CN101759698A

CN101759698A - 一种恩替卡韦的制备方法

Info

Publication number: CN101759698A
Application number: CN200910201121A
Authority: CN
Inventors: 周智善; 魏宪明; 许杏祥; 陈慧新
Original assignee: SHANGHAI PHARMACEUTICAL STOCK CO Ltd
Current assignee: Shanghai Pharmaceuticals Holding Co Ltd; Shanghai Zhongxi Sunve Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2009-12-15
Filing date: 2009-12-15
Publication date: 2010-06-30
Anticipated expiration: 2029-12-15
Also published as: CN101759698B

Abstract

本发明涉及一种治疗乙型肝炎药物恩替卡韦I的制备方法，以[1S(1α，2α，3β，5α)]-3-苯甲氧基-2-苯甲氧甲基-6-氧杂二环[3.1.0]己烷II和2，6-二氨基嘌呤III为起始原料，通过开环氧缩合，trityl氨基保护、氧化、亚甲基化，然后改用乙酰基保护2-位氨基，6-位氨基重氮化水解，最后去保护基，制得恩替卡韦，本发明反应收率高，产品光学纯度高，操作简便，适合工业化生产。

Description

一种恩替卡韦的制备方法

技术领域

本发明涉及药物制备，具体涉及一种治疗乙型肝炎药物恩替卡韦的制备方法。

背景技术

恩替卡韦(Entecavir)是一种脱氧鸟核苷类似物。其化学名为[1S-(1α，3α，4β)]-2-氨基-1，9-二氢-9-[4-羟基-3-羟甲基-2-亚甲基环戊基]-6H-嘌呤-6-酮1水合物，结构式I如下：

体外试验表明，它对肝细胞内逆转录酶和乙型肝炎病毒DNA多聚酶有直接抑制作用，能有效抑制乙型肝炎病毒的复制，有很强的抗乙肝病毒能力，并且选择性很高。它的抗乙肝病毒活性比对细胞毒性大8000倍，有着十分优良的选择性治疗指数。大量临床应用后证明，日口服0.1mg-0.5mg剂量的恩替卡韦即可有效治疗慢性乙型肝炎。

自美国专利(US5206244)公开了恩替卡韦的制备和治疗乙型肝炎的用途后，有关它的合成专利报道，如WO98/09964，WO04/052310；美国施贵宝公司先后开发了二种制备方法，均申请了中国专利，公开号：CN1061972A和CN1747959A；之后，约有数篇中国专利公开报道了恩替卡韦的制备，综合这些专利报道，涉及偶联的方法主要有：(A)碱基和手性取代1，2-环氧环戊烷进行开环氧偶联，(B)碱基和手性取代环戊醇以Mitsonobu反应进行偶联，反应式如下：

上述两种偶联的方法中，其碱基均采用6-取代(X为苄氧基，氯，溴，碘)-2-氨基嘌呤，该方法的缺点是常伴有嘌呤核7位的偶联，从而导致7-位异构体的生成。

发明内容

本发明选用2，6-二氨基嘌呤为碱基，提出了偶联的区域专属性，提供一种原料易得，操作简便，产品纯度高的制备恩替卡韦的方法。

本发明提供一种恩替卡韦的制备方法。

本发明方法包括下列步骤：

(1)用2，6-二氨基嘌呤III作为碱基，与[1S(1α，2α，3β，5α)]-3-苯甲氧基-2-苯甲氧甲基-6-氧杂二环[3.1.0]己烷II，在冠醚和碱存在下，缩合得[1S(1α，2β，3α，5β)]-5-(2，6-二氨基嘌呤-9-基)-3-苯甲氧基-2-苯甲氧甲基环戊醇IV；

所述碱可以是NaH或LiH，也可用KOH或K2CO3等，优选NaH或LiH；

(2)化合物IV在碱的作用下，用氨基保护剂保护嘌呤环上二个氨基得[1S-(1α，2β，3α，5β)]-5-[2，6-双(三苯甲氨基)嘌呤-9-基]-3-苯甲氧基-2-苯甲氧甲基环戊醇V；

所述氨基保护剂为三苯氯甲烷或对甲氧基二苯基氯甲烷；

(3)化合物V的羟基经氧化剂氧化得[2R(2α，3β，5α)]-5-[2，6-双(三苯甲氨基)嘌呤-9-基]-3-苯甲氧基-2-苯甲氧甲基环戊酮VI；

(4)化合物VI与亚甲基化试剂Nysted试剂反应，亚甲基化得[1S(1α，3α，4β)]-9-[2-亚甲基-4-苯甲氧基-3-苯甲氧甲基环戊基]-2，6-双(三苯甲氨基)-9H-嘌呤VII；

所述亚甲基化试剂为Nysted试剂锌-四氯化钛-二溴甲烷复合物或锌-四氯化钛-二碘甲烷复合物；

(5)化合物VII用稀酸水解脱去三苯甲基保护基后得[1S(1α，3α，4β)]-9-[2-亚甲基-4-苯甲氧基-3-苯甲氧甲基环戊基]-9H-嘌呤-2，6-二胺VIII；

(6)化合物VIII用醋酐双乙酰化，然后用氨醇溶液部分氨解得[1S(1α，3α，4β)]-2-乙酰氨基-9-[2-亚甲基-4-苯甲氧基-3-苯甲氧甲基环戊基]-9H-嘌呤-6-胺IX；

(7)化合物IX的嘌呤环6-位氨基用NaNO2在HOAc溶液中重氮化，水解得[1S-(1α，3α，4β)]-2-乙酰氨基-1，9-二氢-9-[2-亚甲基-4-苯甲氧基-3-苯甲氧甲基环戊基]-6H-嘌呤-6-酮X；

(8)用氨醇溶液氨解化合物X中2-位乙酰基，最后以BCl3脱除二个苄基保护基制得恩替卡韦I。

反应式如下：

本发明采用2，6-二氨基嘌呤III作为碱基，与易得的试剂为原料，各步反应技术条件相对简单，收率较高，分离纯化容易，适合工业化生产。

具体实施方式

以下实施例的制备方法应理解为仅用于进一步说明本发明，而不是对本发明的限制，在本发明构思的前提下，对本发明制备方法中反应条件，溶剂等的简单改变都属于本发明要求的保护范围。

实施例1.

[1S(1α，2β，3α，5β)]-5-(2，6-二氨基嘌呤-9-基)-3-苯甲氧基-2-苯甲氧甲基环戊醇IV的制备

2，6-二氨基嘌呤15g，60％NaH 2g，干燥的DMF250ml混合，85℃搅拌20分钟，冷至室温，加[1S(1α，2α，3β，5α)]-3-苯甲氧基-2-苯甲氧甲基-6-氧杂二环[3，1，0]己烷II 15.5g和18-冠醚-61.4g，加热回流四小时。反应结束后减压蒸去DMF，残留物用醋酸乙酯提取，依次用水，饱和氯化钠溶液洗，干燥，浓缩，粗品过柱得缩合物IV17.2g，收率74％。

实施例2

[1S(1α，2β，3α，5β)-5-[2，6-双(三苯甲氨基)嘌呤-9-基]-3-苯甲氧基-2-苯甲氧甲基环戊醇V的制备

上步制得的缩合物IV12g，三苯氯甲烷21.76g，三乙胺7.9g，干燥的二氯甲烷240ml混合，室温搅拌过夜。反应结束后加饱和碳酸氢钠溶液终止反应。分取有机层，水层用二氯甲烷提取，合并有机层，依次用水、饱和氯化钠溶液洗，干燥，蒸去溶媒后经重结晶得双保护产物V 15g，收率60％。

实施例3

[2R(2α，3β，5α)]-5-[2，6-双(三苯甲氨基)嘌呤-9-基]-3-苯甲氧基-2-苯甲氧甲基环戊酮VI的制备

无水二氯甲烷60ml，草酰氯4.17g混合后，于冷至-70℃，滴加二甲亚砜5g在20ml无水二氯甲烷中的溶液，搅拌15分钟后，滴加实施例2制得的双保护产物V 10g和40ml无水二氯甲烷配成的溶液。继续低温反应二小时。滴加三乙胺7.5g，再搅拌一小时。反应液倒入饱和碳酸氢钠溶液终止反应。分出有机层，水层用二氯甲烷提取，合并有机相，用水洗至中性，干燥后减压蒸去溶媒得VI粗品10g。

实施例4

[1S(1α，3α，4β)]9-[2-亚甲基-4-苯甲氧基-3-苯甲氧甲基环戊基)]-2，6-双(三苯甲氨基)-9H-嘌呤VII的制备

在氩气保护下，活性锌粉20g，无水四氢呋喃310ml，室温搅拌下加二碘甲烷28.4g，冷至-40℃慢慢滴加14.5g四氯化钛，滴毕，温度控制在0～5℃反应72hr。冷却下滴加上步制得的酮VI10g和20ml四氢呋喃配成的溶液，室温搅拌过夜。次日反应液倒入二氯甲烷和饱和碳酸氢钠的混合液中剧烈搅拌，一小时后过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤。合并有机层，依次用水、饱和氯化钠溶液洗，干燥，浓缩得VII粗品10g。

实施例5

[1S(1α，3α，4β)]-9-[2-亚甲基-4-苯甲氧基-3-苯甲氧甲基环戊基]-9H-嘌呤-2，6-二胺VIII的制备

上步制得的VII10g，四氢呋喃100ml和3N盐酸100ml混合，60℃搅拌反应。TLC检查至原料消失，用氢氧化钠溶液中和至pH～8，减压蒸去有机溶剂，水层用乙酸乙酯提取。合并有机层，用饱和氯化钠溶液洗涤、干燥、浓缩，所得粗品用硅胶层析过柱，收集双氨基产物VIII约3g，上述VI-VIII三步总收率约60％。

实施例6

[1S(1α，3α，4β)]2-乙酰氨基-9-[2-亚甲基-4-苯甲氧基-3-苯甲氧甲基环戊基]-9H-嘌呤-6-胺IX的制备

10g上述双氨基产物，220g乙酸酐，室温搅拌反应20小时。在冰浴冷却下滴加甲醇224ml，搅拌1小时，以破坏过量酸酐。减压蒸干溶剂，残留物用二氯甲烷溶解，有机层依次用碳酸氢钠，水和饱和氯化钠溶液洗，干燥浓缩得IX10.5g。

上述IX10g溶解在200ml饱和氨甲醇溶液中，室温搅拌3小时。反应结束，减压浓缩，残留物用二氯甲烷提取，水洗，

干燥浓缩得IX粗品10g。

实施例7

[1S(1α，3α，4β)]2-乙酰氨基-1，9-二氢-9-[2-亚甲基-4-苯甲氧基-3-苯甲氧甲基环戊基]-6H-嘌呤-6-酮X的制备

上步制得的IX10g溶于200ml冰醋酸中，室温搅拌下缓慢滴加亚硝酸钠溶液(22g亚硝酸钠和60ml水配制而成)，反应半小时。第二次滴加11g亚硝酸钠配制的溶液，滴毕搅拌1小时，升至60℃反应二小时。冷至室温加入尿素34g，搅拌半小时。减压蒸去溶剂，残留物用二氯甲烷溶解，用饱和碳酸氢钠调至pH～8。分出有机层，用饱和氯化钠洗，干燥浓缩，粗品层析过硅胶柱得6-位酮基产物X 5g，上述VIII-X三步总产率61.7％。

实施例8

恩替卡韦的制备

上述X 10g溶于1500ml饱和氨甲醇溶液，反应半小时后缓慢升温至60℃，反应二小时。减压蒸干溶剂，二氯甲烷溶解，依次用水和饱和氯化钠溶液洗涤，干燥浓缩得粗品，重结晶得中间体酮胺物8.3g，产率90％。

上述酮胺物10g溶于干燥二氯甲烷350ml，在氩气保护下冷至-78℃，滴加1M三氯化硼-二氯甲烷溶液127ml，滴完后反应30分钟。然后升温至-20℃反应30分钟。再次冷至-78℃，滴加甲醇400ml，自然升至室温，减压浓缩，再加400ml甲醇，浓缩。残留物加水100ml，用乙醚-乙酸乙酯(1∶1)洗涤二次，分出水层，用氢氧化钠水溶液调pH～8，反应液呈混浆状，加热溶解，加活性炭脱色，滤液冷却过夜，过滤，固体用水洗，乙醚-乙酸乙酯洗，干燥得恩替卡韦I 3.77g，收率58.2％。

[α]_D＝+35.5°(c，0.38，Water)

¹HNMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ10.64(s，1H，1-NH)，7.69(s，1H，8-H)，6.45(s，2H，2-NH₂)，5.39(dd，J＝10.2Hz，J＝8.0Hz，1H，4′-H)，5.12(s，1H，亚甲基氢)，4.90(d，J＝2.7Hz，1H，-OH)，4.86(t，J＝4.9Hz，1H，-OH)，4.59(s，1H，亚甲基氢)，4.26(br.s，1H，1′-H)，3.56(m，2H，-CH₂OH)，2.54(m，1H，3′-H)，2.24(m，1H，5′-H)，2.06(m，1H，5′-H)，

¹³C NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ156.9，153.5，151.5，151.3，136.0，116.2，109.3，70.4，63.0，55.2，54.1，39.2。

Claims

1.一种恩替卡韦的制备方法，其特征在于该方法包括下列步骤：

(8)用氨醇溶液氨解化合物X中2-位乙酰基，最后以BCl₃脱除二个苄基保护基制得恩替卡韦I，

反应式如下：

2.根据权利要求1所述一种恩替卡韦的制备方法，其特征在于步骤(1)所述碱为NaH、LiH、KOH或K₂CO₃优选NaH或LiH。

3.根据权利要求1所述一种恩替卡韦的制备方法，其特征在于步骤(1)所述碱为NaH或LiH。

4.根据权利要求1所述一种恩替卡韦的制备方法，其特征在于步骤(2)所述氨基保护剂为三苯氯甲烷或对甲氧基二苯基氯甲烷。

5.根据权利要求1所述一种恩替卡韦的制备方法，其特征在于步骤(4)亚甲基化试剂为锌-四氯化钛-二溴甲烷复合物或锌-四氯化钛-二碘甲烷复合物。