CN108740611B - 桃蛀螟幼虫人工饲料、其制备方法及桃蛀螟饲养方法 - Google Patents
桃蛀螟幼虫人工饲料、其制备方法及桃蛀螟饲养方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种桃蛀螟幼虫人工饲料及其制备方法和桃蛀螟饲养方法。所述桃蛀螟幼虫人工饲料，以质量份数计，包括生麦胚40～60份，大豆粉20～40份，板栗粉65～85份，奶粉10～30份，酵母粉10～20份，蔗糖20～30份，复合维生素2～7份，琼脂15～25份，玉米胚芽油1～2份，尼泊金乙酯0.5～2份，抗坏血酸1～3份，30～40%甲醛水溶液1～3份，水800～1200份。采用本发明桃蛀螟幼虫人工饲料进行桃蛀螟的饲养，不仅可得到较高的幼虫存活率、化蛹率、羽化率、雌雄成虫寿命、单雌产卵量等，提高卵的孵化率，且制备过程简单、方便，可操作性更强。
Description
技术领域
本发明涉及桃蛀螟饲养技术领域，具体涉及一种桃蛀螟幼虫人工饲料、其制备方法及桃蛀螟饲养方法。
背景技术
桃蛀螟(Conogethes punctiferalis)，隶属鳞翅目(Lepidoptera)、螟蛾科(Crambidae)，又称桃斑螟、豹纹斑螟、桃蠹螟、桃实螟蛾等，幼虫俗称蛀心虫。寄主植物多达100余种，会危害苹果、梨、杏、板栗、玉米、高粱、向日葵等多种果树、林木和农作物。近年来，随着耕作制度和气候的变化，桃蛀螟的危害日益严重，特别是在黄淮海夏玉米地区，桃蛀螟已经成为继亚洲玉米螟之后又一重大危害玉米的害虫，甚至在有些地区其种群数量已经超过玉米螟。桃蛀螟危害玉米的部位主要为茎秆、雌穗和叶腋、叶鞘内侧，因此会造成玉米植株折倒，烂穂以及引起严重的穗腐病，从而影响玉米的产量和品质。
室内人工饲养桃蛀螟是为科学试验研究提供大量虫龄和营养状况相一致的标准试虫的重要途径，是开展生物学特性、杀虫剂和Bt蛋白筛选、寄生蜂的繁殖等方面研究的基础保障。目前，对桃蛀螟的室内人工饲养方法主要为两种，一种是采用板栗、玉米等桃蛀螟天然寄主植物的果实对其进行饲养，此方法为传统的饲养方法，具有简单、易于操作等优点，但是，存在如下一些问题：（1）桃蛀螟天然寄主植物的果实受生长季节限制，而不能随时提供新鲜的果实饲料，给周年饲养造成困难；（2）天然寄主植物的果实饲养昆虫，特别是采用板栗饲养时，所需成本相对较高；（3）新鲜果实消毒困难，如玉米穗，易发霉且难消毒，造成饲养效果较差；（4）幼虫虫态难以控制，整齐性、一致性差。另一种为通过人工饲料来进行桃蛀螟的饲养，其中，报道较早的为Honda等公开的桃蛀螟的简单饲养方法，其饲料配方由含玉米、小麦、稻麸、维生素和微量物质的饲料粉、大豆粉、干木屑、琼脂粉、水组成，此方法为采用桃蛀螟人工饲料进行饲养的有益尝试，但是采用其配方所饲养的幼虫存活率较低。
中国专利文献CN 103478493 B公开了一种桃蛀螟人工饲料，其由板栗粉、玉米粉、桃粉、大豆粉、啤酒酵母粉、多维葡萄糖、络蛋白、胆固醇、抗坏血酸、红霉素、琼脂粉、尼泊金甲酯、对羟基苯甲酸甲酯等组成；研究表明，该技术方案中的饲料配方能够提高桃蛀螟的存活率，降低饲养成本，但单雌产卵量、雌雄蛾寿命和卵孵化率等指标较低。
中国专利文献CN 104304694 B公开了一种桃蛀螟人工饲料，其主要由麦胚、大豆粉、玉米苗干粉、板栗干粉、酵母提取物、山梨酸钾、对羟基苯甲酸乙酯、维生素、玉米胚芽油、海藻糖等组成；其中玉米苗干粉的制备方法为：（1）取适量玉米，洗净，培养至三叶期；（2）将玉米苗杀青，再烘干至恒重；（3）将烘干的玉米苗粉碎，过筛，即得玉米苗干粉；该技术方案中的配方虽然在一定程度上解决了产卵量低、继代饲养差等问题，实现了桃蛀螟室内连续多代饲养的需求；但是此配方的幼虫存活率以及卵孵化率有待提高；另外，此配方比较繁琐，特别是玉米苗干粉的制备过程，需要在室内进行培养、育苗、杀青、烘干、粉碎等。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种成本较低，操作简单、且饲养效果好的桃蛀螟幼虫人工饲料及其制备方法和桃蛀螟饲养方法。
为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：
设计一种桃蛀螟幼虫人工饲料，以质量份数计，包括生麦胚40～60份，大豆粉20～40份，板栗粉65～85份，奶粉10～30份，酵母粉10～20份，蔗糖20～30份，复合维生素2～7份，琼脂15～25份，玉米胚芽油1～2份，尼泊金乙酯0.5～2份，抗坏血酸1～3份。
优选的，所述桃蛀螟幼虫人工饲料，还包括30～40%的甲醛水溶液1～3份，水800～1200份。
优选的，所述桃蛀螟幼虫人工饲料，包括生麦胚50份，大豆粉30份，板栗粉75份，奶粉20份，酵母粉15份，蔗糖25份，复合维生素5份，琼脂20份，玉米胚芽油1.3份，尼泊金乙酯1份，抗坏血酸2份。
优选的，所述桃蛀螟幼虫人工饲料，还包括40%的甲醛水溶液2.17份，水1000份。
所述复合维生素优选鳞翅目复合维生素（Vitamin Mix Lepidoptera， 由Frontier Agricultural Science公司生产）。
所述桃蛀螟幼虫人工饲料的制备方法，包括以下步骤：
1）将大豆粉、酵母粉在110～130℃灭菌30～60分钟；
2) 按照质量份数称取各组分，将500～600份数的水加热到40～50℃，之后，向所述水中加入生麦胚、大豆粉、板栗粉、酵母粉、奶粉、蔗糖，搅拌均匀，得到组分A；
3) 向容器中依次加入琼脂、尼泊金乙酯、玉米胚芽油之后，边加入300～600份数的水边进行搅拌，得到混合物，将所得混合物边搅拌边加热至组分全部溶解，得到组分B；
4) 待组分B冷却至50～60℃时，将组分A加入到组分B中搅拌均匀，然后加入抗坏血酸，复合维生素，甲醛水溶液，继续搅拌至混合均匀，即得。
优选的，在所述步骤1）中，所述灭菌温度为121℃，灭菌温度时间30分钟；在所述步骤4）中，所用组分B的冷却温度为60℃，所述复合维生素为Vitamin Mix Lepidoptera（鳞翅目复合维生素， Frontier Agricultural Science公司生产）。
一种桃蛀螟饲养方法，包括以下步骤：
①将初孵的桃蛀螟幼虫接入装有桃蛀螟幼虫人工饲料的养虫器内，置于温度为25～27ºC，光周期为（14～16）L：（8～10）D，相对湿度为70～80%的条件下，待其化蛹、羽化为成虫。
②将雌雄成虫混合放入到产卵盒中，加入8～10%浓度的蔗糖水或蜂蜜水，待其产卵。
③收集步骤②中所产的虫卵，将所述虫卵置于装有湿滤纸的自封袋内，进行孵化；
幼虫孵出后，重复步骤①、②、③，完成继代饲养。
优选的，在所述步骤①中，每3～4天更换饲料；所述温度为26ºC，光周期为16L：8D；在所述养虫器底部铺设一层滤纸。
优选的，在所述步骤①中，将表皮变深褐色的蛹放入装有沾湿棉球的养虫板内，使羽化为成虫；
优选的，在所述步骤②中，所述蔗糖水或蜂蜜水的浓度为10%，所述雌雄成虫所处的温度、光周期、相对湿度同步骤①；
优选的，在所述步骤③中，所述虫卵所处的温度、光周期、相对湿度同步骤①。
与现有技术相比，本发明的有益技术效果在于：
1.本发明桃蛀螟幼虫人工饲料中的各组分相互配合，使得所饲养的幼虫成活率、卵孵化率、单雌产卵量、雌雄蛾寿命均较高，且繁殖力强，可继代饲养。
2.本发明所饲养的幼虫生长发育整齐，饲养效果稳定，可为科学研究和生产需要提供大量性能一致的标准化虫源。
3.本发明的桃蛀螟幼虫人工饲料配方中去除了玉米苗干粉，省去了种苗、杀青、烘干、粉碎等步骤，使得制备方法更加简单、快捷，省时省力。
4.本发明桃蛀螟幼虫人工饲料中包含了奶粉和蔗糖，奶粉中含有蛋白质、脂肪、碳水化合物、钙、铁、锌、亚油酸等多种营养物质，使得饲料的营养更加丰富和均衡全面，提高了幼虫的存活率、羽化率及生殖力。
5.本发明人工饲料防腐效果好，饲料存放时间较长。
6.本发明饲养方法中将卵布放入装有湿滤纸的密封容器内，其中，湿滤纸起到了良好的保湿效果，提高了卵的孵化率。
具体实施方式
下面结合实施例来说明本发明的具体实施方式，但以下实施例只是用来详细说明本发明，并不以任何方式限制本发明的范围。
在以下实施例中所涉及的仪器设备如无特别说明，均为常规仪器设备；所涉及的材料及试剂，如无特别说明，均购自常规化学试剂商店；所涉及的测试、制备方法，如无特别说明，均为常规方法。
本发明中大豆粉、板栗粉、奶粉、麦胚、酵母粉等均为市售产品，复合维生素为市场上公开销售的产品，Vitamin Mix Lepidoptera（鳞翅目复合维生素， FrontierAgricultural Science公司生产）。
实施例1
一种桃蛀螟幼虫人工饲料，以质量份数计，包括生麦胚50份，大豆粉30份，板栗粉75份，奶粉20份，酵母粉15份，蔗糖25份，复合维生素5份，琼脂20份，玉米胚芽油1.3份，尼泊金乙酯1份，抗坏血酸2份，40%甲醛2.17份，蒸馏水1000份。
实施例2
一种桃蛀螟幼虫人工饲料，以质量份数计，包括生麦胚40份，大豆粉20份，板栗粉65份，奶粉10份，酵母粉10份，蔗糖20份，复合维生素2份，琼脂15份，玉米胚芽油1份，尼泊金乙酯0.5份，抗坏血酸1份，40%甲醛1份，蒸馏水800份。
实施例3
一种桃蛀螟幼虫人工饲料，以质量份数计，包括生麦胚60份，大豆粉40份，板栗粉85份，奶粉30份，酵母粉20份，蔗糖30份，复合维生素7份，琼脂25份，玉米胚芽油2份，尼泊金乙酯2份，抗坏血酸7份，40%甲醛3份，蒸馏水1200份。
实施例4
一种桃蛀螟幼虫人工饲料的制备方法，包括以下步骤：
1)将大豆粉、酵母粉分别装入到250ml烧杯中，用锡箔纸封口，放入灭菌锅中 121℃灭菌30分钟，充分冷却之后放入-20℃冰柜保存；
2)组分A的制作：将600ml的水加热到40～50℃，之后，向水中加入生麦胚50g、大豆粉30g、板栗粉75g、酵母粉15g、奶粉20g、蔗糖25g，搅拌均匀，得到组分A；
3)组分B的制作：称取琼脂20g，向琼脂中加入尼泊金乙酯1g和玉米胚芽油1.3g，之后，边加入400ml蒸馏水边进行搅拌，得到混合物，将所得混合物边搅拌边加热至其中组分全部溶解，得到组分B；
4)待组分B冷却至60℃时，将组分A加入到组分B中搅拌均匀，最后依次加入抗坏血酸2g，复合维生素5g，所述复合维生素为市场上公开销售的产品，Vitamin MixLepidoptera（鳞翅目复合维生素， Frontier Agricultural Science公司生产），40%甲醛2.17 g，继续搅拌至混合均匀。
1)将配制好的饲料倒入到保鲜盒中，室温冷却凝固后，盖上盖子，置于4℃的冰箱中备用。
实施例5
采用实施例1中的桃蛀螟幼虫人工饲料进行桃蛀螟的饲养，具体步骤如下：
（1）将初孵的桃蛀螟幼虫小心的接入装有桃蛀螟幼虫人工饲料的24孔养虫板内，一孔一头，盖上盖子，置于温度为26 ± 0.5ºC，光周期为16L：8D，湿度为70～80%的培养箱中。每3～4天给幼虫更换饲料，饲养化蛹。
（2）将表皮变深褐色的蛹挑出，置于24孔板内，一孔一个蛹，每个孔内放一个沾湿的棉球以提供湿度、助于蛹的羽化。将装有蛹的24孔板置于温度为26 ± 0.5ºC，光周期为16L：8D，湿度为70～80%的培养箱中。
（3）记录每个羽化成虫的性别，按照雌雄成虫1:1的比例每40头一组放入养虫盒内，将浸有10%蔗糖水或蜂蜜水的脱脂棉放入培养皿中，将培养皿放入养虫盒内，为成虫提供营养，用纱布对养虫盒封口并作为产卵载体；将养虫盒置于温度为26 ± 0.5ºC，光周期为16L：8D，湿度为70～80%的培养箱中。
（4）收集纱布上的卵，将卵置于装有湿滤纸的密封袋里，其中，加入湿滤纸具有保湿功能，有助于卵的孵化，再将卵置于温度为26 ± 0.5ºC，光周期为16L：8D，湿度为70～80%的培养箱中。
待幼虫孵出后，重复1，2，3，4步骤，循环下去，完成继代饲养。
实施例6
采用实施例1中的桃蛀螟幼虫人工饲料进行桃蛀螟的饲养，具体步骤如下：
将切好的桃蛀螟幼虫人工饲料放入养虫盒内，养虫盒盒底铺设一层滤纸，既保湿也吸潮。将实施例3步骤4中发红的卵布放在饲料上，幼虫孵出后即可直接取食，将养虫盒置于温度为26 ± 0.5ºC，光周期为16L：8D，湿度为70～80%的培养箱中。取食3d后，再补加新鲜饲料，直到化蛹、羽化为成虫。
进行实施例3中的步骤3和4。
实施例7对比试验例
为了说明本发明桃蛀螟幼虫人工饲料的显著的效果，对本发明的人工饲料与专利文献CN 103478493 B、CN 104304694 B中的记载结果，以及天然寄主玉米饲养的幼虫的发育指标和成虫繁殖力进行了对比。
试验材料与方法如下：
供试虫源：2016年采自河南省农业科学院现代化产业基地（原阳基地）玉米和高粱上的幼虫，在室内用玉米和板栗繁殖起来的种群。
试验方法：将桃蛀螟幼虫人工饲料（由实施例1中记载的配方按实施例4记载的方法制成）切成小块，放入24孔养虫板内，将初孵的桃蛀螟幼虫接入到24孔养虫板内，一孔一头，盖上盖子，每个处理有96头幼虫。重复三次。然后将幼虫置于温度为26 ± 0.5ºC，光周期为16L：8D，湿度为70～80%的培养箱中；每3～4天给幼虫更换饲料，饲养化蛹。将表皮变深褐色的蛹挑出，置于24孔板内，一孔一个蛹，每个孔内放一个沾湿的棉球以提供湿度、助于蛹的羽化。将装有蛹的24孔板置于温度为26 ± 0.5ºC，光周期为16L：8D，湿度为70～80%的培养箱中。记录幼虫存活，化蛹时间，称蛹重，羽化时间，将每个处理按照雌雄1:1的比例，每30头一组让其产卵。将浸有10%蔗糖水或蜂蜜水的脱脂棉放入培养皿中，将培养皿放入养虫盒内，为成虫提供营养，用纱布对养虫盒封口并作为产卵载体，将养虫盒置于温度为26 ±0.5ºC，光周期为16L：8D，湿度为70～80%的培养箱中。每2天收集一次纱布上的卵，记录卵布上卵量，然后将卵置于保湿密封的自封袋里，再将自封袋置于温度为26 ± 0.5ºC，光周期为16L：8D，湿度为70～80%的培养箱中，记录孵化情况。连续饲养3代。统计幼虫存活率、幼虫历期、化蛹率、蛹期、蛹重，羽化率、雌雄称虫寿命、单雌平均产卵量、卵孵化率等指标，并采用 SPSS20.0统计软件进行方差分析和差异显著性测验，所得结果和专利文献CN103478493 B、CN 104304694 B中记载的试验结果、以及天然寄主玉米饲养的幼虫结果一同列于下表1和表2中。
表 1 几种配方饲养的桃蛀螟幼虫发育指标参数
表2 几种配方饲养桃蛀螟的成虫寿命和繁殖参数
（注明：表1、2中数据为均值，玉米和专利文献CN 103478493 B、CN104304694 B的数据分别引自其对应实施例中的数据，其中引自专利文献CN 104304694 B的数据为六代桃蛀螟生长发育指标数据的均值。）
从表 1可看出，本发明所述饲料饲养的第一代、第二代和第三代的幼虫存活率相较于专利文献CN 104304694 B中的幼虫存活率有显著的提高(F3,14=81.048, P=0.000，表1)，饲养三代的幼虫历期无显著差异（F2,14=0.067, P=0.936，表1）；本发明中幼虫的蛹重和羽化率显著高于用玉米和专利CN 103478493 B配方的饲养结果，幼虫存活率显著高于专利CN 104304694 B配方饲养的水平（F3,14=81.048, P=0.000）。
从表 2可看出，本发明所述饲料饲养的第一代、第二代和第三代的桃蛀螟雌雄虫寿命与专利CN 104304694 B饲养的无显著差异（雌：F3,14=0.849, P=0.496；雄：F3,14=0.821,P=0.509）；单雌产卵量与专利CN 104304694 B无显著的差异(F3,14=0.677, P=0.584)，高于专利CN 103478493 B和玉米上饲养的产卵量；本发明所述饲料饲养出的第一代、第二代和第三代桃蛀螟的卵孵化率较之于玉米、CN103478493 B和CN 104304694 B均有提高(F3,14=17.410，P=0.000)。同时，本发明的饲料制备过程中不用种植玉米苗等，比专利CN104304694 B中饲料的制备过程更简单，可节约人力和时间，操作性更简便，实用性更强。
综上所述，本发明弥补了现有技术中的不足，获得了良好的幼虫存活率、化蛹率、羽化率、雌雄成虫寿命、单雌产卵量等指标，提高了卵的孵化率，且制备过程简单、方便，可操作性更强，即便没有昆虫学专业背景的人员，经过简单培训后，也能很快掌握桃蛀螟大规模饲养的技术。
上面结合实施例对本发明作了详细的说明，但是，所属技术领域的技术人员能够理解，在不脱离本发明宗旨的前提下，还可以对上述实施例中的各个具体参数进行变更，形成多个具体的实施例，均为本发明的常见变化范围，在此不再一一详述。
Claims (6)
1.一种桃蛀螟饲养方法，其特征在于，①将初孵的桃蛀螟幼虫接入装有桃蛀螟幼虫人工饲料的养虫器内，置于温度为25～27ºC、光周期为（14～16）L：（8～10）D、相对湿度为70～80%的条件下，待其化蛹、羽化为成虫；
②将雌雄成虫放入产卵盒，加入8～10%浓度的蔗糖水或蜂蜜水，待其产卵；
③收集步骤②中所产的虫卵，将所述虫卵置于装有湿滤纸的密封容器袋内，进行孵化；
④幼虫孵出后，重复步骤①、②、③，完成继代饲养；
所述桃蛀螟幼虫人工饲料以质量份数计，由以下组分组成：生麦胚40～60份，大豆粉20～40份，板栗粉65～85份，奶粉10～30份，酵母粉10～20份，蔗糖20～30份，复合维生素2～7份，琼脂15～25份，玉米胚芽油1～2份，尼泊金乙酯0.5～2份，抗坏血酸1～3份，30～40%的甲醛水溶液1～3份，水800～1200份；
所述桃蛀螟幼虫人工饲料的制备方法包括以下步骤：
1）将大豆粉、酵母粉在110～130℃灭菌30～60分钟；
2）按照所述饲料质量份数称取各组分，将500～600份数的水加热到40～50℃，之后，向所述水中加入生麦胚、所述大豆粉、板栗粉、所述酵母粉、奶粉、蔗糖，搅拌均匀，得到组分A；
3）向琼脂中加入尼泊金乙酯和玉米胚芽油，之后，边加入300～600份数的水边进行搅拌，得到混合物，将所得混合物边搅拌边加热至全部溶解，得到组分B；
4）待组分B冷却至50～60℃时，将组分A加入到组分B中搅拌均匀，然后加入抗坏血酸，复合维生素，1～3份30～40%的甲醛水溶液，继续搅拌至混合均匀，即得。
2.根据权利要求1 所述的桃蛀螟饲养方法，其特征在于，包括生麦胚50份，大豆粉30份，板栗粉75份，奶粉20份，酵母粉15份，蔗糖25份，复合维生素5份，琼脂20份，玉米胚芽油1.3份，尼泊金乙酯1份，抗坏血酸2份，40%的甲醛水溶液2.17份，水1000份。
3.根据权利要求1所述的桃蛀螟饲养方法，其特征在于，
在所述步骤1）中，所述灭菌温度为121℃，灭菌温度时间30分钟；在所述步骤4）中，所用组分B的冷却温度为60℃。
4.根据权利要求1所述的桃蛀螟饲养方法，其特征在于，在所述步骤①中，每3～4天更换饲料；在所述养虫器底部铺设一层滤纸。
5.根据权利要求1所述的桃蛀螟饲养方法，其特征在于，在所述步骤①中，所述温度为26ºC，光周期为16L：8D；在所述步骤②中，所述雌雄成虫、所处的温度、光周期、相对湿度同步骤①；在所述步骤③中，所述虫卵所处的温度、光周期、相对湿度同步骤①。
6.根据权利要求1所述的桃蛀螟饲养方法，其特征在于，在所述步骤①中，将表皮变深褐色的蛹放入装有沾湿棉球的养虫板内，使羽化为成虫；在所述步骤②中，所述蔗糖水或蜂蜜水的浓度为10%。
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