CN107279069B - 一种高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法，对今后开展木薯朱砂叶螨抗性机理研究提供基础。该方法为：预先采集新鲜干净的木薯叶，叶背朝上置于托盘内的浸湿海绵上，将带有朱砂叶螨的叶片取下，剪成若干小片，置于新鲜干净木薯叶上再滴加2～3滴木薯营养液，用折叠的纸巾或棉条浸水后覆盖木薯叶边缘，带托盘放置人工气候培养箱饲养，叶片上原有的叶螨爬出吸食新鲜的木薯叶，饲养3～4d后，把旧的木薯叶取出，剪成小片放到新鲜的木薯叶上，每次换叶保持海绵湿润。由于该螨虫繁殖力强，世代周期短，在短时间内便可以获得大量的朱砂叶螨。利用本发明进行室内高效繁殖朱砂叶螨，为开展室内朱砂叶螨抗性选育试验提供了大量虫源。
Description
技术领域
本发明属于农业害虫生物防治领域，具体涉及到一种高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法。
背景技术
广西是全国最大的木薯种植基地和淀粉加工基地，木薯生产已成为广西的重要支柱产业，是广西经济发展的新增长点以及农民增收的重要途径。但是广西气候湿润温暖，热带亚热带经济作物品种繁多，病虫害易滋生繁殖。朱砂叶螨〔Tetranychus cinnabarinus(Boisduval)〕属叶螨科(Tetranychidae)，俗名红蜘蛛，是危害木薯最为严重的一种害螨，严重时可导致植株整株死亡，从而影响产量和质量。尤其是近些年，随着木薯耕作制度的改变，农药的不合理使用等多种因素，导致木薯朱砂叶螨的抗药性增强，以至于木薯朱砂叶螨越发猖狂。为了达到有效控制木薯朱砂叶螨危害，必须周年提供大量的标准虫源，以保证病虫害学、植物保护学领域的专家、学者对木薯朱砂叶螨展开一系列研究所需。因此如何简便、高效的对其饲养逐渐引起大家的重视。完善的木薯朱砂叶螨养殖技术是为木薯朱砂叶螨生物学研究提供持续、高质量虫源的有力保障。
常规室内盆栽活植法是将朱砂叶螨移接到新鲜盆栽豇豆苗上进行繁殖，但在饲养木薯朱砂叶螨过程中该虫难控制，容易逃脱，不便于观察，给科研工作者增加了工作难度。
发明内容
本发明的目的就是针对现有技术存在的缺陷，提供一种高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法，能够有效的控制朱砂叶螨的数量，延长其存活时间，不受外界条件影响，便于观察，提高了木薯朱砂叶螨繁殖率。
本发明的技术方案如下：
一种高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法，包括如下步骤：
(1)将新鲜干净的木薯叶，叶背朝上置于浸湿海绵上，海绵放置在托盘中；在新鲜干净的木薯叶上滴加2～3滴木薯营养液；
(2)将原带有朱砂叶螨的叶片剪成若干小片，置于新鲜干净的木薯叶上，用折叠的纸巾或棉条浸水围在木薯叶边缘；
(3)将托盘放置人工气候培养箱中，叶片上原有的叶螨爬出吸食新鲜的木薯叶，饲养3～4d后，把旧的木薯叶取出，剪成小片再放到新鲜的木薯叶上，新鲜的木薯叶上再滴加2～3滴木薯营养液，如此反复，每次换叶均保持海绵湿润。由于该螨虫繁殖力强，世代周期短，在短时间内便可以获得大量的朱砂叶螨。利用本发明进行室内高效繁殖朱砂叶螨，为开展室内朱砂叶螨抗性选育试验提供了大量虫源。
本发明的木薯营养液由木薯叶匀浆上清液与营养液按照1～2∶1混合而成；所述营养液组分及含量如下：
a.微量元素：CaCl2·H2O 0.02～0.05mg/L；CuSO4·5H2O 0.03～0.05mg/L；FeNaEDTA 4.0～5.0mg/L；MnSO4·H2O 1.0～1.5mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.03～0.05mg/L；ZnSO4·H2O 0.4～0.5mg/L；
b.氨基酸：谷氨酰胺0.3～0.6g/L；赖氨酸0.1～0.2g/L；甘氨酸0.1～0.3g/L；脯氨酸0.1～0.2g/L；
c.维生素：生物素0.2～0.4g/L；烟酸0.1～0.3g/L；盐酸吡哆醇0.2～0.4mg/L；维生素B2 0.1～0.3mg/L；
d.蔗糖：18～22g/L。
作为技术方案的优选，本发明的营养液优选组分及含量如下：
a.微量元素：CaCl2·H2O 0.025mg/L；CuSO4·5H2O 0.035mg/L；FeNaEDTA 4.25mg/L；MnSO4·H2O 1.2mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.035mg/L；ZnSO4·H2O 0.45mg/L；
b.氨基酸：谷氨酰胺0.5g/L；赖氨酸0.1g/L；甘氨酸0.2g/L；脯氨酸0.1g/L；
c.维生素：生物素0.2g/L；烟酸0.1g/L；盐酸吡哆醇0.25mg/L；维生素B2 0.15mg/L；
d.蔗糖：20g/L。
本发明中的木薯营养液是采用干净的感虫品种木薯叶匀浆后离心，用上清液与营养液按1～2∶1混和，过滤，分装，-20℃下贮藏备用。
作为技术方案的优选，新鲜干净的的木薯叶是指采集回来的木薯叶要用自来水冲洗干净，吸干表面的水分，防止叶片带有外来虫子。
作为技术方案的优选，所述海绵要求厚度达到3.5～4cm，比托盘高出0.5～1cm，这样保水性能较好，可以防止木薯叶过早萎蔫。
作为技术方案的优选，所述若干小片要求叶片长：2～3cm，宽为：2～2.5cm。
作为技术方案的优选，折叠的纸巾或棉条要求宽度为2～3cm，长度依据叶片大小将其边缘覆盖。
作为技术方案的优选，人工气候培养箱饲养温度为：25～30℃，湿度为：70～80％，光照时间设定为16～18h，黑暗时间为8～10h，以防止其滞育。
作为技术方案的优选，每次换叶加水于长方形托盘中至其高度的2/3处。
本发明的方法可有效提高朱砂叶螨繁殖效力。由于朱砂叶螨世代周期短，雌、雄性个体难于辨别，往往错过交配时间，所以繁殖率低。本发明的方法是依据朱砂叶螨雌、雄性个体生长特点，能迅速寻找到螨雌、雄性个体，以保持雌、雄最佳交配时间，并通过添加一种特殊营养液来提高朱砂叶螨繁殖率，有效地延长朱砂叶螨的存活时间，为木薯朱砂叶螨展开一系列研究提供了大量虫源。常规盆栽活植法是把朱砂叶螨移接到新鲜盆栽豇豆苗上，朱砂叶螨常躲在豇豆苗叶片背面，不受范围限制，四处爬动，不便直接观察，给科研工作者增加了工作难度。
本发明中添加的木薯营养液，所含成分是生物体内不可缺少的营养成份，它在昆虫体内具有特殊的生理功能，朱砂叶螨吸食后对其生长、发育和繁殖有显著促进作用，能提高朱砂叶螨早期存活率，延长存活时间，加速繁殖后代。
采用本发明的木薯营养液饲养法，朱砂叶螨繁殖率可达85％以上，比不滴加营养液饲养法和常规盆栽活植法分别提高20％、30％以上。
附图说明
图1为本发明方法实施的示意图；
图中：1.托盘，2.海绵，3.新鲜干净的木薯叶，4.剪碎的叶片，5.折叠的纸巾或棉条。
具体实施例
下面通过具体实施例进一步说明本发明，以使本发明的优点和特征更易于被理解，应该理解的是，以下实施例仅仅是本发明的较佳方案，而不是对本发明的限制。
实施例1
一、木薯营养液的配制，其中每升该营养液的组分及各组分的含量如下：
1、微量元素：CaCl2·H2O 0.025mg/L；CuSO4·5H2O 0.035mg/L；FeNaEDTA 4.25mg/L；MnSO4·H2O 1.20mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.035mg/L；ZnSO4·H2O 0.45mg/L
2、氨基酸：谷氨酰胺0.5g/L；赖氨酸0.10g/L；甘氨酸0.2g/L；脯氨酸0.1g/L
3、维生素：生物素0.2g/L；烟酸0.1g/L；盐酸吡哆醇0.25mg/L；维生素B2 0.15mg/L
4、蔗糖：20g/L
5、营养液配制：按各组分含量分别添加，次序为微量元素-氨基酸-维生素-蔗糖-加水定容-调节pH值6.8。
6、取半成熟干净的感虫品种木薯叶数片，匀浆后离心，用上清液与上述配制营养液按1∶1混和，用细菌过滤器将混和液过滤，分装，-20℃贮藏备用。
二、木薯朱砂叶螨繁殖对比试验
分别采用本发明高效繁殖朱砂叶螨的木薯营养液饲养法、不滴加营养液饲养法和常规盆栽活植法3个不同试验方案进行对比，繁殖1～2代(约40～45d)，最后以朱砂叶螨总数量来评价各繁殖情况。
A、高效繁殖朱砂叶螨的木薯营养液饲养法
预先准备好从大田采集新鲜干净的木薯叶，叶背朝上置于长方形托盘内的浸湿海绵上，将备好的成熟朱砂叶螨雌、雄性各25头置于已准备好的新鲜干净木薯叶上再滴加2～3滴木薯营养液进行交配，用折叠的纸巾浸水后覆盖木薯叶边缘，带托盘放置人工气候培养箱饲养：温度为：25℃，湿度为：70％，光照时间为16h，黑暗时间为8h。产卵3天后把雌成螨和雄螨挑走，饲养15～20d后，取出木薯叶统计叶片上朱砂叶螨繁殖总数，计算繁殖率。用此方法处理的雌、雄性各25头，繁殖总数372头，繁殖率86.56％，即为第1代繁殖率。约40～45d后，检查2代繁殖总数为2959头，繁殖率87.43％。
B、不滴加营养液饲养法
预先准备好从大田采集新鲜干净的木薯叶，叶背朝上置于长方形托盘内的浸湿海绵上，将备好的成熟朱砂叶螨雌、雄性各25头置于已准备好的新鲜干净木薯叶上进行交配，用折叠的纸巾浸水后覆盖木薯叶边缘，带托盘放置人工气候培养箱饲养：温度为：25℃，湿度为：70％，光照时间为16h，黑暗时间为8h。产卵3天后把雌成螨和雄螨挑走，饲养15～20d后，取出木薯叶统计叶片上朱砂叶螨繁殖总数，计算繁殖率。用此方法处理的雌、雄性各25头，繁殖总数145头，繁殖率65.52％，即为第1代繁殖率。约40～45d后，检查2代繁殖总数为437头，繁殖率66.82％。
C、常规盆栽活植法
将备好的成熟朱砂叶螨雌、雄性各25头移接到新鲜盆栽豇豆苗上，在工人气候培养箱饲养：温度为：温度为：25℃，湿度为：70％，光照时间为16h，黑暗时间为8h。每隔7d更换新鲜盆栽豇豆苗，产卵3天后把雌成螨和雄螨挑走，饲养15～20d后，取出盆栽豇豆苗统计叶片上朱砂叶螨繁殖总数，计算繁殖率。用此方法处理的雌、雄性各25头，繁殖总数124头，繁殖率59.67％，即为第1代繁殖率。约40～45d后，检查2代繁殖总数为314头，繁殖率60.51％。
4、实施的结果对比
从对比试验可知，采用高效繁殖朱砂叶螨的木薯营养液可提高朱砂叶螨繁殖率。利用朱砂叶螨繁殖能力强，世代周期短的生理特点，采取本发明的营养液效果更好。由表1可以看出，第1代高效繁殖法获得朱砂叶螨总数为372只，不滴加营养液法总数为145只，盆栽活植法总数为124只，分析原因主要是不滴加营养液法影响了朱砂叶螨发育与繁殖，发育历期明显延长，从而降低繁殖率，盆栽活植法朱砂叶螨活动范围广泛，不受限制，容易逃脱，从而影响第2代繁殖率。本发明的木薯营养液实际操作简单，最大优点是能延长该螨存活时间，对其生长、发育及繁殖有明显促进作用，每代繁殖率达85％以上，比不滴加营养液法和常规盆栽活植法分别提高20％、30％以上。
表1不同繁殖方法对木薯朱砂叶螨繁殖总数和繁殖率的比较
实施例2
一、木薯营养液的配制，其中每升该营养液的组分及各组分的含量如下：
1、微量元素：CaCl2·H2O 0.02mg/L；CuSO4·5H2O 0.03mg/L；FeNaEDTA 4.0mg/L；MnSO4·H2O 1.0mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.03mg/L；ZnSO4·H2O 0.4mg/L
2、氨基酸：谷氨酰胺0.3g/L；赖氨酸0.10g/L；甘氨酸0.3g/L；脯氨酸0.2g/L
3、维生素：生物素0.4g/L；烟酸0.3g/L；盐酸吡哆醇0.4mg/L；维生素B2 0.3mg/L
4、蔗糖：22g/L
5、营养液配制：按各组分含量分别添加，次序为微量元素-氨基酸-维生素-蔗糖-加水定容-调节pH值6.8。
6、取半成熟干净的感虫品种木薯叶数片，匀浆后离心，用上清液与上述配制营养液按2∶1混和，用细菌过滤器将混和液过滤，分装，-20℃贮藏备用。
二、高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法，包括如下步骤：
(1)采集新鲜木薯叶，冲洗干净，吸干表面水分得到新鲜干净的木薯叶，再将其叶背朝上置于浸湿海绵上，海绵放置在托盘中，海绵厚度为3.5～4cm，比托盘高出0.5～1cm。在新鲜干净的木薯叶上滴加2滴预先配备好的木薯营养液。
(2)将原带有朱砂叶螨的叶片剪成若干长为2～3cm，宽为2～2.5cm的小片(朱砂叶螨雌、雄性各25头)，置于新鲜干净的木薯叶上，用宽为2cm的棉条浸水围在木薯叶边缘，防止朱砂叶螨逃出。
(3)将托盘放置人工气候培养箱中，环境为：温度25～30℃，湿度为：70～80％，光照时间设定为16h，黑暗时间为8h。叶片上原有的叶螨爬出吸食新鲜的木薯叶，饲养4d后，把旧的木薯叶取出，剪成小片再放到新鲜的木薯叶上，新鲜的木薯叶上再滴加2～3滴木薯营养液，如此反复，每次换叶均保持海绵湿润，每次换叶加水于长方形托盘中至其高度的2/3处。
第一次产卵3天后把雌成螨和雄螨挑走，饲养15d后，取出木薯叶统计叶片上朱砂叶螨繁殖总数，计算繁殖率。用此方法处理的雌、雄性各25头，繁殖总数367头，繁殖率86.38％，即为第1代繁殖率。约40d后，检查2代繁殖总数为2919头，繁殖率87.42％。
实施例3
一、木薯营养液的配制，其中每升该营养液的组分及各组分的含量如下：
1、微量元素：CaCl2·H2O 0.05mg/L；CuSO4·5H2O 0.05mg/L；FeNaEDTA 5.0mg/L；MnSO4·H2O 1.5mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.05mg/L；ZnSO4·H2O 0.5mg/L
2、氨基酸：谷氨酰胺0.6g/L；赖氨酸0.20g/L；甘氨酸0.1g/L；脯氨酸0.1g/L
3、维生素：生物素0.3g/L；烟酸0.2g/L；盐酸吡哆醇0.2mg/L；维生素B2 0.1mg/L
4、蔗糖：18g/L
5、营养液配制：按各组分含量分别添加，次序为微量元素-氨基酸-维生素-蔗糖-加水定容-调节pH值6.8。
6、取半成熟干净的感虫品种木薯叶数片，匀浆后离心，用上清液与上述配制营养液按1.5∶1混和，用细菌过滤器将混和液过滤，分装，-20℃贮藏备用。
二、高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法，包括如下步骤：
(1)采集新鲜木薯叶，冲洗干净，吸干表面水分得到新鲜干净的木薯叶，再将其叶背朝上置于浸湿海绵上，海绵放置在托盘中，海绵厚度为3.5～4cm，比托盘高出0.5～1cm。在新鲜干净的木薯叶上滴加3滴预先配备好的木薯营养液。
(2)将原带有朱砂叶螨的叶片剪成若干长为2～3cm，宽为2～2.5cm的小片(朱砂叶螨雌、雄性各25头)，置于新鲜干净的木薯叶上，用宽为2cm的折叠的纸巾浸水围在木薯叶边缘，防止朱砂叶螨逃出。
(3)将托盘放置人工气候培养箱中，环境为：温度25～30℃，湿度为：70～80％，光照时间设定为18h，黑暗时间为10h。叶片上原有的叶螨爬出吸食新鲜的木薯叶，饲养3d后，把旧的木薯叶取出，剪成小片再放到新鲜的木薯叶上，新鲜的木薯叶上再滴加3滴木薯营养液，如此反复，每次换叶均保持海绵湿润，每次换叶加水于长方形托盘中至其高度的2/3处。
第一次产卵3天后把雌成螨和雄螨挑走，饲养20d后，取出木薯叶统计叶片上朱砂叶螨繁殖总数，计算繁殖率。用此方法处理的雌、雄性各25头，繁殖总数369头，繁殖率86.45％，即为第1代繁殖率。约45d后，检查2代繁殖总数为2936头，繁殖率87.43％。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何不经过创造性劳动想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书所限定的保护范围为准。
Claims (9)
1.一种高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将新鲜干净的木薯叶，叶背朝上置于浸湿海绵上，海绵放置在托盘中；在新鲜干净的木薯叶上滴加2～3滴木薯营养液；
（2）将原带有朱砂叶螨的叶片剪成若干小片，置于新鲜干净的木薯叶上，用折叠的纸巾或棉条浸水围在木薯叶边缘；
（3）将托盘放置人工气候培养箱中，叶片上原有的叶螨爬出吸食新鲜的木薯叶，饲养3~4d后，把旧的木薯叶取出，剪成小片再放到新鲜的木薯叶上，新鲜的木薯叶上再滴加2～3滴木薯营养液，如此反复，每次换叶均保持海绵湿润；
所述木薯营养液由木薯叶匀浆上清液与营养液按照1~2 : 1混合而成；所述营养液组分及含量如下：
a. 微量元素：CaCl2·H2O 0.02~0.05mg/L；CuS04·5H2O 0.03~0.05 mg/L；FeNaEDTA4.0~5.0mg/L； MnSO4·H2O 1.0~1.5mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.03~0.05 mg/L；ZnSO4·H2O 0.4~0.5 mg/L；
b. 氨基酸：谷氨酰胺 0.3~0.6g/L；赖氨酸 0.1~0.2g/L ；甘氨酸0.1~0.3g/L ；脯氨酸0.1~0.2g/L；
c. 维生素：生物素 0.2~0.4g/L；烟酸 0.1~0.3 g/L；盐酸吡哆醇 0.2~0.4 mg/L；维生素B2 0.1~0.3mg/L；
d. 蔗糖：18~22g/L。
2.根据权利要求1所述的高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法，其特征在于：所述营养液组分及含量如下：
a. 微量元素：CaCl2·H2O 0.025mg/L；CuS04·5H2O 0.035 mg/L；FeNaEDTA 4.25mg/L；MnSO4·H2O 1.2mg/L；Na2MoO4·2H2O 0.035 mg/L；ZnSO4·H2O 0.45 mg/L；
b. 氨基酸：谷氨酰胺 0.5g/L；赖氨酸 0.1g/L ；甘氨酸0.2g/L ；脯氨酸0.1g/L；
c. 维生素：生物素 0.2g/L；烟酸 0.1 g/L；盐酸吡哆醇 0.25 mg/L；维生素B20.15mg/L；
d. 蔗糖：20g/L。
3.根据权利要求1所述的高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法，其特征在于：木薯营养液是采用干净的感虫品种木薯叶匀浆后离心，用上清液与营养液按1~2：1混和，过滤，分装，-20 ℃下贮藏备用。
4.根据权利要求1所述的高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法，其特征在于：新鲜干净的木薯叶是指采集回来的木薯叶要用自来水冲洗干净，吸干表面的水分，防止叶片带有外来虫子。
5.根据权利要求1所述的高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法，其特征在于：所述海绵要求厚度达到3.5~4cm，比托盘高出0.5~1cm。
6.根据权利要求1所述的高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法，其特征在于：所述若干小片要求叶片长：2~3cm，宽为：2~2.5cm。
7.根据权利要求1所述的高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法，其特征在于：折叠的纸巾或棉条要求宽度为2~3cm，长度依据叶片大小将其边缘覆盖。
8.根据权利要求1所述的高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法，其特征在于：人工气候培养箱饲养温度为：25~30℃，湿度为：70~80%，光照时间设定为16～18h，黑暗时间为8～10h。
9.根据权利要求1所述的高效繁殖木薯朱砂叶螨的方法，其特征在于：每次换叶加水于长方形托盘中至其高度的2/3处。
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