CN102823498B - 红肉猕猴桃组培苗继代增殖培养基 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种红肉猕猴桃组培苗继代增殖培养基，在MS培养基的基础上，通过调整大量元素的种类和浓度和优化激素调控琼脂浓度等，为红肉猕猴桃组培苗继代增殖提供了均衡合理的营养需求，保证了其快速、高效、健壮生长，有效的促进了节间伸长，提高了增殖系数。

Description

红肉猕猴桃组培苗继代增殖培养基
技术领域
本发明涉及一种植物组培生根培养基，特别涉及红肉猕猴桃组培苗继代增殖培养基。
背景技术
猕猴桃是一种经济价值较高的木质藤本植物，猕猴桃实肉厚汁多，酸甜适度，营养丰富，以其维生素C特高的营养价值而成为当前水果中之珍品，已经成为当今世界的新兴栽培果树。猕猴桃家族中的特色品种红肉猕猴桃，果实子房鲜红色，果肉黄绿色，果实中大，圆柱形，整齐度高，商品性能好，果皮绿褐包无毛，单果重92.5克，最大150克。含糖量高，总糖13.45％，总酸0.49％，可溶性固形物19.6％～24％，维生素C含量每100克135.77毫克以上，具有极高的市场前景和开发利用价值。
猕猴桃属雌雄异株，倍性复杂，雌雄株间花期不遇使种间杂交困难，育种周期长，且有不确定性，给育种工作带来了难度，系统开展其组织培养研究具有重要的意义。通过嫁接繁殖优良苗木的速度有限，而利用种子繁殖的实生苗性状不稳定，雌株不易获得。随着猕猴桃栽培的进一步兴起和引种工作的进行，良种苗需要量急剧增加，而采用常规繁育方法周期长、成活率低，采用组织培养技术快速繁殖猕猴桃成为重要的良种繁育途径。组织培养获得的植株不仅品种性状稳定，而且繁殖速度快，是现在普遍认同的良种繁育方法。中华猕猴桃、美味猕猴桃等许多品种都曾用作组织培养研究的材料进行品种推广。
组织培养是否成功，在很大程度上取决于对培养基的选择。目前，植物组织培养普遍使用的培养基为MS培养基。其由大量元素(硝酸钾、硝酸铵、磷酸二氢钾、硫酸镁和氯化钙)、微量元素(碘化钾、硼酸、硫酸锰、硫酸锌、钼酸钠、硫酸铜和氯化钴)、铁盐(乙二胺四乙酸二钠和硫酸亚铁)、有机物(肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇和烟酸)、激素(6-苄氨基嘌呤、萘乙酸和吲哚乙酸等)、蔗糖和琼脂组成：大量元素保证植株生长所需的矿质营养并加速愈伤组织的生长；微量元素、铁盐和有机物给予植株全面的营养保证，确保植株正常生长；激素的调控使植株在离体条件下快速健壮生长；蔗糖为植株生长提供必需的碳源并调节渗透压；琼脂对植株起支持和固定作用。
红肉猕猴桃组培工厂化育苗的技术问题还没完全解决，采用MS培养基红肉猕猴桃组培苗继代增殖培养时，常出现以下问题：组培生根苗基部愈伤组织膨大，组培苗生长势弱、叶片大、茎矮小、节间伸长生长慢、增殖系数低等现象等。
发明内容
有鉴于此，为克服现有技术的不足，本发明的目的在于对MS培养基进行改进，提供一种适合红肉猕猴桃组培苗的培养基，更进一步地，本发明涉及一种适合红肉猕猴桃组培苗连续继代、快速、高效和/或稳定生长的增殖培养基。
为达到此目的，本发明的红肉猕猴桃组培苗继代增殖养基(ACT)，包括以下组分：
Figure BSA00000779984200021
Figure BSA00000779984200031
本发明优选的培养基包括如下组分：
Figure BSA00000779984200032
Figure BSA00000779984200041
在本发明中，除非有特殊说明，当所述组分中含有结晶水时，所述的质量体积浓度是指带有结晶水的质量体积浓度，所述的组分的中文名称也是指带有结晶水的组分名称。
本发明的有益效果在于：本发明的红肉猕猴桃继代增殖培养基，在MS培养基的基础上，通过调整大量元素的种类和浓度和优化激素调控琼脂浓度等，为红肉猕猴桃组培苗继代增殖提供了均衡合理的营养需求，保证了其快速、高效、健壮生长，有效的促进了节间伸长，提高了增殖系数。
附图说明
为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进一步的详细描述，其中：
图1为以ACT培养基培养的红肉猕猴桃组培苗照片。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本发明的优选实施例进行详细的描述。
本发明以红肉猕猴桃优良单株离体芽器官诱导培养扩繁而来的组培继代苗为试验材料，在MS培养基的基础上，添加了NaH2PO4·2H2O和Ca(NO3)2·4H2O，去掉了CaCl2·2H2O，调整了肌醇和盐酸硫胺素的浓度，并优化激素调控和琼脂浓度等。
1、红肉猕猴桃组培苗继代增殖基本培养基优化
(1)材料与方法
将红肉猕猴桃优良单株离体芽器官诱导培养扩繁而来的组培继代苗转接到不同的培养基配方中进行增殖培养。增殖培养基分别以B5、MS和ACT为基本培养基，均包含配比为6-BA1.0mg/L+NAA0.3mg/L的激素，培养温度控制在25±1℃，光照时间12h/d，光照强度2000Lux-3000Lux。每个处理50个芽，25d后统计增殖后的苗高、总芽数、增殖系数、愈伤及芽苗的生长情况。
(2)结果与分析
植物的基本培养基是植物组培营养物质供给的基础。由表3可知，试验中所比较的3种基本培养基对红肉猕猴桃组培苗继代增殖的影响明显差异，其中以B5和MS为培养基的所有处理，继代苗生势弱于ACT的处理。以ACT为培养基的处理，在苗高、总芽数/株和增殖系数都优于B5和MS处理。综合考虑，ACT培养基更适红肉猕猴桃继代增殖。
表3不同激素浓度配比对灰毡毛忍冬‘渝蕾1号’芽苗继代的影响
Figure BSA00000779984200051
2、不同激素种类及浓度配比对红肉猕猴桃组培苗继代增殖培养的影响
(1)材料与方法
将红肉猕猴桃优良单株离体芽器官诱导培养扩繁而来的组培继代苗转接到不同的培养基配方中进行增殖培养。增殖培养基以ACT为培养基，根据预实验结果和长期的实践经验添加不同的激素种类(NAA、IBA)和浓度配比，分别添加浓度为6-BA0.5mg/L、1.0mg/L、1.5mg/L、2.0mg/L；NAA0.1mg/L、0.3mg/L及IBA0.1mg/L、0.3mg/L和0.5mg/L(具体试验配方见表4)。培养温度控制在25±1℃，光照时间12h/d，光照强度2000Lux-3000Lux。每个处理50个芽，25d后统计增殖后的苗高、总芽数、增殖系数、愈伤及芽苗的生长情况。
表4红肉猕猴桃继代增殖培养基的激素浓度配比试验方案
Figure BSA00000779984200061
(2)结果与分析
植物外源激素的种类、浓度配比对植物组培苗生长和增殖具有重要的调控作用。激素浓度配比是影响其增殖率的最大因素，由表5可知，M1、M2、M3、M4、M5、M6的处理中继代苗普遍表现为不定芽基部愈伤块大，不利于植株吸收营养。而当IBA的浓度在0.1mg/L-0.3mg/L不存在此问题。随着6-BA浓度的降低，增殖率明显下降。综合比较，M9处理增殖系数达到3.56，且在苗高、叶形，芽色等植株生长势方面表现良好。所以，以ACT为基本培养基，红肉猕猴桃组培苗继代增殖培养较佳的激素浓度配比是6-BA1.5mg/L+IBA0.3mg/L。
表5不同激素种类及浓度配比对红肉猕猴桃组培苗继代增殖培养的影响
Figure BSA00000779984200062
Figure BSA00000779984200071
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过参照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述，但本领域的普通技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。

Claims (5)

1.红肉猕猴桃组培苗继代增殖培养基，其特征在于：由以下浓度的组分组成 
。
2.根据权利要求1所述的红肉猕猴桃组培苗增殖培养基，其特征在于：所述NaH2PO4·2H2O的浓度为170mg/L，Ca(NO3)2·4H2O的浓度为300mg/L，肌醇的浓度为200mg/L，盐酸硫胺素的浓度为0.5mg/L，6-BA浓度1.5mg/L，吲哚乙酸浓度0.1-0.3mg/L。 
3.根据权利要求1所述的红肉猕猴桃组培苗增殖培养基，其特征在于：由以下浓度的组分组成 
Figure FSB0000117572660000031
。
4.一种红肉猕猴桃组培苗继代增殖方法，其特征在于以权利要求1-3任意一项所述的培养基为培养基。 
5.根据权利要求4所述的增殖方法，其特征在于所述的组培苗以红肉猕猴桃优良单株离体芽器官诱导培养扩繁而来的组培继代苗进行增殖培养。 
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