CN102578425A - 一种鳞翅目低龄幼虫的人工饲料及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种鳞翅目低龄幼虫的人工饲料,其由下列重量百分比成分制备而成:豆饼粉2.0-3.0%,玉米粉7.0-10.0%,啤酒酵母2.0-3.0%,番茄酱7.0-10.0%,蔗糖0.8-1.2%,琼脂1.2-1.4%,山梨酸0.2-0.5%,复合维生素B 0.05-0.1%,抗坏血酸0.2-0.4%,对羟基苯甲酸乙酯0.1-0.2%,丙酸0.2-0.4%,水71.0-77.0%。本发明还提供了制备所述人工饲料的方法和应用。本发明的人工饲料制作成本低,操作简单,实用性强;使用该饲料和饲养方法饲养鳞翅目低龄幼虫,其幼虫成活率高、工作量小,大大节省了人力物力。
Description
技术领域
本发明属于植物保护领域,具体涉及一种低龄幼虫的人工饲料、及其制备方法和应用。
背景技术
用人工饲料饲养昆虫是研究昆虫学的基本技术之一,此法具有不受季节限制,饲养管理方便,很容易得到生理指标相同的大批量试虫直接开展昆虫生物学、遗传学、抗性测定等方面的研究(吴坤君等,2009;蒋金炜等,2010)。自五十年代以来,国内外人工饲料研究日益受到重视,并得到迅速发展。据不完全统计,迄今为止,国内外已有1000多种昆虫可以应用人工饲料进行繁殖,为研究不同昆虫生物学习性和指导农业防控提供了宝贵的数据(Beck.,S.D.,1956,1957;Singh P.,1974)。典型的应用是通过室内饲养技术,研究不同温度对昆虫生长发育、实验种群生长、存活及繁殖的影响,其研究结果为该种昆虫的预测预报和综合防控提供科学依据(Ali,et al.,1991;Kim,et al.,2001;慕卫等,2002;罗举等,2005;韩兰芝等,2005;李定旭等,2010;徐世才等,2011;秦钟等,2011)。随着国家对农业安全生产和农业环境的日益重视,以“安全、环保”的生物防治技术、新型生物农药防治技术、综合防控技术为主体的“绿色植保”势必要替代传统的农药防治手段。因此,在防控技术方面更注重化学和生物农药制剂的筛选及标准化测定与转基因植株的抗性测定及抗性机制的研究,这就需要大批量、发育一致的供试昆虫。尤其是低龄幼虫(3龄之前)以食量小、抗药性低,被作为许多重大害虫的防控的关键时期,也是生物测定的重点研究方向。
由于目前的人工饲料主要是块状物,由于低龄幼虫行动活跃、体型较小,尤其是钻蛀性幼虫,经常会钻蛀到饲料内部,在单头饲养进行相关试验时常常会出现找不到幼虫的情况。因此,在很多研究中,对于低龄幼虫主要采用多头甚至几十头集体饲养,3龄以后再转入养虫管进行单头饲养。实验室种群生命表的研究也基本采用“龄群”作虫期,即指1-2龄幼虫群、3-6龄幼虫群、蛹、成虫、卵等进行划分,对于幼虫阶段不能得到不同龄期幼虫的发育历期和存活率等重要数据,无法开展不同龄期幼虫的生物测定等相关研究工作。另外,低龄幼虫集体饲养还存在着以下问题:(1)由于昆虫密度过大,一旦感染病毒或细菌很容易传染其他昆虫,给实验带来毁灭性的影响。(2)在实验过程中,有些低龄幼虫具有钻蛀的习性,经常会钻蛀到饲料内部,需要不断翻转饲料寻找幼虫,不仅浪费时间,还可以对实验昆虫造成人为伤害,影响实验结果。(3)昆虫幼虫龄态常出现重叠现象,多头昆虫集体饲养,无法准备记录每头昆虫的发育状况,对研究低龄昆虫发育历期、死亡率,折算起来颇为麻烦,为了使数据更为科学,必须增加取样次数,耗费大量的人力、物力。因此急需一种操作方便、简单易行的人工饲料解决低龄幼虫的单头饲养问题。
发明内容
为了解决上述问题,本发明的目的在于提供一种鳞翅目低龄幼虫(1-3龄)的人工饲料。
本发明的另一目的在于提供一种该饲料的制备方法。
本发明的还一目的在于提供该饲料在饲养鳞翅目昆虫低龄幼虫中的应用。
为了实现本发明目的,本发明提供的一种鳞翅目低龄幼虫的人工饲料,其由下列重量百分含量成分制备而成:豆饼粉2.0-3.0%,玉米粉7.0-10.0%,啤酒酵母(Saccharomyces cerevisae Hansen)2.0-3.0%,番茄酱7.0-10.0%,蔗糖0.8-1.2%,琼脂1.2-1.4%,山梨酸0.2-0.5%,复合维生素B 0.05-0.1%,抗坏血酸(维C)0.2-0.4%,对羟基苯甲酸乙酯0.1-0.2%,丙酸0.2-0.4%,水71.0-77.0%。
其中,所述豆饼粉为普通黄豆打成粉状(北京华谷公司购买)。
所述玉米粉为玉米籽粒打成粉状(超市购买)。
所述番茄酱鲜番茄制作而成(上好牌,天津市天顺鑫意副食调料经销处)。
优选地,其由下列重量百分含量成分制备而成:豆饼粉2.5%,玉米粉8.2%,啤酒酵母2.5%,番茄酱9.5%,蔗糖1.0%,琼脂1.3%,山梨酸0.4%,复合维生素B0.06%,抗坏血酸(维C)0.2%,对羟基苯甲酸乙酯0.14%,丙酸0.2%,水74%。
所述复合维生素B为粉状制剂,其由下列重量百分含量成分制备而成:烟酞胺25.0-35.0%,盐酸硫胺素5.0-10.0%,核黄素12.0-18.0%,盐酸毗哆醇5.0-10.0%,赖氨肌醇0.15-0.20%,叶酸5.0-10.0%,泛酸钙25.0-35.0%,生物素0.5-1.0%。
优选地,所述复合维生素B为粉状制剂,其由下列重量百分含量成分制备而成:烟酞胺30%,盐酸硫胺素8.0%,核黄素15.0%,盐酸毗哆醇8.0%,赖氨肌醇0.20%,叶酸8.0%,泛酸钙30.0%,生物素0.8%。
本发明还提供了制备上述鳞翅目低龄幼虫的人工饲料的方法,其包括以下步骤:
(1)按比例称取豆饼粉、玉米粉和啤酒酵母粉,混合搅拌后灭菌,作为A组分;
(2)按比例称取琼脂和山梨酸,混合后按比例加入水,煮至沸腾,直到琼脂完全溶解,冷却后加入番茄酱搅拌,之后将混合液倒入A组分搅拌,搅拌后液体作为B组分;
(3)将B组分倒入蒸锅内加热,边加热边搅拌,至沸腾后冷却;
(4)按比例称取复合维生素B、抗坏血酸、对羟基苯甲酸乙酯和丙酸,混合后按比例加入水,溶解并搅拌均匀,作为C组分;
(5)将C组分与B组分混合,倒入用于单头饲养的培养皿中冷却凝固,得低龄幼虫的人工饲料。
其中,步骤(1)中所述灭菌温度为124-126℃,灭菌时间为30-35min。
步骤(2)中,所述琼脂和山梨酸混合液冷却温度为60-65℃,所述琼脂和山梨酸总重量与水的重量百分比为1∶30。
步骤(3)中,所述沸腾持续时间为3-5min;冷却温度为60-65℃。
步骤(4)中,所述复合维生素B、抗坏血酸、对羟基苯甲酸乙酯和丙酸的总重量与水的重量百分比为1∶30。
步骤(5)中,因B组分为糊状液体,B组分与C组分混合时,将C组分倒入B组分,让部分C组分混合液体流入下部,充分搅拌至完全均匀,冷却至70~75℃时,倒入直径6cm的培养皿中,每个培养皿内倒入2-3ml,凝固冷却。
本发明还提供了上述人工饲料在饲养鳞翅目低龄幼虫中的应用。
所述鳞翅目低龄幼虫主要包括小地老虎、八字地老虎、甘蓝夜蛾、苜蓿夜蛾、旋幽夜蛾、棉铃虫、甜菜夜蛾等1-3日龄幼虫。
所述应用具体包括如下步骤:
(1)成虫-卵:将羽化后的成虫雌雄配对,放到直径20cm,高30cm的产卵笼内进行交配产卵,产卵笼内悬挂消毒后的纱布,供收集虫卵;用脱脂棉浸泡5%的红糖水放置在直径为10cm的培养皿中,供成虫补充营养;每日更换脱脂棉和红糖水;成虫产卵后,每日更换纱布;饲养温度24-26℃,光照时间14L∶10D(一天24小时中,白天与夜晚的比例为14∶10),相对湿度为60-70%;
(2)卵:将产于纱布上的卵放入5%的甲醛溶液中消毒15min,用无菌水漂洗干净,晾干,然后放入保鲜袋中,用嘴轻轻吹起,空气进入后,放入温度24-26℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为60-70%的培养箱中,直到幼虫孵化;
(3)初孵幼虫:将孵化6-10h左右的幼虫,抖落在接种纸上,用细毛笔蘸0.12%次氯酸钠溶液消毒后,轻轻挑取幼虫,接入装有本发明饲料的培养皿中,每个培养皿接入1头;给每个培养皿做好编号,用皮筋把每5个培养皿捆绑到一起,放入温度24-26℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为60-70%的培养箱中;
为了防止湿度过大,前2天培养皿的上部放一层卫生纸,然后盖上培养皿的盖子。
(4)初孵幼虫-3龄:3龄之前不需更换饲料,根据实验需要,每次检测幼虫发育进度或做相关生测实验,只需打开培养皿,幼虫基本都在饲料的表面,易于观察、挑取;饲养条件为温度24-26℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为60-70%的培养箱中;
(5)3龄以后-化蛹,根据昆虫种类,向培养皿内添加人工饲料,直到幼虫化蛹;饲养条件为温度24-26℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为60-70%的培养箱中;
(6)化蛹-成虫:幼虫化蛹后,从培养皿内取出,放入直径3cm,高度10cm的玻璃试管,直到蛹羽化为成虫,进入下一个饲养周期;饲养条件为温度24-26℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为60-70%的培养箱中。
本发明的有益效果是:
1、针对以往饲料配方很难实现对鳞翅目低龄幼虫的单头饲养问题,研制开发了一种简单易行、操作方便的人工饲料,主要有以下优点:该饲料配制简单,营养全面,不仅能够满足低龄幼虫生长发育所需的各种营养因子,而且能够显著提高低龄幼虫的成活率,而且在高龄幼虫的化蛹率,成虫的羽化率,成虫的产卵量,卵的孵化率等生物学指标与普通人工饲料并无显著差异,因此,该饲料具有很强的适用性。本发明的人工饲料由于是凝固在培养皿底部,不易风干,3龄之前不需添加饲料,减少了人工饲料的使用量,节省了配置人工饲料的成本。利用本发明的人工饲料能够方便的进行低龄幼虫的单头饲料,从而减少了幼虫感染病菌的几率,更减少了因受病菌感染后相互传递而导致整个种群全军覆没的问题。
2、利用本发明的人工饲料饲养鳞翅目低龄幼虫操作步骤简单。由于饲料凝固在培养皿底部,低龄幼虫主要在饲料的表面进行取食,易于观测和挑取,即使幼虫钻蛀到饲料内部也能通过虫粪很快找到,减少了翻转饲料寻找对幼虫的伤害,提高了工作效率。用本发明的人工饲料饲养幼虫只需要在塑料培养皿中进行,因为培养皿成本低,占用空间小,一个光照培养箱内可以开展大量的实验,培养皿消毒后可重复使用,而且培养皿更有利于实验结果的观测和记录,不需打开培养皿可直接检查幼虫发育进度和存活率,避免了病菌通过人工操作传染的机会,从而简化了饲养步骤,大大降低了饲养成本。
总之,本发明的人工饲料制作成本低,操作简单,实用性强;使用该饲料饲养鳞翅目低龄幼虫,工作量小,大大节省了人力物力。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。在不背离本发明精神和实质的情况下,对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换,均属于本发明的保护范围。
若未特别指明,实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
实施例1
利用本发明配制1000g人工饲料,各组分用量百分比分别为:豆饼粉3.0%,玉米粉9.5%,啤酒酵母3.0%,番茄酱10.0%,蔗糖0.8%,琼脂1.2%,山梨酸0.4%,复合维生素B0.1%,抗坏血酸(维C)0.3%,对羟基苯甲酸乙酯0.1%,丙酸0.3%,水71.3%。
所述复合维生素B为粉状制剂,各组分占复合维生素B总量的重量百分含量为:烟酞胺30%,盐酸硫胺素8.0%,核黄素15.0%,盐酸毗哆醇8.0%,赖氨肌醇0.20%,叶酸8.0%,泛酸钙30.0%,生物素0.8%。
按照以下步骤配置鳞翅目低龄幼虫的人工饲料:
准备电子天平1台、1000ml烧杯、200ml烧杯、50ml烧杯各一个、玻璃棒、温度计、微波炉、蒸锅、灭菌锅、塑料培养皿等器具,将各组分按配比称重备用。
将豆饼粉、玉米粉、啤酒酵母倒入灭菌桶中,将上述3种组分充分搅拌后,放入灭菌锅中,于125±1℃灭菌30min后,取出待用作为A组分。
将琼脂和山梨酸与纯净水按1∶30混合,放入蒸锅中,加热并煮至沸腾,直到琼脂完全溶解,待琼脂和山梨酸混合液冷却至65℃时,加入番茄酱充分搅拌后,将其倒入A组分,充分搅拌至均匀作为B组分。
将B组分倒入蒸锅内加热至沸腾后,边加热边搅拌,持续时间5min。
待B组分冷却至65℃时,将复合维生素B、抗坏血酸(C)、对羟基苯甲酸乙酯、丙酸放入烧杯中,按1∶30比例纯净水中溶解,充分搅拌均匀作为C组分。预留部分水,冲洗C组分烧杯,将C组分倒入B组分,让部分C组分混合液体流入下部,充分搅拌至完全均匀,此时得到糊状人工饲料。
待糊状人工饲料冷却至75℃时,倒入底面直径为5cm、高2cm的圆形塑料培养皿中,每个培养皿到入2-3ml人工饲料,使糊状人工饲料平铺到培养皿的底部,待饲料完全凝固冷却后,放入4℃冰箱保存。
利用该人工饲料对低龄幼虫的饲养技术:饲养的过程中必须保持养虫室内、养虫架及各种饲养器具消毒,做到无菌操作,一旦发现昆虫有病毒、细菌感染,及时消毒并处理受感染的昆虫。
成虫-卵:将羽化后的成虫雌雄配对,放到直径20cm,高30cm的产卵笼内进行交配产卵,产卵笼内悬挂消毒后的纱布,供收集虫卵。用脱脂棉浸泡5%的红糖水放置在直径为10cm的培养皿中,供成虫补充营养。每日更换脱脂棉和红糖水。成虫产卵后,每日更换纱布。饲养温度25±1℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为65%。
卵:将产于纱布上的卵放入5%的甲醛溶液中消毒15min,用无菌水漂洗干净,晾干,然后放入保鲜袋中,用嘴轻轻吹起,是空气进入后,放入温度25±1℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为65%的培养箱中,直到幼虫孵化。
初孵幼虫:将孵化8h左右的幼虫,抖落在接种纸上,用细毛笔蘸0.12%次氯酸钠溶液消毒后,轻轻挑取幼虫,接入装有饲料的培养皿中,每个培养皿接入1头。为了防止湿度过大,前2天培养皿的上部放一层卫生纸,然后盖上培养皿的盖子。根据实验需要给每个培养皿做好编号,用皮筋把每5个培养皿捆绑到一起,放入温度25±1℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为65%的培养箱中。
初孵幼虫-3龄:3龄之前不需更换饲料,根据实验需要,每次检测幼虫发育进度或做相关生测实验,只需打开培养皿,幼虫基本都在饲料的表面,易于观察、挑取。饲养条件为温度25±1℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为65%的培养箱中。
3龄以后-化蛹,根据昆虫种类,向培养皿内添加该种昆虫的市售人工饲料,直到幼虫化蛹。饲养条件为温度25±1℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为65%的培养箱中。
化蛹-成虫:幼虫化蛹后,从培养皿内取出,放入直径3cm,高度10cm的玻璃试管,直到蛹羽化为成虫,进入下一个饲养周期。饲养条件为温度25±1℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为65%的培养箱中。
实施例2
利用本发明配制1000g人工饲料,各组分用量百分比分别为:豆饼粉2.5%,玉米粉8.2%,啤酒酵母2.5%,番茄酱9.5%,蔗糖1.0%,琼脂1.3%,山梨酸0.4%,复合维生素B 0.06%,抗坏血酸(维C)0.2%,对羟基苯甲酸乙酯0.14%,丙酸0.2%,水74%。所述复合维生素B为粉状制剂,各组分占复合维生素B总量的百分含量为:烟酞胺30%,盐酸硫胺素8.0%,核黄素15.0%,盐酸毗哆醇8.0%,赖氨肌醇0.20%,叶酸8.0%,泛酸钙30.0%,生物素0.8%。
饲料制备和大规模饲养方法同实例1。
实施例3
利用本发明配制1000g人工饲料,各组分用量百分比分别为:豆饼粉2.0%,玉米粉7.0%,啤酒酵母2.0%,番茄酱8.5%,蔗糖1.2%,琼脂1.4%,山梨酸0.3%,复合维生素B 0.1%,抗坏血酸(维C)0.2%,对羟基苯甲酸乙酯0.1%,丙酸0.2%,水77%。所述复合维生素B为粉状制剂,各组分占复合维生素B总量的百分含量为:烟酞胺30%,盐酸硫胺素8.0%,核黄素15.0%,盐酸毗哆醇8.0%,赖氨肌醇0.20%,叶酸8.0%,泛酸钙30.0%,生物素0.8%。
饲料制备和大规模饲养方法同实例1。
应用例1
1.实验材料与方法
(1)供试虫源:5月上旬在北京延庆探照灯诱虫器抓取小地老虎、八字地老虎、甘蓝夜蛾、苜蓿夜蛾、旋幽夜蛾成虫,放于直径20cm,高30cm的产卵笼内,用5%的红糖水补充营养,使成虫产卵,收集虫卵,取初孵幼虫作为供试虫源。
(2)供试饲料:
小地老虎、八字地老虎、甘蓝夜蛾、苜蓿夜蛾、旋幽夜蛾1-3龄采用实例1-3人工饲料,并以小地老虎人工饲料(专利公开号CN101584411A)作为对照。
(3)实验方法
分别用实例1-3的饲料饲养鳞翅目昆虫小地老虎、八字地老虎、甘蓝夜蛾、苜蓿夜蛾、旋幽夜蛾1-3龄幼虫。同时以小地老虎人工饲料作为对照,每个处理3次重复,每次饲养100头,记录所试5种昆虫1-3日龄的幼虫成活率和发育历期。饲养条件为温度25±1℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为65±5%的培养箱中。
2.数据统计
采用Excel对数据进行初步分析,用SPSS 16.0对所得数据进行方差分析和显著性测验。
3.实验结果
具体实验结果见表1,5种鳞翅目昆虫,1-3龄幼虫采用实例1-3人工饲料和饲养方法饲养其幼虫1-3龄的实验结果表明:除了八字地老虎低龄幼虫成活率稍微偏低外,其它幼虫都在95%以上,显著高于对照幼虫的存活率。实例2人工饲料在小地老虎和甘蓝夜蛾幼虫成活率方面比其它两种实例显著偏高,八字地老虎、苜蓿夜蛾、旋幽夜蛾3种实例饲料饲养1-3龄幼虫存活率没有显著差异。由此可以推荐实例2作为本发明的最优组合。在幼虫发育历期方面,3种实例人工饲料和小地老虎人工饲料对5种1-3龄鳞翅目幼虫没有显著性差异。实验结果表明:本发明人工饲料和饲养方法能显著提供幼虫成活率,并且对幼虫发育历期不产生影响。对生测和抗性监测等实验不会产生客观影响。
表1.实例1-3饲料饲养5种昆虫1-3龄的存活率和发育历期
应用例2
1.实验材料与方法
(1)供试虫源:5月上旬在北京延庆探照灯诱虫器抓取苜蓿夜蛾成虫产卵所产生的后代,室内连续饲养3代。
(2)供试饲料:
苜蓿夜蛾1-3龄使用实例2饲料,4龄以后使用已经公开的苜蓿夜蛾人工饲料配方(慕卫等,2002)饲养。对照为苜蓿夜蛾人工饲料。
(3)实验方法
用实例1-3中的最优组合实例2饲养苜蓿夜蛾1-3日龄幼虫,4龄以后改用苜蓿夜蛾人工饲料,同时以苜蓿夜蛾人工饲料全世代饲养苜蓿夜蛾作为对照,连续饲养3代。饲养方法参照实例1的饲养方法。每个处理3次重复,每次饲养100头,每个世代饲养的过程中均记录幼虫发育历期、幼虫存活率、化蛹率、羽化率、蛹重、产卵量等参数。饲养条件为温度25±1℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为65±5%的培养箱中。
2.数据统计
采用Excel对数据进行初步分析,用SPSS 16.0对所得数据进行方差分析和显著性测验。
3.实验结果
具体实验结果见表2,1-3龄苜蓿夜蛾幼虫采用本发明的最优组合实例2的人工饲料和饲养方法,其幼虫的成活率达到87.4%,显著高于对照的79.2%;实例2的人工饲料和饲养方法连续饲养苜蓿夜蛾3代后与普通人工饲料相比,幼虫的发育历期、化蛹率、蛹重、成虫的羽化率、产卵量、卵的孵化率等生物学指标与普通人工饲料并无显著差异。这说明使用实例2的人工饲料和饲养方法,可以显著提高幼虫的成活率,在抗性监测和昆虫生命表的研究中,实验结果更客观、科学、合理。另外人工饲料简单易行,饲养方法省时、省工,饲养昆虫范围广,具有很强的实用性。
表2.低龄幼虫实例2饲料(I)和苜蓿夜蛾人工饲料(对照)连续饲养3代后对苜蓿夜蛾的影响
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明技术原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种鳞翅目低龄幼虫的人工饲料,其由下列重量百分比成分制备而成:豆饼粉2.0-3.0%,玉米粉7.0-10.0%,啤酒酵母(Saccharomyces cerevisae Hansen)2.0-3.0%,番茄酱7.0-10.0%,蔗糖0.8-1.2%,琼脂1.2-1.4%,山梨酸0.2-0.5%,复合维生素B0.05-0.1%,抗坏血酸0.2-0.4%,对羟基苯甲酸乙酯0.1-0.2%,丙酸0.2-0.4%,水71.0-77.0%。
2.如权利要求1所述的饲料,其特征在于,其由下列重量百分比成分制备而成:豆饼粉2.5%,玉米粉8.2%,啤酒酵母2.5%,番茄酱9.5%,蔗糖1.0%,琼脂1.3%,山梨酸0.4%,复合维生素B0.06%,抗坏血酸0.2%,对羟基苯甲酸乙酯0.14%,丙酸0.2%,水74%。
3.如权利要求1或2所述的饲料,其特征在于,所述复合维生素B由下列重量百分含量成分制备而成:烟酞胺25.0-35.0%,盐酸硫胺素5.0-10.0%,核黄素12.0-18.0%,盐酸毗哆醇5.0-10.0%,赖氨肌醇0.15-0.20%,叶酸5.0-10.0%,泛酸钙25.0-35.0%,生物素0.5-1.0%;优选地,所述复合维生素B由下列重量百分含量成分制备而成:烟酞胺30%,盐酸硫胺素8.0%,核黄素15.0%,盐酸毗哆醇8.0%,赖氨肌醇0.20%,叶酸8.0%,泛酸钙30.0%,生物素0.8%。
4.制备权利要求1-3任意一项所述人工饲料的方法,其包括以下步骤:
(1)按比例称取豆饼粉、玉米粉和啤酒酵母粉,混合搅拌后灭菌,作为A组分;
(2)按比例称取琼脂和山梨酸,混合后按比例加入水,煮至沸腾,直到琼脂完全溶解,冷却后加入番茄酱搅拌,之后将混合液倒入A组分搅拌,搅拌后液体作为B组分;
(3)将B组分倒入蒸锅内加热,边加热边搅拌,至沸腾后冷却;
(4)按比例称取复合维生素B、抗坏血酸、对羟基苯甲酸乙酯和丙酸,混合后按比例加入水,溶解并搅拌均匀,作为C组分;
(5)将C组分与B组分混合,倒入用于单头饲养的培养皿中凝固,得低龄幼虫的人工饲料。
5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述灭菌温度为124-126℃,灭菌时间为30-35min。
6.如权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述琼脂和山梨酸混合液冷却温度为60-65℃,所述琼脂和山梨酸总重量与水的重量比为1∶30。
7.如权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述沸腾持续时间为3-5min;冷却温度为60-65℃。
8.如权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述复合维生素B、抗坏血酸、对羟基苯甲酸乙酯和丙酸的总重量与水的重量比为1∶30;步骤(5)中,所述人工饲料倒入培养皿时的温度为70-75℃,倒入直径6cm培养皿,每个培养皿倒入2-3ml。
9.权利要求1或2所述的饲料在饲养鳞翅目低龄幼虫中的应用。
10.如权利要求9所述的应用,具体步骤如下:
(1)成虫-卵:将羽化后的成虫雌雄配对,放到产卵笼内进行交配产卵,产卵笼内悬挂消毒后的纱布,供收集虫卵;用脱脂棉浸泡红糖水放置在培养皿中,供成虫补充营养;每日更换脱脂棉和红糖水;成虫产卵后,每日更换纱布;饲养温度24-26℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为60-70%;
(2)卵:将产于纱布上的卵放入甲醛溶液中消毒,用无菌水漂洗干净,晾干,然后放入保鲜袋中吹起,空气进入后,放入温度24-26℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为60-70%的培养箱中,直到幼虫孵化;
(3)初孵幼虫:将孵化6-10h的幼虫,抖落在白纸上,用细毛笔蘸次氯酸钠溶液消毒后,挑取幼虫,接入盛有人工饲料的培养皿中,每个培养皿接入1头;放入温度24-26℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为60-70%的培养箱中;
(4)初孵幼虫-3龄:用权利要求1或2所述的饲料饲养;饲养条件为温度24-26℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为60-70%的培养箱中;
(5)3龄以后-化蛹:根据昆虫种类,定期更换人工饲料,直到幼虫化蛹;饲养条件为温度24-26℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为60-70%的培养箱中;
(6)化蛹-成虫:幼虫化蛹后取出,放入玻璃试管,直到蛹羽化为成虫,进入下一个饲养周期;饲养条件为温度24-26℃,光照时间14L∶10D,相对湿度为60-70%的培养箱中。
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