在二氯甲烷(200ml)中于室温下搅拌过夜。将混合物通过硅藻土过滤，用二氯甲烷洗涤。将滤液蒸发，并将残余物进行色谱法纯化，使用50-100％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到黄色油状物。进行第二次的色谱纯化，使用0-100％的乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到所需的化合物，为白色固体(350mg)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 182(MH⁺)。

(h)标题化合物

将(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)(225mg，0.71mmol)的甲醇/二氯甲烷(0.5ml/5ml)溶液用2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]吡啶-7-甲醛(129mg，0.71mmol)处理。10分钟后，将溶液在冰水浴中冷却，用三乙酰氧基硼氢化钠(300mg，1.42mmol)处理，并于0-10℃搅拌1小时。加入饱和的碳酸氢钠溶液(10ml)，然后加入盐水，并将水层用10％甲醇的二氯甲烷溶液(3x 30ml)萃取。将合并的有机层经硫酸镁干燥，蒸发并进行色谱法纯化，使用0-10％的2M NH₃/甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脱，得到产物，为淡黄色固体(250mg，58％)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.40-1.60(2H，m)，1.70-2.00(2H，m)，2.35(1H，dt)，2.55(2H，m)，2.85(1H，d)，2.95(2H，dt)，3.10(2H，m)，3.25(1H，d)，3.80(2H，s)，4.45(2H，m)，4.50(2H，m)，6.73(1H，s)，6.81(1H，d)，7.88(1H，d)，8.11(1H，s)，8.37(1H，s)..

MS(+ve离子电喷雾)m/z 484(MH⁺)。

通过用1M盐酸的乙醚溶液处理游离碱的溶液，将该物质转化为标题二盐酸盐。

实施例23B(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(对映异构体E1)盐酸盐

将(4S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(对映异构体E1)用盐酸(1当量)处理，并然后蒸发，得到盐酸盐。

实施例24(4R/S)-8-氯-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐

(a)(4R/S)-8-氯-3-氟-4-羟基-4-(羟基甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮

将(4R/S)-3-氟-4-羟基-4-(羟基甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(1.44g，6.1mmol)和N-氯琥珀酰亚胺(2.04g，15.25mmol)在乙酸(40mL)和水(25mL)中的混合物于100℃加热1小时。加入另外2.5当量的N-氯琥珀酰亚胺(2.04g，15.25mmol)，并将反应混合物再搅拌1小时，蒸发，用碳酸钠水溶液(100mL)处理，并用10％甲醇的二氯甲烷溶液(3x500ml)萃取。将水层减少至～20mL，并进一步用20％甲醇的二氯甲烷溶液(3x500ml)萃取。将合并的有机层经硫酸镁干燥并蒸发，得到含有多余的盐的产物(2.2g，130％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 271/273(MH⁺)。

(b)4-甲基苯磺酸((4R/S)-8-氯-3-氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基)甲基酯

向不纯的(4R/S)-8-氯-3-氟-4-羟基-4-(羟基甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(2.20g，假定6.10mmol)的二氯甲烷/四氢呋喃/N，N-二甲基甲酰胺(50mL/50mL/5mL)悬浮液中加入对甲苯磺酰氯(1.16g，6.10mmol)、氧化二丁基锡(76mg，0.31mmol)，并最后加入三乙胺(1.27mL，9.15mmol)。将反应混合物在室温下在氩气下搅拌3小时，用水(100mL)处理，并用二氯甲烷萃取(3x 200ml)。将合并的有机层经硫酸镁干燥，蒸发并进一步真空干燥，得到粗产物(46％)，环氧化物(8’-氯-3’-氟-7’H-螺[环氧乙烷-2，4’-吡咯并[3，2，1-de][1，5]二氮杂萘]-7’-酮)(10％)和未知物质(30％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 425/427(MH⁺)。

(c){1-[((4R/S)-8-氯-3-氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

在室温下，在氩气下，向粗品4-甲基苯磺酸((4R/S)-8-氯-3-氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基)甲基酯(～2.5g，假定6.10mmol)的乙醇(50mL)溶液中加入4-哌啶基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(1.22g，6.10mmol)和碳酸氢钠(1.94g，18.31mmol)。将反应混合物搅拌8小时。加入另外0.5当量的4-哌啶基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(0.61g，3.05mmol)和1.5当量的碳酸氢钠(0.97g，9.15mmol)。将反应混合物再搅拌18小时，用水(200mL)处理，并用10％甲醇的二氯甲烷溶液(3x 200ml)萃取。将合并的有机层经硫酸镁干燥，蒸发并进行色谱法纯化，得到不纯的物质，其以粗品用于下一步骤中。

(d)(4R/S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-8-氯-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮

将粗品{1-[((4R/S)-8-氯-3-氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(～1g，2mmol)的二氯甲烷/甲醇(20mL/20mL)溶液用4M HCl的1，4-二噁烷溶液(20mL)处理，并在室温下，在氩气下搅拌30分钟。将反应混合物蒸发，溶于水(～10mL)中，通过加入固体碳酸钠碱化并蒸发。将残余物与15％甲醇的二氯甲烷溶液(3x 200ml)一起搅拌。将合并的有机层经硫酸镁干燥，蒸发并进行色谱法纯化，使用二氯甲烷和2M氨/甲醇梯度洗脱，得到产物(215mg，27％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 353/355(MH⁺)。

(e)标题化合物

将(4R/S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-8-氯-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(118mg，0.33mmol)和2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-甲醛(对于合成，参见WO2004058144，实施例2(c))(55mg，0.33mmol)的氯仿/甲醇(4mL/0.4mL)溶液在室温下，在氩气下搅拌30分钟。加入三乙酰氧基硼氢化钠(142mg，0.67mmol)，并将反应混合物再搅拌30分钟，蒸发并进行色谱法纯化，使用0-20％的甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脱，得到标题化合物的游离碱的单乙酸盐，为黄色油状物(129mg，77％)。

δH(CDCl₃，400MHz)1.50-1.70(2H，m)，1.90-2.00(2H，m)，2.02(3H，s)，2.40(1H，t)，2.52(1H，t)，2.65(1H，m)，2.88(1H，d)，2.95(1H，m)，3.03(1H，m)，3.25(1H，d)，3.85(2H，s)，4.25-4.35(4H，m)，4.40-4.48(2H，m)，6.82(1H，s)，8.08(1H，s)，8.12(1H，s)，8.40(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 502/504(MH⁺)。

通过使用4M盐酸(2当量)处理游离碱的DCM/甲醇溶液，将该物质转化为标题二盐酸盐。

实施例25(4R/S)-8-氯-3-氟-4-羟基-4-({4-[([1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐

将(4R/S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-8-氯-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(97mg，0.27mmol)和[1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-甲醛(46mg，0.27mmol)(对于合成，参见WO2004058144，实施例61)的氯仿/甲醇(4mL/0.4mL)溶液在室温下，在氩气下搅拌30分钟。加入三乙酰氧基硼氢化钠(117mg，0.55mmol)，并将反应混合物再搅拌30分钟，蒸发并进行色谱法纯化，使用0-20％的甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脱，得到标题化合物的游离碱的单乙酸盐(60mg，43％)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.52-1.80(2H，m)，1.90-2.20(5H，m)，2.30-2.55(2H，m)，2.75(1H，m)，2.88(1H，d)，2.95(1H，m)，3.05(1H，m)，3.25(1H，d)，3.90(2H，s)，4.45(2H，s)，5.28(2H，s)，7.20(1H，s)，7.95(1H，s)，8.13(1H，s)，8.40(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 503(MH⁺)。

通过用盐酸的二噁烷(dioxin)溶液处理单乙酸盐的溶液，将该物质转化为标题二盐酸盐。

实施例26A和27 4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮盐酸盐(E1和E2对映异构体)

(a){1-[((4R/S)-3，4-二氟-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

将{1-[(3-氟-4-羟基-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(15.93g，38.1mmol)的二氯甲烷(320ml)溶液在冰浴中冷却，并用三氟化(二乙基氨基)硫(10.1ml，75.9mmol)处理。2.5小时后，在室温下加入饱和的碳酸氢钠水溶液，然后分离各相。将水相用二氯甲烷再萃取两次，并将合并的有机萃取液合并，并蒸发。进行色谱法纯化，使用甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脱，得到产物(5.35g，33％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 421(MH⁺)。

(b)(4R/S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐

将{1-[((4R/S)-3，4-二氟-7-氧代-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-4-基)甲基]-4-哌啶基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(98mg，0.23mmol)的二氯甲烷(2ml)和甲醇(1.5mL)溶液用盐酸的1，4-二噁烷溶液(4M，3.5ml，14mmol)处理。1.5小时后，将混合物蒸发，得到产物(82mg)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 321(MH⁺)。

(c)标题化合物

将(4R/S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐(82mg，0.21mmol)、2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-甲醛(对于合成，参见WO2004058144，实施例2(c))(35mg，0.21mmol)、乙酸钠(86mg，1.05mmol)和乙酸(8滴)在甲醇/氯仿(2.5ml/2.5ml)中的混合物与3A分子筛一起搅拌1小时，然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(51mg)。5小时后，加入饱和的碳酸氢钠水溶液，然后分离各相。将水相用10％甲醇的二氯甲烷溶液萃取两次。将合并的有机萃取液干燥并蒸发。将残余物进行色谱法纯化，使用0-10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到外消旋的标题化合物的游离碱(70mg，71％)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.40-1.60(2H，m)，1.70(1H，m)，2.25-2.45(2H，m)，2.60(1H，m)，2.78(1H，m)，2.95(1H，d)，3.10(1H，d)，3.35(1H，t)，3.80(2H，s)，4.25-4.35(4H，m)，4.55(1H，t)，4.68(1H，d)，4.80(1H，t)，6.82(1H，s)，6.88(1H，d)，7.90(1H，d)，8.10(1H，s)，8.45(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 470(MH⁺)。

通过制备型手性HPLC，将(4R/S)-4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(43mg)拆分成两个对映异构体E1和E2，使用Chiralpak AD-H柱，使用50∶50∶0.1乙腈∶甲醇∶异丙胺洗脱，得到对映异构体E1(首先洗脱下来的物质)和E2(其次洗脱下来的物质)，通过将它们溶于甲醇中，并加入1当量的6.0N HCl的水溶液以将它们转化为单盐酸盐，并蒸发至干。

E1(HCl盐)净重：15mg，＞99％ee，αD+100.6度(甲醇，20℃，c＝1.00)。

E2(HCl盐)净重：18mg，＞99％ee，αD-102.0度(甲醇，20℃，c＝1.00)。

实施例26B 4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐(E1对映异构体)

将4-({4-[(2，3-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)的溶液用HCl的乙醚溶液处理，得到二盐酸盐。

实施例284-({4-[(6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐(E1对映异构体)

(a)4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮对映异构体E1和E2

通过制备型手性HPLC，将4.3g的(4R/S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐的游离碱拆分成两个对映异构体E1和E2，使用Chiralpak AD-H柱，使用50∶50∶0.1乙腈∶甲醇∶异丙胺洗脱，得到对映异构体E1(首先洗脱下来的物质)和E2(其次洗脱下来的物质)。

E1净重：1.5g，＞99％ee

E2净重：2.0g，＞99％ee

(b)标题化合物

将4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮E1对映异构体(60mg，0.19mmol)、6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-甲醛(36mg，0.2mmol)和乙酸(8滴)的无水氯仿(2.5mL)和甲醇(2.5mL)溶液，在3A分子筛存在下，于室温下搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(50mg)，并将反应混合物再搅拌7.5小时。加入碳酸氢钠水溶液以达到碱性，并分离各相。将水相用10％甲醇的二氯甲烷溶液(3x)萃取。干燥合并的有机层，蒸发，并在5g硅胶上进行色谱法纯化，使用0-20％的甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脱，得到标题化合物的游离碱(42mg，45.5％)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.38(2H，m)，1.85(2H，m)，2.36(2H，m)，2.52(1H，m)，2.74(2H，d)，3.00(1H，t)，3.08(1H，d)，3.21(2H，m)，3.350(1H，t)，3.96(2H，s)，4.55(1H，t)，4.65(2H，m)，4.73(1H，d)，4.80(1H，t)，6.88(1H，d)，7.33(1H，s)，7.93(1H，d)，8.43(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 487(MH⁺)。

通过用盐酸的1，4-二噁烷溶液(0.4M，0.43ml)处理游离碱(42mg)的溶液，将该物质转化为标题二盐酸盐，随后蒸发，用乙醚(2x)研磨，得到产物(46mg)。

实施例294-({4-[(6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐(E2对映异构体)

将4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮E2对映异构体(60mg，0.19mmol)、6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-甲醛(36mg，0.2mmol)和乙酸(8滴)的无水氯仿(2.5mL)和甲醇(2.5mL)溶液，在3A分子筛存在下，于室温下搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(50mg)，并将反应混合物再搅拌7.5小时。加入碳酸氢钠水溶液以达到碱性，并分离各相。将水相用10％甲醇的二氯甲烷溶液(4x)萃取。干燥合并的有机层，蒸发，并在5g硅胶上进行色谱法纯化，使用0-20％的甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脱，得到标题化合物的游离碱(32.6mg，29％)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.38(2H，m)，1.85(2H，m)，2.36(2H，m)，2.52(1H，m)，2.74(2H，d)，3.00(1H，t)，3.08(1H，d)，3.21(2H，m)，3.35(1H，t)，3.96(2H，s)，4.55(1H，t)，4.65(2H，m)，4.73(1H，d)，4.80(1H，t)，6.88(1H，d)，7.33(1H，s)，7.93(1H，d)，8.43(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 487(MH⁺)。

通过用盐酸的1，4-二噁烷溶液(0.4M，0.35ml)处理游离碱(32.6mg)的溶液，将该物质转化为标题二盐酸盐，随后蒸发，用乙醚(2x)研磨，得到产物(26.6mg)。

实施例30和314-({4-[(6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮单盐酸盐(E1对映异构体和E2对映异构体)

(a)3，4，6-三氯哒嗪

该化合物通过稍微改变的Kasnar等人，Nucleosides&Nucleotides(1994)，13(1-3)，459-79中的方法来制备。

将硫酸肼盐(51g)悬浮于水(250ml)中，加热至回流并滴加溴代马来酸酐(90.38g)。将混合物加热回流4小时，然后冷却至室温。再用29g硫酸肼，53g溴代马来酸酐和130ml水重复此反应。通过过滤收集沉淀，用水和丙酮洗涤，并在真空下干燥合并的批料，得到4-溴-1，2-二氢-3，6-哒嗪二酮，为白色固体(113g)。

分为两批的固体用磷酰氯(2x 200ml)处理，并加热回流3.5小时。冷却混合物，蒸发并用甲苯共沸。残余物在二氯甲烷和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配，并用DCM再萃取两次。有机萃取物干燥并蒸发。残余物重新溶解于二氯甲烷中，并在硅胶(300g)上色谱纯化(DCM作为洗脱液)，得到白色固体(101.5g，87％)。

(LC/MS分析显示约20-30％的杂质，溴-二氯哒嗪的异构体)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 184/185/186(MH+)，三氯哒嗪

MS(+ve离子电喷雾)m/z 228/229/231(MH+)，溴-二氯哒嗪。

(b)2-[(3，6-二氯-4-哒嗪基)氧基]乙醇

在大约0℃(冰浴冷却)下，经40分钟将乙二醇(55ml)于四氢呋喃(200ml)中的溶液用氢化钠(60％于油中的分散体，5.9g)处理。添加完毕后，分批加入含有杂质溴-二氯哒嗪异构体的3，4，6-三氯哒嗪(27g)，并用较多的无水THF(50ml)洗涤，将混合物在0℃下搅拌1小时，然后在室温下搅拌过夜。混合物浓缩(至1/3体积)，然后用碳酸氢钠水溶液稀释，并用氯仿(5x)和乙酸乙酯(3x)萃取。合并的有机萃取物用水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发，过滤出固体，并用CHCl₃(x3)洗涤，在真空干燥箱中于40℃下干燥过夜，得到白色固体(25.5g，83％)，含有一些溴-衍生物(10-15％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 209/211(MH⁺)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 255/7(MH⁺)，溴-衍生物。

(c)3-氯-6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪

将含有一些溴-衍生物的2-[(3，6-二氯-4-哒嗪基)氧基]乙醇(15.46g；0.0703mol)于无水1，4-二噁烷(1.2L)中的溶液分批用氢化锂(2.3g；0.28mol)处理，并在室温下于氩气中搅拌1小时，然后在110℃下加热过夜。反应混合物用含水1，4-二噁烷，然后用冰-水终止。溶液蒸发至一半体积时，用5M盐酸调节至pH 8，并蒸发至干。加入水，残余物用氯仿萃取5次，干燥(硫酸钠)，蒸发，得到白色固体(12.4g，约77％)(含有约15％的溴代物质)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 173/5(Cl MH⁺)；217/9(Br MH⁺)

(d)3-乙烯基-6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪

将含有约15％的溴代物质的3-氯-6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪(13.6g，0.079mol)于二甲氧基乙烷(400ml)中的溶液在氩气中除气10分钟，然后加入四(三苯基膦)合钯(0)(2g)，碳酸钾(10.33g)，2，4，6-三乙烯基环三硼氧烷(2，4，6-trivinylcyclotriboroxane)吡啶络合物(11.32g)和水(55ml)。将该混合物在95℃下加热48小时，冷却，蒸发至干。混合物用碳酸氢钠水溶液处理，并用DCM(5x)萃取。干燥萃取物(硫酸钠)，蒸发，残余物在硅胶(500g)上色谱纯化，使用0-100％乙酸乙酯-己烷洗脱，得到产物(6.43g，50％)；[也有一些不纯的级分(1.8g)]。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 165(MH⁺)。

(e)6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-甲醛

将已在冰中冷却的3-乙烯基-6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪(11.58g)于1，4-二噁烷/水(600ml/180ml)中的溶液用四氧化锇水溶液(4％w/v，25ml)和高碘酸钠(43g)处理。将该混合物温热至室温，7小时后，在搅拌下将该混合物蒸发至干并用1，4-二噁烷共沸。加入硅胶、1，4-二噁烷和氯仿，将混合物蒸发至干过夜，然后加至硅胶柱(400g)上并进行色谱法纯化，使用氯仿然后用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脱，得到白色固体(7.55g，64％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 167(MH⁺)。

(f)标题化合物

将(4R/S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(63mg，0.20mmol)、6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-甲醛(33mg，0.2mmol)和乙酸(8滴)的无水氯仿(2.5mL)和甲醇(2.5mL)溶液，在3A分子筛存在下，于室温下搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(50mg)，并将反应混合物再搅拌6小时。加入另外的6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-甲醛(22mg)和乙酸(6滴)，搅拌30分钟后加入氰基硼氢化钠(35mg)。再搅拌6小时后，加入6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-甲醛(25mg)。将混合物搅拌1小时，然后加入氰基硼氢化钠(35mg)，并继续搅拌7小时。加入碳酸氢钠水溶液以达到碱性，并分离各相。将水相用10％甲醇的二氯甲烷溶液萃取。干燥合并的有机层，蒸发，并在9g硅胶上进行色谱法纯化，使用0-10％的甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脱，得到外消旋的标题化合物的游离碱(36mg，389％)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.44(2H，m)，1.87(2H，m)，2.37(2H，m)，2.53(1H，m)，2.78(2H，d)，3.01(1H，t)，3.10(1H，d)，3.36(1H，7)，3.83(2H，s)，4.54(1H，t)，4.63(2H，m)，4.68(1H，d)，4.81(1H，t)，6.84(1H，d)，6.93(1H，d)，7.20(1H，d)，7.92(1H，d)，8.43(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 508(MH⁺)。

将标题化合物的游离碱物质(36mg)进行拆分：通过手性HPLC，使用Chiralpak AD-H柱，使用50∶50∶0.1乙腈∶甲醇∶异丙胺洗脱，得到异构体E1和E2。

E1净重：9mg，100％ee。

E2净重：8.6mg，99％ee。

通过将其溶于甲醇中，并加入1当量的6.0N HCl的水溶液以将这些物质中的每一个转化为相应的单盐酸盐，并蒸发至干。

实施例323，4-二氟-4-[(4-{[(3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噁嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐(E1对映异构体)

将4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮E1对映异构体(60mg，0.19mmol)、3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噁嗪-6-甲醛(对于合成，参见WO2004058144，实施例1(l))(36mg，0.2mmol)和乙酸(8滴)的无水氯仿(2.5mL)和甲醇(2.5mL)溶液，在3A分子筛存在下，于室温下搅拌1小时。加入氰基硼氢化钠(50mg)，并将反应混合物再搅拌8小时。加入碳酸氢钠水溶液以达到碱性，并分离各相。将水相用10％甲醇的二氯甲烷溶液(3x)萃取。干燥合并的有机层，蒸发，并在5g硅胶上进行色谱法纯化，使用0-20％的甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脱，得到标题化合物的游离碱(65mg，71％)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.39(2H，m)，1.84(2H，m)，2.35(2H，m)，2.52(1H，m)，2.24(1H，d)，3.00(1H，t)，3.08(1H，d)，3.35(1H，t)，4.00(2H，s)，4.37(2H，m)，4.51(2H，m)，4.55(1H，t)，4.68(1H，d)，4.80(1H，t)，6.88(1H，d)，7.04(1H，s)，7.93(1H，d)，8.43(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 556(MH⁺)。

通过用盐酸的1，4-二噁烷溶液(0.4M，0.65ml)处理上述游离碱(32.6mg)的溶液，将该物质转化为标题二盐酸盐，随后蒸发，得到产物(68mg)。

实施例334-({4-[(6，7-二氢-5H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐(E1对映异构体)

将4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮E1对映异构体(40mg，0.125mmol)和6，7-二氢-5H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3-甲醛(25.4mg，0.156mmol)的氯仿(15mL)和甲醇(1mL)溶液，在3A分子筛存在下，于65℃下在氩气下搅拌5小时。将反应混合物冷却下来，加入三乙酰氧基硼氢化钠(53mg，0.25mmol)，并将反应混合物再搅拌18小时。然后将该混合物通过硅藻土过滤，用二氯甲烷/甲醇(1/1)洗涤，过滤，蒸发，并在碳酸氢钠和20％甲醇的二氯甲烷溶液之间分配(3x)。干燥合并的有机层，蒸发并进行色谱法纯化，使用二氯甲烷/甲醇/NH₄OH95/5/0.5洗脱，得到标题化合物的游离碱，为黄色泡沫状物质(3mg，56％)。

δH(CDCl₃，250MHz)1.30-1.50(2H，m)，1.86(2H，宽t)，2.06(2H，五重峰)，2.30-2.43(2H，m)，2.50-2.60(1H，m)，2.74(1H，d)，2.86(2H，t)，2.97-3.10(2H，m)，3.35(1H，t)，4.37(2H，m)，3.99(2H，s)，4.44(2H，t)，4.58(1H，dd)，4.78(1H ，ddt)，6.88(1H，d)，7.28(1H，s)，7.93(1H，d)，8.43(1H，s).

MS(+ve离子电喷雾)m/z 542(MH⁺)。

通过用1M盐酸的乙醚溶液(0.15ml)处理游离碱(32.6mg)，将该物质转化为标题二盐酸盐，随后蒸发，得到产物(39mg)。

表1：实施例34-57是由(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)和特定的醛，通过实施例1(h)的一般方法制备，除了实施例38和39是使用特定的烷基卤化物在典型的烷基化条件下(K₂CO₃，KI，DMF，40℃，1小时)制备。

^*(+ve离子电喷雾)m/z(MH⁺)。

表2：实施例58-64由特定的甲苯磺酸酯、环状胺和醛，通过实施例1(f)-(h)的一般方法制备。实施例65-68由特定的胺和醛，通过实施例1(h)的一般方法制备。

^*(+ve离子电喷雾)m/z(MH⁺)。

制备(A)5-甲酰基-2，3-二氢-1-苯并呋喃-7-甲腈

(a)7-溴-2，3-二氢-1-苯并呋喃-5-甲醛

在10℃下，向2，3-二氢-1-苯并呋喃-5-甲醛(1.0g，6.75mmol)的冰醋酸(8ml)溶液中缓慢地加入乙酸钠(664mg，8.1mmol)和溴(0.7ml，13.5mmol)。将该反应在室温下搅拌2小时。将该反应用饱和的硫代硫酸钠水溶液(10mL)稀释，用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤，并然后用乙酸乙酯萃取。合并有机物，经硫酸钠干燥，并真空干燥，得到所需的化合物(1.4g，91％)。

MS(+ve离子电喷雾)：m/z 227(M+H)⁺。

(b)标题化合物

向7-溴-2，3-二氢-1-苯并呋喃-5-甲醛(1.3g，4.7mmol)的二甲基乙酰胺(2mL)溶液中加入氰化亚铜(I)(0.41g g，4.7mmol)。将该反应回流18小时，并然后减压浓缩。将残余物用热的乙酸乙酯洗涤。浓缩合并的乙酸乙酯层，并干燥。将粗产物通过快速柱色谱法(硅胶，4∶1和2∶1己烷∶乙酸乙酯梯度溶液)纯化，得到所需的产物(0.5g，50％)。

MS(+ve离子电喷雾)：m/z 174(M+H)⁺.

制备(B)5，6-二氢呋喃并[2，3-c]哒嗪-3-甲醛

(a)(3，6-二氧代-1，2，3，6-四氢-4-哒嗪基)乙酸

将(2，5-二氧代-2，5-二氢-3-呋喃基)乙酸(9g)和硫酸肼(7.2g)在水中的混合物加热回流4小时，然后冷却至环境温度。过滤该沉淀，用水然后用丙酮洗涤。真空干燥，得到白色固体(8.04g，82％)。

MS(ES+)m/z 171(MH⁺)。

(b)(3，6-二氧代-1，2，3，6-四氢-4-哒嗪基)乙酸甲酯

将(3，6-二氧代-1，2，3，6-四氢-4-哒嗪基)乙酸(5.0g)、甲醇(75ml)和4M盐酸在1，4-二噁烷(20ml)中的混合物搅拌过夜。蒸发得到白色固体。

MS(ES+)m/z 185(MH⁺)。

(c)4-(2-羟基乙基)-1，2-二氢-3，6-哒嗪二酮

将(3，6-二氧代-1，2，3，6-四氢-4-哒嗪基)乙酸甲基酯(11.1g，60.3mmol)于THF(2升)中的悬浮液超声处理得到精细的分散液。将该混合物冷却至-15℃，并用氢化铝锂的THF溶液(1M；90ml，90mmol)逐滴处理。将该混合物在0℃下搅拌2小时。加入氢氧化钠(2M；15ml，30mmol)，然后用5M盐酸酸化该混合物至大约pH4-5。倒出上清液并丢弃。油状残余物用水/甲醇(500ml/1升)萃取。将此萃取液从剩余的残余物中倾倒出来，用硅胶处理并蒸发。将该硅胶残余物加至柱的上部，使用10-30％甲醇的DCM溶液洗脱，得到浅黄色油状物(2.7g)。

MS(ES+)m/z 157(MH⁺)。

(d)5，6-二氢呋喃并[2，3-c]哒嗪-3(2H)-酮

将4-(2-羟基乙基)-1，2-二氢-3，6-哒嗪二酮(2.7g)于THF(200ml)中的混合物用三苯基膦(6.6g)和(E)-1，2-二氮烯二羧酸双(1-甲基乙基)酯(5.0ml)处理，并温热至40℃。3小时后，蒸发该混合物，将其加至柱的上部，并在硅胶上色谱纯化，使用0-10％甲醇的DCM溶液洗脱，得到不纯的产物(420mg)，其以类似的方式通过色谱法再纯化，得到产物(390mg)。

MS(ES+)m/z 139(MH⁺)。

(c)三氟甲磺酸5，6-二氢呋喃并[2，3-c]哒嗪-3-基酯

将5，6-二氢呋喃并[2，3-c]哒嗪-3(2H)-酮(780mg)于DMF(15ml)中的溶液用氢化钠(435mg)处理，2小时后，用N-苯基三氟甲磺酰亚胺(3.62g)处理。2小时后，混合物用乙酸乙酯稀释，并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。水层再用乙酸乙酯萃取(2次)，合并的有机萃取液干燥并蒸发，得到产物(937mg)。

MS(ES+)m/z 271(MH⁺)。

(f)3-乙烯基-5，6-二氢呋喃并[2，3-c]哒嗪

将三氟甲磺酸5，6-二氢呋喃并[2，3-c]哒嗪-3-基酯(500mg，1.85mmol)于二甲氧基乙烷(20ml)中的溶液除气，然后用四(三苯基膦)合钯(0)(116mg)、碳酸钾(257mg)、2，4，6-三乙烯基环三硼氧烷吡啶络合物(对于该试剂的制备参见F.Kerins和D.F.O’Shea，J.Org.Chem.2002，67，4968-4971)(416mg)和水(3.6ml)处理。将该混合物在80o℃下搅拌2小时，然后在DCM和饱和碳酸氢钠水溶液之间分配。水相用10％甲醇的DCM溶液萃取，然后将合并的有机萃取物干燥并蒸发。将残余物色谱纯化，使用乙酸乙酯洗脱，得到白色固体(111mg，36％)。

MS(ES+)m/z 149(MH⁺)。

(g)标题化合物

将3-乙烯基-5，6-二氢呋喃并[2，3-c]哒嗪(110mg，0.74mmol)、4％四氧化锇的水溶液(0.66ml)、高碘酸钠(367mg)、1，4-二噁烷(6.6ml)和水(1.3ml)的混合物搅拌3小时。将该混合物蒸发，残余物用氯仿处理，并加至柱的上部。使用乙酸乙酯洗脱，得到产物(23mg)。

MS(ES+)m/z 151(MH⁺)。

制备(C)[(3R)-3-哌啶基甲基]氨基甲酸苯基甲基酯

(a)(3S)-3-[({[(苯基甲基)氧基]羰基}氨基)甲基]-1-哌啶甲酸1，1-二甲基乙基酯

在0℃下，向(3S)-3-(氨基甲基)-1-哌啶甲酸1，1-二甲基乙基酯(2.0g，9.33mmol)的DCM(12ml)溶液中加入三乙胺(1.7ml，12.1mmol)，随后加入N-(苄氧基羰基氧基)琥珀酰亚胺(2.56g，10.3mmol)。几分钟后除去冷却浴，并将该反应于室温下搅拌2小时。将该反应用乙酸乙酯稀释，并用水(2x)、1N HCl、饱和的NaHCO₃水溶液、盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)并浓缩。将产物在硅胶上纯化，使用10％乙酸乙酯-DCM洗脱，得到3.48g的物质，其中含有少量N-(苄氧基羰基氧基)琥珀酰亚胺，将其直接用于下一步骤。

LC/MS(ES)m/e 349(M+H)⁺.

(b)标题化合物

将(3S)-3-[({[(苯基甲基)氧基]羰基}氨基)甲基]-1-哌啶甲酸1，1-二甲基乙基酯(～9.3mmol)溶于DCM(25mL)中，并用4M HCl的1，4-二噁烷溶液(24mL，96mmol)处理。将该反应于室温下搅拌3小时，在此时，LC/MS表明所有的原料都耗尽了。将该反应真空浓缩，得到粘稠的树胶状物质。将该物质溶于水中，并用乙酸乙酯萃取。将水相分离，并用固体Na₂CO₃处理使得pH为～10。然后将该产物萃取到CHCl₃(3x)中，并将合并的有机相干燥(Na₂SO₄)，并浓缩，得到所需的产物，为橙色油状物(2.3g，100％，对于两步)。

LC/MS(ES)m/e 249(M+H)⁺.

制备(D)[(2R)-2-吗啉基甲基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

(a)外消旋的2-{[(2R，S)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基]甲基}-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮

向4-苄基-2-(氯甲基)吗啉(2.0g，8.86mmol)的DMF(10mL)溶液中加入酞酰亚胺钾(1.96g，10.6mmol)，并将混合物于165℃加热4小时。冷却后，将反应混合物倒入到水(20mL)中，并将产物萃取到CHCl₃(3x)中，并将合并的有机层用少量水、盐水洗涤，并干燥(Na₂SO₄)。蒸发溶剂，得到淡黄褐色的固体，将其直接用于下一步骤。

LC/MS(ES)m/e 337(M+H)⁺

(b)外消旋的{[(2R，S)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基]甲基}胺

将粗品外消旋的2-{[(2R，S)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基]甲基}-1H-异吲哚-1，3(2H)-二酮(～8.8mmol)悬浮于无水乙醇(15mL)中，并用肼一水合物(0.75mL，15.4mmol)处理。将反应混合物加热回流，在此期间反应溶液变成黄色和均相，随后沉淀白色的固体。2小时后，将该反应冷却至室温，用CHCl₃稀释，并滤出固体。将滤液蒸发，并将残余物溶于CHCl₃中，并用少量水、盐水洗涤，并干燥(Na₂SO₄)。蒸发溶剂，得到黄色油状物(1.69g)，将其直接用于下一步骤。

LC/MS(ES)m/e 207(M+H)⁺

(c)外消旋的{[(2R，S)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基]甲基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

在0℃下，向粗品外消旋的{[(2R，S)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基]甲基}胺(1.69g，8.2mmol)的DCM(15mL)溶液中加入焦碳酸二叔丁基酯(1.88g，8.6mmol)。除去冷却浴，并将该反应于室温下搅拌2小时。将溶剂真空除去，并将生成的油状物在硅胶上纯化，使用96∶4∶1的CHCl₃-甲醇-NH₄OH洗脱，得到白色固体的标题化合物(1.94g，71％，经3步)：LC/MS(ES)m/e 307(M+H)⁺。

(d){[(2S)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基]甲基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯和{[(2R)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基]甲基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

通过手性制备型HPLC，将外消旋的{[(2R，S)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基]甲基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(10g)拆分成两个对映异构体E1和E2，使用Chiralcel OD柱，使用95∶5己烷∶乙醇洗脱，得到无色油状的{[(2S)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基]甲基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(E2，其次洗脱下来的物质，4.9g，99％ee，[α]_D＝-14.6°)，以及无色油状的{[(2R)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基]甲基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(E1，首先洗脱下来的物质，5.0g，＞98％ce，[α]_D＝+14.6°)。

(e)标题化合物

向{[(2S)-4-(苯基甲基)-2-吗啉基]甲基}氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(4.9g，16mmol)的乙醇(160mL)溶液中加入10％Pd/C(1.5g)。将悬浮液在50psi下氢化8小时。将该反应通过

填料过滤，并将填料用甲醇洗涤几次。将滤液浓缩，得到标题化合物(3.35g，97％)，为无色固体，其不需进一步纯化：LC/MS(ES)m/e 217(M+H)⁺。标题化合物的绝对立体化学通过振动圆二色性法确定(VCD)。

制备(E)(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-4-羟基-3-(甲氧基)-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮对映异构体E1

将(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(对映异构体E1)转化为其相应的甲酸盐(0.72g，2mmol)，溶于甲醇(7mL)中，并然后用甲氧基钠(25％的甲醇溶液，1.3mL，6mmol)处理。然后在氩气下将该反应加热回流大约2小时。将冷却的混合物用大约12滴氯化铵水溶液处理，并蒸发至干。将残余物用20％甲醇/二氯甲烷萃取两次，并将萃取物过滤并蒸发，得到产物(0.66g，100％)。

MS(+ve离子电喷雾)m/z 331(MH⁺)。

实施例69：(4S)-4-({4-[6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-d]嘧啶-2-基甲基]氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1类对映异构体)二盐酸盐

将(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(88mg；0.226mmol)和6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-d]嘧啶-2-甲醛(对于合成，参见WO2004014361，中间体8)(41mg；0.249mmol)和固体NaHCO₃(1.13mmol；95mg)在DCM(10mL)和MeOH(3mL)中与一刮勺硫酸钠一起混合，并搅拌过夜。将反应混合物用NaBH(OAc)₃(0.339mmol；72mg)处理，并搅拌2小时。将反应混合物浓缩，并通过硅胶柱色谱法纯化，使用90∶10∶1DCM∶MeOH∶NH₄OH洗脱，得到游离碱形式的产物(34mg；32％)。

¹H NMR(400MHz，MeOH-d₄)

2.33(s，2H)2.48-2.59(m，2H)3.43-3.54(m，2H)3.73(s，1H)3.89(s，1H)3.97(s，1H)4.12(d，J＝13.64Hz，2H)4.37-4.46(m，4H)4.55-4.65(m，3H)4.83(s，1H)6.93(d，J＝9.85Hz，1H)8.09(d，J＝9.60Hz，1H)8.31(s，1H)8.56(d，J＝1.26Hz，1H).

MS(ES+)m/z 469.3(MH⁺)。

将该物质溶于甲醇/氯仿中，并用1N HCl/乙醚(0.145μL)处理，得到标题化合物(二盐酸盐)，为灰白色固体。

实施例70：(4S)-3-氟-4-羟基-4-[(4-{[(7-氧代-6，7-二氢-1H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噁嗪-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二盐酸盐

向50mL圆底烧瓶中加入(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮游离碱(75mg，0.236mmol)(实施例1g)和7-氧代-6，7-二氢-1H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噁嗪-2-甲醛(54.9mg，0.306mmol)(对于制备，参见WO 2008009700中的F(a))在1，2-二氯甲烷(6ml)和甲醇(3ml)中的溶液。将该反应在25℃下搅拌18小时，加入NaBH(OAc)₃(150mg，0.707mmol)，将该反应混合物搅拌1小时。将该溶液浓缩，并将残余物通过ISCO纯化(10∶1CH₂Cl₂/MeOH，含有1％NH₃H₂O；4g柱)，通过干法装柱(1g SiO₂)。浓缩后，得到60mg油状物。将该油状物再溶于1，2-二氯甲烷(3mL)中，用HCl的乙醚溶液(2eq，1N)处理。分离得到标题化合物产物(二盐酸盐)(47mg，36％)。MS(ES+)m/z 482(MH⁺)。1H NMR(400MHz，CHCl₃-d)δppm 1.51(br.s.，1H)1.55(d，J＝10.11Hz，1H)1.92(br.s.，1H)1.94(d，J＝6.06Hz，1H)2.39(br.s.，1H)2.52(d，J＝2.02Hz，1H)2.61(d，J＝3.79Hz，1H)2.88(d，J＝13.39Hz，1H)2.94(d，J＝11.12Hz，1H)3.02(d，J＝11.12Hz，1H)3.26(d，J＝13.39Hz，1H)3.98(s，2H)4.42(s，2H)4.72(s，2H)5.31(s，2H)6.82(d，J＝9.85Hz，1H)7.93(d，J＝9.85Hz，1H)8.23(s，1H)8.40(d，J＝1.52Hz，1H)

实施例71：(4S)-3，4-二氟-4-[(4-{[(7-氧代-6，7-二氢-1H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噁嗪-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二(三氟乙酸盐)

向50mL圆底烧瓶中加入(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮游离碱(实施例28)和7-氧代-6，7-二氢-1H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噁嗪-2-甲醛(对于合成，参见WO 2008009700中的制备F(a))在二氯甲烷(DCM)(3.00ml)和甲醇(3ml)中的溶液。将该反应于25℃搅拌18小时，加入NaBH(OAc)₃，将混合物搅拌1小时，使反应完成。将该溶液浓缩，将残余物通过Biotage(10∶1CH₂Cl₂/MeOH，含有1％NH₃H₂O；4g柱)纯化。收集级分，分离得到产物(20mg，85％纯)。将其再溶于MeOH中，并通过Gilson(0-100％CH₃CN/0.1％TFA)纯化，分离得到标题化合物(为二TFA盐).(17mg)。MS(ES+)m/z 484(MH⁺)。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 1.81(d，J＝3.54Hz，1H)1.86(dd，J＝16.04，3.92Hz，3H)2.21(br.s.，4H)2.55(br.s.，1H)2.60(d，J＝12.63Hz，3H)2.65(br.s.，1H)3.15(br.s.，1H)3.16(d，J＝9.09Hz，2H)3.41(br.s.，4H)3.54-3.60(m，2H)3.62(br.s.，1H)4.00(s，2H)4.37(s，5H)4.79-4.83(m，5H)6.93(d，J＝9.60Hz，2H)8.08(d，J＝9.85Hz，2H)8.30(s，1H)8.56(d，J＝1.26Hz，2H).

实施例72：(4S)-3，4-二氟-4-[(4-{[(7-氧代-1，5，6，7-四氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮二(三氟乙酸盐)

向25mL圆底烧瓶中加入(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3，4-二氟-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(0.060g，0.187mmol)(实施例28)和7-氧代-1，5，6，7-四氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-甲醛(对于合成，参见WO

2008009700中的实施例125c)(0.044g，0.187mmol)在1∶1CH₂Cl₂/MeOH(10mL)中的溶液。加入过量的Na₂SO₄，并将该反应于室温下搅拌44小时。加入NaBH(OAc)₃(0.119g，0.561mmol)，并将该反应于室温下搅拌1小时。将该溶液在减压下浓缩。将粗物质通过反相HPLC纯化，并分离得到标题化合物(为二TFA盐)，为浅黄色固体(0.015g，21％)。LCMS：m/z 482.2(MH⁺)。1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 1.97(td，J＝12.57，3.92Hz，2H)1.96(s，1H)2.29(d，J＝16.67Hz，1H)2.28(b r.s.，1H)2.67-2.89(m，1H)2.73(t，J＝7.71Hz，3H)3.03(t，J＝7.71Hz，2H)3.37-3.62(m，3H)3.74(t，J＝13.52Hz，1H)4.42(s，2H)4.64-4.81(m，1H)4.85-4.95(m，1H)6.93(d，J＝9.85Hz，1H)8.09(d，J＝9.85Hz，1H)8.49(s，1H)8.57(d，J＝1.26Hz，1H).

实施例73：(4S)-3-氟-4-羟基-4-[(4-{[(7-氧代-1，5，6，7-四氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮盐酸盐

向(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(0.064g/0.20mmol)(实施例1g)在1∶1MeOH/CH₂Cl₂(20mL)中的溶液中加入粗品7-氧代-5，6，7，8-四氢吡啶并[2，3-d]嘧啶-2-甲醛(0.070g；0.39mmol)(对于合成，参见WO 2008009700中的实施例125c)、NaHCO₃(0.117g，1.39mmol)和过量的Na₂SO₄。将该溶液在环境温度下搅拌16小时，随后加入Na(OAc)₃BH(0.127g；0.60mmol)。将生成的溶液再搅拌2小时。然后将该溶液在真空下浓缩到硅胶上，并将粗残余物通过硅胶柱色谱法纯化(CH₂Cl₂/90∶10∶1CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH)，得到所需产物的游离碱，为淡黄色固体(0.042g，44％)。LCMS：m/z 480.0(MH⁺)。1H NMR(400MHz，CHCl₃-d)δppm 1.51-1.71(m，2H)1.98(d，J＝6.06Hz，2H)2.41(td，J＝11.37，2.27Hz，1H)2.55(td，J＝11.43，2.15Hz，1H)2.67(t，J＝10.11Hz，1H)2.73(t，J＝7.71Hz，2H)2.87(d，J＝13.39Hz，1H)2.97(t，J＝7.58Hz，3H)3.27(d，J＝13.64Hz，1H)3.48(s，2H)4.01(s，2H)4.41(d，J＝8.34Hz，1H)6.82(d，J＝9.85Hz，1H)7.91(d，J＝9.85Hz，1H)8.32-8.42(m，1H)8.37(d，J＝3.54Hz，1H)。

将游离碱溶于CH₂Cl₂中，用1M盐酸的乙醚溶液处理，并蒸发至干，得到灰白色粉末状的标题化合物(盐酸盐)。

实施例74：(4S)-3-氟-4-羟基-4-[(4-{[(8-羟基-1-氧代-1，2-二氢-3-异喹啉基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮三氟乙酸盐

向50mL圆底烧瓶中加入(4S)-4-[(4-氨基-1-哌啶基)甲基]-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(83mg，0.23mmol)的HCl盐和8-甲氧基甲氧基-1，2-二氢-1-氧代-3-异喹啉甲醛(对于合成，参见WO2002008224，实施例622-(e))(54mg，0.23mmol)在1，2-二氯甲烷(6ml)和甲醇(3ml)中的溶液。加入NaHCO₃(58mg，0.69mmol)。将该反应于25℃搅拌18小时，加入Na(OAc)₃BH(146mg，0.69mmol)，将反应混合物搅拌1小时，只形成微量的产物。加入NaBH₄(17mg，0.46mmol)，将该溶液继续搅拌1小时，浓缩，并将残余物通过ISCO纯化((10∶1DCM/MeOH，含有1％NH₃H₂O；4g柱)，通过干法装柱(1g SiO₂)。通过快速色谱法纯化后，使用4N HCl的二噁烷溶液除去MOM(甲氧基甲基)保护基团。浓缩后，将产物进一步通过Gilson(0-50％CH₃CN/H₂O/1％TFA)纯化。分离得到标题化合物(为TFA盐)(5mg，3％)。MS(ES+)m/z 492(MH⁺)

生物活性

一般抗菌活性试验

全细胞抗菌活性可通过肉汤微稀释法测定，使用Clinical and LaboratoryStandards Institute(CLSI)推荐的方法，文件M7-A7，″Methods for DilutionSusceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically″。化合物可用0.016-16mcg/mL的范围内的一系列的两倍稀释液测试。

可评价化合物对下面一组革兰氏阳性生物体的活性，所述革兰氏阳性生物体包括金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)，肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)，酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)，粪肠球菌(Enterococcusfaecalis)和屎肠球菌(Enterococcus faecium)。

另外，可评价化合物对下面一组革兰氏阴性菌株的活性，所述革兰氏阴性菌株包括流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)，粘膜炎莫拉氏菌(Moraxella catarrhalis)，大肠杆菌(Escherichia coli)，铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)，奇异变形菌(Proteus mirabilis)，侵肺军团菌(Legionella pneumophila)，肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)，阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)，产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)，肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)和嗜麦芽糖寡养单胞菌(Stenotrophomonasmaltophilia)。

可测定最小抑制浓度(MIC)作为抑制可见的生长的化合物的最小浓度。可使用镜面读数器(mirror reader)来辅助确定MIC端点。

抗菌活性试验的结果

如在本申请中所确定的各个所列实施例以至少一种示例性的盐的形式进行了测试。除非另有说明，所列实施例对至少一种上面列出的生物体的菌株具有MIC≤2μg/ml。实施例24、38和39对至少一种上面列出的生物体的菌株具有MIC≤4μg/ml。实施例47和65对至少一种上面列出的生物体的菌株具有MIC≤8μg/ml。实施例66对上面列出的所有生物体的菌株具有MIC值＞16μg/ml。

结核分枝杆菌(Mvcobacterium tuberculosis)H37Rv抑制试验

对于各个测试化合物的最小抑制浓度(MIC)的测定在96孔平底聚苯乙烯微量滴定板中进行。从400μM起始，以纯DMSO进行10次2-倍药物稀释。将5μl的这些药物溶液加至95μl Middlebrook 7H9培养基中。(板排列的A-H行，1-10列)。异烟肼用作阳性对照，从160μgml^-1起始，制备异烟肼的8次2-倍稀释液，将5μl该对照稀释液(curve)加至95μl Middlebrook 7H9培养基(Difco目录编号271310)中。(11列，A-H行)。将5μl纯DMSO加至12列(生长和空白对照)。

将接种物标准化为约1x10⁷cfu/ml，并用Middlebrook 7H9肉汤(Middlebrook ADC enrichment，可帮助由Becton Dickinson目录编号211887获得的mycobacterial物种生长的脱水培养基)以1∶100稀释，以制备H37Rv菌株(ATCC25618)的最终接种物。将100μl该接种物加至整个板中，除了G-12和H-12孔(空白对照)。将全部板置于密封盒中以防止外周孔干透，将它们在37℃不用振动培养6天。刃天青溶液通过将一片刃天青(resazurin)(ResazurinTablets for Milk Testing；Ref330884Y VWR International Ltd)溶于30ml无菌PBS(磷酸盐缓冲盐水)中制备。将25μl该溶液加入到每个孔中。48小时后，测定荧光(Spectramax M5Molecular Devices，激发530nm，发射590nm)以确定MIC值。

结核分枝杆菌(Mvcobacterium tuberculosis)H37Rv抑制试验的结果

实施例1、3A、4A、6、8A、10B、13-15、19、20A、22、23A、26B、32、33、35-37、40-43、46、48、49、51、53、54、56、59、69和70在结核分枝杆菌H37Rv抑制试验中进行测试。实施例1、3A、6、8A、10B、13-15、19、20A、23A、26B、32、33、35-37、40-42、46、48、49、51、53、54、56、69和70显示的MIC值为4.0μg/ml或小于4.0μg/ml。实施例3A、6、8A、10B、14、19、23A、32、35、37、40、41、46、48、53、54、56和70显示的MIC值为1.7μg/ml或小于1.7μg/ml。

Claims

1.式(I)化合物或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物在制备用于治疗哺乳动物结核病的药物中的用途：

其中：

R²为氢或(C_1-4)烷基，或R²与R⁶一起形成如下所定义的Y；

A为基团(ia)或(ib)：

其中：R³为如对R^1a或R^1b所定义或R³为氧代基团，且n为1或2；

或A为基团(ii)

其中：W¹、W²和W³各自为CR⁴R⁸；

或W²和W³为CR⁴R⁸，且W¹表示W³和N之间的化学键；

X为O、CR⁴R⁸或NR⁶；

R⁶为氢或(C_1-6)烷基；或R⁶与R²一起形成Y；

Y为CR⁴R⁸CH₂；CH₂CR⁴R⁸；C＝O；CR⁴R⁸；CR⁴R⁸(C＝O)；或(C＝O)CR⁴R⁸；

或当X为CR⁴R⁸时，R⁸和R⁷一起表示化学键；

U选自CO和CH₂，和

R⁵为任选取代的二环碳环或杂环体系(B)：

在每个环中含有至多4个杂原子，其中

环(a)和环(b)中至少一个为芳香环；

X³和X⁵独立地为N或C；

R¹⁴和R¹⁵可一起表示氧代基团；

各x独立地为0、1或2；且

R⁹为氟或羟基。

2.根据权利要求1的化合物的用途，其中R^1a为氯、氟或甲氧基，且R^1b为氢，或者R^1a为氟且R^1b为氯或氟。

3.根据前述权利要求中任一项的化合物的用途，其中R²为氢。

4.根据前述权利要求中任一项的化合物的用途，其中与基团R⁹相连的碳原子的立体化学为S构型。

5.根据前述权利要求中任一项的化合物的用途，其中A为基团(ia)，其中n为1且R³为氢或羟基。

6.根据权利要求1-4中任一项的化合物的用途，其中A为(ii)，W¹为化学键，X、W²和W³各自为CH₂且R⁷为H。

7.根据前述权利要求中任一项的化合物的用途，其中U为CH₂。

8.根据前述权利要求中任一项的化合物的用途，其中R⁵为具有8-11个环原子的芳香杂环(B)，且所述环原子包括其中至少一个为N或NR¹³的2-4个杂原子，其中Y²包含2-3个杂原子，其中一个为S和1-2个为N，有一个N键接于X³，或者，该杂环(B)具有芳香环(a)和非芳香环(b)，所述芳香环(a)选自任选取代的苯并环、吡啶并环和哒嗪并环，以及Y²具有3-5个原子，其包括至少一个杂原子，有O、S、CH₂或NR¹³键接于X⁵，其中R¹³不为氢，以及或者NHCO通过N键接于X³，或者通过O、S、CH₂或NH键接于X³。

9.根据权利要求1-7中任一项的化合物的用途，其中R⁵选自：

3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噁嗪-6-基；

3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噻嗪-6-基；

6，7-二氢[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基；

6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]哒嗪-3-基；

6，7-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]哒嗪-3-基；

2，3-二氢-[1，4]二氧杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基；

[1，3]氧硫杂环戊烯并[5，4-c]吡啶-6-基；

2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂环己二烯-6-基；

2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[2，3-c]吡啶-7-基；

3，4-二氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-基；

2，3-二氢[1，4]氧硫杂环己二烯并[3，2-c]吡啶-7-基；和

6，7-二氢-5H-吡喃并[2，3-c]哒嗪-3-基。

10.根据前述权利要求中任一项的化合物的用途，其中该化合物选自：

(4R)-4-({4-[(3，4-二2氢-2H-吡喃并[2，3-c]吡啶-6-基甲基)氨基]-1-哌啶基}甲基)-3-氟-4-羟基-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E2类对映异构体)；

3，4-二氟-4-[(4-{[(3-氧代-3，4-二氢-2H-吡啶并[3，2-b][1，4]噁嗪-6-基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮(E1对映异构体)；和

(4S)-3-氟4-羟基-4-[(4-{[(8-羟基-1-氧代-1，2-二氢-3-异喹啉基)甲基]氨基}-1-哌啶基)甲基]-4，5-二氢-7H-吡咯并[3，2，1-de]-1，5-二氮杂萘-7-酮；

或选自表1或2的化合物；

或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物。

11.根据权利要求1-10中任一项所限定的式(I)化合物、或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物，其用于治疗哺乳动物的结核病。

12.治疗哺乳动物的结核病的方法，该方法包括向有此治疗需要的哺乳动物给药有效量的权利要求1-10中任一项所限定的式(I)化合物、或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物。

13.药物组合物在制备用于治疗哺乳动物的结核病的药物中的用途，所述药物组合物包括权利要求1-10中任一项所限定的式(I)化合物、或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物，以及可药用载体。

14.药物组合物，其包括权利要求1-10中任一项所限定的式(I)化合物、或其可药用盐、溶剂合物或N-氧化物，以及可药用载体、赋形剂或稀释剂，该药物组合物用于治疗哺乳动物的结核病。