CN101766252A - 一种羊血高活性免疫球蛋白浓缩物及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种羊血高活性免疫球蛋白浓缩物及其制备方法，属于食品添加剂领域。本发明主要是向羊血中加入柠檬酸三钠，然后离心，收取羊血浆蛋白溶液；在密闭容器中抽气，获得无膻味的羊血浆蛋白溶液；再用水稀释、然后经滤膜超滤、冷冻干燥即得羊血高活性免疫球蛋白浓缩物。本发明羊血免疫球蛋白活性高，无膻味，口味好，使用安全；本发明方法产量高，每千克羊血可制备30克以上的羊血免疫球蛋白浓缩物；本发明方法简单易行、成本低、能耗可降低52％以上；本发明利用了充分利用了羊血资源，减少了环境污染。
Description
技术领域
本发明属于食品添加剂领域，具体涉及一种羊血高活性免疫球蛋白浓缩物及其制备方法。
背景技术
免疫球蛋白(Immunoglobulin，Ig)是具有抗体活性的，能与相应的抗原发生特异性结合反应的球蛋白，普遍存在于哺乳动物的血液、组织液、淋巴液和体外分泌液中的蛋白质。免疫球蛋白在动物体内具有重要的免疫和生理调节作用，对于改善婴幼儿、中老年人及免疫力低下人群的健康具有重要的作用。其广泛应用于开发功能性食品原料。
动物血液中含有1.5～2％具有活性的免疫球蛋白，是一种丰富、廉价的活性免疫球蛋白的来源。从动物血液中提取免疫球蛋白的方法很多，常用的有盐析法、有机溶剂沉淀法、变性沉淀法、超滤法、柱层析法等。目前生产上应用的主要有盐析法、低温乙醇沉淀法、超滤法等。其中盐析法可以在常温下生产，但其要经过长时间的脱盐；有机溶剂沉淀法大都需要在低温下反应，提取的步骤比较繁琐；如何在提取过程中减少免疫球蛋白的变性，提高免疫球蛋白得率，是目前免疫球蛋白生产中存在的主要问题。
专利《从牛初乳中制备多种生物活性物质的方法》(申请号为：200410015868.5)《从乳汁中提取免疫球蛋白A的方法》(申请号为：99114423.6)《牛、羊初乳粉的制备方法及其制备的牛、羊初乳粉》(申请号为：200510056717.9)公开了从乳汁中提取免疫球蛋白的方法。《猪血中提取免疫球蛋白IgG的方法》(申请号为：200510018302.2)公开了从猪血中提取免疫球蛋白的方法，但是还没有发现从羊血中提取免疫球蛋白的报道，主要是由于羊血具有膻味，其提取物也具有膻味，因而难以作为食品添加剂应用。
发明内容
本发明的目的是提供一种无膻味、含有高活性免疫球蛋白的羊血高活性免疫球蛋白浓缩物。
本发明另一目的是提供上述羊血高活性免疫球蛋白浓缩物的制备方法。
实现本发明的技术方案如下：
一种羊血高活性免疫球蛋白浓缩物，按照如下方法制备：
(1)、预处理：按照重量百分比为0.3～0.5％的比例向羊血中加入柠檬酸三钠，搅拌均匀，然后在4000～6000g离心6～10min，分离为两层溶液，下层为羊血红蛋白溶液，上层为羊血浆蛋白溶液，收集上层的羊血浆蛋白溶液；
(2)、将所得羊血浆蛋白溶液置于密闭容器中加热到58～70℃，用真空泵抽气，当真空度达到0.07～0.09兆帕时，再抽气2～4分钟；得到无膻味的羊血浆蛋白溶液；
(3)、用水将步骤(2)所得羊血浆蛋白溶液稀释至浓度为5～7％，然后经过120～140ku滤膜超滤2～3次，收取截留液；
(4)、将截留液冷冻干燥12～24小时，得到无膻味的羊血高活性免疫球蛋白浓缩物。
上述羊血高活性免疫球蛋白浓缩物步骤(1)中所述的羊血可以是新鲜羊血。
上述羊血高活性免疫球蛋白浓缩物步骤(2)中所述的真空度优选为0.08兆帕。
上述羊血高活性免疫球蛋白浓缩物的制备方法，按照如下步骤进行：
(1)、预处理：按照重量百分比为0.3～0.5％的比例向羊血中加入柠檬酸三钠，搅拌均匀，然后在4000～6000g离心6～10min，分离为两层溶液，下层为羊血红蛋白溶液，上层为羊血浆蛋白溶液，收集上层的羊血浆蛋白溶液；
(2)、将所得羊血浆蛋白溶液置于密闭容器中加热到58～70℃，用真空泵抽气，当真空度达到0.07～0.09兆帕时，再抽气2～4分钟；得到无膻味的羊血浆蛋白溶液；
(3)、用水将步骤(2)所得羊血浆蛋白溶液稀释至浓度为5～7％，然后经过120～140ku滤膜超滤2～3次，收取截留液；
(4)、将截留液冷冻干燥12～24小时，得到无膻味的羊血高活性免疫球蛋白浓缩物。
上述制备方法步骤(1)中所述的羊血可以是新鲜羊血。
上述制备方法步骤(2)中所述的真空度优选为0.08兆帕。
本发明羊血高活性免疫球蛋白浓缩物可作为食品添加剂添加于食品中。
本发明具有的优点：(1)、本发明羊血免疫球蛋白活性高，可达90％以上；(2)、本发明无膻味，口味好，采用物理方法脱除了羊血免疫球蛋白中85～95％的膻味；(3)、本发明羊血免疫球蛋白使用安全，在制备过程中没添加任何有机溶剂；(4)、本发明制备方法产量高，每千克羊血可制备30克以上的羊血免疫球蛋白浓缩物；(5)、本发明方法简单易行、成本低、能耗可降低52％以上；(6)本发明利用了通常作为废物排放的羊血，减少了环境污染。
具体实施方式
实施例1羊血高活性免疫球蛋白浓缩物的制备
(1)向500g羊血液中加入浓度为20％的柠檬酸三钠溶液10g，搅拌均匀，然后在5000g离心(TGL-16A离心机，长沙平凡仪器仪表有限公司)6min，分离得到两层溶液，下层为羊血红蛋白溶液，上层为羊血浆蛋白溶液，收集上层的羊血浆蛋白溶液(175g)。
(2)将所得羊血浆蛋白溶液置于密闭容器中，升温到65℃，用真空泵抽气，当真空度达到0.085兆帕时，再抽气2分钟，得无膻味的羊血浆蛋白溶液。
(3)用水将步骤(2)所得的羊血浆蛋白溶液稀释至浓度为5％，经过120ku滤膜(LM-125，北京旭邦膜设备有限责任公司)超滤3次，取截留液。
(4)将截留液进行冷冻干燥(FD-1PF，北京德天佑科技发展有限公司)12小时，得到无膻味的羊血高活性免疫球蛋白浓缩物15.5克。
采用单向免疫扩散法测定所得羊血高活性免疫球蛋白浓缩物中活性免疫球蛋白的含量，结果活性免疫球蛋白的含量为7.1克。
实施例2羊血高活性免疫球蛋白浓缩物的制备
(1)向1000g羊血液中加入浓度为20％的柠檬酸三钠溶液22g，搅拌均匀，然后在4000g离心(TGL-16A离心机，长沙平凡仪器仪表有限公司)8min，分离得到两层溶液，下层为羊血红蛋白溶液，上层为羊血浆蛋白溶液，收集上层的羊血浆蛋白溶液(370g)。
(2)将所得的羊血浆蛋白溶液置于密闭容器中，升温到64℃，用真空泵抽气，在真空度达到0.086兆帕时再抽气3分钟，得到无膻味的羊血浆蛋白溶液。
(3)用水将步骤(2)所得羊血浆蛋白溶液稀释至浓度为6％，经过130ku滤膜(LM-125，北京旭邦膜设备有限责任公司)超滤2次，收取截留液。
(4)将截留液进行冷冻干燥(FD-1PF，北京德天佑科技发展有限公司)15小时，得到无膻味的羊血高活性免疫球蛋白浓缩物32克。
采用单向免疫扩散法测定所得羊血高活性免疫球蛋白浓缩物中活性免疫球蛋白的含量，结果活性免疫球蛋白的含量为14.6克。
实施例3羊血高活性免疫球蛋白浓缩物的制备
(1)向1000g羊血液中加入浓度为20％的柠檬酸三钠溶液22g，然后在5000g下离心(TGL-16A离心机，长沙平凡仪器仪表有限公司)6min，分离为两层溶液，下层为羊血红蛋白溶液，上层为羊血浆蛋白溶液，取上层的羊血浆蛋白溶液(365g)。
(2)将所得羊血浆蛋白置于密闭容器中，升温到64℃，用真空泵抽气，在真空度达到0.086兆帕时再抽气4分钟，得无膻味的羊血浆蛋白溶液。
(3)用水将步骤(2)所得羊血浆蛋白溶液稀释至浓度为7％，经过120ku滤膜(LM-125，北京旭邦膜设备有限责任公司)超滤2次，收取截留液。
(4)将截留液进行冷冻干燥(FD-1PF，北京德天佑科技发展有限公司)13小时，得到无膻味的羊血高活性免疫球蛋白浓缩物32.5克。
采用单向免疫扩散法测定所得羊血高活性免疫球蛋白浓缩物中活性免疫球蛋白的含量，结果活性免疫球蛋白的含量为14.8克。
Claims (6)
1.一种羊血高活性免疫球蛋白浓缩物，按照如下方法制备：
(1)、预处理：按照重量百分比为0.3～0.5％的比例向羊血中加入柠檬酸三钠，搅拌均匀，然后在4000～6000g离心6～10min，分离为两层溶液，下层为羊血红蛋白溶液，上层为羊血浆蛋白溶液，收集上层的羊血浆蛋白溶液；
(2)、将所得羊血浆蛋白溶液置于密闭容器中加热到58～70℃，用真空泵抽气，当真空度达到0.07～0.09兆帕时，再抽气2～4分钟；得到无膻味的羊血浆蛋白溶液；
(3)、用水将步骤(2)所得羊血浆蛋白溶液稀释至浓度为5～7％，然后经过120～140ku滤膜超滤2～3次，收取截留液；
(4)、将截留液冷冻干燥12～24小时，得到无膻味的羊血高活性免疫球蛋白浓缩物。
2.按照权利要求1所述的羊血高活性免疫球蛋白浓缩物，其特征在于其步骤(1)中所述的羊血是新鲜羊血。
3.按照权利要求1或2所述的羊血高活性免疫球蛋白浓缩物，其特征在于其步骤(2)中所述的真空度为0.08兆帕。
4.权利要求1所述的羊血高活性免疫球蛋白浓缩物的制备方法，按照如下步骤进行：
(1)、预处理：按照重量百分比为0.3～0.5％的比例向羊血中加入柠檬酸三钠，搅拌均匀，然后在4000～6000g离心6～10min，分离为两层溶液，下层为羊血红蛋白溶液，上层为羊血浆蛋白溶液，收集上层的羊血浆蛋白溶液；
(2)、将所得羊血浆蛋白溶液置于密闭容器中加热到58～70℃，用真空泵抽气，当真空度达到0.07～0.09兆帕时，再抽气2～4分钟；得到无膻味的羊血浆蛋白溶液；
(3)、用水将步骤(2)所得羊血浆蛋白溶液稀释至浓度为5～7％，然后经过120～140ku滤膜超滤2～3次，收取截留液；
(4)、将截留液冷冻干燥12～24小时，得到无膻味的羊血高活性免疫球蛋白浓缩物。
5.按照权利要求4所述的制备方法，其特征在于其步骤(1)中所述的羊血是新鲜羊血。
6.按照权利要求4或5所述的制备方法，其特征在于其步骤(2)中所述的真空度为0.08兆帕。
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