CN101658137B - 巨桉无性系wleg-17组培培养基 - Google Patents

巨桉无性系wleg-17组培培养基 Download PDF

Info

Publication number
CN101658137B
CN101658137B CN2009101047536A CN200910104753A CN101658137B CN 101658137 B CN101658137 B CN 101658137B CN 2009101047536 A CN2009101047536 A CN 2009101047536A CN 200910104753 A CN200910104753 A CN 200910104753A CN 101658137 B CN101658137 B CN 101658137B
Authority
CN
China
Prior art keywords
concentration
wleg
clone
culture medium
seedling
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN2009101047536A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101658137A (zh
Inventor
刘奕清
陈泽雄
廖林正
吕玉奎
黄登艳
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chongqing University of Arts and Sciences
Original Assignee
Chongqing University of Arts and Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chongqing University of Arts and Sciences filed Critical Chongqing University of Arts and Sciences
Priority to CN2009101047536A priority Critical patent/CN101658137B/zh
Publication of CN101658137A publication Critical patent/CN101658137A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101658137B publication Critical patent/CN101658137B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了巨桉无性系WLEG-17组培培养基，由具有以下浓度的组分组成：KNO3 1900～2375mg/L，NH4NO3 273～411mg/L，KH2PO4 270～338mg/L，MgSO4·7H2O 480～540mg/L，Ca(NO3)2·4H2O 300mg/L，VB2 6mg/L，6-BA 0.5mg/L，NAA 0.2mg/L，琼脂4700mg/L，微量元素、铁盐与有机物的种类和浓度以及蔗糖浓度与MS培养基相同；本发明培养基在MS培养基的基础上，通过调整大量元素的种类和浓度，添加有机附加成分VB2，优化激素调控和琼脂浓度等，为巨桉无性系WLEG-17组培苗提供了均衡合理的营养需求，保证了其快速、高效、健壮生长，有效的控制了愈伤和玻璃化现象的产生。

Description

巨桉无性系WLEG-17组培培养基
技术领域
本发明涉及一种桉树组培培养基，特别涉及巨桉无性系WLEG-17组培培养基。
背景技术
桉树是世界上三大速生树种之一，其中，巨桉无性系WLEG-17(学名为Eucaiypt us grandis Hill ex Maiden)是我国南方热带、亚热带地区最为重要的速生丰产林造林品种，具有生长迅速、干形通直、树形优美、材质好、抗病虫、抗高温干旱、较耐贫瘠等优点。由于常规的扦插繁殖不能满足大面积造林对巨桉无性系WLEG-17种苗的需求，因此，目前多利用组织培养技术进行工厂化繁育，以在短期内获得大量遗传背景相同、生长势强的优良种苗。
组织培养是否成功，在很大程度上取决于对培养基的选择。目前，植物组织培养普遍使用的培养基为MS培养基。其由大量元素(硝酸钾、硝酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁和氯化钙)、微量元素(碘化钾、硼酸、硫酸锰、硫酸锌、钼酸钠、硫酸铜和氯化钴)、铁盐(乙二胺四乙酸二钠和硫酸亚铁)、有机物(肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇和烟酸)、激素(6-苄氨基嘌呤和萘乙酸)、蔗糖和琼脂组成：大量元素保证植株生长所需的矿质营养并加速愈伤组织的生长；微量元素、铁盐和有机物给予植株全面的营养保证，确保植株正常生长；激素的调控使植株在离体条件下快速健壮生长；蔗糖为植株生长提供必需的碳源并调节渗透压；琼脂对植株起支持和固定作用。
但是，采用MS培养基进行巨桉无性系WLEG-17组织培养时，常出现以下问题：组培苗生长势弱、叶片大、茎细小、伸长生长慢、多次继代后易出现愈伤和玻璃化现象等。
发明内容
有鉴于此，为克服现有技术的不足，本发明的目的在于对MS培养基进行改进，提供一种适合巨桉无性系WLEG-17组培苗连续继代、快速、高效、健壮生长的组培培养基。
为达到此目的，本发明的巨桉无性系WLEG-17组培培养基，由具有以下浓度的组分组成：
硝酸钾KNO3                        1900～2375mg/L
硝酸铵NH4NO3                      273～411mg/L
磷酸二氢钾KH2PO4                  270～338mg/L
硫酸镁MgSO4·7H2O                 480～540mg/L
硝酸钙Ca(NO3)2·4H2O              300mg/L
碘化钾KI                          0.83mg/L
硼酸H3BO3                         6.2mg/L
硫酸锰MnSO4·4H2O                 22.3mg/L
硫酸锌ZnSO4·7H2O                 8.6mg/L
钼酸钠Na2MoO4·2H2O               0.25mg/L
硫酸铜CuSO4·5H2O                 0.025mg/L
氯化钴CoCl2.6H2O                  0.025mg/L
乙二胺四乙酸二钠Na2-EDTA·2H2O    37.3mg/L
硫酸亚铁FeSO4·7H2O               27.8mg/L
肌醇                              100mg/L
甘氨酸                            2mg/L
硫胺素VB1                         0.1mg/L
盐酸吡哆醇VB6                     0.5mg/L
烟酸VB5或VPP                      0.5mg/L
核黄素VB2                         6mg/L
6-苄氨基嘌呤6-BA                  0.5mg/L
萘乙酸NAA                         0.2mg/L
蔗糖                              30000mg/L
琼脂                              4700mg/L
进一步，所述KNO3的浓度为2138mg/L，NH4NO3的浓度为319～411mg/L，KH2PO4的浓度为304mg/L，MgSO4·7H2O的浓度为480mg/L。
本发明的有益效果在于：本发明的巨桉无性系WLEG-17组培培养基，在MS培养基的基础上，通过调整大量元素的种类和浓度，添加有机附加成分核黄素，优化激素调控和琼脂浓度等，为巨桉无性系WLEG-17组培苗提供了均衡合理的营养需求，保证了其快速、高效、健壮生长，有效的控制了愈伤和玻璃化现象的产生。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本发明的优选实施例进行详细的描述。
1、实验材料
以重庆高校园林花卉工程研究中心组培室中的巨桉无性系WLEG-17优良单株离体芽器官诱导培养扩繁而来的组培继代苗为实验材料。
2、实验方法
根据预实验结果和长期的实践经验确定巨桉无性系WLEG-17组培培养基的基础配方(见表1)，再采用随机区组设计，将基础配方中4种大量元素成分的浓度分别按1/8的等差连续递增两次和递减两次，而其它组分及其浓度保持不变(见表2)，观察每种大量元素缺失或过量时组培继代苗的生长情况，以优化组培培养基配方。
表1 巨桉无性系WLEG-17组培培养基的基础配方
Figure G2009101047536D00041
表2 巨桉无性系WLEG-17组培培养基的实验配方
Figure G2009101047536D00051
*其余组分及其浓度同表1的基础配方。
选取生长一致且健壮的巨桉无性系WLEG-17优良单株离体芽器官诱导培养扩繁而来的组培继代苗136瓶，接种于上述配方(表2的M1～M17)的组培培养基中，每种配方接种8瓶，连续继代4次，每次继代周期为20天，统计每种配方培养的组培苗的苗高、健壮程度、叶形叶色，在新生组培苗茎尖上是否产生愈伤，以及新生组培苗是否有玻璃化等。
3、实验结果
1)KNO3对巨桉无性系WLEG-17组培继代苗的影响
调整基础配方中KNO3的浓度，其余组分及其浓度保持不变。结果见表3，当KNO3的浓度高于基础配方时，随着浓度的增加，芽苗高度和健壮程度均呈现出先增高后降低的趋势，其中配方M3的芽苗生长最高，平均高度达1.8cm且生长健壮，继续增加KNO3的浓度，芽苗高度逐渐降低且长势变弱；当KNO3的浓度低于基础配方时，随着浓度的降低，芽苗高度呈现出逐渐降低的趋势，且健壮程度逐渐变弱，叶色逐渐变红；在这五个配方中，芽苗叶形均正常，且均无愈伤和玻璃化现象产生。综合考虑，适合巨桉无性系WLEG-17组培继代苗的KNO3的较佳浓度为1900～2375mg/L，最佳浓度为2138mg/L。
表3 KNO3对巨桉无性系WLEG-17组培继代苗的影响
Figure G2009101047536D00061
2)KH2PO4对巨桉无性系WLEG-17组培继代苗的影响
调整基础配方中KH2PO4的浓度，其余组分及其浓度保持不变。结果见表4，当KH2PO4的浓度高于基础配方时，随着浓度的增加，芽苗高度逐渐增加，生长健壮，叶色正常，无愈伤和玻璃化现象产生，但配方M6有极小部分叶片偏大；当KH2PO4的浓度低于基础配方时，芽苗高度降低，生长健壮，叶形叶色正常，但有愈伤产生。综合考虑，适合巨桉无性系WLEG-17组培继代苗的KH2PO4的较佳浓度为270～338mg/L，最佳浓度为304mg/L。
表4 KH2PO4对巨桉无性系WLEG-17组培继代苗的影响
Figure G2009101047536D00071
3)MgSO4·7H2O对巨桉无性系WLEG-17组培继代苗的影响
调整基础配方中MgSO4·7H2O的浓度，其余组分及其浓度保持不变。结果见表5，当MgSO4·7H2O的浓度高于基础配方时，随着浓度的增加，叶形呈现出逐渐减小的趋势，且配方M10出现愈伤；当MgSO4·7H2O的浓度低于基础配方时，芽苗高度降低，且随着浓度的降低，叶形逐渐增大，叶色逐渐变黄；在这五个配方中，芽苗生长均健壮，且均无玻璃化现象产生。综合考虑，适合巨桉无性系WLEG-17组培继代苗的MgSO4·7H2O的较佳浓度为480～540mg/L，最佳浓度为480mg/L。
表5 MgSO4·7H2O对巨桉无性系WLEG-17组培继代苗的影响
Figure G2009101047536D00072
4)NH4NO3对巨桉无性系WLEG-17组培继代苗的影响
调整基础配方中NH4NO3的浓度，其余组分及其浓度保持不变。结果见表6，当NH4NO3的浓度高于基础配方时，芽苗高度基本一致，但随着浓度的增加，叶形呈现出逐渐增大的趋势，且配方M14有愈伤和玻璃化现象产生；当NH4NO3的浓度低于基础配方时，随着浓度的降低，芽苗高度呈现出逐渐降低的趋势；在这五个配方中，芽苗生长均健壮，叶色均正常。综合考虑，适合巨桉无性系WLEG-17组培继代苗的NH4NO3的较佳浓度为273～411mg/L，最佳浓度为319～411mg/L。
表6 NH4NO3对巨桉无性系WLEG-17组培继代苗的影响
Figure G2009101047536D00081
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过参照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述，但本领域的普通技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。

Claims (2)

1.巨桉无性系WLEG-17组培继代苗培养基，其特征在于：由具有以下浓度的组分组成：
Figure FSB00000534181300011
Figure FSB00000534181300021
2.根据权利要求1所述的巨桉无性系WLEG-17组培继代苗培养基，其特征在于：所述KNO3的浓度为2138mg/L，NH4NO3的浓度为319～411mg/L，KH2PO4的浓度为304mg/L，MgSO4·7H2O的浓度为480mg/L。
CN2009101047536A 2009-08-31 2009-08-31 巨桉无性系wleg-17组培培养基 Expired - Fee Related CN101658137B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2009101047536A CN101658137B (zh) 2009-08-31 2009-08-31 巨桉无性系wleg-17组培培养基

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2009101047536A CN101658137B (zh) 2009-08-31 2009-08-31 巨桉无性系wleg-17组培培养基

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101658137A CN101658137A (zh) 2010-03-03
CN101658137B true CN101658137B (zh) 2011-11-23

Family

ID=41786561

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2009101047536A Expired - Fee Related CN101658137B (zh) 2009-08-31 2009-08-31 巨桉无性系wleg-17组培培养基

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN101658137B (zh)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102265838B (zh) * 2011-06-09 2014-01-15 江苏瑞邦农药厂有限公司 促进植物生根的农药组合物
CN102507451A (zh) * 2011-10-12 2012-06-20 谭宏伟 桉树缺硼快速诊断的方法
CN102577945A (zh) * 2012-01-31 2012-07-18 玉林市林业科学研究所 防止桉树继代培养玻璃化的方法
CN102823504B (zh) * 2012-09-26 2013-05-29 钦州市林业科学研究所 桉树组织培养培养基
CN107279069B (zh) * 2017-07-24 2020-01-21 广西南亚热带农业科学研究所 一种高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法
CN107432388B (zh) * 2017-07-24 2020-08-14 广西南亚热带农业科学研究所 一种高效繁殖朱砂叶螨的木薯营养液
CN108476983B (zh) * 2018-05-18 2020-03-24 广东省农业科学院作物研究所 一种龙脷叶的组培培养基及其快速繁殖方法
CN112352679A (zh) * 2020-11-19 2021-02-12 广州市卉通农业科技有限公司 一种用于双线竹芋组培苗高效生产的培养基及其制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1381171A (zh) * 2002-05-22 2002-11-27 湖南省森林植物园 邓恩桉组培育苗方法
CN1430881A (zh) * 2003-01-29 2003-07-23 湖南省森林植物园 柳桉组培育苗方法
CN101258836A (zh) * 2008-04-29 2008-09-10 广西壮族自治区林业科学研究院 窿缘桉组织培养快速繁殖方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1381171A (zh) * 2002-05-22 2002-11-27 湖南省森林植物园 邓恩桉组培育苗方法
CN1430881A (zh) * 2003-01-29 2003-07-23 湖南省森林植物园 柳桉组培育苗方法
CN101258836A (zh) * 2008-04-29 2008-09-10 广西壮族自治区林业科学研究院 窿缘桉组织培养快速繁殖方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
杨帆等.渝桉1号的单芽茎段培养与植株再生研究.《西南大学学报(自然科学版)》.2007,(第04期), *
谢耀坚.桉树组织培养研究进展.《世界林业研究》.2000,(第06期), *
陈明渊.尾巨桉组培育苗培养基主要成分研究.《林业勘察设计》.2008,(第02期), *

Also Published As

Publication number Publication date
CN101658137A (zh) 2010-03-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101658137B (zh) 巨桉无性系wleg-17组培培养基
CN102124954B (zh) 红叶石楠离体叶片诱导快繁培养基
WO2015096464A1 (zh) 兰花组织培养的培养基及其培养方法
CN105284620A (zh) 一种特早熟桃杂交胚挽救成苗的方法
CN102870681B (zh) 月季试管苗试管内开花及雌蕊单性开花的方法及其培养基
CN102405831B (zh) 一种用于马铃薯茎尖无愈伤成苗的固体培养基
CN101138324B (zh) 甘薯丛生芽诱导的培养基
CN102823498B (zh) 红肉猕猴桃组培苗继代增殖培养基
CN105557522A (zh) 一种梨树离体叶片体细胞胚诱导快繁培养方法
CN103493734A (zh) 红肉猕猴桃组培苗生根培养基
CN102835314B (zh) 一种红叶石楠组培苗生根培养基及其培养方法
CN101396003B (zh) 一种用于培养大蒜有性胚的固体培养基
CN112154919B (zh) 一种诱导七叶一枝花愈伤组织直接成苗的培养基及方法
CN100420740C (zh) 大蒜丛生芽诱导的培养基
CN105393916A (zh) 一种疣粒野生稻离体幼胚培养基
CN105941156B (zh) 一种油用牡丹的组织培养基及其培养方法
CN112106660A (zh) 一种提高马铃薯扩繁工艺效率的培养基及培养方法
CN102577974A (zh) 一种大蒜试管苗高效生根培养基
CN111919747A (zh) 一种基于脱毒槟榔芋培养提高诱导率和生根率的方法
CN112673959A (zh) 一种优质植物组培营养液及组培方法
CN111937750A (zh) 一种木芙蓉花药愈伤组织再生植株的方法
CN1903017A (zh) 百合组织培养球分球的方法
CN109757375A (zh) 一种降香黄檀的组培苗继代增殖培养基
CN116806700B (zh) 一种盐地碱蓬的组培方法
Rachmadiarti et al. The Influence of Various Growth Regulator of Growth Media on Biomass and Callus Induction in Elephantopus scaber Linn

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C17 Cessation of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20111123

Termination date: 20120831