CN105638574A - 一种白眉野草螟的单头饲养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及植物保护领域和昆虫养殖技术，具体涉及一种白眉野草螟的单头饲养方法，本方法采用单个养虫盒作为饲养工具，可避免幼虫间结茧缠连、自相残杀；可有效地抑制病原微生物如细菌、病毒的大量繁殖，防止昆虫间细菌、病毒的传播；方便随时进行除菌清洁，采取消毒措施；有利于饲料的及时更换，保持群体一致；采用含水量20％的无菌蛭石作为蛹室制作介质，老熟幼虫置于介质表面，利于其化蛹和成虫羽化。
Description
技术领域
本发明属于植物保护领域和昆虫养殖技术，涉及一种白眉野草螟的单头饲养方法。
背景技术
鳞翅目是昆虫纲的第二大目，螟蛾科是鳞翅目中的1个大科，隶属该科的白眉野草螟[Agriphilaaeneociliella(Eversmann,1844)]，是近年新发小麦害虫。自该虫2009年发生以来，该虫在莱州市呈蔓延暴发之势，到2012年莱州发生6000多亩，对苗期小麦造成较大危害，可致受害麦苗茎秆断开，麦苗萎蔫枯死，形成缺苗断垄，严重地块50％以上的麦苗死亡，甚至绝产。2013年3月在山西晋城又发现该种害虫为害小麦，发生面积近万亩，300余亩麦田严重缺苗断垄。2014年在山东高密小麦田发生为害，2015年蔓延至青岛即墨，发生面积近千亩，部分麦田严重缺苗断垄。每年造成巨大经济损失，对小麦安全生产造成了严重威胁。由于白眉野草螟是我国一种新发生的小麦害虫，其相关报道较少，且主要集中在监测预报、田间发生规律、生物学特征以及防治技术等方面，想要更客观详细的揭示白眉野草螟的发生和危害规律，控制其为害，室内成功的进行人工饲养则是对其相关特性进行深入研究的前提。
鳞翅目昆虫完成1个世代需要经历卵、幼虫、蛹和成虫4个时期，多数鳞翅目非螟蛾科幼虫通常用人工饲料饲养，技术已经相对成熟。而螟蛾科幼虫通常具有吐丝结茧的习性，其丝茧不单单是以丝作为材料，根据幼虫的生活环境，老熟幼虫会用丝把食物碎屑、树叶、排泄物、土粒等粘附起来，形成一种材质混合茧。用饲料群体饲养通常会连缀排泄物，污染食物，造成试虫发育不良，甚至感病死亡。而且群体饲养也存在种内自相残杀问题。另外，群体饲养的多头幼虫茧缠结在一起，分离困难，饲养环境也难以保持清洁，易造成细菌、病毒感染，导致试验研究无法顺利进行。对于人工饲料来讲，其配方也无法保证营养的全面均衡，如何克服上述问题为白眉野草螟的深入研究提供合格的供试昆虫成为亟待解决的技术问题。
发明内容
针对现有技术存在的诸多问题，发明人经过长期的实验，提供了一种白眉野草螟的单头饲养方法，本方法采用单个养虫盒作为饲养工具，可避免幼虫间结茧缠连、自相残杀；可有效地抑制病原微生物如细菌、病毒的大量繁殖，防止昆虫间细菌、病毒的传播；方便随时进行除菌清洁，采取消毒措施；有利于饲料的及时更换，保持群体一致；采用含水量20％的无菌蛭石作为蛹室制作介质，老熟幼虫置于介质表面，利于其化蛹和成虫羽化。
本发明所述的白眉野草螟的饲养方法，主要包括如下步骤：
(1)卵收集和消毒：
成虫羽化配对置于鳞翅目昆虫成虫饲养集卵盒中，成虫开始产卵后，每天收集1次卵，至其不再产卵；卵收集完毕后，用体积浓度为3-4％的甲醛水溶液消毒1min，然后用无菌网兜取出放在无菌水中浸泡3次，每次5min；浸泡结束后取出用吸水纸吸干卵表面水分；
(2)卵孵化幼虫以及幼虫饲养：
在无菌培养皿边缘处放入1块无菌水浸润的1cm3吸水纸块，将步骤1中消毒后的卵置于该培养皿中与吸水纸相对的一侧，保鲜膜封口后放在光照培养箱中培养，保鲜膜上扎有3个2mm直径透气孔，饲养条件为温度23-25℃、光周期L:D＝14h:10h，培养9-10d后可孵化出幼虫；幼虫孵化后用软毛刷将其转移至放有上述吸水纸块的另一无菌培养皿中，每皿20头幼虫，置于培养箱中，以室温下水培12-13d的小麦幼苗作为食物，喂食量为每天每头幼虫2cm长度叶片1片，保鲜膜封口，保鲜膜上扎有3个2mm直径透气孔，放在光照培养箱中，饲养条件为温度23-25℃、光周期L:D＝14h:10h；每天更换新无菌培养皿和食料；饲养至10日龄后，将群体饲养的幼虫单头转移至养虫盒中，转为单头饲养，每头幼虫每天喂食量为1-2株12-13d的小麦幼苗，更换新食物时将前一天未食尽的食物及所产虫粪清除，经23-27d单头饲喂后老熟，不再取食。
(3)老熟幼虫及蛹的处理：
在养虫盒中加入含水量20wt％的无菌蛭石，厚度3cm；老熟幼虫置于蛭石上方，让其自制蛹室化蛹；定期测量蛭石含水量，保持湿度在20wt％，温度为23-25℃；
(4)成虫饲养及产卵：
成虫羽化后，将其配对转移至鳞翅目昆虫成虫饲养集卵盒中，以10wt％的蜂蜜水作为补充营养，蜂蜜水每天更换1次；当成虫开始产卵，重复步骤(1)的操作过程进行卵的收集和消毒，完成1个世代的培养。
上述的无菌镊子、无菌水、无菌培养皿、无菌养虫盒和无菌蛭石，处理条件均为高温高压蒸汽灭菌30min，器具冷却干燥后使用；无菌网兜浸泡于75％酒精中，使用前取出用无菌水冲洗3次。
步骤(2)中转为单头饲养后，由于白眉野草螟有吐丝连缀虫粪及食物并藏于其中的习性，并且收到惊扰会分泌反吐液，换食物时，需要注意操作要轻，若虫体正在所连缀的粪便及食料中，则可透过透明盒外侧分辨其头尾部，用毛笔或镊子轻触其尾部，使其主动由其中爬出，以便清除粪便及残余食物，保持饲养盒清洁。
采用单头饲养的方法，可有效抑制昆虫病原微生物如细菌、病毒的大量繁殖，防止昆虫间细菌、病毒的传播，且此方法可保证试虫整齐度和整体较高存活率。
步骤(3)中所述含水量20wt％的无菌蛭石，是将灭菌蛭石与无菌水以8：2的重量比混合搅拌均匀得到；其中所述保持蛭石湿度，是向蛭石中添加无菌水，保证蛭石的湿度。
上述鳞翅目昆虫成虫饲养集卵盒为本饲养方法发明人的另一专利，专利号：ZL201420553556.9。
上述培养皿为常规9cm直径玻璃培养皿；所述的养虫盒材质为聚乙烯塑料，形状为圆柱形，内径为3cm、高4.0cm，带盖，为市售产品，可进行121℃高温高压蒸汽灭菌。
上述小麦苗种植方法为：在托盘底部铺15-20层卫生卷纸，将小麦种子覆于其上，浇水，随时保持卷纸湿润；采用这种方法获得小麦苗种，不需要进行单独的小麦种植，且较之其他培育方法所需材料简便易得，且操作简单易行。
与现有技术相比，本发明与现有技术最大的不同点在于：步骤(2)中饲养条件是在大量试验的基础上得出的单头白眉野草螟生长的最适温度，喂食量也是在室内饲养4代的基础上总结得出，采用本发明方法饲喂可有效利用食料，定量进行食料准备，既可避免因喂食量不同而造成的幼虫发育进度的差异，也可避免因喂食量不足而造成的幼虫营养不良，因此，本饲养条件是最适合该虫单头饲养的条件；步骤(3)中无菌蛭石的厚度是根据在单头饲养中实际观察测量获得的虫茧长度来确定的，可满足老熟幼虫成功自制蛹室化蛹的条件，所提供的无菌蛭石含水量为20wt％，也可以确保化蛹的顺利进行；步骤(4)中采用鳞翅目昆虫成虫饲养集卵盒为本发明人的专利产品，与本发明的单头饲养方法配合使用，操作简便，效果更好。
综上所述，采用上述饲养方法，可以得到生长发育正常，存活率较高的白眉野草螟种群。在23-25℃条件下，用此方法饲喂白眉野草螟，其幼虫存活率和成虫羽化率均可达到80％以上，且平均单雌产卵量高于400粒/头，为供试白眉野草螟的正常饲养提供了有利条件。且用此法，不受季节限制，白眉野草螟1年可繁育2代，较每年发生1代的自然种群，其繁殖周期缩短了一半。
具体实施方式
实施例1：
一种白眉野草螟的饲养方法，主要包括如下步骤：
(1)卵收集和消毒：成虫羽化配对置于鳞翅目昆虫成虫饲养集卵盒中，成虫开始产卵后，每天收集1次卵，至其不再产卵。卵收集完毕后，用体积浓度为3.5％的甲醛水溶液消毒1min，然后用无菌网兜取出放在无菌水中浸泡3次，每次5min；浸泡结束后取出用吸水纸吸干卵表面水分。
(2)卵孵化幼虫以及幼虫饲养：在无菌培养皿边缘处放入1块无菌水浸润的1cm3吸水纸块，将步骤1中消毒后的卵置于培养皿中与吸水纸相对的一侧，保鲜膜封口后放在光照培养箱中培养，保鲜膜上扎有3个2mm直径透气孔，饲养条件为温度23℃、光周期L:D＝14h:10h，培养10d后孵化出幼虫。幼虫孵化后用软毛刷将其转移至放有上述吸水纸块的无菌培养皿中，每皿20头幼虫，置于培养箱中，以室温下水培12d的小麦幼苗作为食物，喂食量为每天每头幼虫2cm长度叶片1片，保鲜膜封口，保鲜膜上扎有3个2mm直径透气孔，放在光照培养箱中，饲养条件同上。每天更换新无菌培养皿和食料。饲养至3龄(幼虫10日龄)后，将群体饲养的幼虫单头转移至养虫盒中，转为单头饲养，每头幼虫每天喂食量为1-2株12-13d的小麦幼苗，更新新食物时将前一天未食尽的食物及所产虫粪清除，经27d单头饲喂后老熟，不再取食。
(3)老熟幼虫及蛹的处理：在养虫盒中加入含水量20wt％的无菌蛭石，厚度3cm。老熟幼虫置于蛭石上方，让其自制蛹室化蛹。定期测量蛭石含水量，保持湿度。加水时避开蛹室。加入蛭石54d后，有成虫开始羽化，至第120d全部羽化。
(4)成虫饲养及产卵：成虫羽化后，将其配对转移至鳞翅目昆虫成虫饲养集卵盒中，以10wt％的蜂蜜水作为补充营养，蜂蜜水每天更换1次。当成虫开始产卵，重复步骤(1)的操作过程进行卵的收集和消毒，完成1个世代的培养。
步骤(2)中统计卵孵化幼虫的孵化率，记录消毒后卵的数目，记录卵最终孵化出幼虫的数目，计算公式如下：孵化率＝幼虫数量/卵数量(×100％)，平均孵化率为90％。
步骤(2)中统计幼虫发育到老熟幼虫的存活率，记录卵最终孵化出幼虫的数目，记录发育到老熟幼虫的幼虫数目，计算公式如下：存活率＝老熟幼虫数量/初孵幼虫数量(×100％)，存活率为82％。
步骤(3)中统计成虫羽化率，记录羽化成虫的数目，记录发育到老熟幼虫的幼虫数目，计算公式如下：羽化率＝羽化成虫数量/老熟幼虫数量(×100％)，羽化率为84％。
步骤(4)中统计平均单雌产卵量，记录成虫所产卵的数目，记录雌成虫数目，计算公式如下：平均单雌产卵量＝所产卵数量/雌成虫数量，平均单雌产卵量为432粒/头。
实施例2：
一种白眉野草螟的饲养方法，主要包括如下步骤：
(1)卵收集和消毒：成虫羽化配对置于鳞翅目昆虫成虫饲养集卵盒中，成虫开始产卵后，每天收集1次卵，至其不再产卵。卵收集完毕后，用体积浓度为3.5％的甲醛水溶液消毒1min，然后用无菌网兜取出放在无菌水中浸泡3次，每次5min；浸泡结束后取出用吸水纸吸干卵表面水分。
(2)卵孵化幼虫以及幼虫饲养：在无菌培养皿边缘处放入1块无菌水浸润的1cm3吸水纸块，将步骤1中消毒后的卵置于培养皿中与吸水纸相对的一侧，保鲜膜封口后放在光照培养箱中培养，保鲜膜上扎有3个2mm直径透气孔，饲养条件为温度25℃、光周期L:D＝14h:10h，培养9d后孵化出幼虫。幼虫孵化后用软毛刷将其转移至放有上述吸水纸块的无菌培养皿中，每皿20头幼虫，置于培养箱中，以室温下水培12d的小麦幼苗作为食物，喂食量为每天每头幼虫2cm长度叶片1片，保鲜膜封口，保鲜膜上扎有3个2mm直径透气孔，放在光照培养箱中，饲养条件同上。每天更换新无菌培养皿和食料。饲养至3龄(幼虫10日龄)后，将群体饲养的幼虫单头转移至养虫盒中，转为单头饲养，每头幼虫每天喂食量保证在1-2株13d的小麦幼苗，更新新食物时将前一天未食尽的食物及所产虫粪清除，经23d单头饲喂后老熟，不再取食。
(3)老熟幼虫及蛹的处理：在养虫盒中加入含水量20wt％的无菌蛭石，厚度3cm。老熟幼虫置于蛭石上方，让其自制蛹室化蛹。定期测量蛭石含水量，保持湿度。加水时避开蛹室。加入蛭石67d后，有成虫开始羽化，至第104d全部羽化。
(4)成虫饲养及产卵：成虫羽化后，将其配对转移至鳞翅目昆虫成虫饲养集卵盒中，以10wt％的蜂蜜水作为补充营养，蜂蜜水每天更换1次。当成虫开始产卵，重复步骤(1)的操作过程进行卵的收集和消毒，完成1个世代的培养。
步骤(2)中统计卵孵化幼虫的孵化率，记录消毒后卵的数目，记录卵最终孵化出幼虫的数目，计算公式如下：孵化率＝幼虫数量/卵数量(×100％)，平均孵化率为83％。
步骤(2)中统计幼虫发育到老熟幼虫的存活率，记录卵最终孵化出幼虫的数目，记录发育到老熟幼虫的幼虫数目，计算公式如下：存活率＝老熟幼虫数量/初孵幼虫数量(×100％)，存活率为84％。
步骤(3)中统计成虫羽化率，记录羽化成虫的数目，记录发育到老熟幼虫的幼虫数目，计算公式如下：羽化率＝羽化成虫数量/老熟幼虫数量(×100％)，羽化率为81％。
步骤(4)中统计平均单雌产卵量，记录成虫所产卵的数目，记录雌成虫数目，计算公式如下：平均单雌产卵量＝所产卵数量/雌成虫数量，平均单雌产卵量为496粒/头。
综上所述，采用上述饲养方法，可以得到生长发育正常，幼虫存活率、成虫羽化率均达到80％以上的白眉野草螟种群，且用此方法饲喂白眉野草螟，繁育不受季节限制，1年可获得2代白眉野草螟，大大缩短了自然条件下只获得1代白眉野草螟所需的时间，为供试白眉野草螟的正常饲养供应提供了有利条件。
Claims (4)
1.一种白眉野草螟的单头饲养方法，其特征在于：主要包括如下步骤：
(1)卵收集和消毒：
成虫羽化配对置于鳞翅目昆虫成虫饲养集卵盒中，成虫开始产卵后，每天收集1次卵，至其不再产卵；卵收集完毕后，用体积浓度为3-4％的甲醛水溶液消毒1min，然后用无菌网兜取出放在无菌水中浸泡3次，每次5min；浸泡结束后取出用吸水纸吸干卵表面水分；
(2)卵孵化幼虫以及幼虫饲养：
在无菌培养皿边缘处放入1块无菌水浸润的1cm3吸水纸块，将步骤1中消毒后的卵置于该培养皿中与吸水纸相对的一侧，保鲜膜封口后放在光照培养箱中培养，饲养条件为温度23-25℃、光周期L:D＝14h:10h，培养9-10d后可孵化出幼虫；幼虫孵化后用软毛刷将其转移至放有上述吸水纸块的另一无菌培养皿中，每皿20头幼虫，置于培养箱中，以室温下水培12-13d的小麦幼苗作为食物，喂食量为每天每头幼虫2cm长度叶片1片，保鲜膜封口，保鲜膜上扎有3个2mm直径透气孔，放在光照培养箱中，饲养条件为温度23-25℃、光周期L:D＝14h:10h；每天更换新无菌培养皿和食料；饲养至10日龄后，将群体饲养的幼虫单头转移至养虫盒中，转为单头饲养，每头幼虫每天喂食量为1-2株12-13d的小麦幼苗，更换新食物时将前一天未食尽的食物及所产虫粪清除，经23-27d单头饲喂后老熟，不再取食；
(3)老熟幼虫及蛹的处理：
在养虫盒中加入含水量20wt％的无菌蛭石，厚度3cm；老熟幼虫置于蛭石上方，让其自制蛹室化蛹；定期测量蛭石含水量，保持湿度在20wt％，温度为23-25℃；
(4)成虫饲养及产卵：
成虫羽化后，将其配对转移至鳞翅目昆虫成虫饲养集卵盒中，以10wt％的蜂蜜水作为补充营养，蜂蜜水每天更换1次；当成虫开始产卵，重复步骤(1)的操作过程进行卵的收集和消毒，完成1个世代的培养。
2.根据权利要求1所述的白眉野草螟的饲养方法，其特征在于：所述含水量20％的无菌蛭石，是将灭菌蛭石与无菌水以8：2的重量比混合搅拌均匀得到。
3.根据权利要求1所述的白眉野草螟的饲养方法，其特征在于：所述的培养皿为9cm直径玻璃培养皿。
4.根据权利要求2所述的白眉野草螟的饲养方法，其特征在于：所述的小麦苗种植方法为：在托盘底部铺15-20层卫生卷纸，将小麦种子覆于其上，浇水，随时保持卷纸湿润。
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